COPEG

COPEG
PROCEDIMIENTO PARA EL ENSAYO
INMUNOENZIMÁTICO DE DOBLE
ANTICUERPO (SÁNDWICH)- PREPARACIÓN
DE LA MUESTRA-PUNTO CRÍTICO
1.0
OBJETIVO:
Conocer los procedimientos necesarios para el Ensayo Inmunoenzimático de
Doble Anticuerpo, específicamente para la Preparación de la Muestra.
2.0
ALCANCE:
Este paso debe hacerse dentro de la cámara de bioseguridad tomando en
cuenta todas las buenas prácticas microbiológicas. Toda muestra es
considerada altamente infecciosa hasta tener un resultado negativo por ELISA
o por Cultivo Celular.
3.0
PROCEDIMIENTO:
Paso
Descripción
3.1 Este paso está diseñado para tres (3) tipos de muestras:
Líquido del Cultivo Celular, fluido vesicular y tejidos
epiteliales de lesiones. El fluido del cultivo celular y el
líquido vesicular son usados directamente. Los tejidos
epiteliales son usados en una suspensión al 10 %.
Responsable
Personal de
Ladives
3.2 Remueva la muestra del vial con una pinza estéril del
frasco donde fue recogido, pese 1 gramo en un plato Petri.
3.3 Multiplique el peso del tejido por 9 el resultado es la
cantidad de medio MEM que contenga solución alta de
antibióticos que se le va adicionar al macerado.
Por
ejemplo muestra que pese 0.7g, se le adicione 6.3 ml. del
medio.
3.4 Debe picar y macerar el tejido utilizando arena estéril, un
mortero, pilón, tijera y pinzas estériles.
3.5 Transfiera la suspensión a un tubo de centrífuga estéril y
centrifugue a 2.000 r.p.m x 30’ a 4°C.
3.6 Transfiera el sobrenadante que debe estar claro, a un vial
limpio y estéril, el cual servirá para la prueba de ELISA que
utiliza 300 ul. para cada serotipo de la prueba y 1 ml. para
el aislamiento del virus.
Código:
PO-LAD-22
Revisión: 01
Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo
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PROCEDIMIENTO PARA EL ENSAYO
INMUNOENZIMÁTICO DE DOBLE
ANTICUERPO (SÁNDWICH)- PREPARACIÓN
DE LA MUESTRA-PUNTO CRÍTICO
Paso
Descripción
3.7 PUNTO CRITICO: Cuando la muestra es poca se debe
hacer inoculación en células VERO y Riñón de Cordero
para aislar el virus. Dejando la prueba de ELISA por hacer
en caso que se observe efecto citopático.
4.0
DOCUMENTOS DE REFERENCIA
5.0
HISTORIAL DE MODIFICACIONES
FECHA
28/10/08
Código:
PO-LAD-22
Responsable
Personal de
Ladives
MODIFICACIONES
Se modifica el código, antes PT-LAD-28
Revisión: 01
Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo
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