EVALUACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN DEL AIRE POR MICROORGANISMOS OPORTUNISTAS Y SU RELACIÓN CON MATERIAL PARTICULADO (PM2.5 Y PM10) EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA ANDREA M. CRUZ ORJUELA ANDRES A. JIMENEZ PALLARES UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA BOGOTA D.C 2006 EVALUACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN DEL AIRE POR MICROORGANISMOS OPORTUNISTAS Y SU RELACIÓN CON MATERIAL PARTICULADO (PM2.5 Y PM10) EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA ANDREA M. CRUZ ORJUELA ANDRES A. JIMENEZ PALLARES Trabajo de grado para optar al título de Ingeniero Ambiental y Sanitario Director HUGO SARMIENTO VELA Químico UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA BOGOTA D.C 2006 Nota de aceptación Firma del Director Firma del Jurado Firma del Jurado Bogotá, Octubre de 2006 DEDICATORIA Quiero dedicar este logro primero que todo a Dios por guiarme y darme la fortaleza para culminar esta etapa de mi vida. A mi mama por su amor, paciencia, apoyo y compañía incondicional en cada transcurso de mi vida, a mis hermanos por ser una motivación más para seguir adelante. A Juliana Velasco por ser esa persona que me brindo su amor, compañía, apoyo durante el transcurso de mi carrera y con quien que pude contar en cada momento A mis amigos y compañeros de estudio quienes de alguna manera contribuyeron en mi desarrollo personal y profesional ANDRES JIMENEZ PALLARES DEDICATORIA La culminación de esta etapa de mi vida quiero dedicársela principalmente a Dios quien es ese ser que me ha dado la fortaleza y la sabiduría para afrontar el día a día y me ha permitido cumplir este sueño. A mis padres y hermano, quienes con su comprensión y cariño me han impulsado y me han dado siempre una voz de aliento para la culminación de este proyecto y me han dado fuerzas para el inicio de mi vida profesional. A mi novio John por su amor y su apoyo total e incondicional; y a toda su familia, quienes han estado conmigo en el transcurso de toda mi carrera apoyándome y brindándome siempre los mejores deseos para la culminación de esta etapa de mi vida. A todos y cada uno de los amigos y familiares que siguieron de cerca este proceso y me brindaron una mano en los buenos y malos momentos. A todos muchas gracias. ANDREA M. CRUZ ORJUELA AGRADECIMIENTOS Los autores expresamos nuestros agradecimientos a: A HUGO SARMIENTO por darnos la oportunidad de desarrollar esta investigación y aportarnos sus conocimientos. A GLADIS QUINTERO por su asesoramiento en la parte microbiológica. A YUDI CAROLINA CASTELLANOS y PAULA ANDREA CEDEÑO, estudiantes tesistas de Bacteriología de la Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca por colaborarnos en el desarrollo de este proyecto. A la Universidad de la Salle por respaldarnos en el desarrollo de esta investigación. A las personas que trabajan en los laboratorios de Ingeniería Ambiental y Sanitaria y de Ciencias Básicas de la Universidad de la Salle. A las directivas de Colegio Distrital la Merced e INVIMA por permitirnos el ingreso a sus instalaciones durante esta fase de muestreo. A GISELLA CASTRILLON por su colaboración en la parte estadística del proyecto. A nuestras familias por apoyarnos y compartir con nosotros el desarrollo de toda esta investigación. A todas y cada una de las personas y amigos que estuvieron presentes en todo este proceso y nos dieron siempre una voz de aliento para la culminación de esta meta. CONTENIDO Pag. INTRODUCCION 19 1. OBJETIVOS 20 2. ANTECEDENTES 21 3. MARCO TEORICO 24 3.1. Contaminantes del aire. 24 3.1.1. Aerosoles. 25 3.1.2. Partículas Suspendidas. 25 3.1.3. Contaminantes Gaseosos. 27 3.1.3.1. Contaminantes Primarios. 27 3.1.3.2. Contaminantes Secundarios. 29 3.2. FUENTES DE CONTAMINACION 30 3.3. BIOAEROSOLES 31 3.4. MICROORGANISMOS EN EL AIRE 32 3.4.1 Metabolismo Microbiano. 33 3.4.2 Nutrición Microbiana. 34 3.4.3 Principales familias de microorganismos presentes en el aire. 34 3.5 FACTORES METEOROLÓGICOS Y SU RELACION CON EL TRANSPORTE Y DISPERSION DE MICROORGANISMOS Y CONTAMINANTES DEL AIRE 39 3.5.1. Temperatura. 39 3.5.2. Radiación Solar. 40 3.5.3. Humedad Relativa. 40 3.5.4 Velocidad y Dirección del Viento. 41 3.5.5 Dispersión de Microorganismos. 43 3.5.6 Precipitación. 43 3.6 EFECTOS EN LA SALUD POR CONTAMINANTES ATMOSFERICOS Y MICROORGANISMOS 44 3.6.1. Material Particulado. 44 3.6.2. Óxidos de Nitrógeno. 45 3.6.3 Ozono. 45 3.6.4 Monóxido de Carbono. 46 3.6.5 Dióxido de Azufre. 46 3.6.6 Microorganismos. 47 3.6.6.1. Principales enfermedades causadas por microorganismos. 48 3.7. GENERALIDADES DE LA LOCALIDAD 50 3.7.1 51 Contaminación Atmosférica en la Localidad. 3.8 . ANÁLISIS ESTADÍSTICO. 52 3.8.1. Variable Aleatoria. 52 3.8.2 Distribución de Poisson. 53 3.8.3 Correlación. 54 4. METODOLOGIA 56 4.1 PUNTOS DE MUESTREO 58 4.2 DIAS DE MUESTREO 62 4.3 NÚMERO Y CODIFICACION DE MUESTRAS 62 4.4 JORNADAS DE MUESTREO 63 4.5 MUESTREO MICROBIOLOGICO 64 4.6 MUESTREO DE MATERIAL PARTICULADO (PM2.5) 65 4.7 ANALISIS MICROBIOLOGICO 65 4.7.1 Preparación de Medios de Cultivo. 68 4.7.1.1 Técnicas de Asepsia. 69 4.7.1.2 Control de Calidad. 69 4.7.2 Recuento de UFC. 70 4.7.3 Aislamiento de Microorganismos. 70 4.7.4 Identificación de Microorganismos. 71 4.8. 73 4.8.1. ANALISIS DE RESULTADOS Calculo de la Humedad Relativa en la estación de MERCK. 4.8.2. Análisis de los datos obtenidos en laboratorio y en el medidor de alto volumen PM2.5. 5. ANALISIS Y RESULTADOS 5.1. FACTORES METEOROLÒGICOS Y CONTAMINANTES ATMOSFÈRICOS DURANTE LA FASE DE MUESTREO 74 78 80 80 5.1.1 Condiciones Meteorológicas. 81 5.1.2 Calidad del Aire. 85 5.2. FAMILIAS DE MICROORGANISMOS IDENTIFICADAS 89 5.2.1. Frecuencia Familia Bacillaceae. 90 5.2.2. Frecuencia familia Corynebacteriaceae. 90 5.2.3. Frecuencia familia Pseudomonadaceae. 91 5.2.4. Frecuencia familia Actinomicetaceae. 92 5.2.5. Frecuencia familia Enterobacteriaceae. 92 5.2.6. Frecuencia familia Coccaceae. 93 5.2.7. Frecuencia del reino Micota 93 5.3. FRECUENCIAS ESPECIES IDENTIFICADAS EN CADA UNO DE LOS PUNTOS Y JORNADAS 94 5.3.1. Especies mas frecuentes en el punto parque Puente Aranda. 95 5.3.2. Especies mas frecuentes en el punto Colegio la Merced. 96 5.3.3. Especies mas frecuentes en el punto parque Cundinamarca. 98 5.3.4. Especies mas frecuentes en el punto INVIMA. 99 5.3.5. Especies mas frecuentes en el punto parque Salazar Gómez. 100 5.3.6. Especies mas frecuentes en el Punto Blanco (Guatavita). 101 5.4. MICROORGANISMOS OPORTUNISTAS Y PATOGENOS ENCONTRADOS DURANTE LA FASE DE ESTUDIO 103 5.5. ANALISIS DE LAS CONCENTRACIONES EXPRESADAS EN UFC/m3 POR PUNTOS Y JORNADAS DURANTE EL MUESTREO 104 5.5.1. Concentraciones expresadas en UFC/m3 durante todos los días de muestreo en cada uno de los puntos. 104 5.5.2. Relación de concentraciones de microorganismos expresadas en UFC/m3 con parámetros meteorológicos y concentraciones de contaminantes (PM10, NOX Y O3). 107 5.5.3. Relación de la concentración expresada en UFC/m3 con parámetros meteorológicos y concentraciones PM2.5. 120 5.5.4. Microorganismos identificados en los filtros de PM2.5 sembrados en Agar Sangre y Saboreaud para los puntos Colegio la Merced e INVIMA. 122 5.6 CORRELACION DE PARAMETROS METEOROLOGICOS Y DE CALIDAD DEL AIRE CON LA SUPERVIVENCIA Y VIABILIDAD DE LOS MICROORGANISMOS. 123 5.6.1. Correlaciones para toda la fase de muestreo. 124 5.6.2. Correlaciones para cada una de las jornadas. 125 5.7 MICROORGANISMOS ENCONTRADOS DURANTE LAS TRES FASES DE MUESTREO 126 CONCLUSIONES 130 RECOMENDACIONES 134 BIBLIOGRAFIA ANEXOS LISTA DE TABLAS Pag. Tabla 1. Microorganismos presentes en los bioaersoles. 31 Tabla2. Moléculas afectadas por factores ambientales estresantes 33 Tabla 3. Escalas del viento Beaufort 42 Tabla 4. Niveles de riesgo para la salud para O3 45 Tabla 5. Efectos de la contaminación por partículas en suspensión y SO2 47 Tabla 6. Infección Respiratoria Aguda y Etiología 49 Tabla 7. Nomenclatura de puntos de muestreo 59 Tabla 8. Días de muestreo 62 Tabla 9. Codificación de las muestras 63 Tabla 10. Correlación entre la temperatura y la Humedad Relativa en estación de Usme 74 Tabla 11. Correlación entre la temperatura y la Humedad Relativa en estación de Vitelma 74 Tabla 12. Comportamiento de la Humedad Relativa esperado para la estación de MERCK 76 Tabla 13. Correlación entre la Temperatura de Merck y la Humedad Relativa estimada para esta estación 77 Tabla 14. Comportamiento de los factores ajustados al modelo 78 Tabla 15. Promedios presentados durante jornadas de muestreo 81 Tabla 16. Estadística descriptiva para todo el periodo de muestreo 81 Tabla 17. Promedios durante toda la fase de muestreo 85 Tabla 18. Estadística descriptiva para todo el periodo de muestreo 85 Tabla 19. Codificación de las familias identificadas 95 Tabla 20: Microorganismos encontrados en Guatavita 102 Tabla 21: Hongos encontrados en Guatavita 102 Tabla 22. Especies identificadas y enfermedades que generan 103 Tabla 23. Hongos identificados durante toda la fase muestreo 103 Tabla 24. Promedio de las concentraciones expresadas un UFC/m3 para los 7 días de muestreo 105 Tabla 25: Concentración expresadas en UFC/m3 en los puntos de muestreo por día y jornada 105 Tabla 26. Microorganismos identificados en Colegio la Merced 122 Tabla 27. Microorganismos identificados en INVIMA 123 Tabla 28. Correlaciones entre UFC/m3, con variables meteorológicas y de calidad del aire 124 Tabla 29. Patógenos identificados durante la primera fase 127 Tabla 30.Patógenos encontrados en la segunda fase 127 Tabla 31. Patógenos encontrados en la tercera fase 127 LISTA DE FIGURAS Pag. Figura 1. Diagrama de flujo Metodología. 57 Figura 2. Localidad de Puente Aranda. 58 Figura 3. Muestreo punto parque barrio Puente Aranda. 59 Figura 4. Muestreo punto Colegio la Merced. 60 Figura 5. Muestreo punto parque barrio Cundinamarca. 60 Figura 6. Muestreo punto INVIMA. 61 Figura 7. Muestreo punto parque barrio Salazar Gómez. 61 Figura 8. Actividad Industrial en los alrededores de INVIMA y Flujo vehicular en la Cll 13. 64 Figura 9. Colector de aire microbiológico MAS-100. 64 Figura 10. Siembra de filtros de PM2.5 en Agar sangre y Saboreaud. 65 Figura 11. Agar McConkey. 66 Figura 12. Agar Saboreaud. 67 Figura 13. Agar Chocolate. 67 Figura 14. Agar Sangre. 68 Figura 15. Preparación de medios de Cultivo. 68 Figura 16. Técnicas de asepsia en muestreo y preparación de medios. 69 Figura 17. Pruebas de Viabilidad. 70 Figura 18. Aislamiento de microorganismos. 71 Figura 19. Pruebas Bioquímicas. 73 Figura 20. Rosa de los vientos para el día 19 de Marzo J1. 110 Figura 21. Rosa de los vientos para el día 19 de Marzo J2. 111 Figura 22. Rosa de los vientos para el día 19 de Marzo J3. 112 Figura 23. Rosa de los vientos para el día 21 de Marzo J1. 113 Figura 24. Rosa de los vientos para el día 21 de Marzo J2. 114 Figura 25. Rosa de los vientos para el día 21 de Marzo J3. 115 Figura 26. Rosa de los vientos para el día 23 de Marzo J1. 116 Figura 27.Incremento de la mortalidad en función de la concentración de material particulado. 122 LISTA DE GRAFICAS Pag. Gráfica 1. Comportamiento de la Temperatura en las tres estaciones. 75 Gráfica 2. Comportamiento de la Humedad Relativa en las estaciones de Usme y Vitelma. 75 Gráfica 3. Comportamiento de la Humedad Relativa para las tres estaciones. 77 Gráfica 4. Variaciones de la temperatura durante todo el periodo de muestreo. 82 Gráfica 5. Comportamiento del viento durante el periodo de muestreo. 83 Gráfica 6. Radiación Solar durante el periodo de muestreo. 84 Grafica 7. Humedad Relativa durante el periodo de muestreo. 85 Grafica 8. Concentración de Material Particulado PM10 durante el periodo de muestreo. 86 Gráfica 9. Concentración de Óxidos de Nitrógeno durante el periodo de muestreo. 87 Gráfica 10. Concentración de O3 durante el periodo de muestreo 88 Gráfica 11: Frecuencia de la familia Bacillaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo. 90 Gráfica 12: Frecuencia de la familia Corynebacteriaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo. 90 Gráfica 13: Frecuencia de la familia Pseudomonaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo. 91 Grafica 14: Frecuencia de la familia Actinomicetes en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo. 92 Grafica 15: Frecuencia de la familia Enterobactereaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo. 92 Grafica 16: Frecuencia de la familia Coccaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo. 93 Grafica 17: Frecuencia del reino de los Hongos en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo. 94 Grafica 18: Frecuencia de bacterias y hongos en Puente Aranda durante todos los días de muestreo. 95 Grafica 19: Frecuencia de bacterias y hongos en Colegio la Merced durante todos los días de muestreo. 96 Grafica 20: Frecuencia de familias de microorganismos en Parque Cundinamarca durante todos los días de muestreo. Grafica 21: Frecuencia de familias de microorganismos en INVIMA 98 durante todos los días de muestreo. 99 Grafica 22: Frecuencia de familias de microorganismos en parque Salazar Gómez durante todos los días de muestreo. 100 Grafica 23: Frecuencia de familias de microorganismos en Guatavita durante todos los días de muestreo. 101 Grafica 24: Comportamiento de las concentraciones de microorganismos durante toda la fase de muestreo. 106 Grafica 25: Relación de variables meteorológicas y UFC/m3 en el punto Parque Puente Aranda. 108 Grafica 26: Relación de contaminantes atmosféricos y UFC/m3 en el punto Parque Puente Aranda. 109 Grafica 27: Relación de variables meteorológicas con UFC/m3 para el punto Salazar Gómez. 117 3 Grafica 28: Relación de contaminantes atmosféricos con UFC/m para el punto Salazar Gómez. 117 Grafica 29. Relación UFC/m3 con variables meteorológicas y concentración de PM2.5 en Colegio la Merced. 120 Grafica 30. Relación UFC/m3, PM2.5 y contaminantes atmosféricas en Colegio la Merced. 121 Gráfica 31. Comportamiento de las UFC/m3 durante las tres fases de muestreo en las tres jornadas. 128 Gráfica 32. Familias más frecuentes encontradas durante las tres fases de muestreo. 129 LISTA DE ANEXOS ANEXO A. TABLA DE MUESTREOS ALEATORIOS Y DATOS DE CAMPO ANEXO B. PROTOCOLOS ANEXO C. FORMATO DE LABORATORIO ANEXO D. CORRECCION DE UFC SEGÚN FELLER ANEXO E. PRUEBAS BIOQUIMICAS ANEXO F. MODELO ESTADISTICO DE HUMEDAD ANEXO G. PROMEDIOS DIARIOS DE FACTORES METEOROLÓGICOS Y CONTAMINANTES ATMOSFÉRICOS ANEXO H. BACTERIAS Y HONGOS IDENTIFICADOS DURANTE LA FASE DE MUESTREO ANEXO I. FRECUENCIAS DE FAMILIAS POR PUNTO Y JORNADA ANEXO J. FRECUENCIA DE ESPECIES POR PUNTO Y JORNADA ANEXO K. MICROORGANISMOS DE MAYOR FRECUENCIA POR PUNTO Y JORNADA ANEXO L. CONDICIONES METEOROLOGICAS Y DE CALIDAD DEL AIRE DURANTE LA FASE DE MUESTREO ANEXO M. ROSAS DE LOS VIENTOS ANEXO N. CORRELACIONES POR JORNADAS ANEXO O. MICROORGANISMOS ENCONTRADOS DURANTE LAS TRES FASES DE ESTUDIO GLOSARIO AEROSOL: Conjunto de todas las partículas sólidas y líquidas suspendidas en el aire con diámetros aerodinámico entre 0,002 µm hasta más de 100 µm. AGAR: Polisacarido complejo utilizado como solidificante con el que se forma un gel y forma parte de un medio de cultivo. AISLAMIENTO PRIMARIO: Separación de un microorganismo determinado de poblaciones mixtas que existen en un cultivo de manera que se puedan obtener colonias de bacterias bien aisladas denominadas UFC. ASEPSIA: Todo procedimiento que evita el acceso de gérmenes infecciosos o patógenos. ASPERGILOSIS: Enfermedades generadas por la inhalación de conidias e hifas de las diversas especies del hongo Aspergillus y que generalmente se encuentran asociadas al aparato respiratorio produciendo síntomas como tos, disnea, fiebre y en casos severos dolor torácico. BIOAEROSOL: Partículas transportadas por el aire, compuestas por seres vivos, o moléculas grandes que han sido liberadas por otro ser vivo y pueden estar compuestos por virus, bacterias, hongos y protozoos. CEPA ATCC: (American Type Culture Collection); Son cultivos de referencia utilizados como control en los procedimientos microbiológicos. ENDOCARDITIS: Inflamación de la membrana que cubre interiormente las cavidades del corazón. ENFERMEDAD RESPIRATORIA AGUDA (ERA): Conjunto de patologías como Neumonía, Bronquitis, Asma bronquial que afectan el sistema respiratorio, siendo causa muy frecuente de morbilidad y mortalidad. ESPORA: Una espora es un cuerpo microscópico unicelular o pluricelular que, sin fecundación sino por división propia, da nacimiento a nuevos organismos en vegetales, hongos y algunas especies protozoarias llamadas esporozoarios. INFECCION NOSOCOMIAL: Infecciones generadas dentro de los Hospitales. 14 INMUNODEFICIENCIA: Es un cuadro en el cual se presenta un déficit de la inmunidad humoral, celular o de ambas, y que se caracteriza por una susceptibilidad aumentada a las infecciones, y en algunos casos a enfermedades autoinmunes. INVERSION TERMICA: Fenómeno natural que se presenta cuando una capa de aire caliente queda entre dos capas de aire frío, impidiendo la libre circulación atmosférica y permitiendo que ésta se estacione a nivel del suelo. INFECCION RESPIRATORIA AGUDA (IRA): Conjunto de infecciones del aparato respiratorio causadas por virus y bacterias, generando síntomas como tos, otitis y obstrucción nasal. LISIS OSMOTICA: Muerte de la célula causada por el hinchamiento de esta al entrar agua de manera desequilibrada a esta. MEDIO DE CULTIVO: Solución acuosa que contiene los nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos. MICOTOXINA: Metabolitos secundarios o compuestos ubicuos que difieren mucho en sus propiedades químicas, biológicas y toxicológicas y pueden enfermar o causar la muerte a los animales que los consumen. MICROORGANISMO PATOGENO: Microorganismo que puede causar daños graves en el huésped que habita, por medio de infecciones, enfermedades o ambas. MICROORGANISMO OPORTUNISTA: Microorganismos que en principio no son patógenos, pero que pueden llegar a causar alguna enfermedad cuando las defensas del hospedador se encuentran debilitadas. MUCORMICOSIS: Enfermedad que puede llegar a generar en personas inmunodeficientes Infección rinocerebral (infección de los senos paranasales y del cerebro), Infección pulmonar e Infección del tracto gastrointestinal. OTOMICOSIS: Infección respiratoria de las vías superiores y que generalmente se produce en la piel del conducto auditivo externo producidas principalmente por A. niger y A. fumigatus. PLASMOLISIS: Fenómeno por el cual es extraída toda el agua que posee la célula y esta se seca. UFC: Unidades Formadoras de Colonia 15 RESUMEN El Material Particulado, puede llegar a ser un medio de transporte para microorganismos patógenos y oportunistas, contribuyendo al aumento de enfermedades respiratorias principalmente en niños, ancianos y personas inmunodeficientes. El objetivo de esta investigación fue evaluar la presencia de microorganismos oportunistas en aerosoles en la localidad de Puente Aranda, teniendo en cuenta parámetros meteorológicos y su relación con el material particulado PM 2.5 y PM10, realizando muestreos en cinco puntos, durante tres jornadas comprendidas entre las 6:00 am y 9:00 pm. Para ello se realizaron conteos de UFC e identificación de bacterias y hongos presentes en el aire, adicionalmente los filtros obtenidos en el medidor de alto volumen PM2.5 fueron sembrados en Agar Sangre y Saboreaud en donde se identificaron los microorganismos presentes para este diámetro de partículas. Los resultados muestran un promedio de 535 UFC/m3 para las tres jornadas, encontrándose principalmente Corynebacterium diptheriae, Klebsiella pneumoniae, Pseudomona aeruginosa, Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae como microorganismos patógenos y microorganismos oportunistas como Corynebacterium xerosis, Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Klebsiella ozonae, Proteus mirabilis y Serratia marcescens; en cuanto a los hongos las especies más frecuentes fueron Penicillium spp y Aspergillus spp. Se pudo determinar que las UFC/m3 durante el muestreo presentan una relación directa con las variables temperatura, viento y O3, mientras que para humedad relativa, radiación solar, NOx y PM10, se presenta una relación indirecta; en cuanto a PM2.5, se pudo establecer que los filtros sembrados presentaron baja presencia de microorganismos, debido a las variaciones diurnas de los factores meteorológicos que afectaron su supervivencia. 16 ABSTRACT The particulate material can be a transport media for pathogenic and opportunistic microorganisms, contributing to the increase of respiratory diseases mainly in children, old and inmunodeficient people. The objective of this investigation was to evaluate the presence of opportunistic microorganisms in aerosols of the locality Puente Aranda, considering meteorological parameters and their relation with particulate material PM2,5 and PM10. There were samplings carried out in five points, during three days between 6:00 a.m. and 9:00 p.m. For this porpouse, counts of CFU, fungus and bacteria identification were made in the air, additionally the filters obtained in the measurer of high volume PM2.5 were seeded in blood and Saboreaud agar, where the presence of microorganisms for this diameter of particles were identified. The results show an average of 535 CFU/m3 for the three days, being mainly Corynebacterium diptheriae, Klebsiella pneumoniae, Aeruginosa Pseudomona, Staphylococcus aureus and Streptococcus pneumonia the pathogenic microorganisms and Corynebacterium xerosis, Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Klebsiella ozonae, Proteus mirabilis and Serratia marcescens the opportunistic microorganisms. The most frequent species of fungus were Penicillium spp and Aspergillus spp. It was determined that there is a close relation between CFU/m3 and the variables: temperature, wind and O3 during the samplings, whereas relative humidity, solar radiation, NOX and PM10 present an indirect relation. On the other hand, it was established that the seeded filters had low presence of microorganisms, due to the diurnal variations of the meteorological factors that affected their survival. 17 JUSTIFICACION En la Localidad de Puente Aranda se presenta desde hace varios años un incremento en la actividad industrial y el flujo vehícular, debido al crecimiento y desarrollo de la ciudad, lo que ha generado una mayor cantidad de emisiones provenientes de fuentes fijas y móviles que están afectando la salud humana. Debido a la problemática que se presenta en cuanto a enfermedades respiratorias especialmente en niños, ancianos y personas con alteraciones en su sistema respiratorio se ve la necesidad de realizar una evaluación de la presencia de microorganismos oportunistas en aerosoles, su relación con material particulado PM10 y PM2.5 y factores meteorológicos en las diferentes épocas del año con el fin de relacionar la incidencia de estos factores en la salud, además esta investigación permitirá que las autoridades sanitarias cuenten con herramientas que ayuden a plantear recomendaciones y desarrollan e implementen programas de salud publica integral, para el control de la contaminación por este tipo de agentes en distintas zonas de la ciudad. 18 INTRODUCCION La contaminación del aire esta dada por las emisiones de tipo natural o antropogénico de gases, vapores, partículas líquidas o sólidas y por presencia de microorganismos patógenos u oportunistas en el aire que pueden contribuir en la incidencia de enfermedades respiratorias y gastrointestinales en seres humanos especialmente en niños, ancianos y personas con alteraciones en su sistema inmunológico La problemática que se presenta en la ciudad de Bogotá, principalmente en la localidad de Puente Aranda al ser esta una de las grandes zonas industriales y de alto flujo vehicular, es el incremento en el número de pacientes ambulatorios por enfermedades respiratorias, cardiovasculares, el aumento de admisiones hospitalarias y de mortalidad diaria, atribuido principalmente a las altas concentraciones de material particulado y a microorganismos presentes en la atmósfera. Teniendo en cuenta esta problemática y los antecedentes que existen en cuanto a la relación de material particulado y enfermedades respiratorias fue necesario realizar un estudio de microorganismos oportunistas y su relación con material particulado (PM10 Y PM2.5) en la localidad, considerando parámetros meteorológicos, dispersión y concentración de gases presentes en la atmósfera especialmente O3 y NOx, buscando determinar su comportamiento en áreas industriales y residenciales dentro de la localidad. 19 1. OBJETIVOS 1.1 OBJETIVO GENERAL: Evaluar la presencia de microorganismos oportunistas en aerosoles en algunas zonas de la localidad de Puente Aranda, teniendo en cuenta parámetros meteorológicos y su relación con el material particulado PM 2.5 y PM10. 1.2 OBJETIVOS ESPECIFICIOS: 9 Establecer un protocolo de toma de muestras que cumpla con el criterio de aleatoriedad en las jornadas y en los días de muestreo. 9 Cuantificar la presencia de microorganismos en los aerosoles presentes en la zona de estudio. 9 Determinar la existencia de Haemophyllus influenzae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa y Klebsiella pneumoniae y posibles hongos generadores de micotoxinas en la zona de estudio. 9 Establecer la relación de concentración de microorganismos con material particulado (PM10 y PM 2.5) y los gases presentes en el aire, especialmente O3 y NOx. 9 Realizar un análisis comparativo de los microorganismos encontrados durante las tres fases de monitoreo. 20 2. ANTECEDENTES En 1930 surge la aerobiología que se encarga de estudiar el transporte de los microorganismos en el aire, su identificación, comportamiento y supervivencia, teniendo como referencia la microbiología, meteorología, física de los aerosoles y la química atmosférica 1. La importancia de estudiar los microorganismos en el aire radica en que ciertos patógenos y oportunistas son responsables de causar infecciones respiratorias agudas (IRA) en individuos con respuesta inmune deficiente. La contaminación del aire ha sido también un campo de estudio, por su relación con el aumento de pacientes ambulatorios debido a enfermedades respiratorias y a la mortalidad diaria 2, principalmente por material particulado. En chile durante los años 2000 y 2002 se estudio pacientes menores de 5 años que acudían por IRA a los centros de salud Amanecer de Tumaco y Santa Rosa, en donde se pudo determinar que al incrementarse la concentración de PM10 en 10 µg/m3, se producía un aumento entre el 8% y el 26% en el número de consultas por enfermedad respiratoria 3. En la ciudad de México el estudio que se realizo tuvo como finalidad determinar la relación entre consultas por enfermedad respiratoria y la contaminación atmosférica, en donde se tuvieron en cuenta parámetros meteorológicos como temperatura, humedad relativa y velocidad del viento. Este estudio fue realizado desde el mes de julio de 1997 hasta diciembre de 1998, en donde se determino que un incremento en la concentración de PM10 en un promedio de 24 horas incrementa el numero de consultas por asma en un 4.97% y un 2.95% las consultas a urgencias por IRA 4. En México se realizó un estudio, con el fin de “determinar la concentración y tipo de microorganismos cultivables suspendidos en la atmósfera de la ciudad de Monterrey, por medio de análisis microbiológico de nueve sitios de la ciudad” 5, en 1 www.ine.gob.mx/publicaciones/libros/440/cap1.html. 2 GUÍAS PARA LA CALIDAD DEL AIRE. Centro Panamericano de Ingeniería Sanitaria y Ciencias del Ambiente (CEPIS/OPS) y Agencia Especializada de la Organización Panamericana de la Salud (OPS/OMS).p.40. 3 BARRIOS, S., Peña, F. y OSSES S. Efectos de la contaminación atmosférica por material particulado en las enfermedades respiratorias agudas en menores de 5 años. CIENCIA Y ENFERMERIA X (2): p.21-29,2004. Chile. 4 HERNÁNDEZ, TÉLLEZ, SANÍN, LACASAÑA, CAMPOS y ROMIEU. Relación entre consultas a urgencias por enfermedad respiratoria y contaminación atmosférica en Ciudad Juárez, Chihuahua. Salud pública de México / vol.42, no.4, julio-agosto de 2000. p. 288, 292-296. 5 NEVA P. Aida, GARCÍA Hilda, LIBERTAD Leal, YAÑEZ S. Juan Manuel. Microorganismos en la atmósfera de la ciudad de Monterrey. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Autónoma de Nuevo León, San Nicolás de los Garza., N.L. México. 21 donde se tuvo en cuenta la intensidad de la actividad humana, el tráfico vehicular, la dirección del viento, la humedad relativa, y la temperatura a dos horas diferentes del día (9 am y 14 pm); durante esta investigación se realizaron conteos microbianos de bacterias mesofílicas aerobias, coliformes, hongos, cocos Gram Positivos como Staphylococcus aureus y un bacilo Gram Negativo la Pseudomona aeruginosa. Con lo que se pudo concluir que la familia bacteriana de mayor frecuencia fue Bacillus, en donde se identificaron especies patógenas oportunistas como B. cereus, B. licheniformes, B coagulans y B, subtilis, en cuanto a los hongos se encontro alta frecuencia de aparicion de especies como Penicillium y Aspergillus, los cuales han sido clasificados como patógenos oportunistas y de alto riesgo para la salud de los seres humanos, ya que son causantes de alergias en ciertas épocas del año. También se logro establecer que las concentraciones de microorganismos en el aire no mostraron una relación directa con la actividad humana de cada zona, pero sí sus características ambientales como ubicación, grado de urbanización, nivel de vida de sus habitantes, temperatura y humedad relativa. En Bogotá en los últimos años se han venido adelantando una serie de investigaciones por parte de algunas Universidades con el fin de establecer la condición real del ambiente; la Universidad del Bosque, realizó un estudio con componentes descriptivos y analíticos que permitieron establecer la asociación entre contaminación del aire y enfermedad respiratoria. La población estudiada fueron niños menores de 5 años que vivían en un perímetro de 12 cuadras a la redonda del UPA (Unidad Primaria de Atención) de Puente Aranda y que asistían a instituciones educativas del sector. Los contaminantes que se tuvieron en cuenta para el estudio fueron SO2, NO2, O3, y PM10. La concentración de PM10 se asoció con las tasas de tos, sin que se observara relación dosis-efecto. Las altas concentraciones de PM10 no tienen un efecto considerable en la salud, aunque facilita la presencia de problemas respiratorios por niveles de NO2 y SO2. Un estudio acerca de la relación existente entre la contaminación atmosférica y las enfermedades respiratorias en niños menores de 14 años en dos zonas de Bogotá Venecia y Engativá realizado por la Universidad Javeriana, encontró una asociación de las concentraciones de PM10 y la presentación de síntomas en niños asmáticos y no asmáticos; esta asociación se da cuando se tiene en cuenta el día concurrente y los 5 días precedentes. Según el modelo en niños menores de 14 años una disminución de la concentración de PM10 en 10µg/m3 produciría una disminución de las consultas en un 17% En la localidad de Puente Aranda se realizó una caracterización Microbiológica del aire, por parte de Luis Camilo Blanco estudiante de la Universidad De La Salle, en donde logró identificar microorganismos como Serratia sp, Klebsiella sp, Yersinia 22 sp, Pseudomonas sp, Escherichia coli, Shigella sp, Corynebacterium sp, Candida sp y Rhodoturula sp, Aspergillus flavus, Aspergillus Níger, Penicillum sp, Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermis, sin identificar Haemophyllus influenzae y Streptococcus pneumonia que son los causantes más importantes de infecciones Respiratorias Agudas. Las últimas investigaciones realizadas en la Universidad de la Salle en cuanto a contaminación atmosférica y su relación con microorganismos patógenos hacen parte de un macro proyecto que se encuentra dividido en tres fases; la primera de ellas fue realizada por Ivonne Rey y Milena Fula entre los meses de junio y julio del 2005 y tenía como objetivo determinar la relación existente entre PM10, condiciones atmosféricas y Unidades Formadoras de Colonia UFC con la incidencia en el aumento de Enfermedades Respiratorias para la Localidad de Puente Aranda; en esta fase fueron identificadas 50 especies bacterianas entre las que se encuentran Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa las cuales son de importancia patógena principalmente en las personas con inmunodeficiencias. La segunda fase desarrollada por Fabio Pérez y David Olaya, durante los meses de Octubre y Noviembre del 2005, en donde se hizo una caracterización cualitativa y cuantitativa de los bioaerosoles encontrados en la localidad de Puente Aranda, además se relaciono con factores meteorológicos y material particulado, en esta parte de la investigación se identificaron 37 especies bacterianas en las cuales además de encontrar los microorganismos de importancia patógena identificados durante la primera fase de muestreo, se identificaron microorganismos oportunistas que pueden entrar por vía aérea y causar infección en diferentes sistemas del cuerpo, como es el caso de E. coli, Proteus sp, Klebsiella sp; además se logro establecer que las concentraciones de microorganismos (UFC/m3) durante todo el periodo de muestreo varían de día a día y entre jornadas, lo cual fue atribuido a los cambios atmosféricos que se presentaron durante el muestreo. 23 3. MARCO DE TEÓRICO El aire esta constituido por una mezcla de gases que contienen aproximadamente un 78% de Nitrógeno, 21% de Oxígeno y aproximadamente un 1% de Argón. Estos elementos, unidos a 0.03% de Anhídrido carbónico, forman el 99.99% del aire seco. Cuando se habla de la contaminación del aire, está se relaciona con el aumento de pacientes ambulatorios debido a enfermedades respiratorias, cardiovasculares, al incremento de admisiones hospitalarias y de la mortalidad diaria 6; esto debido a la emisión ya sea natural o por actividades humanas de gases, vapores y partículas líquidas o sólidas en cantidades excesivas y que llegan a producir efectos nocivos en la salud. 3.1 CONTAMINANTES DEL AIRE Son sustancias que cuando están presentes en la atmósfera afectan de manera adversa la salud de los humanos, animales, plantas, vida microbiana y estructuras o materiales. Cuando los contaminantes del aire se encuentran en “concentraciones bajas y hay un periodo de exposición largo pueden llegar a producir afecciones crónicas o efectos agudos cuando se expone a altas concentraciones y hay un periodo de exposición corto” 7; dentro de los contaminantes criterio se encuentran: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Material particulado fino. Óxidos de azufre Monóxido de carbono Ozono Óxidos de Nitrógeno Plomo Estos son los más comunes y de mayor presencia en los centros urbanos que es donde la población se concentra con mayor frecuencia, presentándose una mayor probabilidad de sufrir efectos nocivos en su salud. 6 GUÍAS PARA LA CALIDAD DEL AIRE. Centro Panamericano de Ingeniería Sanitaria y Ciencias del Ambiente (CEPIS/OPS) y Agencia Especializada de la Organización Panamericana de la Salud (OPS/OMS). p. 40. 7 NOEL DE NEVERSJ. Ingeniería del Control de la Contaminación del Aire. Mc Graw Hill. México D.F. 1998. p. 12. 24 3.1.1 AEROSOLES Los aerosoles son el conjunto de todas las partículas sólidas y líquidas suspendidas en el aire, que dependiendo de su composición química y diámetro aerodinámico (0,002 µm hasta más de 100 µm), intervienen de manera importante en el proceso de la contaminación atmosférica. Se clasifican de acuerdo a su origen en cuatro tipos: • • • • Sal marina, generada por la evaporación de las gotas de agua liberando sales. Polvo procedente de suelos, levantados por los vientos compuestos principalmente por silicatos. Humos procedentes de la combustión. Compuestos químicos, principalmente Sulfatos y Nitratos producidos por reacciones químicas y fotoquímicas de componentes gaseosos atmosféricos como el SO2 y NO2 8 Los efectos de los aerosoles en la absorción de radiación dependen del diámetro de las partículas que lo componen; partículas con diámetros menores a 10 µm contribuyen a la absorción de la radiación infrarroja en pequeñas proporciones y refuerzan la absorción de la luz visible, mientras que las partículas con diámetros entre 0.1 µm y 1µm “absorben fuertemente la radiación visible, teniendo como consecuencia un enfriamiento de la superficie terrestre” 9. Su composición química, microbiológica (patógenos u oportunistas) y su tiempo de permanencia en la atmósfera son factores importantes para establecer los efectos que puedan generarse en el sistema respiratorio superior e inferior y los efectos que generen en el área de influencia. 3.1.2 PARTÍCULAS SUSPENDIDAS Las partículas en suspensión son el contaminante más visible, generalmente se presentan como humo, son emitidos en procesos de combustión y actividades industriales y “están compuestos por materiales sólidos y líquidos finamente divididos y dispersados en el aire causando disminución en la visibilidad” 10, en grandes concentraciones son nocivas para la salud pública produciendo irritaciones en el sistema respiratorio; de igual manera tienen efectos adversos en la vegetación y causan deterioro en edificaciones. 8 FONT, Tullot Inocencio. El hombre y su ambiente atmosférico. Madrid: Instituto Nacional de Meteorología, 1991. p. 11 9 Ibid., p. 23 10 NEVERS, Op.cit., p.101 25 Las partículas suspendidas en el aire incluyen partículas totales en suspensión (PTS), Material Particulado con diámetro aerodinámico mediano menor de 10 µm o también llamadas partículas gruesas o de fracción inhalable (PM10), Material Particulado con diámetro aerodinámico mediano inferior a 2,5 µm también llamadas partículas de fracción respirable o partículas finas (PM2.5); “las cuales han sido identificadas por la Organización Mundial para la Salud como una amenaza para la salud” 11, estos efectos dependen de su tamaño y composición química “siendo aparentemente las mas finas y los sulfatos los mas perjudiciales, al parecer estas ultimas son responsables de aumentos de los ataques de asma, de agravaciones de enfermedades cardiacas y pulmonares, y de disminución de la resistencia de los niños a las enfermedades respiratorias” 12. 9 Material Particulado PM 10 µm Dentro del Material Particulado se encuentran las partículas gruesas o PM10; las cuales tiene un diámetro aerodinámico menor a 10 micrómetros, se forman cuando se desintegra una masa de mayor tamaño y quedan suspendidas en el aire millones de partículas (masas) de menor diámetro; “éstas tienden a precipitarse más rápidamente y permanecer en la atmósfera sólo durante algunos minutos u horas, dependiendo de su tamaño, la velocidad del viento, turbulencia y precipitación” 13; son emitidas por diferentes fuentes como las generadas por el polvo que es arrastrado por el viento o levantado por los vehículos en carreteras sin pavimentar, también se encuentran las generadas en operaciones industriales, agrícolas y de construcción; “así mismo los elementos biológicos como bacterias, protozoarios, virus, hongos polen y esporas son clasificados dentro de esta categoría” 14. 9 Material Particulado PM 2,5 µm Las partículas finas o PM2.5, tienen un diámetro aerodinámico inferior a 2.5 micrómetros, provienen generalmente de la utilización de combustibles fósiles y polvos; estás se forman en la atmósfera principalmente por la presencia de gases como los óxidos de azufre, NOx y COV. “Generalmente permanecen más tiempo en la atmósfera que las gruesas, por periodos que pueden ser de días o semanas y tienden a dispersarse de manera más uniforme generando transformaciones atmosféricas locales, durante el estancamiento atmosférico o durante el transporte de largas distancias al convertirse en un aerosol medianamente estable; lo que 11 GUÍAS PARA LA CALIDAD DEL AIRE, Op.cit. p. 17 FONT TULLOT, Op.cit. p. 110 13 GUÍAS PARA LA CALIDAD DEL AIRE. Op.cit. p. 62 14 Ibid., p.65. 12 26 conlleva a que en una región la concentración de la masa total de partículas más gruesas sea menos uniforme que la de partículas finas” 15. Se clasifican en dos categorías: ¾ Las que se emiten al ambiente: Dentro de esta se encuentran las partículas carbonosas del humo y las provenientes de las emisiones de motores diesel. ¾ Las que se forman en el ambiente: Se incluyen las partículas carbonosas que se generan durante la secuencia de la reacción fotoquímica que conduce a la formación de O3, así como las partículas de sulfato y nitrato que resultan de la oxidación de SO2 y NOx liberado durante la combustión, sus productos de reacción y COVs. 3.1.3 CONTAMINANTES GASEOSOS “Los contaminantes gaseosos incluyen compuestos de amoniaco (NH3), compuestos orgánicos como los hidrocarburos (HC), compuestos orgánicos volátiles (COV), hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP), derivados halogénicos, aldehídos, compuestos halogénicos (HF y HCl) y sustancias olorosas” 16, igualmente compuestos de azufre como el dióxido de azufre (SO2) y trióxido de azufre (SO3), compuestos de nitrógeno como el óxido nítrico (NO) y dióxido de nitrógeno (NO2). Según su origen son clasificados como primarios y secundarios. 3.1.3.1 CONTAMINANTES PRIMARIOS Son producidos directamente de los procesos de combustión generados por vehículos, actividades industriales y por plantas de energía eléctrica, dentro de estos contaminantes se encuentran Nox, HC, Pb, CO, SO2, COVs y su concentración puede variar de acuerdo a las emisiones antropogénicas. Se estima que “entre un 90 a 95% de las emisiones de CO, Pb y un 60 a 70% de NOx y HC son generadas por el parque automotor” 17, que al encontrarse cerca del área de respiración de las personas aumenta el riesgo de contraer enfermedades de tipo respiratorio. 15 GUÍAS PARA LA CALIDAD DEL AIRE, Op. Cit., p. 66. Ibid., p.75. 17 ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE LA SALUD. Riesgos del Ambiente Humano para la Salud. p. 77 16 27 Dentro de los contaminantes primarios más relevantes en cuanto a su efecto perjudicial en la salud humana se encuentran: ¾ OXIDOS DE NITROGENO: “El nitrógeno forma siete diferentes óxidos, de los cuales sólo el óxido nítrico (NO) y el dióxido de nitrógeno (NO2) se presentan como contaminantes importantes del aire” 18, debido a su contribución junto con los hidrocarburos en la formación de reacciones fotoquímicas generadoras de O3 troposférico, sus principales fuentes antropogénicas son el consumo de combustibles fósiles y las emisiones generadas por los vehículos a motor. Se ha establecido que los niveles de NOx disminuyen mientras los de O3 aumentan, presentándose un equilibrio de estos en la atmósfera. “Las concentraciones en áreas urbanas medidas anuales se encuentran entre un 20 y 90µg/m3, mientras que en zonas no contaminadas las concentraciones representan aproximadamente 5 veces menos” 19. La presencia de altas concentraciones de NO2 pueden ser perjudiciales para la salud y algunos cultivos por su contribución a la formación de la lluvia ácida. ¾ MONÓXIDO DE CARBONO: El Monóxido de carbono es un gas incoloro, inodoro e insípido, químicamente inerte en condiciones normales y ligeramente menos denso que el aire; es producto de la combustión incompleta de combustibles que contienen carbono, y se presenta también en algunos procesos industriales y biológicos; cuando se presenta en bajas concentraciones, no produce ningún daño, sin embargo cuando sus concentraciones son generadas cerca del suelo, a nivel de la respiración humana, producidas principalmente por emisiones de vehículos a motor pueden llegar a afectar el sistema respiratorio, debido a su afinidad con la hemoglobina. Otras fuentes importantes de emisión de CO son las instalaciones industriales, como centrales eléctricas y plantas siderúrgicas. Las concentraciones en áreas urbanas dependen en gran medida de la densidad del tráfico de vehículos y las condiciones meteorológicas como velocidad y dirección del viento y gradientes de temperatura. “Así mismo estas se ven influenciadas por la configuración que tengan los edificios (forma y altura) y la distancia y ancho de las calles, ya que entre más amplia sea la distancia entre ellas, las concentraciones descienden más rápidamente” 20. 18 EFECTOS DE LOS CONTAMINANTES EN LA SALUD. México, p. 23 FONT TULLOT, Op.cit., p. 83. 20 ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD. ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE LA SALUD. Criterios de salud ambiental 13. Monóxido de Carbono. 1980. p. 16. 19 28 9 DIOXIDO DE AZUFRE Es un gas incoloro con un “umbral de sabor de 0.3ppm y de olor 0.5ppm” 21, emitido por fuentes similares a las de las partículas especialmente mediante la combustión de carbón y petróleo. “Puede reaccionar dando lugar a la formación de ácido sulfúrico y sulfato, los que a su vez quedan así incorporados en el aerosol atmosférico” 22. Su importancia en la contaminación del aire, radica en efectos en la salud humana, es dañino para muchas plantas reduciendo su crecimiento y rendimiento, afecta edificios y monumentos y corrosión de metales. De igual forma “el SO2 antropogénico modifica en cierta medida la composición de las atmósferas locales en áreas urbanas e industriales, cuyos contenidos en SO2 suelen ser del orden de 300 veces superiores a los de las áreas rurales no contaminadas” 23. 3.1.3.2 CONTAMINANTES SECUNDARIOS Los contaminantes secundarios se forman en la atmósfera a través de reacciones térmicas, químicas o fotoquímicas; donde participan los contaminantes primarios de estas últimas se forma el O3, debido a las reacciones que se producen entre el NOx y los hidrocarburos reactivos (HC). Los contaminantes más representativos en cuanto a afectación en la salud de los seres humanos se encuentran: ¾ OZONO: El O3 es el principal oxidante fotoquímico presente en la atmósfera, es un contaminante incoloro e inodoro para concentraciones por debajo de 15 a 40 µg/m3 que se forma al reaccionar los compuestos orgánicos volátiles (VOCs), óxidos de nitrógeno (NOx) e hidrocarburos bajo la acción de la luz ultravioleta. Su importancia en la contaminación del aire se basa principalmente en que aunque sea un compuesto muy inestable y se destruya rápidamente; su corta permanencia en la atmósfera, “puede ser irritante para el sistema respiratorio y generar molestias como tos, flema, dolor al respirar e inflamación en el tejido pulmonar y reducción en la capacidad de respuesta del mismo a agentes extraños” 24 cuando sus concentraciones superan valores de 200 µg/m3. Sin embargo, los estudios médicos no han podido demostrar que la mortalidad aumente a causa del ozono; así mismo “presenta repercusiones meteorológicas 21 J. GLYNN Henry. Ingeniería Ambiental, Prentice Hall. 1999. p. 500. FONT TULLOT. Op.cit., p. 110. 23 Ibid., p. 113 24 www.epa.gov/air/espanol/oertopic. 22 29 representativas, tanto a escala local como a escala global reduciendo la visibilidad y contribuyendo al efecto invernadero” 25. Las concentraciones de O3 en ciudades con un alto porcentaje de industrialización y alto flujo vehicular pueden llegar a ser entre 300 y 400 µg/m3 y persistir entre 8 ó 12 horas/día durante varios días siempre y cuando las condiciones atmosféricas favorezcan su formación y las condiciones de dispersión sean deficientes; de igual forma estudios realizados por la EPA han llegado a establecer que “a medida que el aire contaminado se aleja de los sitios de producción, las concentraciones de O3 aumentan, lo que indica que el O3 se puede producir muy lejos de las fuentes de NO2 y HC” 26. 3.2 FUENTES DE CONTAMINACION Teniendo en cuenta que las emisiones generadas por el desarrollo de diversas actividades humanas, constituyen un gran porcentaje de la contaminación del aire dentro de las grandes ciudades; estas han sido clasificadas en tres grupos: ¾ Fuentes Fijas o Estacionarias: Las cuales a su vez han sido subdivididas en: - - Fuentes de zonas rurales: Entre las que se encuentra la producción agrícola, la minería y extracción de minerales entre otras. Fuentes industriales puntuales y del área: Donde se encuentran todas las actividades industriales que generen emisiones atmosféricas. Fuentes comunitarias: Como la calefacción de viviendas y edificios, Incineradores de residuos urbanos y de lodos provenientes de aguas residuales, chimeneas, cocinas y servicios de lavandería. ¾ Fuentes Móviles: Están compuestas por cualquier tipo de vehículos de combustión a motor ya sea de gasolina, diesel, motocicletas, aviones, incluidas fuentes lineales. ¾ Fuentes de Interiores: Las cuales incluyen el “consumo de cigarrillo, los agentes biológicos que han sido transportados por el aire (polen, ácaros, moho, insectos, microorganismos, alergenos de mascotas), que aunque no son 25 26 FONT TULLOT. Op.cit., p. 115. Ibid., p.115 30 contaminantes en el sentido de la definición, constituyen factores ambientales que pueden ejercer importantes efectos sobre la salud” 27, también son incluidas las emisiones de materiales o sustancias usadas en interiores como compuestos orgánicos volátiles, plomo, radón, asbesto, productos químicos sintéticos, etcétera. 3.3 BIOAEROSOLES Son partículas transportadas por el aire, compuestas por seres vivos, o por moléculas grandes que han sido liberadas por un ser vivo (bacterias, hongos, protozoos, virus), siendo estos complejos debido a la naturaleza de sus componentes y compuestos consecuencia de su desarrollo o actividad. Tabla 1. Microorganismos presentes en los bioaersoles. Organismo Bacteria Hongos Protozoos Unidad transportada Ejemplos de organismos Organismos Esporas productos Legionella Termoactinomyces Endotoxinas Proteasas Organismos Esporas Antígenos Toxinas Volátiles Sporobolomyces Alternaria Histoplasma Glicoproteinas Aflatoxinas Aldehídos Organismos Antígenos Naoglersis Acarnihamaebs Efectos humanos primarios Neumonía Neumonía Fiebre, escalofríos asma Neumonía Asma (Rinitis) Infección sistémica Asma (Rinitis) Cáncer Irritación membrana mucosa. Infección Neumonía Tipos de vida Parásitos facultativos Saprofitos Saprofitos Saprofitos Facultativos Parásito facultativo Fuente: NTP 288.Ministerio de trabajo y asuntos sociales. España. En los bioaerosoles se pueden encontrar microorganismos en donde su presencia en la atmósfera ha sido comprobada por el crecimiento de estos en medios de cultivo denominándose cultivables; “sin embargo, se considera que esto representa sólo una pequeña fracción de la población que llega a la atmósfera, de 27 Organización Panamericana de la Salud / Organización Mundial de la Salud. Op.cit., p. 9. 31 forma tal que la mayoría podría estar muerta o encontrarse en forma viable no cultivable” 28. La presencia, reproducción y dispersión de microorganismos en el aire, depende de factores meteorológicos como temperatura, humedad relativa, luz y velocidades del viento, de igual forma dependen de la cantidad nutrientes, principalmente agua y materia orgánica que puedan encontrar para el desarrollo de su metabolismo y supervivencia. Para que se produzca un bioaerosol, se requieren tres factores: • • • Presencia de un reservorio: Es el lugar donde se encuentran los organismos y el tipo de reservorio depende de si son parásitos obligados (Virus, algunas bacterias y hongos) o parásitos facultativos (la mayoría de bacterias y ciertos hongos). Proceso de amplificación: Es el aumento en la concentración de los organismos, sus partes o componentes, siendo este un factor determinante en el proceso de diseminación y dispersión de las partículas que constituyen el bioaerosol. Aerosolización: Consiste en la diseminación del bioaerosol. 3.4 MICROORGANISMOS EN EL AIRE La mayoría de las bacterias que se encuentran en la atmósfera provienen de la vegetación, el suelo y los cuerpos de agua, y en menor proporción de las actividades antropogénicas; su supervivencia y distribución están dadas por factores biológicos, meteorológicos (viento, radiación solar, temperatura y humedad relativa) y por la química atmosférica. Las actividades antropogénicas, como el tráfico vehicular, las plantas de tratamiento de aguas residuales, el movimiento de los animales en suelos expuestos y la alta densidad poblacional entre otros, liberan una gran cantidad de bacterias a la atmósfera, produciendo la contaminación de las áreas circundantes. Las plantas, al ser un hábitat de muchos microorganismos (saprofitos o patógenos), incluyendo las bacterias, ayudan de manera importante a incrementar el número de éstas suspendidas en el aire, por la acción del viento y de la lluvia. Por otra parte, los animales y el hombre constituyen una fuente importante de bacterias patógenas, en el caso de los humanos las bacterias contenidas en la saliva se liberan a la atmósfera al hablar, toser y estornudar; de igual manera el 28 www.ine.gob.mx/publicaciones/libros/440/cap1.html 32 desprendimiento de la piel y el cabello son una fuente constante de generación de virus, bacterias y hongos; otra fuente importante son las heces de animales y humanos que pueden contaminar el suelo con microorganismos potencialmente patógenos, y existe la posibilidad de que sean suspendidos posteriormente en la atmósfera. Los microorganismos presentes en el aire pueden presentar episodios de estrés causados por condiciones extremas generadas en la atmosfera, como lo son la desecación, el frió, el calor, la congelación, la radiación UV, los cambios de temperatura, la humedad relativa, la lluvia ácida y la contaminación química o choque osmótica; que puede generar daños en sus membranas o la muerte; sin embargo los microorganismos que presentan estos daños, pueden llegar a reproducirse si encuentran los elementos necesarios en el medio circundante para reparar los daños. Por ello la supervivencia de un microorganismo que haya sido expuesto a estrés, dependerá de su capacidad para reparar sus funciones biológicas y metabólicas, las cuales se realizan a través de dos procesos principalmente: • • Físico-químicos Enzimáticos Tabla 2. Moléculas afectadas por factores ambientales estresantes Factor estresante Humead relativa y temperatura Oxígeno Ozono Factor aire libre (ozono+olefins) Rayos g, rayos X y UV Molécula blanco Fosfolípidos de membrana, proteínas Fosfolípidos, proteínas Fosfolípidos, proteínas Fosfolípidos, proteínas y ácidos nucléicos Fosfolípidos, proteínas y ácidos nucléicos Fuente: www.ine.gob.mx/publicaciones/libros/440/cap1.html 3.4.3 METABOLISMO MICROBIANO Consiste en todos los procesos químicos que se generan dentro de una célula, produciendo la energía necesaria para el desarrollo de sus funciones, lo cual depende de los nutrientes presentes en el medio circundante que proporcionen todas las “sustancias necesarias para la síntesis y mantenimiento de su 33 protoplasma, con una fuente de energía y condiciones ambientales adecuadas” 29. Cuando la célula se constituye a partir de nutrientes tomados del medio exterior se denomina anabolismo; dando como resultado de la biosíntesis bioquímica de nuevo material celular (biosíntesis), este proceso requiere energía que se obtiene del medio exterior celular utilizando como fuentes la luz (fototrofos) y compuestos químicos (quimiotrofos). Los microorganismos que utilizan como fuente de energía de compuestos orgánicos se denominan quimiorganotrofos y los que utilizan la oxidación de compuestos inorgánicos se denominan quimiolitotrofos. Los quimiolitotrofos cumplen un papel importante en el mantenimiento de los ciclos del nitrógeno, el carbón y el azufre, estos microorganismos utilizan como sustratos H2S, NH4, NO2, Fe2+, los cuales son oxidados por complejos enzimáticos, dentro de este grupo también se encuentran bacterias que utilizan como fuente de energía el hidrogeno (Nitrosomonas y Nitrobacter). 3.4.4 NUTRICIÓN MICROBIANA Los microorganismos poseen cuatro elementos indispensables para el optimo funcionamiento de su metabolismo denominados macronutrientes, principalmente Carbono, Hidrogeno, Nitrógeno y Oxigeno; los cuales son requeridos en grandes cantidades; estos elementos pueden ser asimilados por compuestos de carbono orgánico, NH3, NO3 o N2; otros macronutrientes importantes para algunos microorganismos son el Fósforo, Azufre, potasio, magnesio y sodio; de igual forma existen elementos necesarios para el funcionamiento de los microorganismos denominados micronutrientes, estos son requeridos en pequeñas cantidades y hacen parte de las enzimas celulares dentro de los cuales se encuentran Cr, Co, Cu, Mn, Ni, Zn, Fe. Los contaminantes del aire, pueden contener nutrientes y proporcionar a los microorganismos energía química y fuentes de carbono necesarios para su nutrición; ayudado de factores meteorológicos como la humedad, temperatura e intensidad lumínica que favorecen su crecimiento. 3.4.3 PRINCIPALES FAMILIAS DE MICROORGANISMOS PRESENTES EN EL AIRE • Familia Bacillaceae: El genero bacillus, esta comprendido por bacilos gram-positivos, caracterizados principalmente por su capacidad de producir esporas. Este género incluye microorganismos aerobios estrictos y anaerobios facultativos. La mayoría de 29 JOKLIL,Wolfgang. Zinsser Microbiología. Medica Panamericana. 1996.p.79 34 especies de este género se encuentran en mayor proporción en muestras de suelo, aire y polvo. Las especies pertenecientes a este género son bastante heterogéneas, debido a su gran diversidad metabólica, de tipo nutricional y de la composición y estructura de la pared celular de las formas vegetativas. De igual manera se encuentran especies psicrofilas, mesófilas y termófilas, así como alcalófilas, neutrófilas y acidófilas. La especie B. anthracis es el principal causante de enfermedades en el se humano y en otros mamíferos, seguido de B. cereus causante de envenenamiento por consumo. Otras especies importantes dentro de esta familia son: • Bacillus mycoides Bacillus circulans Bacillus licheniformis Bacillus subtilis Bacillus megaterium Familia Corynebacteriaceae: Son bacilos gram-positivos, catalasa positiva, no forman esporas, hacen parte de la flora normal del humano, pueden encontrarse en el ambiente y estar asociados con animales. Las corinebacterias se han considerado como poco importantes en cuanto a patologías del ser humano, sin embargo en personas con inmunodeficiencias pueden asumir el papel de invasores oportunistas, causando principalmente infecciones cutáneas, neumonía, endocarditis, placa dental entre otras. El C. diptheriae es el patógeno humano mas importante dentro de esta familia, “la cual tiene la capacidad de producir la toxina difterica cuando es lisogenizada por el fago beta” 30. Otras especies patógenas del hombre son: 30 Corynebacterium amycolatum Corynebacterium auris Corynebacterium jeikeium Corynebacterium minutissimum Corynebacterium xerosis Corynebacterium ulcerans Corynebacterium urealyticum Corynebacterium Bovis Corynebacterium matruchotii www.wikipedia.org/wiki/Portada 35 • Familia Pseudomonadaceae El genero Pseudomonas esta compuesto por varias especies de bacilos gramnegativos, oxidasa-positivos, aerobios y no fermentadores, que habitan principalmente en el suelo y agua, cumplen un papel importante en la descomposición de la material orgánica. Generalmente son móviles debido a los flagelos polares que posee. Algunas especies son patógenas para plantas y animales, mientras otras son patógenas oportunistas que infectan al ser humano que se presente inmunodeficiencias. La Pseudomona aeruginosa es el patógeno humano, causando infecciones nosocomiales, meningitis y meningitis. Otras especies pertenecientes a esta familia son: Pseudomonas mallei Pseudomonas capacia Pseudomonas maltophilya. Pseudomonas pseudomallei. Pseudomonas pseudoalcaligenes Pseudomonas alcaligenes Familia Actinomicetaceae Son bacilos gram-positivos que varían en su morfología, requerimientos de oxigeno, composición de la pared celular y capacidad de formar esporas. Estas causan tres infecciones importantes que son Actinomicosis, Nocarditis y Actinomicetoma. Entre las principales especies se encuentran: • • • • • • Actynomyces Boris Actynomyces pyogenes Actynomyces viscosus Actynomyces israelí Actynomyces naeslundii Familia Enterobactereaceae Son bacilos gram-negativos pequeños no formadores de esporas que pueden ser móviles o inmóviles, son microorganismos facultativos con diversidad bioquímica. Cuando se desarrollan en anaerobiosis fermentan los hidratos de carbono; mientras que en concentraciones elevadas de oxígeno utilizan el ciclo del ácido tricarboxílico. 36 La mayor parte de las especies de esta familia no son patógenas, sino microorganismos oportunistas que pueden infectar cualquier sitio del organismo cuando encuentren un huésped alterado o inmunodeficiente. Los bacilos entéricos pueden llegar a invadir cualquier parte del organismo y causar infecciones nocosomiales, neumonía, meningitis y diversos trastornos gastrointestinales. Estos microorganismos son sensibles a la desecación pero pueden sobrevivir durante periodos prolongados si se les proporciona la humedad adecuada. Entre las especies de mayor interés para los humanos se encuentran: ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ • Escherichia coli Citrobacter koseri Citrobacter amalonaticus Enterobacter aerogenes Klebsiella oxytoca Klebsiella ozaenae Klebsiella pneumoniae Klebsiella rhinoscleromatis Morganella morganii Proteus mirabilis Proteus vulgaris Alcaligenes feacalis Serratia odorífera Providencia alcalifaciens Familia Coccaceae A esta familia pertenece el genero Staphylococcus, son anaerobios facultativos gram-positivos de los cuales existen 20 especies y “tres de ellas son de importancia clínica entre los que se encuentran Staphylococcus aureus, S. epidermis y S. saprophyticus, en donde el S. aureus es el patógeno mas significativo para el hombre, el S epidermis es asociado con infecciones en pacientes con inmunodeficiencias, el S. saprophyticus puede causar infecciones en el tracto urinario en las mujeres” 31. Otro genero perteneciente a esta familia son los “Streptococcus que pueden causar enfermedades como faringitis estreptocócica, fiebre escarlatina, infecciones en el tracto urinario y endocarditis bacteriana. A este genero pertenecen principalmente S. pyogenes, Enterococcus feacalis y S. pneumonia” 32. Otras especies que se asocian con patología humana pertenecientes a esta familia se encuentran: 31 32 JOKLIK, Op.cit., p.555. Ibid.,p.577 37 • Staphylococcus haemolyticus Staphylococcus lugdunensis Staphylococcus auricularis Staphylococcus xylosus Staphylococcus simulans Hongos El reino de los hongos esta compuesto por 50.000 especies; estos se pueden diferenciar, identificar y clasificar según su morfología, estructura, mecanismo de formación y elementos formadores de las esporas. Tan solo una docena de estas especies causan el 90% de todas las micosis. “Los hongos son microorganismos eucariotas, se encuentran principalmente en el agua, los suelos y restos orgánicos en descomposición. La mayoría de estos son aerobios obligados o facultativos, son quimiotropicos” 33. Algunas especies son parásitas y hacen parte de la flora normal de los seres humanos, entre ellos uno de los mas importantes es la Candida albicans, la cual puede comportarse como oportunista y resultar patógena cuando las personas presentan inmunodeficiencias en su sistema. “Otras especies de hongos pueden producir durante su desarrollo sustancias tóxicas o micotoxinas como, por ejemplo, las aflatoxinas producidas por Aspergillus flavus, que es un hongo filamentoso” 34 causante de enfermedades como Ontomicosis y Aspergilosis broncopulmonar. Estas micotoxinas son metabolitos secundarios, que son sintetizados y secretados hacia el medio ambiente por los hongos, “donde pueden ser ingeridos de manera inadvertida y causar efectos tóxicos directos en el ser humano y en animales” 35. Entre los hongos que son de interés clínico se encuentran: • • • • • • • Aspergillus flavus Aspergillus fumigatus Rhizopus spp. Absidia spp. Mucor spp. Aspergillus niger Penicilium spp. 33 Ibit., p.1427 NTP 488: Calidad de aire interior: identificación de hongos 35 JOKLIK, Op.Cit.,P.1442 34 38 3.5 FACTORES METEOROLÓGICOS Y SU RELACION CON EL TRANSPORTE Y DISPERSION DE MICROORGANISMOS Y CONTAMINANTES DEL AIRE “Variables meteorológicos como temperatura, radiación solar, humedad, velocidad y dirección del viento y precipitación que a su vez relacionadas con la topografía y características propias de las ciudades contribuyen en los procesos de transporte, dispersión, mezcla y en las transformaciones físicas y/o químicas de los contaminantes” 36; además influyen en la activación o inactivación de bioaerosoles presentes en la atmósfera que pueden llegar a afectar o no la salud humana. 3.5.1 TEMPERATURA La temperatura está relacionada con la energía calorífica de los rayos solares y es importante porque determina la formación de las nubes, afecta los valores de humedad atmosférica o cantidad de vapor de agua que se encuentra en el aire, e influye en la presión atmosférica, es decir, la fuerza que ejerce el peso del aire sobre la superficie terrestre, esta se relaciona específicamente con la inversión térmica; el cual es un fenómeno natural que se presenta durante todo el año, pero sobre todo durante el invierno y se produce cuando una capa de aire caliente queda entre dos capas de aire frío, impidiendo la libre circulación atmosférica y permitiendo que ésta se estacione a nivel del suelo; aunque por sí sola no representa un riesgo para la salud, sí lo es cuando en su interior posee una concentración elevada de contaminantes y bioaerosoles, generados por las diferentes fuentes de emisión, “deteriorando la calidad del aire y poniendo en riesgo la salud humana” 38. La importancia de la temperatura en la dinámica atmosférica, radica en la influencia que esta genera en la movilización y limpieza de grandes cantidades de polvo, humo, partículas y bioaerosoles suspendidos en el aire, transportándolos a través de cerros, valles y cañadas; en este proceso de limpieza del aire, también participa la lluvia que precipita al suelo las partículas suspendidas existentes. Cuando el ciclo de movimiento del aire no ocurre se tiene el riesgo de exponer a la población a respirar un aire más contaminado de lo normal debido a que el aire se encuentra estancado y la dispersión de contaminantes es prácticamente nula, impidiendo así que “la dilución del contaminante llegue hasta un punto donde las concentraciones cerca del suelo sean inocuas” 39. 36 LOPEZ Leonardo. LA METEOROLOGIA Y LA CONTAMINACION ATMOSFERICA. 2006 EMAS. Salud Familiar 39 ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE LA SALUD. Op. cit. p. 338. 38 39 3.5.2 RADIACION SOLAR La radiación solar también recibe el nombre de espectro electromagnético y es el resultado de la descomposición de la energía que proviene del sol. Este espectro esta constituido por una gama de longitudes de onda; “de las cuales tan solo las que se encuentran entre 0.3 y 0.8 µ llegan a la superficie de la tierra” 40; de igual forma en el proceso de calentamiento solar de la superficie interviene no solo la radiación solar directa sino también la radiación difusa, que es la parte de la radiación dispersada por las partículas de la atmósfera, mediante reflexión difusa y es influida por el tipo y la cantidad de nubes presentes. Se ha establecido que la radiación de luz ultravioleta (UV) produce un efecto biocida en los microorganismos, debido al desecamiento y la elevada temperatura que puede presentarse en el aire, especialmente para aquellos no esporulados; debido a esto la supervivencia en el polvo del aire de los hongos y de algunas bacterias formadoras de esporas es mayor que la de aquellas bacterias no esporuladas, que les permiten tolerar los efectos adversos de los rayos UV, además de contener mecanismos que les permiten reparar los daños provocados por la radiación y de esta forma pueden permanecer por largos periodos de tiempo en la atmósfera, favoreciendo el incremento en las enfermedades presentes en la población. 3.5.3 HUMEDAD RELATIVA El vapor de agua es uno de los componentes más importantes de la atmósfera, debido a que da lugar a diferentes fenómenos atmosféricos y a la determinación de los tipos de clima. Se puede expresar como humedad absoluta o como humedad relativa. La primera hace referencia al numero de gramos de vapor de agua contenidos en un metro cúbico de aire; mientras que “la HR es la relación, expresada en porcentaje, entre la cantidad de vapor de agua realmente existente en la atmósfera y la que existiría si el aire estuviera saturado a la misma temperatura” 41. Esta capacidad del aire para contener humedad se relaciona con la temperatura, donde si “la capacidad del aire para absorber vapor de agua aumenta, la temperatura se eleva” 42; mientras que la humedad relativa disminuye cuando la temperatura aumenta. 40 AYLLON, Op.cit. p. 33 Ibit., p. 121 42 Ibit.,p.121 41 40 La humedad relativa es un factor determinante en el crecimiento de los microorganismos; cuando esta se encuentra entre el 40 y 60% la atmósfera no contiene el vapor de agua necesario para su óptimo crecimiento, haciendo que se disminuya su concentración en el aire; por otra parte al presentarse una baja humedad relativa se pueden presentar efectos adversos en la salud de los seres humanos, generando sequedad en las fosas nasales y garganta, lo que permite tener una mayor susceptibilidad a los patógenos que se puedan encontrar suspendidos en el aire. 3.5.4 VELOCIDAD Y DIRECCION DEL VIENTO El viento es una masa de aire que puede presentar movimientos verticales de ascenso o descenso (convección) o en sentido horizontal (advección). Estos movimientos se dan gracias al calentamiento solar, que generan gradientes de presión horizontal creando movimientos en las masas de aire. Cuando no hay presencia de nubes en el aire se presentan zonas de divergencia en superficie, lo que genera la evacuación horizontal de las masas de aire que se producen en las regiones de alta presión, pero cuando el aire presenta “alta nubosidad se presentan zonas de convergencias a bajos niveles” 43, donde las masas de aire tienden a ascender. Los movimientos verticales son de gran importancia debido a la formación de fenómenos como la turbulencia que favorecen la dispersión de los contaminantes y los bioaerosoles en la atmósfera baja. Los flujos turbulentos presentan fluctuaciones bruscas en la intensidad de las corrientes, sin que estos se den por más de unos pocos segundos. La intensidad de estos flujos es directamente proporcional a la velocidad del viento, a los accidentes en el terreno y a la estabilidad del aire. Se puede presentar turbulencia de origen mecánico; la cual se origina con la fricción que se da entre las partículas del aire y el suelo o por la presencia de accidentes orográficos, también puede presentarse turbulencia de origen térmico debido principalmente a las diferencias de calentamiento que se relacionan con la naturaleza del suelo. En cuanto a la velocidad del viento se puede afirmar que los vientos presentan una variación cíclica, donde se presenta la máxima intensidad durante el día, generado por el calentamiento desigual de la superficie, provocando movimientos convectivos y advectivos de las masas de aire; mientras que en las noches se disminuye la intensidad debido al asentamiento de las partículas, lo que genera una reducción en la velocidad. 43 Ibid.,p.87 41 La velocidad del viento es un factor determinante en la concentración de los contaminantes y los bioaerosoles; presentando una relación inversa con la velocidad del viento, es decir que “en presencia de velocidades de viento muy bajas y condiciones atmosféricas estables se impiden la dispersión de los contaminantes” 44, aumentando así su concentración; en “condiciones turbulentas y de fuertes corrientes verticales, favorecen la dispersión de los contaminantes” 45 disminuyendo de esta manera los efectos adversos que puedan tener en la salud. Tabla 3. Escalas del viento Beaufort GRADO 0 1 2 3 NOMBRE Calma VELOCIDAD (Km/h) 0a1 Ventolina (Brisa leve) 2a6 7 a 12 Viento suave 13 a 18 Viento leve 4 19 a 26 Viento moderado 5 6 7 8 9 10 11 12 27 a 35 Viento regular 36 a 44 Viento fuerte 45 a 54 Viento muy fuerte Temporal 55 a 65 66 a 77 Temporal fuerte Temporal muy fuerte Tempestad 78 a 90 Arranca árboles Causa destrozos Grandes Huracán destrucciones Fuente: Adaptado, Elementos de meteorología y climatología 1996. 44 45 91 a 104 Más de 104 EFECTOS EN LA TIERRA El humo sube verticalmente El humo se inclina Mueve hojas de los árboles Agita hojas de los árboles Mueve las ramas, levanta polvo Mueve árboles pequeños Mueve ramas grandes Mueve árboles grandes Desgaja ramas Destroza chimeneas ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE LA SALUD. Op. cit., p. 338 FONT TULLOT. Op.Cit., p. 124. 42 3.5.5 DISPERSIÓN DE MICROORGANISMOS “El aire es importante en microbiología por que proporciona un mecanismo de transferencia para los microorganismos (virus, bacterias, hongos y toda clase de alergenos), constituyendo una parte del material particulado de la atmósfera” 46, estos se desarrollan en ambientes donde los factores ambientales presentes en una masa de aire estable, contribuyen a su crecimiento, al contener los nutrientes necesarios; sin embargo algunos microorganismos que no encuentran las condiciones apropiadas para sobrevivir bajan su tasa metabólica y utilizan mecanismos como la formación de esporas y/o quistes que les permite resistir a condiciones adversas durante largos periodos de tiempo, recuperándose hasta que impactan sobre un organismo o un medio con las condiciones optimas para crecer o infectar. La dispersión es un factor importante en la distribución y supervivencia de los microorganismos, ya que solo para algunos la atmósfera proporciona las condiciones necesarias para su crecimiento. Otros factores importantes que influyen en la dispersión están relacionados con la estabilidad térmica, que determina la altura máxima de mezclado, la presión barométrica y la densidad del aire, donde la altura de mezcla generara mayor dilución y dispersión de los microorganismos entre más elevada se encuentre. De igual forma la distribución vertical y horizontal de las partículas biológicas dependen de la energía disponible (Vientos, corrientes de conveccion y remolinos locales) lo que les proporciona flotación y movimiento. La capa límite laminar podrá tener una altura que va de pocos centímetros hasta alcanzar varios metros; en donde una vez las partículas biológicas entran a la capa de los remolinos y a la capa turbulenta, podrán llegar a zonas cuyas barreras geográficas no lo permiten. En las noches la inversión térmica determina la estabilidad de la atmósfera, de tal forma que las partículas introducidas a la troposfera permanecerán en algunas ocasiones cerca del suelo. 3.5.6 PRECIPITACION La precipitación se origina al elevarse el aire húmedo y enfriarse de manera adiabática hasta casi su punto de rocío, el diámetro de las gotas de agua es del orden de 0.5 a 2.5 mm, y se originan gracias a las velocidades de caída por adhesión que van dando origen al aumento en el diámetro de las gotas. La importancia de este factor meteorológico en la contaminación del aire, radica en la capacidad de esta para lavar la atmósfera, arrastrando con ella las partículas de contaminantes y bioaerosoles y depositándolas en el suelo, evitando de esta 46 J. GLYNN. Op.Cit. p. 275. 43 forma que estas permanezcan suspendidas en el aire y lleguen a afectar la salud de las personas. 3.6 EFECTOS EN LA SALUD POR CONTAMINANTES ATMOSFERICOS Y MICROORGANISMOS “El hombre inhala aproximadamente 7500 litros de aire al día” 47, que en presencia de contaminantes, puede verse afectado en su sistema respiratorio, especialmente en la nariz, garganta y sistema bronquial; al ser inhalado, el vello fino de la nariz filtra la mayor parte de las partículas gruesas; luego el aire se calienta y humedece, y entonces se filtra, a través de la tráquea, hacia el interior de los conductos bronquiales, los cuales subdividen la corriente de aire al introducirlo en los pulmones, y es transportado a los alvéolos pulmonares; en donde el oxígeno y los contaminantes del aire se pueden absorber y transferir a la corriente sanguínea” 48. 3.6.1 MATERIAL PARTICULADO Aunque los contaminantes pueden afectar la piel, los ojos y otros sistemas, los efectos principales en la salud que son causa de preocupación incluyen efectos en la respiración y el sistema respiratorio, en donde se ha determinado que las concentraciones menores a 100 µg/ m3 pueden generar efectos en la salud. “La respiración continua de aire contaminado disminuye la función de limpieza de los pulmones, lo que ocasiona que un gran número de partículas llegue a las partes inferiores del pulmón, contribuyendo a la aparición de enfermedades respiratorias como la Bronquitis, Efisema y Cáncer” 49, especialmente las partículas con diámetro inferior a 2.5 micras que pueden alcanzar los alvéolos, donde el proceso de eliminación que realiza el organismo puede llegar a ser de semanas, meses o incluso años. De igual forma el polvo y los bioaerosoles que flotan en el aire inciden directamente en personas con antecedentes de enfermedades pulmonares o alérgicas en especial niños y ancianos, causando enfermedades como influenza, difteria, neumonía, faringitis, sinusitis entre otras. 47 W. STRAUSS, S.J. Mainwaring. Contaminación del Aire. Causas, Efectos y Soluciones. Trillas. México, 1993. p. 25. 48 Ibid., p. 26. 49 BLANCO Luis Camilo, Caracterización Microbiológica del Material Particulado como factor de riesgo sobre la salud en la Localidad de Puente Aranda. Universidad de la Salle, Bogotá, 2003.p. 27. 44 3.6.2 OXIDOS DE NITROGENO Este gas puede inhalarse en grandes cantidades y penetrar a las vías respiratorias inferiores del pulmón, lo que puede generar respuestas biológicas; así mismo, puede producir “irritación de los pulmones, bronquitis, neumonía, y reducir la resistencia a las infecciones respiratorias.” 50 “La OMS recomienda para el NO2 el nivel máximo de 190 – 340 µg/m3 siempre que las exposiciones de las personas a sus efectos no pase de una hora y que su frecuencia no sea superior a una vez por mes” 51. 3.6.7 OZONO Este gas incoloro afecta a niños, adultos sanos, y a las personas con problemas en el sistema respiratorio, esto se debe a que el ozono reduce la función pulmonar. Sus principales efectos son: • Irritación del sistema respiratorio y de la garganta • Reducción de la función pulmonar, cuando se inhala profundo. • Empeora el asma, ya que reduce la capacidad de respuesta de las personas a los alérgenos. • Inflama y daña el recubrimiento del pulmón • Empeora enfermedades del pulmón como enfisema y bronquitis Los niveles de riesgo para la salud en cuanto al ozono pueden observare mediante el índice de Calidad del Aire, (Air Quality Index, AQI). La tabla reporta diferentes niveles de riesgo para la salud debido a la presencia de ozono en el aire. Tabla 4. Niveles de riesgo para la salud para O3 ÍNDICE DE CALIDAD DEL AIRE Valores del Índice Clasificación Precauciones para Protegerse del Ozono (µg/m3) Buena Ninguna. 0 a 50 Las personas extraordinariamente sensitivas deben considerar limitar los esfuerzos 51 a 100 Moderada prolongados al aire libre. 50 51 J. GLYNN Henry Op.Cit. p. 502. FONT TULLOT. Op. Cit.. p. 31. 45 Los niños y adultos activos, y las personas con Dañina a la Salud enfermedades respiratorias, tales como el 101 a 150 de los Grupos asma, deben limitar los esfuerzos prolongados Sensitivos al aire libre. Los niños y adultos activos, y las personas con enfermedades respiratorias, tales como el asma, deben evitar el esfuerzo prolongado al 151 a 200 Dañina a la Salud aire libre; todos los demás, especialmente los niños, deben limitar el esfuerzo prolongado al aire libre. Los niños y adultos activos, y las personas con enfermedades respiratorias tales como el Muy Dañina a la asma, deben evitar cualquier esfuerzo al aire 201 a 300 Salud libre; todos los demás, especialmente los niños, deben limitar los esfuerzos al aire libre. Fuente: www.epa.gov/air/espanol/oertopic 3.6.8 MONOXIDO DE CARBONO El CO es absorbido por el cuerpo humano mediante la respiración y su amenaza para la salud es mayor para las personas que padecen problemas cardiovasculares, ya que reacciona con la hemoglobina produciendo una disminución en la capacidad de la sangre para transportar oxígeno a órganos y tejidos y también interfiere en la liberación del oxígeno que es transferido a los tejidos “A concentraciones altas el monóxido afecta la percepción visual, la destreza manual y la capacidad mental” 52, también puede causar confusión, somnolencia y en espacios cerrados puede causar la muerte. La OMS ha sugerido como límites tolerables de CO el 10 mg/m3 para un periodo de exposición de 8 horas y de 40mg/m3 para un periodo de 1 hora. 3.6.9 DIÓXIDO DE AZUFRE Los efectos principales en la salud incluyen efectos en la respiración, afecciones respiratorias, debilitamiento de las defensas pulmonares, agravamiento de enfermedades respiratorias y cardiovasculares ya existentes. Entre las personas sensibles están los asmáticos y quienes padecen enfermedades pulmonares crónicas o afecciones cardiovasculares. Los ancianos y niños son los más afectados.” 53. El dióxido de azufre gaseoso, puede ser absorbido por las paredes 52 53 FONT TULLOT. Op. Cit . p. 501. J. GLYNN . Op. Cit. p. 500 46 húmedas del sistema superior respiratorio, mientras que las partículas finas y las gotas pequeñas dentro del rango de 0.1 a 5 micrómetros de diámetro junto con algunos gases absorbidos sobre éstas se pueden transportar hacia el interior y depositar sobre la superficie del pulmón” 54. La tabla 2 muestra la relación entre la concentración de partículas, de SO2 y sus efectos en la salud. Tabla 5. Efectos de la contaminación por partículas en suspensión y SO2 EFECTOS PARA EXPOSICIONES DE CORTA DURACIÓN Concentraciones medidas en 24 horas Efectos (µg/m3) Aumento de la mortalidad Partículas SO2 entre los ancianos y los 500 500 enfermos crónicos Empeoramiento entre los que padecen enfermedades respiratorias EFECTOS PARA EXPOSICIONES DE LARGA DURACIÓN 250 250 Concentraciones media anual (µg/m3) Partículas SO2 100 100 Efectos Aumento de síntomas de enfermedades respiratorias tanto en niños como en adultos, y mayor frecuencia de estas enfermedades entre los niños Fuente: Font Tullot 1991 3.6.10 MICROORGANISMOS Los efectos en la salud causados por los microorganismos, virus, hongos, y otros que en determinado momento pasan a la tráquea, bronquios y alvéolos, son principalmente enfermedades respiratorias que van desde una afección gripal, a una crisis de broncoespasmo o una neumonía bacteriana. Los niños y ancianos son los más vulnerables a estos factores atmosféricos, por una parte por el tamaño de la vía aérea y porque “los mecanismos de defensa no tienen la madurez suficiente; y por otra parte en la tercera edad se asocian factores inmunológicos.” 55 De igual manera cuando “el aire se encuentra contaminado con micotoxinas estas tienen como consecuencia su transporte al tejido superficial alveolar donde, en el 54 55 W. STRAUSS, S.J. Mainwaring. Op. Cit. p. 59. www.encolombia.com/medicina/neumologia/neumologia15403-contaminacion.htm 47 caso de los tricotecenos, puede interferir en la normalidad de la respuesta inmune y para otras micotoxinas, interferir en la eliminación normal de partículas por el sistema macrófago. Puede producirse, además, un incremento de las infecciones por bacterias oportunista” 56. 3.6.6.1 PRINCIPALES MICROORGANISMOS: • ENFERMEDADES CAUSADAS POR INFECCIÓN RESPIRATORIA: Gran parte del aire que respiramos contiene partículas con presencia de microorganismos, los cuales son una fuente potencial para las infecciones respiratorias superiores originadas por estreptococos y estafilococos resistentes a la desecación. Entre las enfermedades reportadas por el “Instituto de Seguros Sociales como las que generan mayores índices de morbilidad en niños menores de 14 años, se encuentran el IRA (Infección Respiratoria Aguda) y ERA (Enfermedad Respiratoria Aguda)” 57; las cuales son generadas por exposición continua a contaminación del aire; “aún en presencia de concentraciones de concentraciones bajas “ 58 Las Infecciones Respiratorias Agudas se clasifican de acuerdo al nivel de gravedad que se presenta: • IRA sin neumonía: Se puede identificar cuando las personas presentan tos, secreciones en la faringe, fiebre, disfonía y odinofagia. • IRA con neumonía leve: Se presentan los mismos síntomas de la primera clasificación además hay presencia de taquipnea. • IRA con neumonía grave: Se presentan los síntomas de las dos primeras clasificaciones, además de un aumento en la dificultad respiratoria, tiraje, cianosis y en niños menores de 2 meses se presenta hipotermia. 56 MINISTERIO DE TRABAJO Y ASUNTOS SOCIALES ESPAÑA. NTP 351: Micotoxinas (aflatoxinas y tricotecenos) en ambientes laborales 57 ASCOFAME. Guías de practicas clinicas basadas en la evidencia. Infección respiratoria aguda. Proyecto ISS-ascofame, Asociación Colombiana de Medicina. 58 ROMERO PLACERES, M. Air pollucion bronchial asthma, and acute repirator ando infection in children less years of age, Habana city. Salud pública, pg 222 - 223 48 Tabla 6. Infección Respiratoria Aguda y Etiología Entidades clínicas frecuentes más Rinofaringitis Faringoamigdalitis Congestiva Faringoamigdalitis Purulenta Virus Rhinovirus, Influenza, Parainfluenza, Adenovirus Adenovirus Bacteria S. pyogenes Otitis media Influenza, Parainfluenza S. pneumoniae H. influenzae M. catarrhalis Neumonía Influenza Parainfluenza Adenovirus S. pneumoniae H. Influenzae S. Aureus* K. pneumoniae* Fuente: geosalud.com/enfermedades_infecciosas/IRA.htm Las infecciones que pueden entrar hasta el sistema respiratorio inferior (alvéolos o bronquios), son transportadas por el aire y solo pueden entrar al pulmón al estar suspendidos en una corriente de aire. Entre ellas se encuentran: 9 Infección respiratoria bacteriana: Varios patógenos bacterianos afectan el conducto respiratorio, en especial bacterias gram-positivas, las infecciones producidas por estos pueden llegar a ser muy serias, pudiendo causar la muerte. La especie Streptococcus pneumoniae es un patógeno resistente a la desecación, por lo que puede dispersarse fácilmente a través del aire, puede afectar potencialmente la salud humana, “especialmente si las defensas se debilitan, causando infecciones del pulmón que pueden llegar a generar alguna infección secundaria con otros trastornos respiratorios” 59, esta especie esta relacionada con casos de neumonía, endocarditis y meningitis entre otras. Por otra parte la especie Estreptococcus pyogenes es la principal causante de la faringitis estreptocócica, la cual se caracteriza por una inflamación de las membranas mucosas de la garganta. Otra de las enfermedades respiratorias más importantes de acuerdo con la OMS es la tuberculosis, la cual es la enfermedad de transmisión por aire generada por el bacilo tuberculoso Mycobacterium tuberculosis, el cual no posee esporas y sus requerimientos para su desarrollo son simples. 59 MADIGAN, Michael. BROCK . biología de los Microorganismos, p. 552 49 9 Infección respiratoria viral: Las enfermedades virales inician la infección en los tejidos superficiales del tracto respiratorio superior. Entre las enfermedades mas reportadas por los organismos de salud se encuentra la gripe, la cual es una de las enfermedades predominantes en niños y adultos, sus síntomas son la inflamación de las membranas mucosas, obstrucción nasal y malestar. “La influenza es un virus que, se presenta solo en los seres humanos, el cual es transmitido por el aire de una persona a otra, este infecta las membranas mucosas, del tracto respiratorio superior y en ocasiones invade los pulmones, puede causar la muerte si se genera una infección bacteriana” 60. 3.7 GENERALIDADES DE LA LOCALIDAD La Localidad de Puente Aranda es el centro industrial de Bogotá de acuerdo al Departamento Administrativo de Planeación Distrital, se encuentra conformado por 70 barrios en un área de 1.724,28 hectáreas, con un área urbana de 1.723,13 hectáreas, de las cuales 700 son instalaciones industriales entre las que se destacan las de textiles, plásticos, químicos, alimentos, metalmecánica, gaseosas, tabaco y de transporte y 800 residenciales; el restante de hectáreas corresponde a malla vial y espacio público. “El clima correspondiente a la localidad presenta las siguientes características: Temperatura Promedio: 14.2°C; Humedad Relativa: 85 y 93% en los meses lluviosos 62 y 66% en los meses secos; Precipitación: 184 y 307 mm en los meses lluviosos 3.4 y 9.8 mm en los meses secos” 61. En cuanto a topografía y geomorfología Puente Aranda se caracteriza por tener un terreno plano con ligero desnivel de oriente a occidente. Se encuentra en su totalidad ubicada en áreas sin riesgo geotécnico. • Localización Según el Acuerdo 8 de 1977 la localidad quedó limitada de la siguiente manera: al norte por la Localidad de Teusaquillo; entre la Diagonal 22 A, la AV. De las Américas y la AV. Ferrocarril; al sur - oriente por la localidad de Tunjuelito y las Localidades de Los Mártires y Antonio Nariño, entre AV. Ciudad de Quito y la 60 61 Ibid., p. 510 www. Localidades del Distrito Capital/localidades.htm 50 prolongación de la Cra 30 en la Autopista sur; y al occidente por las localidades de Fontibón y Kennedy con la AV 68. • Población De acuerdo con las proyecciones realizadas por el DAPD (Departamento Administrativo de Planeación Distrital) para los años 1997 a 2010 la localidad muestra un comportamiento inestable en el crecimiento de su población siendo esta de 282.491 habitantes para el año 2005; de los cuales “el grupo de edad con mayor representatividad (57%) es el rango de edad menor a 30 años y, tan solo, el 11% de la población que habita en ella es mayor de 55 años. La población con los rangos de edades entre 25 y 29 años son los que mayor representatividad, con un total de 31.750 habitantes, que corresponden a un 12% de la población total local.” 62 3.7.1 CONTAMINACIÓN ATMOSFÉRICA EN LA LOCALIDAD La localidad de Puente Aranda es uno de los grandes centros industriales de Bogotá, entre las actividades económicas mas relevantes y que se presentan en un mayor porcentaje se encuentra el sector alimenticio (19%), caucho (13%), productos químicos (10%), textil (4.5%) y metalúrgicos (3.7%) así mismo se encuentra una concentración elevada de corredores viales de alto flujo vehicular que “generan el promedio mas alto de partículas en suspensión en el aire dentro de la ciudad y la concentración mas elevada de dióxido de azufre (20ppb-68%), teniendo como consecuencia según la Contraloría Distrital de Salud de Bogota un aumento en los índices de morbilidad y mortalidad dentro de la población” 63. De acuerdo al departamento Administrativo del medio ambiente ( DAMA) y por la secretaria distrital de salud, muestran que en la localidad el 53.8 % de las industrias no controlan la temperatura de los gases de emisión y el 37.4 % no controlan el exceso de aire en las calderas, aumentando los efectos en la población de la localidad y en localidades vecinas. En la localidad se ubica la estación N° 13, de vigilancia y control de la calidad del aire (MERCK), la cual arrojo que para los meses de junio y julio de 2005 la concentración de material particulado superó la concentración máxima para 24 horas, siendo este un factor de riesgo para la salud de niños menores de 5 años y personas adultas con deficiencias en su sistema inmunológico causando principalmente infecciones respiratorias agudas. 62 www.Localidades del Distrito Capital/localidades.htm. SECRETARIA DE SALUD, Identificación de los Riesgos y Amenazas de Origen Antrópico de las localidades en Bogota D.C. p. 91. 63 51 Estudios realizados en la universidad de la salle han demostrado que en la localidad “la presencia de HAP’s en el aire es ocasionada a emisiones de motores diesel y a gasolina, lo cual presenta un riesgo para las personas que viven en la localidad y población flotante que pueden ver afectado su sistema inmunológico aumentando así la generación de cáncer de la población” 64 3.9 ANÁLISIS ESTADÍSTICO. La estadística es una técnica o proceso matemático con la que se busca obtener conclusiones razonables por medio de la recolección, organización, análisis e interpretación de datos numéricos durante una investigación. Esta se divide en dos ramas: • Estadística descriptiva: Es aquella que utiliza técnicas y medidas que indican las características de los datos disponibles. Comprende el tratamiento y análisis de datos que tienen por objeto resumir y describir los hechos que han proporcionado la información 65. Su fin primordial es la descripción de las características principales de los datos obtenidos de los cuales se pueden obtener conclusiones que no sobrepasan del conocimiento que aportan. • Estadística inferencial o inductiva: Es aquella que utiliza técnicas que permiten procesar los datos y obtener conclusiones (o inferencias) que van más allá de del conocimiento que proporcionan los datos por sí solos. 3.9.1 VARIABLE ALEATORIA “Una variable aleatoria es una función que asocia un número real con cada elemento del espacio muestral” 66. Se dice que es variable, ya que son posibles diferentes valores numéricos, y aleatoria porque el valor observado depende de alguno de los posibles resultados experimentales que aparezcan. Existen dos tipos de variables numéricas: • Discretas: Se llama variable aleatoria discreta si los valores forman un conjunto finito de posibilidades que puede ser contable. • Continua: Representan los datos medidos que pueden ser tomados en una escala continua. 64 GARAVITO David. Determinación de la concentración de hidrocarburos aromáticos policíclicos presentes en el material particulado emitido por fuentes móviles en la localidad de Puente Aranda. 2006 65 WALPOLE, Ronald E. Probabilidad y estadística para ingenieros. Prentice Hall. México. 1999. p 66 Ibid.,p.136 52 En la mayor parte de los problemas prácticos, las variables aleatorias continuas representan datos medidos, como son todos los posibles pesos, temperaturas, concentraciones de contaminantes o periodos de vida, mientras las variables aleatorias discretas representan datos contados, como el numero de artículos defectuosos, el numero de accidentes al año en un lugar determinado o el numero de unidades formadoras de colonia por m3 en un lugar determinado 3.8.2 DISTRIBUCIÓN DE POISSON La información que se manejó en el proyecto, no se comporta como una variable con distribución normal, por lo tanto se concluye que la distribución más apropiada para manejar los datos es la distribución de Poisson. La distribución de Poisson es una distribución de probabilidad discreta el cual se realiza para experimentos que dan valores numéricos de una variable aleatoria X, el número de resultados que ocurre durante un intervalo o en una región especifica. El intervalo dado puede ser una longitud, un minuto, un día, una semana. Propiedades del proceso de Poisson: • El número de resultados que ocurre en un intervalo o región específica es independiente del número que ocurre en cualquier otro intervalo. • La probabilidad de que ocurra un solo resultado durante un intervalo muy corto o en una región pequeña es proporcional a la longitud del intervalo o al tamaño de la región • La probabilidad de que ocurra mas de un resultado en el intervalo corto es insignificante 67 El numero X de resultados que ocurre durante un experimento de se llama variable aleatoria de Poisson y su distribución de probabilidad se llama distribución de Poisson. Por ejemplo el experimento de Poisson puede generar observaciones para la variable aleatoria X que representa para el intervalo espacial el número de unidades formadoras de colonia (UFC) en un volumen de aire muestreado. 67 Ibid., p. 136 53 El numero medio de resultados se calcula de µ =λt, donde t es el tiempo o región especifico de interés y λ es el numero promedio de resultados por unidad de tiempo o región. 3.8.4 CORRELACION Tiene como objetivo estudiar el comportamiento conjunto de dos variables, determinando su grado de relación en una muestra por medio de un número llamado coeficiente de correlación. El coeficiente de correlación muestral o de Pearson (r) es una estimación del coeficiente de correlación poblacional y mide el grado de relación lineal entre variables. Propiedades de r • El valor de r no depende de cual de las dos variables bajo estudio este marcada como X o como Y • El valor de r es independiente de las unidades en que X y Y se midan. • -1≤ r ≤ 1: Esto nos indica que el valor de r correspondiente al máximo grado posible de relación positiva es r=1, mientras que la relación más negativa esta identificada con r= -1. • r=1 si y solo si todos los pares (Xi, Yi) están en una línea recta con pendiente positiva, y r=-1, si y solo si todos los pares (Xi, Yi) están en una línea recta con pendiente negativa. 68 • Clasificación del grado de correlación: . a) Correlación perfecta, cuando r = 1 b) Correlación excelente, cuando r es mayor de 0.90 y menor de 1. (-1< r < -0.9) c) Correlación aceptable, cuando r se encuentra entre, 0.80 y 0.90. (-0.9 < r < -0.8) DEVORE, Jay L. Probabilidad y Estadística para Ingeniería y Ciencias. Thomson. Argentina. 2000. p. 522 68 54 d) Correlación regular, (-0.8< r < -0.6) cuando r se encuentra entre 0.60 y 0.80. e) Correlación mínima, (-0.60 < r < -0.3) cuando r se encuentra entre 0.30 y 0.60. Cuando el coeficiente de correlación da un valor negativo nos indica que la relación entre las dos variables es inversa, es decir que cuando una aumenta la otra disminuya proporcionalmente. Cuando son positivas la relación es directa. Cuando el coeficiente de correlación se acerca a 1 o -1 nos indica que se presenta una relación lineal buena o fuerte entre X o Y 55 4. METODOLOGIA La investigación realizada es la tercera fase del proyecto de investigación que lleva como titulo “ESTIMACION DEL RIESGO EN LA SALUD HUMANA A PARTIR DE LA CARACTERIZACION DE AEROSOLES EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA EN LA CIUDAD DE BOGOTA”, la cual fue realizada durante la primera temporada de lluvias del año 2006 para evaluar la contaminación del aire por microorganismos oportunistas, su relación con el material particulado (PM10 y PM2.5) y los efectos en la salud teniendo en cuenta parámetros meteorológicos y concentración de gases presentes en la atmósfera especialmente O3 y NOx; y así mismo relacionar la información obtenida en esta fase con las 2 fases anteriores. ¾ Inicialmente se hizo una revisión bibliográfica acerca del tema y se tomaron en cuenta los antecedentes que existían de las dos primeras fases y teniendo en cuenta sus resultados se determino los medios de cultivo, días y jornadas que se trabajaron para esta fase del proyecto. Así mismo se recibió una capacitación de la metodología de los muestreos y calibración de los equipos MAS-100 y Medidor de alto volumen para partículas con diámetro inferior a 2.5 µm (PM2.5). Finalizando esta etapa se hizo un reconocimiento previo de los puntos de muestreo. ¾ En la segunda etapa se calcularon y prepararon los medios de cultivo y pruebas bioquímicas necesarios para los 7 días de muestreo y el blanco, donde se tuvo en cuenta técnicas de asepsia; se realizaron pruebas de control de calidad en donde se comprobó su esterilidad y viabilidad con el fin de garantizar que los medios de cultivo fueran aptos para la toma de muestras. ¾ Con el fin de garantizar la representatividad para esta etapa los puntos de muestreo y los medios de cultivo fueron tomados de manera aleatoria sin sustitución para cada una de las jornadas y días de muestreo. Los filtros tomados en el Medidor de alto volumen para partículas con diámetro inferior a 2.5 µm (PM2.5) fueron sembrados en Agar Sangre y Agar Saboureaud en donde se identifico los microorganismos presentes para este diámetro de partículas. ¾ Se realizo el conteo de Unidades formadoras de colonia (UFC) y posteriormente la identificación de géneros y especies de los microorganismos recolectados en las muestras, mediante tinciones de Gram y pruebas bioquímicas. ¾ La recolección de información de muestreos y de la estación de vigilancia y control de la calidad del aire del DAMA, fueron organizadas y analizadas utilizando la estadística descriptiva e inferencial. 56 Figura 1. Diagrama de flujo Metodología 57 4.1 PUNTOS DE MUESTREO La selección de los puntos de muestreo fue establecida teniendo en cuenta que cumpliera con condiciones de fácil acceso, seguridad y que fueran representativos en cuanto a actividad industrial y zona residencial. Los puntos INVIMA y Colegio la Merced el muestreo con el colector microbiológico de gérmenes aéreos fue realizado a la altura en donde se encontraba el medidor de PM 2.5 con el fin de establecer una relación mas directa entre la concentración de PM2.5 y la concentración de microorganismos expresada en UFC / m3 Los muestreos fueron desarrollados en cinco puntos, ubicados dentro de la localidad: Figura 2. Localidad de Puente Aranda FONTIBON 4 TEUSAQUILLO 5 1 2 KENEDY 3 LOS MARTIRES CONVENCIONES AREA DE INFLUENCIA TUNJUELITO ANTONIO NARIÑO PUNTO ZONA PUNTO ZONA Fuente: Adaptado Recorriendo Puente Aranda 2004. Diagnostico físico y socioeconómico de las localidades de Bogota D.C, Alcaldía mayor de Bogota. Secretaria de hacienda, Departamento Administrativo de planeación. Plano 10: estratificación. P. 45 58 Tabla 7: Nomenclatura de Puntos de Muestreo. SIGLA PPA CM PC IN PSG GT P1 P2 P3 P4 P5 Blanco PUNTO DE MUESTREO Parque Puente Aranda Colegio la Merced Parque Cundinamarca INVIMA Parque Salazar Gómez Guatavita Fuente: Autores PUNTO 1: PARQUE BARRIO PUENTE ARANDA (PPA) Esta ubicado en la Cra 56 con Cll 16, es una zona residencial y comercial principalmente por talleres de mecánica, las vías cercanas a este punto son la Cll 13 y AV. de las Américas cuyo flujo vehicular por ser vía principal es de transporte público y pesado. Otra característica importante de este sitio es su cercanía a la cárcel Modelo de Bogotá. El equipo MAS-100 fue ubicado para cada uno de los muestreos sobre un pasamanos el cual tiene una altura de 2.10 m y con presencia de árboles a una distancia de 14 m. Figura 3. Muestreo punto parque barrio Puente Aranda Fuente: Autores PUNTO 2: COLEGIO DISTRITAL LA MERCED (CM): Ubicado en la Cll 13 Nº 41 – 51, en sus alrededores se encuentran industrias de alimentos, imprentas y automotriz, que generan emisiones constantes y presencia de olores, así mismo se encuentra afectada por la Cll 13, que es una vía principal 59 de Transmilenio con alto flujo vehicular. El MAS-100 fue ubicado en una terraza de 2.5 m de altura al igual que los medidores de alto volumen de PM10 y PM2.5. Figura 4. Muestreo punto Colegio la Merced Fuente: Autores PUNTO 3: PARQUE BARRIO CUNDINAMARCA: Se encuentra ubicado en la Cll 34 con Cra 16; se encuentran principalmente industrias de alimentos (Harinas y Gaseosas), de igual forma se encuentra influenciada por la AV. 19, Cra 30 y Cll 13 las cuales presentan alto flujo vehicular durante el día. La ubicación del equipo de muestreo fue sobre un tanque de agua que tenia una altura de 1.6 m. Figura 5. Muestreo punto parque barrio Cundinamarca Fuente: Autores 60 PUNTO 4: INVIMA (IN): Esta ubicado en una zona comercial y industrial principalmente de alimentos y farmacéutica. Presenta un gran flujo vehicular al encontrarse limitada por la Av. 68 y la Cll 13, se encuentra ubicado en la Cra 68 D Nº 17 – 11. El MAS-100 se ubico sobre la terraza impermeabilizada y a una altura aproximadamente de 20 m a nivel del suelo. Figura 6. Muestreo punto INVIMA Fuente: Autores PUNTO 5: PARQUE BARRIO SALAZAR GOMEZ (PSG): Se encuentra entre las Cll 13 y la Av. 68, específicamente en la Cll 12 con Cra 66; es una zona residencial pero a sus alrededores se hay presencia de industrias alimenticias, metalúrgicas y de gas principalmente. El equipo fue instalado sobre el tanque de almacenamiento de agua a una altura de 1.5 m. Figura 7. Muestreo punto parque barrio Salazar Gómez Fuente: Autores 61 PUNTO BLANCO: GUATAVITA (GT) Este muestreo se realizo con el fin de tener un punto de referencia y poder determinar que diferencia se podía encontrar entre microorganismos presentes en una zona de baja actividad industrial y la zona de estudio. Para realizar este muestreo fue escogido el municipio de Guatavita ya que presenta baja actividad industrial y características similares a las de Bogota como altura y temperatura. El municipio de Guatavita se encuentra a una altura de 2668 m.s.n.m, con una temperatura promedio de 14 ºC, el muestreo fue realizado frente a la laguna de Tomine, el equipo fue ubicado a una altura de 50 cm. sobre el nivel del suelo. 4.2 DIAS DE MUESTREO La toma de muestras fue realizada durante los siete días de la semana no consecutivos a partir del 15 de Marzo hasta el 22 de Abril; es decir, día de por medio, con el fin de poder desarrollar la preparación de los medios de cultivo y conteo de UFC en los días en los que no eran tomadas las muestras, este periodo de muestreo corresponde a la primera temporada de lluvias del año. Tabla 8. Días de Muestreo DIAS DE LA SEMANA DIA 1 2 3 4 5 6 7 8 FECHA 15 de Marzo del 2006 17 de Marzo del 2006 19 de Marzo del 2006 21 de Marzo del 2006 23 de Marzo del 2006 17 de Abril del 2006 22 de Abril del 2006 30 de Abril del 2006 Miércoles Viernes Domingo Martes Jueves Lunes Sábado Domingo (blanco) Fuente: Autores 4.3 NÚMERO Y CODIFICACION DE MUESTRAS El total de muestras tomadas fue de 432 cajas de petri, durante los 7 días de la semana y 1 día de blanco. Por día fueron utilizadas 15 cajas por medio de cultivo para un total de 60 cajas para las tres jornadas del día, adicionalmente fueron preparadas 52 cajas de más, de cada uno de los Agares, con el fin de ser 62 utilizados para aislamiento e identificación de microorganismos; para un total de 640 cajas para el desarrollo de este proyecto. La codificación de cada una de las muestras fue establecida teniendo en cuenta, Jornada, Punto; Medio de Cultivo y Día de Muestreo, de la siguiente manera: Tabla 9. Codificación de las muestras n1 Día de muestreo Va del 18 al 25; siendo el 18 el primer día de muestreo y el 25 el ultimo n2 Jornada del día n3 Punto de Muestreo X Medio de cultivo J1.Jornada de la Mañana P1: Parque Barrio Puente Aranda P2: Colegio Distrital de la Merced P3: Parque Barrio Cundinamarca Sb: Agar Saboureaud J2.Jornada de la Tarde J3.Jornada de la Noche P4: INVIMA P5: Parque Barrio Salazar CODIFICACION DE MUESTRAS A18 Jn1-3 Pn1-5 X A19 Jn1-3 Pn1-5 X A20 Jn1-3 Pn1-5 X Sn: Agar Sangre A21 Jn1-3 Pn1-5 X Ch: Agar Chocolate A23 Jn1-3 Pn1-5 X Mc: Agar McConkey A.B25 Jn1-3 Pn1-5 X A22 Jn1-3 Pn1-5 X A24 Jn1-3 Pn1-5 X Fuente: Autores 4.4 JORNADAS DE MUESTREO Durante el muestreo se realizaron tres jornadas, con las que se busco determinar la concentración de contaminantes y microorganismos en las diferentes horas del día, teniendo en cuenta la actividad industrial y flujo vehicular que se presenta en la zona. La primera jornada fue realizada de 6:00 a 10:00 AM, la segunda de 11:30 a 3:30 PM y la tercera de 4:30 – 8:30 PM. En cada una de estas jornadas, el muestreo se desarrollo de manera aleatoria para cada uno de los puntos, anexo A Al finalizar cada una de las jornadas, las cajas de petri fueron llevadas a incubación, para su posterior conteo e identificación 24 horas después y fue realizado de acuerdo al protocolo 3 de aislamiento e identificación de microorganismos, anexo B. 63 Figuras 8. Actividad Industrial en los alrededores de INVIMA y Flujo vehicular en la Cll 13 Fuente: Autores 4.5 MUESTREO MICROBIOLOGICO Para la toma de muestras fue utilizado el equipo COLECTOR MICROBIOLÓGICO DE GÉRMENES AEREOS MAS 100, el cual fue se programo para absorber un caudal constante de 100 L/ min, para un tiempo total por caja de 5 min, de acuerdo al protocolo 4, anexo B. Las muestras que se tomaron en cada punto estaban compuestas por los 4 Agares, cada caja de petri recibe un flujo de aire de 500 L durante 5 minutos para un total de 20 minutos en cada punto y jornada En cada uno de los puntos de muestreo, los medios de cultivo fueron tomados de manera aleatoria con el fin de cumplir con el protocolo 1 de aleatoriedad anexo B. Figura 9. Colector de aire microbiológico MAS-100 Fuente: Autores 64 4.6 MUESTREO DE MATERIAL PARTICULADO (PM2.5) Durante el periodo de muestreo se tuvo en cuenta las concentraciones de PM2.5, obtenidas por el medidor de alto volumen que fue ubicado en el Colegio Distrital de la Merced para los primeros cinco días de muestreo (15 al 23 de marzo) y para los días 17 y 22 de Abril el equipo se traslado a INVIMA. Los filtros obtenidos en el medidor de PM2.5 para los días del 15 al 23 de marzo fueron llevados al desecador para retirarles la humedad y estabilizarlos a temperatura ambiente durante 24 horas, posteriormente se pesaban en la balanza analítica y de esta manera determinar su concentración, luego fueron sembrados directamente en los medios de cultivo Agar Sangre y Agar Saboureaud, con el fin de identificar que microorganismos podrían estar presentes en partículas con este diámetro aerodinámico. Sin embargo, se considero que la desecación del filtro, podría afectar los microorganismos que no soportaran estas condiciones, por lo tanto se estableció que para los días 17 y 22 de Abril, se tomaran los filtros de PM2.5 y fueran sembrados directamente en los medio de cultivo sin ser llevados al desecador y con ello poder tener mayor certeza de los microorganismos presentes en estas partículas (PM2.5). Figura 10. Siembra de filtros de PM2.5 en Agar sangre y Saboreaud Fuente: Autores 4.7 ANALISIS MICROBIOLOGICO Durante la fase microbiológica se llevaron a cabo cuatro procedimientos esenciales: • • • • Preparación de medios de cultivo Recuento de UFC Aislamiento de microorganismos Identificación de microorganismos 65 Los medios de cultivo que se trabajaron para el aislamiento primario, fueron Agar McConkey, Agar Saboureaud, Agar Chocolate y Agar Sangre, los cuales se trabajados durante las dos primeras fases del proyecto. 9 Agar McConkey: Fue seleccionado ya que es un “medio diferencial y permite el crecimiento y desarrollo de enterobacterias fermentadoras de lactosa como E.coli, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, entre otras y cocos gram negativos” 69 considerados organismos patógenos para los seres humanos. Figura 11. Agar McConkey Fuente: Autores 9 Agar Saboureaud: Este fue seleccionado ya que permite el aislamiento de hongos filamentosos y levaduras de importancia clínica. 69 Diagnóstico Microbiológico. Koneman, Allen, Dawell Sommers. 1989 66 Figura 12. Agar Saboreaud Fuente: Autores 9 Agar Chocolate: Es un medio útil para el aislamiento de coco-bacilos gram-negativos como Haemophyllus Influenzae y diversos microorganismos patógenos oportunistas “considerados por ser los responsables de varias enfermedades respiratorias crónicas presentes con mayor frecuencia en niños” 70. Figura 13. Agar Chocolate Fuente: Autores 70 Manual de procedimientos en Bacteriología clínica. Maria Piedad Sánchez, p. 61 67 9 Agar Sangre: En este medio se desarrollan diferentes especies de microorganismos grampositivos como Streptococcus y Staphylococcus catalogados como microorganismos patógenos de gran importancia clínica. Figura 14. Agar Sangre Fuente: Autores 4.7.1 PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO Para la preparación de estos medios se tuvieron en cuenta los protocolos de aislamiento e identificación de microorganismos en el aire ya establecidos (anexo B), teniendo en cuenta técnicas de asepsia, con el fin de evitar la contaminación de los medios en el proceso de preparación. Para determinar si las cajas de petri con el medio de cultivo no habían sido contaminadas y contaban con los requerimientos nutricionales para el crecimiento de los microorganismos se realizaron pruebas de control de calidad. Figura 15. Preparación de medios de Cultivo Fuente: Autores 68 4.7.1.1 TECNICAS DE ASEPSIA Para garantizar que los medios no se contaminaran, los mesones del laboratorio de microbiología en donde se trabajo, fueron limpiados con Decol y Tego, posteriormente se flamearon con el mechero, con el fin de disminuir la presencia de microorganismos en el área de trabajo. Así mismo se utilizaron los diferentes implementos de protección personal como guantes, tapabocas, bata y cofias o gorros. De igual forma se esterilizaron todos los materiales, medios de cultivo y pruebas bioquímicas con los que se trabajo mediante calentamiento bajo presión, a una temperatura de 121ºC por un tiempo de 15 min en el autoclave para eliminar los microorganismos que pudieran contaminarlos, de acuerdo al protocolo 3, anexo B. Figura 16. Técnicas de asepsia en muestreo y preparación de medios Fuente: Autores 4.7.1.2 CONTROL DE CALIDAD Con el fin de determinar si los medios de cultivo preparados, no habían sido contaminados y contaban con los requerimientos nutricionales necesarios para los microorganismos, se realizaron pruebas de esterilidad y viabilidad: 9 Prueba de esterilidad: Consistió en tomar el 5% de cada lote de Agar McConkey, Agar Chocolate y Agar Sangre preparado y llevarlo a incubación a una temperatura de 37 ºC durante un periodo de 24 horas y para Agar Saboreaud se dejo a temperatura ambiente durante 5 días. Al transcurrir este tiempo se observó si había algún crecimiento de colonias en cada uno de los medios. La ausencia de crecimiento significa que el medio es apto para realizar la toma de muestras. 69 9 Prueba de Viabilidad Esta prueba consistió en sembrar cepas de control ATCC, para Agar Sangre y Agar Chocolate Staphylococcus aureus (ATCC 25923), en Agar McConkey E. coli (ATCC 25922) y en Agar Saboreaud Candida albicans. Después de haber sido sembrado, la caja de petri con el medio de cultivo era llevado a incubación a 37ºC durante 24 horas; transcurrido este tiempo se observaba si la cepa había crecido, con lo cual se daba la aprobación para ser utilizado en los muestreos. Figura 17. Pruebas de Viabilidad Fuente: Autores 4.7.2 RECUENTO DE UFC Para el conteo de las UFC se tuvo en cuenta el crecimiento en Agar Sangre y Agar Chocolate, utilizando la Cabina de Flujo Laminar; la cual permitía contar con las condiciones de asepsia necesarias para evitar la contaminación de los medios de cultivo en este proceso y el contador de colonias, el cual permite tener una mayor exactitud de las colonias presentes, de acuerdo al protocolo 3, anexo B; los datos obtenidos, fueron registrados en un formato de laboratorio, anexo C a los cuales se les hizo correcciones según tabla estadística de Feller, anexo D. 4.7.3 AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS En Agar sangre y Agar chocolate se hizo una descripción morfológica de las colonias, donde se determinaron características como color, forma y tamaño de las mismas, posteriormente se hizo aislamiento de cada una de las colonias 70 diferentes en Agar sangre, las cuales eran llevadas nuevamente a incubación durante 24 horas; pasado este tiempo se realizó un análisis de morfología microscópica por medio de tinciones de Gram con lo cual se estableció si los microorganismos encontrados durante el muestreo correspondían a Gram positivos o Gram negativos; para la identificación de los microorganismos encontrados en Agar McConkey, se realizo el aislamiento en este mismo medio y en Agar Sangre, posteriormente se realizaron las pruebas Bioquímicas necesarias para la identificación. El aislamiento de hongos de cada una de las colonias diferentes fue realizado por medio de repiques en Agar Saboreaud y posteriormente llevadas a incubación a temperatura ambiente por un periodo de 3 a 5 días. Transcurrido este tiempo se realizo una identificación macroscópica determinando color, forma y textura de las colonias. A continuación se realizaron tinciones de Azul de lactofenol determinando las estructuras de cada uno de los hongos. Figura 18. Aislamiento de microorganismos Fuente: Autores 4.7.4 IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS Después de realizar el aislamiento primario fue necesario hacer pruebas Bioquímicas, anexo E, con el fin de evaluar la capacidad metabólica e identificación de los géneros y especies de los microorganismos encontrados. Las pruebas bioquímicas utilizadas para la identificación fueron: • Catalasa: Es utilizada para diferenciar Staphylococcus y Estreptococcus, se realiza con “peróxido de hidrógeno y es positiva cuando los 71 microorganismos contienen la enzima catalasa, la cual descompone el peróxido en oxígeno y agua” 71, produciendo burbujas. 71 72 • Coagulasa: Se utiliza para identificar la especie Staphylococcus aureus; se realiza con plasma y es positiva al observarse un precipitado granular o formación de coágulos. • Azucares: Son necesarios para identificar las especies de los géneros; el principio es la degradación del azúcar y acidificación del medio. • TSI (Agar hierro triple azúcar): “Utilizado para determinar la capacidad de las bacterias fermentadoras para utilizar la lactosa” 72 y formación de acido. • SIM (Agar semisólido de sulfuro de indol): Se utiliza para determinar motilidad y revelan las diferencias de sensibilidad en la detección de H2S. • VP (Voges-Proskauer): Permite diferenciar enterobacterias e indica la presencia de acetoína, producida a partir del piruvato por la vía metabólica del butilenglicol. • MR (Rojo de Metilo): Es utilizado en la identificación de Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus y E.coli entre otros. Cuando da positivo, se presenta un descenso en el pH, indicando la presencia de fuertes fermentadores productores de ácidos mixtos. • LIA (Agar hierro lisina): Se utiliza para diferenciar microorganismos entericos por medio de su capacidad para descarboxilar o desaminar la lisina y formar H2S. • Citrato de Simmon: Permite observar si el microorganismo utiliza como fuente de carbono el citrato de sodio. • Fenilalanina: Es utilizada para la detección del ácido fenilpirúvico, producido por la desaminación del medio. • Urea: Identifica la Hidrólisis de la urea por parte de las bacterias formando CO2 y amoniaco. STANIER, Roger. Microbiología. Reberte S.A. New Jersey. 1984. p. 296 Coneman Op.Cit., lamina 5-1 72 Figura 19. Pruebas Bioquímicas Fuente: Autores 4.8 ANALISIS DE RESULTADOS Los datos utilizados para este estudio fueron obtenidos de estaciones meteorológicas y de calidad del aire, mediciones en campo y resultados de laboratorio. 1. Los datos correspondientes a las estaciones de vigilancia y control de la calidad del aire del DAMA son: • Estación de Merck: Temperatura, PM10, Velocidad y dirección del viento. • Estación de IDRD: Debido a que la estación de Merck no registra NOx, O3 y Radiación solar, fue necesario tomar los datos de esta estación ya que es la única localidad de influencia que registró estas tres variables para los días de muestreo. • Estación de Usme y Vitelma: Fue necesario tomar la humedad relativa de estas dos estaciones, con el fin de estimar la HR de puente Aranda en función de la temperatura; ya que la estación de Merck no registra este parámetro, el cual es indispensable determinar para el comportamiento de los microorganismos. 2. Los datos registrados en campo fueron Temperatura, observaciones de flujo vehicular y peatonal, nubosidad, precipitación, olores y emisiones visibles. 3. Los resultados de laboratorio obtenidos fueron UFC, corregidos según la tabla estadística de Feller, géneros y especies de microorganismos, pesos de filtros de PM2.5. 73 4.8.1 CALCULO DE LA HUMEDAD RELATIVA EN ESTACION DE MERCK Para poder hacer la estimación de la Humedad Relativa en MERCK, inicialmente se comprobó que la temperatura y la humedad relativa en las estaciones de USME y VITELMA presentaran correlación. Tabla 10. Correlación entre la temperatura y la Humedad Relativa en estación de Usme: Temperatura (°C) Humedad Relativa (%) Correlación de Pearson Sig. (2-tailed) N (número de muestras) Correlación de Pearson Sig. (2-tailed) N (número de muestras) Temperatura (°C) 1 . -,577(**) ,000 105 62 -,577(**) ,000 1 . 62 62 HR (%) ** La correlación es significativa al nivel 0.01. (2-tailed). Tabla 11. Correlación entre la temperatura y la Humedad Relativa en estación de Vitelma: Temperatura (°C) Humedad Relativa (%) Correlación de Pearson Sig. (2-tailed) N (número de muestras) Correlación de Pearson Sig. (2-tailed) N (número de muestras) Temperatura (°C) 1 . HR (%) -,574(**) ,000 84 84 -,574(**) ,000 1 . 84 99 ** La Correlación es significativa al nivel 0.01(2-tailed). En ambas tablas se puede observar que la correlación existente es inversa es decir que a mayor temperatura menor es la humedad relativa y viceversa. Las dos correlaciones son significativas con un nivel de 0.01, lo cual es bueno y confirmó que la correlación es válida en el estudio. Teniendo en cuenta esta característica, los valores de humedad relativa que se obtuviera para la estación MERCK deberían tener una correlación alta e inversa con la temperatura ya medida en esta estación. 74 Gráfica 1. Comportamiento de la Temperatura en las tres estaciones 25 20 15 10 5 0 1 6 11 16 21 26 31 36 TEMPERATURA ºC USME 41 46 51 56 61 66 TEMPERATURA ºC VITELMA 71 76 81 86 91 96 101 TEMPERATURA ºC MERCK Fuente: Autores En el anterior gráfico podemos ver que el comportamiento general de la temperatura entre las tres estaciones (Usme, Vitelma y Merck) es muy parecido; sin embargo se debe tener en cuenta que para algunos de los días las estaciones no registraron datos de temperatura especialmente para la estación de Vitelma. Gráfica 2. Comportamiento de la Humedad Relativa en las estaciones de Usme y Vitelma 120 100 80 60 40 20 0 1 7 13 19 25 31 37 43 49 55 61 67 73 79 85 91 97 103 HUMEDAD RELATIVA USME Fuente: Autores 75 HUMEDAD RELATIVA VITELMA En el grafico 2, se observa que el comportamiento entre las humedades relativas, registradas por las dos estaciones es similar; sin embargo al igual que los datos registrados para la temperatura, hubo periodos donde las estaciones no registraron los datos. Tabla 12. Comportamiento de la Humedad Relativa esperado para la estación de MERCK PROMEDIOS Promed Promed Promed io de Promedio Promedio Promedio io de io de Humed de de de Humed Humed JORNA ad Temperatu Temperatu Temperatu ad ad DA Relativa ra (°C) ra (°C) ra (°C) Relativa Relativa (%) para para para (%) (%) para USME VITELMA MERCK para para VITELM USME MERCK A 1 12.60 10.78 14.18 82.88 88.16 85.52 2 14.96 14.43 16.84 71.67 72.24 71.95 3 13.03 12.33 15.14 71.27 84.32 77.80 Fuente: Autores En esta tabla vemos que el comportamiento de las temperaturas si es similar, al igual que la humedad relativa, por lo tanto se calculó un promedio de Humedad relativa para Merck, el cual fue luego tomado como guía del comportamiento que se esperaba obtener tras ajustar el modelo y estimar la humedad relativa de dicha estación. Debido a que el comportamiento de la información durante cada día no es estable ni parecida a la del día anterior, fue necesario ajustar la Humedad Relativa en una serie de tiempo aplicando un modelo Autorregresivo de primer orden AR(1) donde las variables de estudio fueron Humedad Relativa de Usme y Humedad Relativa de Vitelma, con lo cual se pudo estimar una Humedad Relativa para la estación de Merck. Este modelo arrojó unos residuales pequeños los cuales indican que el ajuste de la información es bueno, Anexo F. El siguiente paso fue verificar que la correlación entre la temperatura registrada en la estación Merck y la humedad relativa estimada para esta misma estación presentaran una correlación inversa: 76 Tabla 13. Correlación entre la Temperatura de Merck y la Humedad Relativa estimada para esta estación Correlación Temperatura (°C) Pearson Sig. (2-tailed) N (número muestras) Regresión MOD_3 Correlación de la Humedad Pearson Sig. (2-tailed) Relativa N (número muestras) Temperatura (°C) Regresión MOD_3 de la Humedad Relativa 1 -,661(**) . ,000 105 105 -,661(**) 1 ,000 . 105 105 de de de de ** La Correlación es significativa al nivel 0.01(2-tailed). En la tabla 13, se puede observar que existe una alta correlación (-0.661) entre la temperatura registrada para la estación de MERCK y la Humedad Relativa que fue estimada, la cual es apropiada de acuerdo al comportamiento observado entre los valores de temperatura y Humedad existente entre las demás estaciones; lo cual puede corroborarse en la grafica 3, donde el comportamiento de la Humedad Relativa estimada para la estación de MERCK es similar al comportamiento registrado para las otras dos estaciones. Gráfica 3. Comportamiento de la Humedad Relativa para las tres estaciones 120 100 80 60 40 20 0 1 7 13 19 25 31 37 43 49 55 61 67 73 79 85 91 97 103 HUMEDAD RELATIVA USME HUMEDAD RELATIVA VITELMA Fuente: Autores 77 Humedad relativa merck De acuerdo a los datos anteriormente registrados se pudo establecer los promedios por jornadas en donde se puede ver que los valores obtenidos con el modelo no difieren mucho de los que se esperaban obtener: Tabla 14. Comportamiento de los factores ajustados al modelo PROMEDIOS JORNAD A 1 2 3 Promedio de Temperatur a (°C) para USME Promedio de Temperatur a (°C) para VITELMA Promedio de Temperatur a (°C) para MERCK Promedi o de Humeda d Relativa (%) para USME 12.60 14.96 13.03 10.78 14.43 12.33 14.18 16.84 15.14 82.88 71.67 71.27 Promedi o de Humeda d Relativa (%) para VITELM A 88.16 72.24 84.32 Promedi o de Humeda d Relativa estimad a (%) para MERCK 78.30 72.29 76.28 Fuente: Autores 4.8.2 ANÁLISIS DE LOS DATOS OBTENIDOS EN LABORATORIO Y EN EL MEDIDOR DE ALTO VOLUMEN PM2.5 Con los datos obtenidos en el laboratorio se identificaron las familias teniendo en cuenta los géneros y especies de los microorganismos encontrados y fueron realizadas las frecuencias por punto y jornada, así mismo se identificaron microorganismos patógenos, oportunistas y hongos generadores de micotoxinas. Para determinar el comportamiento de las UFC/m3 por punto y jornada, se realizo el promedio de las concentraciones para todos los días de muestreo. Adicionalmente se tuvo en cuenta las UFC/m3 para cada uno de los días en que fueron tomadas las muestras, con el fin de establecer que días presentaban las mayores concentraciones. Con los filtros obtenidos del medidor de alto volumen para partículas con diámetro aerodinámico menor a 2.5 µm, se sacaron las concentraciones y se realizaron siembras directas en medio Agar Sangre y Agar Saboreaud para los 5 primeros días de muestreo, con el fin de determinar la relación existente entre concentración y microorganismos presentes; sin embargo para los 2 últimos días de muestreo, los filtros fueron sembrados directamente sobre los medios sin determinar su concentración, ya que el proceso de desecación al que se someten los filtros podría afectar el crecimiento de algunos microorganismos. 78 Para determinar la relación existente entre UFC/m3, variables meteorológicas y concentraciones de contaminantes atmosféricos, se calcularon coeficientes de correlación de Pearson mediante el paquete estadístico S.A.S (Statistical Análysis System). Finalmente se realizo una comparación cuantitativa y cualitativa de los microorganismos encontrados durante las tres fases de monitoreo: FASE 1: EVALUACION DE LA CONTAMINACION DEL AIRE POR MICROORGANISMOS PATOGENOS EN LOS BIOAEROSOLES, EN UNA ZONA DE ALTA ACTIVIDAD INDUSTRIAL Y FLUJO VEHICULAR EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA BOGOTA D.C FASE 2: CARACTERIZACION CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DE BIOAEROSOLES RELACIONADOS CON FACTORES METEOROLOGICOS Y MATERIAL PARTICULADO EN PUENTE ARANDA BOGOTA D.C FASE 3: EVALUACION DE LA CONTAMINACION DEL AIRE POR MICROORGANISMOS OPORTUNISTAS Y SU RELACION CON MATERIAL PARTICULADO (PM2.5 Y PM10) EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA 79 5. ANALISIS Y RESULTADOS Para el análisis de los resultados obtenidos para este proyecto se tuvo en cuenta el total de microorganismos encontrados clasificados por familias y su frecuencia de aparición durante el muestreo, así mismo, las concentraciones expresadas en UFC/m3 fueron corregidas estadísticamente según Feller Anexo D. las concentraciones de PM10, PM2.5, NOX y O3, variables meteorológicas como temperatura, humedad relativa, viento y radiación solar; todas ellas fueron correlacionadas frente a la concentración de microorganismos encontradas utilizando el programa estadístico SPSS versión 13 que permite establecer relaciones entre estos parámetros, con el fin de determinar la influencia entre microorganismos oportunistas, concentraciones de contaminantes y parámetros meteorológicos. Los datos de velocidades del viento obtenidos de la estación de vigilancia y control de la calidad del aire MERK fueron utilizados para construir las rosas de vientos por medio del programa Wind Rose Plots For Meteorological Data versión 5.2.1 y de esta forma determinar el comportamiento del viento por días y jornadas de muestreo. 5.1 FACTORES METEOROLÓGICOS Y CONTAMINANTES ATMOSFERICOS DURANTE LA FASE DE MUESTREO Para determinar el comportamiento y supervivencia de los microorganismos presentes en el aire que pueden llegar a causar enfermedades en el hombre, es importante considerar la física y química atmosférica, en donde factores meteorológicos como el viento, la radiación solar, la temperatura y la humedad relativa influyen en el número y viabilidad de los bioaerosoles presentes en la atmósfera, esto a su vez relacionado con los contaminantes atmosféricos (que pueden ser fuentes nutricionales para bacterias y hongos) potencializando los efectos adversos en la salud. Teniendo en cuenta lo anterior y que en la ciudad de Bogotá, la localidad que presenta los mayores niveles de contaminación atmosférica es Puente Aranda, es necesario determinar las características meteorológicas y de calidad del aire que se presentaron durante esta fase de muestreo. Los datos de la calidad del aire y factores meteorológicos obtenidos en campo y por las estaciones de vigilancia y control de la calidad del aire del DAMA y estaciones meteorológicas, corresponden a la hora en que se tomaron las muestras de microorganismos en cada punto y jornada, 80 El propósito de analizar los datos de ésta manera, permite observar como se comportan en el período de muestreo y relacionarlos con la concentración de UFC/m3; para esto fueron organizados en hojas de Excel, para consolidar la información básica y generar tablas y gráficos ilustrativos de los resultados alcanzados; así mismo se determinaron las estadísticas descriptivas, como promedio aritmético, coeficiente de variación y desviación estándar por puntos y jornadas de la fase de muestreo. 5.1.1 CONDICIONES METEOROLÓGICAS Tabla 15. Promedios presentados durante jornadas de muestreo PROMEDIOS Jornada Temperatura (ºC) VIENTO (m/s) RADIACION SOLAR (W/m2) HUMEDAD RELATIVA DEFINITIVA (%) 1 14,18 2,29 210,35 78,30 2 16,84 3,83 347,24 72,29 3 15,14 3,12 78,71 76,28 Fuente: Información procesada por los Autores Tabla 16. Estadística descriptiva para todo el periodo de muestreo PARAMETRO MEDIA DESVIACION ESTANDAR Temperatura (ºC) 15.38 1.49 3.07 1.23 Radiación Solar (W/m ) 212.10 152.22 Humedad Relativa (%) 75.62 5.053 Viento (m/s) 2 Fuente: Información procesada por los Autores • Temperatura: Como se observa en la tabla 16 la temperatura durante este periodo tuvo un comportamiento uniforme presentando una baja oscilación lo cual pudo ser corroborado con el valor registrado por la estadística inferencial al presentar una baja desviación estándar con un valor de 1.49. Como puede observarse en la gráfica 4, en horas de la mañana (J1) se registran bajas temperaturas, con un promedio de 14.18 ºC que van incrementándose gradualmente hasta la segunda jornada donde se registró el promedio mas alto, con un valor de 16.84 81 ºC y finalmente se muestra un descenso en horas de la tarde (J3) alcanzando una temperatura promedio de 15.14 ºC. Gráfica 4. Variaciones de la temperatura durante todo el periodo de muestreo TEMPERATURA 30 T (ºC) PPA CM 20 PC 10 IN PSG J1 J2 D6 D7 D5 D3 D4 D2 D7 D1 D6 D4 D5 D3 D1 D2 D7 D5 D6 D4 D2 D3 D1 0 J3 JORNADAS Y PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores De acuerdo con el registro de los promedios diarios de las condiciones meteorológicas que se presentaron durante los días de muestreo ver (Anexo L), se puede observar que la máxima temperatura se presento el día 5 en el punto parque Salazar Gómez, con un valor de 24.3ºC, siendo este el sitio que en promedio presento las mayores temperaturas; mientras que en el punto INVIMA se registraron los menores valores presentando una temperatura mínima de 13ºC para el mismo día. • Viento La frecuencia y distribución de clases de vientos durante la fase de muestreo (anexo M) muestran que las velocidades predominantes se encontraron entre 0.5 y 2.1 m/s (vientos suaves), con una frecuencia de 50.9 %, seguido de velocidades entre 2.1 y 3.6 m/s con una frecuencia de 26.1; principalmente provenientes de la localidad de Fontibón ubicada al nor-este de la estación de MERCK y en menor proporción provenientes del sur-oeste en donde se encuentran zonas residenciales que pudieron favorecer la presencia y frecuencia de microorganismos encontrados. De acuerdo con la desviación estándar obtenida para este factor de 1.23, nos muestra que el comportamiento de los vientos durante todo el periodo de muestreo fue uniforme, presentándose pocas fluctuaciones durante los días. 82 En la gráfica 5 se puede observar que el viento en horas de la mañana (J1) presenta bajas velocidades registrando un promedio de 2.29 m/s en donde la mínima velocidad presentada fue de 1.3 m/s; mientras que para la segunda jornada se presentó el promedio más alto con un valor de 3.83 m/s, el cual se ve relacionado con la temperatura, la cual alcanzo sus máximos valores en esta misma jornada; para J3, se observa un descenso en la velocidad del viento registrándose un promedio de 3.12 m/s y con velocidades que van de 1 a 6 m/s. Gráfica 5. Comportamiento del viento durante el periodo de muestreo 7 6 5 4 3 2 1 0 PPA CM PC IN J1 J2 D6 D7 D2 D3 D4 D5 D4 D5 D6 D7 D1 D7 D1 D2 D3 D3 D4 D5 D6 PSG D1 D2 m/s VELOCIDAD DEL VIENTO J3 JORNADAS Y PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores Las máximas velocidades se registraron los días 4 y 6 en la segunda jornada; donde los valores más altos se presentaron en los puntos parque Puente Aranda y parque Salazar Gómez con velocidades de 6.3 m/s cada uno; mientras que en el punto INVIMA se registro la mínima velocidad con un valor de 1 m/s durante la tercera jornada Anexo L. • Radiación Solar En la gráfica 6 se puede observar que la radiación solar durante los días de muestreo presenta marcadas fluctuaciones a lo largo del día, lo que es corroborado con la estadística descriptiva, la cual nos arroja una desviación estándar de 152.22; esto es debido a procesos como la absorción y la difusión que se presentan en la atmósfera. Los máximos valores fueron registrados más frecuentemente en la segunda jornada, donde los puntos Colegio la Merced tiene un valor de 751.63 W/m2 en el día 7 y parque Puente Aranda con un valor de 648.89 W/m2 en el día 3 siendo estos los valores más altos; sin embargo en la tercera jornada para el 83 punto Colegio la Merced el día 6 se presento el pico más alto de la radiación solar para todo el periodo de muestreo con un valor de 844.28 Wm2. Gráfica 6. Radiación Solar durante el periodo de muestreo 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0 PPA CM PC IN PSG D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 W/m2 RADIACION SOLAR J1 J2 J3 PUNTOS Y JORNADAS Fuente: Información procesada por los Autores Los mínimos valores se presentaron el día 2 en los puntos Colegio la Merced (8.72 W/m2) e INVIMA (8.78 W/m2) registrados durante la tercera jornada Anexo G. • Humedad Relativa En la gráfica 7 se puede observar que el comportamiento y tendencia de la humedad para los días de muestreo no presenta variaciones significativas; lo cual puede corroborarse con los datos arrojados por la estadística descriptiva, donde la desviación estándar fue de 5.05. El mayor promedio de la humedad relativa se presento para la jornada 1 con un valor de 78.30%, y para la jornada 2 se presenta el mínimo con un valor de 72.29%, para la jornada 3 se presento un valor de 76.28%; la humedad presenta una variación inversa con la temperatura; es decir que la humedad disminuye cuando la temperatura aumenta. 84 Grafica 7. Humedad Relativa durante el periodo de muestreo HUMEDAD RELATIVA PPA HR (%) 100 CM 50 PC IN 0 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 PSG J1 J2 J3 JORNADAS Y DIAS Fuente: Información procesada por los Autores En el punto parque Cundinamarca se presenta la mayor humedad relativa promedio con un valor de 76.92%; mientras la menor HR se presento en el punto Colegio la Merced con un valor de 74.22%. Para la J2 el día 5 fue el que presento la menor humedad relativa con un valor de 65.97%, siendo este el día menos húmedo; por el contrario la J3 en el día 2 fue el más húmedo, en donde se obtuvo un valor de humedad relativa de 84.51%. 5.1.2 CALIDAD DEL AIRE Tabla 17. Promedios durante toda la fase de muestreo Jornada 1 2 3 PM10 (µg/m3) 125.03 94.60 94.37 PROMEDIOS NOx (ppb) 27.29 15.89 32.63 O3 (ppb) 8.20 23.34 10.20 Fuente: Información procesada por los Autores Tabla 18. Estadística descriptiva para todo el periodo de muestreo PARAMETRO MEDIA PM10 (µg/m3) NOx (ppb) O3 (ppb) 104.66 25.25 13.91 DESVIACION ESTANDAR 36.76 27.80 7.79 Fuente: Información procesada por los Autores 85 • Material Particulado con diámetro aerodinámico menor a 10 µm (PM10) La Estadística descriptiva para el PM10 mostró una desviación estándar de 36.76, indicándonos que se presentaron fluctuaciones importantes durante el periodo de muestreo; es decir no existió un comportamiento y tendencia similar durante la fase de muestreo. Durante la tercera fase de monitoreo se puedo observar que las concentraciones promedio más altas se presentaron durante la primera jornada (J1) con un valor de 125.03 μg/m3 este comportamiento puede estar relacionado con el fenómeno de inversión térmica que impide la circulación del aire y permite que las concentraciones de material particulado queden más tiempo estacionados a nivel del suelo; mientras que para las jornadas 2 y 3 se registraron concentraciones promedio similares con valores de 94.60 μg/m3 y 94.37 μg/m3 respectivamente; esta disminución puede ser atribuida a las velocidades del viento que se presentaron durante la segunda y tercera jornada que contribuyeron en la dispersión de las partículas. Grafica 8. Concentración de Material Particulado PM10 durante el periodo de muestreo PM10 250 PPA µg/m³ 200 CM 150 PC 100 IN 50 PSG D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 0 J1 J2 J3 JORNADAS Y PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores De acuerdo con los datos registrados en el Anexo L, las concentraciones más altas se presentaron los días 4 y 5 en los puntos parque Cundinamarca 236 μg/m3 y parque Puente Aranda 218 μg/m3 durante las horas de la mañana; mientras que las mínimas concentraciones se registraron el día 3 en el punto parque Puente Aranda y Colegio la Merced con un valor de 63 μg/m3 para la 86 segunda jornada y el día 6 en los puntos INVIMA (48 μg/m3) y parque Cundinamarca (54 μg/m3) durante la tercera jornada. • Óxidos de Nitrógeno NOx En la tabla 18 se puede observar que la concentración promedio de NOx durante toda la fase de muestreo fue de 25.25 ppb, con una desviación estándar de 27.80, lo que indica que no se presento un comportamiento uniforme de este parámetro durante la fase de muestreo. En la gráfica 9 se muestran que las mayores concentraciones de NOx se presentaron durante el segundo día de muestreo donde para la tercera jornada en los puntos Colegio la Merced e INVIMA se registraron valores de 154 ppb y 164 ppb; mientras que las menores concentraciones se presentaron el día 7 en todos los puntos de muestreo Anexo L. Las mayores concentraciones promedio durante todos los días de muestreo se presentaron durante las jornadas 1 y 3 con valores de 27.29 ppb y 32.71 ppb respectivamente. Gráfica 9. Concentración de Óxidos de Nitrógeno durante el periodo de muestreo 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 PPA CM PC IN PSG D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 ppb NOx J1 J2 J3 JORNADAS Y PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores Esta concentración para la J1 se pudo presentar como consecuencia a que se presentaron las menores velocidades de viento (2.29 m/s) en donde la dispersión de contaminantes es baja, a si mismo porque en horas de la mañana se presenta alto flujo vehicular que incrementa las concentraciones de Nox, por otra parte para la jornada 3, las altas concentraciones se pudieron generar debido a que en las horas en que fueron tomadas las muestras se presenta alto flujo vehicular en especial a partir de las 7:30 pm, hora en la que 87 se levanta la restricción vehicular; mientras que las menores concentraciones promedio se presentaron durante la segunda jornada con un valor de 16.71 ppb, el cual se relaciona con la alta radiación que se presenta durante estas horas del día, originando reacciones fotoquímicas y disminuyendo la concentración de estos óxidos. • Ozono El comportamiento del O3 durante todo el periodo de muestreo presenta fluctuaciones moderadas, lo cual se puede corroborar con la estadística descriptiva en donde la desviación estándar tuvo un valor de 7.79. Para la jornada 2 se observó la mayor concentración promedio con un valor de 23.34 ppb; mientras que para las jornadas 1 y 2 se observan concentraciones de 8.20 y 10.20 ppb respectivamente. En la gráfica 10 se puede observar que el mayor promedio de concentración de O3 se registra en la segunda jornada con un valor de 23.31 ppb; mientras que esta concentración es menor durante las jornadas 1 y 3. De acuerdo con el comportamiento de los NOx durante el muestreo, (ver grafica 9), el O3 presenta una relación inversa con los óxidos de nitrógeno, los cuales disminuyen su concentración durante la jornada 2 al reaccionar con la luz UV y contribuyendo en la formación del Ozono. Gráfica 10. Concentración de O3 durante el periodo de muestreo O3 ppb 60 50 PPA 40 CM 30 PC 20 IN 10 PSG D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 0 J1 J2 JORNADAS Y PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores 88 J3 De acuerdo con el registro de los promedio diarios de calidad del aire que se presentaron durante los días de muestreo Anexo G; en el día 5 durante la segunda jornada se presentaron las mayores concentraciones; donde el punto parque Cundinamarca presento un valor de 48 ppb. 5.2 FAMILIAS DE MICROORGANISMOS IDENTIFICADAS Se identificaron 78 especies bacterianas y 21 especies de hongos Anexo H; las cuales fueron agrupadas por familias; su análisis fue realizado por presencia y frecuencia para cada punto y jornada de muestreo. De igual forma se determino la incidencia de las familias durante los días de muestreo, teniendo en cuenta la relación entre el número de especies encontradas para cada familia y el total de especies identificadas. Anexo I. F (% ) = N º E × 100 TE F: Frecuencia de la familia por punto y jornada (%) N°E: Numero de especies de la misma familia por punto y jornada TE: Total de especies identificadas por punto y jornada Ejemplo: Para la familia Coccaceae del punto parque Puente Aranda en la jornada 1 se encontró un total de 11 especies pertenecientes a esta familia y un total de 41 microorganismos (bacterias y hongos) en todos los días de muestreo. F (% ) = 11 × 100 = 26.82% 41 89 5.2.1 Frecuencia familia Bacillaceae Gráfica 11: Frecuencia de la familia Bacillaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo 25 20 J1 15 J2 10 J3 GT PSG IN PPA 0 PC 5 CM FRECUENCIAS % BACILLACEAE PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores En la grafica 11, se puede observar que la familia Bacillaceae en la jornada 1 presenta la mayor frecuencia para las muestras tomadas en el parque del barrio Puente Aranda (21.95%) y en el parque Salazar Gómez (20%), en cuanto la jornada 2 (J2) la frecuencia de esta familia disminuye con respecto a las otras dos jornadas a excepción del parque del barrio Cundinamarca donde la frecuencia fue de (17.39%) superando el porcentaje de J1 y J2 para este punto; mientras que en la jornada 3 se observa un incremento especialmente en el Colegio la Merced y en el parque del barrio Salazar Gómez. Para el punto blanco realizado en Guatavita no hay presencia de esta familia en ninguna de las tres jornadas. 5.2.2 Frecuencia familia Corynebacteriaceae Gráfica 12: Frecuencia de la familia Corynebacteriaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo 25 20 J1 15 J2 10 J3 PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores 90 GT PSG IN PC 0 CM 5 PPA FRECUENCIAS % CORYNEBACTERIACEAE Al observar la grafica 12, se puede determinar que la presencia de esta familia en la jornada 2 y 3 es mayor que para la jornada 1 en cada uno de los puntos. Para la J2 en el parque Cundinamarca se puede ver una mayor frecuencia (21.74%) de esta familia al igual que en la J3 en el punto INVIMA, mientras que para este mismo punto en la J1 se presenta la menor frecuencia con un porcentaje de 8.33%. con respecto a las muestras tomadas en Guatavita solo le observa la presencia de esta familia para la jornada 3, sin superar los valores de los demás puntos. 5.2.3 Frecuencia familia Pseudomonadaceae Gráfica 13: Frecuencia de la familia Pseudomonaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo 2,5 2 J1 1,5 J2 1 J3 GT PSG IN PC 0 CM 0,5 PPA FRECUENCIAS % PSEUDOMONADACEAE PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores En esta grafica se puede observar claramente que en la jornada 1 y la jornada 2 hay un comportamiento similar para todos los puntos, en donde la presencia de esta familia para J1 es superior a las encontradas en J2 a excepción del parque Cundinamarca en donde no hay presencia de esta familia. Para las muestras tomadas en el colegio la Merced y el parque Salazar Gómez se observa un comportamiento igual en las tres jornadas, siendo la jornada 2 la de menor frecuencia para esta familia con valores de 2.22% cada uno. En el punto 1, 3 y 4 no hay presencia de esta familia en la tercera jornada. Las muestras tomadas en el punto blanco no arrojaron presencia de esta familia en ninguna de las tres jornadas. 91 5.2.4 Frecuencia familia Actinomicetaceae Grafica 14: Frecuencia de la familia Actinomicetaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo 6,00 5,00 4,00 J1 3,00 J2 J3 2,00 GT PSG IN PPA - PC 1,00 CM FRECUENCIAS % ACTINOMICETACEAE PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores En la grafica 14, se ve claramente que para las jornadas 1 y 3 hay una mayor frecuencia de esta familia con respecto a la segunda jornada donde el mayor valor se presento en el parque Salazar Gómez con un porcentaje de 4.44%, para el parque Cundinamarca no se presento ningún microorganismo perteneciente a esta familia y para el resto de los puntos se observan valores entre 2.2 y 2.8%. Con respecto a las muestras tomadas en el punto blanco no se presento crecimiento de ningún microorganismo perteneciente a esta familia. 5.2.5 Frecuencia familia Enterobacteriaceae Grafica 15: Frecuencia de la familia Enterobactereaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo 25 20 J1 15 J2 10 J3 GT PSG IN PC 0 CM 5 PPA FRECUENCIAS % ENTEROBACTERIACEAE PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores En la grafica 15, hay un comportamiento similar para las muestras tomadas en el parque Puente Aranda y el colegio la merced donde se encontró una tendencia 92 descendente de J1 a J3, mientras que para el parque Cundinamarca y Salazar Gómez la mayor frecuencia se encontró en la jornada 2 sin ser esta significativa; para el punto 4 (INVIMA) en la jornada 3 se presento la mayor frecuencia con un valor de 18.42% y con respecto a J2 el mayor valor se encontró en el punto blanco con un valor de 22.22%, sin embargo no hubo presencia de microorganismos pertenecientes a esta familia en la jornada 1 en este punto. 5.2.6 Frecuencia familia Coccaceae Grafica 16: Frecuencia de la familia Coccaceae en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo J1 J2 GT PSG IN PC J3 CM 40 35 30 25 20 15 10 5 0 PPA FRECUENCIAS % COCCACEAE PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores En la grafica 16, se puede ver que para los puntos Colegio la Merced y Parque Salazar Gómez, hay un comportamiento descendiente de jornada 1 a jornada 3, presentándose un valor de 20% para el punto de Salazar Gómez, siendo este el menor porcentaje que se presento en todas los puntos y jornadas de muestreo; mientras que para las muestras tomadas en Guatavita el comportamiento es ascendente presentándose el mayor valor en J3 (38.46%). Para el resto de los puntos no se presenta diferencia significativa en cuanto a las frecuencias en las tres jornadas. 5.2.7 Frecuencia del Reino Micota La grafica 17, muestra que la mayor frecuencia de hongos se presento en el punto blanco para las tres jornadas siendo la jornada 1 la de mayor presencia con un valor de 71.43%. Para las muestras tomadas en el colegio la Merced y parque Salazar Gómez se observa una tendencia ascendente presentándose los menores valores en horas de la mañana y los mayores en noche. La menor frecuencia para la J1 se presento 93 en el parque Puente Aranda con un porcentaje de 14.63% y para la J2 la menor frecuencia estuvo en el parque Cundinamarca con un valor de 21.74%. Grafica 17: Frecuencia del reino de los Hongos en todos los puntos y jornadas durante todos los días de muestreo HONGOS 80,00 FRECUENCIA % 70,00 60,00 50,00 40,00 J1 30,00 J2 20,00 J3 GT PSG IN PC CM - PPA 10,00 PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores 5.3 FRECUENCIAS DE ESPECIES IDENTIFICADAS EN CADA UNO DE LOS PUNTOS Y JORNADAS Para cada punto y cada jornada se determino la frecuencia de aparición de la especie de microorganismo durante toda la fase de muestreo, teniendo en cuenta la relación entre el número de días muestreados y el número de días que aparece el microorganismo Anexo J; de igual forma se determino las especies de mayor frecuencia en cada uno de los puntos de muestreo Anexo K. F (% ) = N º D × 100 TD F: Frecuencia del microorganismo por punto y jornada en porcentaje N°D: Numero de días en que aparece el microorganismo por punto y jornada TD: Total de días muestreados Ejemplo: Para Pseudomonas aeruginosa en el punto Colegio la Merced en la jornada 3 aparece 2 veces durante los siete días de muestreo. F (% )P .aeruginosa = 94 2 × 100 = 28 .57 % 7 Tabla 19. Codificación de las familias identificadas CODIFICACION A B Cc Cory E H Ps FAMILIA Actinomicetes Bacillaceae Coccaceae Corynebacteriaceae Enterobacteriaceae Hongos Pseudomonadaceae Fuente: Autores 5.3.1 Especies mas frecuentes en el punto parque Puente Aranda Grafica 18: Frecuencia de bacterias y hongos en Puente Aranda durante todos los días de muestreo FRECUENCIAS % 30,00 25,00 20,00 J1 15,00 J2 10,00 J3 5,00 Ps H E Cory Cc B A 0,00 HONGOS Y BACTERIAS Fuente: Información procesada por los Autores La grafica 18, se observa que en el Punto 1 las familias de menor frecuencia de aparición durante toda la fase de muestreo fueron Actinomicetaceae (A) y Pseudomonadaceae (Ps); en donde para esta última no hubo presencia de para la tercera jornada; mientras que la familia Coccaceae (Cc) presento la mayor frecuencia durante las tres jornadas con valores superiores al 25%. Los microorganismos pertenecientes a la familia Coccaceae, son clasificados como gram-positivos los cuales poseen una pared celular mucho más ancha, rígida y resistente que la de los gram-negativos, debido a un compuesto derivado del azúcar (peptidoglicano), que puede ser la causa de su supervivencia a las condiciones extremas que se presentan en el aire; los microorganismos pertenecientes a esta familia que se presentaron con mayor frecuencia fueron Micrococcus luteus y Staphylococcus xylosus; los cuales, además de su condición de gram-positivos, son heterótrofos y quimiorganótrofos, lo que aumenta sus posibilidades de supervivencia al poder utilizar como fuente de energía los compuestos orgánicos presentes en el aire. 95 Seguida se encuentra la familia Bacillaceae, comprendida de igual forma por bacilos gram-positivos, caracterizados por su capacidad de producir esporas cuando ocurre un déficit o un exceso de nutrientes , lo que contribuye a su resistencia frente a condiciones extremas como el calor, “(ya que éstas contienen ácido dipicolínico y presentan un bajo contenido de agua), la radiación (debido a las proteínas de la cubierta externa de la espora que generan puentes de disulfuro), y las influencias químicas (esto, gracias a la impermeabilidad que la espora genera en estos casos)” 73 presentes en el aire; entre los microorganismos que se identificaron dentro de esta familia se encuentra el “Bacillus cereus; catalogado como causante de intoxicación alimentaría y endocarditis (inflamación de las membranas que cubre el interior del corazón) o meningitis (inflamación de las membranas que cubren el encéfalo)” 74, Bacillus polymyxa y en menor proporción fueron identificados Bacillus subtilis causante de infecciones oculares, Bacillus pumilis y B. megaterium que aunque no son microorganismos patógenos pueden estar presentes en el aire, suelo, agua y en materia en descomposición. Con respecto a los Hongos se hallaron altas frecuencias en J2 y J3 donde las especies que más se encontraron fueron Mucor sp y Absidia sp “causantes de infecciones graves como la Mucormicosis” 75; enfermedad que puede llegar a generar en personas inmunodeficientes Infección rinocerebral (infección de los senos paranasales y del cerebro), Mucormicosis pulmonar y Mucormicosis del tracto gastrointestinal. 5.3.2 Especies mas frecuentes en punto Colegio la Merced Grafica 19: Frecuencia de bacterias y hongos en Colegio la Merced durante todos los días de muestreo FRECUENCIAS % 35,00 30,00 25,00 20,00 J1 15,00 J2 10,00 J3 5,00 Ps H E Cory Cc B A 0,00 BACTERIAS Y HONGOS Fuente: Información procesada por los Autores En la grafica 19, se observa que la familia Actinomicetes y Pseudomonaceae al igual que en el punto parque Puente Aranda son las de menor frecuencia; sin embargo fue identificada Pseudomonas aeruginosa clasificada como un http://ceiba.cc.ntu.edu.tw/609-21500/314/314.htm ZINSSER. Microbiología pg 839.1996 75 Ibit pg 1531 73 74 96 microorganismo gram-negativo, los cuales presentan una pared celular mucho más compleja conformada principalmente por compuestos biogénicos como los lipopolisacaridos, las proteínas y los fosfolípidos y tan solo por un 10 % de peptidoglicano, que es el compuesto como se menciono anteriormente le proporciona rigidez y resistencia a la pared celular; es posible que debido a esta composición en su pared celular, la cual en presencia de factores meteorológicos como temperatura, humedad relativa y radiación solar, pueden inducir a una inactivación de los microorganismos al afectar los fosfolípidos y las proteínas presentes en ella. La Pseudomonas aeruginosa es un “microorganismo patógeno oportunista causante de meningitis, endocarditis y septicemia (infección de la sangre causada por bacterias patógenas) principalmente en personas con deficiencias en su sistema inmunológico” 76. La familia Coccaceae presenta los mayores porcentajes al igual que en el punto Parque Puente Aranda, sin embargo en este punto se presenta una tendencia descendente de J1 a J3 encontrándose con mayor frecuencia S. xylosus y Micrococcus luteus; la familia Enterobacteriaceae presenta una tendencia descendente de J1 a J3 encontrándose principalmente Klebsiella oxytoca la cual es un microorganismo foto autótrofo, motivo por el cual esta se encuentra con mayor frecuencia en horas de la mañana. La “Klebsiella oxytoca presenta patologías similares a la Klebsiella pneumoniae aunque en una menor proporción causando principalmente neumonía primaria y nosocomial, infecciones de las vías urinarias y meningitis” 77, para el resto de las familias se presentan frecuencias entre el 10 y 20% para las tres jornadas. En cuanto al comportamiento de los hongos en este punto de muestreo, estos presentan un comportamiento ascendente de J1 a J3, en donde se encuentran con mayor frecuencia Mucor spp y Penicillium spp; la alta frecuencia de aparición de este último puede relacionarse con el hecho de que se desarrollan sobre alimentos preparados o sobre sus materias primas; esto teniendo en cuenta que en los alrededores del sitio de muestreo se encuentran industrias alimenticias, de igual forma durante algunos de los días de muestreo se coincidió con las horas de descanso en el colegio, lo que pudo aumentar la presencia de este microorganismo; además se debe tener en cuenta que el Penicillium no es afectado por la luz y esporulan fácilmente en la oscuridad, lo que pudo aumentar la dispersión de estos en el aire. La importancia de este microorganismo como patógeno humano, radica en su capacidad de generar toxinas como la Citroviridina que es una neurotoxina responsable de causar beriberi cardiaco agudo y la Ocratoxina causante de lesiones renales. 76 77 Ibit pg 785 Ibit pg 751 97 5.3.3 Especies mas frecuentes en punto parque Cundinamarca Grafica 20: Frecuencia de familias de microorganismos en Parque Cundinamarca durante todos los días de muestreo FRECUENCIAS % 35,00 30,00 25,00 J1 20,00 J2 15,00 J3 10,00 5,00 Ps H E Cory Cc B A 0,00 BACTERIAS Y HONGOS Fuente: Información procesada por los Autores En la grafica 20, se puede observar que los microorganismos que presentan mayor frecuencia son los hongos especialmente durante la jornada 1 y 3 con valores superiores al 30%, encontrándose mayor presencia “Absidia sp considerada como hongo oportunista y causante de enfermedades como Otomicosis (infección respiratoria de las vías superiores y que generalmente se produce en la piel del conducto auditivo externo) y Mucomicosis” 78. La familia Coccaceae presenta frecuencias con valores superiores al 25% encontrándose con mayor presencia Mycrococcus luteus y Staphylococcus xylosus para las jornadas 2 y 3; para la familia de Actinomicetaceae no se identificaron microorganismos pertenecientes a esta durante la segunda jornada, mientras que las jornadas 1 y 3 presentan valores inferiores al 5%; sin embargo, los microorganismos pertenecientes a esta familia poseen la capacidad de formar esporas, lo que puede contribuir en su dispersión; y aunque su frecuencia de aparición sea baja, éstos son causantes de tres infecciones importantes Actinomicosis, Nocarditis y Actinomicetona. La familia Pseudomonaceae para J1 presenta el menor porcentaje (2.27%), identificándose Pseudomonas aeruginosa sin embargo no presento crecimiento en las otras dos jornadas. En la familia Corynebacteriaceae se presenta un pico en la jornada 2 de 21.74% con respecto a las otras dos jornadas, encontrándose con mayor proporción Corynebacterium jekeium y Corynebacterium amycolatum, ambas catalogadas como especies patógenas para el ser humano, su alta frecuencia de aparición en este punto de muestreo, puede estar relacionada con las condiciones en la que estos microorganismos se desarrollan como lo son las heces, el suelo y las plantas características permanentes en el sitio de muestreo; por otra parte la frecuencia para la familia Bacillaceae se encuentra alrededor del 15% donde los microorganismos mas representativos para este punto fueron B. 78 ZINSSER, Op.Cit, pg 1531 98 cereus y B. subtilis, los cuales son quimiolitotrofos y fotoautótrofos, lo cual puede explicar su comportamiento durante las jornadas de muestreo, ya que estos microorganismos pudieron utilizar la luz y los compuestos químicos presentes en el aire como fuente de energía durante J1 y J2; además al tener la capacidad de formar esporas y desarrollar pigmentos se disminuye el efecto biocida que generan la luz UV; debido a que estas condiciones los protegen de la fotooxidación y los ayuda a absorber la energía lumínica; sin embargo durante la J3 se presenta un pequeño descenso en la frecuencia de aparición posiblemente por la disminución en la radiación solar. 5.3.4 Especies mas frecuentes en punto INVIMA Grafica 21: Frecuencia de familias durante todos los días de muestreo de microorganismos en INVIMA FRECUENCIAS % 35,00 30,00 25,00 20,00 J1 15,00 J2 10,00 J3 5,00 Ps H E Cory Cc B A 0,00 BACTERIAS Y HONGOS Fuente: Información procesada por los Autores Para la grafica 21 se encuentra que la familia Coccaceae en la jornada 1 presenta la mayor frecuencia con un valor de 29.17%, seguida de la jornada 3 con un valor de 26.32% encontrándose principalmente Mycrococcus luteus y Staphylococcus xylosus; con respecto a los hongos para J1 y J2 se presentan valores de 29.17%; su alta frecuencia de aparición para este punto puede estar relacionada con el hecho de que en los alrededores del sitio de muestreo se cuenta con una zona de almacenamiento temporal de material reciclable donde los microorganismos de mayor incidencia son considerados como hongos oportunistas y saprófitos, entre los que se destacan Absidia sp y Aspergillus níger; este último al ser un hongo filamentoso posee la capacidad de formar y proyectar un número elevado de esporas en el aire aumentando la posibilidad de causar enfermedades como Otomicosis y Mucomicosis” 79. La familia Corynebacteriaceae presenta un comportamiento ascendente donde la mayor frecuencia se presenta en la jornada 3 con un porcentaje de 18.42% donde el microorganismo de mayor incidencia perteneciente a esta familia es el 79 ZINSSER, Op.Cit, pg.1531 99 Corynebacterium amycolatum, el cual como se mencionó anteriormente es una bacteria oportunista que se encuentra suspendido en el aire frecuentemente debido a que se encuentran en el suelo, heces y en la flora normal de las personas y animales; para las familias Actinomicetaceae y Pseudomonaceae se presentan las menores frecuencias para las tres jornadas, donde se logro identificar en las muestras tomadas Pseudomonas aeruginosa, para la jornada 3 no se identificaron microorganismos pertenecientes a esta especie. 5.3.5 Especies mas frecuentes en punto parque Salazar Gómez Grafica 22: Frecuencia de familias de microorganismos en parque Salazar Gómez durante todos los días de muestreo FRECUENCIAS % 35,00 30,00 25,00 J1 20,00 J2 15,00 J3 10,00 5,00 Ps H E Cory Cc B A 0,00 BACTERIAS Y HONGOS Fuente: Información procesada por los Autores Para la grafica 22 se puede observar un comportamiento descendente en la familia Coccaceae presentándose el mayor porcentaje de incidencia en J1 (30%) donde el microorganismo que mas se encontró fue Mycrococcus luteus y el menor en J3 (20%) encontrándose principalmente Staphylococcus xylosus; las familias Corynebacteriaceae y Enterobacteriaceae presentan un comportamiento similar, donde los porcentajes de mayor incidencia se encuentran en la jornada 2 identificándose principalmente Corynebacterium jeikeium para la familia Corynebacteriaceae y para la familia Enterobacteriaceae Escherichia coli, Klebsiella oxytoca y Serratia odorífera. Su presencia en este punto de muestreo puede relacionarse con el hecho de que en los alrededores de este sitio se presentan acumulación de residuos, por lo que estos microorganismos al desarrollarse en el suelo, las heces y plantas contribuyen en la descomposición de la materia orgánica. Los hongos presentan un comportamiento ascendente donde el mayor porcentaje se encuentra en la jornada 3 con una de incidencia del 30% encontrándose principalmente Aspergillus flavus, el cual es considerado como un hongo oportunista generador de metabolitos secundarios como las “aflatoxinas, los cuales son consideradas de gran importancia al relacionarse con varias formas de 100 cáncer cuando se expone frecuentemente a éstas” 80; y Mucor sp. La alta frecuencia de aparición de estos microorganismos en este punto de muestreo puede relacionarse con la existencia de un lugar de procesamiento del maíz, que de acuerdo con estudios realizados “durante el proceso de varias operaciones agrícolas con maíz contaminado como el de recolección, traslado con cintas transportadoras, almacenamiento, etc, se determino la existencia de estos microorganismos en el polvo y en áreas circundantes a los sitios de producción” 81 . De la familia Pseudomonaceae fue identificada Pseudomonas aeruginosa; al igual que en el resto de los puntos de muestreo presenta las menores frecuencias con un porcentaje de 2.50% para las jornadas 1 y 3; sin embargo su importancia radica como se menciono anteriormente en el hecho de ser un microorganismo patógeno oportunista y que aunque su frecuencia sea baja, se puede considerar como un riesgo latente. 5.3.6 Especies mas frecuentes en el Punto Blanco (Guatavita) Grafica 23: Frecuencia de familias durante todos los días de muestreo de microorganismos en Guatavita 80,00 FRECUENCIAS % 70,00 60,00 50,00 40,00 J1 30,00 J2 20,00 J3 10,00 0,00 A B Cc Cory E H Ps BACTERIAS Y HONGOS Fuente: Información procesada por los Autores En la grafica 23 se observa que las familias Actinomicetaceae, Bacillaceae y Pseudomonaceae no se encontraron en ninguna de las tres jornadas, mientras que para el resto de las familias si hubo presencia de microorganismos pertenecientes a estas familias en al menos una jornada. Con respecto a los Hongos se presentaron las mayores frecuencias especialmente en la jornada 1 con un porcentaje de 71.43%, para este punto fueron identificados Penicillium sp, Mucor sp, y Rizhopus sp. Para la familia Coccaceae se presento NTP 351: Micotoxinas (aflatoxinas y tricotecenos) en ambientes laborales MINISTERIO DE TRABAJO Y ASUNTOS SOCIALES ESPAÑA 81 NTP 351: Micotoxinas (aflatoxinas y tricotecenos) en ambientes laborales MINISTERIO DE TRABAJO Y ASUNTOS SOCIALES ESPAÑA 80 101 un comportamiento ascendente donde el mayor porcentaje de incidencia fue en J3 (38.46%) encontrándose principalmente Micrococcus luteus, Micrococcus lylae y Staphylococcus xylosus. Para las familias Corynebacteriaceae y Enterobacteriaceae no hubo crecimiento de microorganismos en la primera jornada. Tabla 20. Microorganismos encontrados en Guatavita MICROORGANISMOS ENCONTRADOS EN GUATAVITA DURANTE LAS TRES JORNADAS FAMILIA MICROORGANISMO J1 J2 J3 x Arthrobacter agilis Dermacoccus nishinomiyaensis x x x Kytococcus sedentarius COCCACEAE x x Micrococcus luteus x x Micrococcus lylae x x Staphylococcus xylosus x Escherichia coli. Klebsiella ENTEROBACTEREACEAE x x rinoescleromatis x Serratia odorifera CORYNEBACTERIACEAE Corynebacterium x coagulans Fuente: Información procesada por los Autores En la tabla 20 se nombran los microorganismos identificados en el punto blanco; los cuales también fueron aislados en las muestras tomadas en la localidad de Puente Aranda. De los cuales se encontró Escherichia coli como único microorganismo oportunista y ninguno patógeno. Tabla 21. Hongos encontrados en Guatavita HONGOS ENCONTRADOS EN GUATAVITA DURANTE LAS TRES JORNADAS HONGOS Aspergillus fumigatus Aspergillus niger Candida albicans Cladosporium sp. Mucor sp. Penicillium sp. Rhizopus sp. J1 J2 x J3 x x x x x x x x x x x x x x Fuente: Información procesada por los Autores En la tabla 21 se relacionan los hongos que fueron identificados durante el muestreo realizado en el punto blanco; estos también se identificaron durante los muestreos realizados en la localidad de Puente Aranda, donde se pudo identificar 102 especies como Aspergillus, Candida y Penicillium, considerados como hongos patógenos oportunistas de gran importancia clínica. 5.4 MICROORGANISMOS OPORTUNISTAS Y PATOGENOS ENCONTRADOS DURANTE LA FASE DE ESTUDIO Durante este estudio se pudieron identificar las siguientes especies de microorganismos oportunistas y patógenos que pueden causar enfermedades en el sistema respiratorio, además hongos generadores de metabolitos secundarios (micotoxinas), que en altas concentraciones y con altos periodos de exposición pueden llegar a generar enfermedades en los seres humanos. Tabla 22: Especies identificadas y enfermedades que generan MICROORGANISMOS Corynebacterium xerosis Escherichia coli Klebsiella oxytoca Klebsiella ozonae Proteus mirabilis Serratia marcescens PATOGENOS Corynebacterium diphtheriae Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes Streptococcus pneumoniae OPORTUNISTAS ENFERMEDAD Neumonía, Endocarditis, Artritis Neumonía, infecciones pulmonares y Meningitis Infección nosocomial Infección nosocomial Infección nosocomial, Neumonía, Septicemia Infección nosocomial, Neumonía y Septicemia Difteria Neumonía primaria, infecciones de heridas y de las vías urinarias, Bacteremia y Meningitis Neumonía, Meningitis Neumonía, Meningitis, Endocarditis Faringitis, Neumonía, Endocarditis Neumonía lobular, Sinusitis, Meningitis, Septicemia Fuente: MICROBIOLOGIA DE ZINSSEER. 20ed, Montevideo Uruguay, 1996. Tabla 23. Hongos identificados durante toda la fase muestreo HONGO DESCRIPCION GENERAL Aspergillus fumigatus Aspergillus flavus Hongo patógeno oportunista y alérgeno Aspergillus niger 82 MICOTOXINA GENERADA Aflatoxina, Ocratoxinas, Esporidesmina, Zearalenona y Esterigmatocistina Aflatoxina B1 Aflatoxina, Ocratoxinas, Esporidesmina, Zearalenona y Zinsser Op.cit. pag 1443 103 ENFERMEDAD Aspergillosis broncopulmonar y Ontomicosis” 82, además de bronquiectasias y neoplasias bronquiales Asma y Alergias como rinitis en personas inmunodeficientes por inhalación de las esporas Penicillum spp. Rizhopus spp. Hongo patógeno oportunista Hongo filamentoso, oportunista formador esporas Esterigmatocistina Ocratoxinas, Esporidesmina, Zearalenona, Patulina y Esterigmatocistina de Hongo oportunista Absidia spp. No se ha registrado hasta el momento que sean generadores de micotoxinas Hongo filamentoso Mucor spp. Hongo oportunista Rhizomucor Peniciliosis Zigomicosis y Mucormicosis (infección en senos paranasales) producido por la inhalación de Esporangioesporas, Alveolitós alérgica extrínseca (Pulmón serrador) Mucormicosis, producido por la inhalación de Esporangioesporas Mucormicosis, producido por la inhalación de Esporangioesporas Mucormicosis, producido por la inhalación de Esporangioesporas Fuente: MICROBIOLOGIA DE ZINSSEER. 20ed, Montevideo Uruguay, 1996. NTP488 Ministerio de trabajo y asuntos sociales, España 2002. 5.5 ANALISIS DE LAS CONCENTRACIONES EXPRESADAS EN UFC/m3 POR PUNTOS Y JORNADAS DURANTE EL MUESTREO Para determinar la concentración, se tuvo en cuenta las UFC encontradas en Agar Sangre y Agar Chocolate corregidas según la tabla estadística de Feller Anexo D, sobre el caudal aspirado por el COLECTOR MICROBIOLOGICO DE GERMENES AEREOS MAS100, el cual fue de 500l/min para cada medio. 3 UFC / m = ∑ UFC Agar Sangre + UFC Agar Chocolate V succion do Las concentraciones expresadas en UFC/m3 fueron analizadas para todos los días, jornadas y puntos de muestreo. 5.5.1 Concentraciones expresadas en UFC/m3 durante todos los días de muestreo en cada uno de los puntos Para determinar la concentración se tuvo en cuenta el promedio de las Unidades Formadoras de Colonia (UFC) por días, jornadas y puntos de muestreo. 104 Tabla 24. Promedio de las concentraciones expresadas en UFC/m3 para los 7 días de muestreo UFC/m3 EN LOS 7 DIAS DE MUESTREO PPA CM PC IN PSG GT PUNTOS Parque Puente Aranda Colegio la Merced Parque Cundinamarca INVIMA Parque Salazar Gómez Guatavita J1 J2 J3 849 765 860 367 356 517 283 560 495 382 296 599 382 673 648 227 37 10 Fuente: Información procesada por los Autores Tabla 25. Concentraciones expresadas en UFC/m3 en los puntos de muestreo por día y jornada JORNADAS J1 J2 J3 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 DIAS Miércoles Viernes Domingo Martes Jueves Lunes Sábado Miércoles Viernes Domingo Martes Jueves Lunes Sábado Miércoles Viernes Domingo Martes Jueves Lunes Sábado PPA CM PC IN 95 85 56 91 49 157 135 88 2425 349 502 604 1720 941 304 744 963 181 212 443 243 151 371 440 447 704 401 262 109 84 966 85 57 113 117 41 887 172 639 275 2819 578 1136 299 703 632 474 113 127 607 213 477 651 304 374 282 419 368 306 167 350 249 495 313 1622 599 1134 1971 1554 1189 579 775 659 261 401 468 448 158 205 246 971 798 347 255 Fuente: Información procesada por los Autores 105 PSG 120 62 604 1183 244 84 376 136 90 1523 1529 777 216 409 168 345 1786 874 502 323 536 Grafica 24: Comportamiento de las concentraciones de microorganismos durante toda la fase de muestreo 3 UFC/m TODOS LOS DIAS, PUNTOS Y JORNADAS DE MUESTREO 900 800 UFC/m 3 700 600 J1 500 J2 400 J3 300 200 GT PSG IN PC CM 0 PPA 100 PUNTOS Fuente: Información procesada por los Autores De acuerdo con los datos obtenidos en la estadística descriptiva; el comportamiento de las concentraciones (UFC/m3), presento grandes variaciones durante la fase de muestreo, esto se puede corroborar de acuerdo con el dato arrojado por la desviación estándar de 389.87 el cual indica una alta variabilidad en su comportamiento. En la grafica 24, se puede observar que en el punto parque Puente Aranda se presenta la mayor concentración promedio de UFC durante las tres jornadas como se observa en la tabla 24; para los días 3, 4 y 5 se presentan las mayores concentraciones en este punto para las tres jornadas (Ver tabla 25), lo cual se asocia con la turbulencia mecánica causada por el flujo vehicular y la gran densidad poblacional que se presenta en este punto, especialmente en el día tres, el cual es muy concurrido, debido a que es el día de visitas en la cárcel que se encuentra cerca del lugar de muestreo; por otra parte en los alrededores del sitio se cuenta con gran cantidad de vegetación "la cual es un hábitat natural de muchos microorganismos y contribuye de manera importante a incrementar el número de éstos suspendidos en el aire, por la acción del viento y de la evapotranspiración o por el roce entre las mismas hojas" 83, asiéndolos viables y cultivables en el momento en que fueron tomadas las muestras. Para el resto de los días de muestreo en este punto se presentan concentraciones inferiores a 659 UFC/m3 (Ver tabla 25), posiblemente por que las condiciones atmosféricas que se presentaron, influyeron el la supervivencia de los microorganismos, haciéndolos viables mas no cultivables. El parque Salazar Gómez es el segundo en presentar concentraciones promedio elevadas de microorganismos expresadas en UFC/m3 especialmente durante las 83 www.ine.gob.mx/publicaciones/libros/440/cap1.html 106 jornadas 2 y 3 como se puede ver en la tabla 24. En la tabla 25, se observa que al igual que en punto parque Puente Aranda para los días 3 y 4, durante las tres jornadas de muestreo, se presentan las mayores concentraciones de UFC, este comportamiento puede relacionarse, al igual que con el parque Puente Aranda con la alta densidad poblacional y vehicular, además este punto cuenta con una amplia zona verde; de igual forma para el cuarto día de muestreo se coincidió con el barrido de calles por parte de la empresa de Servicio Públicos lo cual pudo haber influido en mantener las altas concentraciones en este día. Los puntos Colegio la Merced, Parque Cundinamarca e INVIMA, los cuales se encuentran en sectores de mayor influencia industrial se presentan las menores concentraciones promedio de UFC/m3; sin embargo para la primera jornada el punto parque Cundinamarca presento las menores concentraciones promedio, en comparación con el resto de los puntos de muestreo (Ver tabla 24); esto se pudo haber dado ya que la mayoría de los muestreos se realizaron después de las 8 AM, hora en la que empieza a presentarse la inestabilidad atmosférica permitiendo de esta manera la dispersión de los microorganismos; mientras que para la segunda jornada en este mismo punto el valor de las UFC/m3 aumenta el doble de la concentración registrada para J1, presentándose un valor de 560 UFC/m3, debido a que en esta hora del día el sitio de muestreo es mas concurrido tanto por las personas que trabajan en los alrededores como por el tráfico vehicular. Para la tercera jornada, se presenta un descenso leve en la concentración de UFC/m3, esto puede ser atribuido a que en tres de los siete días de muestreo se presentaron lluvias fuertes que generaron un lavado de la atmósfera disminuyendo de esta forma las concentraciones. El comportamiento de las UFC/m3 en los puntos Colegio la Merced e INVIMA, presentan las mayores concentraciones para la jornada 3, con valores de 517 y 599 UFC/m3 respectivamente. Esto pudo generarse debido a la influencia que ejercen los factores meteorológicos y los contaminantes atmosféricos en la supervivencia de los microorganismos a las condiciones extremas que se presentan en la atmósfera, como es el caso de la familia Coccaceae; la cual es la de mayor incidencia en estos dos puntos. 5.5.2 RELACION DE CONCENTRACIÓN DE MICROORGANISMOS EXPRESADAS EN UFC/m3 CON PARAMETROS METEOROLOGICOS Y CONCENTRACIONES DE CONTAMINANTES (PM10, NOX Y O3) El comportamiento de los bioaerosoles, se encuentra estrechamente relacionado con factores meteorológicos, la dinámica atmosférica y la presencia o no de edificaciones y vegetación cerca a los sitios de muestreo como se ha podido observar en los análisis anteriores. Estos factores contribuyen en su distribución ya sea cerca del suelo o a grandes distancias; por lo que la concentración de microorganismos, presenta una alta variabilidad, tanto diurna como estacional. 107 Por esta razón se realizó un análisis del comportamiento de estas concentraciones y de su relación con factores meteorológicos y de calidad del aire durante cada una de las jornadas de muestreo especialmente en los puntos parque Puente Aranda y parque Salazar Gómez; debido a que se encontraron concentraciones de microorganismos muy elevadas durante las tres jornadas de muestreo especialmente para los días 3, 4, 5 ya que fueron los días críticos. Para realizar este análisis fueron utilizados los datos meteorológicos registrados en campo (lluvias, nubosidad y temperatura); y los datos arrojados por las estaciones de monitoreo de calidad del aire del DAMA para cada una de las siguientes variables: velocidad y dirección del viento y PM10 se tomaron los datos reportados por la estación de MERCK, concentraciones de NOx, O3 y Radiación Solar, los registrados por la estación del IDRD y los datos de Humedad Relativa registrados por las estaciones de Usme y Vitelma, para lo que se realizo un modelo Autorregresivo de primer orden (AR1), con el fin de estimar la HR para la estación de MERCK, ya que ésta no mide este parámetro. Grafica 25: Relación de variables meteorológicas y UFC/m3 en el punto Parque Puente Aranda 3 RELACION UFC/m Y VARIABLES METEOROLOGICAS 10000 Temperatura (ºC) 1000 Viento (m/s) 100 Humedad Relativa Radiación Solar 10 UFC/m³ D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 1 J1 J2 J3 JORNADAS Y DIAS Fuente: Información procesada por los Autores 108 Grafica 26: Relación de contaminantes atmosféricos y UFC/m3 en el punto Parque Puente Aranda RELACION UFC/m3 Y CONTAMINANTES ATMOSFERICOS 10000 1000 PM10 (µg/m3) NOX (ppb) 100 O3 (ppb) UFC/m³ 10 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 1 J1 J2 J3 JORNADAS Y DIAS Fuente: Información procesada por los Autores De acuerdo con la gráfica 26, se puede observar que el tercer día de muestreo correspondiente al día domingo, en la jornada 1 se presenta la mayor concentración de UFC y de PM10, encontrándose una relación directa entre estas dos variables, ya que los bioaerosoles hacen parte y se desplazan en el material particulado; de igual forma la relación existente entre la temperatura y la velocidad del viento con respecto a las concentraciones de microorganismos expresadas en UFC/m3 es directa. Las velocidades predominantes del viento que se observan en la figura 20 corresponden a valores entre 0.5 y 2.1 m/s lo que significa que son vientos suaves que no influyen de manera significativa en la dispersión de contaminantes y microorganismo presentes en el aire, por otra parte al haber una relación directa entre temperatura y las concentraciones de UFC/m3 para esta jornada nos indica que estos valores registrados para la temperatura, fueron favorables para la supervivencia de la población microbiana. Con respecto a la Humedad Relativa para este día y jornada, se puede observar en la gráfica 25, que se presenta una relación inversa; sin embargo el valor registrado de 82.06% es favorable para la permanencia de los microorganismos; ya que “cuando ésta se encuentra con valores superiores al 60% la atmósfera contiene el vapor de agua necesario para su supervivencia, contribuyendo a aumentar la concentración de microorganismos en el aire” 84. 84 http://www.lenntech.com/espanol/Calculadoras/humedad-relativa.htm 109 El valor de la Radiación solar registrada para esta jornada fue de 81.54 W/m2, el cual influyo en la poca presencia de las bacterias gram-negativas como las Enterobacteriaceae y Pseudomonadaceae que como se pudo observar anteriormente presentan una baja frecuencia de aparición; por otra parte esta radiación pudo favorecer la viabilidad de microorganismos fotoautótrofos. Con respecto a los contaminantes atmosféricos Nox y O3 no se registraron valores para este día y jornada. Figura 20: Rosa de los vientos para el día 19 de Marzo J1 Fuente: Información procesada por los Autores Con respecto a la jornada 2 en la gráfica 26, se puede ver que se presenta una relación directa entre UFC/m3 y PM10 en donde las concentraciones para esta jornada son menores con respecto a la jornada 1; esto se pudo haber dado debido a que a esta hora del día el flujo vehicular disminuye en este punto, reduciendo las concentraciones de PM10 y así mismo de los microorganismos presentes en el aire, ya que hay menos fuentes de carbono como nutriente para su metabolismo generando de esta manera una reducción en su concentración; por otra parte se presento una relación indirecta entre la temperatura y la velocidad del viento con respecto a las UFC; sin embargo la temperatura para la hora del muestreo permite la viabilidad de los microorganismos pero al encontrarse velocidades del viento entre 2.1 y 3.6 m/s provenientes del sur-oriente de la ciudad, produjeron una 110 dispersión de los contaminantes y de esta forma una disminución de las UFC/m3, como se puede observar en la figura 21. La Humedad Relativa que se presenta para esta jornada tiene un valor de 71.63%, el cual como se menciono anteriormente es óptimo para la supervivencia de los microorganismos; sin embargo el valor registrado para la Radiación Solar fue mayor que para la jornada anterior, como se observa en la gráfica 25, debido a la hora y a la poca nubosidad que se presento en el momento en que fue tomada la muestra, contribuyendo de esta manera a la reducción en la concentración de microorganismos al producir un efecto biocida en algunos microorganismos presentes en el aire, especialmente aquellos que no poseen esporas. Figura 21: Rosa de los vientos para el día 19 de Marzo J2 Fuente: Información procesada por los Autores Para la tercera jornada se puede observar que nuevamente se incrementa las concentraciones de microorganismos y PM10 manteniéndose la relación directa entre estas dos variables, los vientos que predominaron presentaron velocidades entre 2.1 y 3.6 m/s provenientes del sur de la estación, (figura 22), pasando por zonas residenciales como el Galán, Ciudad Montes, Primavera Occidental entre otos que generaron un aumento en la concentración de las UFC. El incremento se pudo generar por que a la hora en que fue realizado el muestreo se presento mayor afluencia de personas y trafico vehicular en el sitio favoreciendo la presencia de turbulencia mecánica que pudo incrementar de esta manera los microorganismos presentes en el aire. Otros factores que influyeron en el aumento 111 de estas concentraciones fueron la temperatura, la humedad relativa y la radiación solar, las cuales para esta hora del día registraron valores que favorecieron la presencia de los microorganismos, Anexo L. En la gráfica 26 se puede observar que las variables NOx y O3 presentan una relación inversa entre sí; esto se pudo generar ya que a esta hora la radiación solar presento un valor significativo que genero reacciones fotoquímicas disminuyendo las concentraciones de NOx y manteniendo las de O3. Figura 22: Rosa de los vientos para el día 19 de Marzo J3 Fuente: Información procesada por los Autores El día 4 presenta valores elevados de UFC/m3 durante las tres jornadas. Como se puede observar en la gráfica 25 para la jornada 1 la concentración de microorganismos fue de 1720 UFC/m3 y presenta una relación inversa con respecto a las variables meteorológicas; sin embargo en el momento en que fueron tomadas las muestras, el comportamiento de estas variables pudo contribuir en que se mantuvieran condiciones aptas para la supervivencia de los microorganismos. Por otra parte en la figura 23 se puede observar que los viento predominantes para este día y jornada presentaron valores entre 0.5 a 2.1 m/s, los cuales son vientos suaves que contribuyeron a que los microorganismos no se dispersaran y se encontraran viables y cultivables en el momento de la toma de muestras. 112 En cuanto al comportamiento de los contaminantes atmosféricos para J1 en este día, se pudo determinar que la concentración para el PM10 fue de 218 µg/m3, la cual se puede relacionar con las altas concentraciones de UFC registradas; “ya que los microorganismos suspendidos en la atmósfera se encuentran asociados a las partículas” 85, por lo que su concentración aumenta proporcional a los microorganismos las fuentes de carbono necesarias para el funcionamiento de su metabolismo y permanencia en la atmósfera. Figura 23: Rosa de los vientos para el día 21 de Marzo J1 Fuente: Información procesada por los Autores En la segunda jornada se presenta un pico en la concentración (Ver tabla 25) para este día, este incremento se pude relacionar con un incremento en las velocidades del viento que registraron valores entre 3.6 y 5.7 m/s(vientos leves y moderados), provenientes de la localidad de Fontibón ubicada al nor-este de la estación (figura 24) que contribuyeron a la formación de turbulencia mecánica, arrastre y transporte de mayor cantidad de bioaerosoles de zonas residenciales pertenecientes a esta localidad hacia el punto de muestreo; además durante esta jornada el sitio de muestreo presenta una gran afluencia de personas 85 www.ine.gob.mx/publicaciones/libros/440/cap1.html 113 pertenecientes a los establecimientos comerciales que se encuentran situados en los alrededores. De acuerdo con la gráfica 25, el comportamiento de las concentraciones de microorganismos con respecto a los factores meteorológicos registrados para esta jornada, nos indica que aunque hubo unas velocidades del viento relativamente altas, las condiciones climatológicas que se presentaron durante el muestreo favorecieron la supervivencia de los microorganismos, ya que para esta jornada se presento una radiación solar y una temperatura más bajas y una humedad relativa más alta que la presentada durante la primera jornada, Anexo L, estas condiciones favorecen especialmente a los microorganismos gram-positivos. Figura 24: Rosa de los vientos para el día 21 de Marzo J2 Fuente: Información procesada por los Autores Para la tercera jornada se observa en las gráficas 25 y 26 una disminución en la concentración (Ver tabla 25), siendo aun este un valor significativo en donde las características climatológicas que se presentaron para estas horas del día como la temperatura (17.5°C), la velocidad del viento (3.7m/s), la radiación solar (0.52 W/m2), la humedad relativa (79.12%), y el aumento en la concentración de PM10 (147 µg/m3), Anexo L pudieron contribuir en la permanencia de los microorganismos en los aerosoles en elevadas concentraciones al aportarles las condiciones necesarias y de estabilidad para su supervivencia. En cuanto al comportamiento de las variables NOx y O3 para esta jornada se presenta una relación inversa, donde los bajos valores registrados para NOx en esta jornada pueden ser atribuidos a que la velocidad del viento promedio del aire 114 es mayor y el mezclado atmosférico es mas fuerte en la tarde que en la mañana, causando de esta manera una dilución más rápida. Figura 25: Rosa de los vientos para el día 21 de Marzo J3 Fuente: Información procesada por los Autores En el día 5 (jueves 23 de marzo 2006) se registró una concentración elevada para la primera jornada en comparación con las otras dos jornadas (Tabla 25), en donde la temperatura (22 ºC), la humedad relativa (83.69 %), la velocidad del viento predominantes entre 0.5 a 2.1 m/s provenientes del nor este figura 26 y la radiación solar (209.89 W/m2) presentan valores favorables para algunos microorganismos, de igual forma esta concentración se puede relacionar teniendo en cuenta que para “Bogotá se presenta estabilidad atmosférica debida a las bajas velocidades del viento entre las 8 de la noche y las 8 de la mañana del día siguiente, permitiendo que se acumulen los contaminantes atmosféricos y se favorezca la inversión térmica” 86, podemos decir que las elevadas concentraciones de UFC y PM10 para esta jornada se pudieron presentar como consecuencia de este fenómeno. 86 Secretaria de Salud. Identificación de los riesgos y amenazas de origen antropico de las localidades de Santafe de Bogota, pag 53. 1999 115 El cuanto a los NOx se registro una concentración de 85 ppb siendo esta la mayor con respecto a las demás jornadas para este día, esta concentración se debe a que en esta hora del día se presentan más emisiones provenientes de fuentes móviles, y los vientos registrados son leves lo cual favorece la concentración de los contaminantes. En cuanto al O3 se presento un valor bajo de 8 ppb, siendo este una concentración normal para esta hora del día, ya que las reacciones fotoquímicas se hacen más fuertes entre las 11:00 am y 1:00 pm hora en que las concentraciones de O3 se hacen mayores. Figura 26: Rosa de los vientos para el día 23 de Marzo J1 Fuente: Información procesada por los Autores 116 Grafica 27: Relación de variables meteorológicas con UFC/m3 para el punto Salazar Gómez 3 RELACION UFC/m CON VARIALBES METEOROLOGICAS 10000 Temperatura (ºC) Viento (m/s) 1000 100 Húmedad Relativa (%) Radiación Solar (W/m2) UFC/m³ 10 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 1 J1 J2 J3 JORNADAS Y DIAS Fuente: Información procesada por los Autores Grafica 28: Relación de contaminantes atmosféricos con UFC/m3 para el punto Salazar Gómez 3 RELACION UFC/m Y CONTAMINANTES ATMOSFÉRICOS 10000 1000 PM10 (µg/m3) NOX (ppb) 100 O3 (ppb) UFC/m³ 10 J1 J2 J3 JORNADAS Y DIAS Fuente: Información procesada por los Autores 117 D7 D6 D5 D4 D3 D2 D1 D7 D6 D4 D5 D3 D2 D1 D7 D6 D5 D4 D3 D2 D1 1 Para la grafica 27 se puede ver que para los días 3, 4 y 5 al igual que para el parque Puente Aranda se presentan las mayores concentraciones de UFC a excepción de la jornada 1 en el día 5 (Ver tabla 25). En el día 3, la primera jornada de muestreo fue tomada de 11:20 a 11:45 AM donde se presento una velocidad del viento con rangos entre 0.5 a 2.1 m/s (figura 20); a esta hora del día ya no se presenta el fenómeno de inversión térmica, por este motivo el valor registrado durante esta jornada es inferior al de la jornada 2 (Tabla 24), en donde se presentaron velocidades del viento con rangos entre 3.6 a 5.7 m/s provenientes del sur-occidente y vientos del sur-oriente con velocidades de 2.1 a 3.6 m/s (figura 21) que pudieron generar turbulencia por rozamiento, además de transportar microorganismos de zonas residenciales incrementando de esta manera su presencia. Para la tercera jornada se presento el máximo valor registrado para este punto y día (Tabla 24), al igual que el valor de PM10 (80 µg/m3) como puede observarse en la gráfica 28. Estos valores se pudieron presentar por el arrastre de partículas y microorganismos (aerosoles) por parte de los vientos provenientes del sur (zonas residenciales e industriales) con velocidades de 3.9 a 5.7 m/s (grafica 22), otro factor que pudo influir para estas concentraciones fue que en la hora de muestreo se presento alto flujo vehicular, alta densidad poblacional y las condiciones climatológicas fueron favorables para la supervivencia y permanencia de hongos y bacterias en el aire. El día 4 la toma de muestras para J1 fue realizada de 12:00 a 12:30 pm, con cielo despejado y velocidades de vientos predominantes de 4.1 m/s presentándose una concentración de 1183 UFC, estas condiciones pudieron generar que “algunos microorganismos no soportaran el transporte por largas distancias ni la desecación por efecto de la radicación de luz ultravioleta” 87, por este motivo se presenta concentración menores a las registradas durante la segunda jornada, sin embargo la concentración sigue siendo representativa lo que puede indicar que la mayoría de microorganismos “se encontraban en sus formas esporuladas o vegetativas siendo de esta manera cultivables” 88. Para esta jornada, no se registraron valores de NOx y O3, sin embargo para esta hora la concentración de O3 pudo haber sido alta, a causa de las reacciones fotoquímicas que se generan por efecto de la alta radiación UV. Para la jornada 2 se presenta un incremento en la concentración de unidades formadoras de colonia (tabla 25) y una disminución en la concentración de PM10 con un valor de 80 µg/m3, indicándonos que para este caso no se presenta una relación directa entre estas dos variables. En el momento que fue tomada la muestra, el cielo se encontraba nublado reduciendo de esta forma los efectos 87 88 BARTHA, Richard, Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental pag. 329. 2002 www.ine.gob.mx/publicaciones/libros/440/cap1.html 118 adversos que genera la radiación solar en los microorganismos y se reportaron velocidades del viento entre 3.6 a 5.7 m/s (figura 21), lo que nos indica mayor turbulencia mecánica y transporte de microorganismos generando así un incremento en la concentración de las UFC. En la tercera jornada se observa una disminución en la concentración de UFC (Tabla 25) y una disminución en la temperatura (16.5°C), lo que nos indica que para este caso existe una relación entre temperatura y UFC; además las velocidades del viento registradas para esta hora del día fueron relativamente altas con rangos entre 3.6 a 5.7m/s (figura 25) que pudieron favorecer la turbulencia por rozamiento contribuyendo a mantener una concentración significativa de microorganismos; por otra parte los valores registrados para la temperatura, nos pueden indicar que algunos microorganismos mesófilos no pudieron sobrevivir en estas condiciones. Para el día 5 en la primera jornada se observa una baja concentración de unidades formadoras de colonia (Ver tabla 25), para este caso se presenta una relación directa con las demás variables meteorológicas e inversa con la temperatura. Para la hora en que se tomo la muestra no se genero turbulencia vehicular ni gran densidad poblacional que asociada con las velocidades de viento presentadas influyeron en la baja concentración de UFC. En la segunda jornada se presenta una concentración de 777 UFC/m3 presentándose una relación directa con PM10 que registro un valor de 155 µg/m3; por otra parte las variables temperatura, radiación solar y humedad relativa fueron favorables para la permanencia de algunos microorganismos, en cuanto al viento, estos provienen del sur-occidente con velocidades de 3.6 a 5.7 m/s y del noroccidente con velocidades de 2.1 a 3.6 m/s, ver Anexo M, que pudieron arrastrar microorganismos de zonas residenciales e industriales hacia el sitio de muestreo por acción del viento. La tercera jornada presenta una concentración de 502 UFC/m3, presentando una relación directa con el material particulado, el cual registro un valor de 119 µg/m3. La humedad relativa que se registró contribuye en la supervivencia de algunos microorganismos; sin embargo la temperatura y las concentraciones de PM10 pudieron generar la disminución en las UFC/m3 ya que los microorganismos posiblemente no encontraron los nutrientes ni las condiciones meteorológicas aptas para su permanencia en la atmósfera, otro factor que pudo influir en este descenso de concentraciones puede atribuirse a las velocidades altas de viento que se registraron en ese momento 2.1 y 5.7 m/s las cuales posiblemente no arrastraron aerosoles de otras zonas, sino que favorecieron su dispersión. 119 5.5.3 RELACION DE LA CONCENTRACION EXPRESADA EN UFC/m3 CON PARAMETROS METEOROLOGICOS Y CONCENTRACIONES PM2.5 Para la relación de estas variables se tomaron los promedios diarios registrados en campo (lluvias, nubosidad y temperatura), datos de viento reportados por la estación de MERCK, datos de NOx, O3 y radiación global registrados por la estación del IDRD y los datos de Humedad relativa obtenidos mediante la estimación aplicando un modelo autorregresivo de primer orden (AR1), utilizando los datos de las estaciones de USME y VITELMA pertenecientes a la red de monitoreo de calidad del aire del DAMA. Para las concentraciones de PM2.5 se trabajo con los datos obtenidos por el medidor de PM2.5 con el que cuenta la Universidad de la Salle; ya que para esta variable no se contaron con datos horarios por parte de la estación, así mismo se realizo una identificación de los microorganismos presentes en los filtros que fueron sembrados en Agar Sangre y Agar Saboreaud. Este análisis fue realizado para el punto Colegio la Merced, debido a que en este sitio se ubicó el medidor de PM2.5. Para los días 17 y 22 de Abril el equipo se ubico en el punto INVIMA en donde no se registraron concentraciones de PM2.5, debido a que los filtros que fueron obtenidos del medidor fueron sembrados en los Agares en el momento en que fueron retirados del medidor, ya que se considero que el proceso de desecación a que eran sometidos los filtros para obtener las concentraciones, podían llegar a afectar la supervivencia de los microorganismos presentes en ellos. Grafica 29. Relación UFC/m3 con variables meteorológicas y concentración de PM2.5 en Colegio la Merced 3 RELACION UFC/m Y VARIABLES METEOROLOGICAS 1000,0 Tem peratura (ªC) VIENTO (m/s ) UFC/m3 100,0 HR(%) Radiación Solar (W/m 2) PM2,5 (µg/m 3) 10,0 1,0 1 2 3 4 5 DIAS Fuente: Información procesada por los Autores 120 6 7 Grafica 30. Relación UFC/m3, PM2.5 y contaminantes atmosféricas en Colegio la Merced 3 RELACION UFC/m Y CONTAMINANTES ATMOSFERICOS 1000 PM2,5 (µg/m3) 100 NOX (ppb) O3(ppb) 10 PM10µg/m3 UFC/m3 1 1 2 3 4 5 6 7 DIAS Fuente: Información procesada por los Autores La concentración promedio de UFC para este punto de muestreo fue de 404 UFC/m3; el día 2 (Viernes) se presento la menor concentración como se observa en la tabla 25, este valor puede ser asociado con las lluvias que se presentaron en el transcurso del día, las cuales pudieron lavar la atmósfera disminuyendo su concentración en el aire. La mayor concentración se presento el día 4 (Martes), en donde las condiciones promedio de temperatura (18.6 ºC), humedad relativa (74.98 %) y radiación solar (151.04 W/m2), permitieron la supervivencia de algunos microorganismos en el aire, por otra parte, para este día no hubo lluvias que permitieran el lavado de la atmósfera. En la grafica 30 se puede observar que se presento una relación directa entre las concentraciones de PM2.5 y PM10 e inversa con la concentración de UFC/m3 en todos los días de muestreo, este comportamiento atípico, puede ser atribuido a la cercanía del punto de muestreo con la cobertura vegetal que como se mencionó anteriormente es una fuente importante de bacterias y hongos, además las velocidades del viento que se registraron pudieron favorecer el transporte de estos hacia el Colector Microbiológico MAS-100 que se encontraba a una distancia de aproximadamente de 2 m. De acuerdo con la OMS existe una relación entre la mortalidad y el material particulado, donde por cada 10 μg/m3, se incrementa un 1% la mortalidad diaria, esto nos puede indicar que de acuerdo con las concentraciones de PM2.5 registradas para los días de muestreo que se encontraron entre 60 y 84 µg/m3, 121 puede haber un incremento en la mortalidad entre un 10 y 14% aproximadamente. Con respecto a las concentraciones de PM10 se puede ver en el Anexo L, que solo para el día 5 se supera la norma para un tiempo de exposición de 24 horas con un valor de 155 µg/m3, para el resto de los días se presentan valores entre 67 y 131 µg/m3. En cuanto a las concentraciones de O3 se registro un promedio de 15.99 ppb para toda la fase de muestreo, para ninguno de los días de muestreo se excedió la norma de calidad del aire para Bogotá Resolución 1208 del 2003. Figura 27. Incremento de la mortalidad en función de la concentración de material particulado. Incremento en mortalidad en función de la concentración de M . P. (OM S) % Incremento en mortalidad 25 20 Sulfatos 15 PM10 10 PM2.5 5 0 0 50 100 150 200 Concentra ción de M. P. Fuente: Organización mundial de la Salud 2000. 5.5.4 MICROORGANISMOS IDENTIFICADOS EN FILTROS DE PM2.5 SEMBRADOS EN AGAR SANGRE Y SABOREAUD PARA LOS PUNTOS COLEGIO LA MERCED E INVIMA En los filtros que fueron sembrados en Agar Sangre y Saboreaud hubo un crecimiento de los siguientes microorganismos: Tabla 26. Microorganismos identificados en Colegio la Merced PUNTO DIA 15-Mar 17-Mar BACTERIAS Staphylococcus pasteuri Staphylococcus pasteuri 19-Mar Staphylococcus pasteuri MERCED 21-Mar 23-Mar Staphylococcus pasteuri Dermacoccus nishinomiyaensis Staphylococcus pasteuri Micrococcus lylae Fuente: Información procesada por los Autores 122 HONGOS Rhizopus sp. Rhizopus sp. Rhizopus sp. Mucor sp. Penicillium sp. Rhizopus sp. Mucor sp. Penicillium sp. Como se puede observar en la tabla 26, solo hubo crecimiento de 3 especies bacterianas y 3 especies de hongos; esta baja presencia de microorganismos en los filtros puede estar relacionada con las variaciones diurnas de los factores meteorológicos, que pudieron afectar la supervivencia de los microorganismos en los filtros; por otra parte el proceso de desecación al que deben ser sometidos los filtros para la obtención de las concentraciones, pudo influir en que se presentara plasmólisis en la pared celular de los microorganismos, haciendo que no fueran viables en el momento de la siembra. Dentro de los microorganismos que se identificaron, los que presentan importancia por sus efectos adversos en la salud y ser catalogados como oportunistas, se encuentran los hongos de la especie Penicillium spp, Mucor spp y Rhizopus spp; los cuales como se menciono anteriormente son responsables de enfermedades como Peniciliosis y Mucomicosis, que al encontrarse en el material particulado con diámetro aerodinámico inferior a 2.5 µm, llegan con mayor facilidad al trácto respiratorio inferior donde pueden alcanzar los alvéolos, donde el proceso de eliminación que realiza el organismo puede llegar a ser de semanas, meses o incluso años, pudiendo generar alergias o enfermedades pulmonares especialmente en niños y ancianos con deficiencia en su sistema inmunológico. Tabla 27. Microorganismos identificados en INVIMA PUNTO DIA 17-Abr INVIMA 22-Abr BACTERIAS Staphylococcus pasteuri Micrococcus lylae Micrococcus lylae Dermacoccus nishinomiyaensis Staphylococcus pasteuri HONGOS Mucor sp. Penicillium sp. Rhizopus sp. Penicillium sp. Fuente: Información procesada por los Autores En la tabla 27, se observa que para este punto no se presento una diferencia significativa en cuanto a las especies bacterianas y de hongos encontrados en el punto Colegio la Merced a pesar que los filtros no fueron sometidos a desecación, esto nos puede indicar que la poca presencia de microorganismos se debe principalmente a las variaciones diurnas de los factores meteorológicos a las que son expuestos durante el muestreo. 5.6 CORRELACION DE PARAMETROS METEOROLOGICOS Y DE CALIDAD DEL AIRE CON LA SUPERVIVENCIA Y VIABILIDAD DE LOS MICROORGANISMOS Para determinar el comportamiento y establecer el grado de relación existente entre la concentración de UFC y las variables meteorológicas y de calidad del aire 123 fue utilizada la estadística inferencial o inductiva, para lo que fue necesario analizar los datos por medio del paquete estadístico SPSS versión 13, con esto se logro establecer el grado de correlación y significancia de cada una de las variables para esta fase de muestreo. Se realizaron correlaciones de Pearson ya que este es un estadístico claro y ampliamente utilizado cuando se cuenta con suficiente información. Este análisis se realizo para toda la fase de muestreo, con el fin de determinar el comportamiento general de cada una de las variables con respecto a la concentración de microorganismos en el aire; de igual forma fue realizado un análisis por jornada para estas variables para poder determinar su comportamiento en el transcurso del día 5.6.1 CORRELACIONES PARA TODA LA FASE DE MUESTREO Tabla 28. Correlaciones entre UFC/m3, variables meteorológicas y calidad del aire t ºC temperatura pm10 ufc viento Noxppb O3ppb R_solar Humedad_rel Pearson Correlation pm10 viento NOxppb O3ppb ufc RS HR 1 Sig. (2-tailed) Pearson Correlation Sig. (2-tailed) -0,5024 1 0,020287 Pearson Correlation 0,326122 -0,255 Sig. (2-tailed) 0,149 Pearson Correlation 0,621 -0,499 Sig. (2-tailed) Pearson Correlation Sig. (2-tailed) Pearson Correlation Sig. (2-tailed) Pearson Correlation Sig. (2-tailed) Pearson Correlation Sig. (2-tailed) 1 0,263 0,261 1 0,002 0,021 0,252 -0,578 0,503 -0,536 -0,488 0,006 0,02 0,012 0,024 0,753 -0,094 0,138 0,374 -0,375 0,547 0,0943 0,093 8,16E-05 0,683 0,61 -0,237 1 1 -0,006 0,52 -0,483 0,529 0,003 0,299 0,977 0,015 0,026 0,013 -0,739 0,078 -0,345 -0,358 0,00012 0,733 0,124 0,11 ** La Correlación es significativa al nivel 0.01 (2-tailed). * La Correlación es significativa al nivel 0.05 (2-tailed). 0,534 -0,629 0,012 0,002 1 -0,471 1 0,03 Fuente: Información procesada por los Autores En la tabla 28, se puede observar que las correlaciones que se presentan entre la variable Temperatura y las variables Viento, O3 y Radiación solar son directas registrándose valores entre 0.61 y 0.753 en valores absolutos; mientras que la relación existente entre la temperatura y NOx es inversa ya que la correlación da negativa con un valor de -0.578. 124 En cuanto a la relación existente entre las UFC/m3 y las variables meteorológicas temperatura y viento, podemos observar que se presenta una correlación baja y directa al registrarse un valor de correlación de Pearson de 0.326 y 0.261 respectivamente; en cuanto a la correlación existente entre UFC con humedad relativa y radiación solar, se presento una correlación baja e indirecta, con valores de -0.34 y -0.06 respectivamente, indicando que si los valores de humedad y radiación aumentan, se afecta la supervivencia y viabilidad de los microorganismos presentes en el aire, especialmente para aquellos no esporulados y no formadores de pigmentos que los protegen de las condiciones adversas del aire. La correlación que se presenta entre las UFC y los contaminantes del aire NOx y PM10 es indirecta donde se registraron datos de correlación con valores de -0.53 y -0.25 respectivamente; mientras que con O3 es directa registrando un valor de 0.13, sin embargo de acuerdo a lo establecido en la literatura la relación existente entre PM10 y UFC/m3 es directa, esto nos indica que es necesario realizar muestreos por periodos de tiempo más prolongados, con lo que se pudiera obtener más datos y hacer que los datos obtenidos por medio de la estadística sean más confiables. 5.6.2 CORRELACIONES PARA CADA UNA DE LAS JORNADAS Para determinar el comportamiento de las variables en el transcurso del día, se realizaron correlaciones entre las variables para cada una de las jornadas. Anexo N • UFC/m3 y PM10: Para la primera jornada se presenta una correlación baja y directa, indicando que para esta hora del día a menor concentración de PM10 menor es la concentración de UFC/m3. En cuanto a las jornadas 2 y 3 se presenta una correlación baja e indirecta, que como se menciono anteriormente es un comportamiento atípico para lo que se deben obtener mayor cantidad de datos con el fin de establecer una correlación más confiable. • UFC/m3 y NOx: Para las tres jornadas, se presenta una relación indirecta, siendo altas para las dos primeras jornadas y baja para la tercera, este comportamiento nos indica que cuando la concentración de NOx aumenta la presencia de microorganismos en el aire disminuye, esto se debe a que los óxidos de nitrógeno en presencia de humedad forman ácidos, que inactivan a los microorganismos presentes en el aire, al afectar su estructura celular. • UFC/m3 y O3: La relación entre estas dos variables es indirecta para la primera y segunda jornada con un bajo grado de correlación con valores de correlación de Pearson de -0.132 y -0.247 respectivamente lo que nos indica que el ozono esta teniendo un efecto biocida el algunos de los 125 microorganismos teniendo en cuenta que la concentración de microorganismos para estas dos jornadas fueron las menores; mientras que para la tercera jornada se presenta una correlación alta y directa con un valor de 0.758, indicándonos que al disminuirse la concentración de O3 los microorganismos pueden permanecer en la atmósfera sin verse afectada su supervivencia. • UFC/m3 y Temperatura: Para las tres jornadas del día durante la fase de muestreo se observa una relación directa, siendo baja para las jornadas 1 y 3 con valores 0.153 y 0.388 respectivamente y para la jornada dos se presenta una correlación alta con un nivel de significancia del 0.05; indicándonos que el incremento en la temperatura favorece la viabilidad de los microorganismos especialmente para J2 donde se presenta la mayor temperatura promedio de las tres jornadas con un valor de 16.84 ºC. • UFC/m3 y Viento: La relación existente entre estas dos variables para las dos primeras jornadas es baja y directa; mientras que para la tercera jornada la correlación que se presenta es baja indirecta presentando un valor de -0.03. • UFC/m3 y Radiación solar: Para las dos primeras jornadas se presenta una correlación baja y directa entre estas dos variables, lo cual nos indica que durante el día a mayor radiación solar mayor es la concentración de microorganismos en el aire; sin embargo esto no es aplicable en todos los casos, ya que algunos microorganismos presentes en el aire no soportan condiciones extremas de radiación solar. Durante la tercera jornada la radiación es baja e indirecta presentando una correlación de Pearson de 0.269. • UFC/m3 y Humedad relativa: Estas variables presentan una relación indirecta para las tres jornadas indicándonos que al disminuir la humedad relativa se aumenta la viabilidad de los microorganismos presentes en el aire, debido a que si el porcentaje de humedad relativa en el aire es muy alto, se puede generar en los microorganismos lisis osmótica, produciendo su muerte y disminuyendo así su concentración. 5.7 MICROORGANISMOS ENCONTRADOS DURANTE LAS TRES FASES DE MUESTREO Los microorganismos que fueron identificados en cada una de las fases de muestreo se encuentran enunciados en el Anexo Ñ. La primera fase de estudio fue desarrollada entre el 07 de Junio al 17 de Julio del 2005 correspondiente a una temporada de transición climática en el año. Durante esta fase de monitoreo se 126 identificaron 50 especies bacterianas y 14 especies de hongos, de las cuales 3 especies son catalogadas como patógenas. Tabla 29. Patógenos identificados durante la primera fase MICROORGANISMOS PATOGENOS J1 1.85 1.85 1.85 Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus sb anaerobius Staphylococcus aureus sb aerobius FRECUENCIA (%) J2 5.5 - J3 - Fuente: Evaluación de la contaminación del aire por microorganismos patógenos en los bioaerosoles, en una zona de alta actividad industrial y flujo vehicular de la localidad de Puente Aranda en Bogotá D.C. Ivonne Rey y Milena Fula. Universidad de La Salle 2005. La segunda fase fue realizada entre el 30 de Octubre y el 25 de Noviembre que corresponde al segundo periodo de transición del año,se encontraron 58 especies de microorganismos, 36 pertenecían a especies bacterianas y 17 a hongos: Tabla 30. Patógenos encontrados en la segunda fase MICROORGANISMOS PATOGENOS Staphylococcus aureus, aerobius. Staphylococcus aureus, anaerobius. Pseudomonas aeruginosa. J1 FRECUENCIA (%) J2 J3 subespecie 26 21 28 subespecie 2 3 5 5 5 5 Fuente: Caracterización cualitativa y cuantitativa de bioaerosoles relacionados con factores meteorológicos y material particulado en Puente Aranda Bogotá D.C. David Olalla y Fabio Pérez. Universidad de la Salle 2006. Esta tercera fase fue realizada durante la primera temporada de lluvias del año. Los muestreos se desarrollaron entre el 15 de Marzo y el 22 de Abril, en donde se encontraron 78 especies bacterianas y 21 especies de hongos, dentro de los cuales se identificaron los siguientes microorganismos patógenos Tabla 31. Patógenos encontrados en la tercera fase MICROORGANISMOS PATOGENOS Corynebacterium diphtheriae Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus sb anaeobius Streptococcus pyogenes Streptococcus pneumoniae Fuente: Información procesada por los Autores 127 J1 2.59 10.38 5.19 1.29 - FRECUENCIA (%) J2 J3 1.29 2.59 1.29 5.19 3.89 3.89 2.59 1.29 3.89 - Como se puede observar en las tablas anteriores en la tercera fase se identificaron 4 especies patógenas diferentes a las encontradas en las dos primeras fases. De las especies patógenas de mayor importancia relacionadas con enfermedades respiratorias se encuentra Haemophyllus influenzae, la cual fue planteada como objetivo durante las tres fases de muestreo; sin embargo no se identifico en ninguna de estas pero si fue identificada Streptococcus pneumoniae. Para la primera fase de muestreo la mayor concentración de UFC/m3 se presento en los puntos INVIMA y parque Salazar Gómez, en la segunda fase los puntos que registraron las mayores concentraciones promedio fueron punto parque Cundinamarca y parque Puente Aranda, mientras que en la tercera fase los mayores valores de UFC/m3 se presentaron en los puntos parque Puente Aranda y parque Salazar Gómez; esto nos indica que el comportamiento de las UFC/m3 en cada uno de los puntos depende de la época y condiciones climáticas que se presentaron durante cada fase de muestreo. Así mismo no se puede establecer con precisión si los microorganismos presentes en el aire, provienen de los puntos ubicados en zonas residenciales o industriales. Gráfica 31. Comportamiento de las UFC/m3 durante las tres fases de muestreo en las tres jornadas 3 COMPORTAMIENTO DE LAS UFC/m EN LAS TRES JORNADAS 700 600 J1 UFC/m 3 500 J2 400 J3 300 200 100 0 FASE I FASE II FASE III FASES Fuente: Información procesada por los Autores Al analizar la concentración de microorganismos presentes en el aire, para la primera fase se presento un promedio de 84 UFC/m3, para la segunda fase se registro un promedio de 138 UFC/m3, mientras que para la tercera fase el promedio en la concentración fue de 535 UFC/m3, lo que nos indica que durante esta fase de muestreo las condiciones meteorológicas fueron más favorables para la supervivencia de microorganismos en el aire. Por otra parte de acuerdo con la gráfica 31, se puede observar que para las fases I y III las mayores concentraciones se presentan en la tercera jornada con valores de 102 y 624 UFC/m3; mientras que para la fase II la mayor concentración se presento durante la segunda jornada registrándose un valor de 171 UFC/m3, las menores concentraciones se presentan para la fase I en J2, en la fase II en J3 y para la fase III durante J1; esto nos indica que no existe un comportamiento uniforme por 128 jornadas entre las tres fases de muestreo, esto posiblemente relacionado con las condiciones meteorológicas y de calidad del aire fueron diferentes. Al realizar un análisis de las concentraciones de UFC registradas por días y jornadas durante las tres fases de muestreo, se pudo establecer que para la tercera fase se presentan las mayores concentraciones, esto puede ser debido a que las condiciones meteorológicas (primera temporada de lluvias) favorecieron el aumento de estas concentraciones, mientras que en la época de transición climática (junio-julio) se presentaron las menores concentraciones posiblemente debido a que las condiciones meteorológicas que se presentaron durante esta época del año como vientos, temperaturas y precipitaciones, no favorecieron la supervivencia de los microorganismos, especialmente aquellos que no cuentan con la capacidad de producir esporas y pigmentos que los protegen de condiciones de estrés. Gráfica 32. Familias más frecuentes encontradas durante las tres fases de muestreo. FAMILIAS DE MAYOR FRECUENCIA PARA LAS TRES FASES 35 FRECUENCIA (% 30 25 B 20 Cc Cory 15 10 5 0 FASE I FASE II FASE III FASES Fuente: Información procesada por los Autores En la gráfica 33 se puede ver que las familias de mayor frecuencia para las tres fases de muestreo fueron Bacillaceae (B), Coccaceae (Cc) y Corynebactereaceae (Cory); en donde para la primera fase la de mayor frecuencia fue la Bacillaceae mientras que para las fases II y III fue la familia Coccaceae. La presencia de la familia Bacillaceae se debe a su capacidad para producir esporas que las hace más resistentes a las condiciones extremas que se pueden presentar en la atmósfera; en cuanto a la familia Coccaceae se debe a sus características en su pared celular que los hace más resistentes a las condiciones adversas. En cuanto a las relaciones existentes entre temperatura y UFC/m3, durante las tres fases de muestreo se puede decir que para las fases II y III fue directa, mientras que para la primera fase esta relación fue indirecta; la relación entre PM10 y UFC/m3 para las fases I y II presento una relación directa y durante la tercera fase la relación fue indirecta, esto nos indica que estas variables no presentan un comportamiento uniforme durante las tres fases de muestreo con respecto a la concentración de UFC. 129 CONCLUSIONES 1. Se estableció un protocolo con el cual se garantizo la aleatoriedad para los puntos de muestreo y medios de cultivo para cada una de las jornadas y días, permitiendo mayor representatividad para esta fase de muestreo. 2. Se logro aislar e identificar 78 especies bacterianas, de las cuales 13 pertenecen a la familia Bacillaceae, 32 de la familia Coccaceae, 17 Corynebactereaceae, 1 Pseudomonaceae, 3 Actynomicetaceae y 12 pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae; de igual forma se logro identificar 21 especies del reino micota, los cuales pueden comportarse como oportunista y resultar patógeno cuando las personas presentan inmunodeficiencias en su sistema. En cuanto al aislamiento e identificación de los microorganismos se puedo establecer que: La familia bacteriana de mayor frecuencia durante la fase de muestreo fue Coccaceae (27%), su alta frecuencia se debe principalmente a que estos microorganismos gram-positivos poseen una pared celular más ancha, rígida y resistente lo que los hace más tolerantes a las condiciones extremas como calor y deshidratación. El reino micota presento la segunda frecuencia de aparición registrando un valor de (24.64%), su supervivencia en el aire puede ser atribuida principalmente por su capacidad de producir mecanismos de recuperación que les permiten reparar los daños causados por los factores meteorológicos. La Bacillaceae presentó una frecuencia de aparición del (17%), la cual esta dada principalmente por la capacidad de producir esporas, de estos microorganismos, lo que contribuye a su resistencia frente a condiciones extremas como el calor, la radiación y las influencias químicas que se puedan presentar en el ambiente. En el punto parque Puente Aranda se presento la mayor concentración promedio de microorganismos durante las tres jornadas donde se registró un valor promedio de 825 UFC/m3, lo cual se puede atribuir principalmente a la gran afluencia poblacional y vehicular que se presenta, además en los alrededores se cuenta con gran cantidad de vegetación que es un hábitat natural de muchos microorganismos y contribuye de manera importante a 130 incrementar el número de éstos suspendidos en el aire, por la acción del viento y de la evapotranspiración. El parque Salazar Gómez fue el segundo en presentar altas concentraciones con un promedio 568 UFC/m3 lo cual se debe principalmente a que presenta condiciones similares a las del parque Puente Aranda. De las tres jornadas de muestreo la que mayor concentración presento fue J3 con un valor de 624 UFC/m3, esto se atribuye a que a estas horas del día hay mayor afluencia de personas y alto flujo vehicular, por otra parte las condiciones meteorológicas que se presentaron pudieron favorecer la supervivencia y permanencia de hongos y bacterias en el aire. En el punto blanco o de referencia ubicado en Guatavita se logro identificar especies comunes de bacterias y hongos a las encontradas en la localidad de Puente Aranda, identificándose Escherichia coli como única bacteria oportunista y especies de hongos como Aspergillus, Candida y Penicillium, considerados como patógenos oportunistas de gran importancia clínica. No se logro identificar ninguna bacteria patógena En el punto blanco no se logro identificar ninguna especie perteneciente a la familia Bacillaceae en ninguna de las jornadas. 3. Se pudo determinar la existencia de patógenos en el aire como Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Corynebacterium diphtheriae, Streptococcus pyogenes y Klebsiella pneumoniae; de igual forma se logro identificar la presencia de microorganismos oportunistas como Corynebacterium xerosis, Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Klebsiella ozonae, Proteus mirabilis y Serratia marcescens que pueden ser inhaladas y afectar principalmente a niños y adultos mayores que presenten inmunodeficiencias en su sistema. • Entre las especies de hongos que se lograron identificar se encuentran Aspergillus flavus, A. fumigatus, A. níger y Penicillium, los cuales son generadoras de micotoxinas. Estos microorganismos en altas concentraciones y con altos periodos de exposición pueden llegar a generar enfermedades en los seres humanos como Aspergillosis broncopulmonar, Ontomicosis bronquiectasias, neoplasias bronquiales especialmente en personas inmunodeficientes por inhalación de las esporas además de asma y alergias. 131 Estas especies fueron más frecuentes en los siguientes puntos: • La especie Staphylococcus aureus se presento con mayor frecuencia en el punto parque Puente Aranda, registrándose un valor de 14.29%. • Las especies Streptococcus pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa se encontraron principalmente en el punto colegio la Merced con una frecuencia de 29.33% y 28.57% respectivamente. • La especie Aspergillus flavus, se presenta con mayor frecuencia en el punto Salazar Gómez con una frecuencia de 38.10%, el Aspergillus fumigatus y Penicillium se presentan con mayor frecuencia en el punto Colegio la Merced registrando valores de 28.57% y 42.86%; mientras que para la especie Aspergillus Níger se presento con mayor frecuencia en el punto INVIMA. • En los filtros de PM2.5 que fueron sembrados en Agar Sangre y Saboreaud, se pudo identificar Staphylococcus pasteuri, Dermacoccus nishinomiyaensis, Micrococcus lylae y 3 especies de hongos Penicillium spp, Mucor spp y Rhizopus spp; esta baja presencia de microorganismos en los filtros esta relacionada con las variaciones diurnas de los factores meteorológicos, que pudieron afectar la supervivencia de los microorganismos en los filtros; por otra parte el proceso de desecación al que fueron sometidos los filtros para la obtención de las concentraciones de material particulado, pudo influir en que se presentara plasmólisis en la pared celular de algunos microorganismos. 4. Se estableció que la relación existente entre UFC/m3 y NOx es indirecta con una significancia del 0.01; mientras que para O3 la relación fue directa. • Se pudo determinar que las UFC/m3 para esta fase de muestreo presenta una relación directa con las variables temperatura, viento y O3, mientras que para humedad relativa, radiación solar, NOx y PM10, se presenta una relación indirecta. 5. Después de la investigación se establecieron diferencias en los microorganismos encontrados en las tres fases de muestreo, donde en la primera fueron identificados 50 especies bacterianas y 14 de hongos, en la segunda 36 bacterianas y 17 correspondientes a hongos; mientras que para la tercera fase de muestreo se encontraron 78 especies bacterianas y 21 hongos. • Para la tercera fase de muestreo se identificaron 4 especies patógenas diferentes a las encontradas en las dos primeras fases. 132 • La especie Haemophyllus influenzae no fue identificada en ninguna de las tres fases. • Durante la primera fase de muestreo la mayor concentración de UFC/m3 se presento en los puntos INVIMA y parque Salazar Gómez, para la segunda fase los puntos que registraron las mayores concentraciones fueron punto parque Cundinamarca y parque Puente Aranda, mientras que en la tercera fase los mayores valores de UFC/m3 se presentaron en los puntos parque Puente Aranda y parque Salazar Gómez. • En cuanto a las concentraciones de UFC en cada una de las fases de muestreo, se pudo determinar que para la tercera fase se presento la mayor concentración promedio con un valor de 535UFC/m3. • Para las fases I y III las mayores concentraciones se presentan en la tercera jornada con valores de 102 y 624 UFC/m3; mientras que para la fase II la mayor concentración se presento durante la segunda jornada registrándose un valor de 171 UFC/m3. • Las familias de mayor frecuencia para las tres fases de muestreo fueron Bacillaceae, Coccaceae y Corynebactereaceae ; en donde para la primera fase la de mayor frecuencia fue la Bacillaceae mientras que para las fases II y III fue la familia Coccaceae. • Las especies patógenas Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus sb anaerobius y Staphylococcus aureus sb aerobius fueron comunes para las tres fases de muestreo. • Las relaciones existentes entre temperatura y UFC/m3 durante las tres fases de muestreo fueron directas durante las fases I y III, mientras que para la primera fase esta relación fue indirecta. • El comportamiento en la concentración de microorganismos expresada en UFC/m3 fue variable para las tres fases de muestreo debido a que fueron realizadas en diferentes periodos climáticos del año. 133 RECOMENDACIONES • Es necesario realizar muestreos por periodos de tiempo más prolongados, que abarquen todas las temporadas climáticas del año y así poder contar con una mayor cantidad de datos que permitan establecer de una manera más confiable el comportamiento de los microorganismos y poder establecer un modelo de predicción en cuanto al comportamiento de los bioaerosoles en el aire. • Para establecer una relación más directa entre PM2.5 , PM10 y UFC en cada uno de los puntos, es necesario contar con un muestreador portátil de material particulado volumétrico, que permita obtener concentraciones horarias de PM2.5, PM10 y de esta forma lograr una relación más directa entre estas variables. • Para determinar que microorganismos se encuentran en el material particulado PM2.5, es necesario que estas mediciones no sean superiores a una hora, con el fin de que la supervivencia de los microorganismos no sea afectada por las variaciones climáticas; de igual forma los filtros no deben ser llevados a desecación y se deben sembrar directamente en los Agares en el momento en que termine la medición. • Los filtros obtenidos del medidor de PM2.5 que se vallan a sembrar en los Agares deben pesarse y hacerles corrección por humedad, para de esta manera estimar la concentración de este parámetro sin que se vea afectada la supervivencia de los microorganismos • Es indispensable que los medidores portátiles de humedad relativa que se encuentran en el laboratorio de Ingeniería Ambiental y Sanitaria se encuentren calibrados con el fin de poder ser utilizados en el momento del muestreo y de esta forma establecer una relación más confiable entre UFC y humedad relativa. • Para determinar la existencia de Haemophyllus influenzae en el aire es necesario adicionar a los medios de cultivo un suplemento como Isovitalex o Vitox que permita proporcionarles los nutrientes necesarios. • Para los puntos INVIMA y Colegio la Merced, se recomienda realizar los muestreos a una altura de 1.5 a 2 m, ya que esta es la altura en la que las personas realmente pueden inhalar las partículas suspendidas en el aire. 134 • Realizar estudios similares en otras localidades de la ciudad como Engativá, Kennedy y Fontibón con el fin de establecer la concentración de microorganismos y determinar la relación de estos con índices de morbilidad en los habitantes de estas localidades. • Se deben escoger un mayor número de sitios de muestreo que se encuentren distribuidos entre zonas residenciales e industriales de forma tal que en el momento de realizar el muestreo aleatorio los datos obtenidos sean estadísticamente más representativos. • Hacer estudios en industrias que se encuentren dentro de la localidad con el fin de determinar si estas son fuentes generadoras de microorganismos. • Se debe realizar en el punto de referencia muestreos con el medidor de gérmenes aéreos MAS 100 y mediciones de PM10 y PM2.5 por periodos de tiempo iguales a los que se realicen en la localidad y de esta manera determinar con mayor exactitud el comportamiento de estas variables. 135 BIBLIOGRAFIA ♦ ARCINIEGAS, Angela y RODRÍGUEZ, Carolina. 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PROTOCOLOS 142 Fecha: PROTOCOLO 2. MUESTREO PARA MICROORGANISMOS EN EL AIRE 1. ANTES DEL MUESTREO • Seleccione y prepare los medios de cultivo de acuerdo a los microorganismos que desee identificar*. • Guarde las cajas de petri con medios de cultivo en bolsas herméticas por cada medio para evitar contaminación. • Retire las cajas con medio de cultivo de la nevera el día del muestreo y codifíquelas. • Transporte las cajas de petri necesarias para la toma de la muestra en un recipiente hermético, asegurándose de llevar 1 caja de más por cada medio y jornada. • El día anterior cargue la batería del equipo para asegurar el funcionamiento de este durante el muestreo. • Utilice los elementos de protección personal para la manipulación de los medios. • Tome la muestra según protocolo anexo de operación del equipo. • Registre la información de campo ver anexo A de formato de campo. * Ver protocolo de preparación de medios de cultivo 143 Elaborado: Andrés Jiménez Andrea Cruz PROTOCOLO 2. MUESTREO PARA MICROORGANISMOS EN EL AIRE 2. MUESTREO • Coloque el equipo sobre una superficie plana y estable en el punto de muestreo escogido. • Retire y limpie el cabezal y el guardapolvo con un desinfectante, para eliminar la presencia de agentes contaminantes en el equipo. • Encienda y programe el equipo según el protocolo de operación. • Coloque la caja de petri cerrada sobre el soporte de la caja que posee el equipo y retire la tapa de la caja de petri. • Coloque el cabezal y retire el guardapolvo al equipo. • Inicie el funcionamiento del equipo con la opción Start. • Coloque el guardapolvo en el momento que finaliza la toma de muestras. • Retire el cabezal del equipo, tape la caja de petri y llévela al recipiente hermético. • Lleve las muestras a incubación en el menor tiempo posible. • Para la siguiente toma de muestras siga todo el procedimiento anterior. 144 Pagina 2 Fecha: PROTOCOLO 3. AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS EN EL AIRE 1. PREPARACION DE MEDIOS • Establezca el numero de cajas de petri que serán usadas por cada medio de cultivo de acuerdo al numero de días que se vallan a muestrear y preparando un 50% de mas para resiembras y las que se llevan de mas en caso de alguna eventualidad. • Determine el volumen de medio de cultivo a preparar, teniendo en cuenta que por cada medio se sirven 25ml de este en cada caja de petri. ⎛ 25ml ⎞ ⎟⎟ = 1700ml = 1.7lt ⎝ 1caja ⎠ Ej: 68cajas × ⎜⎜ • Calcule la cantidad de Agar según especificaciones del fabricante, para medios a base de sangre calcule el volumen de sangre el cual debe encontrarse entre el 5 y 7% del volumen del medio de cultivo. Ej: Para 850 ml de Agar base Sangre. 850ml × 0.05 = 42.5mlSangre • Utilice los elementos de protección personal. • Disuelva completamente el Agar en agua destilada y póngalo a calentar hasta el punto de ebullición agitándolo constantemente. • Tape el recipiente que contiene el Agar y llévelo a la autoclave a una presión de 15 psi, a una temperatura de 121°C, durante 15 minutos. • Para medios a base sangre, agregue la sangre al Agar después de la esterilización, de forma lenta por las paredes del recipiente y agitando levemente de manera continua. 145 Elaborado: Andrés Jiménez Andrea Cruz PROTOCOLO 3. AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS EN EL AIRE • Limpie, desinfecte y flamee con los mecheros los mesones en donde se van a servir los medios de cultivo. • Coloque las cajas de petri alrededor de los mecheros, sirva el medio de cultivo y déjelo enfriar. • Etiquete y empaque los medios de cultivo en bolsas herméticas y llévelas a refrigerar a una temperatura de 2 a 6°C hasta el día del muestreo (Las cajas de petri deben colocarse con la tapa hacia abajo). Pagina 2 2. INCUBACION • Verifique que la incubadora se encuentre a una temperatura de 37°C. • Lleve a incubación una caja por medio de cultivo a una temperatura de 37°C por 24 horas; de igual forma deje otra caja por medio de cultivo a temperatura ambiente durante 24 horas para control de calidad. • Observe si las cajas con medios de cultivo colocadas a temperatura ambiente y en incubación durante 24 horas presentan o no crecimiento de UFC; si se presenta crecimiento repita la preparación de los medios de cultivo si no realice pruebas de viabilidad. • Después de realizar el muestreo lleve las cajas de petri a la incubadora colocándolas de manera invertida durante un periodo de 24 a 48 horas a una temperatura de 37 °C. 146 PROTOCOLO 3. AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS EN EL AIRE Pagina 3 3. ESTUDIO MACROSCOPICO Y MICROOCOPICO • 24 horas antes del conteo de UFC, encienda la cabina de flujo laminar para eliminar la presencia de microorganismos que puedan contaminar las muestras. • Utilice los elementos de protección personal, saque las muestras de la incubadora y diríjase a la cabina de flujo laminar. • Prenda dos mecheros de alcohol dentro de la cabina para evitar contaminación y manipule las cajas de petri alrededor de estos. • Realice el conteo de UFC en el contador de colonias y regístrelas en el formato de laboratorio. anexo E. • Describa las colonias según tamaño, color, forma, textura y visibilidad de hemólisis. 4. AISLAMIENTO • Marque la parte inferior de la caja con un medio estéril dividiéndolo en cuarteles, anote la codificación de la muestra y el número de la colonia que va a ser sembrada en el formato de laboratorio. • Con un asa estéril tome la superficie de la colonia, deslice el asa haciendo una estría sobre la superficie del medio estéril (Agar Sangre o Agar Chocolate). • En el momento de realiciar un nuevo aislamiento, esterilice nuevamente el asa. • Lleve a incubar las cajas de petri a 37°C, asegúrese que las cajas queden boca abajo, durante un periodo de 24 a 48 horas. • Realice la tinción de gram de las colonias aisladas, según técnicas microbiológicas estipuladas. 147 PROTOCOLO 3. AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS EN EL AIRE 5. PRUEBAS BIOQUIMICAS • • • • • • Determine el número de pruebas bioquímicas de acuerdo al resultado de las tinciones de gram. Esterilice los tubos de ensayo en la autoclave antes de ser utilizados. Colóquese los elementos de protección personal. Determine el volumen de cada una de las pruebas teniendo en cuenta que para los azucares se agregan 4 ml por tubo y para las demás 3 ml. Prepare las pruebas bioquímicas según las indicaciones del fabricante y sirva las pruebas en los tubos de ensayo con una pipeta; tape, marque y acomode los tubos en una canastilla y esterilice en autoclave. Para la preparación de los azucares determine el volumen que se desea preparar, tenga en cuenta las indicaciones del fabricante para el caldo nutritivo; debe agregar el azúcar y el indicador al 1%. Ej: Para 300 ml de caldo nutritivo = 100% agregue el 1% de azúcar (3 gr) y el 1% de indicador (3 ml) • • • • • Al salir los tubos de la autoclave coloque Fenilalanina, SIM y azucares en posición vertical y los demás con una inclinación de 15° hasta su solidificación. Coloque los tubos en refrigeración hasta su utilización. Siembre con un asa esterilizada los microorganismos aislados en las pruebas bioquímicas. Con el asa siembre por estría en la superficie inclinada y en la columna vertical de las pruebas bioquímicas. Deje en incubación las pruebas bioquímicas durante un tiempo de 24 horas a 37°C. Mediante las tablas de identificación de microorganismos, consulte los resultados de las pruebas y haga su registro en el formato de trabajo en el laboratorio, anexo E. Fuente: Información procesada por los Autores 148 Pagina 4 PROTOCOLO 4. OPERACIÓN DEL COLECTOR MICROBIOLOGICO DE GERMENES AEREOS MAS-100 LABORATORIO FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA DESCRIPCION GENERAL El MAS-100 es un instrumento muy eficaz basado en el principio del muestreador de aire de Adernsen que aspira el aire a través de una placa perforada. La corriente de aire resultante, y las partículas que contiene, se dirigen hacia la superficie de agar de la caja de petri. Después del muestreo se procede al cultivo de la muestra y al recuento de las UFC, cuyo resultado se presenta en forma de Número total de gérmenes (NTG). El MAS-100 utiliza un aspirador de alta potencia y controla el volumen de forma continua. Este sistema mide la corriente de aire entrante y regula el aire aspirado hasta obtener un caudal de aire constante de 100 L/min., si la corriente de aire no fuese constante por motivos externos o se viese reducida o interrumpida a causa de unas cajas de petri demasiado llenas, la cantidad de aire se regularía automáticamente. FUNCIONAMIENTO 1. Conexión del MAS-100 Pulsando la tecla yes se pone en funcionamiento el equipo y en la pantalla aparecerá la capacidad restante de la batería en litros y ultimo volumen de utilización usado. 2. Ajustar las cajas de petri • Antes de utilizar el equipo por primera vez, ajuste los laterales de sujeción de la caja de petri. • Retire la tapa del orificio y coloque una caja de petri sobre el soporte de las cajas. • Ajuste los laterales azules con la llave fija numero 3 de forma que la capsula de petri quede firmemente sujeta y no se pueda desplazar. 149 PROTOCOLO 4. OPERACIÓN DEL COLECTOR MICROBIOLOGICO DE GERMENES AEREOS MAS-100 Pagina 2 3. Realización de toma de muestras • • • • • • • • Coloque el MAS-100 sobre una superficie estable. Abra la tapa del orificio (con el guardapolvo acoplado) girándolo hacia la derecha, desinféctelo con amonio cuaternario o glutaraldehido al 2%. Coloque una caja de petri cerrada sobre la sujeción de la caja. Retire la tapa de la caja de petri. Cierre la tapa del orificio del equipo. Programe el MAS-100 según las instrucciones. Retire el guardapolvo y comience la toma de muestras en el menú start pulsando yes. Abra el cabezal de acumulación, extraiga la caja de petri y coloque su correspondiente tapa. 4. Apagar el MAS-100 • Después de un ciclo de toma de muestras el equipo indicara en la pantalla el último volumen recogido. Apretar “yes” o “no” para activar el cierre automático en 5 minutos. 5. Interrupción de una medición • Si durante la toma de muestras pulsa la tecla “no” aparecerá el mensaje “failet repeat test” en pantalla, lo que significa que la prueba no es valida y repita la prueba 6. Caudal de aire insuficiente • Si el censor incorporado no alcanza los 100l/min de la corriente de aire, aparecerá el mensaje “Air flor blocked” en la pantalla y la luz roja se iluminara, la toma de muestra será interrumpida. Retire la caja de petri e inicie un nuevo análisis. Pulse “yes” o “no” para anular el mensaje de error. 150 PROTOCOLO 4. OPERACIÓN DEL COLECTOR MICROBIOLOGICO DE GERMENES AEREOS MAS-100 Pagina 3 PARTES DEL EQUIPO • • • • • • Sistema completo MAS-100 con cabezal, guardapolvo y paquete de baterías. Adaptador de red. Llave fija de 3 mm para el centrado de cajas de petri. Tabla de corrección estadística según Feller, anexo F. Tabla diagrama del programa de Software. Manual del usuario. ACCESORIOS PIEZAS DE REPUESTO • • • • • • • • • • Unidad de calibración DA-100. Cable Pc/paquete de Software Trípode 100-325cm Adaptador rápido. Adaptador de tubo flexible 151 Tapa perforada. Cubierta contra polvo Alimentador de corriente Paquete de baterías NiMH Maletín resistente PROTOCOLO 4. OPERACIÓN DEL COLECTOR MICROBIOLOGICO DE GERMENES AEREOS MAS-100 Pagina 4 CUIDADOS Y MANTENIMIENTO • • • • • • El MAS-100 debe calibrarse periódicamente. El cabezal junto con el guardapolvo puede tratarse en un autoclave durante 15 min a 121°C y 15 psi. Limpiar el MAS-100 con un desinfectante apropiado. Entre la toma de muestras puede limpiarse la tapa con un desinfectante. Debe verificarse que los orificios de la tapa no se encuentren tapados. Humedad relativa máxima 80% para temperaturas hasta 31°C, decreciendo linealmente hasta 50% de humedad relativa a 40°C. CALIBRACION El MAS-100 se calibra en fabrica a 100l/min., solo se permite el cambio de piezas mecánicas a personas autorizadas, se aprieta “yes” y “no” simultáneamente durante 3 seg., sin encender previamente el sistema, usted entra en el “calibration mode”. El valor K3 aparecerá en la pantalla y el ventilador empieza a funcionar de forma audible. Para recalibracion, es decir, para ajustar el valor K3 y K5 se requiere la unidad de calibración DA100. después de ajustar el recordatorio entre 1 y 12 meses, se regresara al modo de medición pulsando yes Fuente: Información procesada por los Autores 152 ANEXO A. TABLA DE MUESTREOS ALEATORIOS Y DATOS DE CAMPO 153 JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA MIERCOLES 15 DE MARZO 2006 CONDICION METEOROLÓGICA HORA JORNADA PUNTO Temperatura INICIAL FINAL INICIAL 6:05 am 6:35 am 7:10 am FINAL 7:40 am INICIAL 8:10 am FINAL INICIAL 8:35 am J1 9:10 am 9:35 am 10:05 am INICIAL 10:30 am FINAL 11:30 a.m. INICIAL 11:55 a.m. FINAL INICIAL 12:25 m P2 13,5ºC P5 16,8ºC P3 19ºC P4 22ºC P1 20ºC P4 17 ºC FINAL 12:45 General → Nublado → Se presentaron emisiones en 3 industrias al rededor → vientos moderados → Nublado → Se presentaron emisiones en 3 industrias al rededor → vientos moderados → Parcialmente nublado → Se presento bajo flujo vehicular → Presencia de Sol → Vientos moderados → Nublado → Se presentaron lluvias la noche anterior → vientos moderados ALETORIEDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Ch Mc Sb Sn Mc Sn Sb Ch Sb Sn Ch Mc Sn Ch Mc Sb Mc Ch Sn Sb Sb Sn Mc Ch Sn Ch Mc Sb J2 → Nublado → vientos moderados P1 17,5 ºC → Nublado → vientos Moderados 154 p.m. INICIAL 1:00 p.m. FINAL 1:25 p.m. 02:00 pm. INICIAL FINAL 2:25 p.m. INICIAL 5:30 p.m. FINAL 6:00 p.m. 06:35 p.m. INICIAL FINAL 7:00 pm. INICIAL 9:20 p.m. FINAL 9:45p.m. 19 ºC P3 16.5 ºC → Nublado → vientos Moderados Mc Ch Mc Sb Sb Mc Ch Sn Ch Sb Mc Sn → Nublado → vientos Moderados INICIAL 2:45 p.m. FINAL 3:10 p.m. INICIAL 7:25 pm. FINAL 7:50 pm. 08:25 p.m. INICIAL FINAL 8:45 p.m. P2 J3 P5 19 ºC P5 19 ºC → Nublado fuerte → vientos fuertes → Lluvia Ch Sn Mc Sb P4 17ºC → Nublado fuerte → vientos fuertes → Lluvia Sn Sb Mc Ch P1 17,5ºC → Nublado fuerte → vientos fuertes →Lluvia Mc Sb Sn Ch P3 16,5ºC → Nublado fuerte → vientos fuertes →Lluvia Sn Mc Sb Ch P2 16ºC → Nublado fuerte → vientos fuertes →Lluvia Sb Mc Ch Sn → Nublado → vientos fuertes JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA VIERNES 17 DE MARZO 2006 HORA JORNADA PUNTO CONDICION METEOROLÓGICA 155 ALETORIEDAD DE LOS INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL 6:10 a.m. 6:35 a.m. 7:05 a.m. 7:25 a.m. 7:50 a.m. 8:15 a.m. 8:35 a.m. 9:00 a.m. 9:35 a.m. 9:55 a.m. 12:00 m 12:20 p.m. 12:40 p.m. 1:00 p.m. 1:35 p.m. 2:00 p.m. 02:25pm 3:00 p.m. 4:05 p.m. 4:25 p.m. 5:50 p.m. 6:10 p.m. 06:35pm 6:55 p.m. 7:15 p.m. 7:35 p.m. 08:25pm J1 J2 J3 Temperatura General P1 14ºC P4 15,5ºC → Parcialmente Nublado → Algunos momentos de sol → Nublado → vientos leves →bajo flujo vehicular →algunas emisiones industriales P5 17ºC P2 19,6 ºC P3 20ºC P1 20,5ºC P3 21ºC P4 20,5ºC P2 19ºC P5 18ºC P5 17ºC P3 16,3ºC P1 16,5ºC P2 15,8ºC → Parcialmente Nublado → viento leves → Parcialmente Nublado → viento leves → Parcialmente Nublado → viento leves → Parcialmente Nublado → llovizna → viento leves → Parcialmente Nublado → Parcialmente Nublado → viento leves → Parcialmente Nublado → llovizna → viento leves → Nublado → lluvia → Nublado → llovizna → Nublado → lluvia fuerte → Nublado → llovizna → Nublado → lluvia fuerte 156 MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Ch Sb Sn Mc Mc Ch Sn Sb Mc Sb Ch Sn Mc Sb Ch Sn Ch Sb Sn Mc Sb Ch Mc Sn Ch Mc Sb Sn Mc Sn Sb Ch Mc Ch Sb Sn Mc Ch Sn Sb Sb Ch Sn Mc Sb Sn Mc Ch Sn Mc Sb Mc Mc Sb Ch Sn FINAL 8:50 p.m. INICIAL 9:15 p.m. FINAL 9:35 p.m. P4 15ºC → Nublado → lluvia media Ch Mc Sn Sb JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA DOMINGO 19 DE MARZO 2006 CONDICION METEOROLÓGICA HORA JORNADA PUNTO Temperatura INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL 8:25 am 8:50 am 9:00 am 9:25 am 9:45 a.m. 10:04 am 10:35 am 10:55 am 11:20 am 11:45 am 11:50a.m. 12:15 p.m. 12:35 m 1:00 p.m. 01:30p.m. 01:50 p.m. 02:15 pm. 02:45p.m. 02:50p.m. J1 J2 P3 17,3ºC P1 18,5ºC P4 17ºC P2 18ºC P5 18,4ºC P4 19ºC P3 19,5ºC P1 21ºC P2 20.8ºC P5 20ºC General → Nublado →No hay presencia de viento → Presencia de Sol → Vientos moderados → Parcialmente nublado → vientos moderados → Presencia de Sol → Vientos moderados → Parcialmente nublado → vientos moderados → Nublado →No hay presencia de vientos → Nublado → vientos moderados → Presencia de Sol → vientos moderados →Soleado → No hay presencia de vientos → Nublado → vientos Moderados 157 ALETORIEDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Sb Sn Ch Mc Sn Ch Mc Sb Mc Ch Sn Sb Mc Ch Sn Sb Sb Sn Ch Mc Mc Sb Sn Ch Ch Mc Sn Sb Mc Sb Ch Sn Sb Mc Ch Sn Sb Mc Ch Sn FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL 3:10 p.m. 05:00p.m. 5:25 p.m. 5:30 p.m. 5:50 pm. 6:00 pm. 6:30 pm. 6:55 p.m. 7:20 p.m. 7:30 p.m. 8:00p.m. J3 P1 19,5ºC P4 18,7ºC P5 18,3ºC P2 16,2ºC P3 15,7ºC → Nublado → No hay presencia de vientos → Nublado → vientos fuertes → Despejado →No hay presencia de vientos → Nublado → vientos moderados → Se encuentra brisando → Vientos fuertes →Lluvia fuerte Mc Sn Ch Sb Sb Mc Ch Sn Sn Ch Mc Sb Mc Ch Sb Sn Ch Sn Sb Mc JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA MARTES 21 DE MARZO 2006 CONDICION METEOROLÓGICA HORA JORNADA PUNTO Temperatura 8:45 am 9:10 am 9:30 am 9:55 am 10:35 a.m. INICIAL FINAL 10:55 am INICIAL 11:15 am 11:45am FINAL INICIAL 12:00 m FINAL 12:25 pm INICIAL FINAL INICIAL FINAL J1 P2 19ºC P4 20ºC P1 20,1ºC P3 19,5ºC P5 21ºC General → Soleado → Despejado → Despejado con presencia de Sol → vientos moderados →Nublado → Vientos moderados → Nublado → Vientos de moderados a fuertes → Despejado con presencia de Sol → No hay presencia de vientos 158 ALETORIEDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Mc Sn Sb Ch Mc Sb Sn Ch Mc Sn Ch Sb Ch Sb Sn Mc Ch Sn Mc Sb INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL 12:30 p.m. 12:45 p.m. 13:20 1:40 p.m. 2:05p.m. 2:30 p.m. 3:00 pm. 3:30p.m. 4:00p.m. 4:25p.m. 5:20p.m. 5:45 p.m. 6:00 p.m. 6:25 pm. 6:50 pm. 7:15 pm. 7:30 p.m. 7:50 p.m. 8:20 p.m. 8:50p.m. P3 J2 J3 19ºC P5 19,6ºC P4 20ºC P2 19,5ºC P1 18,7ºC P2 17,2ºC P3 16,6ºC P1 17,5ºC P5 16,5ºC P4 16ºC → Nublado → vientos moderados → Parcialmente nublado → Moderados vientos → Nublado →vientos fuertes → Nublado → vientos moderados →Nublado → Vientos moderados → Nublado → vientos moderados → Nublado → poco viento → Parcialmente nublado → No hay presencia de vientos → Parcialmente nublado → vientos Moderados → Vientos moderados →Parcialmente nublado 159 Ch Sn Sb Mc Mc Sb Sn Ch Sn Sb Ch Mc Mc Sb Ch Sn Sn Ch Sb Mc Sn Ch Mc Sb Sb Ch Sn Mc Mc Sb Sn Ch Sn Sb Mc Ch Ch Sb Mc Sn JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA JUEVES 23 DE MARZO 2006 CONDICION METEOROLÓGICA HORA JORNADA PUNTO Temperatura INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL 7:20 am 7:40 am 8:00 am 8:20 a.m. 8:55 a.m. 9:15 a.m. 9:45 a.m. 10:10am 10:25 m 10:50 pm 11:00a.m. 11:25 a.m. FINAL INICIAL 12:00 m FINAL 12:25 p.m. INICIAL 12:55p.m. FINAL 1:20 p.m. INICIAL 2:30 pm. FINAL 2:50p.m. INICIAL 3:25p.m. FINAL 4:00p.m. INICIAL 5:22p.m. J1 J2 J3 P4 18ºC P1 22ºC P3 22ºC P5 24,3ºC P2 21,5ºC P4 22ºC P1 19ºC P2 20ºC P5 22ºC P3 19ºC P2 19ºC General → Nublado → vientos moderados →Nublado → No hay vientos → Al finalizar el muestreo hay presencia de sol → Despejado con presencia de Sol → No hay presencia de vientos → Parcialmente nublado → No hay presencia de vientos → Despejado con presencia de Sol →No hay presencia de vientos → Parcialmente nublado → No hay presencia de vientos → Al finalizar muestreo presencia de Sol →Nublado → No hay vientos → Nublado → Vientos moderados → Presencia de llovizna → Parcialmente nublado → vientos moderados→ Radiación Difusa → Parcialmente nublado → vientos fuertes → Presencia de llovizna 160 ALETORIEDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Mc Sn Ch Sb Sb M Ch Sn Sb Sn Ch Mc Sn Ch Mc Sb Mc Sb Ch Sn Ch Sn Sb Mc Ch Sn Mc Sb Sb Ch Sn Mc Mc Sb Ch Sn Sb Ch Sn Mc Mc Sb Sn Ch FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL → Parcialmente nublado → No hay presencia de vientos 5:40 p.m. 6:20 p.m. 6:45 pm. 7:15 pm. 7:45 pm. 8:10 p.m. 8:55 p.m. 9:10 p.m. 9:35p.m. P5 17ºC P1 16,5ºC P3 16,4ºC P4 15ºC →Parcialmente nublado → vientos leves → Nublado → vientos leves → Despejado → vientos leves →hay presencia de un fuerte olor a grasas →Parcialmente nublado → vientos leves Ch Sb Mc Sn Sn Sb Mc Ch Ch Sb Sn Mc Sb Ch Sn Mc JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA LUNES 17 DE ABRIL 2006 CONDICION METEOROLÓGICA HORA JORNADA PUNTO Temperatura INICIAL 7:50 am 8:10 am FINAL INICIAL 8:35 am FINAL 9:00 a.m. INICIAL 9:30 a.m. FINAL 9:50 a.m. 10:05 a.m. INICIAL 10:30am FINAL INICIAL 11:00 m FINAL 11:30 pm INICIAL 12:30 m. J1 P1 13ºC P3 14ºC P4 13ºC P2 15ºC General → Nublado → vientos leves → lluvia → Nublado →Vientos leves → Brisa →Nublado → vientos leves → brisa ALETORIEDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Ch Sb Sn Mc Mc Sb Ch Sn Sn Mc Ch Sb Sn Mc Ch Sb Sb Ch Sn Mc Mc Sn Ch Sb → Nublado → Vientos leves J2 P5 16,5ºC P1 15ºC → Parcialmente nublado → vientos leves 161 FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL 12:50 p.m. 01:00p.m. 1:25 p.m. 1:30 p.m. 2:00pm 2:20 pm. 2:50p.m. 3:05p.m. 3:30 p.m. 3:35 p.m. 3:55 p.m. 04:15p.m. 4:35 pm. 5:25 pm. 5:45 pm. 6:00 p.m. 6:20 p.m. 6:40 p.m. 7:10p.m. J3 P5 17,5ºC P4 18ºC P2 17,8ºC P3 17ºC P1 17,5ºC P2 18ºC P4 15ºC P3 16ºC P5 16,5ºC → Parcialmente nublado → vientos moderados→ Radiación Difusa → Nublado → Vientos moderados → Presencia de llovizna →Nublado → No hay vientos → Parcialmente nublado → No hay presencia de vientos → Al finalizar muestreo presencia de Sol → Parcialmente nublado → vientos fuertes → Presencia de llovizna → Presencia de sol → vientos fuertes → despejado → Presencia de sol → Vientos fuertes →Despejado → vientos leves → Nublado → vientos leves →Despejado → vientos leves Mc Ch Sb Sn Mc Ch Sn Sb Ch Mc Sn Sb Sn Sb Mc Ch Sb Ch Mc Sn Ch Sb Mc Sn Sb Sn Mc Ch Ch Mc Sb Sn Ch Sb Sn Mc JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA SABADO 22 DE ABRIL 2006 CONDICION METEOROLÓGICA HORA JORNADA PUNTO Temperatura INICIAL 9:33 am J1 P4 18,5ºC General →Nublado → vientos leves → brisa 162 ALETORIEDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Sn Mc Ch Sb FINAL 9:55 a.m. 10:10 a.m. INICIAL 10:30 a.m. FINAL 11:00 a.m. INICIAL 11:20 a.m. FINAL 11:45 a.m. INICIAL 12:05m FINAL 12:20 pm INICIAL 12:45 p.m. FINAL INICIAL 1:00pm. FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL P1 Ch Sb Sn Mc Mc Sb Ch Sn Sn Mc Ch Sb Sb Ch Sn Mc Ch Mc Sn Sb Sn Sb Mc Ch Mc Sn Ch Sb Mc Ch Sn Sb Mc Ch Sb Sn Ch Sn Mc Sb Sn Sb Ch Mc → Nublado → vientos leves → lluvia P3 17ºC → Nublado →Vientos leves → Brisa P2 19ºC → Nublado → Vientos leves 1:20 p.m. 1:45p.m. 2:05 p.m. 2:50p.m. 3:10pm 3:45 pm. 4:05p.m. 4:50p.m. 5:10 p.m. 5:35 p.m. 6:00p.m. 6:25p.m. 19ºC J2 J3 P5 19,3ºC P2 19,5ºC P3 20ºC P1 22ºC P4 20,5ºC P5 21ºC P3 19ºC P2 18,7ºC → Parcialmente nublado → leves → Parcialmente nublado → presencia de vientos → Al muestreo presencia de Sol → Parcialmente nublado → fuertes → Presencia de llovizna → Parcialmente nublado → moderados→ Radiación Difusa vientos No hay finalizar vientos vientos →Nublado → No hay vientos → Nublado → Vientos moderados → Presencia de llovizna →Nublado → vientos leves → bajo flujo vehicular 163 FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL INICIAL FINAL →Despejado → vientos muy leves → bajo flujo vehicular 6:50 pm. 7:15 pm. 7:35 pm. 8:00 p.m. 8:20 p.m. 8:45 p.m. 9:05p.m. P1 18ºC P5 17ºC P4 17,5ºC → Despejado → vientos leves → Parcialmente nublado → vientos leves → polvo abundante por barrido de calle → Nublado → Vientos fuertes → bajo flujo vehicular Sb Sn Ch Mc Sn Ch Sb Mc Mc Ch Sn Sb JORNADAS DE MUESTREO EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA DOMINGO 30 DE ABRIL 2006 HORA JORNADA DIA BLANCO PUNTO CONDICION METEOROLÓGICA Temperatura 8:50 a.m. INICIAL J1 14ºC PUNTO 09:10 BLANCO a.m. FINAL 03:30 pm. INICIAL J2 19ºC PUNTO 03:50 BLANCO p.m. FINAL 06:30 p.m. INICIAL J3 14ºC PUNTO 06:50 BLANCO p.m. FINAL Fuente: Información procesada por los Autores General ALETORIEDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO 1 2 3 4 Sb Ch Sn Mc Mc Sb Ch Sn Ch Mc Sn Sb → Nublado →Vientos leves → llovizna →Nublado → No hay vientos → brisa leve →Nublado → No hay vientos 164 ANEXO I. FRECUENCIAS DE FAMILIAS POR PUNTO Y JORNADA 165 PPA CM PC IN PSG GT FAMILIA J1 J2 J3 TOTAL JI (%) J2 (%) J3 (%) Actinomicetaceae 2 1 1 4 4,88 2,22 2,33 Bacillaceae 9 8 8 25 21,95 17,78 18,60 Coccaceae 11 12 12 35 26,83 26,67 27,91 Corynebacteriaaceae 6 6 7 19 14,63 13,33 16,28 Enterobactereaceae 6 6 5 17 14,63 13,33 11,63 Hongos 6 11 10 27 14,63 24,44 23,26 Pseudomonaceae 1 1 0 2 2,44 2,22 0,00 Actinomicetaceae 1 1 2 4 2,50 2,22 4,88 Bacillaceae 7 6 8 21 17,50 13,33 19,51 Coccaceae 13 14 10 37 32,50 31,11 24,39 Corynebacteriaaceae 4 7 5 16 10,00 15,56 12,20 Enterobactereaceae 6 6 5 17 15,00 13,33 12,20 Hongos 8 10 10 28 20,00 22,22 24,39 Pseudomonaceae 1 1 1 3 2,50 2,22 2,44 Actinomicetaceae 2 0 2 4 4,55 0,00 5,13 Bacillaceae 7 8 6 21 15,91 17,39 15,38 Coccaceae 11 13 10 34 25,00 28,26 25,64 Corynebacteriaaceae 5 10 5 20 11,36 21,74 12,82 Enterobactereaceae 4 5 4 13 9,09 10,87 10,26 Hongos 14 10 12 36 31,82 21,74 30,77 Pseudomonaceae 1 0 0 1 2,27 0,00 0,00 Actinomicetaceae 1 1 1 3 2,08 2,08 2,63 Bacillaceae 7 6 5 18 14,58 12,50 13,16 Coccaceae 14 12 10 36 29,17 25,00 26,32 Corynebacteriaaceae 4 7 7 18 8,33 14,58 18,42 Enterobactereaceae 7 7 7 21 14,58 14,58 18,42 Hongos 14 14 8 36 29,17 29,17 21,05 Pseudomonaceae 1 1 0 2 2,08 2,08 0,00 Actinomicetaceae 2 2 2 6 5,00 4,44 5,00 Bacillaceae 7 6 8 21 17,50 13,33 20,00 Coccaceae 12 13 8 33 30,00 28,89 20,00 Corynebacteriaaceae 5 7 5 17 12,50 15,56 12,50 Enterobactereaceae 4 5 4 13 10,00 11,11 10,00 Hongos 9 11 12 32 22,50 24,44 30,00 Pseudomonaceae 1 1 1 3 2,50 2,22 2,50 Actinomicetaceae 0 0 0 0 0,00 0,00 0,00 Bacillaceae 0 0 0 0 0,00 0,00 0,00 Coccaceae 2 3 5 10 28,57 33,33 38,46 Corynebacteriaaceae 0 0 1 1 0,00 0,00 7,69 Enterobactereaceae 0 2 1 3 0,00 22,22 7,69 Hongos 5 4 6 15 71,43 44,44 46,15 Pseudomonaceae 0 0 0 0 0,00 0,00 0,00 Fuente: Información procesada por los Autores 166 ANEXO K. MICROORGANISMOS DE MAYOR FRECUENCIA POR PUNTO Y JORNADA 167 MICROORGANISMOS DE MAYOR FRECUENCIA POR PUNTO Y JORNADA FRECUENCIA PUNTO MICROORGANISMOS PPA CM PC IN PSG J1(%) J2(%) J3(%) Absidia sp. 57,14 28,57 71,43 Actinomices pyogenes 28,57 57,14 42,86 Bacillus cereus 42,86 57,14 57,14 Bacillus polymyxa 57,14 42,86 42,86 Micrococcus luteus 57,14 85,71 85,71 Mucor sp. 57,14 42,86 28,57 Staphylococcus xylosus 85,71 14,29 85,71 Bacillus cereus 57,14 71,43 14,29 Bacillus polymyxa 42,86 57,14 42,86 Klebsiella oxitoca 28,57 28,57 71,43 Micrococcus luteus 85,71 85,71 100 Mucor sp. 57,14 42,86 57,14 Penicillium sp. 42,86 57,14 28,57 Staphylococcus xylosus 71,43 85,71 85,71 Adsidia sp. 28,57 57,14 42,86 Bacillus cereus 28,57 57,14 57,14 Bacillus subtilis 28,57 28,57 42,86 Escherichia coli 28,57 28,57 28,57 Kitococcus sedentarius 42,86 28,57 14,29 Micrococcus luteus 57,14 71,43 85,71 Staphylococcus xylosus 57,14 85,71 85,71 Absidia sp. 42,86 57,14 71,43 Aspergillus niger 42,86 14,29 71,43 Bacillus cereus 42,86 71,43 71,43 Bacillus subtilis 57,14 42,86 57,14 Klebsiella oxitoca 42,86 57,14 42,86 Micrococcus luteus 71,43 71,43 71,43 Staphylococcus xylosus 57,14 57,14 28,57 Aspergillus flavus 28,57 28,57 57,14 Bacillus cereus 42,86 28,57 71,43 Bacillus subtilis 42,86 28,57 42,86 Corynebacterium jekeium 28,57 42,86 28,57 100 85,71 71,43 Mucor sp. 57,14 28,57 57,14 Staphylococcus xylosus 42,86 42,86 57,14 100 100 0 0 100 100 Micrococcus lylae 100 0 100 Mucor sp. 100 100 100 Penicillium sp. 100 100 100 Rhizopus sp. 100 100 100 0 100 100 Micrococcus luteus Dermacoccus nishinomiyaensis Micrococcus luteus GT Staphylococcus xylosus Fuente: Información procesada por los Autores 168 ANEXO M. ROSAS DE LOS VIENTOS 169 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 15 DE Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 15 DE MARZO J1 Fuente: Información procesada por los Autores 170 MARZO- TODO EL DIA ROSA DE LOS VIENTOS DIA 15 DE MARZO J2 Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 15 DE MARZO J3 Fuente: Información procesada por los Autores 171 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE MARZO TODO EL DIA Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE MARZO J1 Fuente: Información procesada por los Autores 172 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE MARZO J2 Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE MARZO J3 Fuente: Información procesada por los Autores 173 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 19 DE MARZO TODO EL DIA Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 19 DE MARZO J1 Fuente: Información procesada por los Autores 174 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 19 DE MARZO J2 Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 19 DE MARZO J3 Fuente: Información procesada por los Autores 175 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 21 DE MARZO TODO EL DIA Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 21 DE MARZO J1 Fuente: Información procesada por los Autores 176 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 21 DE MARZO J2 Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 21 DE MARZO J3 Fuente: Información procesada por los Autores 177 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 23 DE MARZO TODO EL DIA Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 23 DE MARZO J1 Fuente: Información procesada por los Autores 178 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 23 DE MARZO J2 Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 23 DE MARZO J3 Fuente: Información procesada por los Autores 179 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE ABRIL TODO EL DIA Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE ABRIL J1 Fuente: Información procesada por los Autores 180 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE ABRIL J2 Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 17 DE ABRIL J3 Fuente: Información procesada por los Autores 181 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 22 DE ABRIL TODO EL DIA Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 22 DE ABRIL J1 Fuente: Información procesada por los Autores 182 ROSA DE LOS VIENTOS DIA 22 DE ABRIL J2 Fuente: Información procesada por los Autores ROSA DE LOS VIENTOS DIA 22 DE ABRIL J3 Fuente: Información procesada por los Autores 183 ROSA DE LOS VIENTOS DURANTE TODOS LOS DIAS DE MUESTREO Fuente: Información procesada por los Autores FRECUENCIA DE DISTRIBUCION DE CLASE DE VIENTOS TODOS LOS DIAS DE MUESTREO Fuente: Información procesada por los Autores 184 ANEXO O. MICROORGANISMOS ENCONTRADOS DURANTE LAS TRES FASES DE ESTUDIO 185 MICROORGANISMOS ENCONTRADOS DURANTE LAS TRES FASES DE ESTUDIO FAS FAS FAS MICROORGANISMOS E1 E2 E3 x Actinomices bovis x Actynimices pyogenes x Actynomyces viscosus x Acitenobacter calcoaceticus x Alcaligenes feacalis x Arthobacter agilis x Aeromona hydrophila x Aeromona salmonicica x Aureobacterium liquefaciens Bacillos mycoides Bacillus cereus Bacillus circulans Bacillus coagulans x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x Bacillus fharigiensis Bacillus lentus Bacillus licheniformes Bacillus macerans Bacillus megaterium Bacillus mycoides Bacillus polymyxa Bacillus pumilis Bacillus sphaericus Bacillus subtilis Bacillus thrigiensis x x x x x x x x x x x Citrobacter amalonaticus Citrobacter diversus Corynebacterium afermentans x Corynebacterium amycolatum x Corynebacterium flavescens Corynebacterium afermentans sb afermentans Corynebacterium arealyticum Corynebacterium bovis Corynebacterium coagulans x x x x x x x x Corynebacterium cutcheri Corynebacterium diphteriae x x x x Corynebacterium flavescens Corynebacterium glucuronolyticum Corynebacterium jeikeium Corynebacterium kutscheri Corynebacterium macghileyi 186 x x x x x x x x x x x Corynebacterium matruchitii Corynebacterium minutissimum x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x Corynebacterium polymyxa Corynebacterium urealyticum Corynebacterium xerosis Dermacoccus nishinomiyaensis Enterococcus faecalis Escherichia coli Flavobacterium mudovorum Flavobacterium odoratum Fusobacterium mortiferum Klebsiella odonifera Klebsiella oxytoca Klebsiella ozaenae Klebsiella pneumoniae Klebsiella rhinoescleromatis Kocurea rosea Kocurea kristinae Kytococcus sedentareus Micrococcus luteus Micrococcus lylae Micrococcus kristinae Micrococcus sedentareus Microccus rosea Moraxella lacunata Morganella morganii Pantoea aglomerans Pantoea gergoviae Providencia alcalifaciens Pseudomona aeruginosa x x x x x x x x Serratia marcescens Serratia odorifera Serratia rubidaea Staphylococccus caseolyticus Staphylococccus warneri x Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus sub especie aerobius Staphylococcus pasteuri. Staphylococcus aureus sb.e anaerobios haemolyticos x x x x capitis Staphylococcus hominis x Staphylococcus lentus coagulans Staphylococcus epidermidis muscae x x Staphylococcus eyuorum pasteuri gallinarium Staphylococcus pneumoniae 187 x x x x x x x x x x x x Proteus mirabilis x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x Staphylococcus sacarolyticos Staphylococcus saprophyticos Staphylococcus simulans x Staphylococcus xylosus x Stomacoccus mucilaginosus Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Microorganismos en común en las tres fases Microorganismos en común entre las fases 1 y 2 Microorganismos en común entre las fases 1 y 3 Microorganismos en común entre las fases 2 y 3 Microorganismos encontrados únicamente en la tercera fase Fuente: Información procesada por los Autores 188 x x x x x x x HONGOS ENCONTRADOS DURANTE LAS TRES FASES DE ESTUDIO FASE FASE FASE 1 2 3 HONGOS x x Absidia sp x Acremonium sp x Ahernaria sp. x Aspergillus sp. x x Aspegillus flavus x x Aspergillus fumigatus x x Aspergillus niger x Aspergillus sp. x Aureobasidium spp. x Botrytis spp. x Candida albicans x Candida parasilopsis x x Cephalosporium sp. x x Cladosporium sp. x Curvularia x x x Fusarium sp. x x Geotrichun sp. x x Levaduras x x Mucor sp. x Mycrosporum sp. x Mycrosporum cannis x Mycrosporum gypseum Paecylomyces sp. x x x x Penicillium sp x Rhizomucor sp. x x x Rhizopus sp. x Sepedonium spp. x Scedosporium spp. x x Scopulariopsis sp. x x Syncephalastrum sp. x x x Trichoderma sp x Trichophyton spp. x Trichophyton shoeleni Microorganismos en común en las tres fases Microorganismos en común entre las fases 1 y 2 Microorganismos en común entre las fases 1 y 3 Microorganismos en común entre las fases 2 y 3 Microorganismos encontrados únicamente en la tercera fase Fuente: Información procesada por los Autores 189 190 191 ANEXO C. FORMATO DE LABORATORIO 192 UNIVERSIDAD DE LA SALLE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA FECHA DE MUESTREO: Día______ Mes______ Año______ CODIFICACION DE LA MUESTRA: A______ J______ P______ RECUENTO UFC: A. Sangre______ A. Chocolate_______ A. McConkey____ A. Saboreaud_______ COLONIA Nº Fuente: GRAM + - Información CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS MICROSCOPICAS procesada 193 por los Autores ANEXO D. CORRECCION DE UFC SEGÚN FELLER 194 CORRECCION UFC SEGÚN TABLA ESTADISTICA DE FELLER DIA JORNADA 4 PUNTO 5 1 2 1 1 4 2 3 1 2 5 2 3 47 330 33 159 5 1 48 255 45 367 60 398 2 3 541 382 1430 2 C. A. C. A. FELLER CHOCOLATE FELLER McCONKEY 828 364 958 5 43 49 52 0 1102 315 618 3 50 34 35 2 695 184 246 1 34 21 22 0 202 90 102 4 51 38 40 0 405 229 339 2 2 C. FELLER 5 0 3 2 1 0 4 48 992 65 2028 66 151 42 345 72 191 44 791 0 0 3 0 2 0 0 3 38 182 218 311 40 241 314 599 42 228 322 296 44 337 652 537 0 2 0 5 0 2 0 5 4 5 1 45 123 58 249 97 368 48 147 63 389 111 1005 35 322 67 379 215 299 37 652 73 1170 308 549 3 0 1 0 6 3 0 1 0 6 2 3 105 318 120 178 122 632 142 235 233 301 135 232 246 557 164 344 0 4 2 0 0 4 2 0 4 90 334 102 718 60 53 65 57 4 3 4 3 5 1 85 279 34 276 95 477 35 467 67 252 14 391 73 397 14 496 4 0 0 5 4 0 0 5 2 3 51 90 74 105 54 102 85 122 91 72 47 81 103 79 50 90 2 4 0 8 2 4 0 8 4 5 42 169 30 130 44 219 31 157 42 172 30 78 44 224 31 87 0 4 0 4 0 4 0 4 1 2 41 173 56 250 43 226 60 391 14 279 50 181 14 477 53 241 0 2 5 4 0 2 5 4 3 4 34 120 18 51 35 142 18 54 74 226 22 55 82 332 23 59 1 3 0 1 1 3 0 1 5 1 54 240 126 215 58 366 151 308 31 257 157 234 32 411 199 351 3 1 0 2 3 1 0 2 2 3 129 110 157 186 156 128 180 250 83 113 212 226 93 133 315 151 5 4 1 5 4 1 4 127 112 153 131 132 243 160 373 2 3 2 3 5 1 45 188 365 132 93 254 969 160 187 185 390 75 252 248 1456 83 3 4 1 0 3 4 1 0 2 3 110 89 187 90 128 101 252 102 170 47 186 196 221 50 250 269 0 1 3 0 1 3 4 5 206 193 350 44 289 263 828 47 290 143 300 35 315 177 353 37 3 1 0 3 1 0 1 2 230 67 68 157 342 73 74 199 298 51 87 256 545 54 98 408 0 0 0 0 3 4 210 81 133 192 297 90 161 261 230 106 99 167 342 123 114 216 0 0 1 0 0 1 3 5 1 330 81 380 152 350 108 265 190 828 126 433 257 3 0 2 0 3 0 2 0 3 2 3 171 89 265 45 695 90 1189 191 233 101 240 53 331 130 366 57 701 157 3 1 4 0 3 1 4 0 3 1 6 3 4 297 A. SANGRE 358 41 375 2 433 48 4 97 11 115 135 0 0 5 147 183 118 140 0 0 195 1 7 2 3 210 297 125 150 3 3 2 289 511 153 193 2 2 3 179 237 135 164 4 4 4 112 131 112 131 3 3 5 169 219 130 157 4 4 1 213 309 230 342 1 1 2 85 95 163 209 2 2 3 180 239 115 135 2 2 4 173 226 52 56 1 1 5 167 216 153 193 5 5 1 345 791 145 180 0 0 2 315 618 145 180 2 2 3 91 103 183 244 6 6 4 142 175 73 80 9 9 5 188 254 185 248 4 4 PB 27 28 262 425 0 0 2 PB 6 6 62 67 0 0 3 PB 3 3 17 17 0 0 1 8 1 Fuente: Información procesada por los Autores 196 ANEXO N. CORRELACIONES POR JORNADAS 197 Correlaciones entre UFC/m3 con variables meteorológicas y de calidad del aire en la jornada 1 t ºC Pearson Correlation temperatura ufc viento NOxppb O3ppb RS HR 1 Sig. (2-tailed) pm10 ufc viento Pearson Correlation 0,044 Sig. (2-tailed) 0,925 O3ppb R_solar Humedad_rel 1 Pearson Correlation 0,153 0,019 Sig. (2-tailed) 0,742 0,968 Pearson Correlation 0,661 -0,28 0,483 Sig. (2-tailed) 0,106 0,543 0,273 Pearson Correlation NOxppb * pm10 1 1 -0,303 0,512 -0,794 -0,66 Sig. (2-tailed) 0,509 0,24 0,033 0,107 Pearson Correlation 0,786 0,433 -0,132 0,13 0,227 Sig. (2-tailed) 0,036 0,332 0,777 0,782 0,624 Pearson Correlation 0,823 -0,028 0,508 0,869 -0,64 0,362 Sig. (2-tailed) 0,023 0,953 0,245 0,011 0,122 0,425 -0,6 -0,33 -0,58 -0,756 0,356 -0,36 -0,77 0,155 0,47 0,172 0,434 0,422 0,043 Pearson Correlation Sig. (2-tailed) 0,049 1 1 1 1 Correlation is significant at the 0.05 level (2-tailed). Fuente: Información procesada por los Autores Correlaciones entre UFC/m3 con variables meteorológicas y de calidad del aire en la jornada 2 t ºC pm10 ufc temperatura Pearson Correlation Sig. (2-tailed) 1 pm10 Pearson Correlation Sig. (2-tailed) -0,545 0,206 1 ufc Pearson Correlation Sig. (2-tailed) viento Pearson Correlation Sig. (2-tailed) 0,78 0,039 -0,018 0,969 -0,396 0,379 -0,294 0,522 Noxppb Pearson Correlation Sig. (2-tailed) O3ppb Pearson Correlation Sig. (2-tailed) -0,83 0,021 -0,241 0,602 R_solar Pearson Correlation Sig. (2-tailed) 0,621 0,136 Humedad_rel Pearson Correlation Sig. (2-tailed) -0,533 0,218 * ** viento 1 0,783 -0,661 0,037 0,106 0,811 -0,247 -0,321 0,483 -0,62 0,594 0,32 0,484 0,138 0,207 0,655 -0,293 -0,357 0,524 0,432 0,42 0,349 Correlation is significant at the 0.05 level (2-tailed). Correlation is significant at the 0.01 level (2-tailed). 198 O3ppb RS HR 1 0,348 0,444 0,027 -0,496 0,257 NOxppb 1 0,53 1 0,221 -0,82 0,024 0,275 0,55 -0,41 0,363 -0,62 0,134 1 -0,36 0,431 1 Fuente: Información procesada por los Autores Correlaciones entre UFC/m3 con variables meteorológicas y de calidad del aire en la jornada 3 t ºC pm10 temperatura Pearson Correlation Sig. (2-tailed) 1 pm10 Pearson Correlation Sig. (2-tailed) ufc Pearson Correlation Sig. (2-tailed) -0,923 0,003 0,388 0,389 viento NOxppb O3ppb RS HR 1 -0,245 0,597 1 -0,862 -0,03 1 0,013 0,95 Pearson Correlation 0,684 -0,503 -0,658 NOxppb Sig. (2-tailed) 0,09 0,25 0,108 Pearson Correlation -0,432 0,758 0,392 O3ppb Sig. (2-tailed) 0,333 0,048 0,385 Pearson Correlation 0,5 -0,712 -0,269 0,899 R_solar Sig. (2-tailed) 0,253 0,072 0,559 0,006 Pearson Correlation -0,807 0,634 -0,196 -0,52 Humedad_rel Sig. (2-tailed) 0,028 0,126 0,673 0,232 ** Correlation is significant at the 0.01 level (2-tailed). * Correlation is significant at the 0.05 level (2-tailed). viento Pearson Correlation Sig. (2-tailed) ufc 0,74 0,057 -0,769 0,043 0,493 0,261 Fuente: Información procesada por los Autores 199 1 -0,84 0,017 -0,31 0,493 0,813 0,026 1 0,138 0,768 -0,46 0,301 1 -0,21 0,648 1 ANEXO H. BACTERIAS Y HONGOS IDENTIFICADOS DURANTE LA FASE DE MUESTREO 200 MICROORGANISMOS ENCONTRADOS DURANTE MUESTREO Actinomices bovis Klebsiella oxitoca Actynimices pyogenes Klebsiella ozaenae Actynomyces viscosus Klebsiella pneumoniae Arthobacter agilis Klebsiella rhinoescleromatis Aureobacterium liquefaciens Kocurea rosea Bacillos mycoides Kocurea kristinae Bacillus cereus Kytococcus sedentareus Bacillus circulans Micrococcus luteus Bacillus coagulans Micrococcus lylae Bacillus licheniformes Proteus mirabilis Bacillus macerans Providencia alcalifaciens Bacillus megaterium Pseudomona aeruginosa Bacillus mycoides Serratia marcescens Bacillus polymyxa Serratia odorifera Bacillus pumilis Serratia rubidaea Bacillus sphaericus Staphylococccus caseolyticus Bacillus subtilis Staphylococccus warneri Bacillus thrigiensis Staphylococcus aureus Corynebacterium afermentans Staphylococcus aureus sub especie aureus Corynebacterium amycolatum Staphylococcus pasteuri. Corynebacterium afermentans sb afermentans Staphylococcus aureus sb.e anaerobios Corynebacterium arealyticum Staphylococcus capitis Corynebacterium bovis Staphylococcus caseolyticos Corynebacterium coagulans Staphylococcus coagulans Corynebacterium diphteriae Staphylococcus epidermidis Corynebacterium flavescens Staphylococcus gallinarium Corynebacterium glucuronolyticum Staphylococcus haemolyticos Corynebacterium jeikeium Staphylococcus hominis Corynebacterium kutcheri Staphylococcus lentus Corynebacterium macghileyi Staphylococcus muscae Corynebacterium matruchitii Staphylococcus pasteuri Corynebacterium minutissimum Staphylococcus pneumoniae Corynebacterium polymyxa Staphylococcus sacarolyticos Corynebacterium urealyticum Staphylococcus saprophyticos Corynebacterium xerosis Staphylococcus simulans Dermacoccus nishinomiyaensis Staphylococcus xylosus Enterococcus faecalis Stomacoccus mucilaginosus Escherichia coli Streptococcus pneumoniae Klebsiella odonifera Streptococcus pyogenes Fuente: Fuente: Yudi Castellanos, Paula Cedeño y Autores 201 HONGOS ENCONTRADOS DURANTE MUESTREO Absidia sp Ahernaria sp. Aspegillus flavus Aspergillus fumigatus Aspergillus niger Aspergillus sp. Candida albicans Candida parasilopsis Cephalosporium sp. Cladosporium sp. Curvularia Fusarium sp. Geotrichun sp. Mucor sp. Paecylomyces sp. Penicillium sp Rhizomucor sp. Rhizopus sp. Scopulariopsis sp. Syncephalastrum sp. Trichoderma sp Fuente: Fuente: Yudi Castellanos, Paula Cedeño y Autores 202 ANEXO F. MODELO ESTADISTICO DE HUMEDAD 203 MODEL:MOD_2 Model Description: Variable: tempera_v Regressors: temperatura_u 95,00 percent confidence intervals will be generated. Split group number: 1 Series length: 90 Number of cases skipped at end because of missing values: 15 Number of cases containing missing values: 6 Kalman filtering will be used for estimation. Termination criteria: Parameter epsilon: ,001 Maximum Marquardt constant: 1,00E+09 SSQ Percentage: ,001 Maximum number of iterations: 10 Initial values: AR1 ,00000 temperat ,59522 CONSTANT 4,87401 Marquardt constant = ,001 Adjusted sum of squares = 760,46466 Iteration History: Iteration Adj. Sum of Squares 1 2 3 4 101,20424 100,66275 100,57852 100,57328 Marquardt Constant ,00100000 ,00010000 ,00001000 ,00000100 Conclusion of estimation phase. Estimation terminated at iteration number 5 because: Sum of squares decreased by less than ,001 percent. FINAL PARAMETERS: Number of residuals 84 Standard error 1,084577 204 Log likelihood -126,7602 AIC 259,52041 SBC 266,81286 Analysis of Variance: DF Adj. Sum of Squares Residuals 81 Residual Variance 100,57288 1,1763073 Variables in the Model: B SEB T-RATIO APPROX. PROB. AR1 ,9507445 ,0383275 24,805807 ,00000000 temperat ,5076149 ,0942684 5,384781 ,00000069 CONSTANT 6,6042689 2,2627661 2,918671 ,00454940 Covariance Matrix: AR1 AR1 ,00146900 Correlation Matrix: AR1 AR1 1,0000000 Regressor Covariance Matrix: temperat CONSTANT temperat ,0088865 -,1094755 CONSTANT -,1094755 5,1201106 Regressor Correlation Matrix: temperat CONSTANT temperat 1,0000000 -,5132287 CONSTANT -,5132287 1,0000000 The following new variables are being created: 205 Name Label FIT_1 Fit for tempera_v from AREG, MOD_2 ERR_1 Error for tempera_v from AREG, MOD_2 LCL_1 95% LCL for tempera_v from AREG, MOD_2 UCL_1 95% UCL for tempera_v from AREG, MOD_2 SEP_1 SE of fit for tempera_v from AREG, MOD_2 Abbreviated Extended Name Name temperat temperatura_u MODEL:MOD_3 Model Description: Variable: humedad_u Regressors: humedad_v 95,00 percent confidence intervals will be generated. Split group number: 1 Series length: 105 Number of cases containing missing values: 49 Kalman filtering will be used for estimation. Termination criteria: Parameter epsilon:,001 Maximum Marquardt constant: 1,00E+09 SSQ Percentage: ,001 Maximum number of iterations: 10 Initial values: AR1 ,00000 humedad_ ,43425 CONSTANT 41,47284 Marquardt constant = ,001 Adjusted sum of squares = 11124,53 Iteration History: 206 Iteration Adj. Sum of Squares 1 2 10480,686 10478,564 Marquardt Constant ,00100000 ,00010000 Conclusion of estimation phase. Estimation terminated at iteration number 3 because: Sum of squares decreased by less than ,001 percent. FINAL PARAMETERS: Number of residuals 56 Standard error 14,031946 Log likelihood -225,98484 AIC 457,96967 SBC 464,04573 Analysis of Variance: DF Adj. Sum of Squares Residuals 53 10478,555 Residual Variance 196,89550 Variables in the Model: B SEB T-RATIO APPROX. PROB. AR1 ,238379 ,135233 1,7627371 ,08371023 humedad_ ,449436 ,186123 2,4147279 ,01923069 CONSTANT 40,316064 15,036118 2,6812814 ,00975503 Covariance Matrix: AR1 AR1 ,01828783 Correlation Matrix: AR1 AR1 1,0000000 Regressor Covariance Matrix: 207 humedad_ humedad_ CONSTANT CONSTANT ,03464 -2,76231 -2,76231 226,08485 Regressor Correlation Matrix: humedad_ CONSTANT humedad_ 1,0000000 -,9870462 CONSTANT -,9870462 1,0000000 The following new variables are being created: Name Label FIT_2 Fit for humedad_u from AREG, MOD_3 ERR_2 Error for humedad_u from AREG, MOD_3 LCL_2 95% LCL for humedad_u from AREG, MOD_3 UCL_2 95% UCL for humedad_u from AREG, MOD_3 SEP_2 SE of fit for humedad_u from AREG, MOD_3 Abbreviated Extended Name Name humedad_ humedad_v MODEL: MOD_4. Independent:humedad_u Dependent Mth Rsq d.f. F Sigf b0 b1 b2 b3 temperat QUA ,660 59 57,17 ,000 10,2748 ,2822 -,0030 temperat CUB ,660 58 37,55 ,000 9,3133 ,3619 -,0046 8,9E-06 temperat S ,040 60 2,48 ,121 2,5470 4,0506 208 Abbreviated Extended Name Name temperat temperatura_u temperatura_u Observed Quadratic Cubic S 20,00 18,00 16,00 14,00 12,00 10,00 8,00 0,00 20,00 40,00 60,00 humedad_u 209 80,00 100,00 ANEXO G. PROMEDIOS DIARIOS DE FACTORES METEOROLOGICOS Y CONTAMINANTES ATMOSFERICOS 210 PROMEEDIOS DIARIOS DE FACTORES METEOROLOGICOS DIA Temperatura Viento (ºC) (m/s) Radiación Solar (W/m3) Humedad Relativa Merck (%) 1 14,11 2,84 136,67 76,39 2 14,53 2,04 141,72 81,73 3 15,76 2,63 195,72 75,10 4 15,83 3,95 236,01 73,92 5 15,59 2,29 202,2 71,66 6 15,72 4,28 305,37 79,32 7 16,16 3,53 267,01 71,25 Fuente: Información procesada por los Autores PROMEDIOS DIARIOS DE CONTAMINANTES ATMOSFERICOS DIA PM10 (µg/m3) NOx(ppb) O3(ppb) 1 136,8 40,8 15 2 117,87 62,87 12,07 3 69,67 0 15,6 4 111,4 5,2 14,2 5 144,47 42,2 15,53 6 74,93 18,8 11,8 7 77,53 6,93 13,2 Fuente: Información procesada por los Autores 211 ANEXO J. FRECUENCIA DE ESPECIES POR PUNTO Y JORNADA 212 PUENTE ARANDA JORNADA 1 Staphylococcus xylosus Staphylococcus sim ulans Staphylococcus pneum oniae Staphylococcus pasteuri Staphylococcus aureus sb .e aureus Serratia rub idaea Sarratia odorifera Pseudom ona aeruginosa Proteus m irab ilis Micrococcus leteus Kytococcus sedentarius Kocuria k ristinae Kocurea rosea M IC R O O R G A N IS M O S Kleb siella pneum oniae Kleb siella oxitoca Escherichia coli Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium m acgnileyi Coryneb acterium k utschen Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium flavescens Coryneb acterium am ycolatum Bacillus thurigiensis Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus m acerans Bacillus licheniform es Bacillus cereus Arthob acter agilis Actynom ices pyogenes Actinom ices b oris 0 20 40 60 80 100 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores PUENTE ARANDA JORNADA 2 Stom acoccus m ucilaginosus Staphylococcus xylosus Staphylococcus warneri Staphylococcus sim ulans Staphylococcus pasteuri Staphylococcus aureus sb .e aureus Serratia rub idaea Pseudom ona auriginosa Micrococcus lylae Micrococcus luteus Kytococcus sedentareus Kocuria k ristinae M IC R O O R G A N IS M O S Kleb siella pneum oniae Kleb siella oz aenae Kleb siella oxytoca Escherichia coli Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium xerosis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium k utschen Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium am ycolatum Coryneb acterium flavescens Bacillus thurigiensis Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus m acerans Bacillus cereus Aureob acterium liquefaciens Arthrob acter agilis Actynom ices pyogenes 0 10 20 30 40 50 60 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores 213 70 80 90 PUENTE ARANDA JORNADA 3 Stom atococcus m ucilaginosus Staphylococcus xilosus Staphylococcus pasteuri Staphylococcus coagulans Staphylococcus aureus Staphylococccus caseolyticus Serratia rub idaea Serratia odorifera Proteus m irab ilis Micrococcus lylae Micrococcus luteus Kytococcus sedentarius M IC R O O R G A N IS M O S Kocuria k ristinae Kleb siella oxytoca Escherichia coli Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium xerosis Coryneb acterium m inutissim um Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium k utcheri Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium am ycolatum Corineb acterium flavescens Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus m acerans Bacillus circulans Bacillus cereus Arthrob acter agilis Actynom yces pyogenes 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores COLEGIO LA MERCED JORNADA 1 Staphylococcus xylosus Staphylococcus pasteuri Staphylococcus lentus Staphylococcus gallinarium Staphylococcus epiderm idis Staphylococcus aureus sb .e aureus Staphylococcus aureus sb .e anaerob ios Serratia rub idaea Pseudom ona aeruginosa Proteus m irab ilis Micrococcus lylae Micrococcus leteus M IC R O O R G A N IS M O S Kytococcus sedentarius Kocurea rosea Kleb siella rinosclerom atis Kleb siella oz aenae k leb siella oxytoca Escherichia coli Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium am ycolatum Corineb acterium flavescens Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus m acerans Bacillus cereus Arthrob acter agilis Actynom ices pyogenes 0 10 20 30 40 50 60 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores 214 70 80 90 COLEGIO LA MERCED JORNADA 2 Streptococcus pneum oniae Stom atococcus m ucilaginosus Staphylococcus xylosus Staphylococcus warneri Staphylococcus pasteuri Staphylococcus m uscae Staphylococcus epiderm idis Staphylococcus aureus Serratia odorifera Serratia rub idaea Sseudom ona aeuriginosa Proteus m irab ilis M IC R O O R G A N IS M O S Micrococcus lylae Micrococcus luteus Kytococcus sedentarius Kocuria k ristinae Kleb siella oz aenae Kleb siella oxytoca Escherichia coli. Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium m acghileyi Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium glucuronolyticum Coryneb acterium diphteriae Coryneb acterium b oris Coryneb acterium am ycolatum Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus cereus Arthrob acter agilis Actynim ices b oris 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores COLEGIO LA M ERCED JORNADA 3 Streptoc oc c us pyogenes Staphyl oc oc c us x yl os us Staphyl oc oc c us pas teuri Staphyl oc oc c us mus c aes Staphyl oc oc c us c oagul ans Serrati a odori fera Ps eudomona aerugi nos a Provi denc i a al c al i gac i ens Proteus mi rab i l i s Mi c rococ c us l uteus Koc urea k ri s ti nae M IR O O R G A N IS M O S Koc urea ros ea Kl eb s i el l a ox ytoc a Es c heri c hi a c ol i . Dermac occ us ni s hi nomi yaens i s Coryneb ac teri um x eros i s Coryneb ac teri um mi nuti s s i mum Coryneb ac teri um k utsc heri Coryneb ac teri um j ei k ei um Coryneb ac teri um fl aves c ens Bac i l l us pol ymyx a Bac i l l us myc oi des Bac i l l us megateri um Bac i l l us mac erans Bac i l l us l i cheni formi s Bac i l l us c oagul ans Bac i l l us c i rc ul ans Bac i l l us c ereus Arthrob ac ter agi l i s Ac tynomi ces b ori s Ac tyni mi c es pyogenes 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada 215 por los Autores PARQUE CUNDINAMARCA JORNADA 1 Staphylococcus xylosus Staphylococcus sim ulans Staphylococcus aureus sb .e aureus Staphylococcus coagulans Pseudom ona aeruginosa Proteus m irab ilis Micrococcus lylae Micrococcus luteus k ytococcus sedentarius Kocurea rosea Kocurea k ristinae M IC R O O R G A N IS M O S k leb siella oxitoca k leb siella odonifera Escherichia coli. Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium xerosis Coryneb acterium k utscheri Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium flavescens Coryneb acterium am ycolatum Bacillus sub tilis Bacillus sphaericus Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus cereus Arthrob acter agilis Actynom ices pyogenes Actynom ices b oris 0 10 20 30 40 50 60 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores PARQUE CUNDINAMARCA JORNADA 2 Stomatococ cus muci l agi nosus Staphyl oc oc c us x yl osus Staphyl ococ cus warneri Staphyl ococc us epi dermi di s Staphyl oc oc c us c oagulans Staphyl ococ cus pasteuri . Serrati a odori fera Proteus mi rab i l i s Mi c roc occ us l uteus Kytococc us sedentari us Kocuria k ri sti nae Koc urea rosea k l eb s i el l a oz aneae M IC R O O R G A N IS M O S k l eb s i el l a ox ytoc a Es cheri c hi a c ol i Enteroc occ us faec al i s Dermacoc cus ni s hi nomi yaens i s Coryneb ac teri um x eros i s Coryneb ac teri um ureal yti c um Coryneb ac terium mi nuti ss imum Coryneb ac teri um matruchoti i Coryneb acteri um mac gi nl eyi Coryneb ac teri um k utsc heri Coryneb ac teri um j ekei um Coryneb acteri um b ori s Coryneb ac teri um amycol atum Coryneb ac teri um afermentans s b afermentans Baci l l us s ub ti l i s Baci l l us pumi l i s Baci l l us pol ymyx a Bac i l l us myc oi des Bac i l l us megateri um Baci l l us l i cheni formi s Bac i l l us fhari gi ens i s Bac i l l us c ereus Arthrob acter agi l i s 0 10 20 30 40 50 60 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores 216 70 80 90 PARQUE CUNDINAMARCA JORNADA 3 Staphylococcus xylosus Staphylococcus warnen Staphylococcus sacarolyticos Staphylococcus pasteuri Staphylococcus haemolyticos Staphylococcus aureus sub especie aureus Serratia rub idaea Micrococcus luteus kytococcus sedentareus Kocuria kristinae M ICROO RGANISM O S Kocurea rosea Kleb siella rhinoescleromatis Kleb siella oxytoca Escherichia coli Coryneb acterium matruchitii Coryneb acterium kutscheri Coryneb acterium jekeium Coryneb acterium b oris Coryneb acterium amycolatum Bacillus sub tilis Bacillus pumilis Bacillus polymyxa Bacillus mycoides Bacillus macerans Bacillus cereus Actynomices b oris Actynimices pyogenes 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores INVIMA JORNADA 1 Stom atococcus m ucilaginosus Staphylococcus xylosus Staphylococcus sim ulans Staphylococcus sacharolyticus Staphylococcus pasteuri Staphylococcus m uscae Staphylococcus lentus Staphylococccus warneri Serratia rub idaea Serratia m arcescens Pseudom ona aeruginosa Proteus m irab ilis M IC R O O R G A N IS M O S Micrococcus lylae Micrococcus luteus k ytococcus sedentarius k ocuria rosea k leib siella pneum oniae k leb siella oz onaea Kleb siella oxytoca Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium k utscheri Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium am ycolatum Bacillus thrigiensis Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus licheniform is Bacillus coagulans Bacillus cereus Aureob acterium liquefaciens Arthrob acter agilis Actynom ices pyogenes 0 10 20 30 40 50 FRECUENCIA (%) 217 60 70 80 INVIMA JORNADA 2 Staphylococcus xylosus Staphylococcus sim ulans Staphylococcus pasteuri Staphylococcus hom inis Staphylococcus epiderm idis Staphylococcus aureus Serratia rub idaea Serratia odorifera Pseudom ona aeuriginosa Proteus m irab ilis Micrococcus lylae Micrococcus luteus M IC R O O R G A N IS M O S Kytococcus sedentarius Kocuria k ristinae Kleb siella pneum oniae Kleb siella oz aenae Kleb siella oxytoca Escherichia coli. Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium xerosis Coryneb acterium k utscheri Coryneb acterium jeik eium Coryneb acterium flavescens Coryneb acterium coagulans Coryneb acterium arealyticum Coryneb acterium am ycolatum Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa Bacillus m ycoides Bacillus m acerans Bacillus cereus Arthrob acter agilis Actynom icos pyogenes 0 10 20 30 40 50 60 70 80 FRECUENCIA % Fuente: Información procesada por los Autores INVIMA JORNADA 3 Staphylococcus xylosus Staphylococcus pasteuri Staphylococcus m uscae Serratia rub idaea Proteus m irab ilis Micrococcus lylae Micrococcus luteus k ytococcus sedentareus Kocuria k ristinae Kocurea rosea Kleb siella pneum oniae M IC R O O R G A N IS M O S Kleb siella oz aenae Kleb siella oxytoca Escherichia coli. Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium polym yxa Coryneb acterium m atruchitii Coryneb acterium k utscheri Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium flavescens Coryneb acterium b oris Coryneb acterium am ycolatum Bacillus sub tilis Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus m acerans Bacillus cereus Aureob acterium liquefaciens Arthrob acter agilis Actinoyces pyogenes 0 10 20 218 30 40 50 FRECUENCIA (%) 60 70 80 SALAZAR GOMEZ JORNADA 1 Stom acoccus m ucilaginosus Sthaphylococcus xilosus Staphylococcus sim ulans Staphylococcus pasteuri Staphylococcus lentus Staphylococcus caseolyticos Ppeudom ona aeruginosa Serratia rub idaea Serratia odorifera Micrococcus luteus Kytococcus sedentarius M IC R O O R G A N IS M O S k ocuria rosea Kocuria k ristinae Kleb siella oxytoca Escherichia coli Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium m acgnileyi Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium flavescens Coryneb acterium am ycolatum Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polym yxa b acillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus coagulans Bacillus cereus Arthrob acter agilis Actynom yces viscosus Actynom ices b oris 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores Fuente: Información procesada por los Autores SALAZAR GOMEZ JORNADA 2 Streptococcus pneum oniae Staphylococcus xylosus Staphylococcus warneri Staphylococcus sim ulans Staphylococcus saprophyticos staphylococcus pasteuri Staphylococcus epiderm idis Staphylococcus capitis Serratia rub idaea Serratia odorifera Pseudom ona aeruginosa Proteus m irab ilis M IC R O O R G A N IS M O S Micrococcus luteus Kytococcus sedentarius Kocurea rosea Kleb siella oxytoca Escherichia coli. Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium xerosis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium k utcheri Coryneb acterium jek eium Coryneb acterium flavescens Coryneb acterium arealyticum Coryneb acterium am ycolatum Bacillus sub tilis Bacillus polym yxa Bacillus m egaterium Bacillus m acerans Bacillus cereus Bacillus m ycoides Arthrob acter agilis 219 Actynom ices pyogenes Actynom ices b oris 0 10 20 30 40 50 60 FRECUENCIA (%) 70 80 90 Fuente: Información procesada 220 por los Autores SALAZAR GOMEZ JORNADA 3 Stom atococcus mucilaginosus Staphylococcus xylosus Serratea odorifera Pseudom ona auriginosa Proteus m irab ilis Micrococcus luteus Kytococcus sedentarius Kocuria rosea Kocurea k ristinae Kleb siella oz aenae MICROORGANISMOS Escherichia coli Derm acoccus nishinom iyaensis Coryneb acterium m atruchotii Coryneb acterium kutscheri Coryneb acterium jeikeium Coryneb acterium am ycolatum Coryneb acterium aferm entans Bacillus sub tilis Bacillus pum ilis Bacillus polim ixa Bacillus m ycoides Bacillus m egaterium Bacillus m acerans Bacillus circulans Bacillus cereus Arthrob acter agilis Actynomices pyogenes Actynom ices b oris 0 10 20 30 40 50 FRECUENCIA (%) Fuente: Información procesada por los Autores 221 60 70 80 ANEXO L. CONDICIONES METEOROLOGICAS Y DE CALIDAD DEL AIRE DURANTE LA FASE DE MUESTREO 222 ESTACION PUENTE ARANDA DIA JORNADA PUNTO 2 1 5 1 3 4 1 4 1 2 2 3 5 3 5 4 1 3 HORA Humedad Temperatura VIENTO PM10(µg/m3) UFC/m³ NOx(ppb) O3(ppb) relativa Radiación (ºC) (m/s) merck Solar (W/m2) (%) 06:00am 12,3 78 07:10am 12,1 111 08:10am 12,7 155 09:10am 13,9 167 10:10am 14,9 184 11:30am 17,2 173 12:30pm 18,3 129 1:00pm 14,9 121 2:00pm 14,7 166 3:00pm 14,9 161 5:30pm 14 147 06:30pm 13,4 122 07:30pm 12,7 106 08:30pm 12,9 112 85 120 56 91 95 85 109 84 966 136 168 167 419 306 223 1,3 28 2 84,74 0 1,9 55 1 85,99 0,63 1,3 86 2 84,82 52,08 1,6 77 4 77,84 144,96 2,3 41 18 70,73 414,19 2,5 23 28 71,20 401,03 5,1 23 44 68,90 585,75 5,1 29 23 67,46 121,77 5,1 29 30 70,83 125,53 3,3 42 19 73,47 117,9 4,7 32 17 74,76 82,96 3,7 22 18 80,31 3,25 1,1 29 11 82,11 0 1,9 31 7 83,70 0 2 1 4 1 5 2 3 1 3 2 2 4 2 5 5 3 3 1 2 4 3 1 3 1 09:30pm 12,7 120 06:10am 12,5 112 7:00am 12,7 100 8:00am 13,7 133 9:00am. 15,4 132 9:35am 18,3 115 12:00pm 15,2 91 12:40pm 14,9 124 1:35pm 16,4 131 2:30pm 17,9 125 4:00pm 14,7 121 6:00pm 12,9 100 6:35pm 12,8 77 7:15pm 13,2 92 8:30pm 13,6 137 9:00pm 13,7 178 6:30am 12,2 75 7:00am 12,6 117 368 49 88 62 157 135 57 117 41 113 90 345 495 350 249 313 502 2425 224 1,7 65 1 68,99 0 1,3 21 3 85,14 0 1,9 48 0 87,66 0 1,7 52 5 84,66 128,89 2 37 14 79,65 390,37 1,3 21 27 76,39 532,37 2,1 52 17 79,51 104,5 3,6 54 10 78,01 188,15 2,8 43 26 79,47 224,62 2,3 28 35 75,30 316,47 1,8 28 34 77,57 174,3 3,5 69 3 84,49 29,17 1,6 86 2 84,49 9,75 1,5 86 2 84,77 9,75 2,2 154 1 84,59 8,72 1 164 2 84,23 8,78 1,4 0 0 83,52 0,85 1,4 0 0 82,06 81,54 4 2 5 4 3 2 1 2 5 1 4 3 5 2 3 2 4 4 1 1 3 5 8:00am 13,9 152 9:15am 14,2 113 10:05am 15 0 12:00pm 15,6 0 12:35pm 16,7 0 1:30pm 18,5 63 2:15pm 18,5 63 2:50pm 18,8 66 5:00pm 18,8 70 05:30pm. 17,3 70 06:00pm. 15,1 80 06:55pm. 15,1 80 07:30pm 14,1 96 06:45am 13 90 07:30am 13,1 150 09:35am 13,5 218 10:35am. 15,7 236 11:00am 17,5 102 604 349 604 275 639 887 172 1523 1622 1971 1786 599 1134 941 744 1720 304 1183 225 2,4 0 0 79,25 163,31 3,2 0 10 76,06 226,19 2,1 0 20 74,40 384,39 3,6 0 25 71,21 460,69 3,3 0 25 71,21 406,89 2,4 0 21 71,63 648,89 2,4 0 21 70,66 160,91 2 0 21 70,06 160,91 2,5 0 24 69,12 201,2 3,9 0 24 72,45 18,69 3,9 0 24 72,45 18,69 2,5 0 13 77,78 2,63 2,4 0 6 84,59 0,03 1,5 0 2 77,90 20,91 2,1 0 6 75,58 152,48 3 0 13 72,44 208,31 4,1 0 20 71,15 500,07 4,1 0 0 69,35 745,03 3 5 2 4 2 1 2 3 3 1 5 4 4 5 1 3 5 1 2 4 2 1 2 12:30pm. 18 91 01:20pm. 17,7 80 02:05pm. 17,7 80 03:00pm 17,3 72 04:00pm 16,9 71 05:20:pm. 16,1 92 06:00pm. 16,1 92 07:00pm 15,6 147 07:30pm. 14,4 75 08:20pm. 14,9 75 07:20a.m. 12,8 149 08:00a.m. 14,4 177 08:55a.m. 15 179 09:45a.m. 15,4 211 10:25a.m. 15,4 211 11:00a.m. 16,3 156 12:00 p.m. 17,3 119 12:55 p.m. 16,3 116 1136 1559 799 578 2819 1189 579 1554 874 775 443 963 212 244 181 113 703 632 226 4,9 6 23 69,94 430,26 5,5 0 24 69,76 577,55 5,5 6 21 70,80 259,5 5,7 7 21 72,49 250,26 5,7 10 17 75,34 186,78 3,6 9 17 74,54 181,94 3,6 10 14 76,24 26,61 3,5 8 14 79,12 0,52 4,1 14 9 78,26 0 2,3 8 12 75,87 0 1,6 65 5 81,93 37,56 1,2 85 8 83,69 209,86 2,2 68 11 76,44 303,25 2,8 42 15 63,58 210,88 2,8 18 19 63,19 251,97 3,3 18 19 63,19 251,97 1,4 10 20 65,28 298,01 1,6 22 19 65,89 272,49 5 3 3 03:25 p.m. 19 122 15,4 138 14,9 119 14,5 100 14,4 102 14,7 113 07:50 a.m. 12,8 124 08:35 a.m. 12,7 138 09:30 a.m. 14,4 88 10:05 a.m. 14,4 88 11:00 a.m. 14,8 105 12:30 p.m. 15,6 68 01:00 p.m. 15,6 68 01:30 p.m. 17,2 58 02:20:00p.m. 17,2 58 03:05 p.m. 17,4 53 03:35 p.m. 17,5 57 5 06:20 p.m. 1 07:15 p.m. 3 08:10 p.m. 4 09:10 p.m. 4 2 5 1 5 4 2 2 155 05:22 p.m. 3 1 18,1 2 1 6 02:30 p.m. 3 1 777 474 261 502 659 401 468 2,4 29 29 67,47 577,38 2,6 18 48 68,03 487,07 4,1 36 16 74,90 80,26 2,9 39 10 75,98 51 2,5 61 4 64,54 1,25 1,7 49 5 79,34 0 1,2 73 5 81,50 0 53 1 82,83 10,2 29 6 85,02 35,32 29 6 84,10 35,32 33 11 84,23 228,38 39 15 85,08 308,5 29 19 81,23 314,07 8 18 79,72 238,75 6 16 80,32 479,89 6 16 79,41 479,89 6 15 77,15 452,82 6 15 76,68 452,82 243 1,6 371 2,3 440 1,4 151 1,4 84 2,2 127 6,3 216 6,3 477 5,8 607 5,8 213 5,2 448 5,0 227 2 4 3 5 4 7 1 3 2 1 5 2 3 1 4 2 5 3 3 2 1 5 04:15 p.m. 17,5 57 05:25 p.m. 17 48 06:00 p.m. 16,3 54 06:40 p.m. 15,4 60 07:00 a.m. 14 68 07:35 a.m. 14,6 69 08:30 a.m. 15,1 78 09:25 a.m. 15,1 78 10:15 a.m. 16,1 73 01:00 p.m. 16,6 74 01:45 p.m. 16,1 86 02:50 p.m. 16,2 101 03:45 p.m. 17,6 89 04:50 p.m. 18,2 60 05:35 p.m. 17,6 67 06:25 p.m. 17,6 67 07:15 p.m. 16,8 69 08:00 p.m. 15,6 124 158 5,0 246 6,0 205 5,8 323 4,1 262 3,1 447 3,4 401 3,6 704 3,6 376 4,9 304 5,3 374 4,6 651 4,4 852 2,4 409 1,9 347 2,6 798 2,6 971 2,8 536 4,7 228 7 13 75,44 844,28 9 11 69,27 295,57 7 10 74,89 283,81 15 5 74,38 120,92 4 0 76,82 73,4 4 0 76,56 271,97 5 0 74,88 324,5 8 21 71,42 414,42 7 22 71,44 500,06 5 25 70,50 751,63 4 25 70,01 439,15 6 22 71,74 394,19 4 24 69,52 605,94 4 17 65,97 207,64 11 12 65,81 22,28 5 9 66,49 0 5 9 70,61 0 16 6 72,90 0 4 08:45 p.m. 15,2 60 255 Fuente: Información procesada por los Autores 229 3,1 16 6 74,08 0 PROTOCOLO 1. ALETORIEDAD EN LA TOMA DE MUESTRAS Pagina 1 PARAMETROS ANTES DE REALIZAR EL MUESTREO • Determine de sitios a muestrear en zona residencial e industrial dentro de la localidad (población), para esta investigación. • Establezca la unidad elemental o elemento que desea estudiar y observar todas o algunas de sus caracteristicas para ser medidadas o contadas; estas debenn ser bien definidas, adecuadas y comparables. (UFC, [ ] de PM10 y [ ] de PM2.5). • Determine las cartacteristicas cuantitativas y cualitativas de la unidad de estudio. MUESTREO ALEAOTRIO • Establezca el tamaño de la muestra, es decir los puntos de muestreo dentro de la localidad y los medios de cultivo que van a ser utilizados durante el muestreo. • Establezca las horas (jornadas) en que se van a realizar los muestreos. • Utilice el método de selección al azar por sorteo 1. Identifique cada una de las unidades de la población (puntos y medios) mediante números consecutivos (Utilizando tarjetas o balotas). 2. Introdúzcalos dentro de un recipiente y mezclelos. 3. Extraiga de una en una hasta completar el tamaño de la muestra. Ejemplo: Muestreo aleatorio para el día 1 y jornada 1: 1. 1: Puente Aranda 1. Medio de Cultivo: Agar Sangre 2: Colegio la Merced 2. Medio de Cultivo: Agar Chocolate 3: Parque Cundinamarca 3. Medio de Cultivo: Agar McConkey 4: INVIMA 4. Medio de Cultivo: Agar Saboreaud 5: Parque Salazar Gómez 2. Introduzca en un recipiente los puntos y mezclelos. 230 PROTOCOLO 1. ALETORIEDAD EN LA TOMA DE MUESTRAS Pagina 2 3. Extracción de las muestras: A. Extraiga cada una de las balotas correspondientes a los puntos y anote el orden en que fueron escogidos cada uno de estos en un formato. B. Para el primer punto que fue escogido realice el sorteo para los medios de cultivo teniendo en cuenta el numeral 2 y anótelo en el formato. C. Realice el mismo procedimiento para cada uno de los puntos de muestro. Despues de la selección al azar la jornada 1 quedo de la siguiente manera: PUNTOS 2 5 3 4 1 • Ag. Chocolate Ag. McConkey Ag.Saboreaud Ag. Sangre Ag. McConkey MEDIOS DE CULTIVO Ag. McConkey Ag.Saboreaud Ag. Sangre Ag.Saboreaud Ag. Sangre Ag. Chocolate Ag. Chocolate Ag. McConkey Ag. Chocolate Ag. Sangre Ag. Sangre Ag. Chocolate Ag. McConkey Ag.Saboreaud Ag.Saboreaud Realice el mismo procedimiento para cada día y jornada de muestreo, con el fin de garantizar mayor representatividad de los datos a obtener. Fuente Información procesada por los Autores 231