Scheda tecnica 130802 P.A.S. Periodic Acid Schiff Hotchkiss - MC Manus 04 – 130802 IVD Dispositivo médico-diagnóstico in vitro | Código CND: W01030799 Número mínimo de test realizables................ 100 Tiempo de ejecución................ 50 minutos Caducidad del producto.....................1 Temperatura de almacenamiento 2 - 8 °C Temperatura de transporte ... temperatura ambiente Equipo complementario....... no necesario Uso Preparación de muestras cito-histológicas para examinar por microscopía óptica. Aplicación Para la visualización de los componentes del tejido, normales o patológicos, caracterizados por la presencia de grupos glicólicos o aminohidroxílicos adyacentes en secciones histológicas (método 1) y sobre tiras hemáticas y citológicas (método 2). Principio La especificidad de este método se basa en la oxidación selectiva mediante ácido periódico, de los grupos: 1,2-glicólico, amínico primario (o 1 hidróxi- 2-amínico); amínico secundario (o 1-hidroxi-2alquilamínico) y 1-hidroxi-2-cetónico; hay, además, oxidación de algunos derivados metoxilicos y de alfacetona, pero que no se transforman en aldehído). Durante esta oxidación se produce la ruptura de la unión entre los átomos de carbón situados en la posición1,2 con la consecuente formación de grupos aldehídos. En la reacción sucesiva, los 2 grupos aldehídicos muy cercanos entre sí, son transformados por la fucsina sulfurosa del reactivo de Schiff, en un compuesto insoluble coloreado, parecido pero no igual, a la fucsina básica. Los requisitos necesarios para que estas reacciones se produzcan son: 1. Que los grupos hidroxílicos sean libres; 2. Que los compuestos, que se forman después de la oxidación, no se puedan difundir en el tejido; 3. Que los grupos aldehídicos de estos compuestos sean suficientemente numerosos, como para poder ser detectado histoquímicamente. Se puede ver claramente que sólo las macromoléculas como los polisacáridos y los mucopolisacáridos, responden a estas características. La elección del ácido periódico como oxidante, se debe al hecho de que bloquea la reacción de oxidación en el estadio aldehídico. Los mucopolisacáridos ácidos, a excepción de la heparina monosulfúrica, no reaccionan, pues la presencia del grupo –SO3H bloquea los grupos glicólicos reactivos. Sociedad productora: Bio-Optica Milano s.p.a. Pagina 1 di 3 Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 Scheda tecnica 130802 Método 1) Resultados Sustancias P.A.S. positivas .................................................................................................. Rojo magenta Núcleos ..............................................................................................................................................……Azul Reactivos Advertencias y precauciones Método para muestras histológicas: Llevar la muestra al agua destilada. Poner 10 gotas del reactivo A sobre la muestra: dejar actuar 10 minutos. Lavar en agua destilada. Poner 10 gotas del reactivo B sobre la muestra: dejar actuar 20 minutos. Lavar en agua destilada. Poner 10 gotas de la solución C sobre la muestra: dejar actuar 2 minutos. Escurrir el portaobjetos y, sin lavar, poner sobre la muestra 10 gotas del reactivo D: dejar actuar 2 minutos. Lavar en agua destilada. Poner sobre la muestra 10 gotas del reactivo E: dejar actuar 3 minutos. Enjuagar en agua corriente de grifo durante 5 minutos. Deshidratar en serie ascendente de los alcoholes, xileno y bálsamo. 2) Método para tiras hemáticas y citológicas: Poner las tiras que se han secado al aire en agua destilada. Poner 10 gotas del reactivo A sobre la tira: dejar actuar 10 minutos. Lavar en agua destilada. Poner 10 gotas del reactivo B sobre la tira: dejar actuar 20 minutos. Lavar en agua destilada. Poner 10 gotas de la solución C sobre la tira: dejar actuar 2 minutos. Escurrir el portaobjetos y, sin lavar, poner sobre la tira 10 gotas del reactivo D: dejar actuar 2 minutos. Lavar en agua destilada. Poner 10 gotas del reactivo E sobre la tira: dejar actuar 3 minutos. Enjuagar en agua corriente de grifo durante 5 minutos. Deshidratar en serie ascendente de los alcoholes, xileno y bálsamo. A) Ácido periódico ........................................................................................................... 30 ml B) Reactivo de Schiff .........................................................................................................30 ml C) Solución de metabisulfito de potasio............................................................................ 30 ml D) Solución fijadora............................................................................................................ 30 ml E) Hemalubre de Mayer ..................................................................................................... 30 ml El producto debe ser utilizado por personal técnico especializado. El producto esta clasificado como peligroso. Leer con cuidado las informaciones que están en la etiqueta (símbolos de peligro, frases de riesgo y de seguridad) y consultar siempre la ficha de seguridad donde se puede encontrar la información relativa a los riesgos presentados del preparado, adoptar medidas preventivas durante el uso y medidas de primeros auxilios en caso de vertido accidental. No utilizar en caso de que el recipiente primario tenga daños. Almacenamiento Conservar el preparado a 2 - 8 °C. Mantener los recipientes bien cerrados. Estabilidad Después de la primera apertura, el reactivo es válido hasta la fecha de caducidad indicada, únicamente si está correctamente guardado. Eliminación Residuos peligroso; gestionar por empresas especializadas y autorizadas, según la ley vigente. Bibliografía • • • Cook HC. Human tissue mucins. Lab. Aid Series - Baker Editor London Hotchkiss RD. A microchemical reaction resulting in the standing of polysaccaride structures in fixed tissue preparations. Arch Bioch 1948; 16: 131. Mc Manus JFA Periodic acid routine applied to kidney Amer J Path 1948; 24:643. Fecha de emisión: abril 2015 Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it Scheda tecnica 130802 Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it