38 INIA Tierra adentro cultivos enero - febrero 2010 LIBERACIÓN DE AZÚCARES DESDE SEMILLAS DE LUPINO: DAÑINO EFECTO DEL EXCESO DE AGUA EN EL SUELO Javiera Aravena C. Bioingeniera [email protected] CGNA Jaime Mejías B. Ingeniero Agrónomo, Ph.D. INIA Carillanca Véronique Amiard Bioquímica, Dra. CGNA Más del 90% del lupino se cultiva en La Araucanía, con alrededor de 20.000 hectáreas sembradas anualmente (Censo Agropecuario, 2007). El establecimiento se realiza entre mayo y agosto, período en el cual ocurre la mayor concentración de precipitaciones. La condición de humedad del suelo es de vital importancia para gatillar la germinación y el vigor de la futura planta de lupino, pero por otra parte el exceso de humedad en el suelo afecta negativamente el proceso de germinación y complica el arraigamiento de las plantas. Estudios preliminares realizados en el Centro de Genómica Nutricional Agroacuícola, CGNA, en laboratorios de INIA Carillanca, han mostrado una interesante interacción entre la humedad del suelo y la liberación de azúcares, lo cual afecta la germinación de semilla de lupino amarillo. Importancia del oxígeno en la germinación El suelo está compuesto por partículas de diferentes tamaños. Entre ellas existen espacios in- Cultivo de lupino amarillo en el predio de Carillanca. Plántulas veinte días después de la siembra (arriba) y ejemplares en plena floración (abajo). tersticiales o porosidades donde se almacenan agua y gases. El volumen de aire en el suelo es variable, y representa entre un 18 y 25% del volumen total de poros. Agua y gases son absorbidos y utilizados por las semillas y las raíces de las plantas para sus funciones esenciales. En días de alta precipitación, los poros del suelo se llenan de agua desplazando parte del aire, situación que se denomina técnicamente como "nivel de saturación". En un suelo volcánico perteneciente a la serie Vilcún carac- terizado por su alta capacidad de retención de agua y un alto contenido de materia orgánica, se estudió la posible interacción entre la humedad de suelo, la liberación de azúcares y la germinación. A modo de imitar lo que ocurre normalmente en campo, el suelo fue llevado a tres niveles de contenido de humedad definidos como 20; 100; y 120% de la capacidad de campo, equivalentes a un terreno húmedo, terreno después de una lluvia fuerte y terreno después de varios días de lluvias. La capacidad de campo se refiere a la cantidad constante de agua que contiene un suelo saturado después de 48 horas de drenaje. En condiciones de suelo no saturadas (cuadro 1), las semillas de lupino amarillo presentaron casi un 100% de germinación después de las 48 horas de siembra. En suelos en capacidad de campo el porcentaje de germinación fue de un 50% durante el mismo período. Las semillas dispuestas en suelos sobresaturados (120% de la capacidad de campo) no germinaron a las 48 horas. Estos resultados sugieren que la germinación de semillas de lupino en suelos saturados se afecta negativamente. Nuestro estudio demostró, además, que las semillas de lupino sometidas a exceso de agua durante un período mayor (tres días) disminuyeron notoriamente la capacidad de germinar, aun siendo trasplantadas posteriormente a un suelo con bajo nivel de humedad. La falta de oxígeno en los Cuadro 1. Porcentaje de germinación en diferentes condiciones de siembra. Condiciones de siembra 20% de la capacidad de campo 100% de la capacidad de campo 120% de la capacidad de campo Oxígeno Porcentaje de germinación ++ + - 97 46 0 INIA Tierra adentro cultivos enero - febrero 2010 Liberación de azúcares durante la germinación La imbibición o absorción de agua de las semillas está acompañada por un movimiento de compuestos de la semilla hasta el suelo. Este proceso se denomina exudación y las sustancias liberadas se llaman de forma genérica "exudados". Cuantificamos los azúcares liberados por las semillas de lupino amarillo sembradas en algodón humedecido o con exceso de agua, a modo de imitación de lo que ocurre en el suelo húmedo o satura- do. Constatamos, mediante cromatografía (HPTLC), que las semillas de lupino liberan distintos azúcares durante las primeras etapas de la germinación. Los mayoritarios son estaquiosa, verbascosa y sacarosa; los minoritarios, rafinosa, glucosa y fructosa. La cantidad de azúcares exudados por la semilla depende fuertemente de la disponibilidad de agua. Como se muestra en la figura 1, la exudación es 10 veces mayor en semillas sembradas en agua, comparada a las semillas en algodón humedecido. Influencia de exudados sobre microorganismos del suelo La semilla en germinación y la espermósfera, o suelo que la rodea, representan un hábitat favorable para el desarrollo de microorganismos que consumen las sustancias liberadas por las semillas. Estos compuestos, ya sean azúcares, ácidos grasos, flavonoides o aminoácidos, juegan un rol importante en la interacción de las plantas con micro- Figura 1. Carbohidratos exudados por semillas de lupino durante la germinación. 300 Carbohidratos exudados (μg / 100 mg de semilla seca) suelos sobresaturados afecta el metabolismo respiratorio de la semilla, favoreciendo un metabolismo de fermentación. La fermentación permite a la semilla sobrevivir por un tiempo en ausencia de oxígeno, utilizando sus reservas de carbono como fuente de energía. Sin embargo, este proceso tiene un rendimiento energético inferior al metabolismo respiratorio y está limitado por la cantidad de reserva de la semilla. 200 100 0 Semilla en agua Glucosa + Fructosa Sacarosa organismos del suelo. Un claro ejemplo es el estímulo de la germinación de esporas del patógeno Fusarium spp. La atracción y estimulación de los microorganismos depende de la intensidad con la que son liberados compuestos desde la semilla sembrada y, por ende, de la humedad del suelo. Doble perjuicio Los resultados del estudio indican que el exceso de agua en el suelo genera dos escena- Semilla en algodón humedo Rafinosa Estaquiosa Verbascosa rios, que sumados pueden ser perjudiciales para la semilla de lupino en germinación. Por un lado, la ausencia de oxígeno provoca que la semilla no pueda respirar adecuadamente; por otro, la entrada rápida de agua en la semilla daña los tejidos y produce la liberación de una mayor cantidad de azúcares. En estas condiciones de alta humedad, los azúcares exudados favorecerían el desarrollo de microorganismos patógenos, incrementando el riesgo de enfermedades en las semillas. Semilla lupino Moléculas exudadas Moléculas exudadas Microorganismos del suelo Análisis de azúcares Cromatograma (HPTLC) Sacarosa Suelo sobresaturado Verbascosa Estaquiosa Rafinosa Suelo bajo la capacidad de campo Glucosa + Fructosa Figura 2. Se analizaron por HPTLC los azúcares liberados por semillas sembradas en distintos niveles de humedad. Nuestros resultados indican que las semillas liberan una mayor cantidad de azúcares cuando se encuentran en un suelo saturado por las precipitaciones, en comparación a suelos con un menor contenido de humedad. Los azúcares liberados por semilla pueden favorecer el desarrollo de microorganismos patógenos y en consecuencia afectar negativamente el vigor de la futura plántula. 39