Administración Parenteral de Homocisteína y Efecto del Ácido

ADMINISTRACIÓN PARENTERAL DE HOMOCISTEÍNA Y EFECTO DEL
ÁCIDO FÓLICO EN LA FORMACIÓN DE ATEROMAS EN CONEJOS
BRAVO, Mayra; ARMAS, Fernando; CABRERA, María E.; GONZÁLEZ, Julio C.;
PELAYO, Tibisay; GONZÁLEZ, Dora C.; REIGOSA, Aldo
RESUMEN
La homocisteína ha sido asociada con enfermedad vascular prematura, pudiendo actuar
sinérgicamente con otros factores de riesgo como los niveles elevados de colesterol y
triglicéridos, así como deficiencia de vitaminas. El presente trabajo se planteó establecer
el efecto de la administración de homocisteína por vía parenteral y del ácido fólico por
vía oral en la formación de ateromas en conejos. Para ello se estudiaron 15 conejos de
raza Nueva Zelanda provenientes del Bioterio de la Universidad de Carabobo divididos
en tres grupos, los cuales fueron alimentados con el siguiente esquema: Grupo 1:
conejarina Protinal tipo A; Grupo 2: homocisteína por vía parenteral subcutánea durante
40 días; Grupo 3: homocisteína de la misma forma que el grupo 2 y ácido fólico por vía
oral. Se realizaron determinaciones de los niveles séricos de colesterol, HDL-C, LDL-C,
triglicéridos, ácido fólico y homocisteína antes y después del período experimental. Los
conejos fueron sacrificados y se les extrajo el corazón y la aorta, con la finalidad de
realizar cortes histológicos de los mismos. Los resultados obtenidos revelan que los
niveles de homocisteína fueron más altos en el grupo 2 que los obtenidos en el grupo 1,
siendo esta diferencia significativa entre los dos grupos P(0.000), observándose en el
grupo 2 los ateromas más graves de grado IV y V; en el grupo 3 se aprecia que los
niveles de homocisteína no aumentan; los niveles de ácido fólico en este grupo fueron
más altos comparados con los otros; en este grupo se observaron ateromas menos graves
de grado I y III. Se evidenció una correlación baja positiva entre la variable
homocisteína y el ácido fólico del grupo 3 (r=0.292). y una correlación alta entre los
lípidos en el grupo 2 y 3. En conclusión, el mayor daño a nivel del endotelio vascular se
observó en el grupo 2 (homocisteína), en el grupo 3 (homocisteína/ácido fólico) los
resultados sugieren que la suplementación con ácido fólico evita la elevación de la
homocisteína plasmática y por lo tanto disminuye la posibilidad de daño a nivel
vascular.
PALABRAS CLAVES: homocisteína, ácido fólico, aterosclerosis.
ABSTRACT
EFFECTS OF ADMINISTERING PARENTERAL HOMOCYSTEINE AND
ORAL FOLIC ACID ON THE DEVELOPMENT OF ATHEROMAS IN
RABBITS
Homocysteine has been associated with early vascular disease, and could act
synergistically with other risk factors such as high levels of cholesterol and
triglycerides, as well as vitamin deficiencies. This work was aimed at determining the
effect of administering parenteral homocysteine and oral folic acid on the development
of atheromas in rabbits. Fifteen New Zealand rabbits from the University of Carabobo’s
biotery were studied, being divided into three groups with the following food regimes:
Group 1: “conejarina” Protinal type A. Group 2: Parenteral subcutaneous homocysteine
during 40 days. Group 3: Homocysteine in the same way as Group 2, plus oral folic
acid. Serum levels of cholesterol HDL-C, LDL-C, triglycerides, folic acid, and
homocysteine were determined before and after the experimental period. Once killed,
the rabbits had the heart and aorta removed with the purpose of cutting histologic
sections. Results showed a significant difference P(0.000) in homocysteine levels, being
higher in Group 2 than in Group 1, and more serious atheromas, grades IV and V, were
observed in Group 2. Homocysteine levels did not increase in Group 3, which had
higher levels of folic acid, as compared with the others, and less serious atheromas,
grades I and III. A positive low correlation between the variable homocysteine and folic
acid in Group 3 (r=0.292), and a high correlation between lipids in Groups 2 and 2 were
observed. It is concluded that the worst damage to the vascular endothelium was
observed in Group 2 (homocysteine). In Group 3 (homocysteine/ folic acid), results
suggest that folic acid supplementation prevents plasma homocysteine increase and
therefore decreases the risk for vascular damage.
KEY WORDS: homocysteine, folic acid, atherosclerosis.
I.
INTRODUCCIÓN
Las enfermedades cardiovasculares son la principal causa de morbilidad y mortalidad
en la mayoría de los países en vías de desarrollo; es por esta razón que últimamente se
han realizado importantes avances en su diagnóstico y tratamiento (Clarke y col., 2001).
Las enfermedades cardiovasculares más comunes están representadas por el infarto al
miocardio y la ateroesclerosis. Esta última se define como una enfermedad de las
arterias de mediano y gran calibre caracterizada por lesiones circunscritas a la pared
arterial denominadas placas de ateroma, las cuales están formadas por lípidos, detritos
celulares y calcio, recubiertos por una capa fibrosa (colágeno, elastina, fibras
musculares lisas, macrófagos, linfocitos) y tapizados por células endoteliales (Guo y
Dudman, 2001).
La problemática social real de la aterosclerosis se observa a partir del hecho de que
esta enfermedad tiene una prevalencia significativa del 13% entre los pacientes adultos
con enfermedad cardiovascular y del 50-60% entre los fallecidos, a nivel mundial; en
Venezuela la aterosclerosis representa la primera causa de muerte en el adulto y su
primera manifestación en más del 50% de los casos es la muerte súbita o infarto del
miocardio fatal o no (Anuario de Epidemiología M.S.A.S., 1994).
Así, la prevención de las enfermedades cardiovasculares se ha venido tomando con
una mayor preocupación, y ha permitido conocer más a fondo los efectos que traen
ciertas condiciones como el tabaquismo, el estrés, la obesidad, la hipertensión y los
elevados niveles de colesterol plasmático sobre el organismo (Hirsh, 1994).
De las condiciones de riesgo ya mencionadas en cuanto a las enfermedades
cardiovasculares, las más comunes en la aterosclerosis son la obesidad y los altos
niveles de colesterol y diversos lípidos en el organismo. Sin embargo, recientemente se
ha tratado de relacionar alteraciones en el metabolismo de la metionina con la aparición
de defectos aterogénicos, por la acumulación de homocisteína, cuando ésta se encuentra
en niveles elevados en el plasma (Mathias y col.; 1995).
En los tejidos y células normales, la metionina es convertida en tiolactona de
homocisteína,
ácido
homocisteico,
fosfosulfato
de
fosfoadenosina
y
glicosaminoglucanos sulfatados del tejido conectivo. La base libre de tiolactona de
homocisteína causa necrosis tisular y efectos proliferativos en los tejidos epiteliales y
estroma de los animales normales, así como agregación y liberación de prostaglandinas
por las plaquetas normales (Mc Cully y col., 1990; Still y col., 1998).
Diversos experimentos indican que los efectos protrombóticos de la homocisteína se
observan en el daño endotelial o disfunción de éste. Otros estudios realizados en
humanos y animales han demostrado que la homocisteína daña las células endoteliales,
lo cual predispone a la adhesión plaquetaria, activación y subsecuente formación de
trombos (Heijer y col., 1996; Clarke, 1998; Selhub y col., 1999).
El efecto citotóxico primario de la homocisteína puede ser manifestado a través del
mecanismo dañino oxidativo. La homocisteína produce autoxidación en el plasma a
través de reacciones derivadas del oxígeno, como la formación de peróxido y
superóxido de hidrógeno, ambas moléculas actúan lesionando el endotelio, además el
superóxido inicia la peroxidación de lípidos en la superficie de la célula endotelial,
contribuyendo a la oxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL) (Assmann y col.;
1998).
La relación entre la homocisteína y el daño endotelial también ocurre por otros
mecanismos. La homocisteína promueve la coagulación producto del incremento de la
actividad del factor XI y factor V y de la disminución de la actividad de la proteína C.
La homocisteína también puede mantener el estado de la protrombina por inhibición del
heparansulfato y la expresión de la trombomodulina, induciendo el factor tisular y
reduciendo el enlace del activador plasminógeno tisular del receptor de la célula
endotelial. Con cada uno de estos cambios contribuye a incrementar la formación de
trombina, y en consecuencia la formación de trombosis (Mc Cully y col.; 1990). La
hiperhomocisteinemia puede resultar de anormalidades en la función de alguna de las
enzimas involucradas en el metabolismo de la homocisteína, o de la deficiencia de
cofactores o cosustratos de esas enzimas (folato, vitamina B6, o vitamina B12).
Debido a que algunas vitaminas funcionan como cofactores o cosustratos en las
reacciones enzimáticas involucradas en el metabolismo de la homocisteína, diversas
hiperhomocisteinemias pueden ser detectadas en pacientes con niveles bajos de folato o
vitamina B12, y aun en individuos cuyos niveles plasmáticos de estas vitaminas se
encuentran en el nivel inferior del rango normal. Sin embargo, la asociación de la
deficiencia de la vitamina B6 con la hiperhomocisteínemia es menos clara.
Aun cuando en muchos países se han llevado a cabo investigaciones relacionadas, en
Venezuela existe una carencia de información y de estudios acerca de los efectos de la
homocisteína, siendo entonces necesario el diseño y desarrollo de investigaciones
experimentales específicas que permitan definir el papel de la hiperhomocisteinemia
como factor de riesgo de la aterosclerosis dentro del entorno demográfico de la
población venezolana. Por todo lo expuesto, esta investigación plantea conocer el efecto
que tiene la hiperhomocisteinemia en la formación de placas ateroscleróticas en paredes
aórticas de conejos, como medios vivos ideales de experimentación, y estudiar a su vez
la acción que ejerce el ácido fólico en esta condición.
II.
METODOLOGÍA
Población y Muestra
Se utilizaron conejos machos y hembras de raza de Nueva Zelanda de dos a tres
meses con un peso aproximado entre 1500 y 2000 gramos, provenientes del Bioterio de
la Universidad de Carabobo.
Diseño Experimental
Estuvo representado por 15 conejos de raza de Nueva Zelanda, los cuales se
dividieron en 3 grupos de cinco. Después de una semana de ambientación se
organizaron de la siguiente manera:
• Grupo Control (1): Fue alimentado diariamente con 100 g de conejarina granulada
de marca Protinal tipo A, más agua a libre demanda.
• Grupo de homocisteína (2): Fue alimentado con 100 g de conejarina granulada de
marca Protinal tipo A, además recibió homocisteína acuosa de tiolactona 0.2 ml (2
mg/ml) SIGMA, por vía parenteral subcutánea interdiaria.
• El Grupo de ácido fólico (3): Fue alimentado igualmente con la conejarina
granulada de marca Protinal tipo A y recibió homocisteína en la misma forma; este
grupo además fue suplementado con ácido fólico 0.2 ml (5 mg/ml) diario por vía
oral.
El período experimental tuvo una duración de 40 días.
Recolección de la Muestra de sangre
Los conejos fueron preparados para la extracción de sangre. Dicha preparación
consistió en afeitar la zona torácica donde se encuentra el corazón. A los cuatro grupos,
a los 0 días previo ayuno de 14 horas se les extrajo una muestra de 3 ml directamente
del corazón con una jeringa de 21 por 1” y se colocó en tubos de ensayo. Las muestras
se centrifugaron a 3500 r.p.m. durante 10 minutos, obteniendo el suero para la
determinación de homocisteína, colesterol total y las fracciones, triglicéridos y ácido
fólico. Posteriormente a los 40 días se les tomaron muestras a los tres grupos
nuevamente.
Determinación de Homocisteína plasmática
Las determinaciones de los niveles plasmáticos de Homocisteína se realizaron por el
sistema IMX ABBOTT de Homocisteína.
Principios Biológicos del Procedimiento:
La determinación de homocisteína se basa en la tecnología de inmunoensayo de
polarización de la fluorescencia (FPIA). Para ello, la homocisteína unida (forma
oxidada) se reduce a homocisteína libre y esta se convierte enzimáticamente en Sadenosil-L-homocisteína (SAH). Esto ocurre mediante dos procesos:
Proceso de Reducción: La homocisteína y las formas de homocisteína como
disulfuro mixto y unidas a proteínas presentes en la muestra se reducen y forman homocisteína libre utilizando el ditiotreitol (DTT).
Proceso de Conversión enzimática: La homocisteína total libre se convierte en Sadenosil-L-homocisteína (SAH) utilizando la SAH hidrolasa y exceso de adenosina.
Valores referenciales:
5
mol/l a 15
mol/l
Sensibilidad y Especificidad.
La sensibilidad del ensayo IMX homocisteína es de <0,50
límite superior del intervalo de confianza (95%).
mol/l, lo que equivale el
Reactividad cruzada S-adenosil-l-metionina a una concentración de 0,5 mmol/l de
12,9%, y adenosina a una concentración 5 mmol/l de 0,9%.
Determinación de Colesterol, Triglicéridos, HDL-c, LDL-c.
La determinación de Colesterol y Triglicéridos se efectuó por métodos enzimáticos
automatizados (Express 550 plus).
La determinación de HDL-c se efectuó utilizando un reactivo precipitante formado
por ácido fosfotúngstico e iones de magnesio. En el sobrenadante quedan solamente las
HDL-c que se cuantifican por el método enzimático.
La determinación de LDL-c se efectuó por precipitación y la fracción sobrenadante
se midió luego por el método enzimático, calculándose la LDL-c al restarles el HDL-c
del Colesterol Total.
Determinación de Ácido Fólico
Se utilizó el método automatizado de Inmulite (DPC), el cual es un método
inmunológico quimioluminoscente.
Valores de Referencia Ácido Fólico
0.5 a 24 ng/ml
Preparación de Tejidos
Los conejos fueron sacrificados por aéreoembolismo, este es un método que consiste
en realizar una punción al corazón del conejo e inyectarle aire.
Posteriormente se procedió a realizar la autopsia de dichos animales y se le extrajo el
corazón y aorta para ser examinados. La extracción de estos tejidos se realizó con ayuda
de pinzas y bisturí afilado procurando no dañar el tejido. Las muestras de tejido
extraídas fueron conservadas en formaldehído 10% hasta el momento de ser procesadas.
Las muestras de la aorta y corazón se colocaron en baños de concentraciones
crecientes de etanol, desde el 70% hasta alcohol absoluto (100%), inmediatamente las
piezas se colocaron en un medio de inclusión en estado líquido, se empleó parafina
calentada a 60 ºC, la cual permite que el tejido adquiera cierta consistencia, se dejan
solidificar a temperatura ambiente formándose un bloque de parafina. Los bloques son
seccionados por la cuchilla del micrótomo que corta el tejido en secciones
suficientemente delgadas como para permitir el paso de la luz. Estos cortes son
extendidos en agua caliente y después adheridos en láminas previamente gelatinizadas.
Los cortes de la aorta y corazón fueron coloreados con hematoxilina y eosina y luego
se observaron por microscopía óptica.
Análisis Estadístico:
Se calcularon Promedio, Desviación estándar, Correlación de Pearson (análisis
paramétricos específicos), se compararon las medias utilizando la “t” de Student con un
nivel de significancia de 0.05. Para estos cálculos se utilizó el programa estadístico
SSPS versión 8.0.
III. RESULTADOS
Tabla 1
Valores promedio de las variables en estudio de los grupo 1 y grupo 2. Bárbula
2001.
GRUPO 1GRUPO 2
VARIABLES
+- DS
Colesterol mg/dl
+- DS
55 +- 17.35 38 +- 17.5
t
p
0.861
0.41
HDL-c mg/dl
17+- 4.43
20+- 5.78
-0.674
0.51
LDL-c mg/dl
35+-13.51
20+- 6.45
1.433
0.18
Triglicérido mg/dl
53+-19.52
61+- 15.8
-0.408
0.69
mol/l 6.1+- 1.35 13.8+-1.56
7.153
*0.000
-1.082
0.31
Homocisteína
Ácido Fólico ng/dl
9+- 1.97
10.3+-0.97
Fuente: Datos tomados de la investigación.
P<0.05
* Significativo
Tabla 2
Valores promedio de las variables en estudio de los grupo 1 y grupo 3. Bárbula
2001.
GRUPO 1 GRUPO 3
VARIABLES
+- DS
Colesterol mg/dl
+- DS
t
p
55 +- 17.35
48.5+-17.85
0.115
0.91
HDL-c mg/dl
17+- 4.43
22.5+-7.34
-1.322
0.22
LDL-c mg/dl
35+-13.51
24+-9.17
1.075
0.31
Triglicérido mg/dl
53+-19.52
57.5+-13.12
0.026
0.97
Homocisteína
6.1+- 1.35
7+-1.30
-0.923
0.38
9+- 1.97
17.8+-1.37
-7.207
*0.000
mol/l
Ácido Fólico ng/dl
Fuente: Datos tomados de la investigación.
P<0.05
* Significativo
Tabla 3
Valores promedio de las variables en estudio de los grupo 2 y grupo 3. Bárbula
2001.
GRUPO 2
VARIABLES
GRUPO 3
+- DS
+- DS
t
p
Colesterol mg/dl
39+- 17.5
48.5+-17.85
-0.687
0.51
HDL-c mg/dl
20+-5.78
22.5+-7.34
-0.687
0.51
LDL-c mg/dl
20+-6.45
24+-9.17
0.202
0.84
Triglicéridos mg/dl
61+-15.8
57.5+-13.12
0.494
0.63
7+-1.30
5.925
*0.000
17.8+-1.37
10.779
*0.000
Homocisteína
mol/l 13.8+-1.57
Ácido Fólico ng/dl
10.3+-0.97
Fuente: Datos tomados de la investigación.
P<0.05
* Significativo
Gráfico 1
Concentraciones Promedios de Colesterol, HDL-c, LDL-c,
Triglicéridos de los Grupos 1, 2, 3 antes de la experimentación
Gráfico 2
Comparación de los Niveles Promedios de Colesterol, HDL-c, LDL-c, T
Triglicéridos de los Grupos 1, 2, 3 después de la experimentación
Gráfico 3
Comparación de los Valores Promedio de Homocisteína y Ácido Fólico de los
Grupos 1, 2, 3 antes y después de la experimentación
Tabla 4
Matriz de Correlaciones de Pearson de las variables en estudio en el grupo 2
HDL-c
LDL-c
Colesterol
Triglicéridos Homocisteína
1
0.79
0.93
0.010
-0.229
P=0.107
P=0.018
P=0.986
P=0.710
1
0.90
0.50
-0.005
P=0.036
P=0.390
P=0.993
1
0.32
0.19
P=0.588
P=0.975
1
0.695
Ácido
Fólico
HDL-c
LDL-c
0.79
P=0.107
Colesterol
Triglicéridos
Homocisteína
Ácido Fólico
0.93
0.90
P=0.018
P=0.036
-0.010
0.50
0.32
P=0.986
P=0.993
P=0.588
-0.229
-0.005
0.019
0.695
P=0.710
P=0.993
P=0.975
P=0.192
0.15
0.43
0.29
0.61
0.712
P=0.176
P=0.721
P=0.657
P=0.273
P=0.176
0.15
P=0.807
0.43
P=0.721
0.29
P=0.625
0.61
P=0.192
P=0.273
1
0.15
P=0.176
1
Fuente: Datos tomados de la investigación.
Tabla 5
Matriz de Correlaciones de Pearson de las variables en estudio en el grupo 3
HDL-c
HDL-c
LDL-c
1
0.96
LDL-c ColesterolTriglicéridosHomocisteínaÁcido Fólico
0.96
0.98
P=0.363
P=0.170
1
0.99
P=0.363
Colesterol
Triglicéridos
Homocisteína
Ácido Fólico
P=0.004
0.98
0.99
1
P=0.986
P=0.004
0.88
0.91
0.92
P=0.986
P=0.801
P=0.765
-0.42
-0.60
-0.53
P=0.571
P=0.396
P=0.462
0.157
-0.080
-0.014
P=0.842
P=0.919
P=0.985
0.88
P=0.986
0.91
P=0.801
0.92
P=0.765
Fuente: Datos tomados de la investigación.
1
-0.34
-0.42
0.157
P=0.571
P=0.842
-0.60
-0.080
P=0.396
P=0.919
-0.53
-0.014
P=0.462
P=0.985
-0.34
-0.274
P=0.651
P=0.725
1
0.292
P=0.651
-0.274
P=0.725
P=0.707
0.292
P=0.707
1
Tabla 6
Comparación entre los Niveles de Homocisteína y el Grado de Ateroma en
Aortas de Conejos
CONCENTRACIÓN
HOMOCISTEÍNA µmol/l
GRUPO 1
GRADO DE ATEROMA
7.6
4.9
5.4
6.1
8.0
II
No se observó lesión
No se observó lesión
No se observó lesión
II
GRUPO 2
13.8
11.9
10.9
13.8
14.7
GRUPO 3
9.0
7.2
6.8
5.9
IV y V
IV y V
IV y V
IV
IV
I
III
No se observó lesión
I
Fuente: Datos tomados de la investigación.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
En la tabla 1 se muestran los valores promedio de las variables analizadas en los
grupos 1 y 2 y se pudo observar que los niveles de colesterol en el grupo 1 son mayores
que los obtenido en el grupo 2. En cuanto a los niveles de HDL-C, LDL-C y
Triglicéridos no se observó ninguna variación importante; mientras que en el grupo 2 se
observan niveles más alto de homocisteína, siendo esta diferencia significativa entre los
dos grupos.
En cuanto a los resultados obtenidos en la tabla 2 donde se comparan los valores
promedio en los grupos 1 y 3 se observa que en los niveles de colesterol HDL-C, LDLC, triglicéridos, homocisteína no hay variación representativa entre los dos grupos;
mientras que en el grupo 3 los niveles de ácido fólico se encuentran aumentados, ya que
este grupo recibió ácido fólico 0.2 ml (5 mg/ml) diario por vía oral, siendo esta
diferencia significativa entre ambos grupos.
Al observar los resultados obtenidos en la tabla 3, donde se comparan los valores
promedio de los grupos 2 y 3, se observa que no hubo variación importante de los
niveles de Colesterol, HDL-C; LDL-C y triglicéridos entre los grupos. En cuanto a los
niveles de homocisteína y ácido fólico se observa que los niveles de homocisteína están
altos en el grupo 2 y los niveles de ácido fólico están aumentados en el grupo 3, siendo
estas diferencias significativas entre ambos grupos.
En el gráfico 1 y 2 se comparan los valores promedios de colesterol total y
fraccionado y triglicéridos antes y después de la experimentación de los grupos 1, 2 y 3
y se observó como los lípidos no presentan variaciones significativas.
En el gráfico 3 se comparan los niveles de homocisteína y ácido fólico antes y
después de la experimentación y observamos que los niveles de homocisteína antes de
la experimentación se mantienen, después de la experimentación se observa un aumento
en el grupo 2 ya que este grupo se le suministro homocisteína 2 mg/ml por vía
parenteral y en el grupo 3 se observó que los niveles de homocisteína disminuyen por
efecto del ácido fólico. En cuanto al ácido fólico, antes de la experimentación no se
observa alteración, después de la experimentación se observa un aumento en el grupo 3.
Se realizaron estudios de correlaciones de Pearson y se observó correlación alta en el
grupo 2 entre el ácido fólico y homocisteína; correlación alta entre el colesterol total y
fraccionado; correlación alta entre la homocisteína y triglicéridos (tabla 4). Así mismo
se obtuvo en la tabla 5, correlación alta entre colesterol total y fraccionado del grupo 3;
una correlación baja entre la homocisteína y ácido fólico, lo que indica que a mayor
cantidad de ácido fólico los niveles de homocisteína no aumentan, se mantienen.
En la tabla 6 observamos que en el grupo 1 hay 3 animales en los cuales no se
encontraron ateromas (Figura 1) y hay 2 animales con predominio de ateromas de grado
II (Figura 2). En el grupo 2 se observaron lesiones de tipo V (Figura 3) en el cual el
ateroma ya está calcificado y en la tipo IV (Figura 4) el ateroma es fibroso, estas son las
lesiones más graves observadas en los grupos estudiados. En el grupo 3 se observaron
lesiones tipo I donde solo se observa engrosamiento, y de tipo III (Figura 5) donde el
ateroma está formado por depósitos de lípidos extracelulares.
DISCUSIÓN
La formación de placas de ateromas es una consecuencia compleja de múltiples
eventos interrelacionados, siendo difícil comprender, diagnosticar y tratar las diversas
anomalías de las enfermedades cardiovasculares. La homocisteína es un aminoácido
sulfuro asociado con enfermedades cardiovasculares y formación de ateromas cuando
sus niveles se encuentran elevados en suero (Blann, 1992). En este estudio el efecto que
causa la homocisteína al endotelio vascular en conejos fue estudiado por un período
experimental de 40 días.
El grupo control recibió una dieta balanceada a base de alimento propio para el
animal, sin embargo al realizar el estudio de los cortes histológicos de las aortas se
observó la formación de ateromas de grado I y III, estos resultados pudieran ser
atribuidos a los componentes que contiene el alimento para conejos, siendo estos
resultados similares a la investigación realizada por Mc Cully en 1970, donde se plantea
que la presencia de placas fibrosas en los animales controles podría ser atribuida a la
cantidad incrementada de homocisteína que es formada presumiblemente de los
alimentos ricos en metionina. En vista de este hallazgo se conformó un grupo
alimentado con vegetales (lechuga, zanahoria y otros), no encontrándose en ninguno de
los animales ateromas (datos no mostrados).
Mc Cully en 1990 reportó que la intensidad de la lesiones en corazón de conejos
experimentales fue incrementada por la tiolactona de homocisteína. Resultados
semejantes a los obtenidos por este autor fueron observados en el presente trabajo,
donde se realizó un estudio anatomopatológico en aortas de conejos encontrándose
lesiones ateromatosas de tipo IV y V en el grupo 2. El colesterol total y sus fracciones
no presentan ninguna variación significativa en los diferentes grupos, sin embargo, los
niveles de homocisteína plasmática se encuentran aumentados en el grupo 2, por lo que
se puede considerar a este aminoácido como un agente involucrado en el desarrollo de
dichas lesiones.
Por otra parte al grupo 3 se le administró homocisteína y ácido fólico, siendo este
último utilizado por la acción que cumple en la remetilación de homocisteína a metionina, a través de las enzimas metilenotetrahidrofolato reductasa y metionina sintetasa.
En este grupo se observó la formación de ateromas de menor grado con niveles más
bajos de homocisteína y más altos de ácido fólico, por lo que se sugiere que el ácido
fólico ejerció un efecto protector como inhibidor del aumento de la concentración de
homocisteína plasmática y de la lesión endotelial.
Estudios con humanos suplementados con ácido fólico tales como los realizados por
Ubbink (1995), Clarke (1998) y Donald (1998) demostraron que dicho nutriente es
efectivo para disminuir los niveles de homocisteína plasmática lo que reduce el riesgo
de enfermedades cardiovasculares. Hay otros estudios recientes que afirman el efecto
antioxidante del folato (Verhaar y col., 2002).
Sin duda se necesitan otros estudios para evaluar realmente la acción del ácido fólico
y qué concentración de ácido fólico es la óptima para proteger los niveles excesivos de
homocisteína en animales de experimentación de manera que prevenga la formación de
ateromas de cualquier grado, sin embargo, en este estudio se demuestra el efecto
protector del ácido fólico y la importancia de este compuesto como alternativa en el
tratamiento en humanos de la hiperhomocisteinemia.
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