DETERMINACIÓN DE GRASA Método Bligh y Dyer 1. OBJETIVO

INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE SUBDEPARTAMENTO LABORATORIOS
DEL AMBIENTE
SECCIÓN QUÍMICA DE ALIMENTOS
DETERMINACIÓN DE GRASA
Método Bligh y Dyer
PRT: 701.04-156
Rev. 0
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1. OBJETIVO
Obtener la grasa de un alimento homogeneizado mediante extracción directa con disolventes en
frío.
2. CAMPO DE APLICACION
Esta técnica será aplicada a muestras de alimentos especialmente para extraer lípidos para
identificación por cromatografía de gases y pruebas de rancidez.
3. FUNDAMENTO
El método se basa en la homogeneización de alimentos húmedos con metanol y cloroformo en
proporciones tales que forman una fase sencilla miscible con el agua en los alimentos, que al
adicionar posteriormente cloroformo y agua se separan dos fases con los materiales lípidos en la
capa de cloroformo.
4. REFERENCIAS
Análisis Químico de Alimentos de Pearson. Egan, H; Kirk R y Sawyer R. Compañia Editorial
Continental, México. 1988.
5. TERMINOLOGÍA
NA
6. MATERIALES INSUMOS Y EQUIPOS
6.1 MATERIALES Y EQUIPOS
6.1.1
6.1.2
6.1.3
6.1.4
6.1.5
6.1.6
6.1.7
6.1.8
Balanza analítica
Ultraturrax
Centrífuga
Rotavapor
Estufa
Micropipeta
Vórtex
Material usual de laboratorio: filtros, vasos, tubos tapa rosca, etc.
6.2 REACTIVOS
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE SUBDEPARTAMENTO LABORATORIOS
DEL AMBIENTE
SECCIÓN QUÍMICA DE ALIMENTOS
DETERMINACIÓN DE GRASA
Método Bligh y Dyer
PRT: 701.04-156
Rev. 0
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6.2.1
6.2.2
6.2.3
6.2.4
7
Metanol p.a.
Cloroformo p.a.
Hidróxido de potasio p.a.
Éter de petróleo
DESARROLLO DEL PROCESO
7.1
7.1.1
7.1.2
7.1.3
7.1.4
7.1.5
7.1.6
7.1.7
7.1.8
7.1.11
7.1.12
7.1.13
Preparación de las muestras
Homogeneizar la muestra previamente analizada o conocida su humedad.
Pesar en vaso precipitado de 250 mL aproximadamente 10 g de muestra exactamente pesados.
Agregar agua desionizada en tal cantidad que el total de agua presente sea 16 mL.
Agregar 40 mL de metanol
Agregar 20,0 mL de cloroformo con pipeta volumétrica, extraer por 2 minutos con ultraturrax
Agregar nuevamente 20,0 mL de cloroformo y extraer por 30 segundos con ultraturrax
Agregar 20 ml de agua y extraer por 30 segundos con ultraturrax
Distribuir el contenido en tubos de centrífuga de 50 mL y centrifugar por 10 minutos a 2000 –
2500 rpm.
Extraer con jeringa de 10 mL la capa inferior de cloroformo de cada tubo sin perturbar las
capas flotantes, filtrarlo por papel plegado y recibir el filtrado en erlenmayer de 50 mL.
Tomar una alícuota de 25,0 mL del filtrado con pipeta volumétrica y trasvasijar a un matraz
redondo de fondo plano de 100 mL previamente secado, pesado y mantenido en desecador.
Evaporar el cloroformo en rotavapor a 60 °C.
Completar el secado en estufa de vacío a 60 °C por 2 horas. Enfriar en desecador
Pesar el matraz con la grasa.
7.2
Expresión de resultados
7.1.9
7.1.10
A (g/100g) =
A
P1
P2
VT
Va
VT x P2
----------------------Va x P1
: Concentración en g/100g (%) de grasa
: Peso de la muestra
: Peso de la grasa seca obtenida
: Volumen total de cloroformo (40 mL)
: Volumen de la alícuota de cloroformo tomada (25 mL)