Práctica 3: RECUENTO CELULAR SANGUÍNEO Preparación de

Práctica nº3
Práctica 3: RECUENTO CELULAR SANGUÍNEO
Preparación de muestras sanguíneas con líquido de Türck y PBS:
Material:
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Sangre capilar
Líquido de dilución: PBS (Solución salina fisiológica)para visualizar eritrocitos
Líquido de dilución (Líquido de Türck)para visualizar leucocitos
Pipetas dilutorias o microcapilar calibrado
Cámara de Neubauer
Microscopio
La pipeta dilutoria tiene una dilatación proximal que permite realizar una dilución
1/100. Si solo se enrasa la pipeta hasta 0,5 el valor de dilución será
1/200.
Método:
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Desinfectar el dedo que va a ser punzado.

Con una lanceta, realizar una punción en el lateral de la yema y
presionar el dedo para que salga más sangre.
Extracción de 0,5µl de sangre
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Con una pipeta calibrada a 0,5µl, coger sangre e introducirla en los tubos
eppendorf que contienen ya uno el líquido de Türk (100μl) y el otro el PBS
(1000 μl) homogeneizando la mezcla.

Coger 1µl de sangre y ponerla en un portaobjetos poner un cubreobjetos y
mirar al microscopio los leucocitos.

Coger sangre mezclada con líquido de Türk y colocarla en la
cámara de Neubauer hasta que quede llena la parte central.
Colocar
un
cubreobjetos. Por
capilaridad
el
líquido
embadurna todo el cuadrado y los consiguientes. Tras el
recuento de leucocitos, lavar convenientemente la cámara
1
1
2
1
Tubos eppendorf:
1. Sangre + Turck
2. Sangre + PBS
2
Práctica nº3
de Neubauer y realizar la misma operación con la preparación con PBS.
Recuento de leucocitos:
Método de recuento:
Mirar al microscopio la cámara de Neubauer, y realizar el recuento según los
cuadraditos. A la hora de contar hay que hacer un consenso sobre como contar los
leucocitos que están sobre una raya de manera a no contar el mismo dos veces en
cuadrados diferentes; por ejemplo, solo contar los leucocitos que están sobre las
rayas de arriba y la izquierda:
Contar en un grande (los negros de cada unos 16 cuadraditos)
cuantos leucocitos hay, los veremos por la coloración que
experimentan sus núcleos.
Cuando tengamos el númerode leucocitos que hay en uno de los
cadrados, aplicaremos la formula
El valor normal es entre 5000 y 10000.
Cuando hayamos hecho el recuento del número de leucocitos de una de las áreas
del cuadro (los leucocitos de los 16 cuadritos) aplicaremos la siguiente fórmula:
( Nº de leucocitos en el cuadrado negro X 4(cuadrados grandes)
X 20 factor de dilución X 10 Volumen muestra) / 4
En nuestro caso contamos 52 leucocitos en un cuadrado grande por lo que según el
cálculo el valor de leucocitos es de 10400 es alto ya que el valor fisiológico de
leucocitos es de entre 5000 y 10000.