Micropropagación de árboles adultos de ... multiplicación de brotes axilares y ...

Micropropagación de árboles adultos de encina mediante la
multiplicación de brotes axilares y vía inducción de embriogénesis
somática
M. T. Martínez, M. C. San José, E. Corredoira, F. J. Vieitez, M. J. Cernadas, R.
Montenegro, A. M. Vieitez
Departamento de Fisiología Vegetal, Instituto de Investigaciones Agrobiológicas de
Galicia (IIAG-CSIC), Avd. de Vigo s/n, 15705 Santiago de Compostela, La Coruña.
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La encina, Quercus ilex L., una de las Fagáceas más representativas del bosque
Mediterráneo, sufre un decaimiento progresivo, debido entre otras causas, a la
enfermedad conocida como "la seca". Esta problemática ha provocado una reducción de
sus masas forestales originando un problema ambiental grave que amenaza su
sostenibilidad.
El objetivo del trabajo es el establecimiento y mantenimiento in vitro de cultivos de
encina, mediante la proliferación de yemas axilares y posterior utilización de hojas y
ápices de los brotes micropropagados como explantos iniciales para inducir embriones
somáticos (ES), como vía eficaz para la multiplicación rápida de individuos
seleccionados.
Se han recogido estacas (25-30 cm) de la copa de ocho encinas seleccionadas en Quintos
de Mora (Toledo), genotipos Q2, Q3, Q6, Q7, Q8 y Q10 y en el Encín (Alcalá de
Henares), genotipos E00 y E2. Las estacas se trataron con fungicida y se sometieron a
brotación forzada en condiciones controladas. Los nuevos brotes se esterilizaron con
aplicación sucesiva de etanol de 70% y diferentes concentraciones/tiempos de hipoclorito
sódico; seguidamente se seccionaron segmentos nodales que fueron establecidos in vitro.
El proceso de esterilización fue crítico, siendo necesario la eliminación del etanol y el uso
de concentraciones/tiempos bajos de hipoclorito (0.3% de cloro libre 2-3 min.) para
conseguir el crecimiento in vitro de estos genotipos. Las tasas de contaminación oscilaron
entre 0-8%. Según el genotipo, entre 11-70% de los explantos respondieron positivamente
formando brotes.
La estabilización de los cultivos se ha logrado en seis de los ocho genotipos seleccionados
permitiéndonos utilizarlos como fuente de explantos para la inducción embriogénica. Los
primeros estudios realizados con material del Q3 y Q10 mostraron la posibilidad de
inducir ES en ápices caulinares cultivados en medios sin reguladores de crecimiento o
adicionados con AIA o ANA en combinación con BA, con tasas del 2-4% de inducción.
Se agradece al Dr. M. Toribio el suministro del material vegetal utilizado en este trabajo.
Este trabajo fue parcialmente financiado por el MINECO (España) mediante el proyecto
AGL 2013-47400-C4-3R.