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Microbiología
Bactident® Oxidasa
para detección de la citocromooxidasa
en microorganismos
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Técnica
Con el asa de inoculación tomar del
medio de cultivo una colonia aislada,
que haya crecido bien.
Aplicar la colonia sobre la zona reactiva y frotar con el asa de inoculación.
Producto sanitario para diagnóstico in vitro
Contenido: 50 varillas indicadoras
Para uso profesional solamente
Empleo
Para detección de la citocromooxidasa en microorganismos.
Al cabo de aprox. 20 a 60 segundos
comparar con la escala colorimétrica.
Composición
La zona reactiva de una tira de ensayo contiene:
dicloruro de N,N-dimetil-1,4-fenilendiamonio 0,1 µmol;
1-naftol 1,0 µmol.
Fundamento
La citocromooxidasa es un enzima del grupo de la porfirina férrica may difundido en la naturaleza. Ella oxida el
citocromo c reducido y entonces se transforma ella
misma en la forma reducida e inactiva. Por transferencia
de los electrones a oxígeno molecular la citocromooxidasa se transforma de nuevo en la forma activa.
En presencia de oxígeno molecular el sistema citocromooxidasa/citocromo c puede reducir toda una serie de
sustancias orgánicas, entre otras el llamado reactivo
NaDi (1-naftol + dimetilparafenilendiamina) con formación
de la molécula de condensación, azul de indofenol.
Esta reacción se emplea para clasificar e identificar bacterias.
Empleo
Cada vez se examinan las colonias individuales crecidas
sobre un medio de cultivo, o, en el caso de cultivos
puros, un asa de inoculación. La reacción puede realizarse, en lugar de con la masa bacteriana, con una suspensión espesa de bacterias.
„Para evitar resultados falsamente positivos trabajar
exclusivamente con asas de platino.“
Ver instrucciones generales para uso
Estabilidad
Ver fecha de caducidad.
Tomar solamente la correspondiente cantidad de varillas
que se necesite. No tocar las zonas reactivas de la varilla
indicadora. Cerrar inmediatamente de nuevo los recipientes. No son utilizables las varillas indicadoras con zona
reactiva coloreada intensamente de pardo. Almacenar a
la temperatura indicada.
Almacenaje
Almacenar en lugar fresco, seco y en recipiente bien cerrado de +2 °C a +8 °C.
Eliminación correcta
Después de usarlas, las varillas indicadoras deben
eliminarse de la misma manera que el material bacteriano. Esto puede realizarse mediante combustión, tratamiento en autoclave o introducción en una solución desinfectante del 5 hasta el 6%, durante mínimo 6 horas.
Evaluación
En el caso de gérmenes citocromooxidasa-positivos la
zona reactiva se colorea de azul a violeta azulado.
Microorganismos oxidasa-positivos importantes en medicina
Neisseria (todas las especies)
Actinobacillus lignieresii
Aeromonas spp.
Actinobacillus equuli
Pasteurella spp.
Bordetella pertussis
Vibrio spp.
Bac. anthracis
Cordiobacterium hominis
Bac. subtillis
Pseudomonas spp.
Brucella spp.
Flavobacterium spp.
Chromobacterium spp.
Alcaligenes spp.
Eikenella corrodens
Moraxella spp.
Plesiomonas spp.
Campylobacter spp.
Branhamella catarrhalis
Micrococcus spp.
Microorganismos oxidasa-negativos
Staphylococcus spp.
Pseudomonas mallei
Streptococcus spp.
Pseudomonas maltophilia
Gemella haemolysans
Bordetella parapertussis
Peptococcus spp.
Actinobacillus
Peptostreptococcus spp.
actinomycetem-comitans
Leuconostoc spp.
Anaerobier (todos)
Corynebacterium spp.
Haemophilus spp.
Listeria spp.
Pasteurella haemolytica
Lactobacillus spp.
tipo T
Bacillus spp.
Streptobacillus
Enterobacteriaceae
Mycoplasma spp.
(todos los géneros)
Acholeplasma spp.
Acinetobacter spp.
Nota:
Se recomienda realizar siempre un ensayo de control con un cultivo
negativo (p.ej. E. coli), con un cultivo débilmente positivo (p.ej.
Pasteurella) y con un cultivo fuertemente positivo (p.ej. Pseudomonas o Aeromonas). Para este ensayo son adecuados sobre todo
cultivos de medios nutritivos sin colorantes, indicadores o inhibidores. Si el cultivo bacteriano mismo muestra un color, debe tenerse
en cuenta esto al evaluar el ensayo.
Las colonias de bacterias que fueron tomadas de medios con valores de pH por debajo de 5,5 (p.ej. tras metabolismo de hidratos de
carbono y acidificación consiguiente del medio de cultivo), pueden
mostrar una reacción de oxidasa falsamente negativa. En estos
casos, los microorganismos, antes de la identificación de oxidasa,
deberían someterse a un pasaje intermedio a un medio, en el cual
no pueda tener lugar una disminución del valor del pH por debajo
de 6,0 debido a la correspondiente bacteria.
Version 2007-10-29
Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Germany, Tel. + 49 (0)61 51 72-2440, www.merck.de
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