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ANÁLISIS PROTEÓMICO DE LAS MODIFICACIONES PRODUCIDAS POR LA
ISQUEMIA CEREBRAL FOCAL EN UN MODELO DE RATA
Sánchez-Hernández H1, Cázares FE1, Gallegos JL3, Cortés L1, Calderón KG3,
Hernández FC1, Ortiz A2. 1Departamento de Infectómica y Patogénesis
Molecular, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del IPN; 2Laboratorio
de Neuropatología Experimental, Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía
MVS; 3Instituto Nacional de Medicina Genómica.
La enfermedad vascular cerebral (EVC) es un trastorno en el cual un área del
encéfalo se afecta por isquemia o por hemorragia. Dentro de estos trastornos está
la isquemia cerebral focal (ICF), que es la disminución del flujo sanguíneo en una
región específica del cerebro, disminuyendo la disposición de oxígeno y glucosa.
La EVC es la tercera causa de muerte en Estados Unidos, y la quinta en México,
siendo la patología neurológica con mayor prevalencia, donde el infarto cerebral
es la segunda causa de mortalidad en el mundo y la primera causa de
discapacidad.
La ICF induce cambios de la expresión genética en las neuronas y en células de la
glía, además las proteínas también cambian su expresión, la cual ha sido muy
poco estudiada bajo estas condiciones. Por esta razón el análisis de la expresión
de proteínas durante la ICF temprana se hace necesario para conocer los
mecanismos moleculares involucrados en este proceso, y esto permitirá proponer
intervenciones terapéuticas que disminuyan las secuelas después de ocurrido el
problema agudo.
En este trabajo se usó un modelo de ICF, inducida quirúrgicamente en el cerebro
de la rata Wistar. El procedimiento consistió en bloquear la circulación de la arteria
cerebral media de las ratas macho durante 1 h con y sin 24 h de reperfusión
sanguínea (rpf), al término de estos tiempos se sacrificaron, se obtuvieron los
cerebros y se analizaron por separando las proteínas del hipocampo (H), cuerpo
estriado (CE) y corteza parietal (CP) mediante electroforesis bidimensional (2D)
tiñendo con azul de Coomassie. Las imágenes de los geles (n=3) se examinaron
utilizando el programa Image Master 2D Platinum para identificar las proteínas
expresadas diferencialmente entre las diferentes condiciones de ICF/rpf con
respecto a los controles normal y sham. Los puntos diferenciales se recuperaron
de los geles, se analizaron por espectrometría de masas (MS), y las proteínas se
identificaron con los programas Protein Pilot y Mascot. Al comparar los perfiles
proteicos 2D de las tres regiones cerebrales analizadas bajo condiciones
normales, éstas fueron similares en el 84% de las proteínas. Al comparar las
proteínas de cada región en condiciones normales con aquellas de 1 h de ICF con
y sin 24 h de rpf, se observó que en la CP la proteína 14-3-3 gamma aumentó su
expresión, mientras que la nucleósido difosfato cinasa A, la proteína de unión a
fosfatidiletanolamina 1 y la superóxido dismutasa 1 disminuyeron. En las tres
regiones cerebrales, la actina citoplasmática 2 disminuyó su expresión. Se
propone un modelo molecular de la respuesta bioquímica de las regiones
cerebrales bajo isquemia con y sin rpf, que integra las vías de señalización que
pudieran estar regulando los cambios observados durante el proceso isquémico.