NOMBRES: DOCENTE: Dr. Fernando Abasolo. CURSO: III Semestre ‘’’’. ASIGNATURA: Microbiología. TINCION GRAM Definición La tinción de Gram es una técnica de laboratorio que permite identificar distintos tipos de bacterias según se coloree su superficie, aportando información muy útil para orientar el tratamiento antibiótico. La tinción de Gram, también conocida como coloración de Gram, es una técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiológicos de las bacterias. Fue diseñada por Christian Gram, un científico danés, en el año 1884. El objetivo de Gram era conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poder estudiarlas y clasificarlas. La prueba resultó todo un éxito y pronto se convirtió en una técnica muy útil no solo para el estudio de las bacterias, sino también para poder identificarlas rápidamente en una infección y seleccionar el antibiótico más adecuado para tratarla. La técnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de cualquier origen (esputo, orina, pus, etcétera) que supuestamente contenga bacterias no identificadas. Los colorantes tiñen la pared de las bacterias de color morado y, tras unos minutos, se realiza un lavado del colorante. Después de eso puede que el colorante permanezca en la pared bacteriana o que se haya ido. En el primer caso permanecería el color morado, y se trataría de bacterias Gram positivas y, en el segundo, la pared tendría un color rosado, y serían Gram negativas. Fundamento La técnica de la tinción de gram fue ideada y desarrollada por Christan Gram en el año 1884. Para la realización de una tinción de gram se utilizan dos colorantes. Uno de carácter primario, como es el cristal violeta, y otro de contraste, como la safranina. También se utiliza un mordiente para la safranina, como es el lugol, y un decolorante como el alcohol/acetona. Esta tinción pone de manifiesto la afinidad tintorial de la pared, la cual depende de su composición para que el microorganismo sea considerado gram+ o gram-. Los microorganismos grampositivos se diferencian de los gramnegativos en que tienen más mureína, una pared celular monoestratificada y presencia de ácidos teitoicos. Los gram- tienen menos mureína, una pared celular biestratificada y no tienen ácidos teitoicos. Esta técnica sirve, junto a la morfología, para clasificar las bacterias como: 1 Cocos grampositivos. Bacilos grampositivos. Cocos gramnegativos. Bacilos gramnegativos. También existen bacterias en forma de espiral, catalogadas dentro de las bacterias gramnegativas, y bacterias con forma de coma o Vibrio que se incluyen dentro de los bacilos gramnegativos. La tinción de gram cuenta con limitaciones, ya que no sirve para clasificar bacterias como mycobacterias y mycoplasmas. Esto es debido a que las mycobacterias están encapsuladas y los mycoplasmas no poseen pared celular. Pese a su edad, es una técnica que se sigue utilizando hoy en día en los laboratorios de diagnóstico clínico. Los laboratorios de microbiología cuentan, incluso, con aparatos de tinción automática. Tras la realización de un frotis bacteriano a partir de una muestra cultivada, ésta se introduce en el aparato y se realiza la tinción de gram. Técnica 2
