VARIANTES INTRATIPICAS DEL GENOTIPO 58 DEL VIRUS

Universidad Nacional del Nordeste
Secretaria General de Ciencia y Técnica
COMUNICACIONES CIENTÍFICAS Y TECNOLÓGICAS 2009
VARIANTES INTRATIPICAS DEL GENOTIPO 58 DEL VIRUS PAPILOMA HUMANO (HPV-58)
Y SU RELACION CON EL RIESGO DE CANCER CERVICAL
Marín, Héctor Marcelo - Alonso, José Mario
Identificación del Plan “Variantes intratípicas del genotipo 58 del virus papiloma humano (HPV-58) y su relación con el
de Trabajo / Proyecto: riesgo de cáncer cervical”
Facultad / Instituto:
Instituto de Medicina Regional
Domicilio:
Av. Las Heras 727- Resistencia (CP3500) - Chaco
Teléfono/Fax:
03722-427293
Palabras Claves:
Hpv, Pcr, Genotipo 58, Secuenciación
- E-mail: [email protected]
RESUMEN
Existen aproximadamente 15 genotipos de virus papiloma humano (HPV) considerados de “alto riesgo” de acuerdo a
su potencial oncogénico, ya que fueron identificados en pacientes que desarrollaron cáncer de cérvix. En el caso
particular del HPV- 58, genotipo secundario prevalente en nuestra región, es importante investigar la variación
intragenotípica para poder establecer la asociación entre determinadas variantes de este genotipo y la persistencia viral o
el desarrollo de lesiones de cuello uterino malignas o de alto grado. Este tipo de estudio se desarrolló, en nuestro país,
solamente en el genotipo 16, obteniéndose resultados que permitieron ampliar el conocimiento acerca de la
etiopatogenia de un genotipo en particular con elevada prevalencia mundial.
Por lo tanto la descripción de características genéticas específicas de los aislamientos de HPV-58 resulta de interés al
momento de analizar su correlación con las particularidades clínicas de la infección y la efectividad de vacunas
accesibles actualmente, considerando una población de estudio con elevada incidencia de esta patología y una
comunidad médica carente de información relacionada con los genotipos de HPV circulantes en la región.
Se analizó el material genético de muestras de material de cuello uterino con HPV – 58 de una población de 250
mujeres con distintos grados de alteraciones citológicas (por estudio de PAP) y/o lesiones cervicales (por colposcopía)
como ser: PAP inflamatorio, lesión lesiones intraepiteliales escamosas de bajo grado (LG-SIL) y de alto grado (HGSIL), células escamosas atípicas de significado indeterminado (ASCUS) y carcinoma in situ e invasor, de acuerdo a la
clasificación de Bethesda. Esta población correspondiente a los Hospitales “Angela P. Llano” y “Juan R. Vidal” de la
ciudad de Corrientes y consultorios privados de la ciudad de Resistencia fue sometida a una investigación previa (Beca
de Iniciación, SeGCyT – UNNE. Res. 437/03 C.D. 2003 – 2005) para detectar la presencia de HPV y genotipos
prevalentes.
Se amplificaron segmentos genómicos correspondientes a los genes E6 y E7 del HPV-58, mediante reacción en cadena
de la polimerasa (PCR).
Los productos de la reacción fueron visualizados en un gel de agarosa teñido con bromuro de etidio, previa separación
electroforética. Los fragmentos de ADN así obtenidos se purificaron para su posterior secuenciación por el método de
los dideoxiterminadores de cadena en forma automatizada. A partir de las secuencias obtenidas y de otras secuencias
marcadoras de genotipos obtenidas del GenBank se realizaron análisis filogenéticos (alineamiento de secuencias),
empleando distintos programas tales como Clustal X y BioEdit.
Se logró amplificar y secuenciar el gen E6 de 10 muestras, previamente genotipificadas como HPV-58. El análisis
posterior de alineamiento de secuencias evidenció diferencias en determinados sitios del gen E6 que podrían
considerarse como posibles mutaciones puntuales entre las secuencias analizadas.
Si bien no se ha analizado un número estadísticamente significativo de muestras, las probables mutaciones encontradas
podrían establecer la presencia de variantes intratípicas e inferir en la existencia de más de un genoma ancestro.
Este cuestionamiento podrá discernirse con repetidas secuenciaciones de las muestras destacadas, para analizar la
constancia de las mutaciones encontradas y el análisis posterior del gen E7 con el correspondiente estudio filogenético.