GROCOTT Método de empleado para visualizar hongos

Bio Optica Milano S.p.A. • via San Faustino 58 • I-20134 Milano
Tel. +39 02.21.27.13.1 • Fax Acquisti/Export +39 02.21.54.155
Fax Assistenza/Contabilità +39 02.26.41.74.48 • Fax Vendite +39 02.21.53.000
GROCOTT
Para hongos
Ref: 043823
-
Número mínimo de test realizables ................................... 50
Tiempo de ejecución ........................................................ 1 hora y 50 minutos
Caducidad del producto .................................................... 1 año
Temperatura de almacenamiento ...................................... 4 ºC
Equipo complementario.................................................... Cubeta Coplin 50 ml,
probeta graduada, varilla
estufa
APLICACIÓN
Método de empleado para visualizar hongos en cortes de tejido
PRINCIPIO
En la mayoría de los micetos, la pared celular está constituida por quinina, polímero de la N-acetilglucosamina, a los cuales pueden asociarse polímeros de la D-glucosa, D-manosa, proteínas y lípidos. El
ácido crómico actúa sobre los grupos glicólicos y glicoamínicos presentes en la cadena polisacárida
oxidándolos a grupos aldehídicos con la consecuente ruptura de la cadena.
El nitrato de plata, que forma parte del complejo plata-metenamina, es reducido a plata metálica por
estos nuevos grupos aldehídicos, haciéndose así visible.
REACTIVOS
A- Solución de ácido crómico .............................................. 30
B- Solución de bisulfito de sodio.......................................... 30
C- Solución de hexametilentetramina .................................. 50
D- Solución de nitrato de plata............................................ 30
E- Solución de borato de sodio ............................................ 50
F- Solución de cloruro de oro .............................................. 30
G- Solución de tiosulfato de sodio ....................................... 30
H- Solución verde luz ......................................................... 30
ml
ml
ml
ml
ml
ml
ml
ml
MÉTODO
1- Llevar los cortes a agua destilada
2- Colocar sobre el corte 10 gotas de la solución A. Dejar actuar durante 20 minutos
3- Lavar con agua corriente pocos segundos.
4- Colocar sobre el corte 10 gotas de solución B. Dejar actuar durante 1 minuto
5- Lavar con agua corriente durante 5 minutos.
6- Lavar con 4 cambios de agua destilada
7- En una cubeta Coplin de 50 ml, poner 40 ml de agua destilada y agregar secuencialmente: 20
gotas del reactivo C, 10 gotas del reactivo D, 20 gotas del reactivo E. Agitar brevemente con
varilla de vidrio previamente lavada con agua destilada.
8- Introducir el porta en la cubeta e incubar durante 1 hora en estufa a 60ºC.
9- Sacar la cubeta de la estufa y dejar enfriar durante 10 minutos.
10- Lavar en agua destilada 6 veces.
11- Colocar sobre el corte 10 gotas del reactivo F y dejar reaccionar durante 3 minutos
Partita IVA - VAT Number: IT06754140157
Tribunale di Milano REA n. 1118800 – c.c.i.a.a. di Milano
Bio Optica Milano S.p.A. • via San Faustino 58 • I-20134 Milano
Tel. +39 02.21.27.13.1 • Fax Acquisti/Export +39 02.21.54.155
Fax Assistenza/Contabilità +39 02.26.41.74.48 • Fax Vendite +39 02.21.53.000
12- Enjuagar con agua destilada
13- Colocar sobre el corte 10 gotas del reactivo G. Dejar reaccionar durante 5 minutos.
14- Lavar con agua corriente
15- Colocar sobre el corte 10 gotas del reactivo H, dejar reaccionar 30 segundos
16- Deshidratar a través de la serie ascendente de alcoholes, xileno y montaje
RESULTADOS
Hongos ................................................................ nítidamente delineados de negro
Mucinas ................................................................................................. gris oscuro
Fondo .............................................................................................................. verde
Partita IVA - VAT Number: IT06754140157
Tribunale di Milano REA n. 1118800 – c.c.i.a.a. di Milano