UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE BIOANALISIS "ANALISIS MICROBIOLOGIC*} DEL AGUA EN LA COMUNIDAD DE EL CONEJO MUNICIPIO DE PEROTE Y EL CHICO MUNICIPIO DE EMILIANO ZAPATA VERACRUZ. TESIS Para obtener el Titulo de LICENCIADO EN QUIMICA CLIN1CA Presentan LORENA MARIA CASTRO MARIN GLORIA ORDAZ GARCIA Director M. en C. ROCIOI HERNANDEZ CORIA Xalapa-Enriquez, Ver. A 31 de Mayo de 2007 Universidad Veracruzana Facultad de Bioanalisis Facultod de Xa la pa. Bioandtisis !/er. Autorizacion de Impresion ( 6 ) C. Q. C. FRANCISCO S O U S PAEZ DIRECTOR (A) DE LA FACULTAD DE BIOANALISIS UNIDAD DE CIENCIAS DE LA SALUD PRESENTE Despues de haber revisado el Proyecto de Trabajo " de: Recepcional, en la modalidad TESIS " Intitulado: " Analisis microbiologico del agua en la comunidad de el Conejo mpio. De Perote y el Chico mpio. De Emiliano Zapata Veracruz." Realizado por: LORENA MARIA CASTRO MARIN Y GLORIA ORDAZ GARCIA Hago de su conocimiento que estoy de acuerdo en su contenido cientifico, por lo cual NO TENGO INCONVENIENTE EN AUTORIZAR SU IMPRESION. ATENTAMENTE "Lis de Veracruz, Arte, Ciencia, Luz" Xalapa, Ver, a 31 de mayo de 2007. NOTA: Esta Autori/acion dc Impresion ( f o r m a 6) debc mcluirse c o m o primer;! pal!nui Jc nuncra invariahlo dcnlro del trabajo final imprcso y ontuadernado. INDICE INTRODUCCION 1 CAPITULO I ANTECEDENTES 3 Ciclo del agua 5 Importancia del agua en la vida 5 Tratamiento y distribution del agua 6 Microorganismos Patogenos contaminantes del agun 7 Mesofilos y Coliformes 8 Information del agua por la OMS 10 Estudros realizados en otros lugares 12 CAPITULO II JUSTIFICACION 14 OBJETIVOS Objetivo general 14 Objetivos particulares 14 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 15 CAPITULO III Material y Metodos 17 Description de las Zonas de muestreo 18 Mapa de localizacion de El Conejo 20 Mapa de localizacion de El Chico 22 Obtencion y toma de Muestra 23 CAPITULO IV RESULTADOS Resultados de El Conejo 20 Resultados de El Chico 31 CONCLUSIONES 33 RECOMENDACIONES 33 BIBLIOGRAFIAS 34 ANEXOS 36 HE&tCATO-RJA A DIOS; que siempre esta a mi lado oyendo mis oraciones y que nunca me deja sola. A MIS PADRES: Antolin Castro Rivera y a Eugenia Marin Cortez por apoyarme en este largo camino ya que sin su ayuda y consejos no hubiese logrado este triunfo que tambien es suyo. A MI ESPOSO: Jose de la Paz Palmeros Barradas por su ayuda incondicional, por motivarme siempre y creer enmi ;Te Amo Mochito! A MI HIJA: Shalom Palmeros Castro que ahora es una de mis principales fuerzas para seguir triunfando. A MIS HERMANOS : Azaid Castro Marin. Mayra Castro Marin, y Oscar Castro Marin por su apoyo A MIS TIAS: Francisca Marin Cortez y Paulina Marin Cortez por sus consejos y apoyo incondicional. A MIS PRIMOS: Raquel Marin Cortez. Adan Eliud Marin Salazar por ayudarme cuando los necesitaba. A MIS AMI6AS Y COMPANERAS DE CLASE: Marilu Tapia Gonzales. Rocio Ramirez, Beatriz Pozos. Dorita por toda su confianza y apoyo que me brindaron cuando estuvimos juntas y por su puesto a Gloria Ordaz por su tiempo para poder lograr una de nuestras metas. ; MIL QRAC1AS; Lorena Ma. Castro Marin AqRA&ECIMIENTOS A gradezco a nuestra director a de tesis QC. M.C Rocio Imelda Hernandez Coria por su tiempo hacia nosotros para poder realizar nuestra investigation. A l*A QC: Claudia Belen Ortega Planell por trabajar en el laboratorio. apcyarnos con el material v permitirnos A LA QC: Ana Leticia Ramos por su tiempo compartido con nosotros. AL QC: Francisco Soli's Paez por habernos escuchado cuando lo necesitabamos AGRADEC1MIENT0S A MIS PADRES: p o r todo (2.1 a p o y o que me han brindado y que saeri/iearon m u c h a s c o s a s p a r a q u e estudiara una earrera profesional, c o n s e j o s que me han d a d o p a r a seguir adelante y ver culminado a n o de mis s u e n o s y que este logro tambien es de ustedes, p o r q u e sin u s t e d e s n o seria n a d a y agradecerle a ©ios p o r los p a d r e s qusz me dio. A MIS HERMANOS: ANGEL: Que sieropre he tenido tu apoyo, c o n s e j o s p a r a s o l u c i o n a r mis, problemas y ejemplo de q u e si se pueden lograr los c o s a s e u a n d o uno se 1 o p r o p o n e m u c h a s graeias. MARI: Tambien agradecer el a p o y o q u e me brindaste en los momentos malos y Jelices de mi vida y s a b e r que cuento contigo RODRIGO: Cres el menor de t o d o s y te a g r a d e z e o t o d o s los r a t o s malos y b u e n o s q u e hemos p a s a d o , decirte g r a s por todo MIS H1JAS: SURI V VALERIA: p o r q u e ustedes son el motor de mi vida y me dan la Juerza de salir adelante y que tambien por ustedes realiee esa meta. A MI ESPOSO: FRED: Te a g r a d e z e o el a p o y o que me has brindado en todo este tiempo que has e s t a d o eonmigo y s a b e s que TQM. AMIQOS: L.ORENA V PAZ: Qusz szn szstsz tiszmpo msz brindaron su a p o y o , tiszmpo y eonfianza g r a e i a s por todo. PINO: <§>abjzs qusz tambiszn t*z agradszzeo szl a p o y o moral qusz mg h a s b r i n d a d o szn todo momsznto y qusz ssz qusz vas szstar ahi e u a n d o tsz nszeszsitsz. JOSE: Agradszzeo <g\ habgrtsz conocido porqusz siszmprg rszeibf an buszn eonsszjo dsz ti c u a n d o mas 1 o njzeszsitaba y szn ti vi un gran amigo g r a e i a s p o r todo ABI: Graeias tambien porqusz aunqusz no n o s vszmos sjz qusz eusznto contigo A MIS MAESTRAS: MI ASESORA ROCIO: Graeias por szl a p o y o qusz m? brindo szn todo szstsz tiszmpo qusz (zstuvsz eon usted p a r a podszr lograr (zsta mszta graeias. Q.C BELEN: Graeias por szl a p o y o que msz brindo y tiszmpo szn gstsz proyszeto y dsz sabszr qusz mas qusz una maszstra szs una pszrsona szn la eual ssz puedsz eonfiar szn todo momsznto muehas graeias. MAESTRA EN CIENCIAS ANA LETICIA RAMOS: Graeias tambiszn por el a p o y o que msz brindo tambiszn szn este proyszeto y los eonsszjos qusz rszeibi d e s d e el prineipio graeias. p o r ultimo darlsz g r a e i a s a 5>ios por todo lo qusz msz ha d a d o szn mi vida fszlieidad, alszgrias, tristszzas solo tu sabszs porqusz haees las e o s a s GLORIA ORDAZ GARCIA GRACIAS A TODOS INTRODUCTION El agua es un recurso natural para todas las formas de vida teniendo mayor importancia en el consumo humano, ya que esta se utiliza para beber, cocinar, lavar, aseo personal y en la industria agricola. Este vital liquido tiene otros usos externos como son en la jardineria, lavado de coches y banquetas. Todos los organismos que se encuentran en el agua son importantes en el momento de establecer un control de la misma, sin considerar si tiene su medio natural de vida en el agua o pertenece a poblaciones transitorias introducidas por el hombre. Hoy en dia el agua es un problema de salud publica en el afio 2000, mas de 11,000 millones de habitantes carecian de un suministro de agua, lo que se supone un 17% de la poblacion del planeta. El abastecimiento del agua para uso y consumo humano con calidad microbiologica adecuada es fundamental para la prevention y transmision de enfermedades por lo que se debe de conocer los Microorganismos patogenos y determinar su genero, especie, asi como, origen, magnitud y oscilacion de su numero. Los parametros biologicos del agua potable son de mucho interes, los microorganismos que pueden encontrarse en el agua son bacterias, hongos, protozoarios, virus y algas, causantes de muchas enfermedades para el hombre, por lo que el control microbiologico del agua se debe centrar en las especies patogenas que provocan enfermedades. En el presente trabajo se realizo un estudio microbiologico del agua potable en dos poblaciones de estudio, con la finalidad de apoyar a las comunidades en la prevention de enfermedades trasmitidas a traves del agua que ellas consumen., y se verified el cumplimiento de la NOM-127-SSA1 1994. CAPITULO 1 ANTECEDENTES ANTECEDENTES El agua como sustancia quimica esta compuesta por dos atomos de hidrogeno y uno de oxigeno, con la formula H2O. Es una sustancia compuesta relativamente abundante en el planeta Tierra. Existe en varias formas y lugares, principalmente en los oceanos y las capas polares, pero tambien en nubes, lluvia, rios y banquisas. (l ' 2) ' Es fundamental para todas las formas de vida conocidas. Los humanos consumen agua potable. Los recursos naturales se han vuelto escasos con la creciente poblacion mundial y su disposition en varias regiones habitadas es la preocupacion de muchas organizaciones gubernamentales (1'2)' Esta es la unica sustancia que se encuentra en la Tierra de manera natural en los tres estados materiales (gas, li'quido y solido), no tiene color, olor ni sabor. Qulmicamente pura se le llama ultrex existen otras formas de pureza como agua destilada, y casi no tiene sustancias disueltas. (U2,3) . Este liquido ocupa tres cuartas partes de la Tierra. El 3% de esta es dulce, ese 3%, un 1% esta en estado liquido, componiendo los rios y lagos. El 2% restante se encuentra en los polos geograficos de la Tierra. (l ' 2 ). Los atomos de hidrogeno y oxigeno del agua se acomodan en una orientation no lineal dando forma a un angulo de 104.5°C, estos atomos de hidrogeno y oxigeno se mantiene unido por enlaces covalentes, las moleculas de agua interactuan entre si por que las colas positivas del hidrogeno son atrai'das por la cabeza negativa del oxigeno. Esta interaction propicia formation de puentes de hidrogeno tal como se muestra en la figura 1. (4) Motecuta de Agua la La estructura molecular del agua con la capacidad de formar puentes de hidrogeno, constituyen el fundamento de las propiedades fisicas y qui'micas del agua tales como: (14) El punto de ebullition del agua a nivel del mar es de 100°C, y su punto de congelation es de 0°C. La densidad maxima del agua h'quida es 1 g/cm3 a una temperature de 4°C; la densidad del agua solida es menor a la del agua liquida, 0.917 g/ml. (1,2-3) Tiene una tension superficial muy elevada., cuando la superficie de los h'quidos del agua se comporta como una pelicula capaz de alargarse y al mismo tiempo ofrece cierta resistencia al intentar romperla y esta propiedad ayuda a que algunas cosas muy ligeras se detengan en la superficie del agua. El calor espetifico del agua es de lcal/°C-g. Este permite a los organismos importantes cambios de calor con escasa modification de la temperatura corporal. <l4) Su elevado calor de evaporation es de (536cal/g) calor necesario para vaporizar 1 g de liquido, este permite eliminar el exceso de calor evaporando cantidades relativamente pequenas de agua, lo que permite mantener la temperatura del organismo mas baja que la del medio ambiente. Este es otro mecanismo regulador de la temperatura del organismo atraves de la piel, pulmones, respiration y el sudor <14> Elevada constante dielectrica (K= 80 a 20°C). Esta indica que el agua sea un buen disolvente de compuestos ionicos y de sales cristalizadas ya que este elevado valor de la constante supone que la molecula de agua se opone a la atraccion electrostatica entre los iones positivos y negativos debilitando dichas fuerzas de atraccion. <l4) Capacidad de hidratacion o solvatacion de iones. es debido a su caracter dipolar del agua que determina que sus moleculas rodeen a los distintos iones. aislandolos del resto. provocando a si este fenomeno. (l4> Es Disolvente de moleculas anflpaticas, este fenomeno solubiliza compuestos anfipaticos los cuales son aquellos que presentan en su estructura grupos polares y apolares. <14) Es Disolvente de compuestos no polares de naturaleza no ionica, graeias a su capacidad de producir puentes de hidrogeno con otras moleculas no ionicas. Pueden disolver compuestos como alcoholes, aminas o glucidos, estas ultimas propiedades determina que el agua sea considerada como el disolvente universal y que en el organismo se realiza el proceso de transporte de nutrition y osmosis. (14) Transparencia es una propiedad fisica importante para el proceso de fotosintesis en la masa oceanica y fondos marinos ya que esta es una cadena trofica que finaliza en la nutrition hum ana. ( l 4 ) Ciclo del agua El mayor reservorio del agua es el oceano. El calor del sol evapora el agua del mar y una vez evaporada esta asciende a la atmosfera en forma de nubes, estas nubes con agua en forma de gas (humedad) son empujadas por el aire hacia los continentes y al entrar en contacto con las temperaturas mas frias de la tierra se condensan y caen al suelo continental en forma de agua, nieve o granizo. Una vez en el suelo, una parte del agua es tomada por los organismos vegetales y animales (mismos que posteriormente transpiran) y otra parte alimenta a los cuerpos de aguas superficiales (rios y arroyos) y subterraneos. Una gran cantidad del agua que cae al continente escurre por la superficie y a traves del subsuelo para nuevamente depositarse en el mar y nuevamente reanudar el ciclo del agua. (8) Importancia del agua en la vida Todas las formas de vida conocidas dependen del agua. El agua es parte vital de muchos procesos metabolicos en el cuerpo. Cantidades significantes de agua son usadas durante la digestion de la comida. Sin embargo, algunas bacterias y semillas de plantas pueden entrar a un estado criptobiotico por un periodo de tiempo indefinido cuando se deshidratan, y vuelven a la vida cuando se devuelven a un ambiente humedo. (13) Cerca del 72% de la masa libre de grasa del cuerpo humano esta hecha de agua. Para su adecuado funcionamiento nuestro cuerpo requiere entre uno y tres litros de agua diarios para evitar la deshidratacion, la cantidad precisa depende del nivel de actividad, temperatura, humedad y otros factores. El cuerpo pierde agua por medio de la orina y las heces, la transpiration y la exhalation del vapor de agua en nuestros alimentos. (13) Un municipio sano debe considerar que el primer punto de contamination microbiana es el agua que consumen sus habitantes puesto que la utilizan para su uso personal como para la limpieza de utensilios de cocina y preparation de alimentos Tratamiento y Distribution del agua El agua absorbe rapidamente sustancias naturales como las producidas por el hombre que hacen el agua inadecuada para su consumo sin algun tipo de tratamiento. El agua debe de encontrarse libre de ciertas sustancias como: (17) > Color: el cual debe de ser claro, pero con la presencia de materia organica disuelta cambia que proviene de suelos de turba o sales minerales de hierro y manganeso. > Turbidez clara o transparente: cuando presenta turbidez el agua se puede deber a la alta concentration de bacterias o particulas de mineral en suspension. > Sabor v Olor caracteristicos: el sabor y olor desagradables son por contamination de agua residuales, la excesiva concentracion de productos quimicos como son hierro manganeso o aluminio. > Dureza: la excesiva y extremadamente dureza son indeseables > Patogenos: el agua debe de estar libre de bacterias, virus y protozoos. Pueden provenir de aguas residuales tanto de humanos como de animales que contaminan los recursos del agua (17) El tratamiento y la distribution del agua es el proceso por el cual se convierte en apta para el consumo humano transportandola hasta el consumidor. El tratamiento del agua es producir un adecuado suministro que es quimico, bacteriologica y esteticamente agradable produciendo agua que sea: <l7) > Grata : que no tenga un sabor desagradable > Saludable: que no haya patogenos o quimicos > Limpia: libre de materia suspendida y turbidez > Sin color y olor: agradable pera el consumo > Blanda: se utiliza para higiene personal, lavar ropa y trastes sin el excesivo uso de detergente. (l7) Despues del tratamiento el agua se conduce hasta el consumidor por medio de tuberias subterraneas y que se utilizan para transportar grandes volumenes de agua desde el origen hasta la planta de tratamiento y despues a los depositos de servicio que son los que abastecen a las casa. Es generalmente de buena calidad, libre de solidos, bacterias y otros patogenos, excepto en limitadas areas donde han sido afectados por contamination. (17) La red de distribution cosiste en tuberias de diferentes tamanos y materiales, el mas comun es el de hierro que se encarga de llevar el agua a las casas, actualmente el tubo de hierro a sido remplazado por mangueras de PVC.<17> MICROORGANISMOS PATOGENOS CONTAMINANTES DEL AGUA Los microorganismos mas comunes que se encuentran en el agua son Mesofilos y Coliformes totales ambos pertenecen a la familia de las Enterobacteriacea son bacilos gram negativos. Los microorganismos hallados con mas frecuencia en el laboratorio se encuentran de manera natural en el tracto gastrointestinal, heces de animales de sangre caliente, en el suelo y agua. <9) MESOFILOS Dentro de este tenemos a los Streptococus y Staphylococus que tiene una temperature optima de crecimiento comprendida entre 20°C y 45°C. La temperatura minima se encuentra en el rango de 15°C a 20°C y la temperatura maxima en torno a 45°C. La gran mayoria de los microorganismos son Mesofilos gram positivo y gram negativo Por otra parte, la investigation de bacterias Mesofilicas aerobias proporciona information acerca del numero total de bacterias viables, constituyendo un recurso valioso adicional para determinar el grado de exposition del agua a la contamination por materia organica. El recuento de estos organismos representa un respaldo atribuido a los resultados de los analisis de Coliformes. <9) COLIFORMES Son un grupo heterogeneo y existe poca evidencia que indique que estas bacterias Coliformes pertenezcan a un solo genero taxonomico. El numero de organismos se establece mediante la cuenta de unidades formadoras de colonias, metodo para la cuenta de microorganismos Coliformes totales usando la tecnica del numero mas probable la cual proporciona una estimation estadistica ,(A'b) El agua es un medio de transmision para numerosos microorganismos, principalmente bacterias de origen intestinal. Es por esta razon que el control sanitario se realiza en fixncion de la presencia de este tipo de bacterias. Desde el punto de vista microbiologico, el examen de la calidad sanitaria del agua tiene por objetivo determinar la presencia de ciertos grupos de bacterias, que revelen una contamination reciente por materia fecal o por materia organica. Durante mas de medio siglo se ha empleado el grupo Coliformes como un indicador del grado de contamination y, por lo tanto, de la calidad sanitaria del agua. (9) Este grupo se encuentra conformado por bacilos gram negativos, aerobios y anaerobios facultativos. no esporulados. caracterizados por fermentar la lactosa con production de acido y gas dentro de las 48 horas de incubation a 37°C. La capacidad de producir gas en estas condiciones es el criterio que permite diferenciar el componente fecal del grupo Coliforme <9) Las enterobacteriacea que se encuentran frecuentemente en el agua se clasifican en tribus: >• Tribu I: Echericieae. E.coliy Shigella. "r Tribu II: Edwards ie Ilae y E. Tarda. Tribu III: Salmonella. S. Choleraes. S. Typha y S. Enter it idi > Tribu IV: Citrobacter amalonaticos > Tribu V: Klebsielleae, Enterobacter aerogenes, serratia entomophila. > Tribu VI: Proteeae, Proteus mirabilis,(7) En la siguiente tabla No. 1 se presentan las enfermedades mas frecuentes causadas por bacterias presentes en el agua. Tabla No. 1 Enfermedades causadas por bacterias en el agua BACTERIAS [ ENFERMEDADES Y SINTOMAS Causa gastroenteritis provocando sintomas como diarreas liquidas y abundantes, poca mucosidad, Escherichia coli nauseas y deshidratacion. Esta bacteria se aisla comunmente en agua contaminada ,(7) Infection bacteriana mas comun, sus sintomas son fiebre, diarrea acuosa con dolor, colambres Shigella abdominales y mialgias generalizadas, (7) Se presenta con sintomas de gastroenteritis aguda con diarrea, dolor abdominal fuerte, fiebre, Salmonella nauseas y vomito, (7) Destruyen las micro vellosidades del intestino formando Citrobacter denominadas lesiones muy adherencia caracteristicas y eliminaci6n, produciendo diarrea, (7) Campylobacter L Se presentan sintomas de diarrea aguda, (7) ,i Como puede observarse en la tabla estas bacterias son Productoras de fuertes intoxicaciones alimentarias presentando cuadros gastrointestinales y vomito. resultando de gran importancia la identification de la Escherichia coli contamination por materia fecal. ya que esta bacteria indica una INFORMACION DEL AGUA POR LA ORGANIZACION MUNDIAL DE LA SALUD (OMS) La OMS insita a mejorar el abastecimiento de agua y el saneamiento basico Los objetivos de desarrollo del milenio preven, para antes de 2015, proporcionar saneamiento basico a casi 2,000 millones de personas, De aqui a 2015 cada ano tiene que aumentar en 138 millones el numero de personas que disponen de saneamiento basico para que se logre reducir a la mitad la proportion de personas que carecen de agua potable y saneamiento basico, advierten en un informe la Organization Mundial de la Salud (OMS) y la UNICEF.<5) Segun un informe de la OMS y la UNICEF, mas de 5.000 niiios mueren cada dia en todo el mundo por las enfermedades causadas por el agua. El agua y el saneamiento de mala calidad son responsables del 90% de estas defiinciones, especialmente en el Africa subsahariana, donde la poblacion infantil, tiene una probabilidad 500 veces mayor de morir por causa de una enfermedad diarreica. Hay 1,100 millones de personas, es decir 18% de la poblacion mundial, no disponen de agua apta para el consumo. Unos 2,600 millones de personas, el 42% del total, no tienen acceso a servicios basicos se saneamiento.(6) El objetivo del desarrollo del Milenio pide que se reduzca "a la mitad para el ano 2015, el porcentaje de personas que carezcan de acceso sostenible a agua potable y servicios de saneamiento basicos". Al parecer en la mayoria de las regiones es posible que se alcance el objetivo del milenio relativo al subministro de agua potable a escala global con exception del Africa' 6 ' En 1990 y 2002 1,100 millones de personas obtuvieron agua apta para.el consumo. Los mejores resultados en ese sentido se lograron en el Africa meridional, donde hubo un aumento del 71% en 1990, al 84% en 2002, en lo que respecta al acceso al agua. En el Africa subsahariana, el acceso aumento en forma marginal, del 49% en 1990 al 58% en 2002.<6) La OMS (Organization Mundial de la Salud) recomienda que en el agua para beber haya 0 colonias de Coliformes por 100 ml de agua. (6) Por tal razon la secretaria de salud modifica la Norma Oficial Mexicana, con la finalidad de establecer un control sanitario al agua que se somete a tratamiento de potabilizacion para efecto de hacerla apta para uso y consumo humano con acorde a las necesidades. (A,a) La NOM-127-SSA1-1994 salud ambiental. Agua para uso y consumo humano. Limites Permisibles de calidad y tratamientos a que debe someterse el agua para su potabilizacion. Esta norma oficial mexicana establece los limites permisibles de calidad y los tratamientos de potabilizacion del agua para uso y consumo humano, que deben cumplir los sistemas de abas^ecimiento publicos y privados o cualquier persona fisica o moral que la distribuya.<Aa) La NOM-092-SSA1-1994. Bienes y servicios. Metodo para la cuenta de bacterias aerobias en placa. Esta norma oficial mexicana establece el metodo para estimar la cantidad de microorganismos viables presentes en el agua, por la cuenta de colonias en un medio solido. Esta norma es de observancia obligatoria en el territorio nacional para las personas fisicas o morales que requieran efectuar este metodo.<A,C) La NOM-112-SSA1-1994 Bienes y servicios. Determination de bacterias Coliformes. Tecnica del numero mas probable. Esta norma mexicana establece el metodo microbiologico para estimar el numero mas probable. Se aplica a agua potable. Esta norma es de observancia obligatoria en el territorio nacional para personas fisicas o morales que requieran efectuar este metodo, para fines oficiales. <A b) Estas normas fueron utilizadas para la realization del analisis microbiologico del agua ESTUDIOS REALIZADOS EN OTROS LUGARES En 1996 y 1997. Dos acueductos pertenecientes a las municipalidades de Cartago y San Marcos presentaron contamination En los resultados del analisis microbiologico se detectaron Coliformes fecales en el agua de la naciente (NMP/100mL=7,3) y en la red de distribution (NMP/100mL=2.1) pero no en el tanque de almacenamiento. En la inspection sanitaria los resultados obtenidos fueron cinco grados en la naciente, siete en el tanque de almacenamiento. (10) En la primavera de 1998 hubo un brote de gastroenteritis aguda en Guadarrama (Comunidad de Madrid, Espaiia) que afecto sobre todo a ninos en edad preescolar En la primavera de 1998 hubo un brote de gastroenteritis aguda en Guadarrama (Comunidad de Madrid, Espaiia) que afecto sobre todo a ninos en edad preescolar Los resultados de la investigation epidemiologica sustentan que el origen del brote de gastroenteritis por Cryptosporidium parvum file el agua del grifo. Aunque no se detecto este parasito en los analisis de agua.(11) En 1996 yl997 se llevo acabo un estudio en 31 ciudades cubanas con el objetivo de determinar si habia una relation entre la calidad del agua de consumo y la frecuencia de enfermedades diarreicas. Las mediciones se hicieron en 2045 puntos claves de las redes de distribution de agua de las ciudades estudiadas. Los porcentaje por el numero mas probable de Coliformes en todo el territorio fueron de 87.0 y 76. 5 % respectivamente, es decir <9.2/100ml (12) El 30 de octubre del 2004 se realizo otra medicion con la presencia de personal calificado de la universidad Federico villa real y se realizo el agua de una cisterna que provee la zona, encontrando el agua no apta para el consumo humano segun la ley general del agua, norma tecnica peruana y estandares de calidad del agua de la OMS sus resultados fueron los siguientes: Coliformes Totales 2400NMP UFC/lOOml y los Mesofilos ftieron de 103 UFC/ml CAPITULO II JUSTIFICACION Y OBJETIVOS JUSTIFICASION La justification del presente trabajo se encuentra dentro del marco de la microbiologia sanitaria del agua potable, ya que muchas ciudades del estado de Veracruz, a pesar de tener una red de distribution de agua potable, esta no cumple con los parametros de calidad estipulados en la NOM-127SSA- 1994. Las comunidades que seran estudiadas son : El Conejo, Municipio de Perote y El Chico, Municipio de Emiliano Zapata que se encuentran localizadas dentro del Estado de Veracruz. El presente tema es seleccionado por la problematica que presentan dichas comunidades al no contar con un tratamiento del agua y la distribution de redes de abastecimiento aptas para su uso y consumo; lo cual traen como consecuencias enfermedades causadas por bacterias como la salmonella, shigella. E.coli y el vibrio del colera. Por tal razon en este estudio microbiologico se llevara a cabo la determination de Coliformes totales por el Numero mas probable (NMP) y Mesofilos ya que estos son causantes de dichas enfermedades. OBJETIVOS Objetivo General Evaluar la calidad microbiologica del agua potable que abastece a las comunidades de El Conejo, Municipio de Perote Ver., y El Chico Municipio de Emilio Zapata de acuerdo con la NOM-127-SSA1 -1994. Objetivos Particulares. • Identificar la presencia de Coliformes totales por el numero mas probable (NMP) y Mesofilos en el agua potable de la comunidad de El Conejo Municipio de Perote. • Identificar la presencia de Coliformes totales por el numero mas probable (NMP) y Mesofilos en el agua potable de la comunidad de El Chico Municipio de Emiliano Zapata. • Verificar que esten dentro de los limites que indica la NOM-127-SSA 1 -1994 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ^E1 agua potable que consumen los habitantes de las comunidades de El Conejo Municipio de perote y El Chico Municipio de Emiliano Zapata cumplen NOM-127-SSA1-1994? microbiologicamente con la CAPITULO III METODOLOGIA MATERIAL Y METODOS Para cumplir como los objetivos propuestos en el presente trabajo del analisis microbiologico de las muestras de agua se siguio la metodologia indicada en el presente diagrama de flujo No. 1 Diagrama de flujo No. 1 Metodologia de Trabajo El C o n e j o (Vliinicipio rip Poiote » El C h i c o • I/hmicipio de Emiliano Zapata DESCRIPCION DE LAS ZONAS DE MUESTREO El Conejo El cofre de perote se encuentra ubicado en el extremo centro oeste del estado de Veracruz dentro de los 19°40o,19°20C) y abarca parcialmente los municipios de Perote, Xico, Ayahualulco y Rafael Ramirez. (15) La montana se extiende aproximadamente a 40km en una direction norte sur y 30km.Sus limites los podemos establecer de la siguiente forma: al norte el pueblo de las vigas, al sur los pueblos de Ayahualulco e Ixhuacan de los Reyes, al este Xalapa y Coatepec y al oeste el valle de Perote. (I5) La Comunidad de El Conejo Municipio de Perote Veracruz, se encuentra ubicada dentro de los 19°26, 19°32 latitud norte y 97° 06, 97°15 longitud oeste, a una altitud norte de 3300 m.s.n.m localizado a 15 km de la carretera federal Xalapa - Perote. (15) Fotografia de la Comunidad del Conejo Clima El clima es de gran interes ya que en una corta distancia se encuentran diferentes climaticas muy marcadas, condicionadas por la altitud y la orientation de la montana El tipo de clima de la zona de estudio son muy frios que se distribuyen en los lugares cuyas altitudes se encuentran entre los 2800 y 3800 m.s.n.m.<15) Contexto Fisico La comunidad del Conejo no cuenta con una mancha urbana definida, ni posee un patron de crecimiento urbano. Se observa que la traza urbana presenta caracteristicas que se puede decir que las casas estan dispuestas a lo largo de la calle distinguiendose una avenida principal que atraviesa todo el pueblo extendiendose ramificaciones las cuales comunican hacia parte de casas y los cultivos Esta comunidad se dedica principalmente al cultivo de papa, forraje y el ganado de tipo caprino: chivos y borregos. Los hombres trabajan en sus campos y algunos se dedican a la realization del tabique que se encuentra fiiera de la comunidad. (l5) Vida Rural Los nucleos campesinos se encuentran mas cerca de los pueblos primitivos que del hombre civilizado de nuestros dias. Puede decirse que carecen de una vida social. Las comunidades mas atrasadas se hallan sumergidas en el seno de una naturaleza hostil o precaria que no han podido dominar con sus tecnicas rudimentarias de trabajo. se adaptan al medio en que viven, sus costumbres y tradiciones, soportando las condiciones mas adversas. Viviendo en casas muy sencillas en compania de sus animales domesticos. El hogar campesino es la celula social que conserva la herencia biologica y cultural de la comunidad. Ahi nace el hijo se educa y adquiere los usos y costumbres de sus mayores. Decir medio rural es el aislamiento. estancamiento economico, desconfianza, pobreza social (15) Mapa de la Localization geografica de El Conejo El Chico Se encuentra ubicado en una zona central del estado, las coordenadas de 20° 15 latitud norte y 97° 24 latitud oeste, a una altura de 885 m. sobre el nivel del mar. Limita al norte con Actopan al suroeste con Puente Nacional, al sur con Agazapan y Jacomulco, al oeste con Coatepec, al noroeste con Xalapa al norte con Naolinco. Clima Su clima es templado humedo con una temperatura promedio de 25.2°C, su precipitation fluvial media anual es de 2.779 ml. ' . ' » . ^ * . .i. J. w • ,* • •Pagina » „., LL , i j* * - v . •*\ * , 4 ,. - - . , ' ^• „ \• • i , OBTENCION Y TOMA DE MUESTRAS Se obtuvieron 10 muestras de agua de cada comunidad para el estudio microbiologico, El abastecimiento para la comunidad de El Conejo proviene de manantial producto del escurrimiento y filtration de las faldas del cofre de Perote, almacenada en un tanque y distribuida con mangueras de plastico, mientras que el agua que abastece a El Chico es de un nacimiento la cual es entubada hacia la caja de abastecimiento central y posteriormente conectada a diferentes tanques que entran a la red de distribution por mangueras de PVC . En ambos sitios de estudio los tanques no tienen tratamientos de cloracion solo son lavados dos veces por ano. Esto trae como consecuencias contaminantes microbiologicas por lo cual los habitantes se veran afectados en sus condiciones de vida. El analisis de agua que se lleva a cabo es de tipo microbiologico y de gran importancia ya que nos permite conocer la calidad del vital liquido. Todas las muestras de agua fueron transportadas al laboratorio en recipientes de plasticos de boca ancha esteril, debidamente etiquetada de acuerdo a su orden de recoleccion. estas se depositaron en hieleras con bolsas de refrigerantes. A una temperatura de 4 a 10° C cuidando de no congelar las muestras. Las muestras de la comunidad de El Conejo se colectaron el dia 4 de diciembre del 2006. el pH de las muestras fue de 8.3, una temperatura de 7°C. Las muestras de la comunidad de El Chico se colectaron el dia 12 de marzo del 2007, con un pH de 6.5, una temperatura de 19°C De acuerdo al tipo de muestra de agua su forma de colecta fue la siguiente Agua de la red de distribution (agua de la Have o de filtro conectados a la red), Toma la temperatura y pH del agua y las precauciones para evitar una contamination del sitio y obtencion de una muestra representativa para el analisis fueron Limpiar la boca de la Have o salida del agua con una torunda o gasa para eliminar suciedad y oxido, asi como abrir la Have y dejar correr el agua por 1 minuto. En muestras procedentes de tanques o cisternas (aguas estancadas), se tomaron las siguientes consideraciones: Introducir el frasco destapado con la boca hacia abajo, sosteniendolo por la base y girarlo e impulsarlo suavemente hacia arriba para llenarlo a 2/3 de su capacidad. Posteriormente fueron etiquetadas indicando la fecha, hora, pH y la temperatura. (a,d) En la Tabla No. 2 Se describe el lugar de obtencion de las muestra de agua potable en la comunidad de El Conejo. Numero de Sitio de obtencion muestra * De la manguera que abastece al 1 tanque de la zona norte 2 Del Tanque de abastecimiento 3 Proviene de la manguera de • salida del tanque que distribuye el agua a la comunidad 4 Toma de una casa zona norte 5 Obtenida de unos lavaderos publicos 6 Toma de una casa zona centra 7 Obtenida de la manguera que abastece al segundo tanque de la zona sin- 8 Del tanque de abastecimiento zona sur 9 Tomada de la manguera de salida del tanque zona sur 10 Toma de una casa zona sur En la Tabla No.3 se describe el lugar de obtencion de las muestras de El Chico. Toma del tubo de salida del tanque principal de abastecimiento. Toma de una casa zona norte Tomada de la segunda caja de almacenamiento que se encuentra en la zona norte. Toma de una casa zona norte Toma de una casa zona centro Toma de una casa zona centro Toma de una casa zona sur Toma de una casa zona sur Tomada de un flltro de casa. 10 Toma de una casa zona norte PROCEDIMIENTO Identificacion de Coliformes totales por el metodo del numero mas probable (NMP) Para la identificacion y cuantificacion de microorganismos Coliformes se utilizo el medio de cultivo caldo lactosado rojo fenol que es un medio selectivo para el crecimiento de Enterobacterias. La preparation de los tubos para la inoculation, se describe a continuation: Se preparo una serie de 5 tubos por cada muestra, los 3 primeros tubos son de concentration doble con 20 ml de caldo lactosado, el 4 y 5 tubo son de concentration sencilla con 10 ml de caldo lactosado colocando la campana de durham. Se agregaron 10 ml del agua problema en los 3 primeros tubos de concentration doble. Al 4 tubo se le agrego un 1 ml del agua problema. Al 5 tubo se le agrega 0.1 ml del agua problema. Todos los tubos fueron mezclan e incubados en la estufa a 37°C durante 48 hrs. Transcurrido el tiempo se observo si existe production de gas, lo cual indica una prueba positiva, si esta resulta positiva se realizara la prueba confirmatoria en caldo de verde de bilis brillante. PRUEBAS CONFIRMATORIAS Para realizar la prueba confirmatoria se realizaron los siguientes procesos Se coloca en un tubo con 10 ml de caldo verde de bilis brillante una campana de durham. Posteriormente se toma una asada de cada tubo para inocular al caldo. Se mezcla y se colocan en la estufa a 37 °C durante 48 hrs y la production de gas indica que la prueba es positiva. Identificacion y cuantificacion de Mesofilos Aerobios Microorganismos que se encuentran a temperatura ambiente. Para la determination de Mesofilos Aerobios se utilizo el medio de cultivo agar metodo estandar que sirve para la determination de microorganismos como son Estreptococos y Estafilococos. Se coloca una serie de 10 cajas petri, con 1 ml de la muestra problema cada una, sobre el cual se adiciona el medio de cultivo y se imprime una rotation de 30 giros hacia las manecillas del reloj y en contra por un espacio de 1 min. El medio se deja solidificar, para luego incubar a 37°C durante 48 hrs. Despues de este periodo de incubation se observa si hay crecimiento de colonias aparecidas expresando el resultado en unidades formadoras de colonias (UFC) CAPITULO IV RESULTADOS Y CONCLUSIONES RESULTADOS Los resultados presuntivos para la identificacion de Coliformes totales en las muestras de agua, procedentes de la comunidad de El Conejo se muestra en la tabla No. 4, en la que se indica el numero de muestra, asi como el resultado de los tubos positivos con 10 ml de muestra a una concentration doble, 1 ml y 0.1 ml a concentration sencilla y la prueba confirmatoria. Tabla No.4 Resultados de la comunidad de El conejo Muestra 1 3 Tubos de concentraci6n doble con lOmlde muestra 3 Tubos positivos 2 3 4 5 6 7 8 9 10 3 Tubos positivos 3 Tubos positivos 3 Tubos positivos 3 Tubos positivos 3 Tubos positivos 2 Tubos positivos 2 Tubos positivos 3 Tubos positivos Negativo 1 Tubo de 1 Tubo de concentraci6n concentraci6n sencilla con sencilla con 1 ml de 0.1 ml de muestra muestra Negativo 1 Tubo positivo Pruebas confirmatorias Positivas 1 Tubo positivo Negativo Negativo Positivas Negativo Positivas Negativo Negativo Positivas 1 Tubo positivo Negativo Negativo Positivas Negativo Positivas Negativo Negativo Positivas Negativo Negativo Positivas Negativo Negativo Positivas Negativo Negativo Negativo Como se observa en la tabla las muestras de la 1 a la 9 fueron muestras que presentaron un aspecto turbio, con production de gas dando positivas la prueba confirmatoria. Ambas pruebas indican la presencia de Coliformes totales. Solo la muestra numero 10 dio negativo todas las pruebas. De acuerdo a los resultados anteriores se procedio a la realization del calculo del numero mas probable conforme con lo indicado a la NOM-127-SSA1-1994. Estos resultados indican el indice del numero mas probable por 100 ml de muestra (NMP/100ml), y las UFC/ml de Mesofilos aerobios. Tabla No.5 Calculo del numero mas probable (NMP/100ml) en la comunidad de El Conejo No. de Indice del Muestra NMP/100ml 1 39 < 1 UFC/ml 2 23 < 1 UFC/ml 3 23 < 1 UFC/ml 4 23 < 1 UFC/ml 5 43 < 1 UFC/ml 6 23 < 1 UFC/ml 7 23 < 1 UFC/ml 8 23 < 1 UFC/ml 9 23 < 1 UFC/ml 10 Menos 3 < 1 UFC/ml Foto 1 Aspecto de las muestras positivas Mesofilos UFC/ml Foto 2 Aspecto de las pruebas conflrmativas Los resultados presuntivos para la identificacion de Coliformes totales en las muestras de agua, procedentes de la comunidad de El Chico se muestra en la tabla No. 6, en la que se indica el numeros de muestra, asi como el resultado de los tubos positivos con 10 ml de muestra a una concentration doble, 1 ml y 0.1 ml a concentration sencilla y la prueba confirmatoria Tabla No.6 Resultados de la comunidad de El Chico 3 Tubos de concentration doble con 10 ml de muestra 1 Tubo de concentration sencilla con 1 ml de muestra 1 Tubo de concentration sencilla con 0.1 ml de muestra Pruebas confirmatorias 1 2 Tubos positivos Negativo Negativo Positivas 2 2 Tubos positivos Negativo Negativo Positivas 3 3 Tubos positivos Negativo Negativo Positivas 4 3 Tubos positivos Negativo 1 tubo positivo Positivas 5 2 Tubos positivos 1 tubo positivo Negativo Positivas 6 3 Tubos positivos 1 tubo positivo Negativo Positivas 7 2 Tubos positivos 1 tubo positivo 1 tubo positivo Positivas 8 3 Tubos positivos 1 tubo positivo Negativo Positivas 9 3 Tubos positivos Negativo ' Negativo Positivas 10 1 Tubos positivos Negativo Negativo Positivas Muestra Como se observa en la tabla las muestras de la 1 a la 10 fueron muestras que presentaron un aspecto turbio, con production de gas dando positiva a la prueba confirmatoria. Como ya se hablo anteriormente Ambas pruebas indican la presencia de Coliformes totales. De acuerdo a los resultado's anteriores se procedio a la realization del calculo del numero mas probable conforme lo indicado la NOM-127-SSA1-1994. Estos resultados indican el indice del numero mas probable por 100 ml de muestra (NMP/100ml), y las UFC/ml de Mesofilos aerobios. Tabla No.7 Calculo del numero mas probable (NMP/100ml) En la comunidad de El Chico. No. de Indice del Muestra NMP/100ml 1 23 < 1 UFC/ml 2 23 < 1 UFC/ml 3 23 2 UFC/ml 4 39 9 UFC/ml 5 23 1 UFC/ml 6 23 1 UFC/ml 7 39 2 UFC/ml 8 23 10 UFC/ml 9 23 < 1 UFC/ml 10 Menos 3 <1 UFC/ml Foto 1 Aspecto de las muestras positivas Mesofilos UFC/ml | Foto 2 Aspecto de las pruebas confirmativas CONCLUSIONES Se realizo un estudio microbiologico de agua potable en dos comunidades pertenecientes al estado de Veracruz presentando contamination para Coliformes totales con un indice del numero mas probable (NMP/lOOml 23 a 43) el las comunidades de El Conejo y el Chico. Para la cuantificacion de Mesofilos solo El Chico obtuvo un rango de 1 a 9UFC/ml. En la inspection sanitaria los resultados obtenidos de ambas comunidades no estan dentro de los limites permisibles que indica la NOM - 127 - SSA1 - 1994. Valores de Referencia Permisibles en agua potable Valores de Referencia: Coliformes Totales 2 NMP/100 ml MESOFILOS 2 UFC/ml RECOMENDACINES Debido a la problematica de contamination del agua potable que existe en ambas comunidades se les sugiere las siguientes recomendaciones. 4- Se recomienda un monitoreo microbiologico a los tanques y a las redes de abastecimiento. 4- Establecer una serie de medidas en relation con las condiciones sanitarias de los suministros. tales como la elimination de sus mangueras de plastico, la utilization de letrinas y la defecation al aire libre. 4- Realizar campanas de education y concientizacion sobre habitos higienicos y medidas de prevention contra las infecciones intestinales transmitidas por el agua. 4 Se recomienda la cloracion del agua y como otra medida de prevention de contaminantes es la de hervir el agua. 4- Tratamiento por filtration en carbon activo y coagulation Bibliografias 1 .-Agua - Wikipedia, la enciclopedia libre www.es.wikipedia.org/wiki/Agua 14 de Diciembre 2006 2.-El agua - Monografias.com www.monografias.com/trabajosl6/agua/agua.shtml 14 de Diciembre 2006 3.-Propiedades del Agua http://www.visionlearning.com/library/module_viewer.php?mid=57&l=s 9 de Enero 2007 4.- Libros de conceptos de bioquimica. 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A Paginas: 40,41,58, 61, 99 - 101, 117 - 123, 189 - 193,219,220 ANEXOS A,a.- NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 127- SSA1- 1994 "SALUD AMBIENT AL, AGUA PARA USO Y CONSUMO HUMANO- LIMITES PERMISIBLES DE CALIDAD Y TRATAMIENTO A QUE DEBE SOMETERSE EL AGUA PARA SU POTABILIZACION A,b.- NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 112-SSA1- 1994, BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACION DE BACTERIAS COLIFORMES. TECNICA DEL NUMERO MAS PROBABLE A,c.- NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 092-SSA1-1994, BIENES METODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS AEROBIAS EN PLACA. A,d.- LABORATORIOS RIVAS TECNICA PARA LA RECOLECCION DE MUESTRA Y SERVICIOS