CARACTERIZACIÓN DEL TRANSCRITO DE LA PROTEÍNA

CARACTERIZACIÓN DEL TRANSCRITO DE LA PROTEÍNA MITOCONDRIAL ATP SINTASA
SUBUNIDAD S (FACTOR B) EN EL CAMARÓN BLANCO LITOPENAEUS VANNAMEI
León Ruiz Jesús Alberto. Departamento de Investigaciones Científicas y Tecnológicas. Universidad de
Sonora. [email protected]. Asesor: Dra. Adriana Muhlia Almazán. Centro de Investigación en
Alimentación y Desarrollo A.C. [email protected]
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
El complejo proteico F0F1-ATP sin tasa es sin duda el complejo proteínico más estudiado a nivel molecular
dentro de la mitocondria. Sin embargo, gran parte de la función mitocondrial del camarón blanco del Pacífico
(Litopenaeus vannamei) permanece desconocida hasta la fecha.
El cultivo de camarón es sin duda una de las actividades económicas de mayor trascendencia a nivel
mundial, siendo L. vannamei una de las especies de cultivo más importantes, especialmente para la región
del Norte de México.
Anteriores estudios reportan los principales componentes de la FoF1-ATPsintasa de L. vannamei, entre
ellos, las subunidades altamente conservadas (α, β, γ, ε), las cuales se encuentran expresadas a través de
distintos niveles taxonómicos. Por otro lado, se sabe muy poco acerca de subunidades proteicas
mitocondriales de organismos invertebrados, específicamente invertebrados marinos. Una de estas
proteínas es la ATP sintasa subunidad s, conocida también como Factor B (Fb), la cual fue originalemente
descrita en 1867 como una proteína capaz de restaurar la síntesis de ATP de partículas submitocondriales
(SMP), de la cual, no se tiene conocimiento alguno en el camarón blanco.
METODOLOGÍA
En este trabajo, se reporta la confirmación de la secuencia de 2 marcadores de secuencia expresada (EST,
por sus siglas en inglés) con números de acceso del GenBank FE188973.1 y FE188972.1 a través del
aislamiento de ARN total de hepatopáncreas de L. vannamei del cual fue comprobado su integridad y
ausencia de ADN genómico contaminante, para, posteriormente, mediante una reacción en cadena de la
polimerasa con transcriptasa reversa (RT-PCR), ser utilizado como templado para la síntesis de ADN
complementario (cDNA). El producto de amplificación de PCR utilizando oligonucleótidos específicos para
la secuencia putativa construida a partir de 2 ESTs fue, posteriormente, enviado a secuenciar a la
Universidad de Arizona (UAGC).
CONCLUSIONES
Por medio de técnicas de biología molecular avanzadas se pudo obtener un producto de PCR el cual fue
consistente con el producto esperado según la secuencia putativa construida. La secuencia de este
producto será posteriormente analizada con algoritmos específicos para ello, como ClustalΩ y BlastN para
verificar la homología y regiones conservadas de la secuencia obtenida con secuencias ya caracterizadas.