1.13300.0001 ¡““““““ “““““ ““““ ¶ Microbiología Bactident® Oxidasa para detección de la citocromooxidasa en microorganismos ¢[[[[[[[[[[[[[] Técnica Con el asa de inoculación tomar del medio de cultivo una colonia aislada, que haya crecido bien. Aplicar la colonia sobre la zona reactiva y frotar con el asa de inoculación. Producto sanitario para diagnóstico in vitro Contenido: 50 varillas indicadoras Para uso profesional solamente Empleo Para detección de la citocromooxidasa en microorganismos. Al cabo de aprox. 20 a 60 segundos comparar con la escala colorimétrica. Composición La zona reactiva de una tira de ensayo contiene: dicloruro de N,N-dimetil-1,4-fenilendiamonio 0,1 µmol; 1-naftol 1,0 µmol. Fundamento La citocromooxidasa es un enzima del grupo de la porfirina férrica may difundido en la naturaleza. Ella oxida el citocromo c reducido y entonces se transforma ella misma en la forma reducida e inactiva. Por transferencia de los electrones a oxígeno molecular la citocromooxidasa se transforma de nuevo en la forma activa. En presencia de oxígeno molecular el sistema citocromooxidasa/citocromo c puede reducir toda una serie de sustancias orgánicas, entre otras el llamado reactivo NaDi (1-naftol + dimetilparafenilendiamina) con formación de la molécula de condensación, azul de indofenol. Esta reacción se emplea para clasificar e identificar bacterias. Empleo Cada vez se examinan las colonias individuales crecidas sobre un medio de cultivo, o, en el caso de cultivos puros, un asa de inoculación. La reacción puede realizarse, en lugar de con la masa bacteriana, con una suspensión espesa de bacterias. „Para evitar resultados falsamente positivos trabajar exclusivamente con asas de platino.“ Ver instrucciones generales para uso Estabilidad Ver fecha de caducidad. Tomar solamente la correspondiente cantidad de varillas que se necesite. No tocar las zonas reactivas de la varilla indicadora. Cerrar inmediatamente de nuevo los recipientes. No son utilizables las varillas indicadoras con zona reactiva coloreada intensamente de pardo. Almacenar a la temperatura indicada. Almacenaje Almacenar en lugar fresco, seco y en recipiente bien cerrado de +2 °C a +8 °C. Eliminación correcta Después de usarlas, las varillas indicadoras deben eliminarse de la misma manera que el material bacteriano. Esto puede realizarse mediante combustión, tratamiento en autoclave o introducción en una solución desinfectante del 5 hasta el 6%, durante mínimo 6 horas. Evaluación En el caso de gérmenes citocromooxidasa-positivos la zona reactiva se colorea de azul a violeta azulado. Microorganismos oxidasa-positivos importantes en medicina Neisseria (todas las especies) Actinobacillus lignieresii Aeromonas spp. Actinobacillus equuli Pasteurella spp. Bordetella pertussis Vibrio spp. Bac. anthracis Cordiobacterium hominis Bac. subtillis Pseudomonas spp. Brucella spp. Flavobacterium spp. Chromobacterium spp. Alcaligenes spp. Eikenella corrodens Moraxella spp. Plesiomonas spp. Campylobacter spp. Branhamella catarrhalis Micrococcus spp. Microorganismos oxidasa-negativos Staphylococcus spp. Pseudomonas mallei Streptococcus spp. Pseudomonas maltophilia Gemella haemolysans Bordetella parapertussis Peptococcus spp. Actinobacillus Peptostreptococcus spp. actinomycetem-comitans Leuconostoc spp. Anaerobier (todos) Corynebacterium spp. Haemophilus spp. Listeria spp. Pasteurella haemolytica Lactobacillus spp. tipo T Bacillus spp. Streptobacillus Enterobacteriaceae Mycoplasma spp. (todos los géneros) Acholeplasma spp. Acinetobacter spp. Nota: Se recomienda realizar siempre un ensayo de control con un cultivo negativo (p.ej. E. coli), con un cultivo débilmente positivo (p.ej. Pasteurella) y con un cultivo fuertemente positivo (p.ej. Pseudomonas o Aeromonas). Para este ensayo son adecuados sobre todo cultivos de medios nutritivos sin colorantes, indicadores o inhibidores. Si el cultivo bacteriano mismo muestra un color, debe tenerse en cuenta esto al evaluar el ensayo. Las colonias de bacterias que fueron tomadas de medios con valores de pH por debajo de 5,5 (p.ej. tras metabolismo de hidratos de carbono y acidificación consiguiente del medio de cultivo), pueden mostrar una reacción de oxidasa falsamente negativa. En estos casos, los microorganismos, antes de la identificación de oxidasa, deberían someterse a un pasaje intermedio a un medio, en el cual no pueda tener lugar una disminución del valor del pH por debajo de 6,0 debido a la correspondiente bacteria. Version 2007-10-29 Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Germany, Tel. + 49 (0)61 51 72-2440, www.merck.de
