PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 13/08/12 Código: PN-ACUI-PG-02 Procedimiento para la toma y envío de muestras de especies de acuicultura Versión 02 Página 1 de 5 Elaborado por: Coordinador Programa Acuícola Revisado por: Jefe de la Unidad de Servicios Generales LANASEVE Aprobado por: Director Técnico Unidad de Epidemiología 1. Objetivo. Establecer los requisitos para tomar y enviar muestras de especies de acuicultura para el diagnóstico de enfermedades, la vigilancia sanitaria de las mismas y la presencia de residuos ambientales para la inocuidad del producto. 2. Alcance: Aplica a la toma de muestras en las especies Tilapias, peces ornamentales, truchas, camarones y de aguas y sedimentos en los estanques. 3. Responsabilidad y autoridades Coordinador del Programa de Sanidad Acuícola: Velar por la actualización de este procedimiento Supervisar que se cumpla con el procedimiento y en algunos casos toma las muestras Director de Operaciones: Incluir en el POI y en el informe semestral de toma de muestras que programan en las direcciones regionales. Director Regional: Incluir en POI la toma de muestras, y en el informe semestral. Jefe del Departamento de Vigilancia: Supervisar que se tome de forma adecuada la muestra y que llegue al laboratorio para su análisis Personal Técnico del SENASA: Es el responsable de tomar las muestras de los diferentes establecimientos y que estas sean aptas para el análisis en el laboratorio. 4. Definiciones Procedimiento: Forma especificada para llevar a cabo una actividad o proceso. 5. Abreviaturas y/o Siglas CVO: Certificado Veterinario de Operación MAG: Ministerio de Agricultura y Ganadería SENASA: Servicio Nacional de Salud Animal POI: Plan Operativo Institucional LANASEVE: Laboratorio Nacional de Servicios Veterinarios IRET: El Instituto Regional de Estudios en Sustancias Tóxicas LASEQ: Laboratorio de Análisis y Servicios Químicos UNA: Universidad Nacional PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 13/08/12 Código: PN-ACUI-PG-02 Procedimiento para la toma y envío de muestras de especies de acuicultura Versión 02 Página 2 de 5 Elaborado por: Coordinador Programa Acuícola Revisado por: Jefe de la Unidad de Servicios Generales LANASEVE Aprobado por: Director Técnico Unidad de Epidemiología 6. Referencias Ley Nº 8495, Ley General del Servicio Nacional de Salud Animal. Decreto Ejecutivo Nº 34859-MAG, Reglamento General para el Otorgamiento del Certificado Veterinario de Operación. SEG-PE-001-RE-005: Criterios de Aceptación de la Muestra SEG-PE-001-RE-004: Ensayos y Métodos Utilizados SEG-PE-001-RE-007: Formulario de Recepción de Muestras de Diagnóstico. 7. Descripción del procedimiento. La correcta toma de muestra, de preservación, de traslado y envío al laboratorio, es una de las partes fundamentales para realizar un certero diagnostico de enfermedad, de la vigilancia epidemiológica y la detección de presencia de residuos ambientales para la inocuidad del producto. 7.1 MUESTRAS PARA DIAGNOSTICO DE ENFERMEDAD Este muestreo no posee un cronograma determinado, se toman muestras según el brote de enfermedad que ocurra en cualquier especie. 1. Muestras de camarones En el LANASEVE se realizan los métodos por PCR y por análisis en fresco e histología. Para las pruebas para la confirmación por presencia de Acido nucleico de los Virus de la Infección Hipodermal y Necrosis Hematopoyética (IHHNV), Virus de la Cabeza Amarilla (YHV), Síndrome de Taura, Virus del Síndrome de la Mancha Blanca, y Virus de la Necrosis Hepatopancreal-bacterial (NHP-Bact) y Enfermedad de la Cola Blanca. Los requisitos para la toma de las muestras y transporte son: 10 camarones adultos o 50 gr de larvas (deben ser animales enfermos o moribundos no muertos), en frascos con Etanol al 95%, el tejido debe de ser fresco y transportarse refrigerado, y si el tejido está congelado evitar el descongelamiento. Para las técnicas por análisis en fresco necesita muestras vivas de 10 camarones adultos o 20 unidades en estado post larval, de ellos 5 se hace examen directo y el resto por análisis histológico. Para la toma de muestra y transporte, los camarones se colocan en una bolsa plástica gruesa con agua del estanque o piscina donde estaban y se le agrega suficiente oxígeno para que soporten el transporte al laboratorio. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 13/08/12 Código: PN-ACUI-PG-02 Procedimiento para la toma y envío de muestras de especies de acuicultura Versión 02 Página 3 de 5 Elaborado por: Coordinador Programa Acuícola Revisado por: Jefe de la Unidad de Servicios Generales LANASEVE Aprobado por: Director Técnico Unidad de Epidemiología 2. Muestras de peces De una explotación primaria, se toma una muestra de peces enfermos vivos, la cantidad varía de acuerdo al tamaño, si son peces pequeños de menos de 4 centímetros se necesitan de 10 a 15 unidades, pero si son peces de mayor tamaño se necesitan 10, la mitad se hacen por examen en fresco y los otros por histología. Los peces se colocan en una bolsa plástica gruesa con agua del estanque o piscina donde estaban y se le agrega suficiente oxígeno para que soporten el transporte a la cátedra de Patología de la escuela de Medicina Veterinaria de la UNA. 7.2. MUESTRAS PARA LA VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA Para este muestreo si existe un cronograma, el cual depende de los períodos de la producción. 1. Muestras para camarones A modo de empezar un sistema de vigilancia Activa de las enfermedades en el camarón, se comenzara con la enfermedad de las Manchas Blancas, y Síndrome de Taura, como enfermedades de las cuales Costa Rica es endémica y para conocer cual es la prevalencia de ellas en el país y de la Cabeza Amarilla como enfermedad exótica en el país. Los camarones (se toman al azar vivos) se colocan en Etanol al 95%. 7.3 MUESTRAS PARA LA DETECCIÓN DE RESIDUOS AMBIENTALES EN AGUAS DE ESTANQUE, SEDIMENTOS PARA LA INOCUIDAD DEL PRODUCTO Este muestreo se realiza para estanques de camarones y peces, y se muestrea una vez al año, pero en caso de ser necesario se realizaría con mayor frecuencia. Los laboratorios utilizados serán el IRET, LASEQ, LANASEVE. 1. Muestras de Sedimentos Se tomaran muestras para plaguicidas, y metales pesados como: Cadmio, Plomo, Mercurio, Arsénico. Para la toma de muestra del sedimento hay 2 formas © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 13/08/12 Código: PN-ACUI-PG-02 Procedimiento para la toma y envío de muestras de especies de acuicultura Versión 02 Página 4 de 5 Elaborado por: Coordinador Programa Acuícola 1. Revisado por: Jefe de la Unidad de Servicios Generales LANASEVE Aprobado por: Director Técnico Unidad de Epidemiología 2. Lugar de toma de muestra Dirección de muestreo La persona encargada de tomar la muestra debe de caminar en la dirección que le indica la flecha y tomar una muestra de sedimento que le cabe en el puño, y echarlo en el balde plástico que debe de llevar, cuando ya recorrió todo el estanque debe de revolverlo y sacar una muestra aproximadamente de un kilogramo y echarlo y envolverlo en el papel aluminio calcinado suministrado por el laboratorio que hará el análisis. Posteriormente se mete dentro de una bolsa plástica Zipploc y se transporta en refrigeración. 2. Muestras de aguas Se tomaran muestras para plaguicidas, para microbiología (para detectar la presencia de Vibrio parahemolyticus) y de químicos (Nitritos y amonio) Para la toma de muestra del agua se toma al ingreso y la salida del agua a la finca. Las aguas para los diferentes muestreos se toman en botellas de vidrio de diferentes volúmenes proporcionadas por los laboratorios. 3. Muestras de fauna de los estanques Esas muestras pueden ser Moluscos gasterópodos, los cuales se les harán análisis de metales pesados como: Cadmio, Plomo, Mercurio, Arsénico, con ello determinaríamos la presencia de metales en los alimentos balanceados. 4. Muestras de animales en caso de intoxicación En caso de presentarse mortalidades de animales por sospecha de intoxicación, se deben de tomar muestras de animales moribundos o que tengan muy pocas horas de haber muerto, la cantidad de muestra necesaria para las técnicas en animales de talla comercial son: de 3 a 5 peces o de 500 gr de camarón. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 13/08/12 Código: PN-ACUI-PG-02 Procedimiento para la toma y envío de muestras de especies de acuicultura Versión 02 Página 5 de 5 Elaborado por: Coordinador Programa Acuícola Revisado por: Jefe de la Unidad de Servicios Generales LANASEVE Aprobado por: Director Técnico Unidad de Epidemiología 7.4 Envío de muestras a los laboratorios Las muestras se deben hacer llegar lo más pronto posible a los laboratorios, especialmente cuando los animales vienen vivos. Para el caso de animales muertos por sospecha de intoxicación estos deben congelarse, y llevarse al laboratorio rápidamente. 7.5 Reportes de Resultados Los reportes de resultados sean extendidos por el LANASEVE o los diferentes laboratorios de la UNA, serán entregados al usuario y con una copia al Coordinador de programa la cual puede ser de forma física o digital. 8. Anexos No aplica © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada