1 ÍNDICE GENERAL Página I. DATOS GENERALES 3 1.1. Nombre del Proyecto 3 1.2. Ubicación geográfica 3 1.3. Período de ejecución 3 1.4. Facultades que presentan el Proyecto 3 1.5. Ejes temáticos prioritarios y línea de investigación 3 1.5.1. Eje temático 3 1.5.2. Línea de investigación 3 II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 3 2.1. Antecedentes del problema 3 2.2. Definición del problema 4 2.3. Formulación del Problema 4 2.4. Justificación e importancia 4 2.5. Limitaciones 4 III. OBJETIVOS 5 3.1. Objetivo general 5 3.2. Objetivos específicos 5 IV. MARCO TEÓRICO CONCEPTUAL 5 4.1. Antecedentes de la investigación 5 4.1.1. Sacha inchi 5 4.1.2. Bioempaques o biopelículas 8 4.2. Definición de términos 8 4.3. Bases teóricas 9 4.3.1. Composición del Sacha inchi 9 4.3.2. Procesos de elaboración de películas biodegradables (bioempaques) 10 4.3.2.1. Tipos de películas biodegradables 12 4.3.2.2. Películas biodegradables de proteína 12 4.4. Hipótesis 13 4.5. Sistema de variables 13 4.6. Escala de medición 13 V. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN 14 5.1. Tipo de investigación 14 5.2. Nivel de investigación 14 5.3. Diseño de investigación 14 5.4. Cobertura de investigación 16 5.5. Fuentes, técnicas e instrumentos de investigación 16 5.6. Procedimiento y presentación de datos 20 5.7. Análisis e interpretación de datos 20 VI. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS 20 6.1. Cronograma de actividades 20 6.2. Asignación de recursos 20 6.3. Presupuesto o costo del proyecto 21 6.4. Financiamiento 21 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 21 I. DATOS GENERALES 1.1. Nombre del Proyecto “Diseño y producción de películas biodegradables empleando torta de sacha inchi y glicerol” 1.2. Ubicación geográfica 2 El trabajo de investigación se realizará en los Laboratorios de Investigación, Control de Calidad e Ingeniería y Diseño de la Facultad de Ingeniería Agroindustrial de la UNSM–T, Ciudad Universitaria, Morales, Provincia y Región San Martín. 1.3. Período de ejecución del Proyecto El proyecto tendrá una duración de nueve meses, de Abril 2014 a Diciembre 2014. 1.4. Facultad (es) que presentan el Proyecto Las Facultades que estarán a cargo de la ejecución del proyecto serán la Facultad de Ingeniería Agroindustrial y la Facultad de Educación y Humanidades (a través del Departamento Académico de Ciencias Básicas). 1.5. Ejes temáticos prioritarios y línea de investigación 1.5.1 Eje temático Conservación, aprovechamiento y gestión sostenible de los recursos naturales 1.5.2 Línea de investigación Procesos agroindustriales de la producción agropecuaria y forestal de la Región San Martín II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 2.1. Antecedentes del problema En las últimas décadas el interés por sustituir a los polímeros sintéticos, que actualmente son utilizados como material de embalaje, está en aumento. Los materiales sintéticos garantizan una protección adecuada para diversos tipos de productos, pero presentan el inconveniente de no ser biodegradables, por tanto de difícil reciclaje, siendo responsables por gran parte de los residuos plásticos que se acumulan en el medio ambiente. Estos materiales contribuyen en un alto porcentaje del total de desperdicios en el mundo, causando serios disturbios ecológicos. Desde la década del 70 del siglo pasado, se han estudiado biopolímeros polares como polisacáridos y proteínas para sustituir los materiales plásticos derivados del petróleo, presentando como gran ventaja sobre ellos su característica biodegradable. De otro lado, en la región San Martín existe una gran variedad de materias primas que podrían ser utilizadas en la producción de biopelículas y películas comestibles, tal como la torta de sacha inchi, subproducto de la industria aceitera, que posee un alto contenido de proteínas. 3 2.2. Definición del problema La posibilidad de producir embalajes biodegradables a partir de materia prima de origen vegetal es un concepto atractivo, que ha sido poco estudiado en el país y en la Región San Martín. Las ventajas para la naturaleza serian considerables. Por un lado serian aprovechados al máximo los recursos generados, evitando el desperdicio, y por otro se disminuiría el volumen de basura no biodegradable, que actualmente representa un problema creciente y sin soluciones a corto y mediano plazo. 2.3. Formulación del Problema ¿Es factible desarrollar películas biodegradables o comestibles (bioempaques), con características físicas y mecánicas adecuadas para su uso en alimentos, empleando torta de sacha inchi y glicerol como plastificante? 2.4. Justificación e importancia En la Región San Martín se viene incrementando la producción de sacha inchi y, en consecuencia, la cantidad de torta resultante del proceso de extracción de aceite. Esta torta, que tiene un alto contenido de proteínas, puede ser utilizada para la producción de películas biodegradables (bioempaques), diversificando los usos de este subproducto, y contribuyendo en la sustitución de los empaques plásticos que afectan al ambiente. En este contexto, a través de la presente propuesta de investigación se pretende determinar la s condiciones adecuadas para producir biopelículas con adecuadas características físicas y mecánicas, que puedan ser empleadas en alimentos. Así mismo, el desarrollo de la presente propuesta puede contribuir para iniciar las relaciones entre Universidad, empresa y productores agrarios, como ocurre en otros países, como también para mejorar la formación profesional de los estudiantes mediante la investigación aplicada. 2.5. Limitaciones La Facultad de Ingeniería Agroindustrial de la Universidad Nacional de San Martín, pese a contar con docentes con experiencia en el campo de investigación agroindustrial, formados principalmente en universidades del exterior, tiene limitaciones en cuanto a instalaciones y equipos de proceso, lo cual puede ser parcialmente superado con la adquisición de materiales y equipos requeridos para la presente propuesta de investigación. III. OBJETIVOS 3.1. Objetivo general 4 Obtener películas biodegradables, con adecuadas características físicas y mecánicas, a partir de torta de sacha inchi y glicerol. 3.2. Objetivos específicos Evaluar el comportamiento reológico de las soluciones filmogénicas, a partir de las cuales se forman las películas biodegradables, antes del secado. Evaluar el efecto de la concentración de torta de sacha inchi y glicerol en las propiedades físicas y mecánicas de las películas biodegradables obtenidas. Fijar la isoterma de adsorción de vapor de agua de las biopelículas obtenidas. IV. MARCO TEÓRICO CONCEPTUAL 4.1. Antecedentes de la investigación 4.1.1. Sacha inchi Sacha inchi (Plukenetia volúbilis L.) (Figura 1) conocido también con los nombres de: “Sacha Inchic”, “Sacha Maní”, “Maní del Inca”, “Maní del Monte” , “Maní Jibaro”, “Inca Peanuts”, es una planta de la Amazonía Peruana conocida por los nativos desde hace miles de años, la utilizaron los preincas y los incas como lo testimonian cerámicas encontradas en tumbas (huacos Mochica-Chimú). La “Porra” o “Mazo” esta inspirada en la cápsula de 04 puntas del fruto (Proamazonia, s/a). (a) (b) Figura 1. Fruto de Sacha Inchi (Plukenetia volúbilis L.)¸(a), verde; (b), maduro. El "sacha inchi" es un producto de consumo muy popular en la población nativa y mestiza de algunas áreas rurales de San Martín. La semilla actualmente se consume tostada, cocida con sal, en confituras (turrón), en mantequilla y como ingrediente de diversos platos típicos como: inchi cucho (ají con maní), lechona api (mazamorra de plátano con maní), inchi capi (sopa de gallina con maní o sopa de res con maní), en los cuales reemplaza al maní. En algunos lugares 5 se obtienen aceites en forma artesanal para la alimentación y combustible de iluminación. Los frutos son cápsulas de 3 a 5 cm. de diámetro, dehiscentes de color verde intenso, cuando maduran son de color marrón oscuro (Figura 1.b); usualmente presentan 04 lóbulos, pero algunos frutos presentan de 05 a 07 lóbulos; las semillas se encuentran dentro de los lóbulos de las cápsulas; miden de 15 a 20 mm. de ancho, por 7 a 8 mm de espesor; el peso de Semillas, varia de 0,8 a 1,4 gr; en las semillas se encuentran los cotiledones a manera de almendras, cubiertas de una fina película blanquecina que cubre a la almendra que es la materia prima para la extracción del aceite; las semillas contienen de 49 a 54 % de aceite; composición de la Semilla es de 33 a 35% de Cáscara y 65 a 67% de almendra. Según Arévalo (s/a) y Valles (1990), el contenido de proteínas del Sacha Inchi es de 33%, y su perfil de aminoácidos, en algunos aspectos, es mejor que el de las otras semillas oleaginosas. Los niveles de leucina y lisina son más bajos que los de la proteína de la soya, aunque igual o mayor que los niveles de la proteína de maní, semilla de algodón o del girasol. El contenido de aminoácidos azufrados (metionina + cistina), tirosina, treonina y triptófano es mayor que en las otras oleaginosas. Agroindustrias Amazónicas (2005) reportó que el contenido de aceite es de 54% y su perfil de ácidos grasos es como sigue: palmítico, 3,85%; Esteárico, 2,54%; Oleico, 8,2%; Linoleico, 36,8 % y Linolénico 48,6 %. El aceite, por provenir de una especie vegetal, carece de colesterol, el sabor ligeramente amargo de la almendra cruda, que desaparece durante el cocido, el tostado y en la cocción por microondas (Arévalo, s/a). La cantidad de hectáreas sembradas y la producción de sacha inchi en la Región San Martín se presentan en el Cuadro 1. Puede verse que, entre los años 2005 y 2010, la producción se incrementó notoriamente, con el consecuente aumento de la extracción de aceite, destinado principalmente a la exportación, y de torta considerada como subproducto de la industria aceitera. El potencial agroindustrial del sacha inchi se presenta en la Figura 2, en la cual se consideran diversas aplicaciones para el aceite y la torta, que en la forma de harina podría ser utilizada para la producción de bioempaques; mientras que en la Figura 3 se presenta el proceso de extracción de aceite. Cuadro 1. Área sembrada y producción de Sacha inchi en la Región San Martín Año Superficie en verde (Hás) Superficie cosechada (Hás) 6 Producción (TM) 2005 1156 0 2006 1267 209,5 115,4 2007 1159 524 1447,25 2008 1755,5 882,5 2635,89 2009 1950,5 694,5 2165,65 2010 1922 742 2413,48 2011 1925 396,8 Fuente: GORESAM, DRASAM, Dirección de Estadística Agraria, Área de Estadística Agraria, 2014. Figura 2. Potencial agroindustrial del sacha inchi (IIAP, 2009) 7 Figura 3. Proceso de extracción de aceite de sacha inchi (Chirinos et al., 2009) 4.1.2. Bioempaques o biopelículas El empleo de embalajes o envolturas comestibles para la protección de alimentos se practica de forma empírica desde hace mucho tiempo. Por ejemplo, podemos citar la protección frente a la desecación e intercambios gaseosos de trozos de carne mediante recubrimiento con grasa (que se practica en Europa desde el siglo XVI), de algunos productos de bollería con azúcar o chocolate o de ciertas frutas por recubrimiento con películas de cera (practicado en China desde el siglo XII) (Bureau y Multón, 1995). El empleo de “hojas” lipoproteicas, obtenidas mediante secado de la “piel” formada durante la ebullición de la leche de soja, se utiliza tradicionalmente en Asia como material de embalaje para mejorar la presentación o conservación de ciertos alimentos. Algunos alimentos naturales, por ejemplo, el pan, disponen de una capa superficial protectora, la corteza, que se forma a lo largo de distintas operaciones como por ejemplo, la cocción, el secado o la fritura (Bureau y Multón, 1995). 4.2. Definición de términos Materia prima. La materia extraída de la naturaleza y que se transforma para elaborar materiales que más tarde se convertirán en bienes de consumo. Biopelícula. Película formada por materiales biodegradables (polisacáridos, proteínas, grasas), que puede ser utilizada como empaque. 8 Comportamiento reológico. Comportamiento de los materiales durante el flujo o sometidos a un esfuerzo. Propiedades mecánicas. Propiedades relacionadas con la resistencia de un material ante solicitaciones externas (tensión, compresión). Propiedades físicas. Atributos relacionados con la solubilidad, permeabilidad al vapor de agua, permeabilidad a los gases, adsorción de vapor de agua. 4.3. Bases teóricas 4.3.1. Composición del Sacha Inchi El sacha inchi ha sido objeto de varios estudios para la determinación de su composición química. La composición proximal del Sacha inchi proveniente de la Región San Martín, reportada por diferentes investigadores, es mostrada en el Cuadro 2; en el se puede observar que en el contenido de grasa y carbohidratos reportados difieren en gran medida, no ocurriendo esto en el contenido de proteínas, debido esto, posiblemente, al diferente lugar de cultivo. Cuadro 2. Análisis químico proximal de la almendra de Sacha Inchi (%) (1) (%)(2) (%)(3) Humedad 6,50 8,5 7,9 Grasa 51,59 41,7 40,5 Proteína 26,70 27,4 25,8 Ceniza 2,60 2,1 2,0 Fibra 3,44 2,5 3,0 Carbohidratos 9,17 17,7 20,8 Componentes (1) Vela (1995); (2)Ecotipo Lamas (Benavides y Morales, 1994); (3) Ecotipo Shanao (Benavides y Morales, 1994) Medina et al. (2007), en el estudio de la influencia del piso ecológico en la composición proximal del sacha inchi, reportaron que, como se observa en Cuadro 3, el porcentaje de proteínas obtenido del Sacha inchi proveniente del Pongo de Cainarachi fue elevado en comparación a los valores obtenidos de las semillas provenientes de pisos ecológicos de mayor altitud, notándose un aumento del contenido de proteínas con la disminución de la altitud. El contenido de grasa total obtenido en todas las muestras se encontraron en el rango reportado 9 por otros autores; notándose una aparente disminución de los valores obtenidos con la disminución de la altitud. Cuadro 3. Análisis Proximal de Sacha Inchi provenientes de cuatro pisos ecológicos Naranjos Chirapa 808 1134 msnm msnm 300 msnm Pongo de Cainarachi Ahuashiyacu Humedad, % 7,64 4,08 4,69 6,88 Proteínas crudas, % 33,11 33,4 34,97 45,26 Grasa bruta, % 43,89 44,52 38,25 40,65 2,8 2,56 2,49 2,40 Ceniza, % Los componentes del polvo atomizado (PA) y de la harina desgrasada por prensado (HD) de sacha inchi, según estudios realizados por el Instituto Nacional de Nutrición (Gómez– Sánchez et al., 1995, citado por Agroindustrias Amazónicas, 2005), se presentan en el Cuadro 4, en el cual se puede notar el elevado contenido de proteína en la harina desengrasada que puede destinarse a la elaboración de diversos platos o a la producción de películas biodegradables o bioempaques. Cuadro 4. Resultado de análisis de Polvo atomizado y Harina desgrasada de Sacha inchi Componentes Polvo atomizado (%) Harina desgrasada (%) Humedad 10,20 3,80 Proteína 46,67 47,79 Extracto etéreo 29,80 39,00 Fibra cruda 2,80 4,60 Cenizas 4,00 Fuente: Agroindustrias Amazónicas, 2005. 3,80 4.3.2. Procesos de elaboración de películas biodegradables (bioempaques) La elaboración de películas y coberturas comestibles envuelve la utilización de varios componentes, cada uno con una finalidad especifica. Los componentes principales son: el polímero formador de film, de alto peso molecular y el plastificante (Cuq et al., 1997). Los plastificantes son moléculas capaces de aumentar la plasticidad y flexibilidad de los polímeros, 10 tornándolos manipulables. Esto ocurre por la disminución de fuerzas intermoleculares, resultando en una mayor libertad de movimiento de cadenas. No es el caso de las proteínas, los plastificantes se integran a la red proteica modificando el número e intensidad de las interacciones moleculares, produciéndose interacciones proteínaplastificante con disminución de las interacciones proteína-proteína (Cuq et al., 1997). El efecto de contenido de plastificante utilizando la formulación de biofilmes a base de proteínas miofibrilares de carne bovina fue estudiado por Ocuno y Sobral (1998). Ellos encontraron que la permeabilidad al vapor de agua aumentaba con la concentración de plastificante y que esta propiedad también era influenciada por el tipo de plastificante empleado (sorbitol, glicerol, sacarosa). Los películas y coberturas son elaborados normalmente utilizando la denominada “vía húmeda” (Cuq, 1996); los filmes son formados a partir de una solución de dispersión filmogénica. Kester y Fennema (1986) describen tres mecanismos para la formación de películas comestibles a partir de soluciones. Una de ellas consiste en la simple agregación de polímero (vía evaporación de solvente, enlaces cruzados, cambio de pH, y la adición de un solvente inmiscible), agregación completa (vía interacciones entre diferentes polímeros) y gelatinización, cuando ocurre una transición sol-gel o por coagulación térmica. El secado de la solución filmogénica es el paso siguiente para la obtención de biopelículas; mediante esta operación produce un aumento de concentración de biopolímero, con consiguiente agregación de moléculas, formando una red tridimensional que constituye los filmes. La técnica más utilizada es la denominada “casting”. Esta técnica permite el control del espesor del film a través de la cantidad de materia seca (Gontard et al., 1992) y la variación de “espesor aparente” de soluciones en los moldes (Cuq et al., 1996). Otro componente de las películas es el ajustador de pH, que también influencia la solubilidad de proteína. El pH para trabajar con proteínas debe ser encima o debajo del pI, donde la proteína posee cargas disponibles para interactuar con el agua y aumentar, así, a su solubilidad el cual permitirá la formación de gel (Carvalho,1997). Existen muchos estudios que avalan el efecto del pH en las propiedades de las biopelículas. Wall y Beckwith (1969) obtuvieron películas a partir de una solución de gluten, ácido láctico y agua como solvente, pero ellos fueron muy quebradizos. Anker et al. (1972) describieron un método para solubilizar la proteína de trigo con calentamiento alcohólico y en medio alcalino. Biopelículas de proteína de gluten fueron elaborados con 20% de etanol y pH 5 (Gontard et al., 1992), en tanto las películas de gelatina fueron elaboradas utilizando agua destilada como 11 solvente y pH 5,6 (Carvalho, 1997; Sarmento, 1999). Películas de proteína miofibrilar de bovino fueron obtenidos utilizando agua destilada como solvente y pH 2,8 (Souza, 2001). Pérez y Krochta (2000) estudiaron el efecto de las condiciones de secado en la elaboración de películas de proteína de suero y de emulsiones proteína–lípido, encontrando que el aumento de la temperatura de secado a 40% de humedad relativa disminuye la permeabilidad al vapor de agua, en ambos casos, y también que las propiedades mecánicas no fueron afectadas por las condiciones de secado. 4.3.2.1. Tipos de películas biodegradables Los materiales básicos de los que están formados los revestimientos y películas se pueden clasificar en tres categorías: polisacáridos, proteínas y compuestos lipídicos. Los polisacáridos (celulosa, pectina, almidón, alginatos, quitosano, carragenatos y gomas vegetales y microbianas) poseen buenas propiedades para la formación de películas y adhesión a las superficies cortadas de los vegetales. Debido al carácter hidrofílico de estos compuestos, las películas que forman constituyen eficientes barreras frente a los lípidos, pero no frente a la humedad. Su principal función es el control del intercambio gaseoso. El quitosano (derivado parcialmente desacetilado y despolimerizado de la quitina) inhibe el crecimiento de diversos mohos y levaduras. Entre los polisacáridos, la celulosa y el quitosano son los dos materiales que se han empleado en recubrimientos para alargar la vida útil de productos vegetales (Pennisi, 1992). En el grupo de materiales proteicos ensayados hasta el momento se encuentra el colágeno, o la zeína, el gluten de trigo, la ovo albúmina, la proteína de soya, la caseína, etc. (Guilbert y Biquet, 1989). Las propiedades de barrera y mecánicas de los film a base de proteínas, en general, son mejores que los de polisacáridos, aunque no han sido estudiados tan extensamente como éstos últimos (Guilbert y Graille, 1994; Cuq et al., 1996). Poseen buenas cualidades para la formación de film y se adhieren bien a superficies hidrofílicas, pero en la mayoría de los casos no constituyen barreras al vapor de agua. Las proteínas de soya y las caseínas se han empleado en formulaciones para productos vegetales (Baldwin et al., 1995). 4.3.2.2. Películas biodegradables de proteína Los filmes a base de proteínas de alto peso molecular son generalmente insolubles o un poco solubles en agua, poseen buenas propiedades mecánicas (resistencia y flexibilidad) (Carvalho, 1997). 12 La elaboración de películas a base de proteínas envuelve varios componentes con finalidades específicas. De un modo general las formulaciones están constituidos por los siguientes compuestos: agente formador de películas (macromoléculas), agente plastificante, solvente y de ajuste de pH (Souza, 2001). Dentro de las proteínas utilizadas como agente formador de películas se destacan: las de origen animal, como gelatina (Carvalho, 1997; Sarmento, 1999), proteínas miofibrilares de peces (Monterrey y Sobral, 2000) y de bovino (Souza, 2001) y proteína de suero de leche (Miller y Krochta, 1997); y los de origen vegetal, como gluten, zeína y proteína de soya. Generalmente se utilizan aislados de proteína de soya, con más del 90% de proteína, obtenidos por extracciones ácidas y alcalinas, que posteriormente se solubilizan en soluciones acuosas alcalinas para formar las películas cuando se elimina el disolvente por secado (Rhim et al., 2000). Las películas de proteína de soya requieren de la adición de plastificantes para darles textura y flexibilidad, siendo el glicerol y el sorbitol los más usados (Rhim et al., 2002; Kim et al., 2003). Sin embargo otras leguminosas que también se están usando para la obtención de películas comestibles son el frijol verde, haba, chícharo y garbanzo, aunque la información acerca de ellas todavía es limitada (Bourtoom, 2008; Saremnezhad et al., 2011; Adebiyi y Aluko, 2011; Kowalczyk y Baraniak, 2011). 4.4. Hipótesis Ho: Las películas biodegradables (bioempaques) obtenidos empleando torta de sacha inchi y glicerol no presentan adecuadas propiedades físicas y mecánicas. Hi: Las películas biodegradables (bioempaques) obtenidos empleando torta de sacha inchi y glicerol presentan adecuadas propiedades físicas y mecánicas. 4.5. Sistema de variables Las variables independientes serán la concentración de torta de sacha inchi y la concentración de glicerol que tendrá la función de plastificante. Las variables dependientes serán: solubilidad, permeabilidad al vapor de agua, color, resistencia a la perforación y resistencia y deformación a la tracción. 4.6. Escala de medición Se empleará una escala de medida cuantitativa para todas las variables consideradas, tanto independientes como dependientes. 13 V. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN 5.1. Tipo de investigación Aplicada. 5.2. Nivel de investigación Explicativo. 5.3. Diseño de investigación Los ensayos serán realizados empleando torta de sacha inchi a la cual se le aplicará un pretratamiento, consistente en molienda y tamizado (malla #180), con la finalidad de uniformizar el tamaño de partícula. Para la preparación de la solución filmogénica se utilizará torta de sacha inchi (concentración: 1%, 1,5%, 3%, 4,5%, 5%) y glicerol como plastificante (concentraciones de 0,75%, 1%, 1,5%, 2%, 2,25%), con agitación y temperatura de 80°C, adicionándose la cantidad de agua requerida para completar el 100% de la solución filmogénica. La solución será colocada en placas de acrílico para permitir la formación de las películas, las cuales serán secadas en secador convectivo a temperaturas de 40 – 50°C por un tiempo de 24 horas. Las películas ya secadas serán retiradas de las placas y sometidas a evaluación de sus propiedades físicas y mecánicas. En la Figura 4 se presenta el flujograma tentativo para la obtención de las películas biodegradables. Las propiedades reológicas de las soluciones filmogénicas serán evaluadas empleando reómetro (RVT Brookfield), y el grosor de las películas deberá estar en torno de 0,1 mm. Figura 4. Diagrama de flujo para la obtención de películas biodegradables de torta de sacha inchi y glicerol 14 El diseño experimental que se utilizará será del tipo compuesto con punto central 2 k, considerando dos variables independientes (concentración de torta de sacha inchi y concentración de glicerol) con tres niveles (-1, 0, +1), y puntos axiales –α(–1,4142) y +α(+1,4142). Los tratamientos del estudio (22 + 5 + 2 x 2) se presentan en el Cuadro 5. Cuadro 5. Tratamientos del estudio Dominio Experimental Factores -α -1 0 1 α 1 1,5 3 4,5 5 2 2,25 X1: Concentración torta de sacha inchi (%) X2: Concentración glicerol (%) 0,75 1 1,5 Cuadro 6. Matriz de experimentos del diseño factorial 2 k Variables Variables naturales codificadas Respuesta Torta Glicerol Nº (%) (%) X1 X2 1 1,5 1 -1 -1 (Y1) 2 1,5 2 -1 1 (Y2) 3 4,5 1 1 -1 (Y3) 4 4,5 2 1 1 (Y4) 5 3 1,5 0 0 (Y5) 6 3 1,5 0 0 (Y6) 7 3 1,5 0 0 (Y7) 8 3 1,5 0 0 (Y8) 9 3 1,5 0 0 (Y9) 10 5 1,5 α 0 (Y10) 11 1 1,5 -α 0 (Y11) 12 3 2,25 0 α (Y12) 13 3 0,75 0 -α (Y13) En el Cuadro 6 se muestra el plan de experimentación que se obtiene al reemplazar los valores de las variables codificadas por los valores de las variables reales. Las interacciones entre los diferentes factores serán analizadas mediante Análisis de varianza y las diferencias entre tratamientos mediante prueba de Tuckey. 15 5.4. Cobertura de investigación La unidad experimental estará compuesta por 100 gramos de solución filmogénica, por cada tratamiento, la cual será sometida a secado para obtener las biopelículas. De las biopelículas se tomarán 20 secciones para realizar los diferentes análisis (físicos y mecánicos) del producto. 5.5. Fuentes, técnicas e instrumentos de investigación Se emplearán como fuentes bibliográficas artículos científicos obtenidos en revistas electrónicas indizadas y textos especializados sobre el tema. Análisis Los diferentes análisis serán realizados mediante metodologías validadas y recomendadas en la literatura científica: La humedad de las muestras será determinada por secado en estufa a 105ºC por 24 horas (A.O.A.C, 1990). La determinación del color se realizará con un colorímetro triestímulo portátil, Minolta modelo CR-400, con iluminante D65 y un ángulo observador de 0ºC, utilizando el sistema CIELab. El eje L* (claridad) va desde 100 (blanco) hasta 0 (negro), el eje a* va desde a*(verde) hasta + a*(rojo), mientras que el eje b* va desde – b* (azul) hasta b* (amarillo) (Minolta, 1993). Solubilidad en agua La prueba de solubilidad será realizada según la metodología propuesta por Gontard et al. (1992). Tres discos de cada muestra de filme, con 2 cm de diámetro, previamente pesadas, serán inmersos en 50 ml de agua, a temperatura ambiente, y mantenidos por 24 horas, bajo agitación esporádica, después la cual, será determinada el contenido de materia seca no solubilizada. La materia sólida insoluble será determinada utilizando el método de filtración según la técnica 971.09 de la AOAC (1990). Permeabilidad al vapor de agua (PVA) La permeabilidad al vapor de agua (PVA) de los filmes será determinada por el método desecante, con base en la norma E 96-80 (ASTM, 1995), de acuerdo con el procedimiento descrito por Souza (2001). Las muestras de película serán fijadas en células de permeación de vidrio, con abertura circular (diámetro 34 mm), correspondiendo al área expuesta para el cambio, cerrada herméticamente, y conteniendo silica gel en su interior (0% humedad relativa). 16 conforme al esquema de la Figura 5. Película célula de permeabilidad HR2 HR1 Silica gel Agua destilada Las células de permeación, serán colocadas dentro de desecadores conteniendo agua destilada. El peso ganado por las células será determinado en balanza analítica en intervalos de 24 horas durante 5 días. Las determinaciones se realizarán en triplicado, Figura 5. Esquema del dispositivo utilizado para la determinación de la permeabilidad al vapor de agua. PRUEBAS MECANICAS Las pruebas mecánicas serán realizadas, por triplicado, utilizando un texturómetro TA-XT2 (Texas Instrument, USA). Fuerza y deformación en la ruptura en la prueba de perforación Las películas serán cortadas en forma de discos con 6 cm de diámetro, y fijados en una célula con una abertura circular en la tapa de 3,4 cm de diámetro. Un sensor cilíndrico de 3 mm de diámetro se mueve perpendicularmente en la superficie del filme, con velocidad constante (1 mm/s), hasta la ruptura de la película, como se muestra en la figura; donde lo es el radio de la superficie del filme no tensionado, D es la distancia penetrada por la sonda en el momento de la ruptura y L es el radio de la superficie de la película en el punto de ruptura (película tensionada), como se indica en la Figura 6. 17 Película no Sonda Anillo de teflón tensionada lo D L Cápsula Película tensionada Figura 6. Esquema del sistema de determinación de la deformación en la Prueba de ruptura. Fuerza y deformación en la ruptura en prueba de tracción Cuerpos de prueba, cortados según la Figura 7, serán sometidos a la tracción con velocidad de 1,0 mm/s, partiéndose de una separación inicial de 80 mm, hasta la ruptura del filme. La tensión en la ruptura y la elongación en la ruptura serán obtenidos directamente de la curva de tensión en función de la elongación, conocidas las dimensiones iniciales de los cuerpos de prueba. El módulo de elasticidad, o el módulo de Young, será obtenido de la tangente de la curva en la región elástica. 6 mm 25 mm 115 mm Figura 7. Esquema del cuerpo de prueba, para la prueba de tracción Isotermas de Sorción Las isotermas de sorción serán determinadas por el método gravimétrico. Aproximadamente 1 g de muestra serán colocados en pequeños desecadores los cuales contendrán soluciones saturadas de diferentes sales con actividades de agua (aw) en el rango de 0,11 a 0,95. Los desecadores serán colocados en ambientes a 25, 35 y 45°C. Cada tres días, las muestras serán pesadas en balanza analítica y la actividad de agua será medida con un medidor de actividad de agua con compensación de temperatura, Aqualab Modelo 3TE. 18 Los datos de las isotermas de adsorción serán analizados utilizando la ecuación de Guggenheim-Anderson-De Boer (GAB). La ecuación de GAB es un modelo de tres parámetros proporciona propiedades físicas y es reconocida como el modelo más versátil para isotermas de sorción de alimentos (Rizvi, 1986; Perez-Alonso et al., 2006): MoCKaw M (1 Ka )(1 Ka w CKa ) w (1) w donde M es la humedad de equilibrio (g agua/g de sólido seco); Mo es la humedad de monocapa (g agua/g de sólido seco); aw es la actividad de agua; C es la constante de Guggenheim e igual a: C c'exp (hm hn ) RT (2) donde c’ es una constante; hm es el calor total de sorción de la primera capa (kJ/mol); hn es el calor total de sorción de las multicapas (kJ/mol); R es la constante universal de los gases (kJ/mol K); T es la temperatura absoluta (K) y K es otra constante: K k'exp (hl hm ) RT (3) donde k’ es una constante de la ecuación; hl es el calor de condensación del agua pura (kJ/mol). Instrumentos y materiales: Los instrumentos y materiales que serán utilizados en el presente trabajo son los siguientes: Instrumentos (Equipos) Materiales y Reactivos 19 Balanzas analítica y de precisión Colorímetro triestímulo Equipo extractor Soxhlet Reómetro RVT Brookfield Termómetro rango de 0–200 °C Molino y tamizador Estufa o secador convectivo (por adquirir) Baño con recirculación (por adquirir) Agitador mecánico (por adquirir) Micrómetro digital 0–25mm (por adquirir) Texturómetro TA.XT2 (por adquirir). Determinador actividad de agua (por adquirir) Buretas, Pipetas Placas Petri Vasos de precipitados Matraces Láminas de poliéster Cloruro de litio Acetato de potasio, Cloruro de magnesio Carbonato de potasio, Nitrato de magnesio Cloruro de sodio, Cloruro de potasio Cloruro de bario, Hidróxido de sodio Glicerol Campanas desecadoras Papel filtro. 5.6. Procedimiento y presentación de datos Los datos obtenidos serán presentados en cuadros y gráficos, con el objeto de facilitar su análisis. 5.7. Análisis e interpretación de datos El análisis de los datos será realizado empleando programas estadísticos (Statistica 5.0, Minitab o Statgraphics). La interpretación de los datos obtenidos será realizada contrastándolos con datos reportados en la literatura científica. VI. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS 6.1. Cronograma de actividades Meses Actividades 1 2 3 4 5 6 7 8 9 X X X X X X X X X 2. Ensayos y caracterización de la X materia prima X 1. Investigación bibliográfica 20 3. Pruebas de producción bio-películas X X X X X 4. Pruebas de evaluación de propiedades X X X X X X X X X X X X X X X X X X X 5. Proceso de la información X 6. Análisis de resultados 7. Elaboración informe 8. Elaboración de artículo X X 6.2. Asignación de recursos Los recursos asignados servirán principalmente para la adquisición de equipos y materiales de laboratorio, capacitación y asignación de incentivos por investigación. 6.3. Presupuesto o costo del proyecto RUBROS 23. Bienes y Servicios (16,24%) Materiales de acopio Material fotográfico Material de escritorio y oficina Material de laboratorio Reactivos Adquisición de insumos Adquisición de materia prima Pruebas tecnológicas Movilidad y alimentación Material de difusión Libros, revistas y fotocopias Pasajes y movilidad local Supervisión y monitoreo, difusión y publicaciones (1,50%) 25. Subvención a investigadores (21,54%) 21 MONTO TOTAL (Nuevos Soles) 15 466,65 1 428.51 20 514,28 26. Equipamiento de laboratorio (60,72%) Texturómetro TA-XT2 Determinador de actividad de agua Agitador mecánico Baño con recirculación Estufa o Secador convectivo con adquisición datos Micrómetro digital Monto total 57 828,51 95 238,00 6.4. Financiamiento Fondo Especial de Desarrollo Universitario (FEDU–Investigación). VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Adebiyi, A. P. y Aluko, R. E. 2011. Functional properties of protein fractions obtained from commercial yellow field pea (Pisum sativum L.) seed protein isolate. Food Chemistry, 128(4): 902–908. Agroindustrias Amazónicas. 2005. Información clasificada de Agroindustrias Amazónicas. Lima, 36 p. Anker, C. A., Foster, G. A., Hermansson, A. M. 1972. Wheat gluten films. U. S. Patent n° 364.249. A.O.A.C. 1990. Official Methods of Analysis. 15th Ed. Association of Official Analytical Chemists, Inc., Virginia, USA. Arévalo, G. (s/a). El cultivo del sacha inchi (Plukenetia volubilis L.) en la Amazonía, Programa Nacional de Investigación en Recursos Genéticos y Biotecnología – PRONARGEB, Estación Experimental El Porvenir – Tarapoto. Baldwin, E.A., Nisperos-Carriedo, M.O., Baker, R.A.1995. Edible coatings for lightly processed fruits and vegetables. Benavides, J. y Morales, J. 1994. 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