XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico PURIFICACION DE PROTEASAS INTESTINALES DE INSECTOS PLAGA DE CULTIVOS DE INTERÉS ANTROPOCÉNTRICO Beatriz Alicia Martínez Medina del Instituto Tecnológico Superior de Uruapan, [email protected] . Asesor Cesar Aguirre Mancilla de Instituto Tecnológico de Roque, [email protected] . PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Hoy en día ha habido cambios climáticos que han impactado en los ecosistemas naturales, el nopal tiene una gran ventaja a pesar de estos cambios al poder ser cultivado en gran parte de la superficie de la tierra, particularmente en regiones áridas, semiáridas, ya que es una de las pocas plantas con mecanismo fotosintético especializado que le permite ser tres veces más eficiente que cualquier pasto o leguminosa en convertir agua en materia seca. Además de eso existen algunas desventajas para este cultivo y una de ellas es el insecto picudo de nopal (Cactophagus spinolae) esta plaga afecta directamente a la planta en estado larva o adulto provocando secreciones gomosas, esta plaga al alimentarse del cultivo provoca el debilitamiento de este, la disminución en la producción, y en otros casos la muerte. Por lo tanto es importante estudiar las proteasas intestinales más importantes que se encuentran en el tracto digestivo de dicho insecto que provoca daño severo al cultivo y así mediante la caracterización de estas enzimas y la búsqueda de inhibidores de proteasas naturales, proponer o diseñar estrategias de control más eficientes y amigables con el ambiente para controlar esta importante plaga. METODOLOGIA Para lograr el objetivo de la investigación es necesario llevar a cabo una serie de pasos, el primero es recolectar los insectos directamente de cultivos de nopal infestados, y posteriormente extraer el tracto digestivo de estos, una vez teniendo las muestras intestinales se centrifugan para obtener un extracto intestinal el cual posteriormente se somete a un proceso de separación y purificación por medio de cromatografía liquida de alta resolución (HPLC), para identificar las diferentes proteasas existentes en el tracto digestivo del insecto, una vez obteniendo las muestras separadas por medio de este equipo finalmente se llevara a liofilización para posteriores estudios de caracterización enzimática. CONCLUSIONES Los resultados preliminares de la separación cromatografica obtenido de HPLC, muestra nueve picos de proteína, falta por identificar los que pudieran contener actividad proteolítica, y con esto identificar el número de posibles proteasas en el tracto digestivo del insecto (Cactophagus spinolae). © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014