1. INTRODUCCION 1. OBJETO Y MOTIVACION DE LA

LlPOBllOQUlMlCA COMPARADA
Estudio de Iípidos y lip~oproteínasen diversas especies animales
"
Dr. AUGUSTO COROMINAS VILARDELL
(Barcelona)
A mi padre y maestro, doctor J . M . Corominas Planellas, miembro corresponsal de esta Real Academia
desde 1952.
1. INTRODUCCION
1. OBJETO Y MOTIVACION
DE LA 1NVESTIGAC:ION
En esta investigación de Lipobioquímica comparada hemos efectuado
una prospección biológica, en el sentido de estudiar la composición de 1ípidos plasmáticos en diversas especies
animales, siempre comparándolas con
la especie humana. Si bien es un trabajo de índole zoológico o veterinario
está siempre enfocado con la mentalidad de un médico.
Personalmente hemos estudiado la
composición lipídica del suero humano
en condiciones normales y en dislipemias. También hemos investigado los
lípidos de orina, LCR, seinen, derrames, heces, saliva, bilis.. .
A nivel tisular hemos estudiado la
composirión lipídica de cerebro, arteria, pulmón, riñón, hígado, músculo
esquelético, miocardio, grasa epiploica, médula ósea, etc.
También hemos investigado la composición lipídica de alimentos y bebidas para establecer el régimen ideal
en casos particulares de hiperlipemias.
Por todo ello nuestras investigaciones han sido hasta el momento exclusivamente clínicas, pero igualmente
como se ha demostrado una ontogenia
para los lípidos cerebrales, este trabajo se ha iniciado con objeto de demostrar si existe una filogenia para los 1ípidos séricos, es decir, si los lípidos
varían de acuerdo con la escala zoológica.
Este trabajo es el primero de una
serie que estamos desarrollando y en
él hemos escogido aquellos animales
que nos han sido más fácil, como: ca-
* Premio "Anales de Medicina y Cirugía" del Concurso 1971 de la Real Academia de Medicina de
Barcelona. - Lema: Monosioaloga~gliósido.
98
ANALES DE MEDICINA Y ClRUGlA
ballo, cabra, cerdo, cobayo, cordero,
conejo, gallina, perro y vaca, habiendo comparado sus lípidos séricos con
los humanos.
El estudio ha sido complejo y tiene
un valor limitado puesto que se han
escogido en general, 10 animales de
cada especie procurando que sean machos y hembras, de la misma edad,
sanos, de los que se ignoraba la comida del día anterior y si habían ingerido antes del sacrificio.
La estadística es reducida, pero la
presentamos a título de prospección
biológica y considerando que las técniras no han sido empleadas en sueros
animales, realizada de una forma lo
más rigurosa posible dentro de nuestra
condición de médico y nuestras posibilidades de obtención de muestras.
Por otra parte, manejamos una gran
cantidad de parárnetros lipídicos, lo
que da mayor validez a la investigación.
Este trabajo está distribuido en seis
Vol. L11. N? 228
capítulo. E n el primero revisamos brevemente la bioquímica de Iípidos y lipoproteínas. E n el segundo, de matcrial y métodos, consideramos las condiciones en las que se ha verificado la
extracción de la sangre y un resumen
de los métodos químicos, elcctroforéticos y cromatográficos empleados en
la investigación.
En el capítulo 111 consideramos los
resultados obtenidos en los distintos
animales ordenados por orden alfabético. Al final desarrollamos los lípidos
séricos de personas normales.
E n el capítulo IV planteamos una
discusión bioquímica y metabólica. En
el V exponemos un resumen y las conclusiones obtenidas. Finalmente, en
el VI, desarrollamos la Bibliografía
consultada.
Agradecemos la valiosísima colaboración técnica prestada por las señoritas Mercedes Roigé, Juana María
Palomes, Ana Roigé, Miki Abril y María Clarós.
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
Abril-Junio
TABLA 1
I.
LIPIDOS SIMPLES
M onoglicéridos
- Glicéridos
Diglicéridos
Triglicéridos
- Céridos
- Esteres
de colesterol
- Acidos biliares
11. LIPIDOS COMPLEJO'S
- Fosfolípidos
i Glicerofosfolípidos
Acido fosfatídico
Cefalina
Lecitina
Serinf osf átido
Lisolecitina
i ~sfin~ofosfolí~idos
- Esfingomielina
- Glucolípidos
i Cerebrósidos
i Sulfátidos
m Gangliósidos
111. DERIVADOS DE LOS LIPIDOS
Saturados
- Acidos grasos
Hidroxiácidos
Cíclicos
- Prostaglandinas
- Alcoholes
i Glicerol
i Esfingosina
i Colina
i Etanolamina
i Serina
i Inositol
i Colesterol
100
2.
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
BIOQUIMICA DE LOS
LIPIDOS
A) Definición
Son un grupo de principios inmediatos que poseen C, H, O, N y ocasionalmente S y P que se agrupan por
presentar las siguientes propiedades
comunes : a) Insolubilidad en agua.
b) Solubilidad en los llamados disolventes de las grasas como éter, benceno, cloroformo, tetracloruro de carbono.. . c) En general son ésteres de ácidos grasos superiores con distintos alcoholes. A 20" C los glicéridos pueden ser sólidos o líquidos, llamándose
respectivamente grasas o aceites. Son
un componente importante de la dieta, teniendo un importante poder calorífico. En los maimíferos forman sustancia de reserva, acumulándose en el
panículo adiposo. Algunos lípidos complejos forman parte de las complicadas estructuras del tejido nervioso. Ligados a las proteínas forman las membranas celulares y de las mitocondrias.
Clasificación.
En la tabla 1 presentamos la clasificación de los lípidos que seguiremos,
modificada de la que expuso BLOOR.
Los Iípidos simples poseen ácidos grasos y un alcohol. En los glicéridos el
alcohol es glicerol, en tanto en los ésteres de colesterol, éste actúa como alcohol; en las ceras los alcoholes son
de gran número de C, los lípidos complejos tienen, además de un alcohol y
ácidos grasos otros grupos químicos,
como ácido fosfórico (fosfolípidos) o
moléculas glucídicas (glucolípidos).
Vol. LII. N.O 228
a) Lípidos simples.
a,) Glicéridos son ésteres de glicerina con ácidos grasos superiores. Scgún el número de OH de la glicerina
esterificada, pueden dividirse en mono,
di y triglicéridos. El radical ácido de
los monoglicéridos pueden estar enlazados con el carbono alfa o beta (llamados también 1'2) del glicerol.
v
HOCH
I
H,COH
H COH
*1
B)
monoglicérido
(2-monoglicérido)
Los diglicéridos tienen dos grupos
ácidos esterificando los hidróxilos del
propanotriol. Los diglicéridos que se
encuentran en la naturaleza son: alfa,
beta diglicéridos.
Los ácidos grasos de los diglicéridos
pueden ser iguales o distintos.
En los triglicéridos están esterificados los OH de la glicerina por tres
ácidos grasos. Si estos ácidos grasos
4
*
ANALES DE MEDICINA Y ClRUGlA
Abril-Junio
son iguales se llaman triglicéridos simplcs. En caso de que sean distintos se
llaman triglicéridos mixtos, siendo en
este caso frecuente la presencia de uno
o dos ácidos de cadena no saturada.
101
capa fina de Silicagel impregnada con
aceite de parafina halla los siguientes
triglicéridos de suero.
- Trioleína.
- Linoleodioleína.
- Oleodilinoleína.
O
l
- Trilinoleína.
- Triglicérido no
HC-O-C--F?
1
1
La denominación de los triglicéridos está en relación con los ácidos grasos que lo constituyen. Un triglicérido
compuesto por tres moléculas de ácido palmítico se denomina tripalmitina.
La oleoplmitoestearina es un triglicérido mixto compuesto por los ácidos
oleico, palmítico y esteárico.
HJC-(CH~)X- C-O--CHz
1
H~C-(CH~~~-C-O--CH
&C-(CH2lZ
I
4o
-C-O --CH2
Triglicérido mixto
e
a*) Estéridos: Son ésteres de esteroles; lo que más nos interesa considerar son los ésteres de colesterol.
Este, tanto en su forma libre como en
la esterificada es una de los componen lipídicos más importantes del suero y de tejidos humanos.
CH,
1!0
4o
40
identificado.
Los triglicéridos de los depósitos grasos de los animales tienen ácidos palmítico, esteárico y oleico.
L,a grasa de los depósitos adiposos
humanos posee los siguientes ácidos
grasos: ácido palmitico 25 %, ácido
esteárico 6 %, palmitoleico 7 %, oleico 50 %, Iinoleico y linolénico 8 %
otros ácidos grasos esenciales 2 %.
MICHALEC,
mediante cromatografía en
El colesterol comprende alrededor
del 20 % de los lípidos cerebrales,
encontrándose casi totalmente en el
animal adulto en forma libre.
Los ácidos grasos de la pequeña
concentración de ésteres de colesterol
cerebrales difieren de los éteres de colesterol plasmáticos. En el cerebro predominan ésteres de ácidos grasos saturados y monoenoicos. En el animal
en fase temprana de desarrollo una
considerable proporción del colesterol
del SNC puede ser esterificada. Además del colesterol en el tejido nervioso pueden encontrarse otros esteroles
como colestanol, A-7 colestanol y 7
dehidrocolesterol (COOK1958).
102
Vol. LII. N." 228
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
En el suero humano el colesterol se
presenta en un 30 % en forma libre
y el resto en forma esterificada. Por
cromatografía en capa fina pueden separarse los éstere:; de colesterol que
están en la siguiente
según ZOLLNER
proporción :
Esteres saturados (palmitato, estearato) 16 I4'0.
Monoenoicos (oleato) 23'6 I 3'4.
Dienoicos (linoleato) 46'7 +4'8.
Tri y tetraenoico (linolenato y araquidonato) 11,8I 3,4.
Polienoicos 2,O 1 1,O.
a3) Acidos biliares: Los ácidos biliares son derivados del núcleo de colesterol. Se eliminan por la bilis, los
más importantes son:
Acido cólico 3 alfa, 7 alfa, 12 alfa
trihidroxicolánicc.
Acido desoxicólico 3 alfa, 12 alfa
dihidroxicolánico.
Acido quenodesoxicólico 3 alfa, 7
alfa dihidroxicolánico.
o amidas de ácidos grasos con diversos alcoholes y además tienen otros
grupos químicos. Se distinguen dos
grupos fundamentales : 1." Glicerofosfolípidos que poseen glicerol y ácido
fosfórico y 2." Esfingolípidos que tienen una base de larga cadena parafínica de 18 C. con un doble enlace,
dos grupos hidróxilo y un grupo amínico (esfingosina).
bl) Glicerofosfolípidos : En este
grupo uno de los hidróxilos de la glicerina está esterificado por ácido fosfórico, se describen :
alfa) Acidos fosfatídicos: Están
constituidos por glicerol, dos moléculas de ácidos grasos y una molécula
de ácido fosfórico.
o
Il
O H,C-OC-R,
II
R2-CO-CH
I
1
7
H,C-O-P-OH
l
OH
Los ácidos fosfatídicos son productos intermediarios en la síntesis de
fosfolípidos y triglicéridos en los tejidos animales.
Acido cólico
Todos estos están en la bilis combinados con la glicina o con la taurina.
Los ácidos biliares pueden separarse mediante cromatografía en capa fina y en fase gaseosa.
b) Lípidos complejos: Son ésteres
Los ácidos alfa-lisofosfatídicos difieren de los anteriores en que carecen del ácido graso 'que esterifica al
li
Abril-Jiinio
1
~
*
l
P
ANALES DE MEDlCINA Y ClRUGlA
hidróxilo del carbono beta de la glicerina.
beta) Lecitinas: (Fosfatidilcolinas)
son semejantes a los ácidos fosfatídiros
cn los que el ácido fosfórico esterifica
además una molécula de colina.
De acuerdo con los ácidos grasos
pueden distinguirsc múltiples clases de
lecitinas. Al parecer el radical ácido
que esterifica en posición alfa es de
cadena saturada, en tanto que el que
lo hace en posición beta es de ca-
103
dena no saturada. Las lecitinas están
ampliamente difundidas en la naturaleza. En el cuerpo humano se encuentran especialmente en cerebro o hígado. E n el suero existe una proporción
de un 63 % en relación con el total
de fosfolípidos. Mediante la combinación de técnicas cromatográficas en
capa fina y fase gaseosa, VITELLIy
cols. (1968) encuentran la siguiente
propor:ión de ácidos grasos esterificando las lecitinas séricas.
1. fosfatidiletanolamina
1. fosfatidil-serina
Acido mirístico
"
"
"
"
"
"
"
palmítico
palmitoleico
esteárico
oleizo
linoleico
linolénico
araquídico
Las lisolecitinas son semejantes a
las lecitinas, pero carecen del ácido
graso no saturado situado en posición
beta.
Las lisolecitinas se encuentran en
la mayoría de los tejidos orgánicos. En
el suero humano se halla en una proporción del 9 % en relación con el total de fosfolípidos, los ácidos grasos
más importantes constituyentes de las
lisolecitinas son palmítiro, esteárico,
oleico y linolénico.
104
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGlA
gamma) Cefalinas (fosfatidiletenolamina y fosfatidilserinas). Son glicerofosfolípidos semejantes a las lecitinas
pero en lugar de colina tienen etanolamina (colamin-cefalinas) o serina (serin-cef alinas).
Las cefalinas fueron aisladas en el
En el suetejido nervioso por FOLCH.
ro humano se encuentran en una proporción de un 6 % en relación con
los fosfolípidos totales.
VITELLI y COIS.(19á8) mediante
CCF y CFG encuentran la siguiente
proporción de ácidos grasos en las cef alinas séricos:
Vol. LII. N.O 228
Acido mirístico
"
"
"
"
"
"
"
palmítico
palmitoleico
esteárico
oleico
linolénico
linoleico
araquídico
Las alfa-lisocefalinas difieren de las
cefalinas en que carecen del ácido gra-
Cardiolipina
so que esterifica el glicerol en posición
beta.
delta) Cardiolipina: Se ha obtenido del corazón. Tiene interés, puesto
que se utiliza en el diagnóstico de la
sífilis. Posee dos ácidos fosfóricos, tres
moléculas de glicerol y cuatro ácidos
grasos.
epsilon) Plasmalógenos: Son semejantes a los compuestos lecitina o cefalina con la particularidad de tener en
posición alfa o beta un aldehido graso
unido a la glicerina en forma de éter
enolico.
dseda) Inositol fosfátidos : Son semejantes a las lecitinas y cefalinas que
tienen como base el inositol en lugar
de lecitina o colaniina. Según el nú-
mero de fosfóricos de la molécula se
clasifican en monofosfoinositoles, difosfoinositoles y fosfoinositoles complejos.
b2) Esfingolípidos.
Reciben este nombre los lípidos
complejos que tienen esfingosina (Derytho-1,3dihidroxi, 2 amino, 4 trans-
CAPSULAS
La administración matutina de
1-2 capsulas trabaja en ritmo
sincronizado con la secreción
suprarrenal fisiológica.
l NYECTABLE
Vía i. m. (efecto sistémico),
intra o periarticular e
infiltración intradérmica o
intralesional
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~
\
urea
M
I
1
Abril-Junio
sotadequeno), dihidroxiesfingosina, fitoesfingosina o deshidrofotiesfingosina.
La esfingosina está siempre unida a un
ácido graso de larga cadena, formando
una amida llamada ceramida. Se han
demostrado más de 50 ácidos grasos
saturados, no saturados o hidroxilados, unidos a la esfingosina, cuya longitud de cadena oscila entre 14 y 30
átomos de carbono. Las múltiples combinaciones posibles entre los diferentes tipos de ácidos grasos y de esfingosina son a menudo características para
un determinado esfingolípido.
es la esfingosina, está esterificado por
un grupo fosforilcolina.
Las esfingomielinas se encuentran
en su mayoría en los tejidos orgánicos,
especialmente en el tejido nervioso. En
el suero por CCF pueden separarse
dos esfingomielinas. Se encuentran en
una propoxión del 22 % en relación
con el total de fosfolípidos. VITELLI
y cols. mediante cromatografía en fase
gaseosa demuestran los siguientes ácidos grasos en las esfingomielinas séricas :
Acido mirístico
"
"
"
"
EII la fórmula de más abajo puede
observarse la estructura de la ceramida. En la parte superior está la esfingosina, cuyo hidróxilo terminal servirá para el enlace con otros compuestos, como fosforilcolina (esfingomielinas) hexosas u oligosacáridos
(Glucolípidos). En las mol6culas de
4-
1 O5
ANALES DE MEDICINA Y CZRUGZA
esfingolípidos existirán, por tanto, una
parte lipófila constituida pos la ceramida y una porción hidrófila, el oligosacárido.
alfa) Esfingomielinas. Son ceramidas en las que el hidróxilo terminal
"
"
"
palmítico
palmitoleico
esteárico
oleico
linoleico
linolénico
araquídico
Cl4: O
Cl5: 0
C16:0
C16: 1
Cl7: 0
Cl8: 0
Cl8: 1
Cl8: 2
C18: 3
CzO:O
2,61 %
0,89 %
48,61 %
1,27 %
1,97%
26,50 %
5,50 %
3,40 %
8,47 %
beta) Glucoesfingolípidos.
En los glucoesfingolípidos el grupo
hidroxilo terminal de la esfingosina
está sustuitido por una hexosa o por
un oligosacárido.
Se consideran 4 grupos fundamentales dentro de los glucoesfingolípidos:
cerebrósidos, sulfátidos, ceramidas plihexósidos y gangliósidos, todos ellos
de gran importancia en la formación
de estructuras lipídicas del tejido nervioso.
Los cerebrósidos se caracterizan por
tener una molécula de galactosa unida
por un enlace glucosídico al hidróxido
terminal en la esfingosina de la ceramida.
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
106
H
H
OH
-. .
Según el ácido graso de la ceramida
se distinguen cuatro cerebrósidos:
Cerasina
Acido lignocérico
Frenosina
Acido cerebrónico
Nervona
Acido nervónico
Oxinervona
Acido oxinervónico
Por hidrolisis allcalina del enlace
peptídico con hidróxido básico se consigue la separación del ácido de los
cerebrósidos obtenidndose una molécula de psicosina foirmada por esfingosina-galactosa.
Ceramida B glucosa (4
Vol. LII.
N.O
228
En la enfermedad de GAUCHER
existe un acúmulo de cerebrósidos, El enlace éster se establece en el hidroxilo
del carbono 3 de la galactosa.
Los sulfátidos se localizan en la sustancia blanca cerebral. Aumentan
anormalmente en la leucodistrofia metacromática (sulfatidosis).
Las ceramidas-polihexósidos se diferencian de los cerebrósidos en que
tienen otras moléculas glucídicas ligadas a la galactosa. STOFFELdistingue
los siguientes:
- Ceramida
dihexósidos aislados
de bazo y eritrocitos. Aumenta en la
enfermedad de FABRY.
SU estructura
es la siguiente:
......
1) B-galactosa
Las ceramidas trihexósidos han sido anti A y anti B están constituidos por
aisladas del riñón, hígado y suero. YA- ceramida polihexósidos cuya estructuMAKAWA aisló cerainidas tetrahexósira se ha dilucidado recientemente.
dos en los eritrocitos denominándolos
En la sustancia gris cerebral Suzuglobósidos :
KI v cols. estudian en tres controles
Ceramida-glucosa (4 ...... 1) gal
la concentración de ceramidas hexósi(4 .. .... 1) gal (6 ...... 1) gal
dos. Los resultados están expresados
N. acetilgalactosamina
en porcentaje de la cantidad total de
Se ha demostrado que los grupos lípidos.
Ceramida
hexósidos
2,s
meses
3
8
años
años
Monohexósido
Glucósido
Galactósido
Dihexósido
Trihexósido
Tetrahexósido
Sulf átido
Indicios
0,65
0,30
0,19
0,27
0,79
O
1,55
0,23
0,32
0,09
0,45
o
1,90
Indicios
Indicios
Indicios
1,40
Abril-Junio
ANALES DE MEDICINA Y ClRUGIA
- Los
gangliósidos son un grupo
de glucoesfingolípidos que se encuentran en el tejido cerebral. Difieren de
los cerebrósidos y de las ceramidas
polihexósidos en que aquéllos poseen
ácido N-acetil neuraminico (NANA).
La estructura de los gangliósidos
debido a su-gran número es compleja,
en la figura 1 exponemos la fórmula
del GMl, la nomenclatura es asimismo
muy confusa. Cada autor que ha estudiado el problema tiene la suya, la
cual ocasiona la natural confusión
cuando se comparan resultados. La
que tiene quizás una mayor aceptación
es la de SVENNERHOLM,
cuya modificación propuesta por KOREYexponemos
en la tabla 11.
SUZUKI
y COIS. (1970) encuentran la
siguiente proporción de gangliósidos
de sustancia gris y blanca cerebral.
SUBSTANCIA
GRIS
Figura 1. Fórmula GM2.
o
11
H02C- C--CH2-
107
SUBSTANCIA
BLANCA
Estos valores están expresados en
procentajes de total de N-acetilneuramínico en gangliósidos individuales.
y 7
PH
/)H /H
C-CC-C-C-CH20H
I
I
I
I
I
H
NH, OH H H
AC. NEURAM~NICO
En la enfermedad de TAY-SACHS C) Derivados de los lípidos. Son
existe un aumento de GM2 en el ce- los compuestos orgánicos obtenidos
rebro.
por hidrólisis de los lípidos. Interesa
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
108
destacar, por una parte, los alcoholes,
y por otra los ácidos grasos.
Vol. LIL.
N.O
228
C1) Alcoholes.
Los más importantes biológicamente es la glicerina (Propanotriol).
Tabla 11
CLASIFICACION DE GANGLIOSIDOS
Monosialogangliósidos
G6 (GMJ
Gs (GMJ
G, (GM,)
................................. R - G ~ -uGal
NANA
.................................R - Glu - Gal - N
NANA
.................................. R - Glu - Gal- N
ác. gal
ác. gal- Gal
NANA
G3 (GD,,)
................................. R - Glu - N
G, (GT,)
................................. R - Glu - Gal - N
ác. gal- NANA
NANA
G2 (GDIb) ................................. R - Glu - Gal- N ác. gal- Gal
NANA-NANA '
ác. gal- NANA
NANA - NANA
R = Ceramida.
N ác. gal = N acetilgalactosamina.
Glu = Glucosa.
Gal = Galactosa.
NANA =N acetilneuramínico
CH20H
l
CHOH
Con dos alcoholes primarios y otro
secundario. Son los constituyentes del
mono, di y triglicéridos y también de
los glicero-fosfolípidos. Por deshidratación se produce la acroleina, sustancia a la cual se le ha atribuido un cierto papel en la patología de algunas
enfermedades autoinmunes.
Podemos citar también los alcoholes
de las ceras; saturados de [cadenaslar-
gas: láurico (Ci2) de la lanolina, mirístico (CI4) y araquílico (C2,,) de ceras
de insectos, carnaubílico (CIJ de la
cera de las abejas. Un ejemplo de su
constitución lo tenemos en el alcohol
cerílico.
CH3 - (CH&
-CH20H
Podemos nombrar también los alcoholes de los lípidos compuestos.
Abril-Junio
Colina
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
HO -H2C-- CH2-N - CH,
\
CH3
Colamina
HO-C-C-NH2
I
I
H: H
Serina
HO-C-C-COOH
I
I
H H
C,)
Acidos grasos.
Se llaman ácidos grasos a los áridos
carboxílicos que forman parte de las
moléculas lipídicas. En general son de
cadena lineal larga y habitualmente
con un número radical carboxílico. En
la Tabla 111 podemos observar una seric de ácidos grasos de importancia
bioquímica.
Acidos grasos
Glicéridos
Fosfolipídico
Esteres de colesterol
La cadena de ácidos grasos puede
ser saturada con uno o más dobles
enlaces. En el organismo donde los
podemos encontrar combinados con
los Iípidos (esterificación o formación
de enlaces amídicos) o bien en forma
libre. PEZOLDestudia la proporción de
los diferentes ácidos graTos que se combinan con los lípidos que forman las
lipoproteínas.
Palmítico Esteárico
%
%
31
34
1O
BLUTONy COIS. (1965) nnediante el
técnicas electroforéticas y cromatográficas en capa fina y fase gaseosa, estudia la composición de los ácidos grasos
del suero, tanto en su forma libre
como en la esteriíicada, en el individuo
adulto normal, encuentra 110s porcentajes siguientes :
14
(12
(15
(16
(16
(18
(18
(18
(20
: O)
:O)
: 0)
: 1)
: 1)
: 1)
: 2)
: 4)
Oleico
Linoleico Araquidónico
%
%
%
38
11
17
16
21
55
-
0,5 %
l,o %
palmítico
22,9 %
palmitoleico
5,6 %
esteárico
7,8 %
oleico
22,8 %
linoleico
31,3 %
araquidónico 5,2 %
Acido láurico
Acido
Acido
Acido
Acido
Acido
Acido
1O
6
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
110
Vol. LII. N." 228
TABLA 111
ACIDOS GRASOS
Acético
Butírico
Caproico
Caprífico
Cáprico
Láurico
Palmítico
Esteárico
Lignocérico
Cerebrónico
Acidos grasos saturados
CH3-COOH
Fermentación acética
CH3(CH2)2-COOH
Mantequilla
CH,(CH2),-COOH
Mantequilla, aceite
CH3(CHZ),-COOH
Mantequilla, aceite
CH3(CH2),-COOH
Mantequilla, grasa
CH3(CHJlo-COOH
Grasa
CH3(CH2)i4-COOH
Grasas animales y vegetales
CH3(CH2)16-COOH
Grasas animales
CH3(CHZ),,-COOH
Lípidos complejos
CH3(CH2)21-CH-COOH Lípidos complejos
OH
Oleico
Nervónico
Linoleico
Oxinervónico
Acidos grasos no saturados
CH3-(CH2),-CH
=CH-(CH,),-COOH
CH3-(CHz)i3-CH
=CH-(CH2),-COOH
@H,-(CHJ7-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH,),-COOH
CH,-(CHZ),~-CH
=CH-(CH2)6-CH-COOH
OH
En el suero hay un total de 200 a
400 mg de ácidos grasos, 30 a 60 mg
de libres y el resto de esterificados.
Las proporciones de ácidos grasos
libres en el suero son los siguientes:
Acido
Acido
Acido
Acido
Acido
mirístico
1,5 %
miristoleico 0,5-1 %
palmítico
21-27 %
palmitoleico 2-10 %
esteárico
2-16 %
Grasas
Cerebrósidos
Grasas y aceites
Cerebrósidos
Acido oleico
25-50 %
Acido linoleico
5-20 %
Acido araquidónico
2-5 %
Además de los ácidos grasos mencionados tiene también gran interés
considerar la estructura del ácido fitánico, que está aumentado en la enfermedad de REFSUM,tanto en su forma
libre como esterificando glicerina, colesterol y fosfolípidos.
Su estructura es la siguiente (3.7.11.15 tetrametil hexadecanoico):
C3) Prostaglandinas.
a partir de glándulas vesiculares. Actualmente el número de compuestos
Las prostaglandinas son sustancias de este tipo aislados es muy numerocon destacada acción hormonal aisla- so, sin embargo, todos derivan del áciy SJOVALL do prostanoico.
das en 1957 por BEKGSTROM
Abril-Junio
10
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGZA
B
E
9
7
11
13
5
3
Es un ácido graso con 20 átomos
de carbono con un ciclo pentagonal;
los 'dos átomos de hidrógenos ligados
a los carbonos 8 y 12 están en posición trans.
Las llamadas prostaglandinas primarias tienen los siguientes nombres
con sus estructuras químir,as :
1
dzO
15
17
19
AC PROSTANOICO
PGE,:
PGE2:
PGE3:
PGF,:
PGF2:
PGF3:
11 alfa - 15 - dihidroxi - 9 - 0x0 - 13 ácido prostaenoico
11 alfa - 15 - dihiclroxi - 9 - 0x0 - 5 - 13 protadienoico
11 alfa - 15 - dihidroxi - 9 - 0x0 - 5 - 13 - 17 prostatrienoico
9 alfa - 11 alfa - 15 trihidroxi - 13 prostaenoico
9 alfa - 11 alfa - 15 trihidroxi - 5 - 13 prostadienoico
9 alfa - 11 alfa - 15 trihidroxi - 5 - 13 - 17 prostatrienoico
Se han descrito además ocho prostaglandinas más en el líquido seminal
humano.
La acción primordial de las prostaglandinas radica en su acción sobre los
múscullos lisos y contracción del músculo uterino.
3.
111
LIPOPROTEINAS
Los Iípidos plasmático~sno son lo
- Alfa-Lipoproteínas .
- Beta-Lipoproteínas .
- Prebeta-Lipoproteínas .
- Quilomicrones
.
.
.
.
.
.
suficientemente polares para circular
en forma libre, por lo cual es preciso
la unión con proteínas, resultando unas
macromoléculas llamadas genéricamente lipoproteínas.
Existen cuatro tipos fundamentales
de lipoproteínas, resultando unas macromoléculas que reciben diversos
nombres de acuerdo con el método de
estudio.
High density lipoprotein (LDH)
Low density lipoprotein (LDL)
Very low density lipoprotein (VLDL)
Estos cuatro grupos fundamentales mo las alfa* globulinas; está compueshan sido demostrados por medio de ta de 45 a 55 % de proteína (llamada
técnicas como precipitaciónn salina, apoproteína A), 30 % fosfolípidos y
precipitación por alcohol, inmunopre- 18 % colesterol. Su peso molecular
cipitación, electroforesis, ultracentri- se estima entre 165.000 y 400.000
fugación y cromatografn'a (FREDRICK- comparada con la beta-lipoproteína tiene relativamente más colesterol esteriSON y COIS.1967).
La alfa-lipoproteína, tiene una mo- ficado y fosfolípidos.
vilidad electroforética sobre papel coMediante ultracentrifugación se ha
112
ANALES DE MEDICINA Y ClRUGlA
conseguido aislar dos lipoproteínas de
distintas densidades, una con densidad
1.062-1,12 llamada HDL2 (también
alfaLPA) y otra entre 1,12 y 1,21 llamada HDL3 (alfaLPB).
Las concentraciones plasmáticas de
estos dos tipos de alfalipoproteínas varían en ciertos trastornos metabólicos
y pueden determinarse mediante la ultracentrifugación analítica.
Solamente una forma inmunológica
da alf alipoprotcínas consigue separar
en el plasma fresco. La otra forma antigénica (alfaLPB) se consigue detectar
después de la deslipidación del suero.
Esta migra más lentamente que la
(alfaLPA HDLJ y probablemente es
un polímero más pequeño que ésta,
poseyendo las dos la misma subunidad
polipéptica.
La betalipoproteína migra sobre papel, como las beta globulinas (tiene
una densidad que oscila entre 1.006 y
1.063 y un peso molecular que se estima entre 1,3 y 3,2 X lo6.
Mediante electroforesis se consigue,
empleando suero antibeta-lipoproteínas, un inmunoprecipitado, en la zona
de depósito del suero.
Las lipoproteínas alfa y beta se sintetizan en el hígado, lo que se ha demostrado administrando aminoácidos
marcados CI4en la perfusión del hígado de la rata, observando beta-lipoprotehas de densidad 1.062. Se ha demostrado que la síntesis tiene lugar en
Vol. LII. N.O 228
los microsomas de las células hepáticas
(FREDRICKSON
y cols.)
La forma de transporte de los glicéridos en el plasma depende de su origen, si bien procedentes de la dieta
grasa, vehiculizándose mediante los
quilomicrones, bien procedentes de la
síntesis endógena y en este caso están
transportados por la prebeta-lipoproteína.
Las lipoproteínas prebeta (Very low
density) tienen una densidad que oscila
entre 1.006 y 0,93. Migración electroforética sobre papel entre alfa y beta.
Los lípidos representan el 85 % del
peso total del complejo proteínico y
lipoproteínico (apoproteína C.p.m.
834.000) 2-1 5 % . Los glicéridos ocupan 60-80 %, el colesterol 10-20 % y
los fosfolípidos 10-20 % del peso molecular lipídico total.
El término quilomicrón se propuso
en 1920 para señalar las partículas
visibles en la linfa y sangre despuCs
de la ingestión de una comida grasa.
En el plasma mediante electroforesis
sobre papel, permanecen en el origen.
Empleando gel de almidón migran con
alfaz (partículas primarias) o con beta
(partículas secundarias).
Las proteínas representan un 0,s95 % del peso molecular. Entre los
lípidos, los glicéridos representan el
79-95 %, el colesterol 2-12 % y los
fosfolípidos 3-15 %.
Y
ir
T
*
TABLA 1V bis
CLASIFICACION ZOOLOGICA DE LOS ANIMALES ESTUDIADOS
Cordero.
C1. Mamíferos: SC1. Euterios:
O. Artiodáctilos:
$9
Cabra.
S. O. Rumiantes:
G. Ovis:
Ovis Aries
9,
G. Capra
Capra sp.
G. Bos:
Bos domesticus
S. O. Suiformes:
F. Suidos
G. Sus:
Sus Scrofa
Equus caballus
Toro-Vaca.
,
Cerdo.
Y,
.
Caballo.
Perro.
Conejo.
$9
Cobayo.
O. Perisodáctilos:
S. O. Hipomorfos: F. Equidos:
G. Equus:
O. Fisípedos:
F. Cánidos:
G. Canis:
Canis sp.
O. Lagomorfos:
F. Lepóridos:
G. Oryctolagus: Oryctolagus cunículus
O. Roedores:
G. Cavia:
Cavia sp.
G. Gallus:
Gallus sp.
Gallina.
C1. Aves:
hlula.
Híbrido F, de un asno macho y una yegua.
C1. =Clase
S. C1. =Subclase
C. = Orden
S. O. = Suborden
G. = Género
F. = Familia
SC1. Cerinadas : O. Galliformes :
2i
k
&
b
tri
5t;
2
5
114
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
11. MATERIAL Y METODOS
A) Material. - La sangre de los
animales estudiados se ha obtenido en
el momento de su sacrificio en el Matadero Municipal de Barcelona y de
Aves de Bañolas (gallináceas y conejos). En los perros, la sangre se ha
obtenido por punción en la arteria femoral, los cobayos han sido sacrificados en nuestro propio laboratorio.
La sangre se ha dispuesto en un
Erlenmeyer que en general contenía
heparina y que posteriormente se ha
centrifugado, por tanto en la mayoría
de los casos hemos trabajado con plasma.
Desconocemos si el animal había
ingerido algún tiempo antes de su sacrificio. Creemos que hubiera sido
preferible obtener la sangre de los animales por punción en el establo, por
considerar la posible acción de las caterocolaminas sobre el metabolismo lipídico. Si bien aquello hubiera sido
preferible en el plano bioquímico, en
el plano técnico no hubiera sido posible desarrollar este trabajo por dificultades en la extracción y en la obtención de animales.
,En la Tabla IVa exponemos la clasificación zoológica de los animales estudiados.
El suero humano se ha obtenido
por punción venosa y posterior centrifugación de individuos de ambos sexos,
no obesos, que afirmaron no haber padecido enfermedad alguna un año anterior a la extracción y tenían normal
Vol. LII. N.O 228
el hemograma y velocidad de sedimentación globular.
Casi todas las personas son gente
joven, que trabajan en nuestro laboratorio. En otro trabajo hemos desarrollado el concepto de persona "clínicamente normal" y "bioquímicamente normal". Para la estadística de los
lípidos de la -especie humana hemos
solamente considerado individuos bioquímicamente normales, en número
ligeramente superior a los de las especies animales estudiadas. Sin einbargo, para la estadística de glicéridos
y glicerol libre, manejaremos datos
más numerosos procedentes de trabajos personales y publicados en otro
lugar.
3
%
En los animales hemos valorado solamente las medias en los distintos parámetros lipídicos estudiados, por considerar que la muestra es insuficiente
para el cálculo de la desviación standard.
B) Métodos de estudio. - Los
métodos aplicados al estudio de los
lípidos son numerosos. En la Tabla IV
se consideran los de mayor interés en
lipobioquímica. Personalmente, para
este trabajo hemos desarrollado tres
grupos de métodos :
- químicos
- electroforéticos
- cromatográficos
que consideramos sucintamente.
7
ANA!LES DE MEDICINA Y CIRUGIA
Abril-Junio
TABLA IV
METODOS DE ESTUDIO DE LOS LIPIDOS
A. Métodos químicos
Lípidos neutros
de ZOI.LNER
de KUNKEL
Gravimétrico
Colesterol total
- Método de RAIJPAPORT
- Método de So1.s
Colesterol libre
Glicéridos
- Método de EGGSTEIN
- Método de VANHANDEL
Fosfolípidos
- Método de ZILVERMIT
Acidos grasos libres
- Método de DUNCOMBE
Acidos grasos totales
Lípidos fecales
- Método de VANDE KAMER
- Método
- Método
- Método
B.
Crornatografía en capa fina
1. Separación lípidos neutros
2. Separación ésteres de colesterol
3. Separación fosfolipidos
4. Separación triglicéridos
5. Separación ácidos grasos
6. Separación prostaglandinas
7. Separación ácidos biliares
C . Cromatogvaf ía en colurnna
D. Crornatografía en fase gaseosa
- Esteres metílicos de ácidos grasos
- Triglicéridos
- Colesterol
- Acidos biliares
- Prostaglandinas
- Esfingosina
E. Métodos espectroscopia infrarioja
F . Espectrometría de masas
G. Métodos electroforéticos e inmunológicos
H. Métodos radioisotópicos
116
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
1. Métodos químicos
Vol. LII. N.O 228
de 0,5 C.C.de suero son precipitadas
con solución de ácido sulfúrico, con
lo que el colesterol liberado de las proteínas forma un cromógeno (reacción
de LIEBERMANN).
Lectura a 630 mp.
c) Glicéridos. Método de EGGSTEIN.- Con este método se determina el glicerol libre del suero, tras saponificar se determina el glicerol total y
restando el libre se obtiene el glicerol
esterificado con ácidos grasos, el cual
se transforma en glicéridos multiplicado por el peso molecular medio de éstos (885). La reacción transcurre en
tres etapas :
a) Lípidos totales. - Entre los
numerosos métodos descritos para la
valoración de lípidos totales (gravimétricos, turbidimétricos, fotométricos.. .)
hemos adaptado en nuestro laboratorio, dada la sencillez de ejecución y
su reproductibilidad, la técnica de
ZOLLNER
y KIRSCH.Este método consiste en valorar fotométricamente el
color rosado que producen los lípidos
de suero al ser tratados con una solución de ácido fosfórico y vainillina.
b) Colesterol total. Método de
RAPPAPORT
(1960). - Las proteínas
3
i
+ ATP Pimvatokinasa glicerol 1P + ADP
Fosfoenolpiruvato + ADP Glicerokinasa Piruvato + ATP
Piruvato -t NADH + H+LDH Lactato + NAD
Glicerol
>
>
___)
Determinado el NAD (test óptico
de WARBURG)
se conoce el glicerol y
de éste se deducen los glicéridos presentes en el suero.
d) Fosfolípidos. Método de ZILVERMITT y DAVIS(1950). - Las técnicas más usuales para la valoración
de fosfolípidos se basan en la determinación del fósforo lipídico, los resultados se expresan en fósforo de fosfolípidos.
La técnica empleada consiste en
precipitar las proteínas del suero con
ácido tricloroacético tratándose directamente con ácido perclórico para
efectuar la digestión del precipitado.
Después de calentar a 180-200" C en
baño de arena o de silicona. Añadir
solución de molibdato amónico en áci-
do sulfúrico y posteriormente vanadato
amónico en ácido nítrico. Lectura a
405 my.
Para los cálculos se multiplica el
fósforo de fosfolípidos por 25, obteniéndose el valor como fosfátidos expresados como lecitina.
e) Acidos grasos libres (DUNCOMBE 1964).
Se verifica inicialmente una extracción con cloroformo, tratándose a
continuación con nitrato de cobre.
Después de una intensa agitación automática se forman dos fases (acuosa y
clorofórmica). La fase clorofórmica se
trata con dietilditiocarbamato que
reacciona con los ácidos grasos libres
y desarrolla un color amarillo. Lectura
a 486 mp.
T
*
l
Abril-Jiinio
2.
ANALES DE MEDICINA Y CZRUGIA
Métodos electroforéticos.
Las lipoproteínas de suero pueden
estudiarse mediante diferentes métodos :
a) Métodos electroforéticos.
- Electroforesis en papel.
- Electroforesis en acetato de
celulosa.
- Electroforesis en gel de
agarosa.
- Electroforesis en gel de almidón.
- Electroforesis en gel de
acrilamida.
b)
Métodos inmunológicos.
- Inmunodifusión radial simple.
c) Métodos
inmunoelectroforéti-
cos.
- Empleo de antisueros totales.
- Empleo
de antisueros específicos. Antialfa y antibeta lipoproteína.
En este trabajo hemos empleado la
técnica de electroforesis sobre acetato
de celulosa cuya metódica es la siguiente:
f
- Se emplea la cubeta AC/4 con
puente 8,5 cm.
- Tampón veronal sódico 8,24 gr/
b
litro.
- Voltaje 200 voltios suministrados por una fuente de corriente
continua (ATOM Elphor o Argemi) durante 35 minutos.
- Después de las electroforesis se
117
sumergen las tiras más de 3 horas en la solución siguiente 100
mg. Rojo Ciba y 60 C.C. etanol
puro y 70 C.C.de NaOH 5 %,
se agita fuertemente, se coloca
el colorante en una cubeta, la
cual debe permanecer tapada.
Con esta técnica se separan:
- Alfa - lipoproteínas (frecuentemente subdivididas en 2 fracciones)
- Prebeta-liproproteínas
- Beta lipoproteínas
- Quilomicrones, cuando existen.
3. Métodos cromatográficos.
La técnica cromatográfica en capa
fina la hemos desarrollado in extenso
en otras publicaciones. Aquí solamente resumiremos estos métodos.
Se ha usado la CCF sobre Silicagel G, en placas de 250 mM, preparadas por nosotros, bien manualmente,
bien con el extensor automático Stratomat.
Hemos verificado tres tipos de cromatogramas distintos :
a) Cromatogramas de lípidos neutros. Solventes éter de petróleo, éter
etílico, ácido acético (90/10/1).
Distancia recorrida 15 cm. Tiempo
30 m. Se separan perfectamente.
- Esteres de colesterol Rf 0,83
- Triglicéridos Rf 0,32
- A.G.L. Rf 0,14
- Colesterol libre Rf 0,05
- Fosfolípidos Rf O
b) Cromatogramas de ésteres de
colesterol. Solventes éter de petróleo-
118
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
cloroformo 90/ 10. 4 recorridos. Distancia recorrida d,el solvente 10 cm.
Tiempo de cada desarrollo 25 minutos.
Se separan:
- Esteres saturados Rf 0,63
- Esteres monioenoicos Rf 0,57
- Esteres dienoicos Rf 0,50
- Esteres trienoicos Rf 0,39
- Esteres polienoicos Rf 0,33
c) Cromatograma de fosfolípidos.
Solventes cloroforino-metanol-acéticoagua (60/30 1/6). Distancia recorrida
14 cm. Tiempo 40 minutos.
Se visualizan:
- Cefalina Rf 0,60
- Lecitina Rf 0,40
- Esfingomieliiias Rf 0,32 - 0,20
- Lisolecitinas Rf 0,10
En todos los casos la tinción se ha
verificado con solución etanólica de
ácido fosfomolíbdico al 10 %.
Se han valorado las placas por referencia a un standard de suero humano normal.
111. RESULTADOS
1. CABALLOS (Equus Caballus)
Son mamíferos, de la subclase Euterios, orden Perisodáctilos, Suborden
Hipomorfos, Familia Equidos, Género
Equus.
Se han estudiado un total de 10
équidos, una hembra y 9 machos, de
los cuales 2 eran caballos y 7 mulos.
(Híbrido F, de un asno macho y una
Vol. LII. N." 228
yegua). Las edades comprendidas entre 10 y 12 años (véase tabla V).
a) Estudio bioquímico.
Lípidos totales: En la hembra el valor de lípidos totales han sido de 829
mg % c.c. En los machos el valor
medio obtenido ha sido de 412 con
un valor mínimo de 307 y un valor
máximo de 500.
Colesterol total: La cifra de colesterol total obtenida en la hembra ha
sido de 170 mg %. En los 9 machos
el valor promedio ha sido de 85 mg %,
con un mínimo de 74 y un máximo
de 96.
Glicerol libre: La concentración de
glicerol libre en la hembra ha sido
de ó,25 mg %, en los machos el valor medio obtenido ha sido de 0,21
con un mínimo situado en 0,10 y un
máximo de 0,47 mg % .
Glicerina de glicérido: El valor obtenido en la hembra ha sido de 48,58
mg %. En los machos el valor promedio obtenido de glicerina ha sido de
6,39 con un valor mínimo de 2,23 y
un valor máximo de 11,32.
Gli'céridos: En la hembra el valor
obtenido de glicéridos ha sido de
464,93 mg %, en los machos el valor
medio ha sido de 59,39 con un mínimo de 20,lO y un valor máximo de
107,55.
Fósforo lipídico: El valor obtenido
en la hembra ha sido de 6,l mg % , en
los machos el valor promedio obtenido
ha sido de 5,O mg % con un mínimo
de 3,2 y un valor máximo de 7,s.
Fosfolípidos: El valor obtenido en
la hembra ha sido 152,5 mg %. En
TABLA V
ESTUDIO LIPIDICO E N EQUUS CABALLUS
LIPIDOGRAMA
Nombre
Sexo
Edad
L. Totales
F . Lip.
-
Fosfol.
-
CABALLO 1
10 años
829
6,l
152,s
CABALLO 2
10 años
358
7,s
195
CABALLO 3
10 años
375
5,4
135
MULO 1
10 años
500
8,4
210
MULO 2
10 años
479
4,8
120
MULO 3
12 años
448
3,7
92
no valorado
MULO 4
12 años
358
3,4
85
10
MULO 5
12 años
461
4,7
117
no valorado
MULO 6
12 años
307
4,l
102
11,6
MULO 7
12 años
423
3,2
80
MACHOS
M
HEMBRAS
H
TOTALES
453
93
0,22
10,61
-
90
88,s
no valorado
1
l
A i Y A L E S D E M E D I C ' I N A Y CIRUGIA
120
Vol. 1-11. N." 228
FOSFOLIPIDOS
LIPIDOS NEUTROS
R r
---
I
.
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~
b
9
Q
P
st
*SS*
---o
-
n
P
I
I
P
C
l
l
O
P
P
\t
ESTERES D E COLESTEROL
!
rq
I I g g \
P
Figura 2.
gi
P
P
st
Lípido? plasmáticos de Equus caballus. Cromatograma de Iípidos neutros con
20, 40 y 60 h de problema y 20 h de standard de suero hiirn;ino.
Esteres de colesterol 10 y 20 h de problema y 5, 10 h de standard.
Fosfolípidos 50 y 80 h de problema, 50 X de standard.
4
infeccione
UROHUBBER
GRAGEAS
Pielitis. Pielonefritis. Cistitis. Nefritis intersticiales. Nefritis agudas exudativas.
Nefritis supuradas. Antrax renal. Nefritis intersticial crónica y esclerosis intersticial. Pielitis gravídica. Pionefrosis. Perinefritis. Uretritis y uretrotrigonitis. Epididimitis. Enfermedades infecciosas del aparato uro-genital de cualquier etiología.
Frasco con 36 grageas, conteniendo cada una:
Eritromicina base (en forma de lauril sulfato del éster propiónico) 75 mg; Clorhidrato de tetraciclina 125 mg; Nitrofurantoína 25 mg; Metil bromuro de escopolamina 0,5 mg; Tripsina (2.500 u. N. F./mgl 5 mg; Alfaquimotripsina (1.000 u.
N. F./mgl 3 mg; Excipientes C.S.
Siempre, según criterio facultativo. Por vía oral, como dosis media, 2 grageas en
los adultos, cada 6 horas. En los niños, una gragea cada 6 a 8 horas.
LABORATORIOS HUBBER, EL A.
Fábrica y Laboratorios de Productos Biológicos y Farmacéuticos
Berlín, 38-48 - Teléf. "321 72 00 - BARCELONA-15 [España]
Abril-Junio
ANALES DE Mj EDZCINA Y CIRUGIA
los machos el valor medio obtenido ha
sido de 126,O con un mínimo situado
en 80 y un valor máximo de 210.
Acidos grasos libres: En la hembra
el valor obtenido de ácidos grasos libres ha sido de 0,43, en tanto en los
machos el valor medio está situado en
0,24 con un mínimo de 0,13 y un valor máximo de 0,30 mEq/l.
Como podemos observar en las cifras anteriores se ve en la hembra estudiada una franca diferencia de las
concentraciones lipídicas en relación
a los maohos, observándose, en todos
los parámetros lipídicos estudiados una
mayor concentración en la hembra que
en los machos, destacándose especialmente los glicéridos.
El estudio de los lípidos de las yeguas es de todas formas insuficiente
con un solo caso para adoptar conclusiones de las diferencias bioquímicas
entre los dos sexos, sin embargo, en
este pnmer estudio parece ser que existe una marcada diferencia entre las
hembras y los machos estudiados.
b) Estudio cromatográfico (fig. 2).
bl) Lípidos neutros: El estudio de
los Iípidos neutros de los équidos nos
demuestra la separación de ésteres de
colesterol, tnglicéridos, ácidos grasos
libres, colesterol libre y fosfolípidos en
una proporción inferior, en los machos,
a la especie humana.
b2) Esteres de colesterol: El cromatograma de ésteres de colesterol nos
demuestra la presencia de ésteres saturados monoenoicos, dienoicos y trienoicos. En este cromatograma destaca
la mayor notable proporción de éstedes dienoicos sobre los monoenoicos
121
y saturados, el cromatograma contrasta visiblemente con los obtenidos de
suero de la especie humana.
bj) Fosfolípidos: El cromatograma
de fosfolípidos de los equidos demuestra la presencia de cefalina, lecitina, 2
esfingomielinas, a la concentración empleada no se observa lisolecitina. Destaca como en el hombre que la fracción mayoritaria corresponde a la lecitina, seguida de la cefalina y a continuación 2 esfingomielinas.
c) Lipoproteínas.
Hemos realizado 9 lipidogramas de
suero de Equus Caballus, de los cuales solamente hemos podido valorar 6.
Se observan dos lipoproteínas, una con
movilidad alfa y otra con movilidad
beta.
La porción de lipoproteína alfa oscila entre 8,6 y 25 %. La fracción
beta está entre un mínimo de 75,O %
y un máximo de 91,4 %. La tinción
de las lipoproteínas oscila, debido probablemente a la menor proporción
que en la especie humana, es más débil que en los lipidogramas séricos humanos.
2.
CABRAS (Capra Sp.).
Son mamíferos de la subclase Euterios, del Orden Arteriodáctilos, Suborden Rumiantes y género Capra.
Se han estudiado un total de 9 machos y una hembra, 6 de los machos
con edad comprendida entre 3 meses
y 4, los otros tres tenían una edad situada entre 25 y 30 días, la hembra
que ha sido posible estudiar tenía de
25 a 30 días (Tabla VI).
Ahril-Jiinio
•
ANALES DE MEDICINA Y C I R U G I A
a) Estudio bioquímico: Los lípidos totalcs de los machos oscilan entre
484 y 900 mg %, con una media de
641 mg %. En la hembra estudiada
el valor obtcnido ha sido de 248 mg%.
La media obtenida para la especie
es de 601 mg %. Realmente parece
observarse una mayor proporción en
la cifra de lípidos totales en el macho
que cn la hembra, sin embargo ello
puede ser debido a que la hembra tiene solanicnte 25-30 días y en cambio
los niachos tienen una edad más avanzada.
Refcrcntc al colesterol total la cifra
iníni~naobtcnido ha sido de 175 mg %
y la máxima de 288 mg %, con una
media situada en 21 6 mg %. En la
hembra cstudiada el valor total del colcsterol obtenido es de 67 mg %. El
valor medio para el conjunto de machos y hembras cstudiados está en 201
mg %.
e
4
123
a la que se observa en la especie humana.
El fósforo lipídico solamente lo hemos estudiado en 6 machos y éstos nos
han dado un valor de 5,1, el valor
máxima es de 7,8 con una media de
6,0, media por otra parte que corresponde al total. Referente a los fosfolípidos el valor medio obtenido es de
127 y el máximo es de 198 con una
media para los machos de 151 mg % .
En cuanto los ácidos grasos libres
se han estudiado en 4 machos y 1 hembra, los valores oscilan entre 0,88 y
1,53 con una media de 1,29 m. Val.
para los machos, en la hembra los ácidos grasos libres encontrados han sido
de 0,61.
b)
Estudio cromatográfico (fig. 3).
b,) Lípidos neutros: E n el cromatograma de Iípidos neutros comparados con el extracto de suero humano
se observa la presencia de ésteres de
En glicerol libre cl valor mínimo ob- colesterol, triglicéridos, ácidos grasos
tenido en machos es de 1,28 mg % libres, colesterol libre y fosfolípidos.
y el ináximo 2,84 con una media de Destaca una notable disminución de
1,78. En la hembra el valor obtenido triglicéridos en relación con el suero
es dc 0,93 y el promedio para la es- humano y probablemente un aumento
pccie es de 1,69. El glicerol de glicé- de ácidos grasos libres.
ridos para los machos oscila entre 2,29
b2) Esteres de colesterol: E n el
y 6,71 con una media dc 3,60, en la cromatograma de ésteres de colesterol
hembra estudiada el valor está en 1,84 se observan ésteres saturados, monoen el total la cifra obtenida es de
enoicos, dienoicos, trienoicos y polie3,42.
noicos, con la particularidad de que
La cifra iníni~iiade glicéridos obte- aproximadamente los 4 primeros están
nida es de 7,88 y la cifra máxima es en la misma proporción en tanto los
47,81 con una media de 17,53. E n la polienoicos están disminuidos.
b,) Fosfolípidos: En el cromatohembra cl valor medio es 8,66. La
media obtenida para la especie está grama de fosfolípidos se observan ceen 16,64 valor a todas luces inferior falina, lecitina, 2 esfingomielinas y una
124
ANALES D E MEDICII\'A
Vol. 1-11. N.O 228
Y CIRIJGIA
1,IPIDOS NEUTROS
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ID
-
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- n n ESTERES D E COLESTEROL
8
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111*
P
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P
P
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FOSFOI-IPIDOS
m
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P
P
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1
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st
rir
m
m
u
P
P
st
4
Figiira 3.
Lípidoi plasrnáticoi de Capia Sp. Crornatograma de Iípidoi neutros con 20,
40 y 60 h de extracto. Standard, extracto de suelo humano 20 h.
Esteres de coleiterol 10 y 20 h de problema, 5 y 10 h de standard.
Fosfolípidos 50 y 80 h de problema. 50 h de standard.
Abril-Jiinio
ANALES D E MEDICINA Y CIRUGIA
lisolccitina, cn proporción scmcjante o
qiiizlí superior a la que se observa en
la cspecie humana. Dcstaca coino siemprc cl componente fosfolípido mayoritario dcl suero cs Ic lecitina y le sigucn cn importnncia las csfingomiclinas y 1;i ccfalinn, cn último tCrniino la
lisolecitina; parece obscrvarsc por dcbajo de la ccfalina una fracción no
125
un valor mínimo de 412 y un valor
máximo dc 512. El valor obtenido en
la hembra ha sido de 443. El valor
medio obtenido para todos los individuos de la especie estudiados ha sido
de 464.
El valor mcdio en los niachos de
colesterol total es de 133 mg % con
un Iímitc inferior de 100 y un límite
supcrior dc 168 mg %. En la hembra
identificada.
el valor ha sido dc 105 mg %, el vac) 1,ipopiotcínns.
lor mcdio para la espccie cs dc 130
Hcnios ohscrvado los lipidogramas
mg %.
plnsniiticos cn los 10 animales cstuEn gliccrol libre el valor medio cs
diados. En los lipido$ranias dcstacan
de 1,94 con un mínimo situado en
tres fraccioncs, una de movilidad albú1.67 y un máximo de 2,02. E n la
mina. otra alfa globulina y otra bcta
hembra cl valor ha sido de 2,12. El
o prchcta.
valor mcdio de glicerol para la espc1-a fracción de liporilbúmina oscila
cie cs dc 1,96 mg %.
cntrc O y 6,- 96. Las alfa lipoprotcínas
El glicerol de glicéridos tiene un vavarían cntrc 44.2 y 78.7. Las bctalor mínimo cn machos de 2,37 y un
lipoprotcínns cstin ciitrc 18,5 y 49,s.
valor máximo de 5,92 con un valor
Al rcvk de lo quc ocurre en cl sucmedio dc 4.64. En la hembra el varo Iiuniano la fracción mayoritaria color obtenido ha sido 6,12 el promedio
rrcspondc n alfa-lipoprotcínas. Asimisobtenido para la cspecie es de 4.79
iiio cs riotahlc la proporción de lipoing % .
~ilhúmina.
En glicéridos hemos obtcnido una
cifra mínima dc 6,44 mg % y un valor máximo de 33,18 mg % con un
3. CERDOS (Sus Scrofa).
valor medio de 22,78. En la hembra el
valor mcdio obtenido ha sido dc 38,86
Son maniífcros, subclasc Euterios,
ing %. El valor mcdio ohtenido para
Orden .Artcriodactilos, Suhordcn Suila espccie cs dc 24,39 mg % como
formes. Faiiiilia Suidos, Géncro Sus.
pucde observarse la cifra de glicéridos
Hciiios estudiado un total dc 10 ceres muy inferior a la que se observa cn
dos, tlc los cuales 1 es hcmbra y los
condicioncs normales en la espccie huotros 9 son ninclios. Las edades osciiiinna.
Ian todas cllas cntrc 6 y 7 mcses.
La cifra iiicdio de f6sforo lipídico
ci de S,? con un valor mínimo de 4,2
a) Estudio bioquíiiiico (Tabla VI]).
El valor medio de Iípidos totalcs ob- y un valor máximo de 7.8. En la hemtenidos para los machos es de 466. con bra cl valor obtcnido ha sido 2 mg %.
TABLA VI1
ESTUDIO LIPIDICO EN SUS SCROFA
.Vombre
Sexo
Edad
L . Totales
C . T.
G . L.
G. G.
G. N.
CERDO
1
H
6-7 meses
443
105
2,12
6,12
38,86
CERDO
2
M
6-7 meses
428
139
1,70
2,37
6,44
CERDO
3
M
6-7 meses
434
105
1.76
5,21
CERDO
4
M
6-7 meses
512
168
2,02
4,10
CERDO
5
M
6-7 meses
457
124
1,49
5,92
CERDO
6
M
6-7meses
495
144
2,14
CERDO
7
M
6-7 meses
468
120
CERDO
8
M
6-7 meses
479
134
CERDO
9
M
6-7meses
412
100
CERDO 10
M
6-7 meses
512
464
F. Lip.
2
Fo'fol.
A . G . L.
50
0,25
4,2
105
0,17
33,18
5,l
127
0,44
6,3
20,OO
7,8
195
0,30
10,6
13,75
5,l
127
0.25
10,s
38,4
4.42
21,93
5.2
130
0,23
9,3
35,l
1,89
4,10
21,26
4,9
124.5
0,15
8.9
32,3
1.67
4.89
30.97
6,s
152,s
0,30
9.6
37,7
2,74
5,37
25.30
4,3
107
0,15
10,4
33,7
163
2.10
5,45
32.22
5,4
134
0,44
10.6
33.8
130
1.96
4,79
24.39
5
125.2
0.26
MACHOS
HEMBRAS
TOTAL
Alfa
10,l
Preb.
Befa
Abril-Jiinio
A N A L E S D E MEDIC'INA Y C l R U G l A
127
NEUTROS
ESTERES DE COLESTEROL
Figiirir 4. Lípidos plasmáticos de Sus Scrofa. Crornatograma de Iípidos neutros con 20,
40 y 60 h de extracto probIema, 20 A. de control.
Esteres de colesterol 10 y 20 h de problema, 5 y 10 h de control.
Fosfolípidos 50 y 80 h de problema y 50 h de control.
128
ANALES D E MEDICINA Y CIRUGIA
La mcdia obtcnido para toda la especic ha sido dc 5 mg %. Los fosfolípidos oscilan cntrc 105 y 195 con una
media dc 133,s. En la hembra los fosfolípidos obtenidos han sido de 50
m2 96. El valor medio para la especic está en 125,2 mg. 96.
Los ácidos grasos libres oscilan entre 0,17 y 0,44 con un valor medio
de 0,27. En la hembra el valor obtenido ha sido 0,25, el valor obtenido
para la cspecie híi sido de 0,26 mVal.
b) Estudio cromatogrtlifico (fig 4).
b,) E n el cromatograma dc lípidos
neutros comparados con la cspecie humana se observa: ésteres de colestcrol, triglicéridos, ácidos crasos libres,
colestcrol libre y fosfolípidos. A igualdad de concentración destaca una notable disininución de triglicéridos y en
ácidos grasos libres aproximadamente
igual a la quc sc observa cn el suero
humano.
bz) Esteres de colesterol: En el
cromatograma de Csteres de colesterol
se observan éstcrcs saturados, monocnoicos, dienoicos y trienoicos.
b3) Fosfolípidos: En el cromatograma dc fosfolípidos se observan: cefalina, lecitina, 2 e~fingomiclinasy una
lisolecitina. La proporción de fosfolípidos es infcrior a la que se obscrva en
la espccic humana.
C) Lipoprotcín;is.
En los lipidogrnmas de los machos
se scparan tres fracciones lipoalbúmina,
alfalipoprotcína y betalipoproteína. La
lipoalbúmina oscila cntre 6,3 y 10,6 %.
La alfalipoproteína varía entrc 30,3 y
38,4 5%. La bctalipoproteína cstá en-
Vol. LII. N: 228
trc un mínimo de 51,s y un mtliximo
de 58,8.
E n la hembra hemos observado una
alfa de 21.8, una prebeta dc 30,9
y una beta de 47,3 %.
4.
COBAYO (Cavia Sp.)
Son mamíferos, subclase Euterios,
orden Roedores, género Cavia, nombre Cavia Sp.
Se han estudiado un total dc 1 0
cavias, 6 machos y 4 hembras, todos
cllos dc 1 año de edad.
a) Estudio bioquíinico (Tabla
VIII).
El valor incdio obtcnido de Iípidos
totales ha sido cn los machos de 188
mg % con un máximo de 248 y un
mínimo de 116. En las hcrnbras cl valor medio es dc 372 con un máximo
de 900 y un niínimo de 136. El valor medio total ha sido dc 261 mg % .
La concentración media de colesterol total en los machos es de 47
mg % con un máximo de 82 y un mínimo de 30. En las hembras los resultados son de 56 de media, un máximo de 90 y un mínimo dc 18. La
mcdia total para la especie resulta dc
50mg %.
El gliccrol librc cn los machos, oscila cntre 0,10 y 1,68 con un valor
mcdio de 0.67 mg 96. En las henibras el valor mcdio cs dc 1 2 2 con u11
máximo de 2,03 y un mínimo dc 0,26.
La media total resulta dc 0,89 mg 5%.
Los glic6ridos cn los machos varían
cntrc 1,92 y 108,32 nig %, con una
nicdia dc 40,8. En las hcrnbras los rc-
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TABLA VI11
ESTUDIO LIPIDICO EN CAVLA SP
Nombre
Sexo
Edad
L . Totales
C. T.
G . L.
G . G.
G. N .
F Lip.
1
46,27
2
COBAYO 2
33,67
1,5
COBAYO
3
1 año
40,88
4,1
COBAYO 4
1 año
48,67
2,s
COBAYO
1 año
9,62
1 3
3,l
COBAYO
5
COBAYO
6
1 año
1.92
COBAYO
7
1 año
43,29
32
COBAYO
8
1 año
108,32
3,4
COBAYO
9
1 año
512,07
5,O
COBAYO 10
1 año
75,03
2,9
MACHOS
1 año
HEMBRAS
1 año
TOTAL
Fosfol.
130
ANALES D E MEDICINA Y ('IKUGlA
Vol. 1.11.
N."228
FOSFOLIPIDOS
LlPlDOS NEUTROS
P
P
P
C
P
P
C
ESTERES DE COLESTEROL
Figiira 5. Lípidos séricos de Cavia Sp. Lípidos neutros 20, 40 y 60 h tle extracio p;.ohleni;i.
20 h de control.
Esteres de colesterol 5 y 10 h de problema. 5 y 10 h de control.
Fosfolípidos 50 y 70 h de prohlema, 50 h de control.
Abril-Jiinio
v
A N A L E S L)E M E D I C I N A Y ~ ' I R ~ J G I A
sultados son miiy diversos, oscilando
cntrc 40,88 y 512,07 ing 96. Como
pucdc observarse, las variaciones de
glicéridos son muy importantes con
iina probablc diferencia sexual.
El fósforo lipídico cn los machos
varía cntrc 1,S y 3,1 con una media de
2.5 y cn las hciiibras oscila entre 2,s
y 5,0 con una media dc 3,6.
Los fosfolípicios son superiores en
Ins Iicmhras que en los machos, hallántlo\c en aquéllas conccntraciones mcdias de 90 (60-125) y en los machos
J c 62 (37-85) mg % . El valor medio
para la cspccic cs de 76 mg %.
Las mcdias dc los ácidos grasos lihrcs son semejantes cn los dos sexos
O,X6 para los machos y 0.84 para las
hcmbras.
h)
Estudio cromatogrúfico (fig. 5).
Lípidos neutros: En este croninto~rnmasc observan ésteres de colcstcrol triglicéridos, ácidos grasos lihrcs. colcstcrol librc y fosfolípido en
proporcicín infcrior cn la niayoría de
los casos estudiados, a los de control
tlcl siiero huiiiaiio.
h?) Estercs de colcstcrol: Se observan éstercs de colesterol saturados,
inonoenoicos, dicnoicos, trienoicos y
polienoicos en proporción inferior al
control humano. Predoniinan los ésteres dicnoicos sobre las otras fracciones.
h,) Fosfolípidos: Se fraccionan cefalina, lecitina y 2 esfingomielinas. No
sc ohscrva lisolecitina.
17,)
C) Lipoproteínas.
Idas lipoprotcínas obtenidas y valoradas de los cobayos estudiados han
131
sido dc difícil interpretación, se han
observado dos fracciones, probablemcntc alfa y betalipoprotcínas, sicndo
ésta la fracción mayoritaria.
5.
CONEJO (Oryctolagus cuniculus).
Son mamíferos, Subclase Euterios,
Ordcn Lagomorfos, Familia Leporidos, Género Oryctolagus.
Sc han estudiado un total de 14 conejos, de los cuales 9 corresponden
a machos y 5 corresponden a hembras, todos tienen una edad de 3 meses
a) Estudio bioquímico (Tabla IX).
En los machos las concentraciones
de Iípidos totales oscilan entre 297
mg % y 450 con una media situada
en 336 mg %. En las hembras los
valorcs mínimos están entre 325 y 487
con una media de 386. La media obtenida en conjunto, es dccir, tanto en
niachos como en hembras, es 354
n1g % .
La concentración de colestcrol total
oscila cn los machos entre 33 mg %
y 76. La media está situada en 56
mg 7%. En las hembras oscila entre 38
y 81 mg %, estando la media situada
cn 62 mg %. La cifra media obtenida
para el conjunto de la especie está situada en 58 mg %.
El glicerol libre en los machos está
cntre 0,49 y 2,75 mg 7% con una media situada en 2,07. En las hembras
la conccntración de glicerol librc oscila
entre 1,O3 y 4,44 mg % con una media de 3,16, por tanto, se observa que
la concentración de glicerol libre en
TABLA IX
ESTUDIO LIPIDICO EN ORYCTOLAGUS CUNICULUS
LIPIDOGRAMA
Nombre
CONEJO
Sexo
1
Edad
3 meses
L . Totales
-
297
C . T.
G . L.
G . 'V.
F. Lip.
Fofol.
Alfa
Beta
55
2,76
33,47
2,5
62
N o valorado
CONEJO 2
3 meses
371
55
2,74
81,48
4,1
102,5
N o valorado
CONEJO
3
3 meses
277
50
2,62
3837
3,3
82
N o valorado
CONEJO 4
3 meses
321
65
2,38
37,13
5,4
135
32,7
67,3
CONEJO 5
3 meses
275
33
0,49
38,28
2,2
55
49,O
51,O
CONEJO 6
3 meses
355
52
1,48
88,88
3,2
80
44,4
55,6
CONEJO 7
3 meses
380
76
2,81
3433
3,3
82
45,6
54,O
CONEJO
8
3 meses
300
62
2,81
43,19
3,s
95
38,8
68,6
CONEJO 9
3 meses
450
57
0,57
128,52
3,8
95
31,4
68,6
CONEJO 10
3 meses
487
67
3,60
57,04
4,4
110
49,7
50,3
CONEJO 11
3 meses
325
38
1,13
73,68
6
150
40,l
59,9
CONEJO 12
3 meses
400
81
3,32
52,62
5,l
127
25,3
74,7
CONEJO 13
3 meses
370
62
3,83
64,83
43
112
40,2
60,8
CONEJO 14
3 meses
350
62
4,44
58,93
4,2
105
23,l
76,9
MACHOS
HEMBRAS
TOTAL
II
ANALES BE MEDICINA Y C l R U G l A
Abril-Jiinio
133
ESTERES DE COLESTEKOL
1,IPIDOS NEUTROS
FOSFOLTPIDOS
Figura 6.
Lípidos séricos de Oryctolagus cuniculus. Cromatograma de Iípidos neutros
con 20, 40 y 60 h de extracto problema, 20 h de control.
Esteres de colesterol, 5, 10 y 20 h de problema, 5 y 10 h de standard.
Fosfolípidos 50 y 80 h. Control 50 h.
134
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
hembras es superior a la que se ha
obtenido en machos. La media situada
para la especie está situada en
2,49 mg % .
El glicerol ligado a glicéridos varía
en los machos entre dos límites bastantc amplios situados cn 6,24 y 21,60
mg %, la media obtenida está en 8,97.
En las hcmbras el valor mínimo ha
sido de 8.79 y el valor máximo en
10,57 con una media de 9,65. El valor
medio obtcnido para el conjunto de
machos y hembras estudiados está en
9,21 mg %.
Para los machos de csta especie los
glicéridos oscilan entre 52,62 y 73,68,
estando la media situada entre 61,42.
El valor medio de glicéridos para la
cspecic está en 59,37 mg %.
El fósforo lipídico en machos varía
entre 2,2 y 5 4 , con una media de 3,s.
La media para las hembras es de 4,8,
con un valor mínimo de 4,2 y un valor máximo de 6 mg %. El valor medio para la especie está situado en 3,9.
El valor medio de fosfolípidos para
los machos estudiados está en 87,6,
con un valor mínimo de 55 y un valor
máximo de 162. El valor medio obtenido para las hembras está en 120
mg % , con un mínimo de 105 y un
máximo de 150. El promedio obtenido para la especie es de 99,4 mg % .
Referente a los ácidos grasos libres
el promedio estudiado para los machos
cstá en 0,69 mVal, con un mínimo de
0,58 y un máximo de 1 , l . En las hembras el valor medio es de 1,11, con
un mínimo de 0,75 y un máximo de
1,22. Como puede observarsc los valores para las hembras referente a la
Vol. LIT. N.O 228
mayoría de parámetros lipídicos son
más elevados que para los machos,
destacan en estc sentido los fosfolípidos, los glicéridos y los ácidos grasos libres.
b) Estudio cromatográfico (figura 6).
b,) Lípidos neutros: En la placa
de Iípidos neutros se observa si comparamos a distintas concentraciones
el extracto de suero de conejo en relación con el cxtracto de suero humano, la prescncia de ésteres de colesterol, triglicéridos, ácidos grasos libres,
colesterol libre y fosfolípidos. Destaca
una menor proporción en relación con
el hombre de éstercs de colesterol, de
triglicéridos, colesterol libre y probablemente de fosfolípidos. Ahora bien,
la concentración de ácidos grasos libres son superiores en el conejo que
en el hombre.
b2) Esteres de colesterol: En el
cromatograma de ésteres de colesterol
destaca la presencia de ésteres de colesterol saturados, monoenoicos, dienoicos, trienoicos e indicios de polienoicos, de ellos los que están en mayor
proporción son los ésteres dienoicos,
le siguen los saturados y a continuación los monoenoicos.
b3 Fosfolípidos: En el cromatograma de fosfolípidos destaca la presencia de cefalina, lecitina, dos esfingomielinas y una lisolecitina, en una
proporción inferior a la que se observa
en el suero humano. La fracción mayoritaria de fosfolípidos corresponde a
lecitina, sin embargo, esta proporción
es inferior a la del suero humano.
4
*
a
a
"La llave
reguladora
de la
diuresis"
Conocido internacionalmente como LASlX
ORAL
PARENTERAL
HOECHST IBERICA, S. A.
- Barcelona
TABLA X
ESTUDIO LIPIDICO EN OVlS ARIES
LIPIDOGRAMA
Sexo
Nombre
-
-
Edad
-
CORDERO
1
h.1
3 meses
CORDERO
2
M
3 meses
CORDERO
3
M
3 meses
CORDERO
4
M
3 meses
CORDERO
5
M
3 meses
CORDERO
6
3 meses
CORDERO
7
3 meses
CORDERO
8
3 meses
CORDERO
9
3 meses
CORDERO 10
3 meses
MACHOS
HEMBRAS
TOTAL
136
A N A L E S D E MEI)I('IhfA Y ( ' 1 R l l í ; l A
V o l . 1.11. N." 228
1.IPIDOS NEUTROS
ESTERES DE COLESTEKOI>
Figiira 7 .
Lípidos séricos de Ovis Aries. Lípidos neiitros 20, 40 y 60 h tle pi'ohlemn:
20 h de control.
Esteres de colesterbl 10 y 20 h de prohlema; 5 y 10 h de control.
Fosfolípidos 50 y 80 h de prohlema: 50 h de control.
I
Al>ril-.lt~nio
A,VAl.I:'.Y / ) E R I ~ ~ D I ( ' I I VYA ( ' I R U G I A
C) Lipoprotcínas:
Los lipidogrnnins de los 14 conejos
híin sido de difícil valoríici6n dada la
escasa coloracií,n dc las tiras. En ]as
10 vriloradas hemos conseguido la scparacicín dc dos Iipoprotcínas. La lipoprotcína alfa varía cntrc 23,l y
49,O nig 96. La lipoprotcína bcta cstá
situada cntrc 50,3 y 76,9 mg 5%.
6.
CORDERO (Ovis Aries)
Son mamíferos, Subclasc Eutcrios,
Ordcn Artiodactilos, Suborden Runiiantcs, Gcncro Ovis.
Hcmos estudiado un totnl de 10
corderos, todos ~110smachos, con una
cdacl aproximada de 3 rncscs.
a,
bioquímico (Tabla X),
La cifra de Iípidos totales varía rclntiv:iincntc poco, con un míniino situado cn 221 y un máximo situado
en 266. con uní1 nicdia de 24 1 nig 96.
El colcstcrol total cstá situado cntrc 55-73 iiig O/o con una media de
65 iiig % .
El glicerol librc ticnc un valor medio de 1,72 con un mínimo de 1,13 y
un máximo de 3,18 mg %.
En glicerol de glicérido hcnlos haIlndo un valor mctlio dc 2,3 1 con un
mínimo dc 1,42 y un valor niáxiiiio
de 3,79. Los glicéridos varían cntrc
2,78 y 16,06, con un valor niedio de
6,32 mg 96,por tanto, pueden obscrvarsc unos glicéridos bajísirnos en rclación a la especie humana.
El fósforo lipídico oscila entre 3 y
6 nig %, con un valor mcdio de 3,52.
137
Los fosfolípidos varían entre 75 mg %
con un valor medio de
Y 150 mcS
87 nlg ?h.
LOS ácidos grasos librcs oscilan cntrc 0984 Y 292 maVI, con un valor
medio de 1,59.
b)
di^ croinatográfico (fig. 7).
b,) Lípidos
~1 cromatograma dc lípidos ncutros demuestra
la prcscncia dc éstcrcs de colesterol,
triglicéridos, colcstcrol librc, ácidos
grnsos libres y fosfolípidos. Destaca
una disn~inución cn relación con cl
suero humano de Cstcrcs de colesterol
ttc triglicéridos y de colcstcrol libre.
b2) Estcrcs de colesterol : Rcalizado cl cromatograma de éstcrcs dc colcstcrol sc observa la separación
6stcrcs saturados, monocnoicos, dienoiCOS,tricnoicos y policnoicos, cstando
todos ellos en una proporción inferior
a la dcl suero humano, sin embargo,
las proporciones rclativas cntrc cada
uno dc los Cstcrcs son scmcjantes a las
que se obscrvan en el suero humano.
b,) Fosfolípidos: En el cromatograma dc fosfolípidos se observa una
pobreza de los cxtractos lipídicos, destacándosc la prcscncia dc ccfalina, lecitina y 2 csfingomiclinas. A las conccntracioncs empleadas prácticamcntc
no se observa lisolccitina. La fracción
mayoritaria dcl suero corresponde a
la lccitina.
c) Lipoprotcínas.
La scparacicín clcctroforética y posterior tinción lipídica nos separa csencialmcntc lipoalbúmina y alfalipoproteínas (quc hemos calculado juntas) y
bctalipoproteínas. En dos casos se ha
\
1
1
'&
7-
TABLA SI
ESTUDIO LIPIDICO EN G.41.LUS SP
b
2
LlPII>OGRA.\fA
.Yor~rhrc
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E<laii
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-
-
L . Tufaler C . T .
G . L.
-- - -- - -
ti. Y .
G. G.
- -
-
F . Lip.
-
~- -
-
Bclci
--
-
1
.
7
?
S:
.
0.69
32.8
67.2
100
0.9
31.6
68.4
2.j
57
0.59
30.4
69.6
>
L1
2
41.46
2.7
67
0.62
27.5
72.5
5.36
15.10
2.4
60
0.86
30.4
69.6
38.74
358.53
450
0.46
22.4
77,6
\f
3 meses
400
110
3.20
4.76
15
2.9
GALLO 2
51
3 meses
600
86
2.88
4.76
!r(.OX
4
GALLO 3
51
3 meses
400
96
2.8!
j.68
8.36
GALLO 4
21
3 mcier
425
91
3.58
7.39
GALLO 5
XI
3 meses
500
110
3.79
H
3 meses
750
72
1.47
6
A!f(r
4
GALLO 1
GALLINA
. A. G . L.
f
18
72
+
w
m
C
i
2
b
r
m
-c:
i
GALLINA
7
H
3 meses
950
57
1.94
53.49
495.91
16
400
0.45
23.2
76.8
GALLINA
8
H
3 meses
1.900
134
0.85
74.50
708.51
25
625
0,53
21.2
78.8
CiALLlNA
9
H
3 meses
1.025
86
7.51
40.17
430.24
20
500
0.96
36,3
63.7
GALLTNA 10
H
3 mesei
1.075
129
1.43
50.95
476.38
15
375
0.62
30
70
MACHOS
21
465
98
3.25
5.29
19.60
71
0.73
HEMBRAS
H
1.140
95
1.84
53.37
495.71
18
470
0.60
802
97
2.54
20.33
257.65
10.8
270
0.66
TOTAI.
2.8
%
'
.
h
<
4
Z
ra
IJ
7-
I-'igiii':~ 8 .
I.ípicloi plaim:iticos dc m a c h o de G i i I i ~ iSp. I.ipiclo\ nciilro\ 70, 40 y 6 0 h tle
extracto. 20 h d e contiol.
Eiteies d e colesterol 5, 1 0 y 20 h de prohlcrna y S y 10 h tic conti-ol.
Fo.;folípidos 5 0 y X O h d e p:.«hleni;i y 5 0 i. de control.
Y CIRIIGIA
conseguido la separación de prcbctalipoprotcínas.
Las alfalipoprotcínas oscilan cntrc
40 y 84,7 % . La bcta cntrc 19 y
60 %. En todos los casos a cxccpci6n
de uno, la alfalipoprotcína cs superior
a la bctn. Los lipidograinas son muy
scniejantcs a los observados en la Capra Sp.
7.
GALLINA (Gnllus Sp)
Son aves, Suhclasc Cnrinndas, 0 r den Gallifornics. GCncro Gallus.
Sc han estudiado un total de 5 gallos
y dc 5 gaillnas, con cdadcs alrededor
dc los 3 meses.
a) Estiidio hioquíniico (Tabla X).
En los gallos las cifras de Iípidos
totales están en 465, con un valor niíninio situado en 400 y un vnlor máxinio situado en 600. El valor inedio cii
las gallinas cs de 1.140, con Lin valor
mínimo de 750 y iin valor niáxiiiio
dc 1.900 mg %. El pronicdio ohtcnicio pnrn el conjunto de todos los individuos estudiados cstá en 802 mg %.
La cifra de colcstcrol totiil oscila
cn los machos cntrc 86 y 110 mg %
y en hembras cntrc 57 y 134 nig ?h.
La mcdia para los priineros es de 98
y para los segundos dc 95, la mcdia
cn total cs dc 97 nig % .
El glicerol libre oscila cntrc 2,8 cl
uno y 3,79, con i i n vnlor mcdio de
3,25 cii machos. En las hembras los
valores dc glicerol libre varían cntrc
0,85 y 3 3 1 , con un vnlor mcdio dc
1,84. El valoi- nicdio para In cspccic
sería dc 2,54 nig % .
V o l . 1.11. N." 2 2 8
Glicerol ¿c glicérido en los machos
oscila cntrc 3.68 y 7.89. con un valor
mcdio dc 5,29. En las hcmbi~nsosciln
cntrc 38.74 y 74.50, con una nicdia
dc 53,37. El vnlor iiicdio para la cspccic ha sido de 29,33 mg 76.
Los glicCridos en los machos oscila
cntrc 8.36 y 15.10. con iin valor iiicdio de 13. En Ins Iicmhras los gliiéridos varían cntrc 358.53 y 7 0 8 3 1 ,
con iin valor nicdio de 495.7 1 nig %'.
Como pucdc ohscrvarsc existe iiiia cxtiaordinaria diferencia de los 2licCridos
de lino a otro sexo, el valor iiicdio
calculndo quc no ticnc c;isi ningún
valor ha sido de 257.65 mg % .
El f6sfoi-o lipídico varí:~cn los inachos cntrc 2.3 y 4 ing 96 y cii I;is Iicnibrns cntrc 1 5 y 25 i i i ~C/C. Los v;~Iorcs
iiicdios obtenidos cstán cntrc 2,X para
los machos y 1 8 para las hciiihras. El
valor nicdio para la especie es de 10,X.
Los fosfolípidos calciilados varía11
en los iii:ichos ciltrc 57 y 100 nig %
y en las hcmhrns cntrc 357 y 625
nig %. Los vrilores iiicdios ohtcnidos
cstán situados en los machos en 7 1 y
en las hciiihrns en 470. Aquí piicdc
ohscrvarsc tan1bii.n iinn cxtraordinarin diferencia scxii;il. Los ácid«s grnsos
lihrcs tlc los iiinchos oscilan cntrc 0.69
y 0.9 mVsl, con iin valor iiicdio tlc
0.73. En las hciiibr:is cstos vrtlorcs
oscilan cntrc 0.46 y 0.95, con un valor nicdio dc 0.60. La nicdin ohtcnidn
para la cspccic está en 0,66.
*
4
4
h ) Est~idiocroiiiatopráfico (íigiirns
8 y 9).
Lípidos neutros: En el 'stiiclio
cronintográfico de Iípitios neutros en
b,)
ESTERES I>E COLESTEKOL
1.ll'lDOS NEUTROS
FOSFOLI 1'1 DOS
Yigiira 9.
1-ípicloi plasrnáticos de gallina. 1-ípidos neutros 20, 40 y 60 h de extracto
prohlerna: 20 h de control.
Esteres de colesterol 5, 10 y 20 h de prohlem;~;5 y 10 h de control.
Fosfolípidos 50 y 8 0 h de problema; 50 h de extracto control.
142
ANALES DE AdEDlCINA Y ClRUGlA
machos se demuestra la presencia de
Estcres de colcsterol. triglicéridos, ácidos grasos libres, colesterol libre y fosfolípidos. Sc observa que la proporción de triglicEridos es muy inferior a
la del suero humano, y asiniismo, la
dc éstcres de colestcrol y probablcmente la de fosfolípidos.
b,) Estcres de colesterol: En el
cromatograma de ésteres de colestcrol
sc demuestra la presencia de ésteres
saturados, monoenoicos, dienoicos, tricnoicos y tetraenoicos. Los éstcres dicnoicos son los que cstán en fracción
mayoritaria.
b,) Fosfolípidos: En el cromatograma de fosfolípidos se obscrvan ccfalina, Iecitina, esfingomielina e indicios dc lisolecitina. La fracción mayoritaria es la lecitina.
V o l . 1-11. N," 228
c) Lipoprotcíni~s.
La separación mediante clectroforesis sobre acctato de cclulova y posterior tinción lipídica nos ha demostrado 2 fracciones de interpretación
difi:ultosa, pero que creemos que se
trata de alfn y beta lipoprotcínas. No
hemos hallado diferencias scxualcs, lo
cual despuis de lo que hemos visto
con los Iípidos resulta sorprenderitc.
La proporción de alfa lipoproteinas
oscila cntrc 22.4 y 36.3 %. Las hetalipoproteínas varínn cntrc 63.7 y
77.6 % .
8.
PERRO (Canis Sp.)
Son maniífcios, Suhclasc Euterios.
Orden Fisípcdos. Familia Cánidos, Género Canis.
Lípidos ncutros: Si ahora csb
tudiamos el cromatograma de ga11'inas
sc observa lo mismo cluc los machos,
pero con una extraordinaria concentración de triglicéridos y asimismo dc
fosfolípidos.
bz,) Estercs de colcstcrol: En el
cromatograma de ésteres de colcsterol
cstán los Cstcres saturados, nionoenoicos, dienoicos y trienoicos, en una proporción semejante la que hcmos observado en los machos.
a) Estudio hioquíniico (Tabla XII)
Se han cstudindo 9 niachos y 1 1
hembras, en ellos solaiiicntc se ha dcterminado la concentración dc Iípidos
totales. En los machos el vnlor nicdio
obtcnido ha sido de 418. con un vnlor
mínimo de 287 y un valor niáxiiiio
de 700 mg 5%. En las hcnibrns el valor nicdio cbtcnido ha sido de 480. con
un mínimo de 375 y iin máximo de
775.
h . , Fosfolípidos: En el croniatograma de fosfolípidos hay una extraordinaria concentración de cefalina y
lccitina en nicnor proporción dc 2 esfingomielinas predominando una de
ellas y de lisolecitina. Por tanto. cn
gallos y gillanas es la especie donde
hay mayores diferencias scxualcs.
b) Estudio croniatográfico (fig. 10).
b,) Lípidos ncutros: El estiidio
cromatogrrífi:o de los Iípidos neutros
nos deniuestra In presencia de éstercs
de colcstcrol. triglicEridos, colcstcrol
libre, ácidos grasos lihrcs y fosfolípidos. Las propoicioncs obscrvndas son
scnicjantcs, aunque en mcnoi propor-
,\l~ril-Jt~ni<)
e
b
ANA1,E.Y BE M E I ) I C I I \ ' A Y C I R U G I A
ción a las que sc observan en la especic humana.
Esteres de colcstcrol: El crob
iiiatogrania dc fstcrcs de colesterol nos
demuestra la presencia de éstcres
saturados, monoenoicos, dicnoicos, tricnoicos y polienoicos, predominando
los Cstcrcs dicnoicos sobre los saturados y monoenoicos.
h,) Fosfolípidos: En el cromatogrania de fosfolípidos se separan ccfnlina, Iccitina, 2 csfingomielinas y lisoIccitina, In fracción mayoritaria corresponde a la Iccitina.
143
y 1.26, con una niedia de 0,41 y en las
Iicmbrns oscila cntre 0.15 y 0,83, con
una incdia dc 0,63. Para este grupo
la mcdia cstá cn 0,54 mg % .
La glicerina de glicérido en los niachos el valor mínimo obtenido es de
1,34 y el valor nláximo cstá en 2,05,
en las hembras estudiadas el vnlor niínimo es de 0,47 y el valor máximo está
en 4.97. La media en los casos de los
machos está en 1,71, en tanto que en
las hembras el valor medio está en
2,49 mg %, es decir, al parecer cxistc
una mayor concentración de glicerina
dc glicéridos en hembras que en machos.
9. TOROS Y VACAS (Ros doiiicsticus)
TABLA X1I
Soii iii:iniífcros, Subclase Euterios,
Orden Artidnctilos, Suhordcn Runiinntci, Género Ro\.
Sc ha estudiado un toro, 4 bueyes.
1 terncrn y 4 vacas.
Estudio bioquíniico
(Tabla XIIT)
Lípidos totales. La cifra de Iípidos
!oialcs de los bueyes y el toro estudiado4 os:ila cntrc 345 y 473 mg %. con
Lirin incdia de 376; en las hembras la
c.~nccntracicín de Iípidos varía cntrc
342 y S67 con iina iiicdin de 434
i11y %.
1-n coiiccntracicín dc colcstcrol total
cii los iiinchos cstá cntre 1 10 y 185
iiig C/c. con iinn mcdia de 1 13. En las
Iienihras las cifras oscilan cntrc 92 y
230 mg %, con una incdia de 15 1.
Las concentraciones dc glicerol lihrc cii los machos os-ila entre 0,27
1)
v
4
L,PIDTCO DE
Nornhre
.FCXO
-
-
PERRO
PERRO
PERRO
PERRO
I
2
5
6
PEI~RO7
PERRO X
PERRO
9
PERRO 10
,
I,ERRO
PERRO 2
PERRO 3
PEKRO 4
I'ER U 0 5
PERRO 6
PERRO 7
PEliliO X
PERRO 0
PEKRO 1 0
I'ERRO 1 1
PERRO 12
-
SP
1- Talal<,\
- --
H
hl
hI
M
M
375
287
350
H
450
H
H
H
MACHOS
HEMBRAS
TOTAI,
455
144
AArALES L)E IZIEiII('1NA Y C I R I I G I A
Vol. L11. N." 228
I.IPIDOS NEUTROS
*MP.
ESTERES DE COI.ESTEROL
Fig~ii.:i 10. Lípidos de suero de Canis Sp. Lípidos neiilros 50 y 5 0 h dc eutr;icto tle do,
problemas, control de 20 h.
Esteres de colesterol 3 0 y 30 h de problenla, 10 h de control.
Fosfolípidos XO h de prohlcma y 50 h de control.
Abril-Junio
&
+
+
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
Referente a los glicéridos podemos
dccir que en los machos el valor mínimo obtenido es de 6,06, en cambio
el valor máximo está situado en 15,OO;
la media obtenida es de 12,47. En las
hembras estudiadas el valor mínimo
está en 3,07 en una hembra de 5 a
6 mcses y el valor máximo es de 45,21,
la media para hembras de glicéridos
cs de 17,95.
El valor mínimo del fósforo Iipídico
en los machos es de 3,O mg %, en
tanto que el valor máximo es de
6 mg %. Con una media de 3,9. En
el caso de las hembras el fósforo lipídico oscila cntre 1,3 y 9,3, con una
media de 4 mg % .
Los fosfolípidos en esta especie oscilan entre 75 y 102,5 mg %, este ú1timo caso es el valor que se ha tomado en el toro, la media en el macho
es de 95,6, en las hembras estudiadas
el valor mínimo de fosfolípidos es de
60 mg %, en tanto que el valor máximo es de 232, la media para las
hembras es de 101,5.
Los ácidos grasos libres obtenidos
en los machos están situados: el mínimo en 0,25 y el máximo en el toro en
1,23, con una media de 0,35; en las
hembras el valor mínimo es 0,22 y el
valor máximo 0,88, con una media situada en 0,75 mVal.
b) Estudio cromatográfico (fig. 11).
bl) Lípidos neutros: El estudio
cromatográfico de lípidos neutros comparado con el cromatograma del suero
humano nos demuestra: ésteres de colesterol, t;iglicéridos, ácidos grasos libres, colesterol libre y fosfolípidos,
145
destaca que la concentración de triglicéridos es muy inferior a la obtenido
en la especie humana, mejor podríamos decir que es inferior la concentración de colesterol, especialmente
colesterol libre.
bZ) Esteres de colesterol: E n el
cromatograma de ésteres de colesterol,
destaca la presencia de ésteres saturados, monoenoicos, dienoicos y dos
ésteres trienoicos que se desdoblan,
así hay una cuarta fracción correspondiente a los ésteres de colesterol trienoicos. Destaca el hecho de que los
ésteres de colesterol que están en mayor proporción son los ésteres dienoiCOS.
b3) Fosfolípidos: En el cromatograma de fosfolípidos se observan cefalina, lecitina, esfingomielina y, en
'
cambio, no se visualiza a la concentración señalada la presencia de lisolecitina, destaca en menor proporción que
en los fosfolípidos de la especie humana.
c) Lipoproteínas.
La separarión de lipoproteínas demuestra la existencia de dos o tres
fracciones de difícil interpretación y
que probablemente se trata de lipoalbúmina, alfalipoproteína y betalipoproteína. La fracción mayoritaria corresponde a alfalipoproteína.
10. HOMBRE
Hemos efectuado desde el año 1967
más de 1.300 estudios de lípidos com-
TABLA XIII
l
ESTUDIO LIPIDICO DE BOS DOMESTPCUS
LIPIDOGRAMA
Nombre
Sexo
TORO
M
Edad
VACA 1
H
6-7 afiss
VACA 2
H
6-7 años
VACA 3
H
6-7 años
BUEY 1
M
6-7 años
TERNERA
H
5-6 meses
BUEY 2
M
5-6 meses
VACA 4
H
5-6 meses
BUEY 3
M
5-6 meses
BUEY 4
M
5-6 meses
MACHOS
HEMBRAS
TOTAL
L. Totales
C. T.
G . L.
G. G.
G. N.
F. Lip.
Fosfol.
A . G . L.
Alfa
Beta
b
2
a
-i
En el síndrome
ARTROPATIA IMPOTENCIA - FUNCIONAL
de la
ENFERMEDAD REUMATICA
INOOMETRCINA LlAUf
1
antiinf lamatorio
analgésico
antigotoso
anticolagenosis
INDOMETACINA LlADE
+
Cápsulas con
Supositorios con
25 m g de Indometacina
Frasco de 50 capsulas
P V.P. 146,lO
100 mg de Indometacina
Cajas con 10 supositorios
P.v P 88,90
@
LlADE
~RPrnRlOS
fRAMCtUllWS
Joaquin Cmta 26
Madrid 6
I
1.ll'lDOS NEUTROS
ESTERES D E COLESTEROL
F:igiirn
I l.
1-ípidoi plasni;íticoi de Ros domesticus. I.ípidos neutros 20. 40 y 60 h dz
extracto; 20 h de control.
Esteres de colesterol 10 y 20 h de problema, 5 y 10 h de control.
Fosfolípidos 50 y 80 h de problema; 50 h de standard.
14%
A N A LES BE MEL)IC'IIVA Y C'1RUC;IA
pletos, coinprcndiendo cn este conccpto la dctcrininación de:
- Lípidos totalcs
- Colesterol total
- Gliccrol librc
- Glicerol de glicérido
- Glicéridos
- Croniatografía de lípidos nciitros
- Crornatografía de éstcrcs
- Cromntografía de fosfolípidos
Adcniús, en In niayoría de casos,
aunque por razones técnicas, no cn
todos, se ha verificado fósforo lipídico, fosfolípidos y tícidos grasos librcs.
Con mcntalidacl clínica hcmos clasificado los individuos en clínicamente
nornialcs y bioquímicamcnte normales.
En cl primer grupo coniprcndemos
;iqucllns personas, no obcsas, que no
han pndccido cnfcrnicdad alguna un
año antes a la extracción. En el scFundo grupo incluimos los individuos
cuyas cifras dc Iípidos séricos no sobrepasan unos límites aceptados por
la niayoría de autorcs y comprobados
por nosotros.
Pcrsonalmcntc, para establcccr los
valorcs normalcs cn In especie humana, con objeto dc scr comparados con
las cspccics de animalcs estudiados.
Tomamos como patrón un grupo dc
personas que trabajan en nucstro lahoratorio. Para los valores de glicéridos, glicerol librc y ácidos grasos lihrcs
Valor medio
Varones
Hembras
Ambos scxos
aceptamos los valores publicados por
nucstro equipo en divcrsas revistas.
1 )
- Lipoproteínas
0,92
0,9 1
0,9 1 5
Vol. 1.11. N,,'
228
Estudio bioquíniico
En las cspc:ics hunianas es bien
conocido que los Iípidos sufrcn variacioncs dc ncucrdo con la cdnd, por lo
quc nuestros resultados, los hcmos
desglosado en cinco grupos: 1 ( 1 8-29
años), 11 (30-39 años), 111 (40-49
;~ños),IV (50-59 años) y V (60 años
en ndclantc). En la Tabla XIV rcsumimos los valorcs hallados eri adultos
clínica y blioquímicanicntc riornialcs.
En la Tahla XlVa resumimos nucstriis
obscrvacioiics refcrcn:cs al colcstcrol
total.
Carlos PASCLJAI.
y Augusto COROMINAS han estudiado por el método de
E G G ~ T Elos
I N valores de glic6ridos de
sucio en individuos bioquímicaiiicntc
nornialcs, observando en varones unn
media de 88.95 ing %, con una dcsviación standard dc 32,92, coi1 uii valor mínimo de 19, l l y iin iiilíxiino de
158.79 iiig %. En hcnibras los valores
i.csultantcs han sido: mcdia (Ic 79,03
nig %, desviación standrad de 37, 95,
un valor niíninio de 3,13 y inúximo de
154.93. Los valorcs de gliiridos varían de acuerdo con la edad coino se
demuestra en la Trihln XV.
Sc han cstudiado los valorcs dc gliccrol sérico en 100 individiios bioquíniicamcnte normalcs. observando
los siguientes valorcs:
D. S.
12íniitcs 95 %
4
@
a
TABLA XIV
VALORES DE LIPIDOS TOTALES EN ADULTOS "CLINICAMENTE NORMALES
VARONES
Grupo
V . M&.
V . Min.
Casos
1 18-29
HEMBRAS
--
12
V . Medio
Grupo
V . Mín.
Caso%
-
-
~
521
1.047
653
V . Máx.
--
-
1 18-29
36
444
1.350
11 30-39
5
575
91 1
753
11 30-39
13
425
1 .O00
111 40-49
11
571
1.200
931
111 40-49
7
560
955
IV
11
53 1
1.040
787
IV
50-59
8
639
1.529
7
583
883
744
V
60
6
525
1.133
V
50-59
60
VALORES D E LIPIDOS TOTALES EN ADULTOS "BIOQUIMICAMENTE NORMALES"
VARONES
Grupo
--
1
Casos
HEMBRAS
V . Mín
V Máx
--
-
--- -
D . S.
Grupo
--
1
Casos
V Mín
V . Máx
V . Mdx.
18-29
29
444
787
613
11 30-39
7
425
790
65 1
18-29
11
52 1
773
617
73,72
11 30-39
3
575
750
666
87,80
111 40-49
4
575
800
655
122,97
111 40-49
6
560
777
648
IV 50-59
4
639
692
655
3
525
800
685
IV
V
50-59
5
53 1
71 1
614
87,99
60
5
583
755
703
68.90
V
60
Valores medios totales = 651
Valores medios totales = 650
Desviación standard = 88,27
Desviación standard = 100,63
V . Medio
TABLA XIV a
COLESTEROL TOTAL EN ADULTOS CLINICAMENTE NORMALES"
VARONES
Grirpo
('UJOS
HEMBRAS
V . Máx.
V . Mín.
.'L
Medio
-
Grirpn
C<r.~os
1'.
Mír~.
V . Máx.
V . Medio
1
12
175
320
211
1
37
153
341
224
11
4
202
297
260
11
12
188
294
236
111
9
192
336
259
111
7
184
299
237
IV
8
151
320
241
IV
6
189
426
318
V
6
182
322
261
V
6
21 1
345
258
COLESTEROL TOTAL EN ADULTOS "BIOQUIMTCAMENTE NORMALES"
VARONES
Grirpo
C « 70 r
V . Mín.
1'.
HEMBRAS
Máx.
V . Medio
Grirpo
Casoc
V. Mi~i.
-
--
V . Máx.
-
- -
D. S.
-
V . Medio
- - - - - -~
- - -
--
-
1
9
175
220
189
1
28
153
250
26,32
209
11
5
202
202
202
11
8
188
249
20,22
215
111
4
192
249
210
111
5
184
249
29.30
2 19
N
5
151
249
209
iV
4
189
250
43,17
219
V
5
182
235
208
V
4
21 1
249
30.16
2 17
Valores medios totales = 203
Valores medios totales = 2 15
Desviación standard = 27,78
Desviación standard ír = 29.83
Ahril-Jiinio
A N A L E S D E MEDICINA Y C l R U G l A
151
FOSFOLIPIDOS
LIPTDOS NEUTROS
ESTERES DE COLESTEROL
Figura 12.
Lípidos de sueros humanos. Cromatograma de Iípidos neutros de 3 sueros
problemas y un control, 20 h de cada muestra.
Cromatograma de Esteres de coIestero1 d e 2 sueros; de cada uno de ellos 5 y 10 h
d e extracto.
Cromatograma de fosfolípidso d e 3 problemas y iin control, 50 h de cada miiestra.
I
152
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
Vol. 1.11. N,,' 228
1,IPIDOS NEUTROS
k:igiira 13. Lípidos d e sueros hiimanos. Cromatogi-ania de Iípidos neiiti-o.; d e 3 \iic;o.;
problem;i\ y iin control, 2 0 h de c;id;i miiestra.
Cr«matogram¿i tle Estcrei de colesterol de 2 suero\: de catl;i lino d e ellos 5 y 10 h dc
estr;icto.
Croniatograma de forfolípiilo.; con 3 prohlem;i\ y iin control.
TABLA XV
VALORES D E GLICERIDOS (Pascua1 y Co;ominas)
ADULTOS "CLINICAMENTE NORMALES
VARONES
Grupo
1V.o
V . Mín.
V . M&.
HEMBRAS
V . Medio
D . S.
Grupo
V . Mín.
N.O
V . M6x.
D. S.
V . Medio
ADULTOS "BIOQUIMICAMENTE NORMALES"
VARONES
Grupo
- -
1
N
O
V Mín.
V Máx.
HEMBRAS
V . Medio
--
11 49,12 mg% 116,49 mg%
D. S.
Grupo
77,77 mg%
22,95 mg% 1
N
O
-
33
V . Mín
V . Medro
V . Máx.
--
-
5,09 mg% 147,69 mg%
-
67,69 mg%
11
5 40,40
"
128,81
"
70,79
"
37,63
"
11
13 25,61
"
153,82
"
74,77
"
111
9 30,68
"
172,48
"
101,36
"
49,lO
" 111
7 49,44
"
172,OO
"
84,66
"
IV
9 65,41
"
146,51
"
99,71
"
30,OO
"
IV
6 65,31
"
143,62
"
105,92
"
V
7 65,40
"
133,91
"
89,68
"
31,58
"
V
6 88,40
"
147,08
"
117,21
"
1 al V 41 30,68
"
172,48
"
88,95
"
34,92
"
1 al V 65 5,09
"
172,OO
"
79,03
"
-
NOBECUTAN
APOSITO PLASTICO ESTERIL
ANTISEPTICO, EN FORMA DE AEROSOL.
-
LAB. INIBS,A Loreto, 8 BARCELONA-15
1.1 I'll)OS NEUTROS
FSTEKI'S DE COLESTEROI
1:igiii;i 14.
Eatiidio croiii;itogr;itico clc Iípidu\ clc p;icieiiic\ clislipcniico\. Ohs2rscve cii el
croniíitograma de I.ípitlos neiitros, :iiirnento\ cfc triglicérido\.
156
ANALES DE MEDICINA Y C l R U G I A
El estudio dc fosfolípidos en varoncs normalcs ha dcniostrado una media dc 180 ing 96 ; cn hembras cl valor
promedio hri sido dc 178 mg 5%. La
mcdiri total ha sido 179 mg %.
b) Estudio croniatográfico
b,) Lípidos neutros: La scparacicín cronintogrrílica dc Iípidos neutros,
nos dcmucstra 111 presencia dc éstercs
de colcstcrol, triglicéridos, colcstcrol
librc, A.G.L. y fosfolípidos.
b2) Estcrcs tlc colcstcrol: El fraccionamiento de Cstcrcs de colesterol
nos demuestra los éstercs saturados,
monocnoicos, dicnoicos, tricnoicos y
policnoicos.
b,) Fosfolípidos: El cromatogranin
de fosfolípidos se scpara cefalina, Iccitina, csfingomic:linas y lisolecitina. La
fraccicín mayoritaria corresponde a Iccitina.
c) Lipoprotcínas
Las lipoprotcínas quc sc separan en
el suero humano normal son alfa, beta
y en gcncrnl prcbcta. No sc separan
en ayunas, cn individuos normalcs quilomicroncs. Las proporciones halladas
en condiciones normales son:
alfa lipoprotcínas 30 a 40 %
prcbcta lipoprotcínas 0-1 0 96
bcta lipoprotcínas 55-65 %
IV.
COMENTARIO
Los Iípidos son principios inmediatos dc gran importancia biológica que
podríamos rcsumir cn los siguicntcs
puntos: 1) Son importantes componcn-
Vol. LTT. N:
228
tcs de la dicta. 2) Producen notable
proporcicín de cncrgía calorífica, pucsto que 1 gr dc glicéridos desprende
9.4 kcal. 3) Fornian sustancia dc rcscrva ncuniulándosc en cl tcjido ndiposo. 4) El tcjido adiposo tiene misión
tcrinogenftica cn aninialcs homoternios. 5) Los rícidos grnsos cscncialcs
poliinsaturados, que no se sintctiznn
en el organismo son vitales para el dcsarrollo. 6) Los Iípidos son vchículo
de vitaminas liposolublcs. 7) Algunos
ácidos grnsos (prostaglandinas) ticncn
niisicín hormonal. 8) La mcnibrann
cclulrir y dc In niitocondria cst ;I' constituida por lipoprotcínas. 9). Algunos
Iípidos complejos forman las coniplicadas estructuras del sistcnia ncrvioso
y la vaina dc la niiclina.
Los Iípidos se localizan en In sangre y tejidos dc animales. En los tcjidos puede cn gcncral dcmostrnrsc. iin
patrón lipídico propio para cada tcjido. Para ello, la croniatografía en capa
fina cs un método bastante bueno; podemos citar que cn el tcjido nervioso
sc localiza cscncialiiientc colcstcrol librc y fosfo y glucolípidos, en tanto cii
cl tcjido adiposo es niuy rico cn triglicfridos.
En los últimos años se ha rcvalorizado cl tcjido adiposo cn cl que se ha
demostrado la iinportantc niisicín en
In rcgulnción de rícidos grasos y glicéridos circulantes, es decir, los fcnóincnos dc lipogC.ncsis y lipolisis.
El tcjido adiposo sc ha dividido
clínicamcntc cn blanco y pardo. Esto
último dcniostrado cn cl tcjido adiposo intcrcscapulrir sc carnctcrizn: a) por
estar muy vascularizado, b) tcncr gran
*
m
158
ANALES DE MEDICINA Y ClRUGlA
proporción de hen~atíesen los capilares, c) tiene elevada concentración de
citocromos, d) gran riqueza en mitocondrias, lugar principal de formación
de ATP, e) la composición lipídica
del tejido adiposo pardo es distinta a
la del blanco, en el sentido de tener
una mayor concentración de ácidos
grasos no saturados, lo que confiere
a los lípidos una nnayor fluidez.
Al parecer, la misión esencial del
tejido adiposo pardo sería la producción de calor, corno se demuestra en
las especies animales hibernantes, sin
embargo, este tejido también existe en
el hombre, perro, rata.. . (A. GAJDOS).
Los Iípidos orgánicos proceden en
su mayoría de los que se ingresan con
la alimentación, siendo la mayor parte
triglicéridos y seclundariamente colesterol y fosfolípidos.
En el intestino tiene lugar una emulsión de las grasas y posteriormente
una hidrolisis por acción de la lipasa
pancreática e intestinal, convirtiéndose los triglicéridos; en monoglicéridos
y ácidos grasos, que atraviesan las células de la mucosa. Por otra parte, la
lecitinasa A actúa sobre los fosfolípidos y produce lisolecitina. En las células de la mucosa1 intestinal glicerol,
ácidos grasos y lisolecitina, sufren procesos metabólicos de resíntesis produciéndose nuevos triglicéridos y fosfolípidos que se conglomeran en gotas llamadas quilomicrones que por vía linfática van a la sangre, de donde los 1ípidos son extraídos y metabolizados
por las células del tejido adiposo, hepático y cardíaco.
El proceso de degradación de los
Vol. LII. N.O 228
ácidos grasos tiene lugar en la mitocondria verificándose una secuencia
de reacciones llamadas globalmente
beta oxidación. Tiene lugar sucesivamente: 1) Formación de un tioéster
de ácido graso. 2) Deshidrogenación.
3) Betadeshidratación. 4) Deshidrogenación con formación de un compuesto beta cetónico y 5) Tiolisis del enlace beta cetónico resultando un tioéster
de ácido graso con dos carbonos menos que el original. Este tioéster de
ácido graso sufrirá todas las reacciones radicadas eliminándose en cada
proceso una molécula de acetil COA.
La regulación del metabolismo lipídico corre a cargo de mecanismos
nerviosos y hormonales. Se han descrito como hormonas que actúan en
la lipogénesis insulina, oxitocina, prolactina y prostaglandinas. Se comportan como agentes lipolíticos o adipocinéticos catecolaminas, secretina,
ACTH, H melanofora, H somatotropa,
g!ucagon, hormona luteínica y serotoninas. Finalmente, como hormonas
permisivas podemos citar las tiroideas
y los glucocorticoides.
La regulación hormonal y nerviosa
se establece en el tejido adiposo por
intermedio de un sistema efector constituido por la adenilciclasas localizadas
en la cara interna de la membrana célular adiposa. Estas adenilciclasas se
consideran el "primer mensajero" del
sistema efector y actúan en la síntesis
del 3-5 AMP cíclico considerado como
"segundo mensajero". El AMP cíclico
actúa a su vez estimulando la lipasa
tisular sensible a las hormonas que
hidrolizan los triglicéridos, ejerciendo
4
+
$
a
Ahi-il-Jiiiiio
ANALES D E M EDICINA Y CIRIJGIA
por tanto iin cfccto lipolítico. La concentración de AMP cíclico está bajo
In dcpcndcncia de dos enzimas, la adenilciclasa, quc cntaliza la formación
de AMP cíclico a partir dc ATP, y la
fosfodicsterasa, que lo degrada en
5 AMP y 3 AMP. Cada efecto que
estimula la primera enzinia o inhiba
la segunda aumenta la conccntración
dc AMP cíclico. La conccntración de
Isic disminuye por las sustancias que
inhihcii las adcnilciclasas o estimulan
la fosfodicstcrasa.
El resultado de los conlplicados procesos de lipog&nc\is o lipolisis que ticiic lugar cn el tcjiclo adiposo es la prcscii:ia de una scric de coniponcntcs
lipídicos en la sangre de los animales
supcriorcs.
El primcr interrogante que se nos
plantea es si existen diferencias cualitntivas o cuantitativas entre los difeixntes animales.
Pcrsoiialmcntc, además de los sucros de los animales investigados, hciiios estudiado la composición de otros
seres mis infcriorcs con objeto dc estnhlcccr diferencias cualitativas.
El estudio mcdiantc cromatografía
en capa fina de extracto lipídico de
.Iiilus tcrrcstris (fip. 15) nos demuestra
la presencia dc cscualcno, ésteres de
colestcrol, triglicéridos, ácidos grasos
libres, colcsterol libre y fracción polar.
Ilcstaca en estc croinatograma una
notable zona de triglicéridos, colestcrol libre superior a colcsterol esterificado, una m:incha marcada de A.G.L.
Es tainbicn iinportaiitc destacar que el
csciinlcno cstli en mayor proporción
cluc el cdesterol esterificado. En el
159
cromatogrania de éstercs de colesterol,
sc observan istercs saturados, tilonocnoicos, dienoicos y trienoicos, todos
ellos cn poca conccntración. Finalmente, en el cromatogrania de fosfo
y glucolípidos señalamos la presencia
de cerebrósidos, cofalina, sulfátidos,
lecitina, fracción no identificada, esfingomiclina y dos fracciones más probablemente lisoleritina e inositolfosfátidos o gangliósidos.
En el extracto lipídico de hormiga
común se demuestra después de la
CCF, escualcno, ésteres de colesterol,
triglicéridos, A.G.L. y fosfolípidos.
El estudio de extractos lipídicos de
calamar, merluza, rape y sardina, nos
dcmucstra una notable concentración
dc colesterol esterificado y libre en el
primcro, en tanto que en la sardina
predominan los triglicéridos. En meiluza y rape observamos colesterol libre
y A.G.L.
Ascendiendo por la escala zoológica
comentaremos en primer lugar los Iípidos de gallus Sp. En los machos los
Iípidos son cualitativamente idénticos
a los dc la especie humana y cuantitativamente, a excepción del glicerol libre, inferiores. En las hembras hemos
observado una gran concentración de
Iípidos totales, glicéridos y fosfolípidos
muy superiores a las observadas en los
machos, siendo el colcsterol total y
los A.G.L,. aproximadamente igual. La
interpretación dc esta diferencia sexual
es difícil con los datos de que disponcmos, en primcr lugar podríamos pcnsar diferencias en la alimentación, con
la ingestión, por ejemplo, dc pienso
con grasa, quizás a título de hipótesis,
160
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGlA
Vol. 1-11. N." 228
1-IPIDOS NEUTROS
FOSFOLIPIDOS
ESTERES DE COLESTEROL
Figura 15. Cromatograma de Julus Terrestris. Lípidos neutros 20 y 40 h de extracto y
20 h de control.
Fosfolípidos 10, 20 y 50 h de extracto y 50 1 de control.
Esteres de colesterol 5, 10 y 15 h de extracto problema y 5 y 10 h del control.
1
Abril-Junio
$
b
@
6
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
podríamos suponer que la hiperlipemia
de la hembra está relacionada con la
producción del huevo. El estudio mediantc CCF de la yema demuestra una
importante concentración de triglicéridos y fosfolípidos. La confirmación de
csta hipótesis la tendríamos si se observan semejantes diferencias sexuales
cn otras aves.
En Cavia Sp las concentraciones lipídicas observadas son algo menos de
una tercera parte de las halladas en el
suero humano, a cxcepción del glicerol
libre que en algunos casos ha sido
superior.
En los Oryctolagus Cunículus estudiados demostramos unos valores de
lípidos totales medios de 345 mg %,
inferiores por tanto a los hallados en
cl hombre. El colesterol total medio
ha sido de 58. El glicerol libre es superior al del suero humano, en cambio
los glicéridos están a la mitad. Los
fosfolípidos son ligeramente inferiores
y los A.G.L. superiores. Se ha hallado
una mínima diferenciación sexual en
el sentido de unos valores lipídicos
globales superiores en las hembras.
El estudio lipídico sérico en Sus Scrofa
nos demuestra una media de lípidos
totales de 464 mg %, colesterol 130
mg %, glicéridos 24,39 mg %, fosfolípidos 3 25 mg %, glicerol libre 196
mg % y A. G. L. 0,26 mVal/litro.
Destacan unos glicéridos muy bajos y
un glicerol libre más alto que en el
suero humano.
En el Canis Sp. solamente hemos
determinado la concentración de lípidos totales observando aproximadamente unos valores a la mitad de los
161
del suero humano. Con CCF hemos
estudiado semicuantitativamente todos
los parámetros lipídicos habituales, demostrándose cualitativamente idénticas
a las de suero humano.
En los Bos domesticus hemos hallado las siguientes proporciones lipídicas medias: totales 41 1 mg %, colesterol total 137 mg %, glicerol libre
0,54 mg %, glicéridos 15,75 mg %,
fosfolípidos 99,2 mg %, A. G. L. 0,60
mVal. Parece observarse una mínima
diferencia sexual con hiperlipemia relativa a favor de las hembras.
En los machos Equus Caballus hallamos una concentración lipídica total
de 412 mg %, colesterol 85, G. L.
0,21, glicéridos 59,39, fosfolípidos
126 mg % y A.G.L. 0,24 mVal. En
la hembra estudiada las concentraciones lipídicas son superiores.
Los lípidos de Capra Sp. macho son
ligeramente inferiores a los de la especie humana, con unos totales medios
de 640 img %, un colesterol de 216,
en cambio los glicéridos son muy inferiores (17,53). Los fosfolípidos han
resultado 151 mg % . Los A.G.L. son
superiores. Al parecer existe una mayor proporción de Iípidos en machos
que en las hembras, si bien tenemos
poca información para aceptarlo como
conclusión definitiva.
En Ovis Aries solamente hemos tenido oportunidad de estudiar machos
observando unos lípidos 1/3 de los
observados en el hombre. Lípidos totales 241 mg %, colesterol 65, fosfolípidos 87 mg %. Los glicéridos son
muy inferiores con una media de 6,32
mg %, en cambio el glicerol libre y
162
ANALES D E MEDICINA Y CIRUGIA
los A.G.L. son superiores a los hallados en la especie humana.
En resumen, podemos afirmar que
no hay diferencias cualitativas en los
lípidos plasmáticos de los animales y
el hombre. En cambio, sí hay diferencias cuantitativas en el sentido de una
menor concentración lipídica en todos
los parámetros. E n algunas especies
hay mayor proporción de glicerol libre
y ácidos grasos libres.
RESUMEN Y CONCLUSIONES
1) En esta investigación pretendeinos hacer un estudio de Lipobioquímica comparada. Comparamos la concentración lipídica de suero o plasma
de diversas especies animales en relación a la especie humana. Entre los
animales estudiados tenemos, caballos, cabras, cerdos, cobayos, conejos,
corderos, gallináceas, perros, toros y
vacas. En cada una de las especies se
ha estudiado un mínimo de 10 individuos, procurando escoger machos y
hembras, con objeto de establecer si
existen diferencias sexuales.
Los parámetros lipídicos estudiados
han sido: Lípidos totales, colesterol
total, glicerol libre, glicerol de glicéridos, fosfolípidos, glicéridos, fósforo
lipídico, ácidos grasos libres, estudiados por métodos químicos. Por métodos electroforéticos sobre acetato de
celulosa se ha estudiado el lipidograma. Y, finalmente, mediante métodos
cromatográficos en capa fina hemos estudiado los distintos parámetros lipidicos séricos.
Vol. LII. N.O 228
Se han verificado tres tipos de cromatogramas: de lípidos neutros, de
ésteres de colesterol y de fosfolípidos;
en total hemos realizado 431 análisis
químicos, 345 placas cromatográficas
y 76 lipidogramas.
2) Se consideran brevemente los
aspectos más importantes de la bioquímica de los lípidos. Se expone la
modificación de BLOORmodificada en
lípidos simples (glicéridos, estéridos
y ácidos biliares), lípidos complejos
(glicerofosfolípidos y esfingolípidos).
Los glicerofosfolípidos contienen glicerina, ácidos grasos y ácido fosfórico
y además colina (lecitina), etanolamina
(cefalina), serina (fosfatidilserina) e
inositol (inositolfosfatido). Los esfingolípidos tienen un aminoalcohol de cadena no saturada con 18 carbonos llamados esfingosina, ésta se une mediante enlace amídico al ácido graso formando la ceramida. Si el hidroxilo terminal de la esfingosina está esterificado
por la fosforilcolina, tenemos la esfingomielina. Los glucoesfingolípidos son
ceramidas con moléculas glucídicas,
galactosa (cerebrósidos), galactosa y
sulfúrico (sulfátidos) hexosas, hexosaminas y NANA (gangliósidos).
Entre los derivados de los lípidos
describimos las características más importantes de los alcoholes, ácidos grasos y prostaglandinas.
3) Los lípidos plasmáticos no son
suficientemente polares para circular
en forma libre, por lo que requieren
la unión con proteínas, resultando macromoléculas llamadas lipoproteínas y
que de acuerdo con su movilidad electroforética se denominan en el hombre
c
t
I
5
Abril-Junio
b.
b
a
6
ANALES DE M
alfa, beta, prebeta y quilomicrones. La
lipoproteína alfa tiene una movilidad
clectroforética como las alfa, globulinas. Tiene un peso molecular entre
165.000 y 400.000. Está compuesta
por un 30 % de fosfolípidos, 18 % de
colcsterol y 45 a 55 % de proteínas.
La betalipoproteína tiene un peso
molccular dc 1,3 a 3,2 por lo6. Contiene 20 a 25 % proteína, 8 % colesterol libre, 35 % cdesterol esterificado, 22 % de fosfolípidos y 10 % de
triglicéridos (FREDRICKSON
y cols.). La
lipoproteína prebeta se sintetiza en el
hígado, vchiculiza los triglicéridos de
síntesis cndógena. Los triglicéridos de
procedencia intestinal van ligados a
los quiloinicrones. Finalmente, los ácidos grasos libres van ligados a la albúmina.
En resumen, existen tres formas de
rtansporte de los Iípidos plasmáticos:
a) Lípidos de procedencia exógena que
circulan en forma de emulsión con los
quilomicrones. b) Los de procedencia
endógena forman un complejo macromolecular con alguna lipoproteína que
según su movilidad electroforética dividimos en alfa, beta y prebetalipoproteína y c) Los áridos grasos libres
de procedencia endógena van ligados
a la albúmina.
4) Los estudios de los lípidos plasmáticos de los animales se han verificado mediante técnicas químicas, electroforéticas y cromatográficas.
Entre los métodos químicos diremos
quc la determinación de los lípidos totales se ha efectuado con la ténica de
ZOLLNER
y KIRSCH.La determinación
de colesterol total se ha verificado con
el método de RAPPAPORT.
La determinación de glicerol libre, glicerol de
glicérido y glicéridos se ha determinado por el método enzimático de EGGSTEIN.La determinación de foslolípidos
se ha verificado con el método de ZILVERSMIT y DAVIS.Finalmente, los ácidos grasos libres se han verificado por
la técnica de DUNCOMBE.
Para la separación d e proteínas se
ha empleado como soporte el acetato
de celulosa, empleando como colorante el Rojo Ciba 7B. Mediante esta técnica se separan perfectamente las alfalipoproteínas, beta, prebeta y quilomicrones.
Métodos cromatográficos : Hemos
empleado la cromatografía sobre Silicagel G (en capa fina), en el cromatograma de Iípidos neutros se han empleado como solventes el éter de petróleo, éter etílico y ácido acético en
proporción 90/ 10/ 1, consiguiendo
una perfecta separación de ésteres de
colesterol, triglicéridos, ácidos grasos
libres, colesterol libre y fosfolípidos.
La separación de ésteres de colesterol
se ha conseguido con un sistema solvente consistente en éter de petróleocloroformo 90/10. Se han separado
ésteres saturados, monoenoicos, dienoicos, trienoicos y polienoicos. En el cromatograma de fosfolípidos el sistema
solvente ha consistido en cloroformo
metanol-acético-agua, con el cual se
han separado perfectamente cefalina,
lecitina, esfingomielinas y lisdicitinas.
5) Se han estudiado 10 Equus Caballus, l hembra y 9 machos, 7 de los
cuales eran mulo3 (híbrido F1de asno,
macho y yegua). Si bien la estadística
164
ANALES DE MEDICINA Y ClRUGlA
es poco numerosa para deducir conclusiones definitivas, se observa una
diferencia sexual con una mayor proporción de Iípidos séricos en la hembra que en el macho. En los machos
la concentración de lípidos totales es
de 412 mg, colesterol 85, glicerol libre 0,21, glicéridos 59,39, fosfolípidos
126 y ácidos grasos libres 0,24 mEq/l.
En el estudio cromatográfico además
de confirmar los datos bioquímicos,
destaca una notable proporción de ésteres dienoicos sobre los monoenoicos
y saturados.
El estudio de las lipoproteínas demuestra la aparición de dos fracciones
de débil intensidad y con movilidad
alfa y beta. La proporción de lipoproteína alfa oscila entre 8,6 y 25 %.
La de lipoproteína beta entre 75 y
91,4 %.
6) Se han investigado los lípidos
y lipoproteínas de 10 Capra Sp., 9 machos y l hembra, Se han observado
diferencias sexuales en el sentido de
una mayor concentración lipídica en
machos que en hembras, sin embargo,
nuestras conclusiones no son definitivas por tener la hembra edad inferior
a la mayoría de machos y al haber
podido solamente estudiar una. Las
concentraciones promedio de lípidos
halladas en machos han sido: Lípidos
totales 641 mg %, colesterol 216
mg %, glicerol libre 1,78 mg %, glicéridos 17,53 mg %, fosfolípidos 151
mg % y A.G.L. 1,29 mEq/l. En relación con la especie humana contrasta
visiblemente la inferior proporción de
glicéridos, la mayor concentración de
A.G.L.
Vol. LII. N.O 228
El estudio cromatográñco demuestra, en comparación con un extracto
de suero humano, la ínfima zona de
triglicéridos y la significativa mancha
de A.G.L. Por otra parte, la proporción de ésteres saturados, monoenoicos, dineoicos, trienoicos es semejante.
De entre los fosfolípidos destaca como
fracción mayoritaria lecitina, seguida
de esfingomielinas, cefalina y lisoleticina.
La separación de lipoproteínas demuestra la presencia de lipoalbúmina,
alf alipoproteína. La alf alipoproteína es
la que está en mayor proporción.
7) El estudio lipídico en 10 individuos (1 hembra y 9 machos) de Sus
Scrofa demuestra una concentración de
lípidos plasmáticos inferiores a los de
la especie humana. Las concentraciones medias de lípidos totales han resultado 464 mg %, de colesterol total
130 mg %, glicerol libre 1,96 mg %,
glicéridos 24,39 mg %, fosfolípido
125,2 y ácidos grasos libres 0,26 mVal.
La cromatografía en capa fina demuestra la presencia de fracciones lipídicas cualitativamente idénticas a las
de la especie humana, destacando una
menor proporción de la fracción glicerídica.
En el lipidograma aparecen, en los
machos, lipoalbúmina alfa beta y lipoproteína. La fracción mayoritaria corresponde a la lipoproteína beta. En
la hembra se ha observado además
prebetalipoproteína.
8) Se han estudiado los lípidos de
10 Cavias Sp., hallándose los siguientes valores medios en la especie: Lí-
Abril-Junio
\+
\
c
S
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
pidos totales 261 mg %, colesterol total 50 mg %, glicerol libre 0,89 mg %,
glicéridos 90,97, fosforo lipídico, 2,9
mg %, fosfolípidos 76, A.G.L. 0,85
mVal. Los valores obtenidos son, en
general, inferiores a los observados en
la especie humana.
9) En 14 Conejos (Oryctolagus
cunículus), 9 machos y 5 hembras, la
concentración de parámetros lipídicos
hallada ha sido la siguiente: lípidos totales 345 mg %, cdesterol total 58
mg %, glicerol libre, 2,49 mg %, glicéridos 59,37, fosfolípidos 99,4 mg %
y ácidos grasos libres 0,84 mVal.
El estudio cromatográfico nos ha
demostrado la presencia de ésteres de
colesterol, triglicéridos, A.G.L., colesterol libre y fosfolípidos. Entre los ésteres de colesterol predominan los dienoicos, sobre los saturados y monoenoicos. La fracción mayoritaria de
fosfolípidos es la lecitina, seguida de
cefalina, esfingomielinas y lisolecitina.
La separación electroforética de lipoproteínas nos permite visualizar dos
fracciones, alfa y beta. La primera en
una proporción entre 23,l y 49,O %
y la lipoprotenía beta entre 50,3 y
76,9 %.
10) Se han estudiado los lípidos
séricos en 10 machos de Ovis Aries.
El promedio obtenido ha sido, lípidos
totales 241 mg %, colesterol total 65
mg %, glicerol libre 1,72 mg % glicéridos 6,32, fosfolípidos 87 mg %,
ácidos grasos libres 1,59 mVal. Destaca una disminución de lípidos totales, especialmente de glicéridos y colesterol. Se observa un aumento en
165
relación con la especie humana de
A.G.L.
En el lipidograma la fracción mayoritaria corresponde a la alfa lipoproteína.
11) Hemos estudiado 10 individuos de Gallus Sp., observando importantes diferencias sexuales. En los machos las concentraciones promedio son
las siguientes: Lípidos totales 465
mg %, colesterol total 198 mg %, glicerol libre 3,25, glicéridos 19,60
mg %, fosfolípidos 71 mg % y A.G.L.
0,73 mVal.
En las hembras los valores son: 1ípidos totales 1.140 mg %, colesterol
95, glicerol libre 1,84 mg %, glicéridos 495,71, fosfolípidos 470 y A.G.L.
0,60 mVal. Por tanto, las diferencias
sexuales más significativas son a nivel
de glicéridos y de fosfolípidos.
El estudio cromatográfico confirma
las diferencias sexuales demostradas
por métodos químicos.
La separación electroforética de lipoproteínas demuestra la aparición de
2 fracciones alfa y beta, que sorprendentemente no presentan diferencias
sexuales.
12) El estudio de 9 machos y 11
hembras de Canis Sp., nos demuestra
una concentración media de lípidos
totales en los primeros de 418 mg %
y en las segundas de 486 mg %.
En el cromatograma de lípidos neutros demostramos ésteres de colesterol,
triglicéridos, colesterol libre y fosfolípidos. Los ésteres de colesterol demostrados han sido los saturados, monoenoicos, dienoicos y trienoicos con
indicios de tetraenoicos. El cromato-
166
ANALES D E MEDICINA Y CIRUGIA
Vol. LII. N.O 228
mg %, fosfolípidos 180 mg %, A.G.L.
0,39 mVal/l.
En hembras la concentración de 1ípidos totales ha resultado 650 mg %,
13) El promedio de parámetros colesterol total 215, glicerol libre 0,91
lipídicos obetnidos en 10 individuos mg % , con una desviación standard
Bos domesticus, son los siguientes: de 0,36 mg %, glicéridos 79,03 mg %,
lípidos totales 41 1 mg % , colesterol con una desviación standard de 37,9
137 mg %, glicerol libre 0,54, glicé- mg %. Para los fosfolípidos el valor
ridos 15,76 mg %, fosfolípidos 99,2 promedio ha sido 178 mg %. Finalmg %, ácidos grasos libres 0,60 mente, para los A.G.L. 0,39 mVal/l.
15) En diversas ocasiones hemos
mVal/ l .
publicado el interés de la cromatogra14) El estudio de parámetros lifía en capa fina para la separación de
pídicos séricos es de un interés extralípidos humorales y tisulares del cuerordinario en el hombre, puesto que las
po humano y con finalidad clínica o
alteraciones del metabolismo lipídico
de investigación hemos desarrollado en
son causa de numerosas enfermedades.
nuestro laboratorio más de 7.000 plaPersonalmente hemos verificado des- cas cromatográficas. Mediante el desade el año 1967 más de 1.300 estudios rrollo de Iípidos neutros conseguimos
lidípidos completos con finalidad diag- la separa~iónde ésteres de colesterol,
nóstica. Sin embargo, para el presente triglicéridos, A.G.L., colesterol libre y
estudio de lipobioquímica comparado, fosfolípidos. Por otra parte, con clorohemos aceptado más datos de 15pidos formo-metano1 podemos aislar ésteres
totales, colesterol libre, glicerol libre saturados, monoenoicos, dienoicos y
y glicéridos de individuos química- trienoicos. Por último, en el desarrollo
mente normales publicados en otro lu- de fosfolípidos separamos cefalina, legar. Los otros parámetros lipídicos los citina, esfingomielinas y lisolecitina.
hemos estudiado en personal del laboPor tanto, con estos desarrollos, poratorio expresamente para este trabajo. demos identificar hasta 14 parámetros
Los valores hallados en varones han lipídicos séricos. Por su resolución,
sido: lípidos totales 651 mg %, coles- facilidad de ejecución y reproductibiliterol total 203 mg %, glicerol libre dad la CCF tiene un indiscutible inte0,92 mg %, con una desviación stan- rés para el estudio de lípidos séricos
dard de 0,37, glicéridos 88,9 mg % , y tisulares en condiciones normales y
con una desviación standard de 32,9 patológicas.
grama de fosfolípidos nos demuestra
cefalina, lecitina, dos esfingomielinas y
lisolecitina. La lecitina es la fracción
mayoritaria.
El trabajo con$ta de 177 citas bibliográficas.