MAY GRÜNWALD GIEMSA Método selectivo para

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MAY GRÜNWALD GIEMSA
Para cortes
Ref: 081802
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Número mínimo de test realizables ................................... 100
Tiempo de ejecución ........................................................ 35 minutos
Caducidad del producto .................................................... 2 años
Temperatura de almacenamiento ...................................... 15-25 ºC
Equipo complementario.................................................... pipeta graduada
probeta graduada 10 ml
APLICACIÓN
Método selectivo para diferenciar tipos celulares y para evidenciar parásitos en cortes de tejidos,
particularmente indicado para tejidos linfohemopyéticos. Esta coloración se emplea a menudo para
evidenciar el retículo endotelial
PRINCIPIO
El método utiliza dos colorantes en sucesión:
1. la solución de May Grünwald, formada por eosinato de azul de metileno que colorea los núcleos
de azul y el citoplasma de rojo-rosa
2. la solución de Giemsa constituida de azul de cloruro de metileno, azul de metileno eosinato,
celeste II eosinato que aumenta la intensidad de la coloración nuclear y la capacidad de
evidenciar selectivamente los elementos celulares.
En la evaluación de los resultados se debe recordar que el cuadro cromático está fuertemente
influenciado por el pH del agua de lavado u del tampón de dilución; la intensidad de la coloración
puede variar en función de los tiempos de diferenciación
REACTIVOS
A- Solución de may Grünwald ............................................. 30 ml
B- Solución de tampón 20X ................................................ 100 ml
C- Solución de Giemsa ....................................................... 30 ml
MÉTODO
1- Desparafinar los cortes y llevarlos a etanol de 70º
2- Preparación de la solución tampón:
Tomar 2 ml de la solución tampón concentrada B y diluirla en 40 ml de agua destilada. A esta
disolución la llamaremos “solución tampón B”
3- Colocar sobre el corte 10 gotas de la solución tampón B, dejar reaccionar durante 2 minutos.
4- Escurrir el portaobjetos y colocar 10 gotas del reactivo A y 5 gotas de la solución tampón B, dejar
reaccionar durante 5 minutos.
5- Pipetear 10 ml de la solución tampón B y lavar cuidadosamente el portaobjetos con ella.
6- Colocar en la cápsula D, 5 gotas del reactivo C y 15 gotas de la solución tampón B, agitar y
colocarla sobre el portaobjetos, dejar reaccionar durante 12 minutos. Secar al aire (no utilizar
fuentes de calor, estufas o planchas)
7- Diferenciar en
Etanol 95º durante 10 segundos
Etanol absoluto durante 30 segundos
Etanol absoluto durante 30 segundos
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8- Xileno y montaje
RESULTADOS
Núcleos ............................................................................................................azul
Citoplasmas basófilos .......................................................... de celeste a azul oscuro
Citoplasmas acidófilos .......................................................................................rosas
Bacterias ............................................................................................................azul
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