17 "Uso de extractos naturales de albahaca, eneldo e hinojo como medida alternativa de control de Macrosiphum euphorbiae (Thomas) (Homoptera: Aphididae)" "Use of natural extracts of basil, dill and fennel as an alternative measure of control of Macrosiphum euphorbiae (Thomas) (Homoptera: Aphididae)" Russo, SI.; Rodriguez, SI.; Michetti; M.I, Delfino, S2; Pelicano, A.I RESUMEN Se prepararon extractos vegetales de tallos, hojas y flores de albahaca (Ocimum basilicum L), eneldo (Anethum graveolens L.) e hinojo (Foeniculum vulgare Mil!.) en solución de benceno a] ] 'Yoy a] 2%. En cajas de Petri se colocó papel de filtro humedecido con las diferentes soluciones y sobre éste hojas de lechuga con 10 áfidos, utilizando un diseño completamente aleatorizado. Se efectuaron 6 tratamientos con 4 repeticiones: TI a T4: testigo, benceno; E] a E4: esencia de eneldo 1%; Al a A4: esencia de albahaca 1%; H] a H4: esencia de, hinojo] %; AH] a AH4: esencia de albahaca e hinojo] %; AE 1 a AE4: esencia de albahaca e eneldo] %; estas series fueron repetidas al 2%. Se verificó e] efecto knockdown y el porcentaje de mortalidad a los 30 minutos, 6, 24 Y 48 horas. Los datos se analizaron mediante un ANOVA y test de Tukey al 5%. Todos los tratamientos registraron en ambas concentraciones un aumento de la mortalidad a través del tiempo. Se observaron difercncias significativas a altas concentraciones. Se comprobó cl efecto sinérgico al combinar albahaca con eneldo y con hinojo. En ninguna de las dos concentraciones ensayadas se verificó efecto knock-down. Palabras clave: Macrosiphum sinergismo. euphorbiae, extractos vegetales, mortalidad, albahaca, eneldo, hinojo, ABSTRACT Vegetables extracts were prepared from stems, ]eaves and flowers of basi] (Ocinul11basilicul11L.), dill (Anefhemun graveolens L.) and fennel (Foeniculum vulgare Mil!.). The so]vent was benzene to 1% and 2%. Filter papers humidified with different solutions, and over them were put leaves of ]attuce with 10 aphids each onc. A randomized complete design DCA were used and the sampling unit was the Petri disch. 6 treatments with 4 repetition were evaluated: TIto T4: control with solvent applications; El at E4: dill essence at 1%; Alto A4: basil essence at 1'Yo;HIto H4: fennel essence at 1%; AH 1 to AH4: basil essence and fennel at 1%; AE] to AE4: basi] essence and dill at ]%; these series were repeated to 2%. The effcct "knock- down"and the percentage of dead aphids to the 30 minutes, 6, 24 and 48 hours were verificd. The analysis of the data was made through an ANOVA and Tukey test of YY<"Thcre were differences at highet conccntrations. The mixture of: a) basi] and dill, b) basil and fennel showed synergic effect. lt was verfied none of "knochdown" effect for any treatment. Key words: Maaosiphum euphorhiae, extracts vegetables, mortality, basil, dill, fennel, sinergic etfect I Cátedrade ZoologíaAgrícola-UBA. Av. SanMartín 4453 (CI4l7DSE) 2 Cátedrade Esladístíca-UBA.Av. SanMarlín4453 (CI417DSE) 18 INTRODUCCIÓN El tomate (Lycopersicum sculenlum MilI) se cultiva tanto para consumo fresco como para industria. Esta planta es hospedera de numerosas especies de insectos y ácaros, mencionándose a Macrosiphum euphorbiae (Thomas), pulgón de la papa, como una de las principales plagas del cultivo, siendo una de las más importantes en el mundo (Wise el al, 1995; Folcia el al, 1998». Este áfido se comporta como una especie ampliamente polifitófaga, frecuente en cultivos de papa, lechuga, tomate, berenjena como también crisantemo y rosal. Sin embargo se ha encontrado que M. euphorbiae presenta diferente comportamiento según la variedad de tomate afectada (Karsavuran and Onwer, 1993). Se encuentra en brotes y hojas tiernas, produciendo clorosis, enrulamiento, acartuchamiento y necrosis, destacándose asimismo como transmisora de virus. (Lamb el al., 1997; Qumtanilla el al., 1976). Estudios realizados sobre albahaca, eneldo e hinojo demuestran la presencia de aceites esenciales cuya actividad biológica se manifiesta como atFactivos, disuasivos alimentaríos, antimicrobiales, alelopáticos o insecticidas (Hay and Waterman 1993). Su concentración depende de la variedad, su origen geográfico, los distintos órganos vegetales, el estado fenológico del cultivo, las prácticas culturales, el momento de cosecha y el extractante utilizado (agua, benceno, ether, dióxido de carbono, vapor, alcohol, etc.) (Lachowicz el al. 1996; Hay and Waterman 1993; Charles and Simón 1990; Gulati el al. ] 990). En albahaca, utilizando como extractante éter, se encontraron como principales constituyentes a p-cumarina, aesculetín, eriodictol, eriodictol-7-glucosido y al vicenin-2 (Skaltsa and Philianos 1990). Eugenol, beta-ocimene y gamma-cardinene fueron aislados de hojas, flores y tallos de esta planta (Colson el al. 1991), mientras que el linalol se lo encontró en hojas y principalmente en inflorescencias (Silva el al. 1998). Utilizando otros extractantes como agua o vapor se identificó como componentes principales de los aceites esenciales allinalol, metilchavicol, metileugenol y trazas de monoterpenos y sesquiterpenos (Lachowicz el al. 1996; Riaz el al.1994). Extractos de albahaca, obtenidos con metanol y etanol. actuaron como repelente de insectos en tabaco, siendo su eficacia intermedia para Myzuspersicaey Aphisfabae (Stein el al. 1998;Stein and Klingauf 1990). En hinojo fueron encontrados, en mayor proporción en estado maduro del cultivo, como principales constituyentes al anethone, limoneno, fenchone, metilchavicol (Marotti el al. 1994). El rendimiento de lOES lA (Chile) VD!. 19. 2()()] aceite y el contenido de limoneno también variaron con la especie y el grado de procesado en el caso de uso de semillas (Maroti y Piccaglia 1992). Los aceites esenciales de eneldo, fracción hexano, contienen como componentes principales limoneno, dihidrocarbone, carvone y mirístico (Gulati el al.1990), variando su proporción de acuerdo con la variedad del cultivo (Kruger and Hammer 1996). El objetivo del presente trabajo fue evaluar la eficacia de los extractos vegetales de albahaca, eneldo e hinojo y el efecto sinérgico de albahaca-eneldo y albahaca-hinojo sobre adultos de M. euphorbiae. MATERIALES Y METO DOS Los adultos del pulgón de la papa, obtenidos de plantas de tomate fueron multiplicados en cajas dc plástico de 10,5 cm X 10,5 cm X 4,5 cm de profundidad, recubiertas con malla de tela para permitir la aireación. La experiencia se éfectuó en condiciones controladas de laboratorio: 24 :!: 1,5 °C y 70 % :!:5 de humedad relativa y 12 hs de fotofase. Para la obtención de los extractos vegetales se utilizó material fresco de tallos, hojas y flores, el cual pesado y fraccionado, se colocó en un balón de vidrio, con ] litro de agua destilada. Se efectuó la extracción por arrastre con vapor utilizando una trampa de Cleavenger de acuerdo a la farmacología europea. El ensayo se realizó en cajas de Petri. Sobre papel de filtro humedecido con l mI de los distintos extractos, se colocaron hojas de lechuga y sobre éstas] O áfidos. Se evaluaron 6 tratamientos con 4 repeticiones:Tl a T4: benceno; El a E4: esencia de eneldo al 1%; Al a A4: esencia de albahaca al 1%; Hl a H4: esencia de hinojo al l %; AHl a AH4: esencia de albahaca e hinojo al 1%; AEl a AE4: esencias de albahaca e eneldo al ]'Yo; la misma serie se repitió para extractos al 2%. Se uti]¡zó un diseño completamente aleatorizado siendo la unidad de muestreo las cajas de Petri . Se verificó el efecto knockdown y el porcentaje de áfidos muertos a los' 30 minutos, 6, 24 Y 48 horas después de la aplicación. Los resultados fueron analizados mediante ANOVA para la variable de respuesta nÚmero de individuos muertos para un esquema de ensayo repetidos en el tiempo y para las comparaciones mÚltiples entre tratamiento se utilizó el test de Tukey. RESULTADOS A.1. Análisis de toxicidad de los distintos tratamientos en cada momento de medición al 1'Yóde la concentración (Tabla 1, Figuras 1 y 2) 19 No se observaron diferencias significativas entre los tratamientos en relación al momento de observación. A.2. Análisis de toxicidad de los distintos tratamientos en cada momento de medición al 2% de la concentración (Tabla 2, Figuras 3 y 4) A los 30 minutos no se presentaron diferencias significativas entre los tratamientos, observándose una baja mortalidad de individuos. Tanto para las 6 como para las 24 horas, los más efectivos fueron AE y AH llegando AE al máximo valor de mortalidad a las 24 hs. A.3. Efecto de las dosis sobre la mortalidad de individuos. Para ambas concentraciones la mortalidad es efectiva a través del tiempo, siendo su correlación r = 0,78 para el 1% Y r = 0,45 para el 2% (Tablas 3 y 4, Figura 5). CONCLUSIONES A ambas concentraciones la mortalidad aumentó a través del tiempo observándose diferencias significativas al 2%. Al incrementar la concentración, se comprobó que existe un efecto sinérgico al combinar albahaca con hinojo y eneldo. En las concentraciones efecto knockdown. experimentadas no se verificó Figura 1 Evolución de la mortalidad de áfidos para e11% de la concentración 0,8 0,7 ~ (1J o.. 0,6 CI) -@ Q) :::s --- Testigo --- Eneldo --- Hinojo E: ..... o °, 5 Q) c: "b Q) ~ § 0,4 & 0,3 ~~ .0 "6 Q) E: (j --- Alb-eneldo --- Alb-hinojo --- Albahaca 0,2 e a.. 0,1 ° 0,5 6 24 momento desde la aplicacion (horas) 48 20 IDESIA (Chile) Vol. 19,2001 Figura 2 Evolución de la mortalidad de áfidos para cada momento en cada tratamien. to para el 1% de la concentración 0,8 0,7 -@ ClJ 1: .0 -€ 0,6 (j ~ ~ '" ~ ~ 0,5 ~ 0,3 0,5 horas 6 horas 24 horas 48 horas 0,4 1: T§ ClJ ¡¡¡ O> o 0,2 ~1: 0,1 e ° o... T E A H AE AH Tratamientos Figura 3 Evolución de la mortalidad de áfidos para el 2% de la concentración. 1,2 1 "O -§ t:: -@ 0,8 o E: Testigo Eneldo Albahaca Q) ::: ~ Q) 0,6 Hinojo Alb-eneldo t:: Q) OJ o '6 Q) E: e Q 04 ' Alb-hinojo 02 , O 0,5 6 24 Momento desde la aplicacion (horas) 48 21 Figura 4 Evolución de la mortalidad de afidos para cada momento en cada tratamiento para el 2% de la concentración. 1,2 .. 1 "tJ {5 0,8 t: o ' I E o 06 e i Q 0.41 I 1 . 0.5 24 horas .:~i6 horas . horas 48 horas 0,2 I -J O T E H A AE AH Tratamiento Figura 5 Evolución de la mortalidad media de pulgones para ambas concentraciones. 8070 60 '50 Q) E: "O {g c: 40- .1% .2% 30 {g 20 10 2% O concentracion 48 Momento desde la aplicacion (horas) I I 22 IDESJA (Chile) Vol. 19,2001 Tabla 1 Promedio de individuos muertos para cada tratamiento (1% de concentración). Tratamiento 0,5 horas 6 horas 24 horas 48 horas N°indiv. vivos 6,5 Testigo O,025 a O,100 a 0,225 a 0,350 a LX','-l..J¿.:trl (::tCW5) ( ::tO,1 1) ( ::t0,20) ( ::to,20 ) Eneldo IX..":V srct 0,025 a 0,02 5a O,100 a 0,600 a ( ::tO,CE) ( ::to'a» ( ::tO,CR) ( ::tO,14) Albahaca 0,075 a 0,250 0,450 a 0,675 a a IX..>qJ sct ( ::tO,C.U) ( ::tO,20) ( ::tC),31) ( ::tO,28) Hinojo DesJ ,qcj 0,000 a 0,025 a 0,25 O a 0,575 a (::to'm) (::tO,CE) (::tO,13) ( ::tO,22 ) A lb-eneldo Dc'.'{) ,qrl 0,075 a O,125 a 0,350 a 0,575 a ( ::tO,CE) (::to'cE) (::tO,17) ( ::tO,18) Alb-hinojo De.<v srct 0,05 a 0,125 a 0,275 a 0,500 a ( ::to'cE) (::tq,CO) ( ::tO,CE) ( ::tO,CB) 4 3,25 4,25 4,25 5 Nota: letras distintas en orden vertical representan diferencias significativas para test de Tukey (p< 0,05) Tabla 2 Promedio de individuos muertos para cada tratamiento (2% de concentración). Tratamiento Testigo Desvstd Eneldo Desvstd 0,5 horas 6 horas 24 horas 48 horas N°indiv.vivos 0,025 a (O,05) O,075 a O,075 e (0,09) 0,200 be 0,200 b (0,20) 0,275 b 0,275 e (0,28) 0,525 be 7,25 ( 0,15 ) ( O,14) ( O,15) ( 4,5 0,15 ) Albahaca Desvstd 0,325 a (O,38) 0,625 ab (0,26) 0,850 a ( 0,17) 1,000 a (O,OO) 0,75 Hinojo 0,225 a 0,500 abc 0,575 ab 0,775 ab 2,25 Des\' std ( A lb-eneldo 0,350 a Desv std ( 0,26 ) 0,21) (O,39 ) ( 0,40 ) ( 0,22 ) 0,950 a 1,000 a 1,000 a (O,06) A lb-hinojo 0,250 a 0,800 a f)e,\')'.I'ld (-1°, /3 ) ( +:O,JR ) (:!: 0,(0) (:!: 0,(0) 0,925 a 0,975 a (:!: 0,09 ) (:!: 0,05 ) Nota: letras distintas en orden vertical representan diferencias significativas para test de Tukey (p< 0,05) O 0,25 23 Tabla 3 Mortalidad media de pulgones (en porcentaje) en cada momento de medición al 1% de la concentración 0,5 horas 6 horas 24 horas 48 horas Promedio 4,1 :t 0,98 10,8:t 2,7 27,5:t 3,8 54,5:t 3,6 Signifieancía a B e O Momento desde La aplicación Nota: letras distintas en sentido horizontal representan diferencias significativas según Tukey (p < 0,05). Mortalidad Tabla 4 media de pulgones (en porcentaje) en cada momento medición al 2% de concentración. de 0,5 horas 6 horas 24 horas 48 horas Promedio 20,8:t 4,2 52,5 :t 11 63,7:t 75,8 :t 9,8 Signifieancía a B be Momento desde La aplicación 11 ed Nota: letras distintas en sentido horizontal representan diferencias significativas según Tukey (p < 0,05). BIBLIOGRAFIA COLSON, M; TELENYI, P. and PERRIN, A 1991. Characterizatión of foliar appendages and essential oils of Ocimum gratissimum. L leaves. HerbaHungarica, VoL30:3,5-14. GIANNETTI, P.L, and SALDI, J. 1995. Efficacy of a new natural aphicide on some horticultural crops <Jndflowers. Informatore-fitopatologico. Vol. 45:2, 50-53. CHARLES, D.J, and SIMÓN, S.E. 1990. Comparison of extraction methods for the rapid determination of essential oil content and composition of basil. Joumal of the American Society for Horticultural Science. Vol. 115:3,458-462. GULATI, B; SINKA, G.K; BHATTACHARYYA, S.C (ED.); SENN, N (ED); SETHI, K.L.1990. 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