Urocultivo El urocultivo es un examen donde se hace un cultivo de orina con la finalidad de confirmar la presencia de una infección urinaria, como una cistitis o pielonefritis, uretritis. Junto con el urocultivo se solicita la realización de un antibiograma, el cual es realizado por el laboratorio únicamente cuando el resultado del urocultivo es positivo, por medio del antibiograma, es posible identificar los antibióticos a los que es más sensible o resistente la bacteria causante de la infección urinaria, ayudando a definir el mejor tratamiento. Como el resultado de este examen puede demorar unos días, es normal que el médico inicie el tratamiento de forma inmediata con un antibiótico de amplio espectro, es decir, que actúa contra una amplia gama de bacterias, hasta conocer el antimicrobiano específico que servirá para combatir la bacteria, siendo especialmente indicado durante el embarazo, ya que una infección urinaria no tratada durante este periodo puede aumentar el riesgo de aborto. El urocultivo es indicado por el médico cuando la persona presenta síntomas, que incluyen: Dolor o ardor al orinar Secreción vaginal o peneana Orina muy oscura Poca cantidad de orina Sensación de vejiga pesada Picazón y/o enrojecimiento en la región genital Orina con olor fuerte. Cómo se hace el urocultivo Para la realización de este examen, se recomienda recolectar la primera orina de la mañana y descartar el primer chorro, sin embargo, el urocultivo también puede realizarse a partir de orina obtenida durante el día Para recolectar la orina es necesario seguir el siguiente paso a paso: Lavar la zona íntima con agua y jabón antes de recolectar la muestra; Alejar los labios de la vagina, en la mujer, y retraer el prepucio, en el hombre; Se debe descartar el primer chorro de orina; Recoger el resto de la orina en el recipiente. El recipiente (frasco estéril) debe entregarse lo antes posible en el laboratorio para que los resultados sean más fiables, caso esto no sea posible puede mantenerse hasta 2 horas a temperatura ambiente o refrigerarse a 4ºC durante un tiempo máximo de 24 horas. Otra forma de obtener la muestra para el urocultivo puede ser con el uso de una sonda urinaria, también llamado cateterismo vesical, para evitar contaminar la muestra, el cual se realiza generalmente en personas que se encuentran internadas. En los casos en que el urocultivo es positivo, es decir, se verifica el crecimiento de un agente infeccioso, se realiza el antibiograma con el fin de identificar los antimicrobianos, como antifúngicos y antibióticos, más adecuados para el tratamiento. Examen de urocultivo en bebés Los bebés sufren a menudo infecciones en las vías urinarias, ante la sospecha el pediatra pedirá un urocultivo para detectar si hay bacterias que estén ocasionando alguna infección. Hay diferentes métodos de recogida de orina en bebés, aunque el objetivo es que sea de manera simple, confiable y lo menos invasiva para el niño. Los diferentes métodos para recolectar la orina en los bebés son las siguientes: 1. Bolsa adhesiva perineal Esta bolsita se puede conseguir en las farmacias y es la técnica más utilizada para recolectar muestras de orina en los lactantes. Para poder tomar la muestra de orina del lactante en primer lugar es importante desinfectarse las manos y lavar el área genital del bebé con una gasa impregnada en jabón neutro, luego enjuagar con agua y quitar los restos del jabón, después se quita el adhesivo de la bolsa estéril y se pega bien en los genitales del bebé, en los niños se pega dentro del pene y los testículos, en las niñas por fuera de los labios mayores, se despega la bolsita cuando haya orinado, se dobla y se lleva rápidamente al laboratorio. En este método si no es realizado con mucho cuidado tiene alto riesgo de contaminación de la orina que se encuentra en la bolsa, resultando un falso positivo de infección urinaria. 2. Técnica de estimulación vesical Esta técnica se demuestra efectiva, segura y rápida ya que evitaría otras formas de recolección más molestas, pero es necesario de un personal entrenado. El procedimiento consiste en maniobras para estimular la vejiga del bebé, se realizan golpecitos suaves con los dedos en la zona baja del abdomen y masajes circulares en la zona lumbar de la espalda. Estas maniobras se van repitiendo hasta lograr que el niño orine y así recoger la orina en un frasco esteril. 3. Punción suprapúbica Es el mejor método para obtener muestras de orina no contaminadas en bebés, aunque es una técnica más invasiva y molesta. Para realizar la colecta de orina primero se desinfecta la zona pubiana y luego se punza con una aguja adecuada, se aspira la orina y se vuelca al frasco esteril. Además de estas técnicas, también hay otra manera de tomar una muestra de orina en los bebés que es por la colocación de una sonda por la uretra y se recoge una porción del chorro de orina estéril, la cual debe ser realizada por una enfermera especializada, pues este método puede causar muchas molestias para el bebé, principalmente si posee una fuerte fimosis. Esta técnica es recomendada principalmente en bebés que sufren de infecciones urinarias recurrentes. Otros exámenes de orina pueden detectar infección Aunque el urocultivo es el principal examen para diagnosticar la infección urinaria, el examen de orina común también llamado orina tipo 1, EAS u orina de rutina, también puede proporcionar algunos indicios de infección urinaria como la presencia de bacterias, leucocitos, células epiteliales y/o sangre en la orina, nitritos positivos o presencia de filamentos. Además de esto, puede producir cambios en el color, el olor y la consistencia. Agar Sangre El medio de cultivo agar sangre ovina proporciona el crecimiento de la gran mayoría de las bacterias Grampositivas y Gram-negativas, así como de hongos (mohos y levaduras), a partir de una base rica y complementada, ofreciendo óptimas condiciones de desarrollo para microorganismos no fastidiosos. La conservación de los eritrocitos íntegros favorece la formación de halos de hemólisis nítidos, facilitando la diferenciación de algunas especies hemolíticas. Es un medio enriquecido y diferencial. Es la combinación de un agar nutritivo con sangre de mamiferos (normalmente oveja, aunque también hay de conejo o humanos) a una concentración de 5-10%. Se usa para aislar principalmente microorganismos del género Streptococcus (S. pyogenes y S. aureus como más comunes). Es diferencial para detectar actividad hemolítica (lisis y digestión de eritrocitos) según si las bacterias pueden hacer β-hemolisis (lisis completa y se ve un halo incolor alrededor de la colonia) o α-hemolisis (hemolisis parcial y aparece un halo verdoso alrededor de la colonia). Composición Formulación Concentración/L Hidrolizado pancreático de caseína 12.0 Hidrolizado péptido de tejido animal 5.0 Extracto de levaduras 3.5 Extracto de bovino 3.0 Almidón de maíz 1.0 Cloruro de sodio 5.0 Ágar Base 15.0 Sangre ovina, desfibrinada 5% H2O ultra purificada 1L pH 7,3 ±0,2 a 25ºC La formulación se puede ajustar y/o complementar siempre que sea necesario cumplir criterios de desempeño del producto. Tipos de muestras - Se pueden utilizar muestras clínicas como: orina, secreciones y otros fluidos corporales, materiales biológicos diversos, muestras o cualquier otra muestra que pueda contener microorganismos con capacidad de desarrollarse en este producto. El laboratorio debe establecer criterios de recolección, rechazo y conservación de las muestras de acuerdo con su política de calidad. -Siempre considerar las necesidades específicas de los microorganismos que se quieren recuperar en los análisis, microorganismos con necesidades especiales (complementos específicos o ambientes controlados) pueden no presentar crecimiento adecuado al sembrarse en medio de cultivo que no presente los requisitos mínimos. Precauciones y cuidados especiales. - Producto destinado al uso diagnóstico in vitro; - No usar materiales con la fecha de caducidad expirada o que presenten sello de calidad roto o alterado. - Antes de descartar el material usado, esterilizarlo en autoclave a 121ºC por 20 minutos. El medio contiene, peptona de caseína y extracto de levadura que proveen nitrógeno, carbono, aminoácidos y vitaminas. Proteoma peptona es la fuente de nitrógeno para la sangre. El equilibrio osmótico se mantiene gracias a la concentración de cloruro de sodio y el agar utilizado como agente solidificante. Está complementado con sangre ovina desfibrinada a 5%, factores de crecimiento para microorganismos fastidiosos como, por ejemplo, el Streptococcus pneumoniae, siendo la base para determinar los niveles de hemólisis. Agar McConkey Es un medio selectivo y diferencial. En este medio crecen bacterias Gram negativas tanto aerobias como anaerobias facultativas incluyendo todas las especies de la familia Enterobacteriaceae. Contiene sales biliares y cristal violeta inhibiendo el crecimiento de Gram positivas. Es diferencial porque permite detectar bacterias que fermentan Lactosa (L+) de las que no (L-). Las L+ (Escherichia coli, Klebsiella) degradan la lactosa acidificando el medio haciendo que las colonias y el medio tomen un color rosado o rojizo, las L- (Salmonella, Proteus, Yersinia) al no degradar lactosa no hacen este cambio de color en el medio. Composicion Sales biliares y cristal violeta En este sentido, el agar MacConkey tiene una composición compleja. En primer lugar, contiene sales biliares y cristal violeta. Estos elementos se encargan de inhibir el crecimiento de bacterias grampositivas y algunos bacilos gramnegativos exigentes. A su vez, favorece el desarrollo de los bacilos gramnegativos que no son afectados por estas sustancias. Por ello es un medio selectivo. Se dice que es ligeramente selectivo en comparación a otros medios que igualmente inhiben el crecimiento de bacterias grampositivas y también de la mayoría de las bacterias gramnegativas. Peptonas, polipectonas y lactosa Contiene sustancias que aportan los nutrientes necesarios a los microorganismos que se desarrollan en este medio, como las peptonas, polipectonas y la lactosa. La lactosa es el punto clave para que el medio sea diferencial, pues los microorganismos que poseen la capacidad para fermentar la lactosa desarrollarán colonias rosadas fuertes. Algunas bacterias pueden fermentar la lactosa lenta o débilmente, desarrollando colonias color rosado pálido, y siguen siendo lactosa positiva. Las que no fermentan la lactosa utilizan las peptonas como fuente de energía, produciendo amoníaco, alcalinizando el medio. Por ello las colonias que se originan son incoloras o transparentes. Indicador de pH El cambio de color se logra a través de otro compuesto esencial que posee el agar MacConkey. Este compuesto es el indicador de pH, que en este caso es el rojo neutro. La fermentación de la lactosa genera la producción de ácidos mixtos. Los mismos acidifican el medio a un pH por debajo de 6,8. Esto hace que el indicador de pH vire hacia una tonalidad rosada intensa. La intensidad del color puede variar dependiendo del pH final. Agua destilada, cloruro de sodio y agar Por otra parte, contiene agua destilada y cloruro de sodio que le dan la hidratación y equilibrio osmótico al medio. Finalmente, el medio contiene agar, que es la base que proporciona la consistencia de medio sólido. El medio agar MacConkey preparado debe tener un pH final ajustado a 7,1 ± 0,2. Otras variantes de agar MacConkey Agar MacConkey con sorbitol: este medio fue diseñado para distinguir la cepa enteropatógena (Escherichia coli enterohemorrágica O157:H7) del resto de las cepas de Escherichia coli. Este medio cambia el carbohidrato lactosa por sorbitol. Las cepas de E. coli enterohemorrágicas O157:H7 se diferencian del resto porque no fermentan el sorbitol y, por tanto, se obtienen colonias transparentes, en cambio, el resto de las cepas E. coli sí fermentan el sorbitol y las colonias son rosadas fuertes. Agar MacConkey sin cristal violeta, ni sal: este agar difiere mucho del agar MacConkey clásico, pues al no tener cristal violeta pueden crecer bacterias grampositivas. Por otra parte, la ausencia de sal inhibe la aparición de swarming sobre el agar producido por algunos bacilos entéricos, como los del género Proteus, y así facilitar el aislamiento de todas las bacterias presentes, incluyendo bacterias grampositivas. Agar MacConkey con cefoperazone: esta variante de agar MacConkey fue diseñada para aislar inicialmente Laribacter hongkongensis y posteriormente se dieron cuenta de que era útil para aislar Arcobacter butzleri. Ambos son bacilos gramnegativos ligeramente curvados resistentes a cefoperazone. Estas bacterias han sido recientemente vinculadas como causantes de gastroenteritis y diarreas adquiridas en individuos asiáticos y europeos, perfilándose como dos potentes patógenos emergentes. El antibiótico permite inhibir la flora acompañante del tracto gastrointestinal, lo que favorece el desarrollo de estas bacterias, evitando que pasen desapercibidas, ya que las mismas requieren 72 horas para crecer. Agar MacConkey preparada con agua de mar al 10% v/v: esta variante es útil para la evaluación de indicadores sanitarios bacterianos de contaminación fecal, entre ellas coliformes totales y coliformes fecales en aguas saladas recreacionales (playas y bahías). Investigadores han demostrado que el medio preparado de esta manera aumenta significativamente la recuperación de estos microorganismos en el ambiente salino, en comparación con el uso de agar MacConkey preparado con agua destilada. Esto se debe a que en el medio modificado se estimula el crecimiento de bacterias que están de forma fisiológica en un estado de latencia “viables, pero no cultivables”, por tanto, no son recuperables en medios convencionales.
