XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE UN EXTRACTO CRUDO DE PROTEASAS ALCALINAS OBTENIDO DE CASCARAS DE MANGO (Mangifera indica L. Var. Haden) Francisco Javier Lazaro Baez Universidad Politécnica de Sinaloa, [email protected]. Asesor Jesús Aarón Salazar Leyva Universidad Politécnica de Sinaloa, [email protected] PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Las proteasas son el grupo de enzimas más utilizadas en diferentes procesos industriales. En los últimos años se han evaluado extractos enzimáticos provenientes de diversas fuentes, encontrándose que las proteasas provenientes de plantas presentan características catalíticas de interés tales como actividad en un amplio rango de pH, temperatura y alta estabilidad en condiciones extremas. Es sabido que el procesamiento para consumo humano de diversas especies vegetales genera una alta cantidad de sub-productos que generalmente son desechados, a pesar de que este material vegetal puede contener diversas biomoléculas de interés industrial. En relación a lo anterior varios estudios demuestran que la cascara de diversas especies vegetales representa una fuente interesante de proteasas. Por tal motivo en este estudio se plantea la obtención de enzimas proteolíticas a partir de cascaras de mango (Mangifera indica L. Var. Haden), ya que este fruto se cultiva de forma amplia en México, y en específico el Estado de Sinaloa ocupa el tercer lugar en producción de mango a nivel nacional. METODOLOGIA El extracto crudo (EC) de proteasas alcalinas fue obtenido a partir de cascaras de mango (Mangifera indica L. Var. Haden) a través de un proceso de solubilización de las enzimas en buffer fosfatos 0.1 M, pH 7.5. Se determinó la actividad proteolítica total (APT) del EC utilizando azocaseína al 2% (p/v) como sustrato. Se evaluó la APT utilizando diferentes concentraciones de EC y además se probaron diferentes temperaturas de incubación de la mezcla de reacción (25 y 37°C). La reacción se detuvo con ácido tricloroacético al 20% para posteriormente determinar la absorbancia a 366 nm. Una vez establecidas las condiciones del ensayo de APT se realizaron estudios de determinación de temperatura y pH optimo de actividad enzimática, así como ensayos de estabilidad catalítica a diferentes condiciones de pH y temperatura. CONCLUSIONES Esta investigación aun se encuentra en proceso. La determinación de las principales características bioquímicas del extracto crudo de proteasas alcalinas de cascara de mango (Mangifera indica L. Var. Haden) permitirá realizar estudios futuros relacionados con la purificación y caracterización molecular de estas enzimas. © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014