FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA ASIGNATURA: Análisis Clínicos II PRACTICA N ° 5 TEMA: Lipoproteínas DOCENTE: Mg. Enrique León Mejía TURNO: Mañana INTEGRANTE: CICLO: VII Gutiérrez Cáceres Nataly FECHA DE LA PRACTICA: 20-02-20 FECHA DE ENTREGA: 27-02-20 2020-I 1 INDICE Pág. 1. Introducción ........................................................................................ 4 2. Marco teórico ....................................................................................... 5 3. Parte experimental ............................................................................... 7 4. Resultados............................................................................................ 9 5. Interpretación ..................................................................................... 10 6. Cuestionario ....................................................................................... 10 7. Referencias bibliográficas ................................................................ 11 2 LIPOPROTEINAS 3 1- INTRODUCCION: Las lipoproteínas son conjugados de proteínas con lípidos, especializadas en el transporte de estos últimos y se dividen en varios grupos según su densidad: HDL: Lipoproteínas de alta densidad. Estas se conocen como las protectoras. Ya que no permiten que las otras lipoproteínas que son las agresoras se peguen a las células y nos provoque daños en nuestro cuerpo. IDL: Lipoproteínas intermedias. LDL: Lipoproteínas de baja densidad. Estas son las agresoras y son las que más daño nos pueden producir porque contienen mayor cantidad de colesterol, estas cantidades de colesterol y ésteres asociadas a la LDL son habitualmente de unas dos terceras partes del colesterol plasmático total. Su importancia radica en el conocimiento de la homeostasis del colesterol que puede comprenderse revisando las consecuencias que tienen las concentraciones plasmáticas elevadas de colesterol cuando se mantiene de forma prolongada. El colesterol es muy insoluble y se acumula en los leucocitos que se depositan en las zonas de lesión sobre las paredes internas de las arterias. Si las concentraciones de colesterol son demasiado altas para su posterior eliminación hacia el torrente sanguíneo, estas células quedan repletas de depósitos grasos, que luego se endurecen formando una placa, y finalmente obstruyen vasos sanguíneos causando infartos, o sea, ataques cardiacos. VLDL: Lipoproteínas de muy baja densidad y son precursoras de las lipoproteínas se baja densidad. 4 2- MARCO TEÓRICO: Los lípidos son un grupo de compuestos químicamente diverso que desempeñan funciones biológicas muy variadas. Los lípidos en el organismo provienen tanto de la síntesis “de novo” como de la dieta. Al ser compuestos apolares (insolubles en agua) necesitan un sistema de transporte para su distribución por el organismo. Para poder circular en el plasma, se unen a proteínas específicas (Apolipoproteínas) formando estructuras complejas, que se denominan lipoproteínas (Lps). Las Lps son estructuras esféricas cuyo núcleo central, hidrofóbico, contiene el colesterol esterificado y los triacilgliceroles (triglicéridos; TG) y está rodeado por una capa hidrofílica externa compuesta de fosfoacilgliceroles, proteínas y colesterol libre. Existen diversos tipos de Lps. Las principales Lps del plasma son: Quilomicrones (QM), lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL), lipoproteínas de densidad intermedia (IDL) lipoproteínas de baja densidad (LDL) y lipoproteínas de alta densidad (HDL). 5 Una concentración elevada de QM y/o VLDL por encima de valores normales, se asocia a una elevación en la concentración de triacilgliceroles. Un aumento de LDL caracteriza al hipercolesterolemia familiar.Cualquier alteración en los niveles normales de lípidos plasmáticos (fundamentalmente colesterol y triglicéridos) se conocen como DISLIPEMIAS. Son una serie de diversas condiciones patológicas cuyo único elemento común es una alteración del metabolismo de los lípidos, con su consecuente alteración de las concentraciones de lípidos y lipoproteínas en la sangre. Se clasifican según su etiología en dos grandes grupos: 1. 2. HIPOLIPIDEMIAS: Raras y de origen genético HIPERLIPIDEMIAS: Muy comunes en la población general, causante de enfermedades cardiovasculares. A su vez las hiperlipidemias se clasifican en: a. Hiperlipidemias primarias: se deben a una alteración primaria del metabolismo de las Lps, es decir a una alteración relacionada intrínsecamente con las rutas del metabolismo lipoproteico. Son de origen genético. Muchas veces en las primarias no llegamos a conocer el defecto genético responsable pero estos pacientes presentan rasgos (entre ellos el tipo de herencia) que permiten efectuar una orientación diagnóstica. Las principales dislipidemias de causa genética son la Hipercolesterolemia Familiar, la Dislipidemia Familiar Combinada, la Hipercolesterolemia Poligénica, la Disbetalipoproteinemia, las Hipertrigliceridemias Familiares y el déficit de HDL. Su prevalencia a nivel poblacional es alrededor del 4 %, lo que sube a 30-40% en población portadora de cardiopatía coronaria. b. Hiperlipidemias secundarias: consecuencia de otras patologías y/o factores ambientales. Las principales patologías causantes de hiperlipidemias secundarias son la obesidad, la Diabetes Mellitus, el hipotiroidismo, la colestasia, la insuficiencia renal y el síndrome nefrósico. En cuanto a los factores ambientales, los principales son cambios cualitativos y cuantitativos de la dieta y algunas drogas. Sin embargo, puede ser que un mismo paciente tenga una causa primaria y secundaria de dislipemia. Esto sucede cuando la dislipemia persiste después de haber corregido la causa secundaria. 6 3- PARTE EXPERIMENTAL: 3.1. Materiales y Equipos para usar: 1. Tubos de ensayo 13x100mm. 2. Gradilla de metal. 3. Pipeta serológica 2mL, 5mL 4. Baguetas. 8. Micropipetas 10,50,1000uL. 9. Beacker 250 mL 10. Mechero de Bunsen 11. Goteros Pasteur 12. Probeta 250mL 13. Embudo de vidrio 14. Matraz 250mL 15. Pinzas de madera 16. Espectrofotómetro. 17. Centrifuga. 3.2. Reactivos: a) Muestra: suero sanguíneo b) Reactivo precipitante: - Sulfato de dextrano - Acetato magnésico c) Solución standard: (200 mg/dl) 7 3.3. Procedimiento : 1 Reacción de la precipitante 1 gota 300 ul suero Mezclar, reposo por 15 minutos, centrifugar 15 minutos a 2000 rpm. Sobrenadante HDL-C LDL VLDL 8 2 Determinación: HDL-C 2 2 B 2 R. Enzimático (ml) 1.0 1 1 Sol.standard (ml) --------------2 Sobrenadante (ml) --------------2 1 1 S 1.0 D 1.0 0.01 ------------ ------------------ 0.01 Mezclar, incubar 10 minutos a temperatura ambiente // Luz espectrofotómetro a 505 nm. ESPECTROFOTOMETRO - Lectura de absorbancia desconocido: 0.182 nm Lectura de absorbancia del standard: 0.412 nm 4- RESULTADOS: CALCULOS: HDL-C(mg/dl) = AbsxD x (200) x (1.13) Abs.St Hallando: HDL-C(mg/dl) = 0.182 x (200) x (1.13) 0.412 9 99,834 mg/dl 5- INTERPRETACION: Valores normales 40,0 mg/dl El resultado obtenido fue de 99.83 mg/dl, quiere decir que se encuentra en una buena cantidad de colesterol HDL, conocido como colesterol bueno. Esto significa que, a diferencia de otros niveles de colesterol, mientras más elevado sea el colesterol HDL, mejor. Usted puede elevar su colesterol HDL dejando de fumar, bajando el peso adicional y siendo más activo físicamente. 6- CUESTIONARIO: 1.- ¿Cuál es la importancia clínica de la determinación de HDL-C? La función principal de las HDL en el metabolismo lipídico es la captación y transporte de colesterol desde los tejidos periféricos al hígado en un proceso conocido como transporte reverso de colesterol (mecanismo cardioprotectivo). El HDL-colesterol bajo, está asociado con un alto riesgo de enfermedad cardíaca. Por este motivo la determinación de HDL-colesterol es una herramienta útil en la identificación de individuos de alto riesgo. 2.- ¿Cuál es el fundamento de la determinación de HDL-C? FUNDAMENTOS DEL METODO El presente, es un método homogéneo que emplea dos reactivos. En la primera etapa de la reacción, se solubiliza y consume el colesterol libre o unido a proteínas distintas de la HDL en una reacción que involucra a colesterol oxidasa (CHO), peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil)- 3-toluidina disódica (TOOS) dando lugar a un producto no coloreado. En una segunda etapa, un detergente solubiliza específicamente las HDL. El HDL-colesterol es liberado para reaccionar con colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa y TOOS, dando un producto coloreado: 10 3.- ¿Qué importancia clínica tiene la determinación del VLDL? El VLDL es considerado un tipo de colesterol malo, así como el LDL, porque sus valores elevados en la sangre hacen con que la grasa se acumule a nivel de las arterias formando placas ateromatosas, aumentando el riesgo de sufrir enfermedades cardíacas. El colesterol VLDL se produce en el hígado y tiene la función de transportar los triglicéridos por el torrente sanguíneo, las cuales son moléculas de grasa que producen energía en las células. Por lo que valores elevados de este colesterol son debido al exceso de grasa y de carbohidratos en la alimentación, además del exceso de peso y de la falta de actividad física. 4.- ¿Qué patologías presenta cuando existen incrementos o disminución de LDL-C? Si tiene un nivel alto de colesterol LDL, esto significa que tiene demasiado colesterol LDL en la sangre. Este LDL adicional, junto con otras sustancias, forma placa. La placa se acumula en sus arterias; lo que se conoce como arterioesclerosis. La enfermedad de las arterias coronarias ocurre cuando la acumulación de placa se encuentra en las arterias de su corazón. Hace que las arterias se endurezcan y se estrechen, lo que disminuye o bloquea el flujo de sangre a su corazón. Dado que su sangre transporta oxígeno a su corazón, esto significa que su corazón no podrá obtener suficiente oxígeno. Esto puede causar angina (dolor de pecho) o, si el flujo de sangre está completamente bloqueado, un ataque al corazón. 7- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: APLICACIÓN DE TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABÓLICA/ AUTOR: Aguilar Aida / Disponible en: http://www.slideshare.net/aureuzz/determinacion-de-lipoprotenas-de-altadensidad-hdl-en-suero TRABAJOS MÉDICOS-CONSULTA DE ARTÍCULOS DE MEDICINA/ AUTOR: Lourdes Sánchez/ Disponible en: http://trabajosmedicos.blogspot.com/2012/08/determinacion-de-colesteroltotal-y-ldl.html TRABAJOS MÉDICOS-CONSULTA DE ARTÍCULOS DE MEDICINA/ AUTOR: Lourdes Sánchez/ Disponible en: http://trabajosmedicos.blogspot.com/2012/08/determinacion-de-colesteroltotal-y-ldl.html 11
