Valeria Herrera-Lasso Regás PRÁCTICA 04 TINCIÓN DE WRIGHT Objetivo Wright es una variación de azul de metileno y eosina. Nos permite visualizar los distintos gránulos característicos de cada leucocito. Nos da más tonalidades en el citoplasma para distinguir los diferentes leucocitos. La intención es ver los diferentes neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos, eritrocitos y basófilos que son raros de ver ya que son menos numerosos; constituyen sólo el 0,5% del total. Material Frotis sanguíneo Colorante de May-Grünwald-Giemsa Colorante Giemsa Cubreobjetos Microscopio de inmersión Aceite de inmersión: Para la visualización x100. Agua destilada Microlanceta Pipetas Pasteur Método Se consigue una muestra de sangre de alguno de los dedos con la ayuda de una microlanceta. Se coloca una pequeña cantidad de sangre sobre el porta y se procede a hacer la extensión sobre el cubre para conseguir un frotis adecuado (cabeza, cuerpo y cola). Se deja secar 5 minutos y se ahoga el frotis en Giemsa durante 1min. El Giemsa colabora a la hora de proporcionar contraste en las coloraciones. A continuación, se sumerge la muestra con el colorante Wright/tampón PBS durante 10 min. Tras este tiempo, se lava con abundante agua destilada y cuando el frotis esté seco, ya está preparado para la visualización bajo el microscopio. El aceite de inmersión se utiliza para el aumento x100 en el microscopio y nos permite observar los detalles de los leucocitos de nuestra sangre. Resultados Se visualiza bajo el microscopio y se observan los distintos leucocitos. En las imágenes se observa que la sumersión con tinción Wright ha sido de demasiada duración, lo que ha provocado un fondo difuso y de baja resolución. Valeria Herrera-Lasso Regás Fig. 1: Neutrófilos segmentados y linfocito abajo a la derecha. Fig. 2: Neutrófilo segmentado. Valeria Herrera-Lasso Regás Fig. 3: Linfocito arriba a la izquierda y neutrófilo segmentado abajo a la derecha.