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XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
CARACTERIZACIÓN DE PROTEASAS PARCIALMENTE PURIFICADAS CON
SOLVENTES ORGÁNICOS A PARTIR DE LOS FRUTOS (GUÁMARA Y COCUIXTLE)
DE DOS ESPECIES VEGETALES Bromelina pinguin Y Bromelina karatas.
Raquel Soltero Lara, Universidad de Guadalajara-CUCEI, [email protected]. Asesora: Dr.
Efigenia Montalvo González, Instituto Tecnológico de Tepic, [email protected].
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
La investigación tiene como fin encontrar péptidos bioactivos con funciones
antioxidantes producidos por las proteasas de las especies vegetales, por lo cual es
necesario saber el comportamiento enzimático de la proteasa en función de los cambios
de temperatura y pH, para estimar su rango óptimo de acción, así mismo es importante
conocer el peso molecular de la proteasa y el grado de hidrolisis en distintos sustratos.
METODOLOGÍA
Como primera instancia se definió el cronograma de actividades que se llevarían a cabo
durante el periodo del verano científico en cual se consideró una revisión bibliográfica,
seguido de una revisión de las técnicas necesarias para medir actividad enzimática para
la determinación del perfil tanto de pH como de temperatura, para conocer el rango de
acción de la enzima.
Una vez estimados los perfiles proseguimos a realizar el grado de hidrolisis a través de
una comparación entre los péptidos producidos utilizando la técnica de Lowry y la
medición de proteínas en el medio con la técnica de Bradford, además de un monitoreo
del cambio de pH durante 2 horas de reacción de la enzima para determinar el grado de
hidrólisis.
CONCLUSIONES GENERALES
La investigación aún se encuentra en proceso, en esta etapa se realizó el estudio de la
enzima para lograr conocerla y saber cómo actuará, y utilizarla de la mejor manera en el
transcurso de la investigación.
Se pudo observar que la proteasas de las dos especies vegetales tienen mayor actividad
enzimática en rangos de pH de 7-7.5. En cuanto a la temperatura, en el caso de la
Guámara su óptima se ubica en los 75°C, mientras que en el Cocuixtle es de 65°C. Las
proteasas estudiadas tuvieron mayor afinidad a los sustratos de soya y albúmina,
obteniendo mayor cantidad de péptidos en la técnica de Lowry. Quedó pendiente la
determinación del peso molecular.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico
Agosto 2014