INGENIERÍA GENÉTICA DISEÑO DE PRIMERS PARA REGIÓN ESPECIFICA DE LA PROTEÍNA ENOLASA EN D. MELANOGASTER Jonathan Jair González Ruiz Ingeniería en biotecnología Universidad Politécnica de Quintana Roo Paso 1. Selección del Gen El gen que seleccionamos es de la especie Drosophila melanogaster. Su ID de búsqueda es 33351, y está presente en el cromosoma 2L; además, contiene 4869 pares de bases. Este gen codifica a la proteína enolasa, la cual es una enzima clave en la vía glucolítica ya que cataliza la reacción reversible de deshidratación del 2-D-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato >NT_033779.5:c1729636-1724768 Eno [organism=Drosophila melanogaster] [GeneID=33351] [chromosome=2L] AGGGCTTCCAACACACTGCCTTTGCGCCAACATTCACATCAAAATTCAACCCCATCAGTTTGGCTAACCA TTTCTTTTTATATAAAAGTAAGTAAACTAAGAACTAATCCTAGGCCTGCAGGAAGTCTCCGAGATTGCCA CATATTTTGTCGATTTCCGCACATCCCGATTGCTCCAGCGCTGAAATGGCATTGGCGAGGGCCACGGTTT CTTTCAGGGAATGGGCCTTCAACCATATCCTGCCGTTGACTCCCACAGCGATCTCGTAGGGCAGTTCCCG GGTAAGAGCGGCGAGAACAGGGCAGTTTTCCCGCAGCAGCATCCTTCCCAGATTCAGGCTGCACTTGAAG AAGAATCCATCGGTGAGGACGCCCAGTTTGCCACTTTTGCCCACCGAGTTGACGCAGACCAGCTCCGGTT CAATGTCCGCGCTTGCATTCAGGACTCTCGCGTAAATCAGATCACCGGGGATCAGATCCGGGCGATTCTT CTTGCTGGCCGCCTCAAAGGCGAGATACGATATGGAGGCTGTGTCCGTTGCTCCGATGTCCACGCGGTAC AGATCGCCCGCCTTGGCTCGCACAATGCCCAGAATGAGATCCCCGCGTGCCGGGATGTACCTTCTCTGGT AGTTGTCCACCCAGAAGGTGCCGGGTTCCTTGTGTCGAAGTGGGCCCGCCTTGCTAGCCACCACCGTGTC ATCCAGACGCCGCAGTCCCGGTCCGAGTATCACCCGCTTGCTCTTGGCCAGCTCCTCAATGGCCGCAATT CGCTCACCGGGCATAACTATTGTGCTGGTCGCGCTCATTTTAATGTTGCTTTTACGATTTGAAAACTCCA AACAAAAAATCCGCGTGTGTCTTTCAAAACATATGGTCAAGTCGAGGACTTTCCAACACTGCCATTGTCA GCCCTGGTCTTAAAGTTAAATTTAACAGTAGTTGTAAAGAACATAAATATTCAAATTATTTTTGCCCCTT CTTATTTTATTATTTTCAAAATGCTTACGATTTTAATTATTAAGATGAACTTAAAAAAGTAACAGAAAAA TTATATTTAGTCAAATTGTAATTGTTCTATATTACTGAATGATCTTAAAAATGCAAAGAAAGTTTTAAAG AGCTAACAGCGTGTGGGCGGCAATGTTAACCAACACATATGCAATTTTTTCCCGATCAGCTGTGCTGCTA TAAGCATAATCGTACGATTTGTTAAAATCCGCTTTGCATTTATTTGTTCTAATTTATGGCAGCTAAAAAG CGTGACTAACCACAAGTATGTGACTTTGAATGACCCGATTGTCCAGAAACCACGGGAACATTTCATTATC ATTGGTTGTTACACTTCTCTTGACGCCATTTGATTGTTTATGCTTTATTAACGAGAGCATTTATTATTAT GTAGATAGACATGCAATCCACAGCTACGTGTGGATCCCGATTACTCTAACCTTGTGCGAAGGTCAATTTT CCCCAAAAAATATAGGAAACGTACCAGGGAAAACAACAAAAAAGGGAAAGCGCACCCCCACACTGAAAAC CGGCGAGCACCTGGAAACGCATACATATAAAAGGAGAGTAAATGTAAGTGTCCCTCTCTTTTCCACACTT AGAGATGGGCAAAAATACATCGCCTAAGCTGAGCTTTTAAAATTTATGAATATTAAATTTATCATATAGC 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Delimitar la región de amplificación Dentro de este gen inferior a 5000 pb amplificaremos una región especifica de 300 a 500 pb. Ahora, procedemos a buscar funciones específicas de las regiones de nuestro gen, esto con la finalidad de conocer a nuestro gen con más detalle, además de amplificar alguna región específica y no amplificar regiones al azar. Determinamos que existe una región asociada al “ribosomal RNA processing 40 (NCBI Reference Sequence: NP_001285565.1)” entre las primeras 1000 pb. Paso 3. Realizar pruebas para obtener primers específicos
