FERMENTACIONES Proceso anaeróbeo Fermentaciones ocurren en anaerobiosis • Las condiciones anaerobeas se presentan en algunos ecosistemas cuando el oxígeno presente es mas bajo que lo que se consume. • Los compuestos orgánicos son removidos a través de una acción concertada de microorganismos fermentativos o aquellos que realizan respiración anaeróbea. • La fermentación es un proceso microbiano que produce productos útiles o que les ayuda para crecer utilizando aceptores de electrones alternativos para generar ATP a través de una fosforilación a nivel de sustrato Definición • La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, totalmente anaeróbico, donde el producto final es un compuesto orgánico aceptor de los electrones del NADH producido durante la glucólisis. • Las reacciones de fermentación, ocurren en el citosol, y el NADH se oxida a NAD+ • el ATP es producido por fosforilaciones a nivel de sustrato. Las fermentaciones son poco energéticas • Debido a que las fermentaciones son procesos anaeróbicos, la forma de obtener ATP es por fosforilación a nivel sustrato • Esto hace que los procesos energéticos sean muy bajos. • El crecimiento es lento en bacterias o levaduras que se encuentran fermentando. Producción de ATP Fosforlilación a nivel de sustrato Es una reacción química para producir ATP (oGTP) combinada a una transformación enzimática de un sustrato Fosforilación Oxidativa Es un proceso metabólico que utiliza energía liberada por la oxidación de nutrientes para producir ATP reduciendo al Oxígeno a través de una cadena de transporte de electrones. Las fermentaciones pueden ser lineales o ramificadas. Catabolismo Lineal Catabolismo ramificado Sustrato ATP NADH Sustrato NADH +H ATP Intermediario Intermediario ATP Producto de fermentación Producto de fermentación I ATP Producto de fermentación II H2 FERMENTACIONES Fermentación Productos finales Microorganismo 1. Homoláctica Ácido láctico Lactobacilos y estreptococos 2. Heteroláctica Ácido láctico + etanol+CO2 Leuconostoc 3. Ácido Lactato+ ac. Fórmico + CO2 + H2+ succinato+ etanol + acetato E coli, Salmonella y Shiguella Lactato+formiato+etanol+2, 3butano diol (hay acetoína) Serratia, Erwinia, Klebsiella Enterobacter. Ac. Butírico+ác. Acético+ CO2+ H2 C buturicum 4. Mixta Butanodiolica 5. Butírica ácida I 6. Butanol-acetona II Butanol+ acetona+ isopropanol+ etanol C. acetobutiricum 7. Propiónica Via acrilato: propionato+acetato Vía del succinato: propionato+acetato Propionibacterium FERMENTACIÓN ALCOHOLICA Fermentación alcohólica • La fermentación alcohólica es un proceso anaeróbeo realizado por las levaduras y algunas clases de bacterias. • Estos microorganismos transforman el azúcar en alcohol etílico y dióxido de carbono. La fermentación alcohólica, comienza después de que la glucosa entra en la célula. La glucosa se degrada en ácido pirúvico que se convierte luego en CO2 y etanol. Fue descubierta por Louis Pasteur, que la describió como la vie sans l´air (la vida sin el aire). La fermentación típica es llevada a cabo por las levaduras. También algunos metazoos y protistas son capaces de realizarla En la industria la fermentación puede ser oxidativa, es decir, en presencia de oxígeno, pero es una oxidación aeróbica incompleta, como la producción de ácido acético a partir de etanol La producción de etanol, es realizada por Saccharomyces cerevisiae, que utiliza la ruta EM , y por Ziymomonas mobilis que utiliza la ED El etanol también se produce por otros microorganismos fermentativos • Clostridia saccharolitica • Bacterias lacticas heterofementativas • Entero bacterias. Estas bacterias oxidan al piruvato a acetil CoA antes de reducirlo a etanol: Piruvato + Fd Acetil CoA + Fd-red (PFOR) Acetil CoA+ NADH+H acetaldehido + NAD Acetaldehído + NADH+H etanol +NAD El efecto PASTEUR • Consiste en la inhibición de la fermentación alcohólica debido a la participación de oxígeno (O2). La fermentación es un proceso completamente anaeróbico (sin la participación del aire) y la inclusión del oxígeno detiene o minimiza los procesos biológicos de las levaduras. Cuando la concentración de glucosa es alta se favorece el proceso fermentativo. Cuando es baja, se favorece el proceso aeróbico.El efecto fue descubierto en el año 1857 por Louis Pasteur, Como se explica el efecto Pasteur. Bajo condiciones aeróbeas la glucólisis es más rápida que bajo condiciones anaeróbicas. Esto se observa cuando la concentración de glucosa es baja. Dos enzimas compiten para catalizar ya sea la fermentación o la respiración. Esta competencia explica la inhibición de la respiración. La piruvato descarboxilasa está involucrada en la ruta fermentativa. Tiene menor afinidad sobre el piruvato que la piruvato deshidrogenasa. El efecto Crabtree • Corresponde a la inhibición de la respiración por glucosa. El efecto se explica: • Competencia entre la glucólisis y la respiración por el ADP y Pi, Cambio de pH intracelular, cambio en la permeabilidad de la membrana mitocondrial, regulación de las enzimas específicas de la glucólisis. Estos fenómenos ocurren en células tumorales o de alta velocidad glucolítica. • Efecto Pasteur: inhibición de la fermentación por la presencia de oxígeno. • Efecto Crabtree: se inhibe el consumo de oxígeno por alta concentración de glucosa. Hay producción de etanol, presencia de O2 y mucha glucosa >>>GLUCOSA Efecto pasteur Anaeróbico, poca cantidad de ATP PIRUVATO AERÓBICA CAT MUCHO ATP Crabtree O2 Saccharomyces vs Zimmomonas • Saccharomyces cerevisiae genera 2 ATP de una molécula de hexosa y Zimmomonas solo 1 • Ambas utilizan piruvato descarboxilasa para producir acetaldehido: • CH3-CO-COOH CH3-CHO +CO2 Piruvato Descarboxilasa (contiene TiaminPPi) CH3-CHO +NADH + H+ CH3-CH2OH + NAD+ Alcohol DH FERMENTACIONES LÁCTICAS Fermentación del lactato • Es producto de fermentación en muchos anaeróbeos obligados y facultativos. • Algunas bacterias sólo producen ácido láctico (bacterias LAB) Estas son Homofermentativas • Las bacterias LAB requieren de aminoácidos, ácidos nucléicos y otros factores de crecimiento debido a que no pueden sintetizarlos. • Otras producen además de lactato, acetato y etanol (heterofermentativas) Bacterias lácticas LAB FERMENTACIÓN HOMOLÁCTICA El piruvato puede desviarse a La producción de acetyl CoA. Esto significa que se encuentra Presente la piruvato formiato liasa Lactato deshidrogenasa (enzimas glucolíticas) Cuando hay mucho ácido láctico, se exporta de la EMP célula junto con H+ a través de un simport generando un ∆p Glic 3PDH Lactosa: galactosa+glucosa Cuando se utilizan en la obtención de productos lácteos fermentados se parte de lactosa Conversión de citrato a acetato por LAB Las bacterias LAB en fermentación de alimentos Producto de fermentación de soya Son productoras de sabores Enzimas: 1.Citrato liasa 2. Oxaloacetato descarboxilasa 3. Piruvato formiato liasa 4.P transacetilasa 5. acetato cinasa Citrato +ADP+Pi 2 acetato + formiato +ATP Pediococcus halophilus Las bacterias ácido lácticas. Heterofermentativas • Pueden sintetizar algunos monómeros y polímeros para biosíntesis a partir de Acetil CoA o acetil-P que no son intermediarios en las homofermentativas. • Utilizan la ruta de la fosfocetolasa (PK) • Producen mas ATP que las homolácticas debido a la formación de acetil fosfato en la ruta. Leuconostoc y lactobacillus La fosfocetolasa contiene TPP El TPP unido al enzima sostiene El grupo acetilo para dar acetil fosfato En bifidobacterias hay dos fosfocetolasas: 1)Fructosa 6P fosfocetolasa 2)Xilulosa 5P fosfocetolasa Sintetizan 5 moleculas de ATP!! Las fosfocetolasas de Bifidobacterias • Bifidobacterium bifidum tiene dos fosfocetolasas: una es activa sobre fructosa 6p y la otra sobre Xilulosa 5 P y fermenta la glucosa de manera diferente a Leuconostoc mesenteroides. • Se producen 2 moles de lactato y 3 moles de acetato • La fructosa6P-PK rompe la fructosa a eritrosa 4P y acetil P. las TK y TA rearreglan esta eritrosa y una segunda molécula de fructosa para que se formen dos moléculas de Xilulosa 5 P Enzimas importantes en bacterias lacticas • Acetato cinasa: transfiere P al ADP del acetil-P • P-transacetilasa: Transfiere Pi al acetil-CoA para dar acetil-P • Piruvato formiato liasa: Convierte el piruvato a Acetil CoA • Citrato Liasa: Convierte el citrato a OAA y acetato. LAS OTRAS FERMENTACIONES EL PIRUVATO ES UNA MOLÉCULA CENTRAL EN FERMENTACIONES En las siguientes fermentaciones, el destino del piruvato determinara los productos finales de fermentacion FERMENTACIONES ÁCIDO MIXTA Y BUTANODIÓLICA Fermentación ácido mixta • Algunas bacterias G- facultativas fermentan glucosa produciendo lactato, acetato succinato formiato CO2 y H2. • Microorganismos característicos son E coli, Salmonella, Shiguella y enterobacter. • La glucosa se metaboliza por EMP. La PEP carboxilasa sintetiza OAA a partir de PEP antes de reducirse a succinato. • El piruvato puede reducirse a lactato por la lactato DH • En esta ruta de fermentación se produce ATP además de la reoxidación del NADH+H+. PRODUCTOS FINALES DE LA FERMENTACION ÁCIDO MIXTA CAT Glucosa PEP carboxilasa EMP Pir Form Liasa CoA Formiato Hdr Liasa AcetaldehidoDH ALcDH Fosfotransacetilasa Acetato cinasa +ATP Fermentación ácido Mixta Escherichia, Salmonela Shigell y Enterobacter Enzimas: 1. Glucólisis 2. LDH 3. Piruvato formiato –Liasa 4. Formiato hidrogenoliasa 5. AcetaldehidoDH 6. AlcoholDH 7. Fosofotransacetilasa 8. Acetato cinasa 9. PEP carboxilasa 10.Enzimas del CAT Anaerobeos estrictos reverso. fermentan mejor a succinato Y fijan mucho CO2 ATPs? Importancia de la formiato liasa (formiato Hidrógeno liasa) • La producción de formiato o CO2+ H2depende dela presencia de la enzima Formiato liasa • No todas las bacterias la tienen y su presencia es detectable por la generación de grandes cantidades de gas H2 como consecuencia de la fermentación del azúcar. Fermentación butanodiólica • Es una variante de la anterior presente en algunas enterobacterias como Klebsisella, Serratia y Erwinia, que realizan fermentación butanodiólica. • En esta ruta se desprende CO2 y se logra como producto final 2,3 butanodiol generandose acetoína en un paso intermedio que sirve para identificar bacterias que presentan esta ruta y diferenciarlas de la ácido mixta Fermentación butanodiólica Erwinia, Klebsiela y Serratia Enzimas: 1. Glucólisis 2. LDH 3. Piruvato formiato liasa 4. Formiato hidrógeno liasa 5. Acetaldehido DH 6. Alcohol DH 7. 2-Acetolactato sintasa 8. 2-acetolactato descarbox 9. 2,3 butanodiol DH Piruvato 2-Acetolactato sintasa TPP CH3-CH -CO-CH3 = Acetoína OH O/R= -2 La enzima 2-acetolactato sintasa tiene Como cofactor a TPP (α-acetolactato) La 2-acetolactato sintasa Cataliza la reacción : 2 Piruvato 2-acetolactato + CO2 Además de encontrarse en bacterias entéricas se haya en en el género Bacillus que producen 2,3 butanodiol La reacción ocurre en dos etapas: 1. 2. Bacterias entéricas realizan fermentación Acido Mixta o Butanodiólica • Ambas fermentaciones se caracterizan por: • -Producen una mezcla de ácidos orgánicos, CO2 H2 Y ETANOL • La fermentación butanodiólica se destaca por la producción de grandes cantidades de 2,3 butanodiol, acetoína y CO2 y menor cantidad de cptos ácidos. • La cantidad de ácidos es insuficiente y no dan positivo a la prueba de rojo de metilo. • Dan positivo a la prueba de Voges Proskauer (αnaftol+KOH) Prueba de Voges Proskauer • Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un microorganismo de fermentar la glucosa con producción de ácido por la vía ácido mixta o con producción de un producto final neutro (acetoína) por la vía butanodiólica. • A 1 mL de cultivo añada 12 gotas (± 0,6 mL) de αnaftol al 5% en etanol y 4 gotas (± 0,2 mL) de KOH al 40%, agite y deje reposar por 5 a 10 minutos Identificación de fermentación butanodiólica • La aparición de un color rosado constituye una reacción positiva indicadora de la presencia de acetoína, producto de la fermentación de la glucosa • Butanodiólica es Positiva a la Reacción V_P Resultado positivo Resultado negativo Para la ácido mixta • Se utiliza rojo de metilo como indicador. • Prueba de Rojo de Metilo Se Transfiere 5 mL del cultivo a un tubo y añade 5 gotas de solución indicadora de Rojo de Metilo. • Rojo de metilo Es positivo Para Ac. Mixta positivo negativo Fermentación Butírica 1. Butírica I (ácidos) 2. Butírica II. Solventes Fermentación del butirato • El género Clostridium realizan fermentación del butirato. Son bacterias G+ anaeróbeas formadoras de esporas. Se dividen en Sacarolíticas y proteolíticas. Las sacarolíticas fermentan carbohidratos a butirato y acetato. Las otras fermentan proteínas y son patógenas. Reacciones acidogénicas Fermentación de glucosa a butirato-acetato Butirica I Enzimas: 1. EMP 2. Piruvato ferredoxin OxRed 3. Hidrogenasa 4. Acetil CoA acetiltransferasa (tiolasa) 5. Hidroxibutiril CoA DH 6. HidroxiacilCoA hidrolasa (Crotonasa). 7.Butiril CoA Deshidrogenasa 8. P-transbutirilasa 9. Butirato cinasa 10. P-transacetilasa 11. Acetato cinasa. Clostridium butiricum Productos: Butirato y acetato Reacciones fosforoclásticas • Clostridium butyricum transporta glucosa por PTS y la metaboliza hasta piruvato . • El Piruvate es oxidado a acetil-CoA a través de una reacción conocida como reacción fosforoclástica que es catalizada por la pyruvato:ferredoxin oxidoreductasa; la reacción es reversible, contrario a lo que sucede con la Piruvato DH en sistemas aeróbeos para producir acetil.-CoA Por que se utiliza ferredoxina? El uso de ferredoxina en reacciones Redox en microorganismos Permite reversibilidad de las reacciones Clostridium butiricum también Fermenta lactato o acetato para formar butirato El butirato es un ácido graso pequeño Es la base de su propiedad PROBIÓTICA. Probióticos • Clostridium butiricum es utilizado como probiótico. • Las clostridia sacaroliticas y las bacterias lácticas producen acetato, butirato y lactato en altas concentraciones (pKas ácidos 3-5) • A medida que procede la fermentación los productos ácidos se acumulan y desciende el pH cerca a los pKas. Estos productos son deshechados y son tóxicos. • C butiricum produce ácidos grasos que pueden controlar las bacterias indeseables en el intestino con la ventaja de no generar ácido láctico como las bacterias LAB ADPATP Fermentación Butírica II Acetona butanol-etanol 2 piruvato etanol acetil P acetato Acetaldehido Obtención de solventes El acetato puede ser reutilizado En la reacción de la Co A transferasa Productos: Butanol, isopropanol, acetona, Etanol Estos surgen en los últimos estadíos de crecimiento del mo Microorganismos C acetobutyricum C beijerinckii C saccharobutyricum Acetolactato descarboxilasa IsopropanolDH Fase solventogénica Butírica II es una ruta ramificada de la I (metabolismo secundario??) • Por que presenta dos tipos de fermentación, una ácida y otra neutra?? • Durante la ácida se produce ATP pero en la fase solventogénica no hay síntesis de ATP • Es probable que la fase solventogénica le ayude al Microorganismo para protegerse de los productos ácidos • Además, las reacciones acidogénicas son reversibles. • La solventogénesis está acompañada de esporulación. FERMENTACIÓN PROPIÓNICA Fermentación propiónica • La realizan los especies del género Propionibacterium. • Clostridium propiónicum y Megasphaera elsdenii fermentan los carbohidratos o lactatos a propionato, acetato y CO2. • Esta fermentación puede proceder por la vía del succinato o del acrilato. • Propionibacterium fermentan el lactato a propionato por la vía del succinato. Fermentación Propiónica via del succinato Enzimas: 1.LDH 2. M-malonil CoA pir uvato Trans carbox 3. Malato DH 4. Fumarasa 5. Fumarato reductasa 6.CoA transferasa 7. m-malon-CoA mutasa 8. m-malonil CoA racemasa 9.Piruv DH 10 p-transacetilasa 11. Acetato cinasa Fermentación propiónica (succinato) • Las bacterias productoras de propionato que utilizan esta vía excretan una pequeña cantidad de succinato al medio. En este caso, la metil.malonil CoA piruvato transcarboxilasa no puede producir propionil CoA, debido a que la concentración de metil malonil CoA es muy baja. • Para reemplazarlo el succinato se excreta, y el piruvato o PEP son carboxilados a OAA Reacciones utilizadas por los Mos durante la ruta del propionato • Las reacciones que utilizan los microorganismos que realizan esa ruta son las rutas anapleróticas: • 1) Piruvato + ATP +Pi PEP +AMP +PPi • enzima: Piruvato ortofosfato dikinasa • 2)PEP+ CO2+ ADP Oxalato + ATP • Enzima: PEP carboxilasa • 3) PEP+CO +Pi Oxaloaceteto +PPi • Enzima :PEP carboxi trans fosforilasa • El PPi liberado se utiliza para fosforilar azúcares Enzimas de interés. • Transcarboxilasa: requiere biotina • Fumarato reductasa: está acoplada a la síntesis de ATP • Metil malonil CoA mutasa: utiliza Coenzima B12 • En esta fermentación se sintetizan 3 ATP a partir de 3 lactatos: uno por acetato cinasa y otro por fumarato reductasa. La metil malonil-CoA piruvato transcarboxilasa utiliza biotina como cofactor Estructura de la coenzima B12 Esta coenzima es utilizada por Enzimas que realizan reacciones rearreglo de carbones La metil-malonil CoA mutasa realiza la reacción de rearreglo Para convertir el Succinil CoA a metilmalonil CoA Esta coenzima es producida por Propionibacterium shermanii y la sintetizan en gran concentración por la mutasa La vía del acrilato • La mayoría de los Microorganismos de la fermentación propiónica utilizan la vía del succinato. • Pero Clostridium propionicum y Megasphaera elsdenii fermentan lactato a través de la vía del lactil CoA y Acrilil CoA (vía del acrilato) • En esta vía se produce 1 ATP / 3 lactatos.La ruta simple que utiliza lactil CoA es caraterística de bacterias del rumen y el intestino de los rumiantes Ruta del Acrilato en la fermentación del Propionato Regulación de las rutas fermentativas • Cantidad de equivalentes reductores disponibles (NADH+H/NAD+). • Alteración del pH durante el crecimieto. Se producen diferentes cantidades (o tipos) de productos de fermentación. • Las enzimas que se regulan por NADH son: • Lactato deshidrogenasa • Piruvato Formiato Liasa (inhibida por G3P y DHAP). • Fermentaciones que producen acetoína,diacetilos y 2,3 buitanodiol , se regulan por la fosfotransacetilasa y la acetato cinasa Las bacterias fermentativas adaptan su metabolismo • En ausencia de oxígeno ocurren las siguientes adaptaciones: • 1)Se reemplazan las oxidasas por reductasas en la cadena de transporte de electrones • 2) El ciclo del Ac. Cítrico se modifica a una ruta reductiva:la α-cetoglutarato DH y la Succinato DH no se encuentran o están en niveles muy bajos. • La Piruvato formiato liasa sustituye a la PDH Fermentación de Purinas Los Clostridia pueden fermentar Otras moléculas orgánicas Los aminoácidos como glicina,y alanina también pueden ser fermentados por Colostridium. Los Clostidium proteolíticos Utilizan la reacción de Stickland glicina acetato Rendimiento energético de fermentaciones FERMENTACIÓN PROD. FINALES HOMOLÁCTICA ALCOHOLICA ACIDO MIXTA AC. LÁCTICO CO2 +´ETOH Succinato, lactato,acetato,for mialto, etanol BUTANODIOL 2 ATP/GLUCOSA AC, BUTÍRICO, 2ATP/GLUCOSA BUTANOL, ACETONA, ISOPROP, CO2 AC PROPIÓNICO 3ATP/1.5 GLUCOSA BUTANODIOLICA BUTÍRICA PROPIÓNICA RENDIMIENTO ENERGÉTICO 2ATP/ GLUCOSA 2 ATP/GLUCOSA 3ATP/GLUCOSA MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL Características que debe cumplir un Mo para su uso en la industria. • Debe de ser de pequeño tamaño, para facilitar el intercambio de sustancias. • Producir la sustancia de interés • Estar disponible en cultivo puro • Crecer en cultivo a gran escala • Rápido crecimiento, obtención del producto en corto tiempo • No patógena para el humano. Animal o planta • Medio de cultivo disponible • Producción de quesos maduros: • Quesos madurados por bacterias que modifican el queso en cuanto a textura, sabor, incluso color; algunos ejemplos: – S. thermophilus y L. bulgaricus; usados en el provolone. – Streptococcus lactis, Leuconostoc cremoris y Streptococcus diacetylactis en el queso Gouda. – S. lactis y/o S. cremoris - En el queso Cheddar. – L. bulgaricus y S. thermophilus - En el Romano. • Para la producción de quesos madurados por hongos se utilizan: – Penicillium camemberti, usado para producir los quesos camembert y brie. – Penicillium glaucum, usado para producir queso gorgonzola. – Penicillium roqueforti, que es usado para producir los quesos roquefort, danish blue. • bebidas lácteas fermentadas • Además de utilizar bacterias se utilizan levaduras. • En la bebida láctea fermentada conocida como yogur, se utilizan una mezcla simbiótica de 2 cepas: Streptococcus salivarius subsp. thermophilus y Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus. • Aunque ambos se multiplican de forma independiente, el crecimiento de uno se ve favorecido por los cambios generados por el otro. BALANCE DE FERMENTACIÓN Productos de fermentación y sus estados de Oxidación Método BALANCE O/R. • Reglas. 1) Expresar la glucosa utilizada y productos formados en milimoles. 2) Expresar las cantidades de sustrato fermentado y productos finales formados en milimoles de productos por 100 milimoles de sustrato utilizado. 3) Calcular los milimoles de C en el sustrato y en los productos formados: milimoles de C= mmoles de Cpto x No de átomos de C del cpto Calcular estado de Ox-red 4) Determinar el estado de óxido reducción del sustrato y productos Valor de oxidación: No de átomos de O del cpto- No átomos de H 2 • Otra consideración puede ser: +1 para cada oxígeno y -1 por cada 2 H: Ej: ETOH: CH3-CH2-OH: A)1 OXIG- 6/2H = 1-3= -2 B) 6H : 6/2= 3(-1)= -3 1O=+1 ; -3+1= -2 Lo que se debe calcular: • Carbono recuperado: = ∑ mmoles de C de todos los productos 600 ( mmoles de C de glucosa) Valor O/R: = mmoles de Productos oxidados mmoles productos reducidos Balance de C1 o CO2 recuperado: = mmoles de CO2/ mmoles de Cptos de 2C EJEMPLO Notas Importantes. • La glucosa se considera como un compuesto totalmente neutro (valor de oxidación =0) • La cantidad de carbono inicial es muy cercana a la cantidad de carbón de productos fermentados (> 95%). • La cantidad de productos oxidados debe de ser muy cercana a los productos reducidos (O/R ≈ 1) Método del Hidrogeno disponible • La cantidad de mmoles de C del sustrato y productos fermentados se obtiene de igual forma que en el ejemplo anterior. • Hexosas y pentosas y agua tienen valor O/R=0 (tienen una relación H/O = 2) • Cada 2H en exceso= -1 ; 2H faltantes = +1 en las fórmulas de los productos. • Analizar las formulas en base a la relación de H/O= 2. • pEj. Etanol: C2H6O tiene una relación H/O = 6/1 ( le sobran 4H para tener una relación =2) por tanto su edo de O/R será de -2. Calculando los Hidrógenos para O/R: • Ejemplo: 1)Acetato: C2H4O2 . 4H/2O = 2H/O = 2 esto es un edo de O/R de 0 2) CO2 : 0H/2 O , le faltan 4H para tener la relación H/O=2, por tanto tendrá un O/R de +2 3) butanol. C4H10O: 10H/O le sobran 8 H por tanto será un O/R de -4 Columna del H disponible: No de H de la fórmula x 2 (excepto CO2 y H2 La columna de mol H / 100 mol se obtiene multiplicando el valor anterior por los de la primer columna que corresponden a la cantidad en mol o mmoles de sustrato o producto por el H disponible. . Las fermentaciones Microbianas pueden dilucidarse a través de marcaje isotópico de Glucosa Tarea: a partir de citrato obtener acetato Presenta una ruta probable. Que microorganismos pueden hacer esto? Destino del piruvato • Piruvato descarboxilasa. • El piruvato sufre una descarboxilación catalizada por la piruvato descarboxilasa (enzima ausente en animales), enzima dependiente del cofactor pirofosfato de tiamina y del ión Mg2+ • El carbono que sale como CO2 es el grupo carboxilato. El ∆ G'o de la reacción es – 4,72 kcal mol-1, es una reacción irreversible. • La enzima es un tetrámero de subunidades idénticas y posee TPP como cofactor POR QUE NECESITA AL TTP? Via del acrilato Enzimas 1-lactato racemasa 2. CoA transferasa 3.Lactil CoA dehidratasa 4.Acrilil CoA reductasa 5. Lactato DH 6.PFOR 7. Transhidrogenasa 8. P-Transacetilasa y Acetato cinasa
