Dossier_Jornada_Bioalertnet
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15:35 h – 16:05 h Toma de muestras de agentes altamente patógenos en matriz agua: Metodología Sonia Aguayo Investigador-Científico del CNSA (ISCIII) Red Ibérica de laboratorios de alerta biológica. Métodos de acreditación para la detección de agentes altamente patógenos (Grant Agreement number – HOME/2012/ISEC/AG/CBRN/4000003810) PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Toma de muestras de agua para la detección de bacterias, esporas, virus y/u hongos para su posterior identificación, pudiendo ser éstos microorganismos inocuos y/o patógenos ALCANCE PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 1. Referencias bibliográficas 2. Consideraciones previas a la toma de muestra 3. Equipamiento de toma de muestra 4. Realización de la toma de muestra en aguas naturales 5. Consideraciones posteriores a la toma de muestra ÍNDICE PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS • Manual de Calidad del CNSA, ISCIII, Subdirección General de Servicios Aplicados, Formación e Investigación. Edición 8 • POG_CNSA_01 Procedimiento operativo general para la elaboración y control de documentos • UNE-EN ISO 5667-1:2007 Calidad del agua. Muestreo. Parte 1: Guía para el diseño de los programas de muestreo y técnicas de muestreo. • UNE-EN ISO 5667-3:2013 Calidad del agua. Muestreo. Parte 3: Conservación y manipulación de las muestras de agua. • UNE-EN ISO 5667-4:1987 Water quality. Sampling. Part 4: Guidance on sampling from lakes, natural and man-made. • UNE-EN ISO 5667-5:2006 Water quality. Sampling. Part 5: Guidance on sampling of drinking water from treatment works and piped distribution systems. • UNE-EN ISO 5667-6:2005 Water quality. Sampling. Part 6: Guidance on sampling of rivers and streams. • UNE-EN ISO 5667-9:1992 Water quality. Sampling. Part 9: Guidance on sampling from marine waters. • UNE-EN ISO 5667-14:1998 Water quality. Sampling. Part 14: Guidance on quality assurance of environmental water sampling and handling. • UNE-EN ISO 5667-20:2008 Water quality. Sampling. Part 20: Guidance on the use of sampling data for decisions making – Compliance with thresholds and classification systems. • UNE-EN ISO 5667-21:2010 Water quality. Sampling. Part 21: Guidance on sampling of drinking water distributed by tankers or means other than distribution pipes. • UNE-EN ISO 5667-23:2011 Calidad del agua. Muestreo. Parte 23: Guía para el muestreo pasivo en aguas superficiales. • UNE-EN ISO 19458:2007 Calidad del agua. Muestreo para el análisis microbiológico. Referencias bibliográficas PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS • Toma de muestras de agua representativas para el aislamiento, cultivo e identificación de aquellas especies consideradas; • Agente biológico del grupo 4: Aquél que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista generalmente una profilaxis o un tratamiento eficaz . • Se tomarán muestras puntuales. • Toma de muestra que al ser puntual, se realiza en una localización y momento concretos, por lo tanto la información que de ellas se extrae debe circunscribirse exclusivamente a dichas situaciones • Planificación sitios de toma de muestra – planificación atendiendo a la categorización de máxima alerta sanitaria de la situación y de emergencia, alta patogeneicidad de los microorganismos: Punto para la toma de muestra lo más cercano posible al punto sospechoso de haberse realizado el inóculo en la masa de agua y en el tiempo lo más cercano posible a dicha inoculación • Aplicar las medidas de correcta seguridad utilización de los EPI apropiados y demás disposiciones conforme a la legislación competente (Directiva 2000/54/CE - Real Decreto 664/1997 ) Consideraciones previas a la toma de muestras PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Puntos o sitios para la toma de muestras PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS DESCRIPCIÓN Equipamiento de toma de muestra 1. Equipamiento 2. Verificación y calibración de equipos 3. Otros materiales 4. Reactivos 5. Patrones y materiales de referencia Preparación de equipamiento de toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Equipos PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Verificación y calibración de equipos PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Las muestras se deben tomar en RECIPIENTES normalizados y adecuados para evitar que se rompan o se vierta su contenido en el transporte: Recipientes abiertos con tapón. Sirven para tomar la muestra en superficie o inmediatamente bajo ésta. Recipientes cerrados botellas con válvulas de apertura y cierre que permiten obtener muestras a distintas profundidades. Polietileno, polipropileno, poliestireno, etc. en función de: resistencia a temperaturas extremas, resistencia mecánica, facilidad de cierre hermético, tamaño, forma, disponibilidad, coste, posibilidades de limpieza y de reutilización, esterilización,... para ensayos microbiológicos para ensayos fisicoquímicos 500 ml • • • estériles 500 ml (100 ml/inóculo) 1000 ml Legionella > 1000 ml virus, Salmonella spp., amebas, oocistos de Cryptosporidium, cistos de Giardia, Recipientes para la muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 6.1.2 Descontaminación de equipos La descontaminación de los equipos e instrumentos implicados en la toma de muestra garantizará que los microorganismos captados sean exclusivamente aquellos presentes en el ambiente de nuestra matriz de interés. Se deberán seguir las recomendaciones recogidas en el Manual de Bioseguridad en el Laboratorio (2005, OMS) para la esterilización de equipos. 6.1.2.1 Esterilización Se destruirán todas las formas de microorganismos (bacterias, esporas, hongos, virus y/o parásitos) presentes en un determinado equipo o instrumento. El mecanismo de esterilización a aplicar va a depender del tipo de equipamiento que manejemos, y más concretamente del material con el que esté fabricado. Descontaminación de equipos / esterilización PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 1. Control de los recipientes de toma de muestra 1. Ensayo de esterilidad 2. Ensayo de presencia de agentes de inactivación 3. Ensayo de toxicidad residual en los recipientes de toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 1.- Asegurar la esterilidad de los recipientes de toma de muestra: • Recipientes normalizados y esterilizados para ensayos microbiológicos: Certificado de esterilización como condición para su aceptación • Recipientes preparados según procedimiento interno • Independientemente del material tanto si son de vidrio como si son de plástico. Se deben realizar ensayos de esterilidad del lote en uso. Esto corresponde al lote de recipientes tras su etiquetado, adición de agentes de inactivación, si procede, y almacenamiento. a.- Método del “frasco rodado” b.- Método del caldo líquido 2.- Ensayo de presencia de agentes de inactivación: Los envases normalizados comercializados para la toma de muestras de aguas para ensayos microbiológicos, en general, tienen una concentración de tiosulfato a razón de 20 mg/L, por lo que SE PUEDEN UTILIZAR estos envases, sin ningún sobreañadido de tiosulfato sódico, para aguas que contengan hasta 4 ppm de CRL (Cloro Residual Libre). 3.- Ensayo de toxicidad residual en los recipientes de toma de muestra Control de los recipientes PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Mantener la esterilidad e integridad tanto de los soportes para la toma de muestra como de los equipos implicados en la misma: durante el periodo de almacenaje de los equipos, previo a la fase de captación, durante su manipulación y transporte al punto de toma de muestra, De existir dudas sobre el cumplimiento de alguna de ellas, por un lado para equipos, se deberá proceder a revisar el funcionamiento de éstos y una vez comprobado, se deberá proceder nuevamente a su esterilización, y por otro lado, para material fungible, se deberá desechar y reemplazar por material nuevo. Manipulación y transporte de equipos PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 1.- Realización de la toma de muestra en aguas naturales Toma de muestra desde un puente 1.1.- Toma de muestra en el curso del agua 1.2.- Toma de muestra desde la orilla 1.3.- Toma de muestra desde una embarcación 2.- Toma de muestra de aguas subterráneas 3.- Toma de muestra bajo el hielo 4.- Toma de muestra en playas de baño Procedimiento de la toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS La muestra deberá tomarse en una zona en la que la masa de agua presente una elevada tasa de mezcla para que sea representativa y desde el centro del puente a ser posible. 1.- Retirar el tapón y mantenerlo con una mano libre o dejarlo apoyado en una superficie firme tras darle la vuelta de forma que pueda evitarse la contaminación del interior 2.- Hacer descender el recipiente a la superficie del agua, con precaución 3.- Aclarar el fondo del recipiente poniéndolo en contacto por unos segundos con la superficie del agua para a continuación elevarlo y permitir que cualquier residuo presente en el fondo caiga y se lo lleve la corriente. 4.- Sin llegar a sumergir la boca del recipiente, deberá hacerse descender el equipo unos 15 centímetros en el agua. La corriente reorientará el equipo con el recipiente de manera que el recipiente estará aguas arriba del tomamuestras. Rápidamente deberá hacerse descender el tomamuestras unos 0,5 m para sumergirlo completamente. De este modo se minimiza la toma de muestra de la capa superficial. 5.- Recuperar el recipiente teniendo cuidado una vez más de no provocar la liberación de residuos del puente o de la embarcación sobre la muestra o el equipo. 6.- Asegurar que quede espacio entre la muestra y el tope del recipiente para su posterior mezcla en el laboratorio 7.- Cerrar el recipiente con su tapa cubierta de papel de aluminio. DESDE UN PUENTE Realización de la toma de muestras en aguas naturales PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Procedimiento: 1.- Retirar el tapón y mantenerlo con una mano libre o dejarlo apoyado en una superficie firme tras darle la vuelta de forma que pueda evitarse la contaminación del interior 2.- Agarrar la base del recipiente 3.- Invertir el recipiente y situarlo en dirección contraria a la corriente y aguas arriba de la posición del técnico se sumergirá la botella en el agua unos 15 cm para a continuación dirigir la boca del recipiente haría la superficie del agua. Se dejará el tiempo suficiente para que se llene y a continuación se sacará del curso de agua. 4.- debe retirarse inmediatamente el exceso de muestra para asegurar que quede espacio para su posterior mezcla en el laboratorio. 5.- volver a cerrar el recipiente con su tapa cubierta de papel de aluminio. Habrá que cerciorarse de que el aluminio está lo suficientemente abierto como para evitar el contacto con la parte superior o el interior del recipiente. Igual que al principio del proceso, deberá evitarse el contacto de la mano con la parte inferior o el interior del tapón. EN EL CURSO DE AGUA Realización de la toma de muestras en aguas naturales PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Para tomar muestra en un lago, embalse o río desde la orilla. 1.- En primer lugar el recipiente cerrado de toma de muestra deberá fijarse en la pértiga mediante su abrazadera o mecanismo de fijación correspondiente. 2.- Desplazarse hasta una localización desde donde pueda tomarse una muestra representativa con ayuda de la pértiga. 3.- Retirar el tapón y mantenerlo con una mano libre o dejarlo apoyado en una superficie firme tras darle la vuelta de forma que pueda evitarse la contaminación del interior 4.- Situar el recipiente en su pértiga en el punto desde el que se pretende realizar la toma de muestra. 5.- Invertir el recipiente y en un movimiento rápido se sumergirá por su boca en el agua unos 15 centímetros. 6.- Subir el recipiente lentamente hacia la superficie con la boca del recipiente hacia arriba hasta que se llene. Cuando se tomen muestras de un lago, lentamente se moverá el recipiente desde su punto de entrada hasta que se llene por completo. 7.- Asegurar que quede espacio para su posterior mezcla en el laboratorio. 8.- Cerrar el recipiente con su tapa. Cuando la muestra deba tomarse desde una orilla, habrá que prevenir la contaminación de la misma por alteración del fondo o de la orilla del curso de agua. En condiciones normales se empleará una pértiga, aunque también se usa frecuentemente un recipiente sujeto a una cuerda. DESDE LA ORILLA Realización de la toma de muestras en aguas naturales PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS La toma de muestra desde una embarcación se realizará siguiendo cualquiera de los métodos anteriores pero desde la embarcación, considerando que el movimiento de la embarcación puede suponer un riesgo para el trabajador si se pone de pie, por lo que la toma debería realizarse desde una posición segura. Cuando se tome la muestra desde una embarcación deben tomarse precauciones para evitar la contaminación de la muestra por alteración de depósitos o por descargas de cualquier tipo procedentes del propio bote. Por ello es necesario emplear un barco adecuadamente mantenido, y la tripulación debe estar formada convenientemente. Cuando se esté tomando la muestra a bordo de una embarcación, deberá hacerse siempre aguas arriba del sistema de refrigeración del motor para evitar cualquier tipo de contaminación DESDE UNA EMBARCACIÓN Realización de la toma de muestras en aguas naturales PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 1.- En primer lugar se deberá avanzar hacia el interior de la masa de agua unos 75 centímetros. 2.- A continuación deberá avanzarse en el agua hasta que ésta alcance el nivel de la rodilla. 3.- En ese momento se abrirá el recipiente y se insertará en el agua con un ángulo de 45 º (con la boca de la botella hacia abajo). 4.- Se girará la botella hacia arriba unos centímetros por debajo de la superficie hasta que se llene. Una vez llena, se sacará y se desechará el exceso hasta que quede una cámara de aire. A continuación deberá cerrarse el recipiente. 5.- Puede utilizarse una pértiga en el caso de que así sea posible evitar tomar muestras alteradas por levantamiento del sedimento. 6.- Deberán entregarse las muestras al laboratorio en 6 horas desde la toma de muestra . PLAYAS DE BAÑO Realización de la toma de muestras en aguas de baño PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS - Cada muestra captada deberá ser codificada individual e inequívocamente de forma que permita una identificación única de la misma. En igual medida, se deberá registrar una mínima información respecto al origen y las condiciones en las que fue tomada la muestra y adjuntar dicho registro al soporte de muestreo. El formato de toma de muestra incluirá aquella información relativa a la localización y toma de muestra Registro de la toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 1. Inactivación de desinfectantes 2. Condiciones para la conservación de las muestras 3. Tiempo entre toma de muestra y análisis 4. Transporte de muestras 1. Muestras generales 2. Muestras sospechosas de contener microorganismos altamente patógenos 5. Custodia de la muestra 6. Recepción de muestras 7. Verificación de la calibración del equipamiento empleado 8. Descontaminación y transporte de equipos Consideraciones posteriores a la toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Interrumpir la acción de oxidantes (cloro, cloramina, bromo u ozono) que pudieran estar presentes en las muestras o en los recipientes de muestras: Se debe inhibir su acción tan pronto como se tome la muestra. Se añade un agente reductor, tal como el tiosulfato de sodio, a los recipientes de muestra. Inactivación de desinfectantes PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS TIEMPO y TEMPERATURA • • • Tiempo entre la toma de muestra y el inicio del transporte Tiempo de transporte Comienzo de los análisis en el laboratorio La suma de estos tres períodos está limitada a los períodos máximos de conservación Conservación de las muestras durante el transporte PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS 1. 2. Muestras generales Muestras sospechosas de contener microorganismos altamente patógenos En todo caso debe tenerse cuidado en: - no colocar los bloques refrigerantes en contacto directo con la muestra, ya que esto puede provocar su congelación. - ajustar el número, volumen y posición de los bloques refrigerantes al número de muestras, su masa y su temperatura inicial. Se documenta el procedimiento requerido para tiempos de transporte más largos (> 8 h). Se deben transportar de forma separada las muestras frías y calientes. Los recipientes que contienen muestras deben protegerse y sellarse durante el transporte de tal modo que no sufran deterioro o pérdida de ninguna parte de su contenido. El embalaje de los recipientes debe proteger a éstos de posible contaminación externa, en particular cerca de la zona de apertura y no deberían constituir en sí mismos una fuente de contaminación. Guía sobre la reglamentación relativa al Transporte de sustancias infecciosas 2013–2014” emitida por la Organización Mundial de la Salud-OMS. Transporte de las muestras PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Figura 1. Embalaje de material biológico peligroso a.- Recipiente primario b.- Recipiente secundario c.- Material absorbente d.- Envoltura exterior e.- Material de relleno Embalaje PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS • Etiquetado de la muestra • Libro de registro de la cadena de vigilancia (hoja de campo) • Hoja de petición de análisis de la muestra • Envío de la muestra al Laboratorio • Recepción y almacenamiento de la muestra De forma previa a la entrega de la muestra en el laboratorio de microbiología de destino, deberá rellenarse por parte del tomador de la muestra un registro con una información relativa a la identificación de la misma. Una vez en el laboratorio de destino, la parte receptora deberá completar este registro con información relativa al proceso de recepción de la muestra, firmando y sellando este registro, de forma que constituya prueba fehaciente de que la muestra ha sido recibida por su parte . De acuerdo a su propio pc de gestión de muestras Custodia de la muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MATRICES AMBIENTALES ACUÁTICAS PARA LA DETECCIÓN DE MICROORGANISMOS Una vez realizada la toma de muestra, en función de la peligrosidad de los microorganismos susceptibles de haber sido captados (patógenos o inocuos), la descontaminación de los equipos será más o menos intensa. Al igual que en la descontaminación de equipos previa a la toma de muestra, se seguirán las recomendaciones recogidas en el Manual de Bioseguridad de la OMS. 1.- Muestras generales Desinfección de nivel intermedio Destruye todas las formas bacterianas vegetativas y la mayoría de virus y hongos, pero no destruye necesariamente las esporas. Se utilizan como Agentes desinfectantes: ▪ Etanol (alcohol etílico, C2H5OH) y 2-propanol (alcohol isopropílico, (CH3)2CHOH): 70% (v/v)) que deberán estar en contacto con la superficie a desinfectar como mínimo durante 15 minutos. ▪ Hipoclorito sódico: diluciones de 5 g/l a 10 g/l de cloro libre (mayor concentración en función de la carga de materia orgánica presente) durante un período de 30 minutos. 2.- Muestras sospechosas de contener microorganismos altamente patógenos Esterilización El procedimiento de esterilización posterior a la toma de muestra será el mismo que indicábamos al principio de la presentación. Descontaminación de equipos tras la toma de muestras 16:05 h – 16:35 h Toma de muestras de agentes altamente patógenos en matriz suelo/sedimento: Metodología Sonia Aguayo Investigador-Científico del CNSA (ISCIII) Red Ibérica de laboratorios de alerta biológica. Métodos de acreditación para la detección de agentes altamente patógenos (Grant Agreement number – HOME/2012/ISEC/AG/CBRN/4000003810) PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS El objeto del presente procedimiento es definir, por un lado, una sistemática para la correcta toma de muestra de microorganismos (inocuos y/o patógenos) en matrices ambientales sólidas, el uso correcto de los equipos implicados en dicha toma, y las condiciones de almacenamiento y transporte hasta el laboratorio OBJETO PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Este procedimiento se aplica a todas las muestras sólidas procedentes del compartimento ambiental de suelo, y en él se recogen las directrices para una correcta toma de muestras tras la liberación (accidental o intencionada) en una matriz ambiental sólida de algún agente biológico potencialmente patógeno. ALCANCE PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS ISO 10381-1 Calidad del suelo. Muestreo. Parte 1: Directrices para el diseño de los programas de muestreo. ISO 10381-2 Calidad del suelo. Muestreo. Parte 2: Directrices sobre técnicas de muestreo. ISO 10381-3 Calidad del suelo. Muestreo. Parte 3: Directrices para la seguridad. ISO 10381-4 Calidad del suelo. Muestreo. Parte 4: Guía de procedimiento para la investigación de sitios naturales y cultivos. ISO 10381-5 Calidad del suelo. Muestreo. Parte 5: Guía para la investigación de suelos contaminados de emplazamientos industriales y urbanos. ISO 10381-6 Calidad del suelo. Muestreo. Parte 6: Directrices para la toma de muestra, la manipulación y la conservación de suelos en condiciones aerobias para la evaluación en el laboratorio de procesos, biomasa y diversidad microbiana. ISO 11074-2 Calidad del suelo. Vocabulario. Parte 2: Términos y definiciones relativos al muestreo. ISO 18512 Soil quality – Guidance on long and short term storage of soil samples D6169/D6169M - 13 Standard Guide for Selection of Soil and Rock Sampling Devices Used With Drill Rigs for Environmental Investigations D 6907 – 05 Standard Practice for Sampling Soils and Contaminated Media with Hand-Operated Bucket Augers X 31-100 Qualité des sols. Échantillonnage. Méthode de prélèvement d´échantillons de sol FD X31-615 Qualité de sol. Méthodes de détection et de caractérisation des pollutions. Prélèvements et échantillonnage des eaux souterraines dans un forage D4220 – 95 Standard Practices for Preserving and Transporting Soil Samples D6911 – 03 Standard Guide for Packaging and Shipping Environmental Samples for Laboratory Analysis E2770 - 10 Standard Guide for Operational Guidelines for Initial Response to a Suspected Biothreat Agent Referencias bibliográficas de consulta PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS DESCRIPCIÓN Equipamiento de toma de muestra 1. Equipamiento 2. Verificación y calibración de equipos 3. Otros materiales 4. Reactivos 5. Patrones y materiales de referencia Figura 2 – Dispositivo completo y montado de barrena tipo Auger Preparación de equipamiento de toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Las muestras se deben tomar en RECIPIENTES / BOLSAS normalizados y adecuados para evitar que se rompan o se COMPACTE su contenido en el transporte: Recipientes abiertos de boca ancha con tapa de rosca. Recipientes cerrados, bolsas estériles con cierre tipo zip Polietileno, polipropileno, poliestireno, etc. en función de: resistencia a temperaturas extremas, resistencia mecánica, cierre hermético, impermeabilidad al agua y gases, tamaño, forma, disponibilidad, coste, posibilidades de limpieza y de reutilización, esterilización, protección frente a la luz. para ensayos fisicoquímicos 1 kg Para ensayos microbiológicos estériles Siempre que sea posible se procederá a tomar cinco réplicas para llevar a cabo cinco determinaciones del parámetro que requiera un mayor tamaño muestral. Adicionalmente, se recomienda almacenar 50 g extra. r Recipientes para la muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS 6.1.2 Descontaminación de equipos y recipientes La descontaminación de los equipos e instrumentos implicados en la toma de muestra garantizará que los microorganismos captados sean exclusivamente aquellos presentes en el ambiente de nuestra matriz de interés. Se deberán seguir las recomendaciones recogidas en el Manual de Bioseguridad en el Laboratorio (2005, OMS) para la esterilización de equipos. 6.1.2.1 Esterilización Se destruirán todas las formas de microorganismos (bacterias, esporas, hongos, virus y/o parásitos) presentes en un determinado equipo o instrumento. El mecanismo de esterilización a aplicar va a depender del tipo de equipamiento que manejemos, y más concretamente del material con el que esté fabricado. Descontaminación de equipos / esterilización PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS 1. Control de los recipientes de toma de muestra 1. Ensayo de esterilidad 2. Ensayo de toxicidad residual en los recipientes de toma de muestra Descontaminación de equipos / esterilización PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Mantener la esterilidad e integridad tanto de los recipientes para la toma de muestra como de los equipos implicados en la misma: durante el periodo de almacenaje de los equipos, previo a la fase de captación, durante su manipulación y transporte al punto de toma de muestra, De existir dudas sobre el cumplimiento de alguna de ellas, por un lado para equipos, se deberá proceder a revisar el funcionamiento de éstos y una vez comprobado, se deberá proceder nuevamente a su esterilización, y por otro lado, para material fungible, se deberá desechar y reemplazar por material nuevo. Manipulación y transporte de equipos PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS 1. Aspectos comunes 2. Toma de muestra de suelos superficiales 3. Toma de muestra de suelos subsuperficiales 4. Toma de muestra de suelos a profundidades moderadas en suelos inestables 5. Toma de muestra de suelos en profundidad Índice PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS • Obtención de muestras representativas de microorganismos en matriz sólida, que pueden ser inocuos y/o patógenos; • Se tomarán muestras puntuales. • Toma de muestra que al ser puntual, se realiza en una localización y momento concretos, por lo tanto la información que de ellas se extrae debe circunscribirse exclusivamente a dichas situaciones • Planificación sitios de toma de muestra – planificación atendiendo a la categorización de máxima alerta sanitaria de la situación y de emergencia, alta patogeneicidad de los microorganismos: Punto para la toma de muestra los puntos para la toma de muestra deberán encontrarse lo más próximos posibles a los presuntos focos de liberación que se sospechen, si es que los hay. De esta forma la toma de muestra será efectiva, gracias a lo cual podrán tomarse las medidas oportunas. En caso de que no existiera ningún tipo de información, se seguirá el procedimiento habitual para elegir el punto de toma de muestra. • Aplicar las medidas de correcta seguridad utilización de los EPI apropiados y demás disposiciones conforme a la legislación competente (Directiva 2000/54/CE - Real Decreto 664/1997 ) Consideraciones iniciales PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Puntos o sitios para la toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS El proceso consta de dos etapas separadas: a) Ganancia de acceso al punto de toma de muestra. b) Toma de muestra de suelo. 1. Toma de muestra de suelos superficiales 2. Toma de muestra de suelos subsuperficiales 3. Toma de muestra de suelos a profundidades moderadas en suelos inestables 4. Toma de muestra de suelos en profundidad Realización de la toma de muestras PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS a) Muestras simples b) Muestras compuestas c) Muestras alteradas: muestras obtenidas del suelo sin ningún intento de preservar la estructura; es decir que las partículas del suelo se recogen “sueltas” y se permite que se muevan unas respecto a otras. d) Muestras sin alterar: muestras obtenidas del suelo utilizando un método pensado para preservar la estructura del suelo; es decir se emplea un equipo de muestreo especial de tal forma que las partículas de suelo y los huecos no puedan cambiar respecto a la distribución que existe en el suelo antes del muestreo. Tipos de Muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Para proceder con la toma de muestra, se recomienda: • Eliminar toda vegetación superficial, capa de residuos recubiertos musgo, raíces visibles, trozos grandes de plantas o residuos leñosos y cualquier fauna del suelo, para minimizar la adición de carbono orgánico fresco al suelo en un radio de aproximadamente 15 cm en el punto de toma de muestra. • Comenzar a barrenar rotando el agarrador en “T” mientras se presiona el Auger contra el suelo. Se pueden desechar los primeros centímetros (depositándolos en una bolsa dispuesta a tal efecto, nunca sobre el suelo para evitar problemas de contaminación). Siempre que sea posible se procederá a tomar cinco réplicas para llevar a cabo cinco determinaciones del parámetro que requiera un mayor tamaño muestral. Adicionalmente, se recomienda almacenar 50 g extra. Aspectos comunes para la realización de la toma de muestras PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Muestra representativa Puntual o compuesta Los puntos de toma deben poseer unas características representativas, teniendo en cuenta también las variaciones temporales (verticales u horizontales). Fuente: http://www.labsuelos.com/muestreo.html Realización de la toma de muestras PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Si es la interfase superficial del suelo la que debe ser muestreada, se llevará el Auger a la profundidad deseada y una vez se haya tomado la muestra se depositarán los cortes realizados en el contenedor adecuado para su posterior procesamiento. Este tipo de muestra también puede tomarse con ayuda de una pala. Realización de la toma de muestras de suelo superficiales PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS 1.- Introducir el Auger hasta la parte superior del intervalo de profundidad deseada y retirar cuidadosamente ese cabezal 2.- Introducir un cabezal limpio y rotarlo para tomar la muestra 3.- Retirar con mucha precaución para evitar contaminación de la muestra con material de las paredes del orificio realizado 4.- Introducir con cuidado la muestra en el recipiente escogido Para tomar muestras inalteradas, se empleará una barrena Auger plana para limpiar y nivelar la base del orificio 1.- una vez alisada la base, se colocará una barrena Auger tipo Core que será introducida sin tocar las paredes hasta la base del orificio, forzando gradualmente hasta que se complete la toma de muestra 2.- se extrae el dispositivo, se extruye la muestra y se descartan hasta que hayamos alcanzado la profundidad deseada. Para tomar muestras compuestas, se tomarán tantas muestras como submuestras deban componer la muestra compuesta. A las profundidades deseadas. Realización de la toma de muestras de suelo subsuperficiales PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Para la obtención de muestras a profundidades moderadas en suelos inestables, se recomienda reforzar las paredes del orificio con una carcasa. De este modo evitaremos que este colapse antes de continuar tomando muestra. El diámetro interior de la carcasa tendrá que ser ligeramente superior al del cabezal Auger. Toma de muestra de suelos a profundidades moderadas en suelos inestables PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS 1.- Sondeos 1.1.- Perforación por percusión con cable. Esta técnica suele emplearse para estudios geotécnicos, pudiéndose llevar a cabo sondeos profundos superiores a 20 m de profundidad. 1.2.- Perforación por rotación. Esta técnica es particularmente útil para la toma de muestras utilizando sólo técnicas apropiadas a mayor profundidad. 1.3.- Barrena mecánica 2.- Sondas y dispositivos de muestreo controlados Se realizan orificios de sondeo para la toma de muestras. Estas comprenden un tubo hueco con o sin un cono director, o una barra sólida que se introduce en el suelo, utilizando energía hidráulica o fuerza mecánica. Estos sistemas pueden usarse para recoger muestras a diferentes profundidades, para penetrar rápidamente hasta la profundidad donde ha de tomarse la muestra o para conseguir un cilindro continuo. Pueden utilizarse sondas y muestreadores de ventana, muestreadores continuos o sondas controladas. 3.- Excavaciones (pozos de ensayo) Esta es una técnica ampliamente utilizada para la recogida de muestras en emplazamientos donde se realizan estudios relacionados con la contaminación. Las ventajas de este método son, su aplicabilidad bajo un amplio rango de condiciones del suelo, la oportunidad de realizar una observación próxima de los estratos y la velocidad con la que puede realizarse el trabajo. Toma de muestra de suelos a profundidad PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS - Cada muestra captada deberá ser codificada individual e inequívocamente de forma que permita una identificación única de la misma. En igual medida, se deberá registrar una mínima información respecto al origen y las condiciones en las que fue tomada la muestra y adjuntar dicho registro al soporte de muestreo. El formato de toma de muestra incluirá aquella información relativa a la localización y toma de muestra Registro de la toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS 1. Condiciones para la conservación de las muestras 2. Tiempo entre toma de muestra y análisis 3. Transporte de muestras 1. Muestras generales 2. Muestras sospechosas de contener microorganismos altamente patógenos 4. Custodia de la muestra 5. Recepción de muestras 6. Descontaminación y transporte de equipos Consideraciones posteriores a la toma de muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS TIEMPO • • • + Tiempo entre la toma de muestra y el inicio del transporte Tiempo de transporte Comienzo de los análisis en el laboratorio La suma de estos tres períodos está limitada a los períodos máximos de conservación TEMPERATURA • • El suelo debería permanecer tan frío como sea posible pero sin que se produzca la congelación, la desecación o el encharcamiento Las muestras para análisis de DNA o ARN deben congelarse rápidamente en campo mediante hielo seco y durante su transporte hasta el laboratorio + • • OSCURIDAD Evitar la exposición a la luz durante periodos prolongados. Evitar la compactación física Conservación de las muestras durante el transporte PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS 1. 2. Muestras generales Muestras sospechosas de contener microorganismos altamente patógenos En todo caso debe tenerse cuidado en: - no colocar los bloques refrigerantes en contacto directo con la muestra, ya que esto puede provocar su congelación. - ajustar el número, volumen y posición de los bloques refrigerantes al número de muestras, su masa y su temperatura inicial. Se documenta el procedimiento requerido para tiempos de transporte más largos (> 8 h). Se deben transportar de forma separada las muestras frías y calientes. Los recipientes que contienen muestras deben protegerse y sellarse durante el transporte de tal modo que no sufran deterioro o pérdida de ninguna parte de su contenido. El embalaje de los recipientes debe proteger a éstos de posible contaminación externa, en particular cerca de la zona de apertura y no deberían constituir en sí mismos una fuente de contaminación. Guía sobre la reglamentación relativa al Transporte de sustancias infecciosas 2013–2014” emitida por la Organización Mundial de la Salud-OMS. Transporte de las muestras PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Figura 1. Embalaje de material biológico peligroso a.- Recipiente primario b.- Recipiente secundario c.- Material absorbente d.- Envoltura exterior e.- Material de relleno Embalaje PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS • Etiquetado de la muestra • Libro de registro de la cadena de vigilancia (hoja de campo) • Hoja de petición de análisis de la muestra • Envío de la muestra al Laboratorio • Recepción y almacenamiento de la muestra De forma previa a la entrega de la muestra en el laboratorio de microbiología de destino, deberá rellenarse por parte del tomador de la muestra un registro con una información relativa a la identificación de la misma. Una vez en el laboratorio de destino, la parte receptora deberá completar este registro con información relativa al proceso de recepción de la muestra, firmando y sellando este registro, de forma que constituya prueba fehaciente de que la muestra ha sido recibida por su parte . De acuerdo a su propio pc de gestión de muestras Custodia de la muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS De forma previa a la entrega de la muestra en el laboratorio de microbiología de destino, deberá rellenarse por parte del tomador de la muestra un registro con una información relativa a la identificación de la misma. Una vez en el laboratorio de destino, la parte receptora deberá completar este registro con información relativa al proceso de recepción de la muestra, firmando y sellando este registro, de forma que constituya prueba fehaciente de que la muestra ha sido recibida por su parte . De acuerdo a su propio pc de gestión de muestras Recepción de la muestra PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE ENSAYO PARA LA TOMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS EN MATRICES AMBIENTALES SÓLIDAS Una vez realizada la toma de muestra, en función de la peligrosidad de los microorganismos susceptibles de haber sido captados (patógenos o inocuos), la descontaminación de los equipos será más o menos intensa. Al igual que en la descontaminación de equipos previa a la toma de muestra, se seguirán las recomendaciones recogidas en el Manual de Bioseguridad de la OMS. 1.- Muestras generales Desinfección de nivel intermedio Destruye todas las formas bacterianas vegetativas y la mayoría de virus y hongos, pero no destruye necesariamente las esporas. Se utilizan como Agentes desinfectantes: ▪ Etanol (alcohol etílico, C2H5OH) y 2-propanol (alcohol isopropílico, (CH3)2CHOH): 70% (v/v)) que deberán estar en contacto con la superficie a desinfectar como mínimo durante 15 minutos. ▪ Hipoclorito sódico: diluciones de 5 g/l a 10 g/l de cloro libre (mayor concentración en función de la carga de materia orgánica presente) durante un período de 30 minutos. 2.- Muestras sospechosas de contener microorganismos altamente patógenos Esterilización El procedimiento de esterilización posterior a la toma de muestra será el mismo que indicábamos al principio de la presentación. Descontaminación de equipos tras la toma de muestras 16:35 h – 16:50 h Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERNET Francisco Javier Sánchez (ISCIII) Red Ibérica de laboratorios de alerta biológica. Métodos de acreditación para la detección de agentes altamente patógenos (Grant Agreement number – HOME/2012/ISEC/AG/CBRN/4000003810) Proyecto cofinanciado por el Programa de Prevención y Lucha contra la Delincuencia (ISEC) de la Unión Europea (Dirección General de Asuntos de Interior) - Gran Agreement No. HOME/2012/ISEC/AG/CBRN/4000003810 http://ib-bioalertnet.isciii.es/ Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET JORNADA “TOMA DE MUESTRAS EN EPISODIOS DE ALERTA BIOLÓGICA” 06 de julio de 2015 Escuela Nacional de Sanidad (ENS) Dr. Fco. Javier Sánchez Íñigo [email protected] Proyecto cofinanciado por el Programa de Prevención y Lucha contra la Delincuencia (ISEC) de la Unión Europea (Dirección General de Asuntos de Interior) - Gran Agreement No. HOME/2012/ISEC/AG/CBRN/4000003810 http://ib-bioalertnet.isciii.es/ Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET ESQUEMA 1. INTRODUCCIÓN 1.1 IB-BIOALERTNET / C.N.S.A. 1.2 UNIDAD DE EMERGENCIAS (UEM) DEL C.N.S.A. 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.1 Objetivo 2.2 Ensayos de campo 2.3 Participación en ejercicio “Luñol 2014” 3. CONCLUSIONES Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 1. INTRODUCCIÓN 1.1 IB-BIOALERTNET / C.N.S.A. ACTIVIDADES DEL CNSA EN IB-BIOALERTNET 1. Desarrollo de procedimientos para la toma de muestras en matriz atmosférica, acuática y sólida (suelo y sedimento) - Unificación de metodología - Elaboración de protocolos - Ensayos de campo 2. Implantación de Sistema de Gestión de Calidad - Elaboración de Plan de Calidad (PLAN DE CALIDAD PARA LA TOMA DE MUESTRAS AMBIENTALES POTENCIALMENTE PATÓGENAS) - Elaboración de Procedimientos Normalizados Trabajo (PNUs utilización equipos…) 3. Workshop Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 1. INTRODUCCIÓN 1.2 UNIDAD DE EMERGENCIAS – UEM / C.N.S.A. 1. Creación y objetivo UNIDAD DE EMERGENCIAS - UEM 2012. Aportar apoyo científico-técnico a las Administraciones Públicas en situaciones de emergencia ambiental que pueda tener consecuencias sobre la salud de la población. 2. Experiencia Participación directa en los ejercicios: Palazuelos (Segovia), Luñol (Valencia) y Daimiel (Ciudad Real) organizados por la UME y en Curiex (Cáceres) organizado por Protección Civil 3. Modus operandi Desplazamiento de un amplio equipo de profesionales junto a dos unidades móviles y un vehículo de apoyo, para tomar muestras en diferentes matrices ambientales y/o realizar del análisis “in situ” de aquellos parámetros involucrados en el episodio. Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.1 Objetivo 1.- CUMPLIMENTACIÓN DE FORMATOS REGISTROS 2.- PUESTA A PUNTO DE LOS EQUIPOS: PUESTA EN MARCHA Y FUNCIONAMIENTO 3.- PUESTA A PUNTO DE LAS DISTINTAS TÉCNICAS DE TOMA DE MUESTRA POR MATRIZ 4.- MONTAJE DE LOS DISTINTOS SOPORTES DE TOMA DE MUESTRA 5.- VERIFICACIÓN DE LA OPERATIVIDAD DE LOS PROCEDIMIENTOS MEDIANTE SU PUESTA EN PRÁCTICA Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.2 Ensayos de campo Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.2 Ensayos de campo Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.2 Ensayos de campo Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.2 Ensayos de campo Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.2 Ensayos de campo a de muestras para identificación de agentes biológicos en las elo . Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.3 “Luñol 2014” LUÑOL 2014 Ubicación: Buñol (Valencia) Fecha: 31 de marzo a 3 de abril 2014 Contexto: Simulacro sísmico de gran magnitud Impacto: Daños en dos plantas químicas (pesticidas y fertilizantes) Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.3 “Luñol 2014” Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS Establecer los recursos, secuencia de operaciones, personal y técnicas operativas respecto a la toma de muestra de agentes biológicos 2.3 “Luñol 2014” Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.3 “Luñol 2014” Incidencia 441: Vertido de industrias cárnicas - Rotura en depósito de desperdicios cárnicos Toma de muestras de agua y sedimento Incidencia 411: Accidente Transporte mercancías peligrosas - Vertido de gasóleo al río “Luñol” Toma de muestras de agua y sedimento Toma de muestra de agua Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.3 “Luñol 2014” Incidencia 422: Explosión en empresa de plaguicidas - Liberación de 2000 l de malation al 90% Toma de muestras de suelo Incidencia 431: Empresa petroquímica - Explosión de tanque de combustible Toma de muestras de suelo y sedimento Toma de muestra de suelo Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 2. EJERCICIOS PRÁCTICOS 2.3 “Luñol 2014” Incidencias 403 y 404: Fuga de amoníaco anhidro licuado en un tanque de 30000 l - Nube tóxica de amoníaco Toma de muestra de bioaerosoles Toma de muestra de bacterias / virus Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET 3. CONCLUSIONES SE VERIFICÓ LA OPERATIVIDAD DE LOS PROCEDIMIENTOS DE TOMA DE MUESTRA, Y FUE ADECUADA - Se sugiere la realización de más ejercicios “in situ”. - Posibilidad de trasladar estos procedimientos a los Cuerpos y Fuerzas de Seguridad del Estado así como a las Fuerzas Armadas para que organismos ajenos verifiquen su aplicabilidad. Ejercicios prácticos en el ámbito del proyecto IB-BIOALERTNET A USTEDES POR SU ATENCIÓN… … y a todo el personal del CNSA involucrado en las actividades realizadas por la UEM.
