aspergillus

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Aspergilosis en aves rapaces en cautiverio: descripción de dos casos
[Aspergillosis in captive birds of prey: report of two cases]
Conference Paper · July 2010
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7 authors, including:
Carlos Daniel Gornatti Churria
Javier Anibal Origlia
National University of La Plata
National University of La Plata
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Javier Uriarte
Miguel Piscopo
National University of La Plata
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LAS SIGUIENTES EMPRESAS HACEN POSIBLE LA EDICIÓN ELECTRÓNICA
DE ESTE NÚMERO DE LA REVISTA DE LA SOCIEDAD DE MEDICINA VETERINARIA
REVISTA DE MEDICINA
VETERINARIA
ISSN 1852-771X. VOLUMEN 91 – N° 5/6 – AÑO 2010
SOCIEDAD DE MEDICINA VETERINARIA
REPÚBLICA ARGENTINA
Revista de Medicina Veterinaria
Creada el 6 de Agosto de 1915
Buenos Aires, Argentina
PUBLICACIÓN BIMESTRAL
ISSN 1852-771X
Latindex Catálogo Folio Nº 13.462
Abstracts del Commonwealth Agricultural Bureau (CAB)
Su objetivo es publicar trabajos originales e inéditos relacionados con las Ciencias Veterinarias para mantener actualizados a
los socios de la Sociedad de Medicina Veterinaria, acrecentar su perfeccionamiento y brindar un medio de jerarquía para que la
comunidad científica del país pueda difundir conocimientos relacionados con la problemática local de las Ciencias Veterinarias.
Desde su iniciación es norma que los artículos que se publican sean juzgados previamente por árbitros que dictaminan sobre sus
merecimientos. A las normas de este referato y a las de redacción y publicación de la Revista se accede en www.someve.org.ar.
CONSEJO EDITORIAL
DIRECTOR
Jorge E. B. Ostrowski, MV (U.B.A. y Hannover), Dr. med. vet. (Hannover); ex Profesor titular de las Universidades de Buenos Aires,
Nacional del Litoral y Nacional de La Plata; ex Investigador Independiente, CONICET.
SECRETARIO
Claudio Stiebel, MV (U.B.A.), MS (Auburn), Dpto. Zoonosis, Municipalidad Gral. San Martín, Prov. de Buenos Aires.
CONSEJEROS
Adela Agostini, MV (U.B.A.), Diplomada en Salud Pública (U.B.A.), Especialista en Docencia Universitaria, ex Profesora Regular
Asociada de Veterinaria en Salud Pública, Universidad de Buenos Aires.
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Animal, Universidad de Buenos Aires.
Nélida V. Gómez, MV (U.B.A.), Dra. de la U.B.A., Profesora Regular Titular de Clínica Médica de Pequeños Animales, Universidad
de Buenos Aires, Académica de Número de la Academia Nacional de Agronomía y Veterinaria.
María Isabel Pasini, MV (U.B.A.), Ms en Política y Gestión de la Ciencia y la Tecnología (CEA-U.B.A.); Secretaria de la Red Regional
de Bioseguridad (RNBio) del Programa de Biotecnología para América Latina y el Caribe (UNU-BIOLAC); ex Investigadora en el
CICV del INTA, Castelar.
Carlos A. Rossetti, MV (U.B.A.), MS en Salud Animal (U.B.A.), PhD (Texas A&M University); Investigador principal, Instituto de
Patobiología – CICVyA-CNIA (INTA-Castelar); Ex-Docente Área de Patología básica – Fac. Cs. Vets (U.B.A.).
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Sociedad de Medicina Veterinaria, Buenos Aires, Argentina.
PRODUCCIÓN
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68
Revista de Medicina Veterinaria
Volumen 91 – N° 5 / 6 – Año 2010
Índice / Contents
Introducción a la medicina veterinaria Darwiniana. Aplicaciones de la teoría de la evolución en
la práctica veterinaria. Vaccinología, zoonosis y bienestar animal como ejemplos de aplicación.
Introduction to the Darwinian veterinary medicine. Applications of the theory of evolution in the veterinary practice. Immunization, zoonosis and animal welfare as examples of application.
Capitelli, G.M.; Ferrari, H.R.; López, H.
71
VIIº R.A.PA.VE.
Séptima Reunión Argentina de Patología Veterinaria
76
I. Rumiantes
II. Pequeños animales
III. Animales no tradicionales
IV. Patología experimental
V. Equinos
VI. Porcinos
81
107
129
143
154
158
Publicación bimestral, fundada el 6 de agosto de 1915. Los artículos de la Revista no pueden ser reproducidos total o parcialmente, sin la autorización escrita de
la Sociedad de Medicina Veterinaria. Las opiniones expresadas por los autores son de su exclusiva responsabilidad y no reflejan necesariamente los criterios de la
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69
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Producción de Alimentos y Seguridad Alimentaria y de Zoonosis
REVISTA DE MEDICINA VETERINARIA - REGLAMENTO INTERNO
Art. 1º. La Revista de Medicina Veterinaria será conducida por el Director de la Revista, con la colaboración y asesoramiento de una Subcomisión
de Revista, denominada en este caso Consejo Editorial, compuesta por seis miembros, socios activos o vitalicios de la Sociedad. El Director de
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Art. 3º. El Director de la Revista será el responsable ante la C. D. de su marcha y es el nexo natural con ésta.
Art. 4º. Los miembros del Consejo Editorial durarán dos años en el desempeño de sus funciones, pudiendo ser reelegidos indefinidamente como
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d) Tratar que la Revista ofrezca la mayor amplitud en su contenido académico, tratando de conseguir la mayor corrección posible en la composición tipográfica, la mayor regularidad en la fecha de su aparición y la mayor variedad posible en el material publicado.
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del Consejo Editorial deban conocer.
Art. 8º. Toda norma necesaria no contemplada en este reglamento será adoptada por el director de la revista ad referéndum de la C. D.
70
Inmunología
Rev. Med. Vet. (B. Aires) 2010, 91, 5/6: 71 - 75
Introducción a la medicina veterinaria Darwiniana. Aplicaciones de la teoría de la evolución
en la práctica veterinaria. Vaccinología, zoonosis y bienestar animal como ejemplos de
aplicación.
Capitelli, G.M.1; Ferrari, H.R.2; López, H.3
1. Cátedra de Anatomía. 2. Cátedra de Bienestar y Comportamiento animal.
Facultad de Cs. Veterinarias (UBA). Chorroarín 280, C1427CWO, Ciudad Autónoma de Buenos Aires.
3. Cátedra de Enfermedades infecciosas. Facultad de Ciencias Médicas (UBA).
Paraguay 2155 C1121ABG. Ciudad Autónoma de Buenos Aires.
*correo electrónico: [email protected]
No existe conflicto de intereses.
Palabras clave
Etología, Bienestar animal, Evolución, Medicina Veterinaria
Darwiniana, Psicología evolucionista, Enfermedades infecciosas.
Keywords
Ethology, Animal Welfare, Evolution, Darwinian Veterinary
Medicine, Evolutionary Psychology, Infectious Diseases.
RESUMEN
En el presente trabajo se plantea la introducción de la MVD
(Medicina Veterinaria Darwiniana) desde una visión transdisciplinaria biopsicocultural como abordaje en medicina veterinaria en temas de bienestar, comportamiento animal y enfermedades infecciosas.
SUMMARY
Introduction to the Darwinian veterinary medicine.
Applications of the theory of evolution in the veterinary
practice. Immunization, zoonosis and animal welfare as
examples of application.
In this article Darwinian Veterinary Medicine (DVM) is
described as a bioethocultural transdiciplinary point of
boarding of subjects such as animal behaviour and Infectious
diseases.
Introducción
Medicina Darwiniana
En la actualidad, la teoría de la evolución por selección natural, elaborada
y refinada a partir de la original propuesta darwiniana10,23 opera a modo de
paradigma para las ciencias biológicas.
Entonces, ¿Qué papel juega en la medicina, y en la medicina veterinaria en
particular?
En medicina humana, esta teoría
como tal es poco o nada utilizada
hasta el extremo de que, en un análisis
de citas en trabajos de revistas médicas, prácticamente no se encuentran
relaciones con el tema, y cuando las
hay, es a través de otros campos18 y no
directamente.
Los veterinarios han manejado frecuentemente un enfoque mecanicista
con tendencia positivista en la aplicación de la teoría de la evolución,
fundamentalmente en los temas tales
como defensas del huésped, virulencia,
conflicto genético y adaptación parcial
a un ambiente en modificación21.
Esto es especialmente significativo
dado el actual desarrollo de una medicina darwiniana, la que es una reinterpretación (redefinición) de la medicina humana, a partir de la teoría de la
evolución.
La medicina darwiniana permite reconocer que las enfermedades necesitan
una explicación de los mecanismos
corporales en términos evolutivos y el
por qué la selección natural ha dejado
al cuerpo vulnerable a la enfermedad.
En lugar de fenómenos tan específicos
como el equilibrio ácido-base, el ciclo
tricarboxílico de Krebs o la etiopatogenia de la tuberculosis, la teoría de la
evolución ayuda a los médicos a entender por qué la enfermedad existe,
qué ambientes aumentan el riesgo, y
cómo interacciona el tratamiento con
la enfermedad. Tiene aplicación directa
en la investigación médica, al mismo
tiempo de proveer un nuevo paradigma
para entender por qué nuestro cuerpo
es vulnerable a la enfermedad18.
Por cada rasgo observado, es pertinente realizarse cuatro preguntas:
¿Cuál ha sido su ontogenia?,
¿Cuál ha sido su filogenia?,
¿Cuáles son sus mecanismos de regulación?,
¿Cuáles son sus efectos en la supervivencia y la reproducción?
Estas cuatro, llamadas las cuatro preguntas de Tinbergen22, actúan a modo
de paradigma en el estudio biológico
del comportamiento (etología), y son
aplicables a la práctica médica, a la
práctica veterinaria, a la psicología y a
la antropología como ciencias madres.
A partir de ellas, se trata de dar una
respuesta a la pregunta sobre la alteración del funcionamiento de los organismos19.
Pero la teoría de la evolución da cuenta
de las adaptaciones, no de las disfunciones. Por ende: ¿por qué la patología
depresiva se observa con tanta frecuencia en los seres humanos traduciéndose en sufrimiento? ¿Cómo lo
explicamos? Si la selección natural es
tan poderosa que puede delinear cuerpos tan perfectos en tantos aspectos,
¿por qué entonces nuestro diseño estructural nos hace vulnerable a tantos
cientos de enfermedades?
Hay unas pocas explicaciones evolucionistas para este planteo.
Primero, se trata de eventos azarosos,
raros, que no son “identificables” por la
selección natural, y también de eventos genéticos, que caen fuera de su
dominio.
Segundo, hay problemas que surgen
del hecho de que nuestros cuerpos no
fueron diseñados de la nada, sino desde un linaje que nos remonta al primer
ser vivo, y algunas de las estructuras
71
elaboradas en el camino en la actualidad resultan con déficit adaptativos.
Tercero, la competencia entre organismos. Mientras nuestros cuerpos se
preparan a resistir, otros organismos
se preparan a vulnerarnos. Este es un
fenómeno que se llama co-evolución.
Cuarto, existen equilibrios en la naturaleza que pueden modificarse, interacciones que están sujetas a la dinámica
de un constante devenir y la co-evolución mencionada, que hacen que ciertos rasgos no puedan desarrollarse
más sin comprometer a otros.
Quinto, la selección natural no nos preparó para nuestro ambiente actual y
para nuestro estilo de vida pues como
seres humanos somos sus principales
modificadores de forma abrupta, no
permitiendo que la evolución alcance
al cambio dinámico producido. Además
ciertas variaciones que no nos afectaron en el pasado, ahora son mecanismos extrínsecos de enfermedades. Un
ejemplo es la invasión humana de determinados hábitats antes exclusivos
de roedores. El hantavirus en nuestro
país, aumenta su incidencia cuando el
hombre construye viviendas en zonas
áridas de la estepa patagónica y entra
en contacto con la materia fecal del
reservorio transmisor.
Este planteo teórico, conduce a toda
una nueva forma de diseñar la investigación biomédica20.
A partir de las mencionadas cuatro
preguntas, es posible plantear el siguiente desarrollo teórico, a través de
una serie de preguntas o aseveraciones:
1. ¿Qué estructura califica como un
rasgo? ¿Cómo sabemos o distinguimos si es una estructura moldeada
exclusivamente por selección natural, o es que intervienen otros parámetros?
2. ¿Por qué algunos individuos se
enferman y otros no? Es decir, por
qué los miembros de una especie son
vulnerables a ciertas enfermedades y a
otras no. El hecho de ser todos descendientes de un origen común en tiempos
primordiales, hizo que la presión de
evolución (presión de selección natural
del más apto) permitiera que determinados individuos no emparentados
pudieran generar la actual inmunidad
de especie. Dicho de otra manera y
ejemplificando, los seres humanos no
somos vulnerables a muchas de las
enfermedades de las aves y viceversa.
En el pasado remoto existieron muchas
enfermedades, de las que hoy tenemos
referencia a través de textos sagrados
y frente a las cuales nuestra especie, al
ir evolucionando, se hizo resistente.
3. ¿Evolución de la inmunidad o de
la adaptación? Debemos distinguir
entre manifestaciones de enfermedad
que reflejan defectos y manifestaciones que reflejan reforzamiento de la
defensa del cuerpo a la enfermedad.
Un delirio o una alucinación no correlacionan evolutivamente con la hipertermia (aunque si pueden ser las primeras por causa de la segunda); pero
sí enfermedades infecciosas y autoinmunes se relacionan conceptualmente
a través del sistema inmunitario, unas
por he-teroagresión otra por autoagresión. El mecanismo patogénico tiene
una base común, pero una es deseable y la otra produce un espiral difícil
de neutralizar. La defensa frente a una
noxa externa es beneficiosa. No lo es
si el propio organismo desconoce sus
propios antígenos. Hay que distinguir
además entre la patogenia de una enfermedad y las estructuras corporales
que nos hacen vulnerables a ella. Este
cambio en el enfoque, de la enfermedad en sí misma a la estructura corporal que la posibilita, es lo que hace
adecuada la medicina evolucionista o
darwiniana.
4. Debemos distinguir entre los
niveles donde puede operar la selección, especialmente a nivel genes,
individuos y grupos. Esto se traduce
en el “spread” o dispersión genética,
de la expresión de fenotipos y su incidencia en la población general.
5. También es importante distinguir
entre los modos en que la selección
puede influir sobre la frecuencia
genética. A diferencia del punto anterior, en este caso se toma en cuenta
la temporalidad. Aquí hablamos de
concentración de genes y no de dispersión.
6. Hay que cuidar el sentido de los términos que son utilizados de forma
diferente en campos diferentes. Tal
el caso de eficiencia reproductiva. Este
concepto tiene una concepción en el
área de conocimiento de la etología de
poblaciones que difiere de la utilizada
en producción animal.
7. Por último, debemos diferenciar
los posibles tipos de explicaciones
evolutivas existentes que explican
la vulnerabilidad a agentes patógenos que producen enfermedades.
A partir de estos siete puntos se han
propuesto ya, una serie de categorías
de explicaciones evolutivas para la
vulnerabilidad a padecer enfermedades15,17. Muchas alteraciones resultan de la interacción con el ambiente
actual, mal adaptado a cuerpos diseñados ancestralmente para realizar
casi exclusivamente actividades de
forrajeo o alimentación.
Aquellas son:
• Defensa contra la enfermedad o defecto de respuesta, es en verdad una
adaptación. Los organismos fueron
moldeando su complejo sistema de
protección habiendo interactuado durante miles de años con las noxas del
ambiente.
• Infección y otros aspectos co-evolutivos del ambiente biológico. Acción y
reacción que genera la acción. Huéspedes y gérmenes co-evolucionan, uno
mejorando su sistema inmunitario, el
otro aumentando su patogenicidad.
• Nuevos aspectos del ambiente físico.
Los movimientos telúricos, el cambio
climático, las grandes migraciones de
especies modifican el punto de contacto intra e interespecie. El derretimiento
del casquete polar ártico deja sin territorio de caza a distintas especies, entre ellos los osos, que hoy invaden las
ciudades canadienses situadas más al
norte en busca de desechos alimenticios en basura domiciliaria o ratas.
Esto lleva a un contacto diferente entre
especies donde las zoonosis juegan un
rol importantísimo.
• Rasgos genéticos que son dañinos
sólo en un ambiente nuevo. Un animal
es extraído de su bioma y transportado
kilómetros a un área con diferente geografía. Un primate de hábito arborícola
en un área de tala masiva de árboles
debe reaprender a procurarse el alimento.
• Equilibrios de diseño a nivel de genes
y equilibrios de diseño a nivel de rasgo,
que se traducen en estudio de genotipo
y fenotipo respectivamente.
• La dependencia de la vía de entrada
de una noxa en función de la adaptación
biológica del huésped en cuestión.
• Factores azarosos, siempre presentes en la diversidad biológica.
Actualmente se encuentran trabajos
donde se ha sistematizado la forma de
poner a prueba hipótesis evolucionistas
acerca de enfermedades15,17. Muchos
desórdenes médicos resultan de vivir
en un ambiente moderno mal ajustado,
como mencionáramos, a cuerpos
diseñados para realizar actividades en
la sabana africana16.
Medicina veterinaria Darwiniana
Todo lo antes mencionado desde la
medicina humana o desde la biología
animal, es de hecho aplicable sin necesidad de cambios o transformaciones,
a la medicina veterinaria.
Ante cualquiera de las cuestiones típicamente abordadas en el quehacer
72
veterinario, podemos emplear una
óptica que llamaremos medicina veterinaria darwiniana (MVD).
El basamento teórico de esta MVD
es simple: el paciente veterinario es
el resultado del proceso de selección
natural, por lo que sus intercambios
de materia, energía e información han
sido moldeados por este proceso. El
resultado, es un acoplamiento con el
medio ambiente que resulta en la supervivencia y reproducción del individuo,
es decir en el mantenimiento de su estructura sistémica, su autopoiesis14 y
de su capacidad de replicación. Lo que
llamamos patología es un estado en el
cual esos procesos cambian su acoplamiento del individuo con lo ajeno,
en detrimento de la supervivencia, la
reproducción, o ambos.
La intervención médica veterinaria debería tender entonces a restaurar ese
vínculo, o a reemplazarlo por otro que,
aunque no pueda devolver los parámetros de supervivencia y reproducción al
estado anterior, los coloque en algún
punto entre los valores denominados
de salud y enfermedad con sesgo hacia la salud.
Nótese que eliminamos alusiones a
aliviar el dolor o el sufrimiento, porque
los estados que señalan estos términos también han sido moldeados por la
selección natural, y no son per se, un
valor en sí mismos sino en tanto y en
cuanto coadyuvan a la supervivencia y
reproducción de los individuos.
Este enfoque de la MVD sirve de orientación en las dos actividades de la
medicina veterinaria: la investigación y
la práctica clínica.
En la investigación, actuando a modo
de paradigma, señalando el tipo de
preguntas a realizarse como planteo
inicial o al discutir resultados, y el tipo
de respuestas formulables en el marco
de la teoría de la evolución. En la práctica clínica veterinaria, proponiendo la
clase de factores que pueden provocar
en los organismos el tipo de inadaptación con el ambiente
El abordaje de la MVD, ocurre en concomitancia (y en sinergismo) con un
cambio en la forma en que se considera
la tradicional óptica disciplinaria de las
ciencias y las prácticas médicas, orientadas hasta hace no mucho a una especialización creciente y segmentante
del quehacer académico y profesional.
Ewald5,6 considera los genes y los estilos de vida como los dos grandes factores deletéreos sobre la salud. Debido
a que el hombre es el principal modificador del hábitat animal a nivel global,
esta situación impacta de lleno en la
medicina veterinaria.
Actualmente el mundo académico
tiende a la transdisciplinariedad de los
conceptos y de las actividades, proponiéndose la fusión de disciplinas que
hasta hace no mucho se consideraban
independientes. Un ejemplo es el de
la psiconeuroinmunoendocrinología7,
donde los factores emocionales del diencéfalo regulan la respuesta biológica
al stress, la vida de relación y la capacidad de respuesta inmunológica
certera.
En medicina y biología humanas, se
unen por un lado la antropología y las
ciencias de la salud1 y en las ciencias
de la mente la biología evolucionista
con la psicología cognitiva4. En medicina veterinaria surge el planteo de la
necesidad de una visión bioetocultural
(una concepción biológica, conductual
y social) que permita abordar de una
forma diacrónica, a lo largo del tiempo,
como complemento del perfil sincrónico
imperante, en correspondencia temporal con otros procesos o causas.
Encontramos terreno fértil para este
desarrollo conceptual en el campo de
la vaccinología, las zoonosis y el bienestar animal. No como áreas excluyentes de aplicación, sino como aquellas parcelas del conocimiento donde
podemos ejemplificar este enfoque.
Vaccinología y MVD
Ejemplos de cómo la MVD cambia
nuestra forma de abordar las referencias empíricas son los casos de
evidencia experimental de la evolución
parasitaria seguida a la vacunación8, la
evolución de la virulencia en malaria luego de imunización13 o las modificaciones de la respuesta a vacunas contra la
enfermedad de Marek9.
Este punto es de vital importancia y
potencia la utilidad de la Medicina Veterinaria Darwiniana en el sentido de la
prevención para el futuro. Hilleman11
hablaba de planificación de la inoculación antigénica para producir inmunidad frente a un determinado patógeno
no sólo basándose en la identificación
adecuada de antígenos y epítopes,
sino también en “qué parte” de estos se
deben presentar al sistema inmunitario
y “cómo” hacerlo.
Sin lugar a dudas, el estudio filogenético de los agentes etiológicos de enfermedades infecciosas permite realizar
una predicción de su comportamiento
futuro. La biología evolucionista da
cuenta de estos fenómenos.
Zoonosis y MVD
El comportamiento de determinados
reservorios y vectores que intervienen
en la transmisión de zoonosis, permite
identificar como las modificaciones de
ciertas pautas comportamentales favorecen el contacto entre diferentes
organismos: patógenos, intermediarios, huéspedes definitivos. Aquí son
la etología y la psicología cognitiva
comparada, las disciplinas que históricamente brindan los elementos de
apoyo.
La MVD, una conjunción entre la biología evolucionista y la etología animal
comparada , nos permitirán desarrollar
las medidas preventivas a instaurar
identificando las estructuras formadas
por selección natural, la tendencia a
variaciones de vulnerabilidad frente a
determinada noxa infecciosa, las defensas del huésped y la frecuencia
génica de aparición.
En las últimas décadas el mundo viene
sufriendo la emergencia o re-emergencia de zoonosis con una estrecha
relación con elementos tales como
cambios climáticos, ecológicos, o socioculturales en poblaciones animales
y humanas, que se ha traducido en una
modificación de la relación del hábitat
interespecie. Hay individuos de diferentes poblaciones y bagaje genético que
han entrado en contacto por primera
vez.
La “Aldea Global” como concepto, que
aparece hace poco más de cuatro lustros como fenómeno primario de la
globalización, hoy conduce en el tema
sanitario a una mayor difusión de las
zoonosis. Estos cambios facilitan que
algunas especies, sobre todo de insectos, colonicen áreas que anteriormente
les eran exóticas. En esta cadena, el
estudio de los huéspedes, reservorios
y vectores animales toma fundamental
importancia para el diseño de acciones
preventivas y correctivas en la Salud
Pública de las poblaciones humana y
animal, y es donde la MVD permite la
construcción profesional de una transdisciplinariedad.
Bienestar animal y MVD
Broom3 presenta un desarrollo conceptual sobre el bienestar. Los animales tienen un amplio margen de
necesidades que son consecuencia de
los muchos sistemas funcionales que
hacen posible la vida. Una necesidad
es una deficiencia en un animal que
puede ser remediada obteniendo un
recurso particular o respondiendo a un
estimulo particular del ambiente o del
cuerpo.
Si un animal expresa una necesidad,
su estado motivacional es afectado de
forma tal que las respuestas comportamentales y fisiológicas que remedian
esa necesidad, puedan ser realizadas.
Estas respuestas permiten al animal
controlar y mantener la estabilidad
mental y corporal. El bienestar de un
animal es afectado por la incapacidad
de remediar las necesidades, y la dificultad para hacerlo es su estado respecto de sus intentos de lidiar con su
ambiente.
Estos comportamientos, son los así
73
llamados “comportamientos naturales”.
Una definición de los mismos2 indica
que son los que un animal tiende a
hacer en condiciones naturales, porque
es placentero y promueve el funcionamiento biológico.
Son los que se realizan cuando se le
da la oportunidad en un amplio rango
de condiciones naturales, dado que es
presumiblemente placentero (motivado
positivamente) y promueve el funcionamiento en el ambiente de adaptación
evolutiva.
Esta definición excluye los comportamientos de enfermedad, huída y
agresión, porque, hasta donde sabemos, no son placenteros.
Los términos condiciones naturales,
funcionamiento biológico y sentimientos placenteros, deben entenderse
como variables continuas. Así, cuanto
más “natural” sea un comportamiento
de acuerdo con cada uno de estos
componentes, más se ajustará a esta
definición.
Así, el problema del bienestar no está
en el animal en cuanto estructura biológica, sino en la forma en que se relaciona con su ambiente; y en el caso de
los animales de producción y de compañía, ese ambiente es provisto por el
ser humano. Si bien la domesticación
en términos históricos es antigua, en
términos evolutivos no es menos que
reciente. Y si a esto sumamos la forma vertiginosa en que las condiciones
de explotación ganadera cambiaron
y cambian día a día, encontraremos
que aplica a la situación el punto 3 de
la enumeración realizada por Nesse,
1999, y expuesta antes: nuevos aspectos del ambiente físico como explica-
ciones evolutivas para la vulnerabilidad
a enfermedades.
En lo que se refiere a la investigación,
ya se han establecido una serie de
parámetros12,21:
1. articular cómo y por qué ciertas presiones de selección habrían formado
cierto mecanismo o proceso psicológico;
2. identificar las pistas ambientales específicas que habrían activado ese proceso en el ambiente ancestral;
3. explicar por qué ese proceso ha
guiado pensamientos, sentimientos y
comportamientos en ciertas circunstancias sociales específicas, y
4. especificar las pistas o salidas que
abrían determinado ese proceso.
En el caso del bienestar animal, ocurre
que las necesidades referidas a la supervivencia y a la reproducción son
provistas por los dueños/explotadores,
pero las conductas que evolucionaron
para que el propio animal proveyera a
sus necesidades aún están presentes,
y por ser motivadas intrínsecamente,
se encuentran en medios donde su expresión se imposibilita, dificulta o torna
contraproducente, en el sentido de que
no colabora, o disminuye, la supervivencia y la reproducción.
Entonces, desde una óptica MVD, la
forma de proveer al bienestar animal es
permitiendo que esas conductas sean
realizadas de forma no dañina, aún
cuando no resulten necesarias, por la
sencilla razón de que el individuo va a
estar motivado a ello.
La MVD como programa
El enfoque evolucionista de la veterinaria es el camino que puede llevar a
diseñar un atajo entre los elementos
teóricos y metodológicos de las disciplinas orientadas al estudio de los organismos vivos. Esto no implica el surgimiento de una disciplina hegemónica,
que opere un reduccionismo sobre las
existentes, sino la elaboración de una
transdisciplina que las abarque, integre
y supere.
Avistamos un campo, que a partir de la
propuesta evolucionista como marco
conceptual, articule los distintos cuerpos
teóricos de las diferentes disciplinas, y
partiendo de esto compatibilice los métodos, procedimientos, y prácticas.
Este campo, a su vez, redefine su
objeto de estudio e intervención, pasando de entender al ser vivo como un
esquema de causaciones lineales, a
abordarlo desde una mirada compleja
y sistémica.
Esto no permite “hacer lo de siempre
pero más explicado”, sino que posibilita
cursos de acción diferentes que, muy
probablemente, den solución a situaciones que percibimos como nuevas,
no tanto porque estén comenzando
a ocurrir, sino porque recién ahora
podemos distinguirlas, al operar sobre
nuestro entorno desde el paradigma de
la complejidad.
Una MVD elaborada expresamente
para ser el escenario de un quehacer
académico – profesional diferente es
a la vez una necesidad y un desafío:
se trata de protagonizarla, y no de dejar que, simplemente, se construya en
forma espontánea y ajena.
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75
Comunicaciones Científicas
Rev. Med. Vet. (B. Aires) 2010, 91, 5,6: 76 - 161
VIIº R.A.PA.VE.
Séptima Reunión Argentina
de Patología Veterinaria
Universidad de Buenos Aires (UBA)
Buenos Aires, 06 y 07- 07-2010
AUTORIDADES
PRESIDENTE:
Leonardo Minatel
PRESIDENTES HONORARIOS
Julio C. Carfagnini (UBA)
Eduardo Gimeno (UNLP)
Ana Canal (UNL)
Marcial Sánchez Negrette (UNNE)
Guillermo S. Ibargoyen (UNR)
COMISIÓN ORGANIZADORA
Gabriela C. Postma
Andrea Schapira
Guillermo Rimoldi
Silvina Pinto
Sergio L. Invernizzi
Representante del Comité Organizador en el Exterior
Francisco Uzal (UC, Davis)
COMISIÓN CIENTÍFICA
Julio C. Carfagnini (UBA)
Leonardo Minatel (UBA)
Eduardo Gimeno (UNLP)
Julio Idiart (UNLP)
Francisco Uzal (UC, Davis)
Ana Canal (UNL)
Se deja expresa constancia que la selección, aprobación y redacción de las comunicaciones fueron realizadas por la Comisión Científica de la
VII° RAPAVE por delegación de la Asociación Argentina de Patología Veterinaria que es, en última instancia, la Institución responsable.
76
Índice de Comunicaciones Científicas
I. RUMIANTES
Outbreak of goat abortion due to Toxoplasma gondii in Mato Grosso State, Brazil.
Caldeira FHB, Godoy I, Moraes LG, Lodi LR, Ubiali DG, Oliveira ALF, Colodel EM, Pescador CA.
Identification of bovine papillomavirus types in brazil: co-infection of a new type and a rare variant in a dayry cow.
Carvalho RF, Sakata ST, Mori E, Brandão PE, Richtzenhain LJ, Stocco RC, Beçak W.
Intoxicación natural de bovinos con Cestrum parqui en el departamento de Bella Vista, Corrientes.
Caspe SG, Grané E, Ramirez JC, Pereyra M, Benitez D, Draghi MG.
Lesiones histopatológicas en fetos bovinos causadas por un nuevo aislamiento de Neospora caninum.
Caspe SG, Moore DP, Leunda MR, Poso MA, Lischinsky L, Regidor-Cerrillo J, Ortega Mora LM, Odeón AC, Campero CM.
Intoxicación natural en bovinos con Lantana camara en la provincia de Corrientes.
Caspe SG, Repiso G, Ramírez JC, Pereyra M, Ramírez LM, Draghi MG.
Brote de meningoencefalitis por herpesvirus bovino tipo 5 en un feedlot.
Fazzio LE, Costa EF, Valera AR, Quiroga MA, Galosi CM.
α-Manosidosis en un ternero Aberdeen Angus Colorado.
Giannitti F, Uzal FA, Diab SS, Ortega J, Nordhausen R, Weber N, Gimeno EJ.
Indução de resistência à intoxicação por Senecio brasiliensis em ovinos.
Grecco FB, Estima-Silva P, Blanco CS, Soares MP, Sallis ESV, Raffi MB, Sune C, Schild AL.
Squamous cell carcinoma in goats in Mato Grosso State, Brasil.
Lodi LR, Ubiali DG, Caldeira FHB, Silva MIV, Saurini NO, Lopes ER, Peixoto LA, Veronezi RC, Souza MA, Pescador CA, Colodel EM.
Queilosquisis bilateral en un ternero de tambo.
Louge Uriarte EL, Campero CM.
Hemorragia intestinal submucosa en un ternero de cría con diarrea.
Louge Uriarte EL, Moreira AR, Fernández Miyakawa M, Giannitti F,Lischinzky T, Leunda MR, Elizondo AM, Malena R, Odeón AC
Actinobacilosis atípica en un engorde de bovinos.
Magnano GG, Macias AF, Mació MN, Costamagna F, Caminos JM, Sticotti E, Schneider MO, Schleef N, Giraudo JA.
Albinismo em búfalos murrah na região sul do Rio Grade do Sul.
Marcolongo-Pereira C, Damé MC, Vargas Junior SF, Barreto ACC, Soares MP, Quevedo PS, Schild AL.
Descripción clínico-patológica de salmonelosis en terneros de tambo.
Margineda CA, Louge Uriarte EL, Giannitti F, Moreira AR, Odriozola ER, Cámpora L, Bodega J, Lischinzky T, Malena R, Odeón AC.
Estudio retrospectivo de enfermedades bovinas que cursan con signos neurológicos en la región pampeana.
Margineda CA, Odeón AC, Marín M, Odriozola ER, Giannitti F, Campero CM.
Descripción clínico-patológica de la infección natural y experimental por herpesvirus bovino tipo 1.
Marin MS, Pérez SE, Verna AE, Louge Uriarte EL, Leunda MR, Odriozola ER, Campero CM, Odeón AC.
Dermatitis digital papilomatosa bovina asociada a infestación con Tunga penetrans en bovinos de cría del noroeste argentino.
Marin RE.
Un caso de adenomatosis pulmonar ovina en la puna de Jujuy.
Marin RE, Setti W, Carrillo BJ, Blanco Viera J.
Calcinosis enzoótica en bufalos: reporte de un caso.
Micheloud JF, Pellerano B, Pezzone N, Baroni EE, Marini MR, Sanchez A, Canal AM.
Mortandad de bovinos asociada a la ingestión de Asclepias mellodora descripción de un caso.
Odriozola ER, Cámpora LB, Bodega JJ, Giannitti F.
Diagnóstico de raiva em bovinos pela técnica de imuno-histoquímica no sul do Rio Grande do Sul.
Sallis ESV, Marcolongo-Pereira C, Azevedo LA, Raffi MB, Grecco FB, Soares MP, Schild AL.
Compared lectin binding pattern in the cerebellar cortical degeneration induced by Solanum fastigiatum var. Fastigiatum and
S. bonariense in cattle.
Sant’Ana FJF, Barbeito CG, Ishida F, Gimeno EJ, Verdes JM, Battes D, Morãna A, Barros CSL.
Un caso de dermatofilosis mucocutánea prepucial en novillos de la provincia de Entre Ríos.
Travería GE, Di Paolo LA, Alvarado Pinedo MF, Romero JR.
Intestinal obstruction by phytobezoares in cattle.
Ubiali DG, Moraes LGM, Caldeira FHB, Lodi LR, Pescador CA, Souza MA, Colodel EM.
77
Spinal cord compression in cattle associated with a vaccinal granuloma.
Ubiali DG, Pescador CA, Néspoli PB, Caldeira FHB, Oliveira LP, Souza MA, Colodel EM.
Identificación con fluoro jade de células de purkinje degeneradas en cerebelos de bovinos intoxicados con Solanum bonariense L.
Verdes JM, Dehl V, Calliari A, Moraña A.
Serología fetal y lesiones histopatologicas en casos naturales de abortos en bovinos compatibles con Neospora caninum.
Weber NA, Rodríguez AM, Moore DP, Lischinsky L, Cano D, Campero CM.
II. PEQUEÑOS ANIMALES
Presencia de amastigotes de Leishmania sp. en tumor venéreo transmisible intragenital canino.
Amarilla SP, Kegler Pangrazio K, González Dengues E, Grau Fernández I, Avalos Ruiz Díaz A.
Immunodetection of mhc class ii in macrophages of dogs with visceral leishmaniasis.
Andrade MMC, Moreira PRR, Bandarra MB, Munari DP, Lima VMF, Vasconcelos RO.
Primary brain t-cell lymphoma in a cat.
Bannwart LF, Garcia EC, Reis Junior JL, Brown CC, Langohr IM, Sant’Ana FJF.
Un caso de rabdomiosarcoma en el músculo esquelético de un canino joven. comunicación de un caso.
Belotti M, Pezzone N, Marini MR, Pepino S, Sanchez A, Angeli E, Canal AM.
Principales hallazgos clínico-patológicos de la trypanosomiasis cardíaca en 22 caninos de Costa Rica.
Berrocal A.
Uso de anticuerpos monoclonales para la identificación de Leishmania spp. en un canino afectado con kala-azar.
Cañón-Franco WA, Osorio-Morales LF, Pedraza-Ordóñez FJ.
Cardiomiopatía restrictiva con trombosis mural en un felino.
Cuitiño MC, Cappuccio JA, Tórtora M, Quiroga MA.
Neoplasias melanocíticas cutáneas en caninos: inmunomarcación de vimentina, proteína S100 y Melan A.
Cuitiño MC, Massone AR, Idiart JR.
Estudo retrospectivo de colangiohepatite felina: 7 casos.
Esmeraldino AT, Santarém LO, Ávila VPF, Preussler PS.
Estrogen and progesterone receptors in different histopatological grades of canine mammary adenocacinomas.
Hermo G, Wargon V, Soldati R, Scursoni A, Lanari C, Gobello C.
Morphological changes of the bone marrow of dogs with visceral leishmaniasis.
Jacintho APP, Momo C, Moreira PRR, Munari DP, Vasconcelos RO.
Hemorragia idiopática fatal del timo en un bóxer de tres meses.
Kegler Pangrazio K , Amarilla SP, González Dengues E, Avalos Ruiz Díaz A.
Lymphocytes in the brain of dogs with visceral leishmaniasis and seropositivity to Toxoplasma gondii and to Neospora caninum.
Machado GF, Melo GD, Sakamoto KP.
Mielolipoma de bazo en una perra golden retriever.
Massone AR, Aprea A, Giordano A, Baschar H, Allende M, Cuitiño MC, Idiart JR.
Biopsias endoscópicas del tracto gastrointestinal de caninos. analisis de 60 casos (2005-2010).
Massone AR, Aprea A, Quiroga MA, Giordano A, Machuca MA, Madariaga G, Idiart JR.
Astrocytic reactivity in the brain of dogs with visceral leishmaniasis.
Melo GD, Machado GF.
Apoptosis in lymph nodes of dogs with visceral leishmaniasis.
Moreira PRR, Bandarra MB, Magalhães GM, Munari DP, Alessi AC, Vasconcelos RO.
Astrocitoma gemistocítico multicêntrico em um felino doméstico.
Pavarini SP, Oliveira EC, Kroetz RM, Gomes DC, Correa GLF, Driemeier D.
Casuística de parvovirosis canina en el Servicio de Patología Diagnóstica de la Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA.
Postma GC, Minatel L, Bucafusco D, Schapira A, Pinto BS, Bratanich A, Carfagnini JC.
Oligoastrocitoma medular em um felino.
Rolim VM, Pavarini SP, Almeida PR, Vieira L, Oliveira LGS, Driemeier D.
Comparación del cemento de dientes de gatos normales y con enfermedades orales usando microscopio electrónico de barrido.
Saccomanno DM, Negro VB, Hernández SZ.
Estudo retrospectivo dos diagnósticos de mastocitoma em cães e gatos nos anos de 2005 a 2009.
Santarém LO, Esmeraldino AT, Preussler PS, Ávila VPF.
78
III. ANIMALES NO TRADICIONALES
Surto de doença do armazenamento de glicoproteína causada por Sida carpinifolia em cervos sambar (Cervos Unicolor) criados em
cativeiro no Brasil.
Aragão AP, Anjos BL, Diefenbach A, Graça FAS, Armién AG, Peixoto PV.
Estudio lectinhitoquímico de pulmón e hígado de ciervos colorados (Cervus elaphus) y jabalíes (Sus scrofa) de vida libre.
Chang Reissig E, Massone A, Zanuzzi C, Uzal FA, Gimeno EJ.
Metabolic bone disease in captivity pantanal alligators (Caiman yacare).
Cunha BHL, Rosa JG, Caldeira FHB, Néspoli PEB, Souza MA, Ferraz RHS, Soares CE, Figueiredo SI, Saurini NO, Aleixo VM, Pescador CA,
Colodel EM.
Tricolemoma en un cobayo mascota (Cavia porcellus).
Gornatti Churria C, Massone A, Origlia J, López N, Spinsanti E, Uriarte J, Herrero Loyola M, Píscopo M, Petruccelli M.
Aspergilosis en aves rapaces en cautiverio: descripcion de dos casos.
Gornatti Churria C, Origlia J, Spinsanti E, Uriarte J, Herrero Loyola M, Píscopo M, Petruccelli M.
Estudio histopatológico de carcinoma mamario sólido metastásico en un armadillo (Dasypus novemcinctus).
López IC, Saravia M, Cubillos V, Celis S.
Infección por Yersinia pseudotuberculosis en maras (Dolichotis patagonum) en el zoológico nacional de Chile.
López IC, Saravia M, Tirado M, Cubillos V.
Leiomioma cervical uterino en un mono araña (Ateles fusciceps): comunicación de un caso.
Magni C, Pezzone N, Bagattin L, Marini MR, Micheloud JF, Bianchini FA, Pontarelli EL, Hunziker D, Pachoud JC.
Tumor de células germinales en una carpa koi (Cyprinus carpio): comunicación de un caso.
Mattiello R, D’Ambrosio E.
Carcinoma hepatocelular adenoide en un loro hablador (Amazona aestiva): comunicación de un caso.
Mattiello R, D’Ambrosio E, Rodríguez A.
Bronquitis por Providencia rettgeri en un loro (Amazona aestiva) con presunta deficiencia de vitamina A.
Minatel L, Postma GC, Shapira A, Carfagnini JC.
Descripción de un brote de listeriosis en un criadero de chinchillas (Chinchilla lanigera) del partido de La Plata (Buenos Aires,
Argentina).
Origlia JA, Vigo G, Gornatti Churria D, Piscopo M, Herrero Loyola M, Petruccelli M.
Dioctofimosis en un aguará guazú (Chrysocyon brachyurus): comunicación de un caso.
Pezzone N, Magni C, Marini MR, Stutz G, Sensevy A, Hunziker D, Widenhorn N, Canal AM.
Mortandad en tucanes grandes (Ramphastos toco) en cautiverio.
Pezzone N, Sciabarrasi A, Belotti M, Marini MR, Hunziker D, Canal AM.
IV. PATOLOGÍA EXPERIMENTAL
Caracterización biologica de la citotoxina de distensión celular producidas por cepas indígenas de Campylobacter fetus venerealis.
Catena M, Chiapparrone M, Teruel M, Morán P, Soto P.
Evaluación de la adhesión de Campylobacter fetus venerealis a células mdbk por microscopía electrónica de barrido.
Chiapparrone M, Soto P, Morán P, Catena M.
Clonado de de cepas de Tritrichomonas foetus a partir de cepas de campo.
Doumecq ML, Soto P, Echevarría H, Monteavaro C.
Influencia del método anestésico en la respuesta temprana pulmonar a herpesvirus equino de tipo 1 en un modelo murino.
Eöry ML, Galosi CM, Sguazza GH, Fuentealba N, Gimeno EJ, Barbeito CG.
Equine adipose tissue-derived progenitor/stem cells and their potential for the treatment of endometriosis.
Mambelli LI, Mattos RC, Malschitzky E, Miglino MA, Kerkis I.
Equid herpesvirus type 1 (ehv-1) show neurotropism and neurovirulence in mouse model.
Mori CMC, Mori E, Favaro LL, Santos CR, Lara MCCSH, Villalobos EMC, Cunha EMS, Brandão PE, Richtzenhain LJ, Maiorka PC.
Patogenicidad de cepas argentinas y brasileñas de herpesvirus equino 1 en modelo de ratones isogénicos.
Mori E, Mori CMC, Marconi ECM, Lara MCCSH, Cunha EMS, Villalobos EMC, Maiorka, PC, Brandão PE, Richtzenhain LJ, Eöry ML, Fuentealba
NA, Zanuzzi CN, Vissani A, Barrandeguy M, Gimeno EJ, Barbeito CG, Galosi CM.
Efectos de la leche de búfala con mayor concentración de ácido linoleico conjugado y de ácido graso omega-3 sobre el desarrollo del
cáncer experimental del colon en ratas.
Ramírez GV, Montenegro MA, Catuogno MS, Patiño EM, Sánchez Negrette M.
Descrição de técnica imunohistoquímica para detecção de receptores de lh em endométrio de égua.
Santarém LO, Preussler PS, Malschizky E, Esmeraldino AT, Mattos RC.
79
Modelo experimental para evaluar el efecto inducido por vacunas contra Tritrichomonas foetus.
Soto P, Echevarría H, Monteavaro C.
Estudio de la respuesta inmune uterina en un modelo de tritrichomonosis bovina en ratonas balb/c preñadas. Woudwyk MA, Monteavaro
CE, Soto P, Gimeno EJ, Zenclussen AC, Barbeito CG.
V. EQUINOS
Encefalomalacia nigropálida en un equino pastoreando Centaurea solstitialis en el sur de la provincia de Buenos Aires.
Giannitti F, Rodríguez M.
First detection of equine herpesvirus 1 neuropathogenic genotype (G2,254) in a horse with neurological disease in Brazil.
Mori E, Borges AS, Delfiol DJZ, Oliveira Flho JP, Gonçalves RC, Lara MCCSH, Cunha EMS, Villalobos EMC, Nassar AFC, Brandão PE,
Richtzenhain LJ.
Mortandad de equinos asociada al consumo de Solanum glaucophyllum (S. malacoxylon) en Argentina.
Odriozola ER, Rodríguez AM, Caffarena RD, Bodega JJ, Gardey P, Iseas FB, Cantón GJ, Giannitti F.
Un caso de leucoencefalomalacia equina.
Sticotti EE, Magnano GG, Mació MN, Giraudo JA, Cuello H, Schneider MO, Macias AF.
VI. PORCINOS
Tiflocolitis fibrinonecrótica asociada a Salmonella enterica subespecie enterica en el cerdo negro canario.
Andrada M, Acosta B, Suárez A, Arbelo M, Espinosa de los Monteros A, Herráez P, Fernández A.
Hallazgos patológicos en el cerdo negro canario afectados con el síndrome del desmedro multisistémico postdestete.
Andrada M, Quesada O, Paz Y, Sierra E, Ramírez AS, Orós J, Rodríguez F.
Intoxicação por sal em suínos alimentados com bagaço de cevada.
Diefenbach A, Anjos BL, Maran NB, Peixoto PV.
Estudio histopatológico de pulmones de cerdos infectados naturalmente por el virus de influenza a subtipos H3N2 y H1N1 2009.
Quiroga MA, Cappuccio J, Pereda A, Machuca MA, Insarralde L, Sanguinetti R, Barrales H, Perfumo, CJ. P.
80
I. 01.
Outbreak of goat abortion due to Toxoplasma gondii in Mato Grosso state, Brazil.
Caldeira FHB1, Godoy I1, Moraes LG1, Lodi LR1, Ubiali DG1, Oliveira ALF1, Colodel EM1, Pescador CA1
1. Universidade Federal de Mato Grosso, Departamento de Clínica Médica Veterinária,
Laboratório de Patologia Veterinária. Cuiabá, MT, 78.068-900, Brasil.
2. Universidade Federal de Mato Grosso, Departamento de Clínica Médica Veterinária,
Laboratório de Microbiologia e Biologia Molecular Veterinária. Cuiabá, MT, 78.068-900, Brasil.
E-mail: [email protected]
Toxoplasma gondii is a facultative protozoan that has a heteroxenous life cycle and infects all species of warm-blooded
animals. Domestic and wild cats are the definitive hosts.
Toxoplasmosis is prevalent in many areas of the world and it is
associated with abortion and/or congenital disease in several
species acting as intermediate hosts. Toxoplasmosis has been
identified as a major cause of reproductive problems in sheep
and goats, especially in Great Britain, Norway, Australia,
New Zealand, USA and Uruguay. Detection of specific
antibodies in the herd and observation of histological lesions
in the brain and placenta of aborted or stillborn fetuses, as well
as immunohistochemical techniques and PCR of fetal tissue
samples are the base for the diagnosis of toxoplasmosis.
A diagnostic work up of an outbreak of abortion in a Saanen
dairy goat farm in the municipality of Santo Antonio Leverger,
Mato Grosso, Brazil, was performed at the Laboratory of
Veterinary Pathology, Federal University of Mato Grosso (LPV
/ UFMT) between June-September 2009. During this period,
eight goat fetuses (4 male and 4 female) were necropsied.
Several organs were collected and fixed in 10% formalin, and
processed by conventional methods for histopathology. Samples
of lung, liver and abomasal fluid were collected and sent to the
Laboratory of Veterinary Microbiology-UFMT for aerobic bacterial
culture. Additionally, samples of brain were submitted to the
Laboratory of Molecular Biology-UFMT for nested-PCR
detection of Toxoplasma gondii using universal primers for
this microorganism (TOXO1: 5’-GGAACTGCATCCGTTCATGAG-3 ‘and TOXO 2: 5’ TCTTTAAAGCGTTCGTGGTC-3’).
No significant gross lesions were observed. Histological analysis
of the brains revealed the presence of moderate multifocal
necrotizing encephalitis in seven cases. Additionally, in two
fetuses, pulmonary lesions characterized by mild multifocal
pneumonia with areas of necrosis were also observed. No
other significant microscopic changes were found in any of
the other organs examined. No significant bacterial pathogens
were isolated. The nested-PCR for detection of Toxoplasma
gondii resulted in an amplification product of 194pb in seven
cases, which was consistent with the expected product.
Reproductive disorders associated with abortion and neonatal
mortality produced by T. gondii has been reported in several
places of the world and were recently reported in southern
Brazil. Experimental studies indicate that goats are more
susceptible than other species to abortion due to toxoplasmosis.
Gross lesions are usually not observed; however, microscopic
lesions are specially seen in the brain, liver and lungs, were
protozoan cysts can be found.The diagnosis was based
on the combination of epidemiological, clinical, macroscopic,
microscopic and molecular findings that characterize the
disease. Necrosis and mineralization in the placenta and
cotyledons are common lesions found in cases of
toxoplasmosis. In the present study, placentas were not
submitted for analysis. Cats are considered the main source
of infection due to the release of fecal oocyst in the environment,
which can subsequently infect other animals that ingest it.
In the farm, a cat was kept in the same environment as the
goats, suggesting a possible source of infection. Approximately
six months after the last abortion, the goats were subjected to an
ultrasound examination and no pregnancy was detected,
even these animals had been subjected to a reproductive
program. This study demonstrates that toxoplasmosis should
be included in the differential diagnosis list for abortion in
goats. Preventive measures for toxoplasmosis should be
implemented by farmers, since this disease produces
economical losses and it also has zoonotic potential.
81
I. 02.
Identification of bovine papillomavirus types in brazil: co-infection of a new type and a rare
variant in a dairy cow.
Carvalho RF1, Sakata ST1,2, Mori E2, Brandão PE2, Richtzenhain LJ2, Stocco RC1, Beçak W1
1. Laboratório de Genética, Instituto Butantan.
2. Laboratório de Biologia Molecular Aplicada e Sorologia,
Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil.
E-mail: [email protected]
Bovine papillomaviruses (BPVs) are distributed worldwide.
These viruses are recognized as causal agents of several
benign and malign tumors in cattle such as cutaneous
fibropapillomas, benign fibroplasias in other tissues (teats,
genitals), urinary bladder and esophagus cancer. BPVs are
related to severe economical losses in meat, milk and leather
production. Ten different BPV types have been described and
other putative types have being pointed by molecular
techniques, such as PCR with generic primers and DNA
sequencing. Brazil has a cattle herd of approximately 250
million, thus the improvement of studies concerning diversity,
prevalence and related clinical aspects of BPVs are very
relevant. The identification of putative viral types is important
for the development of vaccines. Here, we describe here the
simultaneous presence of two BPV types in three different
warts of a hostein dairy cow with cutaneous papillomatosis.
Wart biopsies were obtained and submitted to histological and
molecular techniques. DNA was extracted for viral typing
using PCR-RFLP directed to a L1 gene segment (major viral
capsid protein) and subsequent sequencing. The L1 gene has
taxonomical relevance due to its high degree of conservation.
In all the three lesions studied, different restriction patterns
were detected which could not be identified in any of the ten
previously characterized viral types profiles. The sequencing
of the amplicons indicated the presence of a rare putative
variant (BAPV-3), originally described in Japan. Furthermore,
the analysis of the two other samples demonstrated in both a
different viral sequence, exceeding 10% of divergence when
compared to the other homologous BPVs sequences
described in Genbank. It is possible to conclude that this viral
sequence represents an entirely new putative type of BPV.
The PCR-RFLP/Sequencing procedure has been verified as
highly effective for BPV identification. This approach provided
the first description of BAPV-3 in Brazil and, more important,
the identification of a possible unreported BPV type, provisionally
named as 01SP/BR/2009. The relevance of these findings is
also related to further vaccine development procedures.
Financial Support: CNPq and FAPESP.
82
I. 03.
Intoxicación natural de bovinos con Cestrum parqui en el departamento de Bella Vista,
Corrientes.
Caspe S1, Grané E2, Ramirez JC1, Pereyra M1, Benitez D1, Draghi MG1
1. Grupo de Sanidad Animal, INTA Mercedes, CC 38, (3470) Mercedes, Corrientes.
2. Actividad privada.
E-mail: [email protected]
Natural intoxication in bovine with Cestrum parqui in
Bella Vista province of Corrientes.
Las intoxicaciones con plantas tóxicas en la región del
noreste argentino es un tema de gran importancia debido a
la variedad botánica, pero que se encuentra poco desarrollado
en esta región. El objetivo del presente trabajo es describir
un episodio de mortandad en bovinos por intoxicación natural con Cestrum parqui, describiendo los hallazgos clínicopatológicos en uno de los casos. En el mes septiembre de
2007 se recibió en el laboratorio de Patología animal del
grupo de Sanidad Animal de INTA E.E.A. Mercedes, Corrientes un ternero muerto de 10 meses de edad perteneciente a
un establecimiento del departamento Bella Vista. El mismo
pertenecía a un lote de terneros que se encontraban en un
potrero de 20 ha consumiendo pastizal natural desde hacía
una semana. El lote constaba de 20 terneros y al momento de
la consulta había ya 7 animales muertos. Los animales fueron
desparasitados al ingresar al lote y no recibieron ningún otro
tratamiento. Se reportó que los animales afectados comenzaban a separarse del grupo, se retrasaban al ser trasladados,
presentaban debilidad, salivación abundante, incoordinación,
ataxia, posterior postración con decúbito lateral y finalmente
muerte. Las muertes se producían dentro de las 48 hs de
observados los primeros signos. Algunos animales afectados
fueron tratados con antibióticos pero no se observó respuesta al tratamiento. En los animales afectados la letalidad
fue del 100%. A la necropsia el animal remitido presentaba un
estado corporal muy bueno, con una buena cantidad de tejido
adiposo en mesenterio y abundante grasa perirrenal. Macroscópicamente se observó ascitis, un puntillado hemorrágico
difuso en el hígado, y edema en la pared de la vesícula biliar
y primera porción del intestino delgado, coincidente con el
lugar de inserción del colédoco. En el intestino se halló un
contenido sanguinolento. En el contenido ruminal se observó
la presencia restos de tallos y de hojas de forma lanceoladas
simples. Al examen histopatológico el animal presentó necrosis hemorrágica centrolobulillar severa como lesión más
importante. Las lesiones macro y microscópicas sugirieron la
posible presencia de algún agente hepatotóxico agudo por
lo que se solicitó el envío de muestras de las malezas presentes en el potrero. El examen de la muestras remitidas reveló la presencia de Cestrum parqui, que era abundante en
el potrero. Se recomendó entonces, el retiro de los animales
de ese lote sin la presencia de esta maleza y a partir de ese
momento la mortandad cesó. Los signos reportados, los
hallazgos anatomopatológicos y la identificación de la planta
sugieren una intoxicación con C. parqui. Debido que esta
planta es nativa y se encuentra ampliamente distribuida en el
país, el reconocimiento de la misma y de las lesiones que provoca resulta de importancia para poder llegar al diagnóstico
de esta intoxicación.
83
I. 04.
Lesiones histopatológicas en fetos bovinos causadas por un nuevo aislamiento de
Neospora caninum.
Caspe SG1, Moore DP2,4, Leunda MR2, Poso MA2, Lischinsky L2, Regidor-Cerrillo J3,
Ortega Mora LM3, Odeón AC2, Campero CM21
1. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA) EEA Mercedes, CC 38 (3470), Mercedes, Corrientes.
2. Grupo de sanidad Animal, INTA EEA Balcarce.
3. Grupo de Salud Animal, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Complutense, Madrid, España. CONICET.
E-mail: [email protected]
Histopathological lesions in bovine fetuses caused by a
new isolate of Neospora caninum.
La neosporosis es una enfermedad parasitaria producida por
el protozoo Neospora caninum que causa abortos en bovinos
y es de distribución cosmopolita. El objetivo de este trabajo
fue evaluar la patogenicidad de la cepa Nc Spain-7 de
N. caninum mediante la inoculación experimental realizada
en el INTA Balcarce, inoculando por vía endovenosa vaquillonas preñadas con 9 semanas de gestación. Se emplearon 17
vaquillonas (Bos taurus) con 65 días de gestación, separadas
al azar en cuatro grupos: tres grupos formados con animales
seronegativos (n= 13): Grupo A: 7 vaquillonas inoculadas con
la cepa Nc-Spain-7; Grupo B: 4 vaquillonas inoculadas con la
cepa de referencia Nc-1 y Grupo C: 2 vaquillonas controles
negativas. La dosis de inóculo utilizada fue de 108 taquizoítos de N. caninum en ambos grupos. Finalmente, el Grupo D
eran vaquillonas seropositivas naturalmente infectadas con
N. caninum (n=4). La viabilidad fetal se controló mediante
ecografías semanales y examen macroscópico de fetos y
placenta al momento de la faena. Se recolectaron los fetos
en el frigorífico y se efectuaron las necropsias correspondientes obteniéndose material para análisis histopatológico con
H/E según protocolo del Laboratorio de Patología Veterinaria.
Los animales del Grupo A se faenaron en dos secuencias.
La primera se realizó en tres vaquillonas (una de ellas con
mellizos) a los 28 días post inoculación (PI), de las cuales
se recupera-ron 4 fetos no viables. En una segunda etapa
se faenaron 4 vaquillonas (Grupo A) a los 48 días PI, de las
cuales se constataron 4 abortos (34 y 48 días PI), recuperán-
dose sólo un feto al momento de la faena. En el grupo B se
detectó un aborto y sólo 2/3 fetos fueron viables a la faena
(48 días PI). Los fetos no viables presentaron severa autólisis estimando la muerte fetal -3 y -6 días previos a la faena.
Microscópicamente se observó desprendimiento de cotiledones, turbidez en el líquido amniótico y marcada autolisis
en hígado y cerebro. Microscópicamente no se observaron
diferencias en la presentación de las lesiones entre los fetos de los grupos A y B (inoculados con Nc-1 y Nc Spain-7,
respectivamente). Las lesiones histopatológicas fetales más
relevantes fueron: peribronquíolitis necrotizante multifocal
mixta, neumonía intersticial supurativa, pericarditis y miocarditis multifocal supurativa severa, placentitis y onfalitis multifocal supurativa, glositis multifocal mononuclear y meningoencefatitis necrótica mononuclear focalizada. Los fetos de los
animales de los grupos C y D fueron viables al momento de
la faena, no presentaron lesiones macroscópicas. Los fetos
del grupo D presentaron lesiones histopatológicas de menor
intensidad (pericaditis difusa, neumonía intersticial, encefalitis focal mononuclear, meningitis supurativa difusa leve). Los
animales del grupo control no presentaron lesiones histopatológicas. La cepa evaluada produjo muerte fetal y lesiones
histopatológicas compatibles con las producidas por N. caninum
y similares a las observadas en los fetos inoculados con la
cepa de referencia Nc-1 demostrando su patogenicidad en
bovinos. Se confirma la utilidad del presente modelo experimental para estudiar la fetopatogenicidad producida por
N. caninum.
84
I. 05.
Intoxicación natural en bovinos con Lantana camara en la provincia de Corrientes.
Caspe SG1, Repiso G2, Ramírez JC1, Pereyra M1, Ramírez LM1, Draghi MG1
1. Grupo de Sanidad Animal, INTA Mercedes, CC 38, (3470) Mercedes, Corrientes.
2. Actividad privada.
E-mail: [email protected]
Natural intoxication in bovine with Lantana camara in
the province of Corrientes.
Lantana camara en una planta arbustiva ampliamente distribuida en la región del noreste argentino, ya sea en forma
nativa o como arbusto ornamental. El objetivo del presente
trabajo es relatar un episodio de mortandad en bovinos con
hallazgos clínicos, bioquímicos y patológicos de un caso de
intoxicación natural con L. camara. En el mes de abril de 2007
se solicitó la presencia del servicio patología animal del grupo
de Sanidad Animal de INTA E.E.A. Mercedes en un establecimiento del departamento Gral. Lavalle, Corrientes. El potrero
tenía en uno de sus extremos un monte natural y lindaba en
el otro extremo con la casa del encargado. La consulta se realizó debido a un caso de mortandad en un lote de 500 terneros. Al momento de la visita se habían producido 8 muertes y
se observaron tres animales más afectados. Se examinaron
dos de ellos y el examen clínico reveló la presencia de lesiones severas de dermatitis, con edema en párpados, morro y
pabellones auriculares, y desprendimiento de epitelio de las
zonas afectadas, con presencia de ictericia en mucosas, úlceras en punta y base de la lengua y una T° rectal de 40
y 4,5°C. Se tomaron muestras de sangre con heparina y se
realizaron frotis de sangre periférica en dos de los animales
afectados. Los resultados de los paráme-tros sanguíneos
revelaron un hematocrito de 18% y 20% (Valor de Referencia:
30-40%), GOT: 138 y 52 UI/l (VR: <35 UI/l), GPT: 38 y 22 UI/l
(VR:10-25), bilirrubina total: 41,7 y 39,25 mg/l (VR:2-5 mg/l),
bilirrubina directa: 5,32 y 1,2 mg/l (VR: 0,1-1 mg/l), bilirrubina
indirecta: 36,38 y 38,05 mg/l (VR: 0,3-4 mg/l), proteínas to-
tales: 6,12 y 6, 34 g% (VR: 7,4-7,9 g%) , albúmina: 2,1 y 2,0 g%
(3,3-4 g%) y fosfatasa alcalina: 206 y 288 UI/l (50-150 UI/l), lo
que hizo pensar en fotosensibilización secundaria de origen
hepático. Los frotis sanguíneos de los animales fueron negativos a hemoparásitos, descartando a estos como causantes
de la anemia. Las necropsias revelaron ictericia generalizada.
El hígado presentaba aumento de tamaño, con bordes redondeados y su coloración era amarillo-anaranjado, con puntillado hemorrágico. La vesícula biliar presentaba edema en la
pared, con contenido biliar espeso. Los riñones estaban congestivos, con puntillado amarillento en la zona de unión corticomedular y la coloración de la orina era oscura. A la observación microscópica los hepatocitos se encontraban tumefactos,
con vacuolización citoplasmática y núcleos vesiculares con
cromatina marginada, y focos aislados de necrosis de centrolobulillar. También pudo observarse la presencia de hepatocitos pleomórficos multinucleados (células sincitiales). Además
había colestasis y proliferación de conductillos biliares. El riñón presentó El riñón presentó degeneración y necrosis de
los túbulos contorneados proximales, con presencia de un
material de aspecto proteináceo en la luz, y degeneración
glomerular con presencia de material hialino en la cápsula de
Bowman. En vista de los hallazgos se realizó un relevamiento
de los lugares donde se encontraban los animales, y allí pudo
constatarse que los mismos permanecían en un corral lindero
a la casa del encargado donde se observó en el cerco que
los separaba la presencia de un arbusto de Lantana camara.
Este hallazgo junto a los diagnósticos clínicos, bioquímicos y
de necropsia, sugieren una intoxicación con esta planta.
85
I. 06.
Brote de meningoencefalitis por herpesvirus bovino tipo 5 en un feedlot.
Fazzio LE1, Costa EF2, Valera AR3, Quiroga MA2, Galosi CM3,4
1. Cátedra de Clínica de Grandes Animales.
2. Cátedra de Patología Especial.
3. Cátedra de Virología Faultad. de Ciencias Veterinarias, U.N.L.P., 60 y 118 B1900AVW, La Plata, Pcia. Bs. As. 4CIC Pcia de Bs As.
E- mail: [email protected]
Outbreak of meningoencephalitis in feedlot cattle by
bovine herpesvirus type 5.
Los virus herpes bovino tipos 1 y 5 (BoHV-1 y 5) son
α-herpesvirus muy relacionados entre sí pero con diferencias
en su patogencidad. En general, BoHV-1 produce principalmente rinotraqueítis, vulvovaginitis pustular infecciosa, balanopostitis, conjuntivitis y aborto. También puede ser causa de
encefalitis, aunque el principal responsable de meningoencefalitis en bovinos es el BoHV-5. Este trabajo describe un brote
de meningoencefalitis que se presentó en un establecimiento agropecuario dedicado al engorde a corral de bovinos
(feedlot) en la localidad de Marcos Paz (Provincia de Buenos
Aires-PBA-) a partir de animales que presentaron signos de
depresión, incoordinación motora y anorexia. La anamnesis
reveló que durante el mes de setiembre de 2008 habían ingresado dos lotes de animales provenientes de establecimientos diferentes. Uno de ellos de la localidad de Bartolomé Bavio (PBA) y el otro de Primero de Mayo (Provincia
de Entre Ríos). Con estos animales se conformó un lote de
n=261, de 175 kg de peso promedio. A los 10 días se observaron dos animales con marcado decaimiento, incoordinación
al caminar, sialorrea intensa, rechinar de dientes, amaurosis
y emaciación. Uno de ellos, además, presentaba indiferencia
al medio y se mantenía estático al apoyar la cabeza contra
objetos. Posteriormente, los animales adoptaban la posición
de decúbito lateral, manifestaban pedaleo y opistótonos y se
producía la muerte en un lapso variable entre 1 y 5 días a
partir del inicio de los signos clínicos. La temperatura corporal
(T), controlada en 5 animales con signos clínicos, presentó
valores entre 36,8 y 37,9 °C. Solo en un animal se registró
39,8 °C de T. Las muertes continuaron en forma de goteo
durante 23 días. La morbilidad fue del 12,64% (n=33) y la
mortalidad del 11,49 % (n=30) ya que tres animales se recuperaron de manera gradual con terapia de rehidratación de
sostén parenteral. De tres animales que se encontraban en
decúbito lateral permanente se tomaron muestras de sangre
con y sin anticoagulante. Posteriormente estos animales fueron sacrificados y se les realizó la necropsia conjuntamente
con un cuarto animal, compañero de lote, que había presentado los signos antes descriptos y fue hallado muerto. De
cada uno de los animales se obtuvieron muestras de líquido
cefalorraquídeo (LCR) en tubos con y sin anticoagulante para
análisis citológico y bacteriológico. Se recolectó encéfalo y la
mitad del mismo, junto con ambos ganglios trigéminos, se fijaron en una solución de formol neutro al 10% para su estudio
histopatológico. El resto del tejido nervioso se acondicionó en
recipientes estériles para estudios bacteriológicos y virológicos. Para el aislamiento viral se procedió de acuerdo a los
métodos convencionales, a partir de muestras de tejido de la
zona frontal del cerebro y utilizando células MDBK. Se realizó
extracción de ADN y se amplificaron las muestras por PCR
utilizando cebadores específicos para BoHV-1 y BoHV-5. Las
muestras de suero fueron analizadas para la determinación
de anticuerpos por la técnica de seroneutralización (SN). Durante la necropsia no se observaron lesiones macroscópicas
a excepción de una ligera congestión en meninges y, en uno
de los animales sacrificados, una zona de hemorragia submeníngea que comprometía la superficie lateral del cerebro.
El estudio citológico del LCR demostró la presencia de un elevado número de células con predominio de linfocitos. El cultivo bacteriológico a partir de LCR y de cerebro resultó negativo. En el examen histopatológico se observaron los cambios
característicos correspondientes a una meningoencefalitis
necrotizante no supurativa. La corteza cerebral se caracterizó
por marcada necrosis neuronal (lesión neuronal isquémica),
severo edema del neuropilo muy evidente alrededor de los
cuerpos neuronales, gliosis difusa, satelitosis y neuronofagia.
Se observaron manguitos perivasculares prominentes con 1
a 3 capas de células mononucleares, principalmente macrófagos, histiocitos y linfocitos. En la sustancia gris cortical se
observaron escasas áreas con focos de infiltración de neutrófilos. Estas lesiones se acompañaron de una ganglioneuritis
no supurativa. El estudio virológico permitió identificar, a las
48h, en los cultivos celulares inoculados con la muestra de
uno de los cerebros analizados, la presencia de focos típicos
de efecto citopático compatibles con BoHV. Este resultado
fue confirmado por la técnica de inmunofluorescencia directa
y por la PCR que resultó positiva para BoHV-5 en una de las
muestras estudiadas. La SN, en concordancia con la presentación aguda del caso, resultó negativa. Las evidencias epizootiológicas, las lesiones histopatológicas y los resultados
de los estudios virológicos sustentan el diagnóstico de meningoencefalitis por BoHV-5.
86
I. 07.
α-manosidosis en un ternero aberdeen angus colorado.
Giannitti F1, Uzal FA2, Diab SS2, Ortega J2, Nordhausen R2, Weber N3, Gimeno EJ4
1. Laboratorio de Diagnóstico Veterinario (LDV), Calle 25 de Mayo Nº 139,
Bahía Blanca (8000), Buenos Aires, Argentina, [email protected].
2. California Animal Health and Food Safety Laboratory System (CAHFS),
San Bernardino and Davis Branches, University of California Davis, USA;
3. Residencia Interna en Salud Animal, INTA Balcarce, Argentina;
4. Instituto de Patología, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de la Plata (UNLP), Argentina.
α-mannosidosis in a red aberdeen angus calf.
La α-manosidosis es una enfermedad de almacenamiento
lisosomal agrupada dentro de las glicoproteinosis, que ocurre
debido a una deficiencia congénita o adquirida de la enzima
lisosomal α-manosidasa. El objetivo del presente trabajo es
reportar un caso de α-manosidosis ocurrido en forma natural en bovinos de Argentina. En enero del 2008, dos terneros
Aberdeen Angus colorados de aproximadamente 2 meses de
edad pertenecientes a un sistema de destete precoz con un
total de 700 terneros ubicado en la provincia de Buenos Aires,
Argentina, presentaron signos neurológicos caracterizados
por ataxia e incoordinación, muriendo luego de un curso crónico y progresivo de pocas semanas de duración. Se practicó la
necropsia de uno de los animales, y se extrajeron muestras
de múltiples tejidos que fueron fijadas en formol tamponado
al 10%, incluidas en parafina, seccionadas a 5 μm de espesor
y coloreadas con hematoxilina y eosina. Muestras de cerebelo fueron procesadas de igual modo y coloreadas mediante
tιcnica de lectinhistoquνmica (LHQ) utilizando las siguientes
lectinas biotiniladas: WGA, sWGA, DBA, Con-A, SBA, RCA-I,
PNA, LCA, UEA-I y BS-I. El sistema de detección utilizado
fue el complejo avidina-bitonina (ABC), utilizándose como
cromógeno diaminobencidina y hematoxilina como colorante
de contraste. Submuestras de cerebelo fueron desparafinadas
y procesadas para microscopía electrónica de transmisión.
Histológicamente los cuerpos neuronales de las células de
Purkinje del cerebelo, neuronas del cerebro (colículo superior) y tallo encefálico presentaban numerosas vacuolas intracitoplasmáticas pequeñas y claras, dándole al pericarion un
aspecto esponjoso. Ultraestructuralmente, el citoplasma de
la mayoría de las células de Purkinje del cerebelo contenía
numerosas vacuolas redondas, de aproximadamente 1 μm
de diámetro, transparentes a los electrones, delimitadas por
una membrana simple y conteniendo ocasionales fragmentos membranosos de material fibrilar. Estas vacuolas eran
ultraestructralmente compatibles con lisosomas. Los cambios
histológicos y ultraestructurales fueron compatibles con una
enfermedad de almacenamiento lisosomal. La LHQ mostró
marcación con WGA, sWGA, Con-A y LCA, lo que permite
confirmar el diagnóstico de α-manosidosis. Si bien la edad
de presentación y la incidencia sugieren que posiblemente se
trate de la forma congénita de esta enfermedad, esta situación no ha sido confirmada hasta el momento. La presente
es la primera comunicación escrita de α-manosidosis bovina
en Argentina.
87
I. 08.
Indução de resistência à intoxicação por Senecio brasiliensis em ovinos.
Grecco FB, Estima-Silva P, Blanco CS, Soares MP, Sallis ESV, Raffi MB, Sune C, Schild AL
Laboratório Regional de Diagnóstico- Faculdade de Veterinária-UFPel,
Campus universitário s/n, 96010-900, Pelotas, RS. Brasil.
E-mail: [email protected]
Induction of resistence to poisoning by Senecio
brasiliensis in sheep.
Senecio spp. são plantas da família Asteraceae, nativas em
várias regiões do mundo e consideradas causadoras de uma
enfermidade de caráter enzoótico em bovinos, com
importante reflexo na produção animal mundial. Dentre as
espécies do gênero Senecio brasiliensis (maria-mole) é uma
das mais difundidas no estado do Rio Grande do Sul. Assim
sendo, alternativas de controle e profilaxia das plantas desse
gênero nas pastagens vem sendo constantemente procuradas
por criadores e profissionais da área. O pastoreio por ovinos
em áreas invadidas por plantas do gênero Senecio é uma das
práticas mais freqüentemente utilizadas. Os ovinos são tidos
como bastante resistentes à intoxicação por alcalóides
pirrolizidinicos (APs) que estão presentes nas espécies de
Senecio de modo que podem controlar a planta consumindo-a,
na maioria das vezes, sem adoecer. A resistência dos ovinos
à ação hepatotóxica dos Aps está associada a peculiaridades
de sua flora ruminal e aos sistemas enzimáticos hepáticos
que resulta em uma grande capacidade de detoxificação
destas substâncias. A intoxicação por Aps em ovinos pode
provocar três tipos diferentes de quadros clínicopatológicos: a) intoxicação aguda com necrose centrolobular;
b) intoxicação crônica com fibrose hepática provocando
fotossensibilização, encefalopatia hepática e edemas; e, c)
intoxicação crônica por cobre cursando com hemólise, icterícia
e hemoglobinúria. No Brasil surtos em ovinos são raros, apesar
de freqüentes em outras partes do mundo. No Rio Grande
do Sul o primeiro surto em ovinos foi descrito em 2001 com
morbidade de aproximadamente 50% e mortalidade de quase
100%. Posteriormente dois outros surtos foram diagnosticados
na região sul do Rio Grande do Sul com morbidade aproximada
de 20% e mortalidade de 100%. O objetivo deste trabalho
foi determinar a dose não tóxica mínima capaz de induzir a
resistência à intoxicação por S. brasiliensis em ovinos. Para
isso inicialmente foi determinada a dose tóxica de planta verde
capaz de induzir intoxicação aguda nesta espécie animal.
Foram administradas 60, 80, 90 e 100g/kg de peso corporal
(pc) a quatro ovinos. As doses que causaram a morte dos
animais (90 e 100 g/kg de pc) foram divididas em duas, cinco
e 10 doses administradas diariamente para determinar se os
animais apresentavam lesões hepáticas crônicas, sendo que
o ovino que recebeu 10g/kg de pc por 10 dias foi desafiado
45 dias após a última administração com a dose de 100g/kg
de pc. Para induzir a resistência doses de 15g/kg de peso
corporal foram administradas por 30 dias e doses de 30g/kg
de pc foram administradas por 10 dias a três ovinos. Dois
foram desafiados no dia seguinte ao final da administração
da planta e um foi desafiado 15 dias após. Os resultados da
intoxicação experimental demonstraram que doses acima de
90g/kg de pc são capazes de produzir intoxicação aguda
e que a dose de 100g/kg de pc fracionada em 10 doses de
10g/kg de pc não induz resistência à intoxicação nesta
espécie animal. Foi demonstrado que doses de 15 g/kg de
pc por 30 dias e 30g/kg de pc por 10 dias induzem resistência
nos ovinos quando os mesmos são desafiados imediatamente
após o término da administração da planta e se o desafio
é realizado 15 dias após o final da administração os animais
perdem a resistência. Estes resultados sugerem que a
intoxicação aguda por Senecio spp. em ovinos não tem
sido diagnosticada em razão da elevada dose de planta
necessária para causar esta forma da intoxicação e que
a intoxicação crônica apesar de ocorrer não é freqüente
uma vez que os animais colocados em áreas infestadas estão
continuamente ingerindo pequenas quantidades da planta
que não são suficientes para causar lesão hepática.
88
I. 09.
Squamous cells carcinoma in goats in Mato Grosso State, Brazil.
Lodi LR, Ubiali DG, Caldeira FHB, Silva MIV, Saurini NO, Lopes ER, Peixoto LA,
Veronezi RC, Souza MA, Pescador CA, Colodel EM.
Universidade Federal de Mato Grosso, Departamento de Clínica Médica Veterinária,
Laboratório de Patologia Veterinária. Cuiabá, MT, 78.068-900, Brasil.
E-mail: [email protected]
Squamous cell carcinoma (SCC) or epidermoid carcinoma is
a malignous neoplasm of the epithelial tissue. This tumor is
commonly found in equine, bovine, feline and canine, and
relatively uncommon in caprine, being most frequent in
animals without skin pigmentation. The ethipathogenesis of
malignant neoplasms is associated with chronic aggression
to DNA as well as with animal susceptibility. The main
aggressors are ultraviolet radiation B (UVB) and Papilomavirus sp.
infection. The aim of this paper is to describe the clinical and
pathological aspects of SCC occurrence in a caprine herd in
the state of Mato Grosso, Brazil. A herd composed of caprine
and ovine situated in Santo Antônio do Leverger municipality,
Mato Grosso, Brazil was visited by the staff of the Veterinary
Pathology Laboratory of the Federal University of Mato Grosso.
The epidemiologic data was obtained with the owner and
practitioner. A clinical exam characterized by visualization of
the lesion situated in the perineum was performed in all
animals from the herd. Additionally, a biopsy surgery in
perineal skin was done in the affected animals and fixed in
10% formalin, processed for histological procedures and
analyzed in optical microscopy. The herd has 60 animals,
composed of 10 males and 50 females, of which 52 were
Saanen and 8 were Anglo Nubian breed. The animals had
previously been in Brachiaria sp and Panicum sp pasture, and
mineral salt. They were kept in a fold, released in the morning,
and locked up in the evening. Four Saanen goats (6.6%) with
depigmented skin developed firm, unique or multiple reddish
to dark nodules in the perineal area. The nodules varied in
development degree, size, and shape. The lesions were
infiltrated through dermal and subcutaneous tissues. The
histological aspects were the same in all samples collected.
Microscopically, the nodules were characterized by proliferation of neoplasic epithelial cells with large ovoid to spherical
nucleus. In some areas prominent pleomorphic nucleolus of
varied size were seen. The tumor cells most resembled those
of normal stratum spinosum of the skin, but cytoplasm cells
are usually abundant and eosinophilic. The cells invaded the
epidermis showing digitiform proliferation toward the deeper
dermis with marked desmoplasia. Keratinization within such
cords or islands results in laminated keratin “pearls”
surrounded by tumor cells, which were also observed. Mitotic
figures were occasionally visualized. Additionally, epidermis
ulceration with neutrophilic infiltrate, hypertrophy and dilatation
of the sebaceous glands in the dermis were observed.
The diagnosis of SCC was based on epidemiological, clinical
and pathological findings. Actinic keratosis, Bowen`s disease,
Paget`s disease and melanomas should be considered
in differential diagnosis from SCC. Various theories have
been reported about the origin of this neoplasm, such
as Papillomavirus sp infection and hereditarily, but
solar irradiation influence and pigmentation degree is more
emphatized. In 1976, vulvar carcinoma was described in
Australia, affecting sheep and perineal carcinoma was
diagnosed in goats, in Pará state, Brazil, in 2009. The present
study describes an outbreak of neoplasia affecting the perineum
of depigmented goats similar to the one described in Pará,
Brazil. The high occurrence of this tumor (6.6%) should be
associated with the frequent exposition of the depigmented
perineum area to UVB radiation associated with deficient
pasture in shaded areas.
89
I. 10.
Queilosquisis bilateral en un ternero de tambo.
Louge Uriarte EL, Campero CM.
Grupo de Sanidad Animal, EEA INTA Balcarce, Pcia. Buenos Aires.
E-mail: [email protected]
Bilateral cheiloschisis in a dariy calf.
Las anomalías congénitas se presentan raramente en bovinos pudiendo ser viables o no al nacimiento. Las mismas ocurren durante el periodo embrionario o fetal temprano, y son
atribuidas a factores genéticos o agentes teratogénicos de
origen químico, físico, vegetal o infeccioso. En base al compromiso de órganos y funciones vitales que ocasione, el feto
puede o no continuar su gestación y llegar a término. En la
presente comunicación se reporta un caso de labio hendido
(queilosquisis o queilognatosquisis) en un ternero de raza
Holando Argentino de un establecimiento lechero del partido
de Balcarce, provincia de Buenos Aires. El ternero nació con
una anormalidad facial presentando dificultad para la ingesta
de leche y de alimento balanceado suministrados en balde.
Al examen físico externo se comprobó la presencia de fisuras
amplias en ambos labios, sin compromiso óseo ni muscular
de ambos maxilares ni otras anomalías de la cavidad bucal.
No se comprobaron anormalidades congénitas de ningún tipo
en otros terneros de la misma camada, desconociéndose la
etiología del problema. Los terneros habían nacido de vacas
inseminadas artificialmente, con semen comercial, y de vacas
que recibieron servicio natural con toro Holando Argentino.
El labio hendido es el resultado de una falla en la fusión de
las prominencias nasales, maxilar y medial, durante la etapa
de desarrollo. La misma puede ser completa o incompleta,
uni o bilateral, y suele estar asociada a paladar hendido. El
presente caso fue bilateral y completo, no asociada a paladar
hendido. Sin embargo, en rumiantes parece haber una mayor
incidencia de anomalías de paladar. La etiología se considera
poligénica y multifactorial siendo una condición relativamente
rara en animales domésticos.
90
I. 11.
Actinobacilosis atípica en un engorde de bovinos.
Magnano GG1, Macias AF1, Mació MN1, Costamagna F2, Caminos JM1,
Sticotti E1, Schneider MO1, Schleef N1, Giraudo JA1
1. Departamento de Patología Animal, Facultad de Agronomía y Veterinaria,
Universidad Nacional de Río Cuarto. Ruta 36 Km 601, Río Cuarto, Córdoba.
2. Médico Veterinario, actividad privada, Buchardo, Córdoba.
E-mail: [email protected]
Atypical actinobacillosis in bovine fattening.
La actinobacilosis es una enfermedad infecciosa que afecta
especialmente el tejido blando y se caracteriza por producir
linfadenitis de tipo piogranulomatosa. Aunque en el ganado
vacuno es más conocida como una enfermedad de la lengua,
puede ocurrir en cualquier órgano entre ellos piel y pulmón.
El objetivo de este trabajo es describir un caso de actinobacilosis atípica en un engorde de bovinos. El mismo se originó
en un lote de 850 animales de razas británicas puras y cruzas de 220 a 300 kg de peso vivo, alimentados a pasturas
durante el día y encerrados por la noche en un corral para
suplementarlos con maíz. El establecimiento estaba ubicado
en la localidad de Buchardo, provincia de Córdoba. En el año
anterior hubo 2 animales con lesiones similares a las descriptas en este reporte, pero el diagnóstico no fue confirmado.
Se examinaron clínicamente 6 animales en los que se observaron lesiones en piel y tejido subcutáneo de los miembros
anteriores y posteriores, ganglios linfáticos preescapulares e
inguinales superficiales y en la piel de la región escrotal. Las
lesiones consistían en múltiples nódulos firmes de 0,5 a 10 cm
aproximadamente, solitarios o la mayoría coalescentes, que
se desplazaban al tacto. Algunos de ellos, los más superficiales, sobresalientes y sin la presencia de piel que los cubriera, fistulizaban hacia el exterior eliminando un contenido
de aspecto purulento con pequeños gránulos de aproximadamente 1 mm de color verde amarillento. Otros presentaban un
recubrimiento costroso con pérdida de la sensibilidad y eran
sangrantes al tacto. Los miembros afectados tenían un aumento exagerado de tamaño de las partes distales. Ninguno
de los 6 animales afectados con las lesiones descriptas tenía
lesiones en la cabeza. Observando el total de los animales
del lote, aproximadamente el 1% evidenciaba lesiones clásicas de actinobacilosis en zonas de la cabeza. Se realizó la
necropsia de un animal macho, Aberdeen Angus, de aproximadamente 18 meses, que tenía lesiones en un miembro
anterior y el ganglio preescapular fistulado. Los principales
hallazgos macroscópicos consistieron en lesiones piogranulomatosas de la cadena ganglionar a lo largo de todo el miembro. Las lesiones estaban rodeadas por fibrosis. El ganglio
preescapular estaba aumentado de tamaño, con necrosis e
inflamación piogranulomatosa. En ambos pulmones se encontraron múltiples focos granulomatosos de 0,5 a 1 cm de
diámetro en superficie y en profundidad del parénquima. Los
cortes histopatológicos de piel, ganglios linfáticos y pulmón,
demostraron la presencia de numerosos focos de necrosis
licuefactiva con drusas bacterianas en su interior, rodeados
por una reacción celular mixta compuesta por macrófagos,
linfocitos, células plasmáticas y neutrófilos (piogranuloma).
Se realizaron cultivos aeróbicos y en atmósfera microaerófila
en agar sangre, de lesiones de ganglios linfáticos, pulmón y
piel, aislando Actinobacillus lignieresii (A. lignieresii) de pulmón y de piel. En esta última muestra también se identificó
Staphylococcus sp. A los cinco animales restantes afectados,
se les realizaron dos tratamientos separados por 15 días con
yoduro de sodio endovenoso y estreptomicina sulfato intramuscular que llevaron a la resolución del cuadro clínico. Los
hallazgos clínicos, anatomopatológicos y bacteriológicos, indicaron un cuadro de linfadenitis producida por A. lignieresii.
Debido a que el A. lignieresii necesita una lesión que le facilite
el ingreso, es importante eliminar todo lo que pueda provocar lesiones de continuidad. En la recorrida por el corral se
observaron salientes en los hierros que sostenían los rollos
de heno; palos enterrados que sobresalían aproximadamente
50 cm; alambres de púas; nudos de alambres con salientes
y excesiva cantidad de animales en el mismo. En este caso
es importante destacar que los animales afectados solo presentaron lesiones en lugares poco frecuente, sin estar involucradas áreas de la cabeza, que es donde comúnmente se
ubican, complicando así el diagnóstico clínico.
91
I. 12.
Albinismo em búfalos murrah na região sul do rio grade do sul.
Marcolongo-Pereira C, Damé MC, Vargas Junior SF, Barreto-Coelho AC, Soares MP, Quevedo PS, Schild AL
Laboratório Regional de Diagnóstico – Faculdade de Veterinária – UFPel,
Campus Universitário s/n, 96010-900, Pelotas, RS, Brasil.
E-mail: [email protected]
Albinism in water bufalloes in southern Brazil.
Albinismo é um defeito de origem hereditária que afeta várias
espécies domésticas, incluindo felinos, caninos, eqüinos e bovinos
e caracteriza-se pela hipopigmentação melanopênica na qual
os melanócitos estão presentes porém são defeituosos e não
sintetizam melanina ou hipopigmentação melanocitopência na
qual há ausência de melanócitos. A lesão varia da completa
ausência de melanina a redução mínima da cor da pele, dos
pelos e dos olhos. Albinismo foi descrito em bovinos das raças
Holstein, Hereford, Pardo Suíço entre outras. Em bubalinos
da raça Murrah albinismo com pigmentação normal dos olhos
foi descrito em uma província da China com uma prevalência
de 30%. Tem sido relatada, também, em diversas raças de
bubalinos a ocorrência de animais com manchas brancas nos
membros e coloração normal do restante do corpo os quais
são denominados albinoides. O objetivo do presente trabalho
foi descrever a ocorrência de albinismo em búfalos da raça
Murrah no Sul do Rio Grande do Sul. Em um período de 10
anos nasceram em uma propriedade aproximadamente 800
búfalos dos quais 14 apresentaram o defeito, todos filhos de
4 diferentes touros. O defeito caracterizava-se por completa
ausência de pigmentação na pele, nas mucosas e nos olhos
que eram rosados e nos pelos que eram brancos. No estudo
histológico em biopsias da pele de 5 búfalos albinos
presentes na propriedade havia espessamento da epiderme
que apresentava projeções para o interior da derme, ausência
de grânulos de melanina e presença de melanócitos observados
pela técnica de imuno-histoquímica utilizando-se anticorpo
monoclonal Melan-A (Dako). Foi observado, ainda, reação
juncional na região dermo-epidérmica comumente observada
em melanomas. Um búfalo albino foi eutanaziado logo após
o nascimento por apresentar sinais neurológicos caracterizados
por depressão, ataxia, tremores e cegueira sendo feito o
diagnóstico de hidranencefalia. Neste caso a imuno-histoquímica
foi negativa para Melan-A. Os resultados obtidos pela imunohistoquímica sugerem que o albinismo observado nos búfalos do
presente relato é do tipo melanopênico. O fato de um búfalo
albino não ter apresentado marcação positiva na imuno-histoquímica deve-se provavelmente a não exposição aos raios
ultra-violeta do sol que com o tempo permitem a expressão
de epítopos que são marcados pela imuno-histoquímica, uma vez
que o mesmo foi eutanaziado logo após o nascimento devido
a ter hidranencefalia. A alta consanguinidade no rebanho e
a prevalência aproximada de 1,75% de búfalos afetados em
um período de 10 anos sugerem que se trata de uma doença
hereditária transmitida por um gene recessivo autossômico
e que este gene está disseminado na população da raça na
região. Diversos defeitos congênitos têm sido diagnosticados em
búfalos da raça Murrah no Brasil, principalmente nos estados
do Rio Grande do Sul e Pará tais como dermatose mecânicobolhosa, artrogripose, condrodisplasia, hipopigmentação da
íris, hérnia umbilical e hiperplasia muscular. A maioria desses
defeitos é de origem hereditária e transmitida por genes
recessivos autossômicos, os quais provavelmente se manifestam
em conseqüência da alta consangüinidade existente no
rebanho dessa raça no Brasil.
92
I. 13.
Descripción clínico-patológica de salmonelosis en terneros de tambo.
Margineda CA, Louge Uriarte EL, Giannitti F, Moreira AR, Odriozola ER,
Cámpora L, Bodega J, Lischinzky T, Malena R, Odeón AC.
Grupo de Sanidad Animal, EEA INTA Balcarce, Pcia. Buenos Aires.
E-mail: [email protected]
Clinico-pathological description of salmonellosis in dairy
calves.
Las infecciones por Salmonella son una causa importante de
morbilidad y mortalidad en terneros criados artificialmente.
Tres síndromes clínicos bien diferenciados (septicemia, enteritis aguda y enteritis crónica) suelen presentarse en terneros,
aunque las infecciones subclínicas son también frecuentes.
Los serovares Typhimurium y Dublin son los de mayor importancia en bovinos a nivel mundial. El objetivo del presente
estudio es describir los hallazgos clínico-patológicos obtenidos durante un brote de salmonelosis en terneros de tambo.
Los animales afectados, cruza Jersey de 2 a 7 días de vida,
se encontraban en la crianza artificial de un tambo del partido
de Tres Arroyos (Pcia. de Bs. As.). El estudio del brote incluyó
el examen clínico, hemograma, medición de proteínas totales
(PT) y gamma-glutamiltrasnferasa (γ-GT) sérica y análisis
bacteriológicos de tres terneros y necropsia e histopatología
de 2 de los animales en estudio. Los signos clínicos registrados fueron diarrea acuosa con estrías de sangre, hipertermia,
decaimiento, deshidratación, opistótono, pedaleo y muerte.
El curso de la enfermedad tuvo una duración promedio de 7
días (rango: 4-10 días). Los terneros recibieron tratamiento
con tilmicosina inyectable y sulfametazina por vía oral, no
respondiendo favorablemente a la terapia. El hemograma
mostró valores normales en cuanto a: recuento eritrocitario
(promedio: 6.975.000/µl), hematocrito (promedio: 37,75%),
concentración de hemoglobina (promedio: 10,35 g/dl) y recuento leucocitario (promedio: 9.550/µl). Las mediciones de
PT y γ-GT presentaron valores promedio (4,6 g/dl y 4, 05 U/l
respectivamente) menores a los de referencia para la especie
y categoría (6.9 a 8.9 g/dl y 76 a 490 U/l, respectivamente),
confirmando un deficiente calostrado, y de manera indirecta,
la falla en la transferencia pasiva de anticuerpos. Durante las
necropsias (de dos terneros) se observó aumento de tamaño
y edema de los linfonódulos mesentéricos (LNM), sin lesiones aparentes en intestino delgado, intestino grueso y otros
órganos. Las lesiones microscópicas de uno de los terneros
ne-cropsiados consistieron en neumonía intersticial con infiltrado alveolar mixto (polimorfonucleares y mononucleares)
difuso, con predominio de neutrófilos y presencia de células
gigantes multinucleadas, y nefritis intersticial focal mixta con
hemorragias en pelvis y corteza renal. En el segundo ternero
necropsiado se observó meningoencefalitis difusa con infiltrado mixto (predominio de mononucleares) perivascular,
abomasitis y enteritis supurativa difusa moderada, linfoadenitis necro-supurativa multifocal severa con leucocitosis sinusal
marcada, hepatitis necro-supurativa multifocal aleatoria moderada, esplenitis supurativa difusa y nefritis intersticial multifocal mixta leve. Para análisis bacteriológico se remitieron
muestras de contenido intestinal, pulmón, bilis, líquido cefaloraquídeo y materia fecal (del animal que no se sacrificó). Se
procedió a la siembra en agar sangre, agar MacConkey y en
caldo te-trationato selectivo con 3 repiques cada 48 h en medio XLD. La identificación se realizó por pruebas bioquímicas
de rutina para enterobacterias. Una vez identificados los aislamientos, se efectuó el antibiograma de las cepas. Se aisló
Salmonella spp. móvil de todas las muestras procesadas,
órganos y materia fecal, tanto de la siembra directa en medio XLD como de los enriquecimientos en caldo tetrationato y
subcultivos correspondientes. La serotipificación realizada por
el INEI-ANLIS Dr. “Carlos G. Malbrán” confirmó que los aislamientos pertenecían al serovaridad Typhimurium (S. entérica
subsp. entérica). Los antibiogramas mostraron resistencia
múltiple, incluyendo a tetraciclina, ampicilina, sulfonamidas y
tilmicosina (estos dos últimos habían sido utilizados); no obstante se mostraron sensibles al cloramfenicol, enrofloxacina
y sulfametazina + trimetroprima, entre los más importantes.
Si bien se realizó un diagnóstico acabado (clínico, evaluación
del calostrado, análisis bacteriológicos e histopatológicos) y
a pesar que no se descartaron otras etiologías que podrían
haber estado implicadas como causa de diarrea, la relevancia
de los aislamientos de Salmonella en los diferentes órganos
permite inferir que este agente fue la principal etiología de la
septicemia y muerte en los terneros. Por otra parte, la histopatología se convirtió en una herramienta fundamental para
confirmar la septicemia en uno de los casos, del cual sólo
se había muestreado y cultivado el pulmón. En muchos establecimientos lecheros la salmonelosis se presenta en forma
endémica, lo cual representa un riesgo para la salud pública.
Además, un aspecto de gran importancia es el hallazgo
de resistencia múltiple a diferentes antibióticos en las cepas
aisladas. Por ello, siempre se debe determinar el perfil de
resistencia a antibióticos en los aislamientos de Salmonella
para poder instaurar un tratamiento adecuado. Además, las
buenas prácticas de manejo e higiene durante la crianza
artificial de terneros son fundamentales para prevenir la
salmonelosis.
93
I. 14.
Estudio retrospectivo de enfermedades bovinas que cursan con signos neurológicos
en la región pampeana.
Margineda CA, Odeón AC, Marín M, Odriozola ER, Giannitti F, Campero CM
Servicio de Diagnóstico Veterinario Especializado, Grupo de Sanidad Animal, EEA INTA Balcarce,
Ruta Nacional 226 km 73,5 (7620) Balcarce, Buenos Aires, Argentina.
E-mail: [email protected]
Retrospective study of bovine diseases with neurological
signs in la pampa region.
La Argentina es un país libre de encefalopatía espongiforme
bovina (EEB). Este hecho junto con el control de otras enfermedades como fiebre aftosa permite exportar carne y sus derivados a países muy exigentes. Para mantener este estatus
sanitario se requiere mantener un sistema de vigilancia epidemiológica, pasivo y activo, que incluya el diagnóstico diferencial de enfermedades con signos neurológicos en animales
adultos (>24 meses). En animales jóvenes (<24 meses) es
importante conocer las enfermedades neurológicas que se
presentan en nuestro país y cuáles son las más frecuentes
en los distintos sistemas de producción. En este trabajo se
describen las enfermedades con signos neurológicos diagnosticadas durante el año 2008, 2009 e inicios del 2010 en
el área de influencia del INTA Balcarce. El Servicio de Diagnóstico Veterinario Especializado del INTA Balcarce atiende
consultas por problemas sanitarios realizadas por veterinarios de la actividad privada, efectuando visitas a los establecimientos ganaderos con problemas o mediante el análisis
de muestras remitidas por los profesionales. Para abordar al
diagnóstico final se realiza recopilación de datos anamnésicos, examen clínico, estudios post mortem y estudios complementarios (bacteriología, histopatología, virología, bioquímica, parasitología, toxicología). Durante el año 2008, 2009 y
enero-marzo del 2010 se diagnosticaron 33 diferentes enfermedades que cursaron con algún tipo de signo neurológico;
15 fueron de etiología metabólico/nutricional, 9 de origen
tóxico, 7 de etiología infecciosa, 1 de etiología parasitaria y
1 de etiología desconocida. En bovinos adultos (>24 meses)
se diagnosticaron 12 casos (C): hipomagnesemia (4C; 3 cría,
1 tambo), hipocalcemia (1C; tambo), hipocalcemia-hipomagnesemia (1C; cría), intoxicación por Cynodon dactylon (1C;
cría), intoxicación hídrica (1C; cría), intoxicación por Solanum
bonaeriense (1C; cría), intoxicación con Wedelia glauca (1C;
no determinado), intoxicación con hepatotóxico agudo (1C;
tambo) y listeriosis (1C; tambo). En bovinos jóvenes (<24 meses) se diagnosticaron 21 casos: polioencefalomalacia (5C;
3 feedlot, 2 invernada), desbalance Ca:P (2C; feedlot), hipomagnesemia (2C; invernada), listeriosis (2C; feedlot), meningoencefalitis virales (2C; feedlot), intoxicación con Wedelia
glauca (2C; invernada) intoxicación con Phalaris spp. (2C;
invernada), coccidiosis (1C; feedlot), encefalitis por Herpesvirus Bovino tipo 1 (1C; invernada), tuberculosis meníngea (1C;
tambo) y enfermedad de los espacios craneanos (1C; feedlot).
En animales adultos, la hipomagnesemia y las enfermedades
tóxicas fueron diagnosticadas con mayor frecuencia (41,6% y
41,6%), apareciendo un solo caso de origen infeccioso en vacas de tambo. De 6 cerebros de animales adultos examinados
microscópicamente, 2 presentaron lesiones neurológicas: microabscesos en la base encefálica (vaca de tambo, listeriosis)
y degeneración y necrosis de las células de Purkinje (vaca de
cría, intoxicación con Solanum bonaeriense). De 20 cerebros
estudiados ninguno presentó lesiones sospechosas de EEB.
La aparición y el crecimiento del número de feedlots en el
país generaron un nuevo escenario de enfermedades neurológicas en animales jóvenes. En el feedlot la polioencefalomalacia (27%), encefalitis infecciosas (41,6%) y desbalance
Ca:P (16,6%) fueron las enfermedades más frecuentes, al
contrario de lo que ocurre en invernada pastoril donde el 50%
de las enfermedades neurológicas fueron de origen tóxico, y
ninguna de origen infeccioso. El feedlot, debido a la mayor
tasa de contacto entre animales, favorece la transmisibilidad
de agentes infecciosos. El hacinamiento y la alimentación en
estos sistemas intensivos de producción son factores predisponentes para la presentación de enfermedades infecciosas
y metabólicas.
94
I. 15.
Descripción clínico-patológica de la infección natural y experimental por herpesvirus
bovino tipo 1.
Marin MS1, Pérez SE1, Verna AE2, Louge Uriarte EL2, Leunda MR2, Odriozola ER2, Campero CM2, Odeón AC2
1. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Ciudad de Buenos Aires, Pcia. Buenos Aires.
2. Grupo de Sanidad Animal, EEA INTA Balcarce, Pcia. Buenos Aires.
E-mail: [email protected]
Clinico-pathological description of natural and experimental infection by bovine herpesvirus type i.
Los Herpesvirus bovino 1 y 5 (BoHV-1 y BoHV-5) son patógenos del bovino estrechamente relacionados. BoHV-5 es
considerado como un neuropatógeno primario, mientras que
BoHV-1, además de causar primariamente cuadros respiratorios y/o reproductivos, también podría estar asociado a enfermedad neurológica. El objetivo de este trabajo es describir los
hallazgos clínico-patológicos de una infección experimental
con BoHV-1 y de un brote de encefalitis en terneros en el que
se aisló BoHV-1. Para la infección experimental fueron desafiados 2 terneros Triple Cruza, serológicamente negativos a
BoHV, menores de 12 meses de edad, con la cepa de referencia BoHV-1 LA38 (106,3 DICT50/ml). El seguimiento clínico y
la recolección de muestras de secreciones nasales y oculares
se realizó diariamente. Durante el pico de infección aguda, a
los 7 días post-infección (dpi), los animales fueron enviados a
faena, donde se recolectaron muestras de distintos sectores
del encéfalo (médula oblonga, cerebro y cerebelo) y ganglio
trigémino (GT). El encéfalo fue cortado transversalmente en 8
secciones de 1-2 cm de espesor, obteniéndose submuestras
de las distintas áreas para aislamiento viral e histopatología.
Se registró una temperatura rectal promedio de 39,5 °C en el
ternero 1 (T1) y de 38,9 ºC en el ternero 2 (T2); se observó
secreción mucosa moderada en el T2 a los 4 dpi y secreción
nasal muco-purulenta a los 6 dpi en ambos terneros. No se
observaron secreciones oculares ni signos nerviosos. BoHV-1
se aisló de las muestras de hisopados nasales a los 4, 5 y 6 dpi
y de todas las secciones de tejido nervioso estudiadas. La
identificación viral se realizó mediante inmunofluorescencia
directa (IFD). La evaluación histopatológica de los cortes de
tejido nervioso de ambos animales evidenció la presencia de
hemorragias focales en todas las áreas del cerebro y meningitis no supurativa, leve en corteza posterior. Se detectaron
manguitos perivasculares mononucleares y pequeños focos
de gliosis en corteza anterior, posterior y médula oblonga.
Áreas de gliosis difusa fueron detectables en corteza anterior y posterior y pequeños focos de neuronofagia y satelitosis
se observaron en corteza anterior, posterior y en la base del
cerebro y diencéfalo del ternero T1. No se observaron lesiones microscópicas en GT y cerebelo. El caso de infección
natural ocurrió en un establecimiento ganadero de Carlos
Tejedor (Pcia. Bs. As.), en un lote de 80 animales (40 novil-
los y 40 vaquillonas), con regular estado corporal. El brote
comenzó con la aparición de novillos con signos nerviosos
y, si bien algunos animales se recuperaron, diez días más
tarde aparecieron nuevos casos. En abril de 2009 se realizó
la necropsia de uno de los animales afectados, observándose
secreciones mucopurulentas en vías respiratorias altas y
bajas, congestión pulmonar, petequias en el corazón y congestión cerebral. En el establecimiento existían antecedentes
de queratoconjuntivitis y malformaciones congénitas. Se remitieron al Servicio de Diagnóstico Veterinario Especializado
de INTA Balcarce muestras de cerebro, pulmón e hisopado
nasal del novillo para aislamiento viral y análisis histológico.
Se aisló BoHV del hisopado nasal, mientras que el cerebro y
pulmón resultaron negativos. El aislamiento fue identificado
molecularmente, mediante PCR como BoHV-1. Microscópicamente se observó neumonía intersticial moderada (compuesta
por mononucleares y polimorfonucleares), hiperplasia linfoidea
de la pulpa blanca esplénica, hemorragias miocárdicas y subepicárdicas y congestión meningea. Si bien se aisló BoHV-1
de la muestra de hisopado nasal, no se pudieron evidenciar
suficientes lesiones compatibles con el cuadro de encefalitis producido por este agente. La ausencia de otras lesiones
en el SNC no permite explicar la causa de los signos nerviosos descritos. La neuroinvasividad de BoHV-1generalmente
no supera las neuronas de primer orden localizadas en GT,
donde se establece la infección latente. Sin embargo, BoHV-1
ha sido aislado esporádicamente de bovinos con desórdenes
del SNC, incluyendo meningoencefalitis. Además, en este
estudio, se aisló BoHV-1 de todas las regiones del sistema
nervioso analizadas, demostrando que su potencial neuroinvasivo usualmente es subestimado. Por otro lado, BoHV-1 y 5
no pueden diferenciarse mediante las pruebas de diagnóstico
de rutina. Como a BoHV-1 históricamente se lo asocia con
enfermedad respiratoria y genital, los herpesvirus aislados
en casos de estos síndromes se atribuyen a BoHV-1 y, del
mismo modo, los casos de infección neurológica en el ganado
se atribuyen generalmente a BoHV-5. Los hallazgos presentados en este trabajo ponen de manifiesto la necesidad de
reevaluar la patogenia de estos herpesvirus y de las pruebas que rutinariamente se utilizan para su diagnóstico, lo cual
permitirá una mejor comprensión de la presentación de los
mismos en el bovino.
95
I. 16.
Dermatitis digital papilomatosa bovina asociada a infestación con Tunga penetrans en
bovinos de cría del noroeste argentino.
Marin RE
Actividad privada. S.S de Jujuy.
E-mail: [email protected]
Papillomatous bovine digital dermatitis associated with
Tunga penetrans infestation in breeding cattle of northwest Argentina.
El rápido desarrollo de la actividad ganadera en el noroeste
argentino (NOA) obliga a la validación de nuevos sistemas
productivos, considerando necesaria la caracterización regional de la problemática sanitaria y posibles medidas de
prevención para la eficientización productiva. La dermatitis
digital papilomatosa ó verrugosa bovina (DDPB) podría resultar de una dermatitis digital de larga evolución, y su origen ha
sido asociado con una variedad de bacterias, principalmente
espiroquetas del género Treponema. En el NOA existe una
plaga conocida como “pulga de la arena”, “Pique” ó “nigua”,
especie de pulga muy pequeña (Tunga penetrans) de 1 mm
de tamaño y hematófaga, siendo los animales domésticos y
salvajes sus reservorios. La infestación, denominada tungiasis, está asociada a estaciones secas y a suelos arenosos.
La misma ocurre por la invasión intradérmica de la hembra
fertilizada de la pulga, la cual aumenta su tamaño alcanzando
hasta 1 cm, permitiendo la entrada a infecciones secundarias.
Este trabajo describe la presencia de DDPB asociada a la
infestación por Tunga penetrans en bovinos en un sistema de
cría extensivo de Coronel Cornejo, Salta. El rodeo afectado
está compuesto por 520 vientres cruza índica nativos sobre
pasturas de Gatton panic y Bracchiaria sp en lotes desmontados y campo natural con monte selvático. Las aguadas naturales se encuentran rodeadas de amplios arenales donde los
animales descansan gran parte del día. Las lluvias ocurren
principalmente entre noviembre y marzo totalizando
los 1000 mm. Entre los años 2007 y 2008 se observó la infestación con Tunga penetrans en el 90 % del rodeo a partir
del otoño, afectando el rodete coronario, espacio interdigital y
dedos accesorios, pezones y prepucio, con mayor severidad
en animales adultos. Los animales afectados presentaban
cojeras severas que afectaban su estado corporal (regular a
malo). Algunos casos se complicaron con mastitis crónicas,
y cuadros de DDPB. La morbilidad de DDBP fue del 6 % de
los vientres y el 30 % de toros, ocasionando el refugo de
ésos animales. Los cuadros agudos de DDBP presentaban
lesiones ulcerativas en rodete coronario, espacio interdigital
y talones. Las lesiones papilomatosas correspondían a masas proliferativas y sangrantes de hasta 12 cm de diámetro.
El cultivo bacteriológico realizado en las lesiones crónicas
confirmó la presencia de Pseudomonas sp. La histopatología
evidenció una importante proliferación fibropapilar, abundante
neovascularización, severo infiltrado mononuclear linfoplasmocitario, y aparente colonización bacteriana en sectores ulcerados de la piel, evidenciando formaciones compatibles con
Tunga penetrans intradérmicas y huevos. La alta infestación
por Tunga penetrans observada en el rodeo y su importancia
clínica al afectar la traslación, con pérdida de estado corporal,
mastitis e infecciones secundarias, hacen que su presencia
tenga especial gravitación en el rodeo. Es altamente probable
que la lesión inicial en la piel producida por este insecto sea
la puerta de entrada de microorganismos patógenos, similar
a lo descripto en humanos, originando cuadros de dermatitis
digital papilomatosa. Durante los episodios registrados en el
2008 los animales afectados con cuadros agudos se trataron
simultáneamente con ivermectina 1% en una sola dosis y oxitetraciclina LA (3 dosis durante 10 días), lográndose la mejoría clínica de los afectados. Durante la época seca de 2009,
se fumigó con cipermetrina en los arenales cercanos a las
aguadas lográndose disminuir la tasa de morbilidad al 0,5 %
en vientres y 0 % en toros. Se concluye que esta condición
es una parasitosis de importancia clínica y económica en la
ganadería regional del NOA contribuyendo a la presentación
de cuadros de DDPB.
96
I. 17.
Un caso de adenomatosis pulmonar ovina en la puna de Jujuy.
Marin RE1, Setti W2, Carrillo BJ2, Blanco Viera J3
1. Programa Sanidad Animal. DPDG, Ministerio de Producción, Gobierno de la provincia de Jujuy
2. AER. INTA. Abra Pampa.Jujuy.
3. INTA-CICV, Castelar.
E-mail: [email protected]
A case of ovine pulmonary adenomatosis in the puna region of Jujuy province, Argentina.
La ganadería de altura en la puna jujeña se caracteriza por
ser un sistema mixto (ovinos, caprinos y camélidos, y escasos bovinos), con deficiente manejo nutricional y sanitario,
destinado a la subsistencia del grupo familiar. En Jujuy, la
población de ovinos está estimada en 453.515 cabezas, de
las cuales el 77,16% se encuentra en la zona de Puna. La
Adenomatosis Pulmonar ovina (APO) ó Jaagsiekte, es un
tumor pulmonar contagioso que se presenta en ovinos, con
menos frecuencia en caprinos, causado por un betaretrovirus
(JSRV) que aún no se ha logrado cultivar in vitro, pero que ha
sido clonado y secuenciado. La enfermedad se caracteriza
por un largo período de incubación, afectando principalmente
ovinos de más de 2 años de edad. Excepcionalmente se presenta en animales de 2–3 meses. Los animales manifiestan
síntomas de dificultad respiratoria progresiva y edema en el
tracto respiratorio. A la necropsia, los pulmones están edematosos, agrandados, aumentados de peso, con lesiones
nodulares grisáceas generalmente bilaterales, que pueden
ser muy pequeñas ó extensas. La forma atípica presenta
tumores nodulares blancos, duros, y solitarios. Histológicamente se observa proliferación de neumocitos de tipo II, pudiendo estar implicadas las células clara de los bronquiolos
terminales. Se puede observar crecimientos papilares que se
proyectan en el alvéolo, siendo una característica destacable
el acúmulo de abundantes macrófagos alveolares adyacentes a las lesiones neoplásicas. Los síntomas clínicos y las
lesiones post–mortem son el método primario para establecer
el diagnóstico presuntivo de APO, pero la confirmación debe
realizarse por métodos inmunohistoquímicos y moleculares.
En Argentina fueron comunicados casos de APO en las provincias de Córdoba y Jujuy entre 1984-1985 y en Río Negro en 2004. Este trabajo describe un caso de APO en una
oveja de 5 años, originaria de una majada de la localidad de
Miraflores, (22º49´06”S y 65º49´30”O), a 3.455 metros sobre
el nivel del mar, departamento de Cochinoca, en la puna de
Jujuy. Se trata de un animal de una majada de más de 350
ejemplares de razas Corriedale, Merino y Manchego (65, 25 y
10% respectivamente), donde los ovinos comparten potreros
e instalaciones con llamas y vicuñas. Los síntomas clínicos
observados fueron dificultad respiratoria aguda luego de un
movimiento en el corral, que incluía taquipnea, extensión del
cuello y boca abierta, con eliminación de fluidos límpidos por
fosas nasales. A la necropsia se observaron pulmones sin colapsar, pesados y con nodulaciones firmes coalescentes de
color grisáceo marmóreo, ocupando el 80% de ambos órganos, sobre la mitad ventral de lóbulos diafragmáticos y otros
lóbulos, observándose una fina zona enfisematosa demarcatoria entre la parte afectada y el tejido pulmonar funcional. La
tráquea y el árbol bronquial se encontraban obliterados con
abundante espuma blanquecina y edema de los linfonódulos
mediastínicos. Los hallazgos histopatológicos fueron proliferación del epitelio alveolar de células columnares (neumocitos
tipo II), con proyecciones papilares intraalveolares y sectores
con formaciones de aspecto acinar. Se observó además proliferación hiperplásica de células epiteliales bronquiolares con
proyecciones papilares hacia la luz del bronquiolo, y abundante proliferación de macrófagos alveolares en áreas circundantes a sectores tumorales. Los hallazgos clínicopatológicos
son coincidentes con los descriptos en la literatura internacional y son concluyentes en el diagnóstico de APO. Estudios inmunohistoquímicos y moleculares se encuentran en proceso
para la confirmación etiológica del cuadro y la determinación
epidemiológica de la región, en la cual fueron descriptos casos de APO en 1982, siendo sacrificadas en ésa oportunidad
la totalidad de las majadas implicadas en ésa epizootia.
97
I. 18.
Calcinosis enzoótica en bufalos: reporte de un caso.
Micheloud JF1, Pellerano B2, Pezzone N1, Baroni EE2, Marini MR1, Sanchez A1, Canal AM1
1. Cátedra de Patología Básica.
2. Cátedra de Toxicología.
Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Litoral.
E-mail: [email protected]
Enzootic calcinosis in buffalo: a case report.
La producción bubalina se ha extendido enormemente en los
últimos años. Constituye una alternativa para zonas marginales en donde el ambiente es demasiado hostil para la producción bovina. Estas áreas son botánicamente muy ricas en
plantas tóxicas; Solanun glaucophyllum es una de ellas, y se
caracteriza por producir una enfermedad conocida como “calcinosis enzoótica” en bovinos, aún no descripta en búfalos.
El presente trabajo tiene por objeto describir la aparición de
un brote de calcinosis enzoótica en búfalos. Se concurrió al
establecimiento “San Felipe” ubicado en la provincia de Formosa, a unos 50 km de la ciudad de Pirané. El rodeo bubalino
estaba constituido por unas 11.000 cabezas. El motivo de la
consulta era que aproximadamente un 2 % de las hembras
adultas sufrían un cuadro de pérdida de peso progresivo y
anestro. Los animales afectados permanecían mucho tiempo
en decúbito, y algunos manifestaban una marcha envarada.
No había signos de diarrea. Se procedió a realizar una necropsia completa de uno de los animales afectados, y se tomaron
muestras en formol bufferado al 10 %. Luego se recorrió el
área para evidenciar la presencia de plantas potencialmente
calcinogénicas. A la necropsia se observó un estado caquéctico generalizado, con atrofia serosa de la grasa del surco coronario y del área perirrenal. La única lesión evidente se halló
en la aorta abdominal, la cual presentaba en su túnica íntima
un área endurecida, rugosa al tacto, contraída y de tonalidad
opaca. Histopatológicamente se evidenció la precipitación de
sales de calcio en la túnica media de la arteria, fragmentación
de fibras elásticas y proliferación de tejido conjuntivo subendotelial. Los demás órganos no presentaron lesiones; no se
hallaron áreas calcificación en pulmón o corazón, algo que
es frecuente en bovinos afectados por calcinosis enzoótica.
Al recorrer los potreros donde los animales pastoreaban se
pudo evidenciar la presencia de Solanum glaucophyllum en
gran parte del área. La calcinosis enzoótica o “enteque seco”
es una enfermedad causada por la intoxicación crónica con
ciertos vegetales tales como el Solanum glaucophyllum. Los
animales afectados presentan principalmente una menor conversión alimenticia e incapacidad para desplazarse. Teniendo
presente las lesiones observadas, la signología clínica, y la
abundancia de Solanum glaucophyllum en el establecimiento,
se arribó al diagnóstico de dicha intoxicación. Se realizarán
estudios más profundos a los fines de valorar la importancia e
incidencia de esta enfermedad en la producción bubalina, ya
que la misma se realiza en áreas donde abunda esta planta,
y por ende la calcinosis enzoótica podría significar un grave
problema para los establecimientos dedicados a esta
producción.
98
I. 19.
Mortandad de bovinos asociada a la ingestión de Asclepias mellodora. Descripción de
un caso.
Odriozola ER, Cámpora LB, Bodega JJ, Giannitti F
Servicio de Diagnóstico Veterinario Especializado, Grupo de Sanidad Animal,
EEA INTA Balcarce, Ruta Nacional 226 km 73,5 (7620) Balcarce, Buenos Aires, Argentina.
E-mail: [email protected]
Case report: calves mortality associated with the consumption of Asclepias mellodora.
Se describe un caso de mortandad en terneros de destete,
asociado a la ingestión de Asclepias mellodora ocurrido en
diciembre del 2009. Esta maleza es una hierba perenne,
de floración primavero-estival, perteneciente a la familia Asclepiadaceae, de 0,4-0,7 metros de altura, erecta,
con raíces gruesas y leñosas, de hojas enteras pecioladas,
opuestas, de 6-12 por 0,5-1,2 cm, glabras o hapenas pubescentes. Las flores son pequeñas, blanco-amarillentas, dispuestas en cimas umbeliformes, terminales y axilares. El fruto
es un folículo fusiforme multiseminado de 9-12 cm de largo.
Posee conductos lactíferos en hojas y tallos y se conoce a las
especies de este género comúnmente como “lecheronas” o
“milkweeds”, por la abundancia de látex (jugo blanco-lechoso)
que exudan los tallos al quebrarse. Un número importante de
Asclepias son tóxicas y pueden causar la muerte del ganado
y de los seres humanos. Dosis de 2 g de materia seca por kg
de peso vivo fueron letales para ovinos experimentalmente.
Se identificó a la desglucouzarina como el principal glucósido cardenólido de A. mellodora. El caso afectó a terneros
de destete en un establecimiento agropecuario del partido de
Guaminí, provincia de Buenos Aires. El lote estaba compuesto por 594 terneros machos de razas británicas y sus cruzas. Al día siguiente de haber ingresado a un potrero en una
zona de médanos, con escasa disponibilidad de “pasto llorón”
(Eragrostis curvula), fueron hallados 7 animales muertos y
uno afectado (1,35 % de morbilidad y 87,5 % de letalidad). Al
recorrer el potrero se identificó abundante cantidad de
A. mellodora, muchas de estas plantas incluidas en las matas
de “pasto llorón”, que evidenciaban haber sido consumidas
por los animales (herbivoría). Se inspeccionó un animal clínicamente afectado que presentaba agresividad, alteraciones
en la marcha, babeo y timpanismo ruminal. Se tomó una
muestra de sangre y se procedió a su sacrificio para estudios postmortem, asimismo se realizaron las necropsias de
otros 2 animales hallados muertos. Se tomaron muestras de
tejidos en formol al 10% para estudios histopatológicos. Los
hallazgos de necropsia fueron similares en los tres casos, incluyendo hemorragias endocárdicas petequiales, congestión
y enrojecimiento difuso de la mucosa ruminal, múltiples erosiones/úlceras no perforantes de las mucosas abomasal y
duodenal. A la histopatología se observó ruminitis necrótica
multifocal con degeneración vacuolar de las células de la
capa córnea y formación de vesículas, enteritis necrosupurativa, necrosis hepática centrolobulillar difusa, hemorragias
y edema del endocardio y miocardio adyacente, y congestión
abomasal. Se dosó la actividad sérica de la enzima creatininfosfoquinasa (CPK) mediante espectrofotometría en el animal
sacrificado, arrojando valores de 1797 U/l (valor normal: 8 a
13 U/l). Los datos anamnésicos, los signos clínicos, los hallazgos anatomopatológicos y de laboratorio y la presencia de
plantas consumidas permiten sospechar que esta especie
vegetal fue responsable de las muertes registradas. En condiciones normales los animales se rehúsan a comer Asclepias
sp. En esta oportunidad la baja oferta forrajera del potrero
(año de extrema sequía) y la presencia de matas consociadas
de “pasto llorón” y A. mellodora, habrían facilitado el consumo
de esta planta y precipitado la intoxicación. Si bien la especie
es conocida por su toxicidad, no hemos hallado referencias
bibliográficas que reporten intoxicaciones naturales en bovinos en la República Argentina.
99
I. 20.
Diagnóstico de raiva em bovinos pela técnica de imuno-histoquímica no sul do Rio
Grande do Sul.
Sallis ESV, Marcolongo-Pereira C, Azevedo LA, Raffi MB, Grecco FB, Soares MP, Schild AL
Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária,
UFPel, Campus Universitário s/n, 96010-900, Pelotas, RS. Brasil.
E-mail: [email protected]
Immunohistochemical diagnosis of rabies in cattle in
southern Rio Grande do Sul, Brazil.
A raiva é uma encefalite altamente fatal, causada por um vírus
RNA neurotrópico, do gênero Lyssavirus, família Rhabdoviridae.
No Brasil a enfermidade é transmitida principalmente pelo
morcego hematófago Desmodus rotundus e menos freqüentemente por canídeos. As perdas anuais de bovinos por raiva
são estimadas em aproximadamente 850.000 cabeças, que
equivalem a aproximadamente 17 milhões de dólares. Os objetivos
desse trabalho foram descrever oito surtos de raiva em
bovinos, ocorridos nos anos de 2008 e 2009, diagnosticados
no Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD) da Faculdade
de Veterinária-UFPel, Rio Grande do Sul, Brasil, avaliando-se
a utilização da técnica de imuno-histoquímica como ferramenta
de diagnóstico, especialmente nos casos em que não são
evidenciados corpúsculos de inclusão. Fragmentos do encéfalo
dos bovinos afetados fixados em formol a 10% para exame
histológico foram, também, submetidos a técnica de imunohistoquímica, utilizando-se anticorpo policlonal (Chemicon
#5199, na diluição de 1:1000), pelo método de estreptavidinabiotina-peroxidase. Os dados epidemiológicos e clínicos dos
animais foram obtidos junto aos proprietários e/ou veterinários
da Secretaria da Agricultura da região. Os surtos ocorreram
nos municípios de Pelotas e Morro Redondo, Rio Grande do
Sul, região que caracteriza-se pela presença de morros e mata
nativa, favorável a proliferação deste mamífero. A taxa de
morbidade variou de 2,6% a 25,0% e mortalidade foi de 100%
em todos os surtos. Apesar de não terem sido observadas
mordidas nos bovinos afetados havia furnas com morcegos
próximas as propriedades onde ocorreram os casos. A maioria
dos casos ocorreu no outono e inverno. A idade dos bovinos
afetados variou de um a cinco anos e a evolução clínica foi
de 4 a 14 dias. Os sinais clínicos caracterizaram-se por apatia
ou inquietação, mudança de comportamento, agressividade
em alguns casos, incoordenação motora, paresia e paralisia
dos membros pélvicos, decúbito, movimentos de pedalagem,
opistótono e morte. Nas necropsias havia apenas congestão
das meninges. Histologicamente no sistema nervoso central
havia manguitos perivasculares de células mononucleares,
principalmente no tronco encefálico, cerebelo e gânglio de
Gasser. Verificou-se, também, degeneração e necrose
neuronal e focos de gliose. Em cinco surtos foram observadas
inclusões intracitoplasmáticas eosinofílicas (corpúsculos de
Negri) no citoplasma de neurônios do tálamo, células de
Purkinje, medula e gânglio de Gasser. Os oito encéfalos
suspeitos apresentaram marcação imuno-histoquímica positiva
para raiva no citoplasma de neurônios e axônios. A utilização
da imuno-histoquímica mostrou-se eficiente para a confirmação
do diagnóstico, principalmente nos casos em que não foram
evidenciados corpúsculos de inclusão, devendo ser levada em
consideração para o diagnóstico definitivo da doença. Por ser uma
técnica rápida permite a tomada de medidas profiláticas imediatas
para impedir o aparecimento de novos casos, como o combate
ao morcego e a vacinação do rebanho na área dos focos,
diminuindo desse modo as perdas econômicas dela decorrentes.
Os surtos observados nos anos de 2008 e 2009 depois de
aproximadamente 10 anos sem a observação de casos na
região deve-se provavelmente ao aumento da população de
morcegos na região.
100
I. 21.
Compared lectin binding pattern in cerebellar cortical degeneration induced by Solanum
fastigiatum var. Fastigiatum and S. bonariense in cattle.
Sant’Ana FJF1, Barbeito CG2, Ishida F2, Gimeno EJ2, Verdes JM3, Battes D3, Morãna A3, Barros CSL4
1. UFG/CAJ, Jataí, GO, Brazil.
2. UNLP/FCV, La Plata, Argentina.
3. UDELAR, Montevideo, Uruguay.
4. UFSM/LPV, Santa Maria, RS, Brazil.
E-mail: [email protected]
This wok describes and compares the morphologic and
lectin histochemical findings in thirty three natural cases of
S. fastigiatum var. fastigiatum intoxication in cattle from southern Brazil, and two natural and four experimental cases of
S. bonariense intoxication in cattle from Uruguay. The
following biotinylated lectins were used in both cases: WGA,
sWGA, BS-I, Con-A, RCA-I, DBA, UEA-I, and LCA. Clinical
signs observed in all poisoned cattle were restricted to the
central nervous system and included proprioceptive and
cerebellar deficits such as incoordination, hypermetria, transitory
seizures, frequent falls and muscle tremors when moved or
stimulated. Seizures were occasional or frequent and lasted
a few seconds. After these episodes, numerous animals
presented wide base stance or remained apparently normal.
Gross changes were noted only in two cattle naturally poisoned
by S. fastigiatum and included moderate atrophy of the
cerebellum. Histologically, the lesions were restricted to the
cerebellum and consisted of partial fine vacuolization and loss
of the Purkinje cells, axonal spheroids measuring 14-50µm, in
the granular cell layer and adjacent white matter and proliferation
of Bergmann’s glia. In some cases, the vacuoles were
coalescent and occupied one pole or the most of the pericarya
of the neurons. Lectin histochemistry revealed strong reactivity
of stored material in Purkinje neurons with the lectins sWGA,
Con-A and LCA in S. fastigiatum cases. A similar pattern was
found in S. bonariense cases with a most intense reaction to
WGA, and less intense reaction to Con-A, whereas BS-I and
RCA-I binding was absent to poor in these neurons in all the
cases studied. There was no difference in the lectin reactivity
in the Purkinje cells between the cases with a small number
of affected cells and those with chronic loss of neurons. The
results of this study showed that in the spontaneous poisoning
by S. fastigiatum and in poisoning by S. bonariense in cattle,
the pattern of lectin binding is similar to those observed
in S. fastigiatum experimental intoxication. A fine vacuolar
degeneration of neuronal perikaria with progressive axonal
degeneration resulting in the death of these cells, and eventually
atrophy of the cerebellum, are the main pathological features
of this disease. Other species of Solanum, such as S. dimitiatum,
S. kwebense, S. viarum and S. cinereum, have been associated
in other countries with neurological disorders in ruminants
with the same clinical manifestation and pathological lesions
observed in the poisoning by S. fastigiatum and S. bonariense.
The lectin-binding pattern observed in affected Purkinje cells
of the present investigation is similar to that detected in plant
induced α-mannosidosis (including poisonings by plants of the
genera Swainsona, Oxytropis, Astragalus, Sida and Ipomoea).
That latter presents, in addition, vacuolization of pancreatic,
liver and kidney epithelial cells. To our knowledge, this is the
first description of lectin histochemical aspects of
spontaneous cases of poisoning by S. fastigiatum var.
fastigiatum and spontaneous and experimental cases
of poisoning by S. bonariense in cattle. Further studies are
needed to define specific storage content in accumulated
lisosomes in Purkinje cells and the potential role of distorted
cytoskeleton in axonal transport alteration suggested in this
cerebellar cortical degenerations induced by Solanaceae in
cattle.
ACKNOWLEDGEMENTS
This work was supported by grant of Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), Covenant ProSul, project
490389/2008-2, Brazil, and Comisión Sectorial de Investigación Científica (CSIC), Uruguay. C.G.B. and E.J.G. are Research Career Members of
the Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas, Argentina. F.J.F.S and C.S.L.B. are recepients of CNPq fellowships.
101
I. 22.
Un caso de dermatofilosis mucocutánea prepucial en novillos de la provincia de Entre Ríos.
Travería GE, Di Paolo LA, Alvarado Pinedo MF, Romero JR.
CEDIVE. Centro de Diagnóstico e Investigaciones Veterinarias. FCV UNLP.
Alvear y Salta (7139). Chascomús. Buenos Aires. Argentina
Email: [email protected]
A case of preputial mucocutaneous dermatophilosis in
steers of Entre Ríos province.
La dermatofilosis es una dermatitis exudativa y proliferativa causada por la bacteria Gram positiva Dermatophilus
congolensis perteneciente al orden Actinomycetales, familia
Dermatophiloceae. La enfermedad puede afectar a animales
salvajes y domésticos e incluso al hombre. En los bovinos
se puede observar una forma severa y progresiva asociada
con la infestación de garrapatas (Amblyoma variegatum),
dado que la saliva de las garrapatas contiene una amplia
gama de sustancias bioactivas, que inhiben la inflamación.
La formación de costras es causada por repetidos ciclos de
invasión de la bacteria a la epidermis, seguidos de multiplicación, infiltración rápida por neutrófilos e hiperqueratosis. En
el presente trabajo se presenta un caso de dematofilosis mucocutánea de presentación poco frecuente. El motivo de consulta fue la presencia de lesiones prepuciales en 70 novillos
pertenecientes a un rodeo de 154 animales (45% de prevalencia) de un establecimiento ubicado en el Delta en la provincia de Entre Ríos. Como antecedente previo se mencionó
la ocurrencia de estas afecciones durante la época de verano
y otoño. Se realizaron dos visitas al establecimiento en donde
se observaron lesiones costrosas en la región mucocutánea
del prepucio. En las lesiones mas avanzadas los animales
presentaban disuria; en algunos casos se producía la obstrucción completa del prepucio con acumulación de orina en
el tejido subcutáneo y, en los casos más graves, ruptura de
uretra con fistulización de orina a través de la piel. Se realizó
la necropsia de un animal y la toma de diferentes muestras
de otros animales afectados para los siguientes análisis:
muestras de sangre para la realización de análisis bioquímico
y pruebas de virusneutralización para rinotraqueitis infecciosa
bovina (IBR) y diarrea viral bovina (BVD), hisopos con material de lesiones prepuciales para cultivos bacteriológico y
virológicos, y muestras para estudios histopatológicos, que
se conservaron en formol al 10%. Los resultados bioquímicos obtenidos fueron uremia elevada de 0,54 g/%o a 0,65
g/%o, (valores de referencia: 0,10 - 0,48 g/%o) y creatinemia
normal. En todas las muestras analizadas las pruebas de virusneutralización para IBR resultaron negativas mientras que
para BVD se encontraron títulos de 1:128. Los aislamientos
virológicos fueron negativos para IBR y BVD. Los cultivos
bacteriológicos presentaron desarrollo en agar sangre de
pequeñas colonias amarillas, a partir de las cuales se realizaron las coloraciones de Gram y tinción 15 pudiéndose observar formas cocoides. La histopatología de las lesiones prepuciales presentó hiperqueratosis con abundante infiltración
eosinofilica subyacente. Se realizaron coloraciones de PAS y
de Gram, con las cuales no se lograron observar claramente
patógenos. Se realizó también la coloración de Grocott, con la
cual sí se identificaron formas compatibles con Dermatophilus
congolensis. Coincidiendo con lo descrito por otros autores, la
época del año, las condiciones húmedas medio ambientales
y la mayor presencia de insectos fueron condicionantes de
esta presentación. El diagnóstico debe realizarse a partir del
cultivo de las lesiones, resultando en este caso de gran ayuda
la histopatología.
102
I. 23.
Intestinal obstruction by phytobezoar in cattle.
Ubiali DG, Moraes LGM, Caldeira FHB, Lodi LR, Pescador CA, Souza MA, Colodel EM.
Universidade Federal de Mato Grosso, Departamento de Clínica Médica Veterinária,
Laboratório de Patologia Veterinária. Cuiabá, MT, 78.068-900, Brasil.
[email protected]
Bezoars, intussusception and volvulus are described as
the main causes of intestinal obstruction in cattle.
Phytobezoares are rounded and solid structures formed within
the gastrointestinal tract from residual high fiber content
grasses. There is evidence that some plants may predispose
to formation of these structures in different species: Romulea
bulbocodium predisposes phytobezoar formation in cattle
and “oats” (Avena sp.) predisposes phytobezoar formation
in horses. In northeastern Brazil, “palma-forrageira” (Opuntia
sp.) predisposes phytobezoar formation in cattle; and in
Africa, coarse seeds and fibers from native shrubs consumed
by sheep also predispose to this condition. The aim of this
paper is to describe the epidemiology and clinical-pathological
picture of intestinal obstruction in cattle in Mato Grosso, Brazil.
In January 2010 the staff of the Laboratory of Veterinary
Pathology (LPV-UFMT), Cuiabá campus visited a farm in Alto
Araguaia, Mato Grosso, Brazil, to investigate cases of cattle
mortality. Epidemiological data was obtained from the owner.
The paddocks were surveyed and clinical examination was
performed in two animals. Two animals with clinical symptoms
and four animals that were found dead in the pasture
underwent necropsy. Several organs were collected and
processed routinely at LPV-UFMT for microscopic examination.
The affected herd consisted of approximately 250 cows, 150
steers and 10 bulls regularly vaccinated against rabies, foot
and mouth disease and botulism. The soil was predominantly
sandy. Death of animals started in December 2009 and
intensified in January 2010, and the animals affected were
in areas with predominance of Stylosanthes sp. All ages
were affected. Approximately 60 animals died. Stylosanthes
sp. had been implanted three years before, intercropped with
Brachiaria brizantha at a ratio of 20:80, but after two years
of grazing, there was predominance of Stylosanthes sp. In
January 2010, the herd was transferred to a pasture of
B. brizantha which did not have Stylosanthes sp. After
moving the animals, deaths continued to occur, but became
less frequent, approximately 12 deaths occurred between
February and April. Recently, the soil was mechanically
managed with tractor plow and areas infested by Stylosantes
sp. were then replaced by B. brizantha. The grass and the
leguminous plants sprouted in association. After the reform of
pasture deaths occurred less frequently, in May, it was reported
the death of three cows. The clinical findings reported by those
responsible for the herd were variable. Initially there was
isolation from the group, apathy, anorexia and recumbency.
Diarrhea was often noticed, as well as mucous content in the
rectum, dehydration, gastrointestinal hypomotility, discomfort,
increased abdominal size and lateral recumbency with the
animal apparently depressed. The clinical course lasted usually
5-7 days, with most affected animals being found dead near
the water sources. Grossly, compact and firm structures, from
spherical to oval, brownish green, (phytobezoars) were found
in the rumen and occasionally in the abomasum of all animals
that underwent necropsy. They were seen in variable numbers
and sizes varied from 1 cm to 15 cm in diameter. In one cow
isolated from group and apathetic, that was euthanized, no
lesions indicating obstruction were observed, however there
was presence of seven phytobezoar in the abomasum, with
different sizes and similar to other described. In the animals
that were found dead, there were phytobezoars of about 3 cm
in diameter causing obstruction either at the pylorus or at the
initial or middle portion of the duodenum. The forestomachs
and duodenum were filled proximally to the site of obstruction
and the portions distal to the phytobezoar lacked food
contents. Friable intestinal tissue, with intense swelling,
congestion, edema and mucosa presenting a red line
associated to the phytobezoar were noted in the area of
obstruction. The gallbladder was distended. Histologically, the
intestine, at the site of obstruction by the phytobezoar,
exhibited diffuse necrosis in the mucosal surface, thickening of
the wall by submucosal edema, neutrophilic infiltrate, intense
fibrin deposition, random necrosis of smooth muscle fibers
and marked congestion and hemorrhage. Basophilic bacteria
bacilli in the intestinal surface were seen. In the abomasum
there was mild multifocal congestion and hemorrhage in the
wall and mucosa. Since 2000, Stylosanthes sp. has been
commercialized for livestock production in Brazil as a source
of protein in association with S. capitata and S. macrocephala.
It is usually recommended to use 20 to 40% of Stylosanthes sp.
with the bulky forage. In this study, the paddocks where the
outbreaks occurred exhibited predominance of Stylosanthes
sp. Fiber-rich food is considered one of the most important
risk factors for this digestive phenomenon. Many animals
have bezoars without clinical manifestation, as it is a common
finding in animals in slaughterhouses. Epidemiological and
clinical-pathological studies on poisoning by Stylosanthes sp.
are being carried out with greater detail at LPV-UFMT.
103
I. 24.
Spinal cord compression in cattle associated with a vaccinal granuloma.
Ubiali DG, Pescador CA, Néspoli PB, Caldeira FHB, Oliveira LP, Souza MA, Colodel EM.
Universidade Federal de Mato Grosso, Departamento de Clínica Médica Veterinária,
Laboratório de Patologia Veterinária. Cuiabá, MT, 78.068-900, Brasil.
E-mail: [email protected]
Spinal cord compression in cattle can be caused by abscesses,
vertebral trauma, osteomyelitis and neoplasia. The aim of this
paper is to describe the clinical and pathological features of
spinal cord compression in cattle produced by vaccine-associated
granuloma. In August 2009 four steers between seven and
nine months old were brought Novo Progresso, Pará state,
Brazil, to an enclosure of the Laboratory of Veterinary Pathology
(LPV-UFMT), Cuiabá campus. Epidemiological data were
obtained from the owner and the animals were clinically
observed for 30 to 60 days. One animal was submitted to a
lumbosacral myelography exam via the lumbosacral space.
After that, the four animals were euthanised, necropsied and
various organs were collected and routinely processed in
LPV-UFMT for histology. The herd had 3,000 cattle and 100
sheep. In May 2009, cattle were vaccinated against foot and
mouth disease (FMD), rabies and black leg. In July the owner
complained that 25 cattle of different ages were affected by
the same neurological signs. The animals had a fair nutritional
condition and presented a muscle and subcutaneous nodular
protuberance of about 5cm diameter on the left side of the
lumbar region. The neurological examination was compatible
with lumbar spinal cord compression syndrome with progressive
paralysis of hind limbs characterized by ataxia with signs of
dragging hooves, crossing of legs when walking, resting
position with members spread, occasional stumbles and falls,
evolving to sternal recumbency with difficulty to rise. Sometimes
the animals assumed a dog sitting position, with hind limbs
extended. The sensory and motor reflexes of the forelimbs
were normal. There was slight hyper-extension of hind limbs,
a slight increase of the patellar reflex, superficial sensory loss,
impaired proprioceptive reflexes in the hindlimbs and tail and
anal slightly decreased. The clinical course reported ranged
between two and five months. Myelography revealed retention
of contrast on the L4 vertebra and intradural-extramedullary lesion
that extended from L1 to L3, characterized by derangement of
the columns of contrast and the presence of lines distributed
in a disorderly fashion through the spinal canal. The lesions
were similar in all animals necropsied, varying in intensity and
distribution. Macroscopically there were areas of necrosis in
the lumbar longissimus muscle with the presence of greyish
yellow material, with a lumpy aspect, which infiltrated between
the muscle fibers. In this material oily content was found with
a viscous consistency and whitish coloration (content similar
to the FA vaccine). This material was infiltrated between the
intervertebral bodies and was found in the sub-dural space,
varying in length from L1 to L4, adhered to the spinal
pia-mater. Histologically there were bilateral, focally extensive
poliomielomalacia, mainly in the ventral gray column, moderate
multifocal axonal vacuolation and occasional neuronal
chromatolysis. There were also marked thickening of pia mater,
extensive areas of caseous necrosis, with infiltration of
macrophages, epithelioid cells and multinucleated giant cells
surrounding unstained circular areas (apparently where there
were oil droplets of FA vaccine). Frequently, there was
proliferation of connective tissue in the periphery of these
areas. In the longissimus lumborum muscle there was
severe diffuse hyaline necrosis of muscle fibers associated
with granulomatous infiltration morphologically similar to that
described in the spinal canal. The epidemiological, clinical
and pathological aspects characterize spinal cord
compression by granuloma associated with inoculation
reaction of the FA vaccine. The spinal cord compression in
this case was attributed to errors in management during
vaccination. In Brazil, the recommendation of the Ministry of
Agriculture and Livestock (MAPA) is to carry out vaccination
against FMD using a syringe needle pistol 20x18, by
intramuscular injection of 5 ml on the side flank of the neck of
inactivated vaccine, trivalent in oil adjuvant. The gun should be
directed in a position perpendicular to the neck. Mishandling
during the vaccination may have consequences to the health
of animals. Practices and management techniques for vaccination
have been advocated in order to avoid disorders affecting the
health of animals, public health and the economy.
104
I. 25.
Identificación con fluoro-jade de células de purkinje degeneradas en cerebelos de bovinos
intoxicados con Solanum bonariense L.
Verdes JM1, Dehl V, Calliari A, Moraña A.
1. Facultad de Veterinaria. Universidad de la República (UdelaR,),
Av. Alberto. Lasplaces 1550, CP 11600, Montevideo, Uruguay.
E-mail: [email protected]
Fluoro-jade identification of degenerating cerebellar purkinie cells p4 bovines intoxicated with Solanum
bonarjense L.
El consumo de Solanum bonariense L. ocasiona una degeneración cortical cerebelosa en bovinos. Esta lesión se debe a
la degeneración específica de las células de Purkinje, permaneciendo aún sin aclarar los mecanismos desencadenantes
de la muerte de este tipo neuronal como consecuencia de
esta intoxicación. El Fluoro-Jade ha sido utilizado previamente
como un marcador de neurodegeneración en diferentes afecciones del sistema nervioso. La marcación de tipos neuronales específicos por este fluoróforo indicaría cuales células
son las que están en proceso de degeneración. El objetivo
del presente trabajo fue analizar la marcación con FluoroJade en la neurodegeneración ocasionada por Solanum
bonariense L. en cerebelos de bovinos intoxicados. Se obtuvieron cortes de 5μm a partir de muestras de 6 cerebelos
de bovinos intoxicados que fueron montados en portaobjetos
cubiertos con gelatina, desparafinados por2 pasajes por xilol
de 10 minutos, hidratados con alcoholes de concentración
decreciente, lavados con agua destilada por 1 minuto. Posteriormente se incubaron los cortes en agitación con permanganato de potasio al 0,06% durante 10 minutos y se lavaron
una vez con agua destilada por 2 minutos. Se incubaron con
Fluoro-Jade al 0,001% por 10 minutos y se lavaron en 3 lavados con agua destilada por 1 minuto cada uno. Finalmente
las láminas se secaron y se montaron con medio de montaje
sintético. Las mismas se observaron en microscopio con filtro
FITC. Las células marcadas por el fluoróforo mostraron un
color verde manzana, dependiendo su intensidad del grado
de reacción en contraste con el fondo oscuro del resto del
corte que no presentaba neuronas afectadas. En los cortes
obtenidos de animales intoxicados se observó una intensa
marcación del pericario y árbol dendrítico de las células de
Purkinje, con una marcación más tenue de las células de la
capa granulosa de la corteza cerebelosa; el resto del corte
no mostró reacción. La reacción con Fluoro-Jade marcó de
forma más intensa y específica a las células de Purkinje que
se encontraban en proceso de degeneración, así como de
forma menos intensa a otros tipos neuronales de la corteza
cerebelosa, Estos resultados preliminares coinciden con trabajos previos de nuestro grupo en cuanto a la especificidad
del daño de este tipo celular y sugieren que el uso de este
fluoróforo, en casos de degeneración cortical cerebelosa
ocasionada por Solanum bonariense; es una herramienta útil
para estudiar la evolución de este tipo de enfermedades del
sistema nervioso en bovinos.
105
I. 26.
Serología fetal y lesiones histopatologicas en casos naturales de abortos en bovinos
compatibles con Neospora caninum.
Weber NA1, Rodríguez AM1, Moore DP2, Lischinsky L3, Cano D3, Campero CM3
1. Residencia Interna en Salud Animal, INTA EEA, CC 276, (7620) Balcarce.
2. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET).
3. Grupo de Sanidad Animal, INTA EEA Balcarce.
E-mail: [email protected]
Fetal serology and histopathological lesions in spontaneous
bovine abortion compatible to Neospora caninum.
Neospora caninum es una de las causas de abortos determinadas más frecuentes en bovinos de nuestro país. Debido
a las dificultades inherentes al aislamiento del protozoo, se
emplean para su detección herramientas diagnósticas como
la determinación y cuantificación de anticuerpos fetales. Si
bien la serología fetal no permite confirmar la causa del aborto, la presencia de anticuerpos en fluidos se considera como
señal de infección y respuesta inmune. El auxilio de otras
técnicas como la histopatología, inmunohistoquímica (IHQ)
o PCR puede demostrar lesiones compatibles y/o presencia
del agente causal en los tejidos. El objetivo de este trabajo
fue establecer el valor diagnóstico que existe en la asociación
de la serología positiva a Neospora caninum y las lesiones
histopatológicas características de este agente en fetos
bovinos examinados en el INTA Balcarce durante los años
2007/2009. Dentro de la metodología de rutina diagnóstica,
se obtuvieron diferentes muestras de órganos y fluidos para
cultivos microbiológicos e histopatología. Se examinaron
102 fetos (60 de rodeos para carne, 23 para leche y 19 de
explotaciones mixtas). Se obtuvieron líquidos de cavidades
(abdominal, toráxica, pericárdica) para realizar la prueba de
inmunofluorescencia indirecta (IFI) con el fin de detectar anticuerpos contra N. caninum, tomando como valor de corte
de positividad la dilución 1/25. Se extrajeron muestras de
múltiples tejidos que fueron fijadas en formol tamponado al
10%, incluidas en parafina, seccionadas a 5 μm de espesor
y coloreadas con hematoxilina-eosina (H/E). Los criterios de
positividad de aborto compatibles con el protozoo se basaron
en la IFI positiva a 1/25 de los fluidos fetales y la presencia de
hallazgos microscópicos como encefalitis focal necrotizante,
hepatitis periportal, neumonía y miocarditis intersticial.
Al realizar la prueba de IFI se detectaron 10 (9.8%) especímenes seropositivos a N. caninum (8 de rodeos para carne y
los restantes de rodeos lecheros). De estos, 6 presentaron lesiones histopatológicas, a saber: encefalitis focal necrotizante
y meningitis no supurativas, epicarditis, pericarditis y hepatitis
periportal no supurativas y neumonía, miositis y nefritis intersticiales no supurativas, de grado leve a moderado. Los 4 fetos restantes presentaron lesiones inflamatoria inespecíficas
(arteritis cardíaca mononuclear, hepatitis leve, congestión en
sistema nervioso central, abomasitis no supurativa, enteritis
no supurativa severa, pericarditis mononuclear, nefritis intersticial focalizada) atribuidas al pasaje de un agente infeccioso
no determinado. Si bien resultados positivos a la prueba de
IFI para N. caninum no permiten concluir en un diagnóstico
determinado, la asociación con lesiones histopatológicas características como las observadas en sistema nervioso central, otorga un valor auxiliar contribuyendo a la aproximación
etiológica.
106
II. 01.
Presencia de amastigotes de Leishmania sp. en tumor venéreo transmisible intragenital
canino.
Amarilla SP1, Kegler Pangrazio K1, González Dengues E1, Grau Fernández I2, Avalos Ruiz Díaz A1
1. Dtpo. Ciencias Patológicas. F.C.V - UNA –San Lorenzo- Paraguay.
2. Dtpo. Patológicas y Clínica. División Hospital Veterinario F.C.V - UNA –San Lorenzo- Paraguay.
E-mail: [email protected]
Intragenital canine transmissible venereal tumor parasitized
by Leishmania sp. amastigotes.
El tumor venéreo transmisible (TVT) constituye una neoplasia
indiferenciada de células redondas linfohistiocitaria que compromete al aparato reproductivo de caninos sin distinción de
sexos, presentándose con menor frecuencia en localizaciones
extragenitales tales como mucosa nasal, oral, anal e incluso
en piel y tejido subcutáneo. A pesar de su alta indiferenciación
y crecimiento invasivo, raras veces hace metástasis. El TVT
se disemina entre caninos a través de la implantación alogénica de células vivas, no requiriendo la transformación de
células del hospedador. Las células del TVT presentan inmunoreactividad a la lisozima, alfa 1 antitripsina y al anticuerpo
monoclonal murino contra macrófagos de caninos, sugiriendo
un inmunofenotipo histiocitario. Por otra parte, la leishmaniosis visceral canina (LVC) es una zoonosis, producida por un
protozoario del género Leishmania; considerada endémica en
el Paraguay y otros países de Latinoamérica. Los caninos son
considerados como principales reservorios y factor de riesgo
de esta enfermedad en el ciclo de la transmisión epidemiológica para el hombre y clínicamente pueden presentar síntomas
característicos o permanecer como animales asintomáticos.
El objetivo del presente trabajo es describir un caso de TVT
vaginal asociado con la presencia de Leishmania sp. en un
canino. Un canino Bóxer, hembra de 2 años de edad, consultó por descarga vaginal serosanguinolenta constante no
asociada al estro. A la inspección vaginal se evidencio en dorsal y posterior de la vagina una masa con aspecto de coliflor,
pedunculada, lobulada, blanco-grisácea, sangrante y firme.
Se recolectaron muestras para estudios histopatológico y citopatológico con el objetivo de caracterizar el proceso. Las
improntas citológicas fueron fijadas con metanol y coloreadas
con Giemsa; las muestras de biopsia fueron fijadas por 48
hs con solución bufferada de formalina al 10% y procesadas
con la técnica histológica de rutina. En las láminas citológicas se observaron numerosas células redondas de forma y
tamaño uniforme, con núcleo excéntrico, cromatina laxa y nucléolos prominentes, de citoplasma basófilo pálido con vacuolas claras bien definidas en hileras. Además, se identificaron
moderado número de neutrófilos, histiocitos y macrófagos; en
estos últimos, se determinaron en su citoplasma, estructuras
de 2 a 4 micras, ovaladas, con núcleo y quinetoplasto eosinofílico evidente, caracteres morfocitológicos típicos del amastigotes de Leishmania sp. En otros campos llamativamente se
observaron dichas estructuras dentro del citoplasma de células neoplásicas y en forma libre. El estudio histopatológico
(H&E) demostró la disposición en cordones de células neoplásicas redondas, sostenidas por un tejido conjuntivo fibrovascular con infiltrado neutrofílico y mononuclear moderado.
Además, se visualizan varias figuras mitóticas atípicas y células en apoptosis. Se han identificado estructuras compatibles
con amastigotes de Leishmania sp determinadas en el estudio
citológico. Para la confirmación se realizó inmunohistoquímica (IHQ) utilizando el método estreptavidina-biotina-peroxidasa (LSAB+ kit, Dako USA), suero hiperinmune de canino
naturalmente infectado como anticuerpo primario y sistema
de revelación con diaminobencidina (DAB); obteniéndose
marcación positiva. Según las características citológicas e
histopatológicas, la masa vaginal corresponde a TVT en fase
de regresión. La presencia de amastigotes de Leishmania sp
en el interior de histiocitos y macrófagos, confirmada por IHQ,
es el resultado de la infiltración de dichas células parasitadas
en la masa tumoral, donde los amastigotes ocasionan ruptura
citoplasmática quedando libres y pueden ser nuevamente
fagocitados por células neoplásicas, sustentando la hipótesis
de que las mismas presentan un inmunofenotipo histiocitario.
Además, podría considerarse como un posible mecanismo
adicional de transmisión venérea de la leishmaniosis canina
teniendo presente que dicha transmisión ha sido confirmada
y que el TVT se disemina entre los caninos por implantación
alogénica durante el contacto sexual.
107
II. 02.
Immunodetection of MHC class II in macrophages of dogs with visceral leishmaniasis.
Andrade MMC1,2, Moreira PRR1,2, Bandarra MB1,2, Munari DP2, Lima VMF3, Vasconcelos RO2
1. Bolsista da FAPESP (Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo.
2. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias – UNESP, Jaboticabal, São Paulo, Brazil.
3. Faculdade de Odontologia, Araçatuba, São Paulo, Brazil.
E-mail: [email protected]
Canine visceral leishmaniasis is a zoonosis of public health
concern, caused by Leishmania (Leishmania) chagasi in the
Americas. The parasite has a great ability to modulate the
host immune response. Therefore, the aim of this study was to
evaluate the immunodetection of MHC class II in macrophages from
naturally infected dogs with L. chagasi. We used 32 mongrel
dogs, from Araçatuba, São Paulo State, Brazil. The animals
were classified in symptomatic, asymptomatic and oligosymptomatic groups. The parasite load in popliteal lymph node and the
MHC-II expression in macrophages from the lymph node were
examined using immunohistochemistry. To determine the density
of macrophages expressing MHC-II we used the anti-MHC
classe II (HLA-DR, DAKO), using 1:150 dilution. For parasite load,
we used the hyperimmune serum of dog naturally infected by
L. chagasi (1:1000 dilution). The density of immunostained
cells was measured by the average of these cells in five
microscopic fields per animal. We observed the higher parasite
load in the symptomatic group, but significant differences were
observed only between oligosymptomatic and symptomatic
groups compared to the asymptomatic group (P <0.05). The
symptomatic group showed intense granulomatous reaction,
but this was also observed in other groups. Macrophages in
these granulomas had cytoplasmic membrane immunostaining, but the reaction varied greatly. Some cells had a membrane
staining, others were not immunostained and others had
immunodetection of MHC-II on the membrane of
intracytoplasmic amastigotes from macrophages. The density
of cells positive for MHC-II had no significant differences
(P > 0.05) among the three groups of infected dogs.
Immunostaining for MHC II in the membrane of amastigotes
of the parasite suggests a process of internalization of this
molecule, favoring the survival and multiplication in this host.
The macrophage became inefficient in presenting antigens to
T lymphocytes. It is concluded that the expression of MHC-II
molecules is reduced in macrophages infected by L. chagasi,
regardless of clinical group, characterizing the mechanism
of parasite immune evasion, to promote their survival in the
host.
108
II. 03.
Primary brain t-cell lymphoma in a cat.
Bannwart LF1, Garcia EC1, Reis Junior JL2, Brown CC2, Langohr IM3, Sant’Ana FJF1.
1. UFG/CAJ/LPV, Jataí, GO, Brazil.
2. UGA/CMV, Athens, GA, USA.
3. Michigan State University, Lansing, MI, USA.
E-mail: [email protected]
Intracranial tumors are less common in cats than in dogs.
Lymphoma in cats is commonly associated with feline
leukemia virus (FeLV) and feline immunodeficiency virus
(FIV) infections but is infrequently described in nervous
system (CNS) of this species. Lymphomas affecting the CNS
usually are part of a multicentric disease in dogs and cats.
An association between immunosuppressive disorders and
primary brain lymphomas has been recognized in humans.
In cats and humans, most primary CNS lymphomas are
B-cell tumors and T-cell neoplasms are rarely described. Age,
breed and sex predilections have not been determined. This
report describes the pathological and immunohistochemical
findings of a primary brain T-cell lymphoma in a 10-year-old,
female, mixed-breed cat submitted for necropsy with a clinical
history of seven days of incoordination, circling and nystagmus
or fixed gaze. Grossly there was slight asymmetry of the right
telencephalic hemisphere, mainly in the pyriform lobe.
Additionally, the natural and cut surfaces of the liver presented
numerous white punctiform areas. Samples of multiple organs,
including brain, spinal cord, lung, heart, spleen, liver, kidney
and mesenteric and mediastinal lymph nodes, were sampled
and fixed in 10% buffered formalin. The tissues were
processed by routine methods for histopathological evaluation
and stained with hematoxylin and eosin. In order
to establish a final diagnosis of the neoplasm, the following
antibodies were applied in appropriate dilutions on the brain
sections: CD3 (polyclonal, 1:200), CD79a (monoclonal, 1:50),
BLA36 (monoclonal, 1:200), MAC387 (monoclonal, 1:200),
FeLV (monoclonal, 1:200) and feline infectious peritonitis (FIP)
virus (monoclonal, 1:1000). Immunohistochemistry (IHC) sections
were counterstained with Mayer’s hematoxylin. Positive controls
for IHC consisted of normal cat lymph nodes for the round
cell markers (CD3, CD79a, BLA36 and MAC387) and lymph
nodes of cats infected with FeLV and FIP virus. For negative
controls, the primary antibodies were replaced with PBS. AP
polymer and alkaline phosphatase were used as the detection
system. In addition, formalin-fixed paraffin-embedded
sections of the brain were submitted for identification of
FeLV viral particles by real-time PCR. Microscopically,
aggregates of small neoplastic round cells expanded areas
of the pons, midbrain, thalamus and subcortical white matter
of the parietal, occipital and pyriform lobes. These cells
presented typical lymphoid or plasmacytoid morphology. In
some regions, neoplastic cell aggregates coalesced to form
extensive sheets. In these areas, some arterioles presented
moderate fibrinoid degeneration. The neoplastic cells had moderate
pleomorphism, scant cytoplasm and hyperchromatic nuclei.
One to three mitoses were observed per high power field.
Neoplastic lymphocytes were also present in multiple layers
in the perivascular spaces and around the mesencephalic aqueduct
and third ventricle. Except for the liver, which showed marked
centrilobular degeneration of hepatocytes, the other tissue
samples were unremarkable and signs of the neoplastic
infiltration were found nowhere other than the brain. At IHC
evaluation, the neoplastic cells had strong diffuse cytoplasmic
labeling for CD3. There was no labeling in the tumor cells for
CD79a, BLA36, MAC387, FIP viral and FeLV antibodies.
PCR for FeLV was negative. Based on the morphologic and
immunohistochemical findings, a diagnosis of primary brain
T-cell lymphoma was made.
ACKNOWLEDGEMENTS
The authors thank Dr. Matti Kiupel and Dr. Roger Maes and their staff for the technical assistance with the IHC for FeLV and FIP virus and with
the real-time PCR for FeLV, respectively.
109
II. 04.
Un caso de rabdomiosarcoma en el músculo esquelético de un canino joven.
Comunicación de un caso.
Belotti M1, Pezzone N1, Marini MR1, Pepino S2, Sanchez A1, Angeli E1, Canal AM1
1. Cátedra de Patología Básica.
2. Hospital de Pequeños Animales. Facultad de Ciencias Veterinarias,
Universidad Nacional del Litoral. P. Kreder 2805, Esperanza, Santa Fe.
E- mail: [email protected]
A case of rhabdomyosarcoma in skeletal muscle of a
young dog. A case report.
Las neoplasias del músculo estriado son muy infrecuentes en
los animales domésticos, representando los rabdomiosarcomas menos del 1% de las neoplasias en caninos. A continuación se describe un caso de rabdomiosarcoma en un canino.
En el Hospital de Pequeños Animales de la Facultad de
Ciencias Veterinarias fue recibido un canino Rottweiler, macho, de 2 años de edad, con una historia de parálisis flácida
del tren posterior, de aparción abrupta, con incapacidad para
incorporarse e hipoestesia. Al examen físico, por palpación,
se encontró a nivel de los músculos de la región toracolumbar
izquierda una tumoración redondeada, de aproximadamente
8 cm de diámetro, de consistencia firme y fría al tacto. Se
realizó una radiografía y una biopsia. En la placa radiográfica
se observó una masa radiopaca en la región dorsolumbar.
Microscópicamente, la masa estaba compuesta en su mayor
parte por células redondas a poligonales, con citoplasmas
abundantes, pálidos y eosinófilos, algunos presentando estriaciones transversales; la mayor parte de las células eran
multinucleadas, siendo sus núcleos poco coloreados y dispuestos en la periferia. Dichas células, que asemejaban a
rabdomioblastos, estaban entremezcladas con otra población
de células más pequeñas, pleomórficas y con menor cantidad
de citoplasma. El índice mitótico era moderado. Se evidenciaron algunas áreas de necrosis y hemorragias. El diagnóstico morfológico fue el de rabdomiosarcoma de tipo embrionario. Se realizó inmunohistoquímica utilizando los anticuerpos
primarios monoclonales Anti-desmina y Anti-actina específica
de músculo, resultando las células más grandes, de tipo
rabdomioblastos, positivas a ambas marcaciones, aunque
no de manera uniforme. Los rabdomiosarcomas se clasifican en tipos embrionario, botiroide, alveolar y pleomórfico.
El de tipo embrionario es el más frecuente en el hombre y
posiblemente en los animales; dentro de éste, a su vez, se
distinguen dos subtipos; uno formado principalmente por células neoplásicas pequeñas y redondas, intercaladas con un
número variable de rabdomioblastos grandes y bien diferenciados, y el otro compuesto por células alargadas que asemejan a los miotubos del músculo en desarrollo. No existe
una evidente predilección por sexo o raza, y la mayoría de
los pocos casos publicados ocurrieron en animales adultos.
La cabeza y el cuello son las regiones en las que se han registrado con mayor frecuencia, existiendo algunos casos en
miembros, flanco y grandes masas musculares. Sin embargo,
la mayoría de los rabdomiosarcomas parecerían ocurrir en
lugares donde no existe músculo estriado normalmente. La
marcación inmunohistoquímica en este tipo de neoplasias
puede ser de difícil interpretación, debido a que los distintos
antígenos se expresan de manera variable, dependiendo del
grado de diferenciación de las células neoplásicas. En este
caso, las células mejor diferenciadas, semejantes a rabdomioblastos, presentaron una tinción más intensa que aquellas
más pequeñas, lo cual coincide con los casos publicados. La
expresión de actina de músculo liso en los rabdomiosarcomas también está documentada. Debido a la escasa bibliografía disponible sobre estas neoplasias, es difícil establecer
un pronóstico; sin embargo, los rabdomiosarcomas deben
considerarse como invasivos y potencialmente metastásicos.
En el caso estudiado, y debido a la incapacidad del animal
para incorporarse, los propietarios autorizaron la eutanasia,
pero no permitieron la realización de la necropsia.
110
II. 05.
Principales hallazgos clínico-patológicos de la trypanosomiasis cardíaca en 22 caninos
de Costa Rica.
Berrocal A.
Servicio Privado de Patología Diagnóstica (Histopatovet), Heredia, Costa Rica.
E-mail [email protected]
Cardiac trypanosomiasis in 22 dogs from Costa Rica.
Clinical and pathological findings.
La tripanosomiasis canina, también conocida como la enfermedad de Chagas o miocarditis chagásica, es causada por
un protozoario hemoflagelar, el Trypanosoma cruzi, el cual
tiene tres diferentes formas morfológicas, el tripomastigoto
o forma sanguínea, el amastigoto o forma intracelular, y el
epimastigoto que se localiza en el vector (Triatoma). Es una
enfermedad endémica, reportada desde el Sudeste de los Estados Unidos, toda Centroamérica y en casi toda Sudamérica.
Afecta a diferentes especies de mamíferos, especialmente a
humanos y perros. En humanos se estima que existen cerca
de 10 millones de infectados. En caninos son conocidas dos
presentaciones clínico-patológicas: la aguda, con muerte en
menos de 24 horas y la crónica. El objetivo del presente trabajo es presentar 22 casos de miocarditis chagásica diagnosticadas en Costa Rica desde 1993 a la fecha. Los 22 casos
fueron diagnosticados a través del examen post-morten del
cadáver. En ninguno de los historiales clínicos se consideró a
la tripanosomiasis como la causa de muerte. Las razones por
las cuales se solicitaron las necropsias fueron la sospecha de
alguna intoxicación, o el hecho de que la muerte ocurriera de
forma súbita, en pacientes relativamente sanos y jóvenes. Del
los 22 casos, 12 fueron hembras y 10 machos. Doce perros
eran de tamaño grande (4 Bulldogs, 2 Bóxers, 2 Labradores
y 4 de raza mixta). El promedio medio de edad fue 15 meses,
variando entre 2,5 a 48 meses; de estos 13 fueron menores
de 12 meses. Los signos clínicos indicados fueron muy escasos; en 10 animales la muerte ocurrió en menos de 24 horas,
manifestando solamente depresión y vómito. En uno de los
casos el diagnóstico de tripanosomiasis fue accidental, dado
que el perro era callejero y fue sacrificado por otras razones.
En 21 casos la necropsia se realizó en forma completa, mientras que en un caso la hizo el veterinario clínico, quien remitió
el corazón y el pulmón para estudio histopatológico. Todas
las alteraciones macroscópicas, especialmente las cardíacas, fueron protocolizadas y fijadas en formalina bufferada al
10%, para posteriormente ser procesadas de forma rutinaria para su respectivo estudio microscópico. En 8 casos se
realizaron raspados del miocardio, fijándose en seco, y coloreándose posteriormente con Giemsa. En tres de los casos,
se realizó inmuno-histoquímica. Las principales alteraciones
macroscópicas observadas fueron palidez de las mucosas,
congestión multiviceral, trasudado abdominal, torácico y
pericárdico, hepato y esplenomegalia, pulmones con mayor
consistencia y coloración rojiza, y líquidos en tráquea y bronquios. En todos los casos había una cardiomiopatía dilatada,
especialmente del lado derecho, con aéreas blanquecinas
focalmente extendidas. En 11 casos estas zonas blancas
abarcaban ambas cavidades, en 4 casos sólo el lado izquierdo, y en dos casos sólo el lado derecho. En los restantes 5
casos la distribución fue multifocal. A la superficie de corte la
palidez afectaba la pared del miocardio. Microscópicamente,
las principales alteraciones se caracterizaron por una gran
sustitución de las miofibrillas por tejido fibroso y células inflamatorias, con predominio de histiocitos, linfocitos y células
plasmáticas. En 3 casos, también se observaron zonas de
necrosis con presencia de polimorfonucleares. Además, en
2 casos hubo mineralización de las miofibrillas cardíacas. En
19 (86,5%) casos, se observaron una variable cantidad de
amastigotes dentro de las miofibrillas (seudoquistes), incluyendo los tres casos positivos a Trypanosoma cruzi por inmunohistoquímica. La edad, las razas mayormente afectadas,
la forma de presentación, los signos clínicos, y las lesiones
anatomopatológicas son semejantes a las descritas en la literatura para la tripanosomiasis canina. También el infiltrado
inflamatorio de las miocarditis tanto en su presentación aguda
como en la crónica son parecidas a las reportadas por diferentes autores, en casos experimentales y naturales. Debido
a que la mayoría de estos pacientes mueren generalmente de
forma súbita, se destaca la importancia de realizar el estudio
antomo-histopatológico de estos casos, a fin de diferenciarlos
de otras causas, especialmente las tóxicas.
111
II. 06.
Uso de anticuerpos monoclonales para la identificación de Leishmania spp. en un canino
afectado con kala-azar.
Cañón-Franco WA1, Osorio-Morales LF2, Pedraza-Ordóñez FJ3.
1. Profesor Auxiliar, Universidad de Caldas, Manizales, Colombia. Doutorando UFRGS, Porto Alegre, Brasil.
2. Investigadora Grupo de Patología Veterinaria, Universidad de Caldas.
3. Profesor Asociado, Universidad de Caldas, Doutorando FCAV-UNESP, Sao Paulo, Brasil.
E-mail: [email protected]
Use of monoclonal antibodies for the identification of
Leishmania spp. in a canine afected with kala-azar.
Se presenta un caso de diagnóstico inmunohistoquímico de
leishmaniasis visceral canina en un paciente del Hospital Veterinario de la Universidad de Caldas en Manizales, Colombia.
El propósito del presente reporte es informar sobre el diagnóstico de esta zoonosis en una zona no endémica, enfatizando
sobre la importancia de los anamnésicos, el abordaje clínico y
la rutina laboratorial, para establecer un diagnóstico definitivo.
La leishmaniasis canina es una enfermedad infecciosa sistémica severa causada por parásitos protozoarios del género
Leishmania, que son transmitidos al perro por la picadura de
insectos hematófagos de la familia de los Phlebotomus en el
viejo mundo y por insectos del género Lutzomia en America.
La enfermedad es endémica en los países mediterráneos,
África oriental, La India, Centroamérica y varios países de Sur
America. En países mediterráneos la Leishmania infantum es
la especie usualmente implicada en la leishmaniasis visceral
canina, produciendo una severa enfermedad sistémica caracterizada por un deterioro progresivo debido al envolvimiento
de múltiples órganos tales como el hígado, bazo, ganglios
linfáticos, medula ósea, riñones y piel. El paciente del presente relato era un canino macho Pastor Belga de tres años
de edad, que había ingresado a Colombia en un vuelo procedente de Madrid, España. De acuerdo al relato del propietario
el animal se encontraba aparentemente normal y en pocos
días empezó a notarse decaído e inapetente por lo cual fue
llevado al Hospital Veterinario para una evaluación general. A
la inspección inicial se observó una alta infestación por pulgas
y garrapatas, dermatitis, artritis, decaimiento e inapetencia.
El animal pesaba para ese entonces 22 kg; sin embargo su
propietario relató que unos meses atrás el peso de su mascota superaba los 28 kg. En los primeros procedimientos diagnósticos laboratoriales se realizó una serología que resultó
negativa para Erhlichia, Dirofilaria y Borrelia (Snap 3Dx).El
hemograma reveló una anemia normocítica normocrómica no
regenerativa, moderada leucocitosis con neutrofilia y plaquetas normales en número y morfología. En el parcial de orina
el nivel de proteínas fue 4,6 g/dL y se observaron ocasionales
células epiteliales y leucocitos, y escasas bacterias. El diag-
nóstico parasitológico mediante la técnica de Sheather no
permitió detectar la presencia de endoparásitos y en un examen directo (raspaje) de piel se diagnosticó la presencia de
ácaros adultos del género Demodex y tricorrexis. En el análisis clínico se encontraron signos característicos deleishmaniasis, incluyendo alopecia periocular, dermatitis escamativa
generalizada, enflaquecimiento progresivo y hepatomegalia.
Basados en el examen clínico y en la historia (paciente procedente de una región endémica para Leishmania) se inició la
búsqueda de las formas parasitarias en la piel donde se pudo
constatar la presencia de amastigotas mediante un examen
directo. Finalmente, debido a no haberse obtenido resultados
favorables al tratamiento se decidió realizar la eutanasia. En
la necropsia se encontraron alteraciones en la mayoría de
los órganos de las cavidades abdominal y torácica
entre ellas, neumoconiosis y enfisema pulmonar leve, congestión del duodeno, hepatomegalia, ligera esplenomegalia
y pequeños hemangiomas, la superficie renal irregular dejo
ver manchas blanquecinas y moderada dificultad para retirar
su capsula. Microscópicamente se encontró Bronconeumonía
supurativa, glomerulonefritis crónica y dermatitis crónica. Se
enviaron muestras de piel, bazo, hígado y riñón, a un laboratorio de referencia, el Servicio de Anatomía Patológica de la
Facultad de Veterinaria de la Universidad Autónoma de Barcelona en España, donde se confirmó por la técnica de inmunohistoquímica (usando anticuerpos monoclonales dirigidos
contra el complejo de L. infantum) la presencia de amastigotas en macrófagos del bazo, el hígado y la piel. La inmunohistoquímica del riñón fue negativa. Se concluye que se trata
de un caso fuera de lo común para la rutina diagnóstica en
el Hospital Veterinario de la Universidad de Caldas, ya que
el mismo se encuentra en una zona no endémica de leishmaniasis, resaltando la importancia de la anamnesis en la obtención de un diagnóstico definitivo. En este caso se asume
que el animal llego ya infectado de España. Se propone la
realización de investigaciones epidemiológicas tendientes al
establecimiento de los riesgos potenciales que podría tener
un caso similar, en una zona donde existen vectores biológicos capaces de transmitir la enfermedad.
AGRADECIMIENTOS
A la Dra. Dolors Fondevila Palau de la Universidad Autónoma de Barcelona en España por su ayuda en el diagnóstico inmunohistoquímico del
caso que aquí se presenta.
112
II. 07.
Cardiomiopatía restrictiva con trombosis mural en un felino.
Cuitiño MC1,3, Cappuccio JA1, Tórtora M2, Quiroga MA1.
1. Cátedra de Patología Especial.
2. Servicio de Cardiología, Facultad de C. Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata. CC 296 (1900). La Plata, Argentina.
3. Becaria CIC, Pcia de Bs As.
E-mail: [email protected]
Restrictive cardiomyopathy with mural thrombosis in a
cat.
Las cardiomiopatías felinas constituyen un grupo de
desórdenes morfológicos y funcionales de causa desconocida. Estas incluyen, en orden decreciente de prevalencia, las
formas hipertrófica, restrictiva, dilatada y no clasificada. La
cardiomiopatía restrictiva es una entidad no tan bien definida
como la cardiomiopatía hipertrófica. Se caracteriza por un llenado ventricular diastólico insuficiente debido a fibrosis del
endocardio y/o del miocardio. El objetivo de este trabajo es
presentar un caso de cardiomiopatía restrictiva con trombosis mural en un felino. Un felino, macho, de 5 años, mestizo,
fue presentado a la consulta por agitación y decaimiento. La
exploración clínica reveló disnea y la auscultación, arritmia y
ausencia de soplo. Mediante electrocardiograma se detectó
fibrilación auricular. El ecocardiograma evidenció agrandamiento atrial bilateral marcado, función sistólica normal, ventrículo izquierdo de espesores parietales normales, tanto en
sístole como en diástole, y diámetros camerales conservados. Se formuló un diagnóstico presuntivo de cardiomiopatía
restrictiva y se indicó el tratamiento con atenolol, 6 mg totales
cada 24 horas, furosemida, 4 mg/kg cada 12 horas y aspirina, 10mg/kg cada 72 horas. Luego de 1 mes, dado el deterioro evidente de la calidad de vida del paciente, se practicó
la eutanasia. En la necropsia se observaron colectas fluidas
en tórax y abdomen, hoja parietal del pericardio engrosada
y hemorrágica, con abundante colecta sanguinolenta en el
saco pericárdico, aumento moderado del espesor de la pared
del ventrículo izquierdo, disminución del diámetro de la cavidad ventricular y dilatación marcada del atrio izquierdo con
presencia de un trombo amarillento de 1 cm de diámetro,
firmemente adherido a la aurícula. En el estudio histopatológico se observaron, en el miocardio ventricular, áreas extensas
de fibrosis difusa, grupos de miocardiocitos con degeneración
hialina y vacuolar, fragmentación de las fibras y focos de miolisis, acompañados de un infiltrado de células histiocíticas,
linfocitos y células plasmáticas. La clasificación de las cardiomiopatías felinas es compleja dado que las distintas formas pueden compartir características clínicas, ecocardiográficas y anatomopatológicas macro y microscópicas. Más aún,
algunas cardiomiopatías no encuadran en las categorías de
hipertrófica, restrictiva y dilatada, por lo que se las considera
“no clasificadas” En este caso, los estudios electrocardiográficos y ecocardiográficos orientaron a formular un diagnóstico
presuntivo de cardiomiopatía restrictiva. Esto fue corroborado
por el hallazgo de una extensa fibrosis miocárdica ventricular
en el estudio histopatológico. Cabe mencionar que, si bien
es claro que la cardiomiopatía restrictiva felina se asocia con
la presencia de fibrosis ventricular, existen discrepancias entre los autores acerca de si su localización es endocárdica,
subendocárdica y/o miocárdica. Independientemente de ello,
consideramos que la presencia de fibrosis ventricular conduce a un proceso fisiopatológico restrictivo.
113
II. 08.
Neoplasias melanocíticas cutáneas en caninos: inmunomarcación de vimentina, proteína
S100 y Melan A.
Cuitiño MC, Massone AR, Idiart JR.
Cátedra de Patología Especial, Facultad de C. Veterinarias,
Universidad Nacional de La Plata. CC 296 (1900). La Plata, Argentina.
1 Becaria CIC, Pcia de Bs As.
E-mail: [email protected]
Canine melanocytic tumors of the skin: immunohistochemical
staining of vimentin, S100 protein and Melan A.
Los neoplasias melanocíticas (NM) representan del 4 al 20%
de las neoplasias cutáneas en caninos. En ocasiones, la
carencia de pigmento y el pleomorfismo celular plantean dificultades en la formulación del diagnóstico y del pronóstico,
por lo que las técnicas de inmunohistoquímica resultan de
utilidad. Los marcadores más utilizados para tal fin en medicina veterinaria son vimentina y proteína S100, aunque es
bien conocido que otras neoplasias también son positivas a
los anteriores. Melan A es una proteína que se expresa en
melanocitos y su distribución en otros tejidos es escasa. Es
utilizada para el diagnóstico de melanomas humanos y se ha
sugerido su potencial como indicador pronóstico. Existen algunos estudios sobre su aplicación en NM caninas pero los
resultados difieren entre los autores. El objetivo de este trabajo es describir las características de la inmunomarcación (IM)
de vimentina, proteína S100 y melan A en las NM cutáneas y
evaluar su relación con el diagnóstico histopatológico (melanocitomas y melanomas) y con las características histopatológicas de las mismas. Se utilizaron 29 melanocitomas y
30 melanomas previamente revisados y reclasificados (OMS,
1998). Se registraron las siguientes características histopatológicas: tipo celular predominante, grado de pigmentación
mediante una escala subjetiva de 1 a 4 y cantidad de mitosis
en 10 campos de mayor aumento. Para la inmunomarcación
se utilizó la técnica de peroxidasa y el kit de detección LSAB2
® System HRP (Dako) con revelado mediante diaminobencidina. Se utilizaron los anticuerpos anti melan A (clon A 103,
Novocastra), anti proteína S100 (rabbit polyclonal, Novocastra) y anti vimentina (clon V9, Novocastra). Se registraron las
siguientes características de la IM: porcentaje de neoplasias
positivas, distribución en el corte (homogénea, heterogénea),
intensidad (fuerte, moderada, débil), localización celular (citoplasmática, nuclear, ambas) y patrón celular de la reacción
(difuso, polar, ambos). Las diferencias entre las características de la IM y el diagnóstico histopatológico, así como entre
las primeras y las características histopatológicas, se evaluaron mediante la prueba de X2. El 96,5% de los melanocitomas (28/29) y el 93,3% de los melanomas (28/30) fue positivo
a vimentina. Las características de la IM fueron similares en
ambos. Ésta fue predominantemente homogénea (82,1%), de
intensidad fuerte (62,5%), con un patrón citoplasmático difuso
(98,2%). El 93,1% de los melanocitomas (27/29) y 93,3% de
los melanomas (28/30) fue positivo a proteína S100. Las características de la IM fueron similares en ambos. Se observó
un predominio de la distribución homogénea (54,5%), de la
intensidad moderada (45,5%) y de la localización nuclear/citoplasmática (87,3%), en todos los casos difusa. No se observaron diferencias en la IM de vimentina y S100 en función del
tipo celular, grado de melanización o cantidad de mitosis cada
10 CMA. Las características de la IM de melan A mostraron
diferencias entre melanocitomas y melanomas. El 96,5%
de los melanocitomas (28/29) y el 73,3% de los melanomas
(22/30) fue positivo a melan A. Se observó una mayor frecuencia de casos positivos en las neoplasias con los grados
más altos de melanización y viceversa (p<0,05). En melanocitomas, la IM fue predominantemente homogénea (58,6%),
de intensidad fuerte (82,1%) así como citoplasmática difusa
(92,9%). En melanomas, predominó la distribución heterogénea (54,5%), la intensidad fuerte (54,5%) y la marcación
citoplasmática difusa (68,2%). La intensidad de marcación
de melan A difirió significativamente entre melanocitomas y
melanomas, observándose asociación significativa entre la
intensidad moderada y melanomas (p=0,034). Los resultados
de la IM de vimentina y proteína S100 coinciden con los de
la bibliografía. La observación de un gran número de casos
positivos y de marcaciones de intensidad moderada a fuerte,
independientemente del grado de melanización, permite considerarlas marcadores útiles y de interpretación sencilla en
la identificación de NM pobremente diferenciadas y amelánicas. En lo que respecta a melan A, el hallazgo de una menor
proporción de casos positivos en melanomas y en los casos
con grados de melanización bajos, coincide con lo observado
por otros autores. A pesar de su alta selectividad, melan A
tendría menor capacidad que la proteína S100 para la identificación de NM pobremente diferenciadas y amelánicas.
Según nuestro estudio, Melan A contribuiría a la formulación
del diagnóstico en poco menos de la mitad de los casos. El
potencial valor pronóstico de melan A en melanomas humanos ha sido propuesto en un estudio en el que el porcentaje
de células inmunomarcadas se correlacionó con el grado de
malignidad del tumor. Las diferencias en la intensidad de marcación de Melan A entre melanocitomas y melanomas observadas en este estudio sugieren una relación de la misma con
el pronóstico.
114
II. 09.
Estudo retrospectivo de colangiohepatite felina: 7 casos.
Esmeraldino AT1, Santarém LO2, Ávila VPF3, Preussler PS4.
1. Médica Veterinária Patologista pela Universidade Luterana do Brasil – ULBRA campus Canoas-RS.
2. Aluna de pós graduação em Patologia Veterinária pela Universidade Luterana do Brasil – ULBRA campus Canoas-RS.
3. Médica Veterinária pós graduada em Patologia Veterinária pela Universidade Luterana do Brasil – ULBRA campus Canoas-RS.
4. Aluna de graduação em Medicina Veterinária pela Universidade Luterana do Brasil – ULBRA campus Canoas-R.
E-mail: [email protected]
Retrospective study of feline cholangiohepatitis: 7 cases.
A colangiohepatite felina é uma das maiores causas de
insuficiência hepática no gato. Esta doença é caracterizada
por inflamação hepática centralizada no espaço porta, e pode
ser aguda ou crônica. A etiologia exata desta alteração no
felino permanece desconhecida, embora haja relatos
que relacionem a doença com infecção ascendente dentro
dos ductos biliares. O diagnóstico definitivo só pode ser feito
através de exame histopatológico, pois os sinais clínicos e
exames bioquímicos são inespecíficos. O objetivo do presente
trabalho foi realizar um levantamento dos casos de
colangiohepatite felina, diagnosticados no Laboratório de
Anatomia Patológica Animal do Hospital Veterinário da Ulbra/
Canoas, no período de janeiro de 2008 a dezembro de 2009.
Foram colhidas informações sobre idade, sexo, histórico
clínico, sinais clínicos, descrição macroscópica e microscópica
da lesão e exames bioquímicos, quando existentes. Dos 7
animais que apresentaram a doença, 4 eram fêmeas e 3
machos, não se observando predisposição de sexo. A idade
variou entre 2 e 19 anos, sendo a idade média de 8,3 anos.
Icterícia, anorexia ou hipofagia, desidratação, perda de peso,
urina escura e prostração, foram os sinais clínicos mais
identificados. Foram realizados exames bioquímicos em
amostras de sangue de 5 animais e em todas foram
observados níveis elevados de uréia e fosfatase alcalina,
além de icterícia de moderada a intensa. Além destas alterações,
três amostras possuíam também níveis elevados de ALT. Nas
necropsias, dentre as lesões macroscópicas, observaram-se
mucosas, tecido subcutâneo e vísceras ictéricas; esplenomegalia;
fígado com alteração na cor, variando entre tons amarelados
e acastanhados e apresentando consistência variável, sendo
edematoso nos casos agudos e firme, com aspecto nodular,
nos casos crônicos. Em alguns casos o fígado apresentava
nódulos friáveis, áreas hemorrágicas e parênquima moteado.
No exame histopatológico com coloração de H&E, verificou-se
nas amostras de tecido hepático dos casos mais agudos,
tumefação dos hepatócitos, colestase e infiltração inflamatória
periportal, com predomínio de polimorfonucleares. Nos casos
de animais com a doença crônica, observou-se acentuada
infiltração inflamatória mononuclear, hiperplasia de ductos
biliares, necrose difusa dos hepatócitos, colestase, fibrose,
esteatose e hemorragia. Nos relatos existe uma grande
variedade quanto a idade e sexo dos animais acometidos.
Os níveis elevados de fosfatase alcalina e uréia, nos exames
sanguíneos, são indicativos de lesão hepática, e altos níveis
de ALT, indicam que a doença está no estágio agudo. No
entanto estes achados podem ocorrer em outras doenças
hepáticas, sendo necessário para o diagnóstico diferencial a
realização de exame histopatológico.
115
II. 10.
Estrogen and progesterone receptors in different histopathological grades of canine
mammary adenocarcinomas.
Hermo G1, Wargon V2, Soldati R2, Scursoni A3, Lanari C2, Gobello C1.
1. Animal Physiology, Faculty of Veterinary Medicine, La Plata National University.
2. Laboratory of Hormonal Carconigenesis, IBYME, Buenos Aires National University.
3. Laboratory of Pathology, Bernal Medical Offices. }
E-mail: [email protected]
Mammary tumors are the most frequent neoplasms in female
dogs. Occurrence of malignant forms varies from 40 to 50%,
being adenocarcinoma the most common histopathological
type. Histological grading of canine mammary carcinomas is
strongly related to prognosis, and its routine use appears to
be helpful in suggesting appropriate adjuvant therapies. The
improved method of Elston and Ellis for histological grading
of carcinomas provides powerful prognostic information. The
measurement of three parameters (tubule formation, nuclear
pleomorphism and mitotic count) reduced problems of
consistency and reproducibility to a minimum. In human breast
cancer, hormone receptors are important prognostic markers.
The aim of this study was to determine the expression of
estrogen receptors (ER) alpha (ER-α), beta (ER-β) and
progesterone receptors (PR) on canine mammary adenocarcinomas
of different histopathological grade (HG). Thirty-seven bitches
bearing mammary carcinomas were mastectomized. Tissue
samples were histopathologically studied and processed for
immunohistochemical staining using specific ER-α, ER-β and
PR antibodies. Hormone receptor expression was quantified
in tumors and among the different HG and were compared
using ANOVA. Histological studies revealed that 31 cases
were simple and 6 were complex adenocarcinomas. Tumors
were classified according to their histological grading in HG 1
(9 cases), HG 2 (13 cases) and HG 3 (15 cases). Hormone
receptors were quantified and the percentage of ER-α, ER-β
and PR expression was evaluated for each HG. These
percentages were 24.4±11, 27.8±8.2, 17.4±6 (p>0.5) for HG
1, HG 2 and HG 3 respectively in ER-α, 77.1±6.9, 57.2±7,
28±7.5 (p<0.0005) for HG 1, HG 2 and HG 3 respectively in
ER-β, and 2±0.8, 11.7±5.9, 9.4±5.3 (p>0.1) for HG 1, HG 2 and
HG 3 respectively in PR. Correlation analyses between the
percentage expression ER-β and HG was -0.62 (p < 0.01). It
is concluded that the expression of ER-α and PR did not vary
in the different HG, although ER-β significantly decreased with
increased HG. In conclusion, we have shown that percentage
of ER-β expression in canine mammary carcinomas oscillates
with histological grade. The clinico-pathologic associations of
ER-β expression and the usefulness of examination of canine
mammary carcinomas for ER-β expression in addition to ER-α
remain to be established. In this study the immunohistochemical detection of ER-β proved to have prognostic value as a
molecular marker. Future studies are necessary to assess its
role in isolation or together with HG, in dogs with mammary
carcinomas.
116
II. 11.
Morphological changes of the bone marrow of dogs with visceral leishmaniasis.
Jacintho APP1, Momo C1, Moreira PRR1, Munari DP2, Vasconcelos RO3.
1. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária.
2. Departamento de Ciências Exatas.
3. Departamento de Patologia Veterinária;
FCAZV-UNESP, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castelane, s/n, Jaboticabal, São Paulo, Brasil.
E-mail: [email protected]
Visceral leishmaniasis is an important zoonotic disease in
public health that is caused by a parasite that has tropism for
lymphoid organs. Among them, the bone marrow is a
major site of multiplication and its evaluation is indispensable
for the diagnosis. The aim of this study was to evaluate the
most frequent bone marrow’s lesions of dogs naturally infected
by Leishmania (Leishmania) chagasi. This study used 31 dogs
euthanized at the Center for Zoonosis Control of Araçatuba,
an endemic city for Canine Visceral leishmaniasis (CVL). The
animals were classified in three groups according to clinical
signs, asymptomatic, oligosymptomatic and symptomatic.
Bone marrow samples were collected from the femur, fixed,
processed by routine methods and stained with Haematoxylin
and E o s i n . B o n e m a r r o w l e s i o n s w e r e c l a s s i fied as
mild, m o d e r a t e o r s e v e r e . T h e p a r a s i t e l o ad was
perfo r m e d b y imunohistochemistry (streptavidin biotin
peroxidase method). The most important microscopic lesions
were multifocal to diffuse granulomas of lepromatous type,
dysplasia megakaryocytic and megakaryocytic emperipolesis,
medullar aplasia, besides infiltrate of linfocytes and plasma
cells. The most frequent lesions were granulomas (11/31),
associated or not to hematopoietic cells population’s decrease,
regardless of clinical stage. The proportion of granulomas per
group was 9.7% in symptomatic dogs, 9.7% in asymptomatic
and 16.13% in oligosymptomatic We found a variable parasite
load in this granulomas, and in some cases there were a high
numbers of parasite’s intracytoplasmatic amastigotes forms.
There were no statistics differences between groups for the
parasite load and intensity of the lesions (P>0,05). Asymptomatic
dogs also present elevate parasitism on the bone marrow.
The megakaryocytic dysplasia is characterized by nucleus
fragmentation with hyperlobulation or discreet segmentation.
Those aspects were observed in all groups of infected dogs
in this study. According to some reports, the medullar
dysplasia may result from the presence of numerous infected
and activated macrophages in this organ, leading
to hematological disorders. An efficient immune response
against the parasite is modulated by cytokines with Th1 profile,
resulting in cell-mediated immunity. In symptomatic dogs, the
cytokines with Th2 profile are predominant, like IL-10, IL-4 and
TGF- b, resulting in humoral immunity. In this case probably
the inhibitory effects can occur on megakaryocyte maturation.
In studies of this research group, we described the antigen
presentation’s changes by reducing mature MHC II expression
at the cell surface and reducing the iNOS expression,
in macrophages infiltrate on lymph nodes of these animals.
These results confirm that macrophages has their function
altereted, and they could be influenced Th1 to Th2 shift.
The megakaryocytic dysplasia was associated with an
increase of TNF-a and the IFN-g cytokines production
by activated macrophages of the granulomas. Possibly the
parasite modulates the host immune response, by interfering with the predominant hematopoietic cells in bone marrow
and consequently the systemic circulation. The parasite
has a predilection to multiply on lymphoid organs, and even
there are some studies about these organs, little attention
was given to the bone marrow’s pathological changes. We
conclude that, regardless dogs presented clinical signs or not,
bone marrow is an important site for multiplication of
Leishmania chagasi and the granulomas of this organ could
contribute to changes of hematopoietic cells, by inducing the
host’s immune response, modulated by the parasite.
117
II. 12.
Hemorragia idiopática fatal del timo en un bóxer de tres meses.
Kegler Pangrazio K, Amarilla SP, González Dengues E, Avalos Ruiz Díaz A.
Dtpo. Ciencias Patológicas. F.C.V - UNA –San Lorenzo- Paraguay.
E-mail: [email protected]
Fatal idiopathic thymic hemorrhage in a three-month-old
boxer.
La hemorragia difusa del timo es considerada una patología
esporádica y fatal, reportada en caninos desde 9 semanas
hasta los 5 años de edad. Las causas pueden ser traumas
severos, intoxicación con anticoagulantes, neoplasias, ruptura de aneurismas y espontánea, esta última catalogada
como una hemorragia idiopática cuya etiología y patogenia
es poco conocida, proponiéndose un inadecuado soporte de
tejido conjuntivo de sostén acompañado por ruptura vascular
(espontánea o microtraumas) como consecuencia de la fragilidad de las paredes de los vasos sanguíneos en timos en
proceso de involución. El objetivo de este trabajo es describir
un caso de hemorragia fatal del timo en un cachorro Bóxer
con muerte súbita. Un canino Bóxer, de 3 meses de edad,
con historial clínico de decaimiento, disnea, mucosas pálidas,
regurgitación de líquidos y alimentos sólidos, y que muriera
luego de 48 horas de evolución, fue necropsiado en el Departamento de Ciencias Patológicas de la Facultad de Ciencias
Veterinarias de la UNA, Paraguay. El examen macroscópico
reveló la presencia de 70 ml de liquido serosanguinolento en
la cavidad toráxica y una masa irregular firme de 3 cm de
espesor, rojo oscura, de aspecto poco lobulado, extendiéndose desde el mediastino craneal hasta el mediastino medio,
rodeando latero-ventralmente la bolsa pericárdica; esta última
con coágulos de sangre adheridos a su base. A la superficie
de corte de la masa mediastínica evidenció claramente que
estaba rodeada por una cápsula lisa con tabiques proyectados al interior, otorgándole un aspecto lobulado de color rojo
oscuro difuso uniforme. Además, los lóbulos pulmonares
presentaban leve atelectasia generalizada y estaban desplazados dorso-caudalmente dentro de la cavidad torácica,
al igual que el corazón. El resto de los órganos internos presentaban palidez severa, y el bazo una retracción severa de
su parénquima. Muestras de la masa y de diferentes órganos
fueron fijados en solución bufferada de formalina al 10% y
procesadas por histopatología convencional de rutina H&E.
Con la histopatología se determinó que la masa mediastínica
correspondía al timo, por el aspecto lobular y la presencia
de Corpúsculos de Hassal. La lesión microscópica predominante consistió en una marcada hemorragia lobular, lobulillar
e interlobulillar, con pérdida total de la arquitectura normal del
timo, sin distinción neta entre corteza y médula. Los linfocitos corticales distribuidos y limitados como delgadas franjas
celulares corticales en algunos lobulillos. Los tabiques interlobulillares presentaban una marcada distensión, hemorragia,
áreas de necrosis fibrinoide y tejido adiposo, incluso en ciertos lobulillos. También se identificó infiltrado de neutrófilos,
algunos eosinófilos y hemosiderófagos. En cortes histológicos del pericardio se evidenció tejido conjuntivo fibrovascular
con marcada hemorragia y numerosos hemosiderófagos. En
los cortes seriados de arteria aorta, pulmonar y tronco braquiocefálico se identificaron las túnicas desde la intima hasta
la adventicia con arquitectura histológica normal destacándose el tejido conjuntivo perivascular con severa hemorragia
difusa. En frotis del líquido de cavidad torácica se identificaron numerosos eritrocitos, algunos neutrófilos y monocitos,
con características morfológicas normales. Ante la ausencia
de evidencia macro y microscópica de solución de continuidad como la ruptura vascular por aneurismas, trauma severo,
neoplasia y al no observarse lesiones compatibles con intoxicación con anticoagulantes, ni desórdenes de la coagulación
se concluye que la muerte del animal podría deberse a una
hemorragia idiopática del timo. Además, la marcada distensión de los tabiques interlobulillares con áreas de necrosis
fibrinoide, presencia de células adiposas e infiltrado de neutrófilos, incluso de localización intralobulillar son indicativos
de un proceso de involución que contribuiría a la hipótesis
propuesta por varios autores.
118
II. 13.
Lymphocytes in the brain of dogs with visceral leishmaniasis and seropositivity to
Toxoplasma gondii and to Neospora caninum.
Machado GF, Melo GD, Sakamoto KP.
School of Veterinary Medicine, UNESP - Univ Estadual Paulista,
Araçatuba, São Paulo, Brazil.
E-mail: [email protected]
Visceral leishmaniasis (VL) is a disease with great variability
regarding the clinical manifestations, in humans as in dogs.
Chronically infected dogs may develop neurological disorders,
however, there are few reports that characterise the lesions
and make clear the pathogenesis of the canine
cerebral leishmaniasis. Considering the immunossupression
associated to visceral leishmaniasis and that the opportunist
pathogens Toxoplasma gondii and Neospora caninum may
collaborate to the occurrence inflammation in the central
nervous system of dogs naturally infected by Leishmania
chagasi, we evaluated the population of B (CD79+) and
T (CD3+) lymphocytes in the nervous tissue of dogs with
visceral leishmaniasis and with seropositivity to T. gondii and
to N. caninum. For this study, a control group of adult dogs
(n = 10) with negative serology to L. chagasi, T. gondii and
N. caninum; and a group of naturally infected animals (n = 24) were
used. Dogs were selected from the Teaching Veterinary Hospital
of UNESP Araçatuba, São Paulo State, Brazil, which is
endemic area for VL. Brain samples were collected and stored
in 10% buffered formalin, submitted to routine histological
procedures and stained with Hematoxylin-Eosin. Histological
sections of the nervous tissue were also subjected to
immunohistochemistry using the streptavidin-biotin-peroxidase
method and a policlonal anti-CD3 antibody and a monoclonal
anti-CD79α antibody. Inflammatory lesions, characterised by
mononuclear cells accumulation, composed mainly by CD3+
T lymphocytes predominated in several encephalic regions of
the dogs from the infected group (P=0.0004). CD79+ B lymphocytes were detected in very small intensity and presented
no difference among groups (P=0.5313). The results presented
herein suggest that the co-presence of visceral leishmaniasis,
toxoplasmosis and neosporosis leads to the occurrence of
inflammatory lesions within the nervous milieu. Furthermore,
these data give evidences that in brain, the immune response
against this co-infection is based mainly on T cell-mediated
response, and B lymphocytes seem not to execute an important
role. Additional studies are needed to help understand the
mechanisms of the interaction between L. chagasi and other
pathogens, as well as the role of lymphocytes and glial cells in
the pathogenesis of brain lesions in co-infected dogs.
This work was supported by Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP; Grant number 05/60132-1).
119
II. 14.
Mielolipoma de bazo en una perra Golden Retriever.
Massone AR1, Aprea A2, Giordano A2, Baschar H2, Allende M2, Cuitiño MC1, Idiart JR1.
1. Cátedra de Patología Especial.
2. Hospital Escuela. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Nacional de La Plata.
E-mail: [email protected]
Splenic myelolipoma in a Golden Retriever bitch.
El mielolipoma es un tumor benigno compuesto por tejido
adiposo maduro con componentes hematopoyéticos que recuerdan a los de la médula ósea. Este tumor es raro en los
animales domésticos. Se ha descripto en el hombre, primates
no humanos, caninos y felinos. En los caninos, se han identificado en el bazo aunque se ha descripto una forma multicéntrica. Al igual que en humanos, en los animales domésticos el
mielolipoma es diagnosticado en forma accidental en el examen clínico o en la necropsia, por no presentar signos clínicos
previos excepto, en algunos casos, una moderada distensión
abdominal. El objetivo del presente trabajo es describir un
caso de mielolipoma esplénico en un canino. Una perra Golden
Retriever, de 11 años de edad fue presentada para un examen de rutina. La exploración clínica reveló actitud normal y
ligera distensión abdominal. La ecografía de abdomen mostró
esplenomegalia difusa y una masa de 10 cm de diámetro localizada en el tercio medio de la cara visceral del bazo, con
ecotextura heterogénea y cavitaciones anecoicas (imágenes
cavernosas). Se realizó la esplecnectomía. El bazo, de 1,800
kg de peso, presentaba una masa con áreas fluctuantes y otras
sólidas, encapsulada y de color blanco amarillento, alternando
con áreas de color rojo oscuro. En el estudio histopatológico
se observó tejido adiposo maduro normal asociado con células hematopoyéticas en diferentes estadios de maduración.
Se observaron, además, macrófagos con hemosiderina. La
historia clínica, los hallazgos ecográficos, macroscópicos e
histopatológicos descriptos, permitieron arribar al diagnóstico
de mielolipoma. La mayoría de los mielolipomas en humanos
se presenta en las glándulas adrenales. Estos tumores son
pequeños, desde pocos milímetros a escasos centímetros,
bien encapsulados y solitarios. En caninos, se han documentado 8 casos de mielolipoma en individuos adultos. Sólo uno
de ellos alcanzó 8 cm de diámetro. La patogenia de los mielolipomas permanece sin dilucidar. Una hipótesis se basa en
la distribución del tejido hematopoyético embrionario, el que
se observa en el tejido conectivo peritoneal en forma difusa y
que involuciona al desarrollarse el resto de los tejidos hematopoyéticos. La reaparición de la hematopoyesis peritoneal se
observó en algunos procesos inflamatorios. Esta neoplasia
se considera benigna y no se han comunicado metástasis en
otros órganos.
120
II. 15.
Biopsias endoscópicas del tracto gastrointestinal de caninos. Analisis de 60 casos
(2005-2010).
Massone AR1, Aprea A2, Quiroga MA1, Giordano A2, Machuca MA1, Madariaga G1, Idiart JR1.
1. Cátedra de Patología Especial.
2. Servicio de Endoscopía. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Nacional de La Plata.
E-mail: [email protected]
Canine gastrointestinal endoscopic biopsies. Analysis of
60 cases (2005-2010).
La endoscopía gastrointestinal es una técnica segura, eficiente,
con mínimas complicaciones y muy útil como herramienta en
el diagnóstico de enfermedades gastrointestinales crónicas
en perros y gatos. Si bien el estudio endoscópico permite, en
muchos casos, observar cambios macroscópicos, el estudio
histopatológico orienta al diagnóstico certero. El objetivo del
presente trabajo es comunicar los estudios de biopsias endoscópicas del tracto gastrointestinal de caninos recibidas en
el Servicio de Anatomía Patológica de la FCV, UNLP, en el
periodo 2005- 2010 y analizar los resultados. En el laboratorio se procesaron y se estudiaron 60 biopsias endoscópicas
del tracto gastrointestinal. Los resultados de la observación
microscópica fueron registrados en una planilla ad-hoc. Las
muestras fueron clasificadas según el segmento anatómico,
la edad y el sexo. Asimismo, se evaluó si la muestra era suficiente (mucosa y submucosa) o insuficiente. En los casos
en los que material resultó suficiente, se aplicó la siguiente
clasificación: cambios inflamatorios agudos (infiltrados linfoplasmocitarios y/o eosinofílicos en mucosa y submucosa,
edema, linfangiectasia y atrofia de vellosidades) y crónicos
(infiltrados linfoplasmocitarios y/o eosinofílicos, fibrosis y atrofia de las glándulas), procesos neoplásicos, lesiones inespecíficas (edema, congestión, linfangiectasia) y ausencia de
lesiones. De las 60 biopsias estudiadas, 29 correspondieron
a estómago, 11 a duodeno, 15 a colon y 5 a recto. Entre las
biopsias estomacales 27/29 resultaron suficientes para su
evaluación y se clasificaron como: 3/27, inflamación aguda;
9/27, inflamación crónica; 9/27, lesiones inespecíficas y 6/27
sin lesión. La distribución según la edad fue: 12/29, entre 0
y 5 años; 13/29 entre 6 y 10 años y 4/29 más de 10 años.
En relación al sexo: 13/29 pertenecían a hembras y 16/29 a
machos. Dentro de las biopsias duodenales 10/11 resultaron
suficientes para su evaluación y se clasificaron como: 2/10,
inflamación aguda; 3/10, inflamación crónica; 2/10, procesos
neoplásicos, 2/10, lesiones inespecíficas y 1/10 sin lesión. La
distribución según la edad fue: 4/11, entre 0 y 5 años; 5/11,
entre 6 y 10 años y 2/11 más de 10 años. En relación al
sexo: 5/11 pertenecían a hembras y 6/11, a machos. Dentro
de las biopsias de colon 14/15 resultaron suficientes para su
evaluación y se clasificaron como: 5/14, inflamación aguda;
4/14, inflamación crónica; 1/14, lesiones inespecíficas y 4/14
sin lesión. La distribución según la edad fue: 7/14, entre 0 y
5 años; 7/14, entre 6 y 10 años y 1/14 más de 10 años. En
relación al sexo: 9/14 pertenecían a hembras y 4/14 a machos. Las 5 biopsias rectales resultaron suficientes para su
evaluación y se clasificaron como 1/5 inflamación aguda, 3/5
inflamación crónica y 1/5 sin lesión. La distribución según la
edad fue: 3/5 entre 0 y 5 años; 1/5, entre 6 y 10 años y 1/5
más de 10 años. En relación al sexo: 1/5 pertenecía a hembra
y 4/5, a machos. Cincuenta y seis biopsias (93,3 %) resultaron suficientes para realizar el estudio histopatológico. En
doce (21,4 %) de las mismas, no se hallaron lesiones. El 53,6
% correspondió a lesiones inflamatorias del tracto gastrointestinal similar a lo observado por otros autores. En lesiones
microscópicas incipientes o con infiltrados moderados, algunos autores sugieren un mínimo de 6 muestras de la lesión
en intestino y 13 de estómago para arribar a un diagnóstico
certero. Estos números se elevan en el caso de las lesiones
neoplásicas, en las que es necesario considerar los límites de
las mismas. La representatividad y la calidad de las biopsias
endoscópicas están en relación directa con la adecuada descripción e interpretación de los hallazgos.
121
II. 16.
Astrocytic reactivity in the brain of dogs with visceral leishmaniasis.
Melo GD, Machado GF.
School of Veterinary Medicine, UNESP - Univ Estadual Paulista, Araçatuba, São Paulo, Brazil.
E-mail: [email protected]
Visceral leishmaniasis (VL) is an emerging disease caused
by the protozoan Leishmania chagasi that results in variable
clinical manifestations in dogs, ranging from unapparent
sub-clinical infections to a systemic disease characterized by
fever, anemia, progressive weight loss, hepatosplenomegaly, generalized lymphadenopathy and cutaneous lesions. In
dogs, there is a frequent association of chronic VL with neurological symptoms, however only few works have investigated
if these neurological manifestations correlate with specific
alterations in brain. Recently, the occurrence of leptomeningitis and choroiditis has been described in cases of canine VL,
with high amount of T lymphocytes. The aim of this study was
to evaluate the astrocyte morphology as well the immunoreactivity of glial fibrillary acidic protein (GFAP) in these cells
in dogs with natural VL. Thirty mixed-breed dogs, male and
female, proceeding from the Teaching Veterinary Hospital of
UNESP Araçatuba, São Paulo State, Brazil, which is an
endemic area for VL, were selected for this study. The dogs
were separated into two groups: the infected group composed of
twenty dogs with positive diagnostic of VL, symptomatic or
asymptomatic; and the control group, constituted by ten dogs
with n e g a t i v e d i a g n o s t i c o f V L a n d n o d a y - history
of neurological disease. Brain samples were collected and
stored in 10% buffered formalin and submitted to routine histological
procedures. Histological sections of the nervous tissue were
subjected to immunohistochemistry using the streptavidinbiotin-peroxidase method and a policlonal anti-GFAP antibody.
Astrocytic reactivity was evaluated in the cortical and in the
sub-ependymal zones in a total area of 543,036.2 µm². The
intensity of the staining was observed in optical microscopy
and quantified by means of the image analyzer software
Image-Pro Plus 6.1, and the results were expressed as the
percentage of the tissue’s immunostained area. The infected
group presented an immunostained area of 5.16% (± 1.22) while
the control group showed only 1.14% (± 0.15) of immunostained
area. There was a significative statistical difference between
the groups (Mann-Whitney test: P<0.0001). Regarding the
brain areas, there was no difference between astrocytes in the
cortex and in the sub-ependymal zone in the infected group
(Mann-Whitney test: P=0.9892) and neither in the control
group (Mann-Whitney test: P=0.9118). Astrocytes morphology
alteration in the brain of the infected dogs consisted basically
by astrocytes processes thickening (astrogliosis). Furthermore,
rare binucleated reactive astrocytes were observed in some
samples, as well as few astrocytes in pairs. Despite the high
GFAP immunoreactivity observed in the infected group, a
variation in the GFAP intensity and in the astrocytes morphology
was detected among the infected dogs, possibly due to the
variation on the time of infection and/or the individual immune
response against the infection. Morphology variation reflects
the functional activation of astrocytes and it validates the
encephalic involvement during Leishmania chagasi infection,
mostly observed in dogs in advanced phases of the disease.
Even if the precise astrocyte function during this disease has
not been clarified, the evident high GFAP immunoreactivity
suggests that these cells play a role in the brain lesions during
VL, maybe in a similar way of other parasitic diseases, such
as malaria and toxoplasmosis.
This work was supported by Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP; Grant numbers 05/60132-1 and 06/56724-3).
122
II. 17.
Apoptosis in lymph nodes of dogs with visceral leishmaniasis.
Moreira PRR1,2, Bandarra MB1,2, Magalhães GM1,2, Munari DP2, Alessi AC2, Vasconcelos RO2.
1. Bolsista da FAPESP (Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo).
2. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias – UNESP, Jaboticabal, São Paulo, Brazil.
E-mail: [email protected]
The generalized lymphadenopathy is the main aspect of canine
visceral leishmaniasis (CVL), but there are few studies
focusing on changes in the lymph node. Apoptosis induced by
protozoa has been described in Trypanosoma cruzi, Leishmania
donovani and Leishmania major. The successful mechanism
results in survival of the parasite, due to evasion of the host
immune system. The lymphoid atrophy has been described in
natural infection by Leishmania chagasi in dogs. Therefore,
the aim of this study was to examine the lymph nodes of infected
dogs, considering the density of apoptotic cells and clinical
stage of the animals. We used 32 mongrel dogs naturally infected
with L. chagasi. The animals were classified as symptomatic (S),
asymptomatic (A) and oligosymptomatic (O) groups. The
lymph nodes (popliteal, subscapular, iliac and mesenteric)
were collected for histopathological analysis. The evaluation
of parasite load and percentage of apoptotic cells were
performed by immunohistochemistry. To determine the
density of apoptotic cells we used the anti-cleaved caspase 3
(Cell Signaling) using 1:200 dilution. For parasite load,
the hyperimmune serum of dog naturally infected by L. chagasi
(1:1000 dilution) was used. Microscopically, more intense
granulomatous reaction occurred in O and S groups. The
classic nodular formation was not observed in granulomas
in the studied lymph nodes. The microscopic appearance of
granulomas was consistent with the diffuse lepromatous
granulomas, where the inflammatory infiltrate was
predominantly composed of macrophages with few lymphocytes
and plasma cells. These granulomas usually have a predominance
of Th2 cytokines. In severe cases, the lymphoid atrophy was
observed in peripheral lymph nodes (popliteal and subscapular).
Iliac and mesenteric lymph nodes showed a discrete reactivity
and parasite load. In symptomatic dogs these parameters
were high, which may cause lymphoid atrophy, leaving the
dog more susceptible to LVC. The subscapular lymph node
showed high reactivity, but the lymphoid atrophy was evident
in the popliteal lymph node. The different cellular response
observed between the lymph nodes could be due to the
progression of the disease. In acute phase of infection, the
subscapular is the most involved, because this lymph
node drains the head of dog, which is the main access for the
vector. In the chronic phase, the popliteal lymph node would
be affected, possibly by a later contact with antigen. Despite
of biological evidence of the greater parasite load and the
highest density of apoptotic cells in the S group, the association
between them was not significant (P > 0.05). The paracortical area
in lymph nodes (T lymphocytes) showed increase of apoptotic
cells. We conclude that dogs with severe clinical symptoms
had the largest parasite load, the greater number of cells in
apoptosis and these cells were lymphocytes. For this, it is
suggested that for these dogs, the parasite used apoptosis to
evade the host immune system.
123
II. 18.
Astrocitoma gemistocítico multicêntrico em um felino doméstico.
Pavarini SP1, Oliveira EC1, Kroetz RM2, Gomes DC1, Correa GLF1, Driemeier D1.
1. Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), Porto Alegre, Brasil.
2. Médica Veterinária do Hospital de Clínicas Veterinárias da UFRGS.
E-mail: [email protected]
Gemistocytic astrocytoma multicentric in a domestic cat.
Neoplasias primárias do sistema nervoso central (SNC) são
relativamente incomuns em felinos domésticos, sendo o
meningioma a neoplasia mais frequente. Astrocitomas são
neoplasias oriundas de astrócitos (origem glial), e estes são
raros em felinos e representam apenas 2,8% das neoplasias
intracranianas nesta espécie. Essas neoplasias p o d e m s e r
derivadas de astrócitos fibrilares ou protoplasmáticos, e serem
bem diferenciados ou indiferenciados. Os bem diferenciados
incluem os tipos fibrilares, protoplasmáticos, gemistocíticos e
pilocíticos. Os indiferenciados são o glioblastoma multiforme,
que é uma apresentação maligna do astrocitoma Dentre os
diferentes tipos de astrocitomas, os gemistocíticos são os
menos comuns. Para confirmação do diagnóstico de astrocitoma
pode se utilizar à técnica de imuno-histoquímica com anticorpo
contra GFAP (glial fibrillary acidic protein), que é um dos
componentes principais dos astrócitos, e este é expresso em
astrócitos com comportamento normal, reativo e neoplásico.
Multifocalidade é incomum em tumores primário do sistema
nervoso central, e pode representar uma forma multicêntrica
verdadeira de desenvolvimento ou estar relacionada à
disseminação de um foco principal. O objetivo deste trabalho
é relatar um caso de astrocitoma gemistocítico multicêntrico
em um felino doméstico, salientando os achados patológicos
relacionados a esta neoplasia. Um felino macho de dois anos
de idade, sem raça definida foi atendido no Hospital de Clínicas
Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul
(UFRGS), este apresentava um quadro de incoordenação
motora, com dificuldade de caminhar, o pescoço estava
enrijecido e a pupila do olho esquerdo estava dilatada (30 dias
antes do óbito). Após alguns dias apresentou quedas sempre para
o lado direito e a pupila do olho esquerdo permanecia dilatada.
Ao final desenvolveu cegueira, nistagmo e não conseguia mais
se movimentar. Devido à gravidade do caso o proprietário
optou pela eutanásia do animal. O felino foi encaminhado ao
Setor de Patologia Veterinária da UFRGS para realização de
necropsia. Fragmentos de diversos órgãos foram coletados e
fixados por 48 horas em solução de formalina 10%, e
processados pelos métodos histológicos de rotina e corados
pela técnica de hematoxina eosina. Cortes de tecido lesionados
foram submetidos ao exame imuno-histoquímico utilizando a
técnica de biotina-streptoavidina ligada a peroxidase,
utilizando-se do anticorpo primário anti-GFAP como
anticorpo, diluído 1:500, utilizando-se como cromógeno o 3´3diaminobenzina (DAB). Os principais achados macroscópicos
observados durante a necropsia se restringiam ao sistema
nervoso central, com a presença de uma área levemente amarelada
com bordos avermelhados, limites moderadamente distintos
com aderência das leptomeninges que abrangia o lobo occipital
e parietal do hemisfério telencefálico direito, e outra área de
aspecto semelhante foi observada ocupando todo o lado
direito do cerebelo. Essas lesões microscopicamente
apresentavam as mesmas alterações que se caracterizavam
por uma proliferação neoplásica pouco delimitada de células
com citoplasma eosinofílico abundante com bordos distintos,
núcleo excêntrico (astrócitos gemistocíticos), com moderada
anisocitose e anisocariose e por vezes com células multinucleadas
entremeadas, e menor quantidade por astrócitos fibrilares.
Ocasionais áreas de necrose caseosa no interior da neoplasia
e infiltrado inflamatório perivascular composto por linfócitos
e plasmócitos foi visualizado nos bordos da lesão. As células
neoplásicas inclusive as multinucleadas mostraram-se
fortemente positivas no exame imuno-histoquímico com
anticorpo para GFAP. O diagnóstico de astrocitoma
gemistocítico multicêntrico no presente caso foi estabelecido
a partir dos achados clínicos, macroscópicos, microscópicos
e imuno-histoquímicos. Tumores de origem glial ocorrendo
simultaneamente em mais de um foco do SNC em animais
domésticos são raríssimos, e deve-se diferenciar o tipo
multifocal do multicêntrico. Neoplasias gliais multifocais têm
como característica um crescimento e disseminação, através
do sangue, comissuras, canais, ou por extensão de uma área
focal. Por outro lado, os gliomas multicêntricos, apresentam
lesões evidentemente separadas, as quais não possuem
relação com uma rota que explique sua simultaneidade. No
presente caso não foi possível estabelecer uma possível rota
de disseminação, pois estes apresentavam-se separados,
sugerindo ser forma multicêntrica.
124
II. 19.
Casuística de parvovirosis canina en el servicio de patología diagnóstica de la Facultad de
Ciencias Veterinarias, UBA.
Postma GC1, Minatel L1, Bucafusco D2, Schapira A1, Pinto BS1, Bratanich A2, Carfagnini JC1.
1. Cátedra de Patología Básica, Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA,
Av. San Martín 5285, (1417) Ciudad Autónoma de Buenos Aires.
2. Cátedra de Virología, Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA,
Av. Chorroarín 280, (1427) Ciudad Autónoma de Buenos Aires.
E-mail: [email protected]
Cases of canine parvovirosis in the pathology diagnostic
service of the Faculty of Veterinary Sciences, UBA.
La parvovirosis canina es una enfermedad endémica de alto
impacto en los criaderos. Dentro de los parvovirus que afectan
a los caninos se encuentran el PVC-1 o virus diminuto, responsable de muerte neonatal en los cachorros, y el PVC-2
que, hasta hace pocos años atrás, presentaba dos cepas antigénicas diferentes: PVC-2a y PVC-2b. En Italia, en el año
2001, se identificó una nueva cepa denominada PVC-2c. De
acuerdo con estudios realizados en nuestro país, esta cepa
habría estado circulando en Argentina al menos desde el año
2003. El objetivo de este trabajo fue estudiar los casos de
parvovirosis canina remitidos al Servicio de Patología
Diagnóstica de la Facultad de Ciencias Veterinarias (UBA)
durante el período comprendido entre enero de 2007 y febrero de 2010, identificando el tipo de cepa involucrada y comparando las lesiones macro y microscópicas producidas por las
cepas tradicionales y la cepa PVC-2c. Durante este período
fueron remitidos para necropsia a este Servicio de Patología
Diagnóstica 113 caninos menores de 8 meses de edad. En
todos los casos se practicó una necropsia completa, tomándose muestras de diversos órganos para histopatología, las
cuales fueron fijadas en formol al 10% y procesadas según
las técnicas de rutina para su inclusión en parafina, obteniéndose cortes de 5 µm de espesor que fueron coloreados con
Hematoxilina y Eosina. En aquellos casos que habían presentado signos gastroentéricos (vómitos y diarrea) o que presentaban lesiones macroscópicas indicativas de enteritis, se
realizaron raspajes de la mucosa intestinal con una hoja de
bisturí estéril, que fueron remitidos refrigerados a la Cátedra
de Virología de la Facultad de Ciencias Veterinarias (UBA)
para la detección de ADN de parvovirus canino por la técnica de PCR. En todos lo casos se aplicó una PCR dirigida
a una región conocida del gen VP2 y, aquellas muestras que
resultaron positivas, fueron sometidas a la técnica de RFLP
(restriction fragment lenght polimorfism), utilizando la
enzima MboII, para identificar si pertenecían al genotipo
CPV-2C. De los 113 caninos, 42 (37%) presentaron parvovirosis canina. En un 88% de esos 42 cachorros, la enfermedad
fue causada por la variante PVC-2c. La edad promedio fue
de 65 ± 28 días. Un 95% de los cachorros eran de razas
puras, pertenecientes a criaderos. La proporción de hembras
y machos afectados fue semejante. Las lesiones encontradas durante las necropsias fueron palidez de las mucosas y
del músculo esquelético, enteritis segmentaria del intestino
delgado, que afectaba principalmente yeyuno e íleon, y congestión de los linfonódulos mesentéricos. La enteritis se caracterizaba macroscópicamente por hiperemia y hemorragias
de la serosa, de grado variable; contenido intestinal líquido,
cuyo color variaba entre amarillento, anaranjado o rojizo; y
mucosa hiperémica y edematosa, en ocasiones cubierta por
fibrina. Las lesiones histopatológicas más relevantes se observaron en intestino delgado y órganos linfoides. El intestino
delgado presentaba acortamiento y pérdida de vellosidades,
necrosis del epitelio y dilatación de las criptas de Lieberkühn,
y escaso infiltrado inflamatorio, de tipo mononuclear. Cabe
destacar que, si bien buena parte de las muestras de intestino presentaban autólisis de grado variable, el acortamiento de las vellosidades y la dilatación de las criptas de
Lieberkühn eran en general visibles. Los órganos linfoides
presentaban necrosis y depleción de células linfoides, lesiones también observadas en las placas de Peyer del intestino.
Algunos animales (45%) presentaron una neumonía intersticial. Los resultados obtenidos indican que un alto porcentaje
de los casos de parvovirosis canina recibidos en el Servicio
de Patología Diagnóstica en estos últimos años fueron causados por la nueva cepa PVC-2c. Aunque no se observaron
diferencias en la distribución de las lesiones entre las cepas
tradicionales y la nueva cepa, cabe destacar que varios casos
presentaron lesiones macroscópicas leves en el intestino, con
ligera hiperemia de la serosa y un contenido de color amarillento, diferente de la enteritis hemorrágica tradicionalmente
observada en el parvovirus canino. Esto concuerda con la
diarrea de color amarillento observada por varios criadores en
los cachorros afectados. Si bien las lesiones macroscópicas
son en general sugestivas de parvovirosis canina, se destaca
la importancia de la técnica de PCR para la confirmación del
diagnóstico, dado que constituye una técnica rápida y confiable, aún en material provenientes de intestinos con autólisis
avanzada. Se concluye que la parvovirosis canina provocada
por la cepa PVC-2c constituye un serio problema para los
criaderos, y que en ocasiones su presentación puede diferir
de la clásica enteritis hemorrágica observada con las cepas
tradicionales PVC-2a y PVC-2b.
125
II. 20.
Oligoastrocitoma medular em um felino.
Rolim VM1, Pavarini SP1, Almeida PR1, Vieira L2, Oliveira LGS1, Driemeier D1.
1. Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), Porto Alegre, Brasil.
2. Médica Veterinária do Hospital de Clínicas da UFRGS.
E-mail: [email protected]
Spinal cord oligoastrocytoma in a cat.
A ocorrência de tumores no sistema nervoso central (SNC) é
considerada rara em gatos. A neoplasia primária do SNC mais
observada no encéfalo dos felinos domésticos é o meningioma,
que é um tumor com origem primária no SNC. Na medula
espinhal, é mais comum ocorrer metástases de linfossarcoma
multicêntrico do que neoplasias primárias. O oligoastrocitoma
ou tumor glial misto é um tumor primário do SNC, considerado
raro em animais domésticos. Existem poucos dados de
literatura quanto a sua ocorrência em felinos. O oligoastrocitoma é
caracterizado por dois tipos de células distintos: os astrócitos
e os oligodendrócitos. Estas células podem estar organizadas
de forma separada e bem delimitadas ou juntas compondo
um grupo de células mistas. Os sinais clínicos apresentados
pelos animais são variados e dependem da localização do
tumor. O objetivo deste trabalho foi relatar um caso de
oligoastrocitoma localizado na medula cervical de um felino,
apresentando os achados clínicos, patológicos e imuno-histoquímicos. Um felino, macho, com 8 anos de idade foi atendido
no Hospital de Clinicas Veterinárias da Universidade Federal
do Rio Grande do Sul, apresentando um quadro de
tetraparesia, apatia, anorexia, retenção urinária e constipação.
Durante a palpação abdominal observou-se que a bexiga
estava repleta. Não foi observada alteração radiológica na
coluna vertebral. Após 20 dias o animal veio a óbito e foi
encaminhado para realização de exame post mortem. Durante
a necropsia observou-se atrofia muscular dos membros,
escaras de decúbito, bexiga estava aumentada de tamanho,
repleta de urina, parede vesical espessada e com focos de
hemorragia na serosa. A medula espinhal apresentava-se
com uma massa tumoral de coloração acinzentada na porção
dorsal, na altura da terceira até a quinta vértebra cervical.
Fragmentos de múltiplos tecidos foram fixados em solução
de formalina 10% durante 24 horas, processados por técnicas
rotineiras de histologia e corados com hematoxilina-eosina.
Microscopicamente, a massa tumoral era composta pela
proliferação neoplásica de dois tipos celulares de origem glial,
caracterizando-se por ser majoritariamente composto por
células do tipo astrócitos (65%). Foram observados dois tipos
de astrócitos, um com aspecto fusiforme e núcleo alongado
(astrócito fibrilar) e outro com células grandes, irregulares,
globoides com o núcleo abundante e excêntrico (astrócito
gemistocítico). Os astrócitos estavam dispostos de maneira
isolada ou entremeada com oligodendrócitos neoplásicos. Os
oligodendrócitos (35%) apresentavam organização cordonal
com áreas de diferenciação mucinosa, o citoplasma formava
um halo claro ao redor do núcleo tipicamente pequeno e
central. A substância branca adjacente à proliferação
neoplásica apresentava-se vacuolizada com acentuada
quantidade de axônios tumefeitos (degeneração walleriana)
e ocasionais esferoides axonais. Na microscopia da bexiga
observou-se cistite fibrinonecrótica difusa acentuada com
infiltrado neutrofílico. A musculatura esquelética dos
membros apresentava atrofia acentuada de fibras. Como
exame complementar foi realizada a imuno-histoquímica (IHQ)
para identificar astrócitos através do método estreptavidinabiotina ligada a peroxidase, com anticorpo primário
anti-GFAP (Glial fibrillary acidic protein), diluído 1:500, utilizando-se
como cromógeno o 3´3-diaminobenzina (DAB). Na IHQ
observou-se marcação positiva em astrócitos. O diagnóstico
de oligoastrocitoma medular no presente caso baseou-se nos
achados clínicos, patológicos e imuno-histoquímicos. Quadro
de tetraparesia, retenção urinária e constipação observado
neste felino esta relacionado as lesões de compressão em
medula cervical causadas pela massa tumoral. As
características patológicas do tumor são compatíveis com
oligoastrocitoma e a IHQ positiva para astrócitos confirma a
proliferação neoplásica deste tipo de células.
126
II. 19.
Comparación del cemento de dientes de gatos normales y con enfermedades orales
usando microscopio electrónico de barrido.
Saccomanno DM, Negro VB, Hernández SZ.
Cátedra de Cirugía. Facultad de Ciencias Veterinarias (UBA).
Chorroarín 280 (C1427CWO), CABA, Argentina TE: 4524-8464.
E-mail: [email protected]
Comparison of cementum in teeth from normal cats and
from cats with oral diseases using scanning electron
microscopy.
El cemento que recubre la superficie radicular dental está considerado como el tejido duro del que menos datos se posee.
La estandarización de las técnicas de preparación de dicho
material, especialmente para ser observado con microscopio
electrónico de barrido (MEB), se torna, en muchos casos, dificultosa. El objetivo del presente estudio fue comparar el cemento de la superficie radicular en dientes de gatos normales
con el de dientes de gatos afectados por enfermedades
orales, en particular enfermedad periodontal (EP) y lesiones
odontoclásticas reabsortivas (LOR), mediante el empleo de
MEB, previa estandarización de su técnica de preparación.
Ambas afecciones tienen una alta prevalencia en los gatos de
nuestro medio, siendo causa en muchos casos, de enfermedades a nivel sistémico, más allá de la alteración oral local,
ya que provocan anorexia por dolor y consiguiente pérdida de
estado general. Se estudiaron dientes provenientes de animales muertos por causas ajenas a enfermedades orales y
de pacientes del Hospital Escuela y del Servicio Externo de
Odontología y Cirugía Maxilofacial de la Facultad de Ciencias
Veterinarias (UBA), y de la práctica privada. Se evaluaron 104
tercios radiculares (correspondientes a los tercios cervical,
medio y apical de cada raíz) de 27 dientes (38 raíces en total),
obtenidos de cadáveres de 4 gatos adultos sin enfermedades
orales, de entre 4 y 8 años; y 10 dientes pertenecientes a
8 gatos adultos con signos clínicos de LOR y/o periodontitis
de distinto grado, de entre 4 y 14 años. Los dientes fueron
extraídos en forma cuidadosa y fijados en formol al 10% por,
al menos, una semana. Luego de estandarizar la técnica de
preparación de cemento, las piezas se acondicionaron para
su observación en el MEB (Philips® XL30). Las imágenes obtenidas se microfotografiaron con la cámara incorporada al
microscopio y analizaron mediante un software analizador de
imágenes (UTHSCA Image Tool® 3.0). Los resultados obtenidos revelaron una arquitectura conservada en el cemento de
las superficies radiculares de dientes sanos, con una distribución de fibras extrínsecas (inserción de las fibras del ligamento periodontal a nivel del cemento) variable de acuerdo al tercio radicular evaluado (número decreciente de cervical hacia
apical) y forma homogénea. El tamaño de las fibras extrínsecas mostró variaciones según tipo de diente y tercio radicular
estudiado. Dicho diámetro se ubicó en un rango promedio de
entre 3,51 y 5,54 μm. En cuanto a las fibras intrínsecas o
propias del cemento, se identificaron en forma paralela a la
superficie radicular, con predominancia en los tercios medio y
apical, rodeando a las fibras extrínsecas. En relación con los
dientes afectados por LOR, las raíces mostraron reabsorción
de los tejidos dentales (esmalte, cemento y dentina), según
extensión de la lesión, con pérdida de sustancia y alteración
completa de la arquitectura de la superficie, de inicio aparente en la unión cemento-esmalte. En los dientes afectados
por EP se detectó igualmente pérdida de la organización del
cemento y detección de reabsorciones radiculares, de diámetros y áreas variables (diámetros entre 49,88 y 1068.90 μm y
áreas entre 1617,8 y 571572 μm²), ocupadas en algunos casos por restos de material (posiblemente cálculo dental, con
depósito de mineral resistente a la preparación para barrer
restos orgánicos), localizados predominantemente en el tercio cervical (77,7%) y medio (22,3%). Es interesante destacar
cómo una enfermedad de origen periodontal [originada en el
periodonto de inserción (ligamento periodontal, hueso alveolar, cemento radicular)] se extiende dentro de la estructura
dental comprometiéndola en forma parcial o total. El barrido
con el microscopio del cemento ubicado en la periferia de las
lesiones muestra características estructurales normales. El
estudio detallado de la arquitectura del cemento en condiciones normales en el gato permitirá establecer semejanzas y
diferencias en relación con otras especies estudiadas y servirá como base para la detección de lesiones que afectan a la
masa dental y al periodonto de inserción. La bibliografía cita
numerosas causas de reabsorciones radiculares, entre las
que se mencionan fuerzas oclusales exageradas, impactación
dental, inflamación periapical y causas idiopáticas. Unos pocos estudios en humanos han relacionado la presencia de
reabsorciones radiculares con la enfermedad periodontal, citando que las mismas son consecuencia de distintos tipos de
agresiones que afectan el ligamento periodontal, provocando
la pérdida de cemento y, en algunos casos más severos, de
dentina. Esto podría derivar, en casos leves a moderados, en
un proceso reparativo natural, si las condiciones adversas
fueran removidas. Es necesario el estudio de mayor número
de muestras que permita caracterizar de forma más acabada
la presencia de reabsorciones radiculares y su relación con
la EP en la especie felina, como así también con el inicio y
desarrollo de las LOR.
El presente trabajo forma parte del proyecto UBACyT V014, aprobado y subsidiado por la UBA.
127
II. 22.
Estudo retrospectivo dos diagnósticos de mastocitoma em cães e gatos nos anos de 2005
a 2009.
Santarém LO1, Esmeraldino AT2, Preussler PS3, Ávila, VPF4.
1. Aluna de pós graduação em Patologia Veterinária pela Universidade Luterana do Brasil- ULBRA campus Canoas- RS.
2. Médica Veterinária Patologista pela Universidade Luterana do Brasil- ULBRA campus Canoas-RS.
3. Aluna de Graduação em Medicina Veterinária pela universidade luterana do Brasil- UlBRA campus Canoas-RS.
4. Médica Veterinária pós graduada em Patolologia Veterinária pela Universidade Luterana do Brasil- ULBRA campus Canoas- RS.
E-mail: [email protected]
Retrospective study of diagnosis of mast cell tumor in
dogs and cats in the year of 2005 to 2009.
Este trabalho teve como objetivo a obtenção de um perfil dos
animais acometidos pelo mastocitoma no laboratório de
histopatologia do hospital veterinário ULBRA. Para isto foi
realizado um levantamento dos diagnósticos de mastocitoma
canino e felino entre o período de janeiro de 2005 e dezembro
de 2009. Foram coletados dados como o número total
dos diagnósticos de mastocitoma, número total de tumores
de pele e demais neoplasias bem como a relação entre a
ocorrência dos mesmos. Também foi realizada a análise das
raças mais acometidas, idade dos animais afetados, a espécie,
as localizações mais freqüentes deste tipo de tumor e os seus
graus de malignidade. As amostras foram provenientes de
animais atendidos na rotina do próprio hospital e também de
outras clínicas com interesse no diagnóstico histopatológico
do laboratório. Os diagnósticos foram dados a partir de
biópsias incisionais cujas lâminas passaram por coloração
de hematoxilina e eosina (H&E), biópsias aspirativas coradas
por Giemsa e material de animais necropsiados afetados pela
neoplasia. Para a realização do levantamento, os livros
protocolos dos anos sob pesquisa foram consultados assim
como o s l a u d o s e x p e d i d o s n e s t e p e r í o d o . Foram
diagnosticados no laboratório um total de 1700 neoplasias,
sendo que dentro destas 84 foram mastocitomas (4,94%).
Considerando somente os tumores de pele foi contabilizado
um total de 493 casos o que dá aos mastocitomas uma
representatividade de 17% dos casos. Nosso estudo indicou
a espécie canina como a mais afetada apresentando um total
de 78 casos (98,85%), já a espécie felina apresentou
6 casos (7,14%). Pôde-se observar a predominância dos
animais sem raça definida (SRD) com um total de 33 casos
(39,28%) seguida da raça Boxer que representou um total
de 12 casos (14,28%). A faixa etária mais acometida é a
faixa entre 5 e 10 anos de idade com um total de 47 casos
(55,95%). A segunda faixa etária é de animais com mais de
10 anos com 24 casos (28,57%), e os menos acometidos são
os animais com menos de 5 anos de idade com um total de
13 casos (17,85%). Quanto à localização dos tumores
pôde-se observar que predominaram os tumores localizados
na porção posterior do animal, ou seja, na região que abrange
abdômen e membros pélvicos totalizando 47 casos (55,95%).
Dentre esses observou-se que em 16 casos (19,04%) os
tumores se localizavam na região do escroto. Pôde-se
observar uma predominância entre os mastocitomas
classificados como G2 e G3 representando respectivamente
38,09% (32 casos) e 44,04% (37 casos). Os mastocitomas
G1 representaram 13,09% (11 casos), em 4,76% (4 casos)
a graduação não foi realizada. De acordo com os dados
levantados neste estudo, se pôde concluir que os casos de
mastocitoma são freqüentes na rotina diagnostica na clinica
de cães e gatos. O perfil dos animais acometidos pela
neoplasia foi semelhante ao descrito na literatura, com
exceção do grau de malignidade que se mostrou mais
agressivo nos animais atendidos no hospital veterinário ULBRA.Possivelmente esta diferença esteja relacionada com a
região em que se encontra o hospital, isto é, grande número
dos animais atendidos são SRD sendo que os mesmos são
trazidos para consulta quando os tumores já se encontram
em estado avançado, assim a probabilidade do tumor
aumentar seu grau de malignidade fica favorecida.
128
III. 01.
Surto de doença do armazenamento de glicoproteína causada por Sida carpinifolia em
cervos sambar (Cervus unicolor) criados em cativeiro no Brasil.
Aragão AP1, Anjos BL1, Diefenbach A1, Graça FAS2, Armién AG3, Peixoto PV1.
1. Curso de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, UFRRJ, Seropédica, RJ, 23890-000, Brasil.
2. Departamento de Clínica de Animais de Produção, Universidade Castelo Branco, Rio de Janeiro, RJ, 21021-020, Brasil.
3. Veterinary Diagnostic Laboratory, University of Minnesota, Minnesota, Saint Paul, USA.
E-mail: [email protected]
An outbreak of acquired glycoprotein storage disease
by Sida carpinifolia in captive sambar deer (Cervus
unicolor), in Brazil.
Sida carpinifolia é uma planta daninha da família Malvaceae,
comumente observada em locais úmidos e sombreados, em
todas as regiões do Brasil. A intoxicação espontânea por
S. carpinifolia tem sido descrita no Rio de Janeiro, São Paulo,
Santa Catarina e Rio Grande do Sul em caprinos, ovinos,
equinos e bovinos. Nos Estados Unidos foram descritos casos da doença do armazenamento lisossomal pela ingestão
de plantas dos gêneros Astralagus spp. e Oxitrops spp. em
cervos-vermelhos (Cervus canadensis) de vida livre. Em relação
à intoxicação por S. carpinifolia em animais selvagens, só há
referência a apenas um caso descrito recentemente em um
gamo criado em cativeiro (Dama dama) no Sul do Brasil. O
objetivo do presente estudo é relatar um surto de doença do
armazenamento (glicoproteinose) causada por S. carpinifolia
em cervos Sambar (Cervus unicolor) criados em cativeiro,
com ênfase nos aspectos epidemiológicos, clinicopatológicos
e ultraestruturais da intoxicação. Entre os meses de maio e agosto
de 2009, nove cervos Sambar jovens, de um rebanho com
55 animais (Cervus unicolor) criados na Fundação Jardim
Zoológico-RIOZOO, Rio de Janeiro, Brasil, apresentaram
emagrecimento acentuado, sinais clínicos neurológicos
graves e morte. O rebanho era alimentado com volumoso à
base de verduras, legumes, feno de capim tifton (Cynodon
dactylon) e ração comercial para equinos, fornecidos uma
vez por dia em um único cocho. Nove cervos apresentaram
sinais clínicos que incluíam apatia, incoordenação, membros
em base ampla (posição de cavalete), tremores musculares,
balançar de cabeça e ataxia, um animal apresentou perda do
tônus lingual, dificuldade em transpor obstáculos e quedas
frequentes que evoluíam para decúbito lateral com intensos
movimentos de pedalagem. À necropsia, em um dos cervos
havia hematomas secundários a traumas, áreas alopécicas
por mordeduras, provocados por machos dominantes
do rebanho e discretas áreas multifocais de hemorragia no
parênquima hepático. Nos rins desse mesmo cervo
observavam-se, na superfície capsular, áreas pálidas
puntiformes e, ao corte, o córtex estava pálido e com
estriações brancacentas que se estendiam até a medular. As
lesões histológicas incluíam acentuada vacuolização
citoplasmática de neurônios e moderada degeneração axonal
e astrogliose em diversas regiões do encéfalo e nos segmentos
cervical, torácico e lombo-sacral da medula espinhal,
alterações semelhantes também foram observadas no
pâncreas, nas tireóides e nos rins. Ultraestruturalmente, a
vacuolização citoplasmática correspondeu à intensa
distensão de lisossomos por acúmulo de glicoproteínas,
confirmado através da lectina-histoquímica. No presente
estudo, o desenvolvimento da intoxicação em cervos jovens,
predominantemente machos após o desmame, ocorreu pela
má distribuição do alimento, que era fornecido ao rebanho
em apenas um cocho, de forma os que machos dominantes
expulsavam os mais jovens no momento da alimentação. A
paralisia flácida e acentuada perda do tônus lingual observada
em um dos cervos desse estudo são sinais neurológicos
ainda não descritos em outras espécies intoxicadas por
S. carpinifolia. A paresia espástica descrita nessa doença
para outras espécies não foi observada em nenhum
dos cervos desse estudo. O quadro de paralisia flácida dos
membros ocorreu em decorrência da acentuada vacuolização
de neurônios motores inferiores da medula espinhal. As
alterações de coloração, consistência e aspecto do parênquima
renal observadas na necropsia de um dos animais, foram
causadas pelo acúmulo de glicoproteínas de células renais
e pode ser considerada como alteração macroscópica que
ocorre em casos graves da intoxicação. Após a ocorrência
do surto da doença e o estabelecimento da causa da
mortandade dos cervos, medidas de controle foram adotadas.
Inicialmente, novos cochos foram implantados no recinto para
facilitar a divisão do alimento, de forma que cervos jovens
e adultos pudessem se alimentar. Num segundo momento,
toda a S. carpinifolia foi removida do recinto e substituída por
capim tifton (Cynodon dactylon). A partir desses procedimentos
nenhum outro caso da doença foi registrado.
129
III. 02.
Estudio lectinhistoquímico de pulmón e hígado de ciervos colorados (Cervus elaphus) y
jabalíes (Sus scrofa) de vida libre.
Chang Reissig E1, Massone A1, Zanuzzi C1, Uzal FA2, Gimeno EJ1.
1. Instituto de Patología, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata, La Plata.
2. Laboratorio de Salud Animal y Seguridad Alimentaria, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de California, Davis.
E-mail: [email protected]
Lectinhistochemical study of lung and liver of free-range
red deer (Cervus elaphus) and wild boar (Sus scrofa).
En Argentina, el ciervo colorado y el jabalí son considerados
un recurso económico de importancia y son valorados para
la caza. Sin embargo, las enfermedades de estas especies
han sido poco estudiadas y se desconoce su impacto sobre la
salud de la fauna autóctona y ganado doméstico. El objetivo
de este estudio fue analizar muestras de pulmones e hígados normales y con lesiones parasitarias de ciervo colorado
(Cervus elaphus) y jabalí (Sus scrofa), utilizando la técnica
de Lectinhistoquímica (LHQ). Se realizaron 101 necropsias
de ciervos colorados (CC) y 15 de jabalíes (J) cazados en
la región de la cordillera Andino Patagónica. Se recolectaron
muestras de hígado y pulmón, que fueron fijadas en formol
tamponado al 10% (pH 7,2) durante 24 a 48 horas, incluidas
en parafina, cortadas a 4µm y teñidas con Hematoxilina y
Eosina (HE). A partir de los hallazgos macroscópicos y de
la observación de cortes teñidos con HE se seleccionaron
9 muestras de pulmón e hígado. La selección se basó en
los hallazgos macroscópicos de Dictyocaulus eckerti,
Metastronyglus pudendotectus y Fasciola hepática, (presencia o ausencia de estos parásitos adultos en pulmón o
hígado) y hallazgos microscópicos (presencia o ausencia de
lesiones causadas por la migración parasitaria en el tejido).
Los casos que no presentaron parásitos adultos en los órganos y no presentaron lesiones microscópicas aparentes en el
tejido, se utilizaron como controles n = 3 (pulmón CC = 1;
hígado CC = 1; hígado J = 1). Los que presentaron parásitos
o lesiones microscópicas compatibles con migración parasitaria fueron tratados como casos afectados (pulmón CC = 2;
pulmón J = 2; hígado CC = 1; hígado J = 1). Los tejidos de los
casos seleccionados fueron cortados a 4µm y se montaron en
portaobjetos con carga positiva. Se realizó la técnica estándar de LHQ utilizando 7 lectinas biotiniladas: Concanavalin A
(Con A), Peanut agglutinin (PNA), Ulex europaeus agglutinin
1 (UEA-1), Ricinus communis agglutinin 1 (RCA-1), Dolichos
biflorus agglutinin (DBA), Soybean agglutinin (SBA), Wheat
germ agglutinin (WGA). Las células caliciformes en el pulmón de los animales afectados (CC y J) mostraron marcada
reactividad con la lectina DBA, afinidad no observada en el
pulmón control de CC. En los pulmones de jabalíes afectados
resultaron fuertemente positivas las células caliciformes y células del epitelio alveolar a la lectina UEA-1. La reactividad
de la lectina PNA fue moderada a fuerte en las células del
epitelio alveolar en el pulmón de J y CC afectados, pero no
presentó afinidad por las células caliciformes de los pulmones
de ambas especies afectadas. En los CC afectados las células epiteliales de bronquios y bronquiolos fueron moderadamente positivas a la lectina Con A, mientras que estas células
en el pulmón del CC control fueron fuertemente positivas a
las lectinas WGA y RCA-1. La lectina RCA-1 fue negativa en
las células caliciformes pero moderadamente positiva en los
neumocitos del pulmón de CC y J afectados, mientras que
resultó fuertemente positiva en las células epiteliales de los
bronquios y bronquiolos en pulmón del CC control. Los cambios observados no mostraron variaciones significativas entre
el caso control y los CC afectados a la lectina UEA-1, WGA y
SBA, pero en el caso de pulmones de J afectados la lectina
WGA si presentó una fuerte unión a las células caliciformes.
En el hígado de animales afectados la unión de la lectina
WGA, RCA-1, y DBA fue fuerte en el epitelio del conductillo
biliar para CC, y WGA, DBA y UEA-1 para J afectados. Todas
estas lectinas fueron negativas en los casos control de CC y
J. La técnica de LHQ resultó ser de gran utilidad para la descripción de las lesiones hepáticas y pulmonares provocadas
por parásitos, especialmente en lesiones de proliferación del
epitelio de los conductillos biliares y alteraciones del epitelio
alveolar y bronquial. No obstante, las diferencias en la reactividad de las fibras musculares lisas, linfocitos, macrófagos y
fibras de colágeno de los animales controles y de los afectados, reflejan cambios funcionales aún no aclarados. Por este
motivo, en función de nuestros resultados y atendiendo a
numerosos factores del individuo y del ambiente, la técnica
LHQ puede utilizarse sólo como un indicador de madurez y
diferenciación de estas células. Por otro lado, de acuerdo a
la bibliografía consultada, este trabajo es la primera comunicación en relación a estudios LHQ en hígados y pulmones
de ciervos colorados y jabalíes parasitados. La aplicación de
la técnica de LHQ en ciervos colorados y jabalíes resulta de
especial interés para su uso como marcadores tisulares y su
empleo en estudios de la patogenia de las enfermedades en
estas especies.
Agradecimientos.
Al Dr. Julio Idiart, docentes y técnicos de la Cátedra de Patología Especial, FCV, UNLP.
130
III. 03.
Metabolic bone disease in captivity pantanal alligators (Caiman yacare).
Cunha BHL, Rosa JG, Caldeira FHB, Néspoli PEB, Souza MA, Ferraz RHS, Soares CE,
Figueiredo SI, Saurini NO, Aleixo VM, Pescador CA, Colodel EM .
Universidade Federal de Mato Grosso, Departamento de Clínica Médica Veterinária,
Laboratório de Patologia Veterinária. Cuiabá, MT, 78.068-900, Brasil.
E-mail: [email protected]
Nutritional osteodystrophy in captive reptiles is common and
often associated with imbalanced diets with excess
phosphorus and /or vitamin D deficiency related to inadequate
exposure to ultraviolet rays. This disease is characterized by
severe softening of the bones, with bones having a “rubber”
aspect, with loss of flexibility which leads to spontaneous fractures,
kyphoscoliosis, impaired growth and death. We report the
occurrence of metabolic bone disease in Pantanal alligators
in captivity in Mato Grosso, Brazil. After death of Pantanal
alligator in an alligator farm in Caceres city, MT, ten 4-monthold alligators were submitted to the Laboratory of Veterinary
Pathology, Federal University of Mato Grosso (LPV -UFMT)
in December 2009 for clinical, pathological and radiographic
examination. Information about management, nutrition,
epidemiological and clinical data were obtained from
the owners during a visit to the alligator farm. At necropsy,
samples of the following tissues bones, muscles, heart, lung,
thyroid, parathyroid, gut, liver, kidney, brain were collected for
routine histological studies. Not decalcified bone bone
specimens processed for histology and sections were stained
by Masson-Goldner Trichrome and Von Kossa methods technique for microscopic analysis. In this farm, there are approximately 100,000 alligators, raised in buildings illuminated with
incandescent light. In 2008 and 2009 the diet of these
alligators was based on the use of ground bovine offal,
obtained from slaughterhouses (70% lung and 30% spleen)
plus 1-3% of the rice-bran. In August 2009 there was
a decrease growth rate and significant increase in mortality,
reaching 30% in some groups, in animals 2 to 6 months
of age. Morbility was 70%. Clinically affected animals
showed pain when handled, marked softening of the bones,
especially the mandible and maxilla, which had a rubber
consistency. Occasional fractures would happen; marked
kyphoscoliosis was also observed. X rays showed marked and
diffuse decrease in density of the skeleton, cortical thinning of
long bones and angular deformities, particularly of the spine,
characterized by kyphosis of the thoracic and lumbar portions.
The main gross lesions were marked and diffuse bone
softening, which were easily cut and flexible. There was
increased volume of costochondral junctions, marked deformity
of the vertebral bodies, hemivertebrae formation and spinal
cord compression. In long bones we noted thickening of the
growth plate. The parathyroid glands were moderately
enlarged. The other organs had no significant gross alterations.
The histological sections of bone had marked osteomalacia /
rickets characterized by marked demineralization of osteoid,
mainly trabecular. At times, the predominance (50%)
of mineralization and organic matrix without hyperplasia of
growth plates was noticed on trabeculae. Variable parathyroid
hyperplasia was a common finding. There was also occasional
serous atrophy of body fat, hepatic lipidosis and atrophy of
muscle masses. The clinical alterations leading to death and
the poor growth rate in this farm was attributed to metabolic
bone disease based on epidemiological, clinical and gross
and histological findings. Osteomalacia / rickets were the main
microscopic finding in this case. Further studies on the
mechanism of occurrence of this lesion should be performed
in alligators. Economic factors such as feed cost and quality of
the skin, which lead farmers do restrict the level of calcium in
the diet of alligators, are important for diet selection. It is known
that nutrition based on the use of bovine offal has marked
imbalance in calcium and phosphorus levels, with values of 10
to 20 times more phosphorus in relation to calcium. This diet
is often associated with fibrous ostedystrophy lesions, which
was found in the alligators of this study. A deficiency of
vitamin D should be better assessed in these animals
in order to characterize the pathogenesis of this disease and
improve the nutritional management of farms. Activity of serum
parathyroid hormone and calciferol and its precursors, as well
as the expression of calcium-binding protein (calbindin) are
under evaluation in the LPV-UFMT, to improve understanding
of this pathology. The correction of the diet with balanced
nutrition including calcium and phosphorus levels, multivitamin
supplementation led to clinical recovery of affected alligators
in a period of approximately 40 days.
131
III. 04.
Tricolemoma en un cobayo mascota (Cavia porcellus).
Gornatti Churria C1, Massone A2, Origlia J1,3, López N1,3, Spinsanti E1,4, Uriarte J1,4,
Herrero Loyola M1, Píscopo M1, Petruccelli M1.
1. Cátedra de Patología de Aves y Pilíferos.
2. Cátedra de Patología Especial, Instituto de Patología Dr. B. Epstein, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNLP.
3. Práctica privada en medicina de pequeños animales y mascotas exóticas.
4. Becarios UNLP.
E-mail: [email protected]
Tricholemmoma in a pet guinea pig (Cavia porcellus).
Los tumores espontáneos son de aparición ocasional en cobayos. Aunque fueron descriptos casos en roedores de
cuatro meses de vida, la mayor incidencia ocurre en animales
ma-yores de tres años de edad. Su aparición se encuentra
asociada a diversos factores, como por ejemplo aquel dado
por la predisposición hereridataria determinada por la raza. El
ade-noma papilar broncogénico es la neoplasia espontánea
más comúnmente encontrada en cobayos. En segundo
lugar, representando aproximadamente el 15 % del total de
los tumores espontáneos hallados, se encuentran aquellos
de piel y tejido subcutáneo. La mayoría de estos últimos son
de comportamiento benigno, observándose en diversas localizaciones, tales como abdomen, dorso, grupa y patas, en
cobayos mascotas, en aquellos utilizados en laboratorios de
investigación como también en roedores de colonias reproductoras con fines comerciales. En agosto de 2009 se recibió
en el servicio de diagnóstico histopatológico del Laboratorio
de Diagnóstico de las Enfermedades de las Aves y los Pilíferos,
Facultad de Ciencias Veterinarias (Universidad Nacional de
La Plata) una muestra fijada en formol neutro al 10%,
correspondiente a una neoformación cutánea de un cobayo
mascota, macho, de 3 años de edad y 970 gr de peso. La
misma estaba ubicada en el tercio medio de la superficie lateral izquierda del cuello y fue obtenida por exéresis quirúrgica. Macroscópicamente presentaba un aspecto de mórula,
medía aproximadamente 2 cm de diámetro y tenía consistencia firme. La muestra fue procesada siguiendo las técnicas
histológicas de rutina para su inclusión en parafina y tinción
con hematoxilina y eosina. El estudio histopatológico permitió
observar islotes de células epiteliales neoplásicas y escasas
estructuras quísticas de tamaño variable, rodeadas ambas por
un estroma fibromixoide. Las islas epiteliales presentaron en
su mayoría un foco central de queratinización tricolemal. Se
observaron rodeadas por abundantes células en empalizada
con un citoplasma eosinófilico pálido y un núcleo pequeño y
eucromático. El número de mitosis por campo fue bajo. Las
lesiones macroscópicas y microscópicas observadas permitieron arribar al diagnóstico de tricolemoma. Aunque publicaciones locales e internacionales hacen referencia a la presencia de tricolemomas en contadas ocasiones en caninos
y felinos domésticos y en un conejo mascota, los autores no
encontraron reportes acerca de tricolemomas en cobayos,
por lo que consideran al presente trabajo como la primera
descripción de un tricolemoma en un cobayo mascota.
132
III. 05.
Aspergilosis en aves rapaces en cautiverio: descripcion de dos casos.
Gornatti Churria C1, Origlia J1, Spinsanti E1,2, Uriarte J1,2, Herrero Loyola M1, Píscopo M1, Petruccelli M1.
1. Cátedra de Patología de Aves y Pilíferos, Instituto de Patología Dr. B. Epstein,
Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata.
2. Becarios UNLP.
E- mail: [email protected]
Aspergillosis in captive birds of prey: report of two
cases.
La aspergilosis es la enfermedad no traumática de mayor incidencia que afecta a aves rapaces de vida libre como también
a aquellas mantenidas en cautividad. Los agentes etiológicos
intervinientes son hongos pertenecientes al género
Aspergillus spp, de los cuales A. fumigatus es el aislado con
mayor frecuencia. Sus esporas pueden alojarse en la porción
superior del aparato respiratorio, produciendo enfermedad
en contadas oportunidades, mientras que la mayoría de los
casos de aspergilosis en falconiformes se presentan en el
aparato respiratorio inferior. La enfermedad puede presentarse, de acuerdo a su curso, en forma aguda o bien crónica.
Así también, por la distribución de las lesiones que produce,
se la puede clasificar en local o sistémica. Determinadas situaciones multifactoriales pueden predisponer a su aparición:
la captura reciente, cambio de dueño, condiciones medioambientales deficientes, enfermedades concomitantes, rango
etario (neonatos y gerontes), tratamientos prolongados con
corticoesteroides, exposición a irritantes respiratorios e intoxicación plúmbica. El 13 de junio del 2008 llegó al servicio de
necropsia del Laboratorio de Diagnóstico de Enfermedades
de las Aves y los Pilíferos de la Facultad de Ciencias Veterinarias un esparvero común (Accipiter striatus) para su examen
post-mortem, proveniente de una colección cetrera privada localizada en la ciudad de La Plata. El ave, de un año de vida,
presentó durante la semana previa a su muerte un cuadro
clínico caracterizado por disnea, tos, boqueo, agi-tación y
cambio en su canto. La necropsia reveló la presencia de focos
blanco-amarillentos, de aspecto caseoso y con un diámetro
de 2 a 3 mm presentes en los sacos aéreos torácicos, que se
mostraron engrosados. El corte longitudinal de la tráquea permitió observar a nivel de su bifurcación, una masa amarillenta
de aspecto caseoso de 1 mm de diámetro que se alojó en la
luz del bronquio izquierdo. El 18 de julio del nom-brado año, el
mismo dueño remitió un halcón peregrino (Falco peregrinus)
de un año y medio de vida. El ave rapaz comenzó a sufrir
trastornos respiratorios, manifestando agitación, boqueo, tos,
cambio en su canto y dificultad respiratoria junto con deposiciones de color verde claro, durante un período de un mes
y medio. Al iniciarse el cuadro clínico se instauró un trata-
miento antifúngico compuesto por Anfotericina B 1mg/10
ml de solución fisiológica para nebulización y Fluconazol
oral (20mg/Kg peso/día, oral). A pesar de ello se produjo el
deceso del ave. La necropsia permitió ver a los sacos aéreos
torácicos engrosados, de coloración amarillenta, conteniendo
un material cremoso blanco-amarillento. En los pulmones
se observaron estructuras cavitarias con contenido de color
amarillento-verdoso. En la superficie visceral de la musculatura pectoral y en la cavidad celómica, circundando a los riñones, se apreciaron estructuras caseosas blanquecinas de 0,5
a 2 cm de diámetro. El corazón mostró un área decolorada
próxima a su vértice de 1 cm de diámetro. En ambos casos
se realizó la tinción de Gueguen de los extendidos en fresco
de los focos caseosos encontrados en tráquea, pulmones,
sacos aéreos y de aquellas estructuras presentes en cavidad
celómica. Muestras de ambos pulmones del halcón peregrino
fueron fijadas en formol neutro al 10%, procesadas mediante
técnicas histológicas de rutina y teñidas con hematoxilina y
eosina para su estudio histopatológico. Los extendidos en
fresco teñidos con Gueguen mostraron hifas tabicadas agrupadas de manera arborescente, características del género
Aspergillus spp. La histopatología de los pulmones del halcón peregrino permitió observar, en la luz de los parabronquios, la presencia de focos necróticos. Allí se encontraron
numerosas estructuras refringentes compatibles con hifas,
las que también estuvieron presentes circundando a ellos.
Las lesiones macroscópicas y microscópicas permitieron arribar al diagnóstico de aspergilosis traqueal de curso agudo,
junto con una aerosaculitis fúngica, en el Accipiter striatus,
mientras que el Falco peregrinus se concluyó que sufrió una
aspergilosis crónica pulmonar junto a una aerosaculitis fúngica, con la presencia de aspergilomas en la cavidad celómica.
Se presume que el factor medioambiental fue determinante
para que se produjera la enfermedad en ambas aves de presa debido a que eran alojadas durante la noche en un cuarto
donde el cetrero almacenaba pinturas, solventes, diluyentes
y otros productos tóxicos que actuaron a manera de irritantes
de las vías respiratorias. Debido a la ausencia de publicaciones nacionales acerca de aspergilosis en aves rapaces, los
autores consideran al presente trabajo como el primer reporte
del nombrado tema en la República Argentina.
133
III. 06.
Estudio histopatológico de carcinoma mamario sólido metastásico en un armadillo
(Dasypus novemcinctus).
López IC1, Saravia M1, Cubillos V2, Celis S3.
1. Laboratorio de Patología Veterinaria Histo-Vet, Santiago.
2. Instituto de Patología Animal UACh. Valdivia,
3 Parque Zoológico Buin Zoo, Santiago.
E-mail: [email protected]
Histopathological study of metastatic solid mammary
carcinoma in an armadillo (Dasypus novemcinctus).
Las neoplasias, han sido comunicadas en una amplia variedad
de animales domésticos y silvestres. En armadillos (Dasypus
novemcinctus) se han comunicado esporádicamente neoplasias de origen mesenquimático (fibromas) o cutáneos (carcinomas). Si bien es sabido que los tumores de origen mamario afectan a una gran variedad de mamíferos, existe escasa
información relacionada con la presentación espontánea de
neoplasias mamarias en esta especie. El presente trabajo
tiene por objetivo comunicar un caso de carcinoma mamario
sólido con metástasis hepática en un armadillo. En septiembre de 2008 se remitieron al Laboratorio de Patología Veterinaria Histo-Vet de la ciudad de Santiago (Chile), muestras de
tumor mamario e hígado de un armadillo hembra de 5 años,
perteneciente al Parque Zoológico Buin Zoo de la ciudad de
Santiago. Clínicamente, el animal presentaba una tumoración
mamaria en la glándula inguinal izquierda, de aspecto nodular
y tamaño aproximado de 2 x 3 x 3,5 cm. El examen clínico
evidenció severo compromiso del estado general y ascitis. El
estudio histopatológico reveló una neoplasia mamaria caracterizada por proliferación de células epiteliales atípicas dispuestas en nidos, delimitados por escaso tejido fibrovascular,
con núcleos esféricos y ovoides, observándose una población
celular con marcada anisocariosis y 3-5 figuras mitóticas por
campo de 40X. El tejido afectado presentó, además, amplias
áreas de necrosis (>50%) e invasión linfática evidente. El
hígado reveló marcada destrucción del parénquima producto
de múltiples nódulos de infiltrado neoplásico, caracterizado
por células epiteliales atípicas dispuestas en nidos, con idéntico patrón que el observado en la glándula mamaria. El
diagnóstico histomorfológico fue carcinoma mamario sólido
con metástasis hepática. Las neoplasias mamarias han sido
descritas en varios grupos taxonómicos de mamíferos,
existiendo en general similitudes en relación con su clasificación histomorfológica. Las diferencias en la prevalencia de
los tumores mamarios en carnívoros y herbívoros silvestres
de vida libre y animales domésticos, varía significativamente
estando asociada a factores de riesgo específicos, relacionados principalmente con trastornos endocrinos, actividad
periódica de producción de leche en especies productivas,
alimentación (dieta) y características hormonales (ciclo estral)
propias de cada especie. Considerando la escasa información
disponible de neoplasias mamarias en armadillos, resultaría
interesante realizar estudios avanzados, incluyendo técnicas
de inmunohistoquímica para la caracterización de los receptores hormonales y marcadores de proliferación celular, entre
otros, que permitieran determinar si esta especie presenta
naturalmente resistencia a la presentación de esta condición
y así contribuir al conocimiento científico con relación a los
factores de riesgo relevantes (dieta, estado reproductivo, factores genéticos, entre otros) que inciden directamente en la
presentación de cáncer mamario en animales y humanos.
134
III. 07.
Infección por Yersinia pseudotuberculosis en maras (Dolichotis patagonum) en el
zoológico nacional de Chile.
López IC1, Saravia M1, Tirado M2, Cubillos V3.
1. Laboratorio de Patología Veterinaria Histo-Vet, Santiago.
2. Zoológico Metropolitano de Santiago.
3. Instituto de Patología Animal UACh. Valdivia.
E-mail: [email protected]
Yersinia pseudotuberculosis infection in maras (Dolichotis
patagonum) at the national zoo of Chile.
La mara patagónica (Dolichotis patagonum) es un roedor de
la familia Caviidae, también conocido como liebre patagónica
o liebre criolla. Es una especie silvestre que habita principalmente en la patagonia de Argentina y Chile, presentando
buena adaptación al cautiverio en zoológicos. En condiciones
de cautiverio, esta especie es particularmente susceptible
a Yersinia pseudotuberculosis, bacteria intracelular facultativa, cocobacilar, Gram negativa, que afecta a una gran variedad de mamíferos domésticos y silvestres, constituyendo
una zoonosis. Yersinia pseudotuberculosis se transmite vía
orofecal, originando un cuadro digestivo que puede tener
curso fatal por septicemia aguda, siendo más común la infección crónica, caracterizada por enterocolitis y linfadenitis
mesentérica granulomatosa, que en su fase septicémica origina granulomas en hígado, bazo, linfonódulos y pulmones,
entre otros. El presente trabajo tiene por objetivo comunicar
un brote de yersiniosis por Yersinia pseudotuberculosis en el
Zoológico Nacional de Chile. En el mes de agosto de 2008,
se observó un brote infeccioso en un grupo de maras en el
Zoológico Nacional de Chile (Santiago), las cuales presentaron signología digestiva caracterizada por cólicos severos,
diarrea y enflaquecimiento, con mortalidad de 8 ejemplares.
El examen macroscópico reveló enteritis necrotizante con
exudado fibrinohemorrágico y severa linfadenitis mesentérica. Por otra parte, se observaron múltiples áreas nodulares
de color blanquecino acompañadas de hemorragias en pulmones e hígado, evidenciando al corte necrosis caseosa. Al
examen histopatológico se observaron severa enteritis necrotizante y linfadenitis granulomatosa. El hígado y los pulmones
evidenciaron múltiples focos granulomatosos, con necrosis
central e infiltrado linfohistioneutrofílico, delimitados por reacción fibroblástica. Como tinciones especiales se utilizaron
Ziehl-Neelsen, que dio negatividad a bacilos ácido-alcohol
resistentes, y Brown y Brenn, que demostró bacterias cocobacilares Gram negativas en el interior de los macrófagos en
diversos granulomas de los órganos examinados. El conjunto
de hallazgos macroscópicos e histopatológicos observados,
permitieron realizar el diagnóstico presuntivo de yersiniosis
causada por Yersinia pseudotuberculosis. Muestras del contenido caseoso de los granulomas presentes en hígado, se
sembraron en agar MacConkey, incubándose durante 48 hrs.
a 37ºC. Se observó crecimiento de colonias bacterianas
(> 50 UFC - cultivo puro). La caracterización bioquímica del
microorganismo se realizó a través del sistema automatizado
de detección VITEK®, que confirmó la presencia de Yersinia
pseudotuberculosis. En el presente brote, los hallazgos macroscópicos e histopatológicos lograron establecer una buena
orientación diagnóstica, que mediante aislamiento del agente
permitió instaurar medidas precoces de tratamiento y manejo
de la población afectada. El brote diagnosticado se presentó
en invierno (clima frío y húmedo), lo cual está en concordancia con comunicaciones previas que, en maras, relacionan
esta enfermedad con los meses invernales, producto de bajas temperaturas, hacinamiento, estrés alimentario y partos
estacionales, con incremento de la mortalidad. Considerando
que Yersinia pseudotuberculosis es una bacteria ubicuitaria,
resulta fundamental tomar medidas de prevención relacionadas principalmente con la higiene y control de ratas y ratones
en los meses invernales.
Agradecimientos.
*Los autores agradecen la colaboración del Laboratorio Veterinario Especializado VetLab® (Santiago-Chile), donde se realizó el aislamiento del
agente.
135
III. 08.
Leiomioma cervical uterino en un mono araña (Ateles fusciceps): comunicación de un
caso.
Magni C1, Pezzone N1, Bagattin L1, Marini MR1, Micheloud JF1, Bianchini FA1, Pontarelli EL1, Hunziker D2, Pachoud JC1.
1. Cátedra de Patología Básica. Facultad de Ciencias Veterinarias,
Universidad Nacional del Litoral. P. Kreder 2805, Esperanza, Santa Fe.
2. Dirección General de Ecología y Protección de la Fauna,
Ministerio de la Producción. Av. A. del Valle 8770, Santa Fe.
E-mail: [email protected]
Cervical uterine leiomyoma in a black headed spider
monkey (Ateles fusciceps): a case report.
El mono araña (Ateles fusciceps) habita en las selvas de
América Central y América del Sur. Es diurno, arbóreo, y se lo
encuentra en grupos de hasta 20 individuos. Desde hace ya
varios años, en la Estación Zoológica Experimental de la ciudad de Santa Fe, se ha logrado la formación de una pequeña
familia estable de esta especie, cuyos integrantes, aún estando en cautiverio, se reproducen todos los años. El objetivo
de este trabajo es presentar el hallazgo de un leiomioma en
el cuello uterino de una de las hembras del grupo. Durante el
invierno del 2009 una hembra adulta y multípara rechazó su
cría sin ninguna causa aparente. Luego murió en la primavera
siguiente. A la necropsia se hallaron lesiones compatibles con
una indigestión aguda por sobrecarga, con gastritis y duodenitis severa, estableciéndose dichas alteraciones como causa
de la muerte. También se observó un engrosamiento uniforme
difuso de la pared del cérvix uterino, con oclusión de su luz y
contenido mucoso en su luz; externamente presentaba áreas
de color blanquecino-amarillento alternadas con otras rojizas;
la consistencia era firme. A su vez, en la porción más caudal
de la vagina, cranealmente a la desembocadura de la uretra,
se halló una estructura papilar, pedunculada, de un tamaño
de 1 cm, blanquecina, lisa y brillante. La histopatología reveló
en la pared del cérvix la presencia de una gran población homogénea de células fusiformes, bien diferenciadas, sin límites
citoplasmáticos precisos y dispuestas en fascículos, con núcleos grandes y pálidos, y un estroma fibroso abundante. El
índice mitótico era bajo. La lesión vaginal correspondió a una
proyección del epitelio escamoso estratificado y corion subyacente, este último con abundantes capilares pletóricos y un
infiltrado celular inflamatorio mixto, pero sin células neoplási-
cas evidentes. Se realizaron técnicas inmunohistoquímicas
en muestras del cérvix utilizando los anticuerpos primarios
monoclonales antidesmina y antiactina específica de músculo. Se observó inmunomarcación leve y poco uniforme en
los citoplasmas de las células neoplásicas con antiactina, la
cual también se observó en las paredes de las arteriolas. La
marcación con antidesmina fue negativa. De acuerdo a estos
resultados, se formuló un diagnóstico de leiomioma cervical
uterino.Los leiomiomas son neoplasias benignas del músculo
liso, y constituyen una de las más frecuentes del tracto genital
en los mamíferos, incluida la mujer, principalmente en hembras adultas no esterilizadas. Sin embargo, existen pocos casos informados de estas neoplasias en primates no humanos,
a pesar de que su estudio es útil para la comparación con
los seres humanos debido a su proximidad filogenética. Los
leiomiomas ocurren más frecuentemente en útero, cervix o
vagina, y pueden interferir con la función reproductiva. Abundante bibliografía respalda la teoría de que constituyen neoplasias hormono-dependientes; se piensa que los estrógenos
son los mayores promotores del crecimiento neoplásico, y
también ha sido demostrado que la progesterona incrementa
el índice mitótico de las células del miometrio. En las mujeres
se sugirió que algunos leiomiomas uterinos regresarían espontáneamente luego de la menopausia. Existe un reporte
de un leiomioma uterino en una chimpancé (Pan troglodytes),
la cual había recibido contraceptivos inyectables compuestos
por estrógeno y progesterona, desde su pubertad hasta los 22
años de edad en que se produjo su muerte. De este modo, y
principalmente en seres humanos, existe evidencia acerca de
la base hormonal de estas neoplasias, si bien el mecanismo
de acción molecular exacto del desequilibrio hormonal que
provocaría su génesis no está aún claramente elucidado.
136
III. 09.
Tumor de células germinales en una carpa koi (Cyprinus carpio). Comunicación de un
caso.
Mattiello R1, D’Ambrosio E2.
1. Cátedra de Medicina, Producción y Tecnología de Fauna Acuática y Terrestre,
Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA. Chorroarín 280, C1427CWO, CABA.
2. Actividad privada, Buenos Aires.
E-mail: [email protected]
Germ cell tumor in a koi carp (Cyprinus carpio). A case
report.
Las neoplasias en los peces son tan frecuentes y variadas
como en los animales terrestres. Se presentan con mayor
frecuencia en los animales adultos, en híbridos genéticos, y
ante la presencia de ciertos virus, parásitos, irritantes, tóxicos o contaminantes ambientales. Son particularidades de
las carpas, especialmente de la variedad koi, su longevidad
y su buena adaptación a ambientes subóptimos. Parte de
esta adaptación radica en la gran capacidad que tienen para
desintoxicar y reparar daños tisulares causados por agentes
tóxicos o carcinogénicos. Pero la longevidad y el alto grado
de consanguinidad o hibridización que suelen presentar estos
individuos, son factores de susceptibilidad a diversos agentes
mutagénicos. Se puede sospechar de masas intraabdominales en los peces cuando estos presentan un abdomen muy
dilatado, pero el diagnóstico definitivo usualmente se realiza
post mortem. La laparotomía exploratoria y la toma de biopsias no son procedimientos frecuentes en estos individuos.
El presente trabajo describe la ocurrencia de una neoplasia
gonadal en una carpa koi hembra adulta. Una carpa koi de
55 cm de largo y tres kilogramos de peso fue hallada muerta
en un estanque exterior de peces ornamentales. La misma
presentaba un abdomen sumamente dilatado, branquias
anémicas y hemorragias petequiales en la piel. Se realizó la
necropsia, hallándose una formación quística de aspecto tumoral, encapsulada, que no involucraba otros órganos más
que las gónadas. Se le tomaron varias muestras, las que fueron fijadas en formol buferado al 10% y procesadas por la técnica de rutina de inclusión en parafina. Los cortes se tiñeron
con hematoxilina y eosina (HE) para su estudio histológico.
Macroscópicamente, la masa tumoral, de 30 cm de diámetro,
presentó una superficie irregular con nódulos blanquecinos
de 3 a 5 cm de diámetro y consistencia blanda, y un saco
quístico que contenía 750 ml de líquido serosanguinolento.
Los cortes histológicos mostraron células grandes, redondas,
de citoplasma claro con núcleo redondo y central, dispuestas en forma difusa en un estroma de tejido fibroso, con amplias áreas de necrosis celular e infiltrado por linfocitos. Las
muestras procesadas no contenían elementos diferenciados,
en tanto que las figuras de mitosis no fueron comunes. Las
características macroscópicas e histológicas corresponden a
un tumor de células germinales, formado por células indiferenciadas con predominio de infiltrado inflamatorio y necrosis. Si bien, el componente celular del tumor fue similar a el
de los tumores de los animales domésticos nombrado como
disgerminoma, se decidió no darle esta nomenclatura debido
a que la clasificación de los tumores de ovario de los peces
no ha sido aún establecida. Los tumores gonadales son más
frecuentes en los machos de carpas adultas y más aún en los
híbridos de Cyprinus carpio x Carassius auratus, a causa de
anomalías genéticas en el desarrollo de las gónadas. En las
hembras, tumores de este tipo son menos frecuentes, pero
cuando ocurren, se caracterizan por la presencia de un gran
saco lleno de líquido. El hermafroditismo es común en esta
especie y, cuando los peces padecen de tumores gonadales,
ambos tejidos, ovárico y testicular, están presentes. No se ha
podido determinar aún la etiología de este tipo de neoplasias,
aunque se mencionan causales como la edad, la consanguinidad y la hibridación, que predisponen a factores mutagénicos
o carcinogénicos.
137
III. 10.
Carcinoma hepatocelular adenoide en un loro hablador (Amazona aestiva). Comunicación
de un caso.
Mattiello R1, D’Ambrosio E2, Rodríguez A1.
1. Cátedra de Medicina, Producción y Tecnología de Fauna Acuática y Terrestre,
Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA. Chorroarín 280, C1427CWO, CABA.
2. Actividad privada, Buenos Aires. E-mail: [email protected]
Adenoid hepatocellular carcinoma in an amazon parrot
(Amazona aestiva). A case report.
Entre las aves, las neoplasias son más frecuentes en la gallina doméstica y en los psitácidos. En la gallina, la mayoría
es causada por organismos como el retrovirus y el herpesvirus. En el resto de las especies la etiología es desconocida.
Algunos de los tumores más comunes en psitácidos incluyen
lipoma, fibrosarcoma, linfoma, papiloma, tumores gonadales,
tumores renales, carcinomas gástricos y leiomiosarcoma,
entre otros. Dentro de los tumores epiteliales del hígado, el
colangiocarcinoma es el de presentación más frecuente en
aves de compañía y silvestres. El presente trabajo describe
el hallazgo de un carcinoma hepático difuso en un pichón
de loro hablador (Amazona aestiva) macho, de 5 meses de
edad. El ave fue comprada en la vía pública en febrero de
2009, y desde el primer día de su obtención fue alimentada con
una pasta de embuche que contenía oxitetraciclina (500 mg/kg
de alimento), como preventivo de la clamidiosis aviar. Al mes
de edad, la misma presentó un cuadro de debilidad, anorexia,
vómitos, dificultad respiratoria y diarrea con abundantes pigmentos biliares. Tanto ella como su dueño tuvieron un diagnóstico positivo de psitacosis. El dueño, por su mal estado de
salud, tuvo que ser internado y el ave fue remitida al Centro
de Zoonosis del partido de San Martín, provincia de Buenos
Aires. Debido a que no se la quiso sacrificar, fue dada en
adopción, bajo tratamiento y control estricto, a un rehabilitador de fauna. Fue entonces medicada con azitromicina
(50 mg/kg PO, 30 días), en combinación con enrofloxacina
(15 mg/kg PO, cada 12 h, 15 días) y ketoconazol (20 mg/kg
PO, cada 12 h, 30 días), ya que además presentaba una candidiasis digestiva severa. El ave tuvo una buena recuperación
clínica y las pruebas de ELISA para Chlamydophila psittaci
(Speed Chlam®) realizadas a los 50 días post tratamiento
resultaron negativas. A los 5 meses el ave fue llevada nuevamente a consulta con un cuadro de debilidad, anorexia, pérdida de peso progresiva, diarrea severa con hematoquesia y
dilatación abdominal. Se decidió la eutanasia, que fue efectuada con pentobarbital sódico (0,5 ml/kg IV). A la necropsia
se halló el hígado marcadamente aumentado de tamaño, de
coloración amarillenta clara y consistencia friable. Se tomaron
muestras del mismo, las que fueron fijadas en formol neutro
al 10% y procesadas por la técnica de rutina de inclusión en
parafina. Los cortes se tiñeron con hematoxilina y eosina (HE)
para su estudio histológico. Para la inmunohistoquímica los
cortes fueron incubados con anticuerpos contra los siguientes
antígenos: citoqueratinas (clon AE1/AE3, CK7, CK20), marcador de hepatocitos (Hepar-1), marcador de la proteína antioncogénica p53 y marcador de proliferación celular (Ki67),
utilizando controles positivo y negativo de origen humano.
Microscópicamente se observaron hepatocitos neoplásicos,
pobremente diferenciados y pleomórficos, con nucléolo prominente y citoplasma vacuolado, formando láminas y acinos con
escaso estroma fibroso, dilatación vascular, pequeñas áreas
de necrosis, infiltrado leucocitario y pocas figuras de mitosis.
Las técnicas de inmunomarcación mostraron una tinción positiva con los marcadores epiteliales AE1/AE3, no hallándose
reactividad alguna para la CK7, CK20, Hepar-1, Ki67 y p-53.
Es conocido el hecho de que anticuerpos humanos funcionan
en la inmunomarcación celular de mamíferos y en algunos
tumores específicos de aves y peces. En este caso la causa
de la negatividad podría ser la ausencia genuina de dichos
anticuerpos en el tejido o la ineficacia de los anticuerpos humanos utilizados para detectar tales antígenos en el loro.
Las características macroscópicas e histológicas son altamente compatibles con carcinoma hepatocelular adenoide
o seudoglandular, caracterizado por hepatocitos con escasa
diferenciación y proliferación de estructuras acinares con lumen muy marcado. Las técnicas de inmunohistoquímica no
permitieron la confirmación del diagnóstico, no pudiendo descartarse la presencia de carcinoma hepato y colangiocelular
combinado. Situaciones como estas son estimulantes para
originar la búsqueda e investigar marcadores en tejidos normales y neoplásicos en aves silvestres.
El presente trabajo deja el precedente de una neoplasia poco
frecuente en pichones de loro hablador que debería incluirse
en el diagnóstico diferencial de las enfermedades hepáticas
para la especie.
138
III. 11.
Bronquitis por Providencia rettgeri en un loro (Amazona aestiva) con presunta deficiencia
de vitamina A.
Minatel L, Postma GC, Shapira A, Carfagnini JC.
Cátedra de Patología, Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA.
Av. San Martín 5285, (1417) Ciudad Autónoma de Buenos Aires.
E-mail: [email protected]
Bronquitis caused by Providencia rettgeri in a parrot
(Amazona aestiva) with presumed vitamin A deficiency.
La deficiencia de vitamina A es una enfermedad frecuente en
las aves en cautiverio alimentadas con una dieta compuesta
exclusivamente por semillas. Se caracteriza por metaplasia
escamosa del epitelio y de las glándulas mucosas de varios
órganos, principalmente de los tractos alimentarios superior y
respiratorio. Esta metaplasia de los epitelios predispone a los
órganos a sufrir infecciones secundarias. El objetivo de este
trabajo es presentar un caso de bronquitis supurativa en un
loro (Amazona aestiva), secundaria presumiblemente a una
deficiencia de vitamina A. Se recibió en el Servicio de
Patología Diagnóstica de la Facultad de Ciencias Veterinarias
el cadáver de un loro macho adulto, que había presentado
signos respiratorios. Según la propietaria, el loro era alimentado exclusivamente con semillas de girasol. El estado nutricional del ave era regular. Al realizar la necropsia se observó
una dilatación de los bronquios primarios, a la altura de la
bifurcación de la tráquea, y dos formaciones nodulares localizadas en el hilio de cada pulmón, que al corte contenía un
material caseoso de color blanquecino. Se tomaron muestras
para bacteriología de dicho material, y muestras para histopatología de los órganos principales, que fueron fijadas en formol al 10%. No se encontraron otras lesiones en la necropsia.
Las muestras para bacteriología fueron sembradas en caldo
cerebro infusión, agar sangre, agar Mac Conkey y agar
Sabouraud. Las muestras para histopatología fueron proce-
sadas con las técnicas de rutina para su inclusión en parafina,
cortadas a 5 µm y coloreadas con Hematoxilina y Eosina. Al
examen microscópico la tráquea y los bronquios primarios y
secundarios estaban revestidos por un epitelio plano estratificado queratinizado. La pared de los bronquios presentaba
una reacción inflamatoria, compuesta por polimorfonucleares
y células mononucleares. Su luz contenía un exudado purulento junto con abundante queratina, observándose gran cantidad de bacterias en dicho material. Alrededor de los bronquios se encontraron varios focos de necrosis licuefactiva,
rodeados por células inflamatorias. No se observaron formas
micóticas en las lesiones descriptas. El esófago presentaba
hiperplasia e hiperqueratosis del epitelio de revestimiento,
con metaplasia escamosa de sus glándulas. De la muestra
tomada del hilio pulmonar, correspondiente al contenido de
uno de los bronquios primarios dilatado, se aisló en pureza
Providencia rettgeri. Si bien no se determinaron los niveles de
vitamina A en el hígado, la metaplasia escamosa observada
en la mucosa de las vías aéreas superiores y en las glándulas esofágicas, sumado al tipo de dieta que consumía el ave,
son altamente sugestivas de una deficiencia de vitamina A.
Providencia rettgeri es un habitante normal del tracto respiratorio superior de las aves. Es probable que la pérdida del
aparato mucociliar en la tráquea y los bronquios, debido a la
metaplasia escamosa causada por la deficiencia de vitamina
A, favorezca la colonización de estos órganos por bacterias
saprófitas como P. rettgeri.
139
III. 12.
Descripción de un brote de listeriosis en un criadero de chinchillas (Chinchilla lanigera)
del partido de La Plata (Buenos Aires, Argentina).
Origlia JA1, Vigo G2, Gornatti Churria D1, Piscopo M1, Herrero Loyola M1, Petruccelli M1.
1. Laboratorio de Diagnostico de Enfermedades de las Aves y Pilíferos,
FCV-UNLP, avenida 60 y 118 La Plata Buenos Aires.
2. Laboratorio de Diagnostico e Investigaciones Bacteriológicas, FCV-UNLP.
E-mail: [email protected]
Outbreak of listeriosis in a commercial breeding colony
of chinchillas (Chinchilla lanigera) in La Plata, Buenos Aires,
Argentina.
En agosto de 2006 un criador del partido de La Plata envió
cuatro ejemplares adultos de chinchilla (Chinchilla lanigera),
dos machos y dos hembras, al Laboratorio de Diagnostico
de Enfermedades de las Aves y Pilíferos de la Facultad de
Ciencias Veterinarias de la Universidad de La Plata para su
evaluación diagnostica. El criadero estaba formado por unos
150 animales. Durante un lapso de 15 días murieron 40
roedores de diversas edades (26,6 % de mortalidad). La dieta
estaba constituida por alimento balanceado para chinchillas
y cubos de alfalfa. La anamnesis reveló graves fallas en el
manejo, como mal funcionamiento de los bebederos y escasa limpieza e higiene. Los signos clínicos observados en los
animales fueron depresión y anorexia. Se realizó la necropsia
de los ejemplares y se tomaron muestras de hígado, bazo,
pulmón, linfonódulo mesentérico, intestino delgado, ciego y
riñón, las que fueron fijadas con formol al 10%, procesadas
según las técnicas de rutina y coloreadas con hematoxilina
y eosina. Muestras de hígado fueron sembradas en medio
Mac Conkey y agar sangre para su estudio bacteriológico.
Los aislamientos bacterianos fueron identificados por métodos convencionales y serotipificación. Esta última técnica fue
realizada en el servicio de bacteriología especial, departamento de bacteriología, INEI-ANLIS “Carlos G. Malbrán”. En
la necropsia se observaron numerosos focos puntiformes de
1 a 3 mm. de diámetro y de color blanco, en hígado e intestino. El linfonódulo mesentérico estaba aumentado de tamaño, con hemorragias y pequeñas áreas de color blanco. En el
ciego se observó compactación del contenido, con presencia
de gas. Los pulmones estaban congestivos, observándose en
dos ejemplares focos de consolidación de consistencia firme
y color rojo en lóbulos caudal derecho e izquierdo. El examen
microscópico del hígado reveló numerosos focos de necrosis coagulativa, en cuya periferia se observó gran cantidad
de neutrófilos y macrófagos, junto con colonias bacterianas.
Los vasos sanguíneos estaban congestivos con la presencia
numerosos leucocitos en su interior. Una escasa y difusa infiltración de linfocitos se observó en el resto del parénquima
hepático. La mayoría de los hepatocitos presentaban degeneración grasa. Por su parte, en el pulmón se observó ede-
ma, congestión de vasos sanguíneos y una infiltración celular
inflamatoria compuesta por neutrófilos y macrófagos, los que
también se encontraban en la luz alveolar. En el bazo se observaron áreas de necrosis coagulativa con la presencia de
macrófagos y neutrófilos. El intestino estaba comprometido
por una extensa infiltración inflamatoria compuesta por neutrófilos y macrófagos. El ganglio linfático mesentérico presentó
un área necrótica extensa junto con una abundante presencia
de macrófagos. En los cultivos de agar sangre se observó el
desarrollo de colonias pequeñas b hemolíticas, que con la coloración de Gram correspondían a cocobacilos Gram (+). Las
pruebas bioquímicas (Catalasa +, Oxidasa -, Indol -, Citrato -,
Rojo de Metilo +, Voges Proskauer +, CAMP +, Rhamnosa +,
Xilosa -, Maltosa +, Glucosa +, Lactosa +) permitieron identificarlos como Listeria monocytogenes, y la serotipificación
como serotipo 4b. La observación directa del contenido intestinal fue negativa para la presencia de elementos parasitarios.
En base a los estudios histopatológicos y bacteriológicos se
determinó que las chinchillas se infectaron y murieron por
Listeria monocytogenes serotipo 4b. Este serotipo está descripto como uno de los más patógenos tanto para humanos
como para animales. Las primeras descripciones de la enfermedad en chinchillas datan de 1940 en Canadá y a partir
de esa fecha se comunicaron brotes en Europa y America
del Norte. La infección puede producir tres cuadros clínicos:
septicemia, encefalitis y abortos. La forma septicémica, en
algunos casos junto con encefalitis, es común en animales
monogástricos en cambio la encefalitis y los abortos ocurren
principalmente en rumiantes adultos. Las chinchillas mantenidas en sistemas de cría intensiva industrial son consideradas
susceptibles a adquirir la infección. Pueden verse afectados
animales de cualquier edad y los signos clínicos incluyen disminución del apetito, depresión, diarrea, constipación, abortos, tortícolis y muerte súbita. Las lesiones observadas en
la necropsia y la histopatología concuerdan con la descripta
en la bibliografía. En nuestro caso no se observaron signos
nerviosos. En general se cita como fuente de infección al alimento contaminado por ratas u otros roedores lo cual no descartamos que haya sucedido en este caso. Como un factor
que favoreció el desarrollo del brote descripto consideramos
de gran relevancia las condiciones de estrés derivadas del
deficiente manejo y escasa limpieza e higiene.
140
III. 13.
Dioctofimosis en un aguará guazú (Chrysocyon brachyurus): comunicación de un caso.
Pezzone N1,3, Magni C3, Marini MR3, Stutz G2, Sensevy A2, Hunziker D2, Widenhorn N4, Canal AM3.
1. Dirección General de Sanidad Animal, Ministerio de la Producción. Bv Pellegrini 3100, Santa Fe.
2. Dirección de Ecología, Ministerio de la Producción. Av. A. del Valle 8770, Santa Fe.
3. Cátedra de Patología Básica. 4Hospital de Pequeños Animales. Facultad de Ciencias Veterinarias,
Universidad Nacional del Litoral. P. Kreder 2805, Esperanza, Santa Fe.
E-mail: [email protected]
Dioctophymosis in a maned wolf (Chrysocyon brachyurus):
a case report.
El aguará guazú o lobo de crin (Chrysocyon brachyurus) es el
cánido más grande de Sudamérica. Es un animal corpulento
en comparación con otros cánidos silvestres, alcanzando los
75 cm de altura y hasta 170 cm de longitud incluyendo la cola;
puede superar los 20 kg de peso. Su pelaje es denso y tupido,
de color anaranjado-rojizo, y posee una distintiva melena de
crines alrededor del cuello. Es inofensivo para el hombre y el
ganado; sin embargo, la ocupación de su hábitat y la caza lo
han reducido a zonas aisladas. Este trabajo describe un caso
de dioctofimosis renal en un ejemplar de aguará guazú capturado en zona rural de Esperanza, Santa Fe. El animal fue ingresado al Hospital de Pequeños Animales de la Facultad de
Ciencias Veterinarias por encontrarse en mal estado general
y fue sometido a diversos análisis. Durante la observación del
sedimento urinario se constató la presencia de abundantes
huevos de Dioctophyma renale. Posteriormente se efectuó
una ecografía,en la que se observó la pérdida de la estructura
del riñón derecho y una imagen compatible con la presencia
del parásito. Se realizó una nefrectomía. Macroscópicamente
se observó un riñón pequeño, pálido, con su cápsula arrugada y de consistencia blanda. Al corte sagital se encontró una
hembra adulta de Dioctophyma renale, de color rojo vinoso,
de aproximadamente 10 cm de longitud, con atrofia total del
parénquima a excepción de una leve sección de la corteza.
Microscópicamente, en ese sector, se observó fibrosis masiva, áreas de necrosis e infiltrados de células mononucleares.
El aguará guazú actualmente está categorizado en Argentina
como especie en peligro de extinción. Entre otros factores,
tales como la caza indiscriminada y la reducción de su hábitat,
se considera que una amenaza de importancia para las poblaciones silvestres de esta especie es la transmisión de enfermedades a partir de animales domésticos, especialmente
perros. Estos últimos actúan como reservorios de agentes
infecciosos y parasitarios, y han sido un factor devastador en
muchas poblaciones de carnívoros silvestres del mundo. La
dictiofimosis renal, que en los cánidos cursa con pielonefritis y
destrucción total unilateral del riñón, ha sido propuesta como
una amenaza para la especie. Sin embargo la información
disponible no permite aún asegurar que constituya un serio
factor de riesgo para este cánido.
141
III. 14.
Mortandad en tucanes grandes (Ramphastos toco) en cautiverio.
Pezzone N1,3, Sciabarrasi A2, Belotti M3, Marini MR3, Hunziker D2, Canal AM3.
1. Dirección General de Sanidad Animal, Ministerio de la Producción. Bv Pellegrini 3100, Santa Fe.
2. Dirección General de Ecología y Protección de la Fauna, Ministerio de la Producción. Av. A. del Valle 8770, Santa Fe.
3. Cátedra de Patología Básica. Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Litoral.
P. Kreder 2805, Esperanza, Santa Fe.
E-mail: [email protected]
Mortality in toco toucans (Ramphastos toco) placed in
captivity.
Los tucanes o ranfástidos constituyen una familia de aves que
se caracterizan por poseer un pico muy desarrollado y de vivos colores. Miden entre 20 y 60 cm, siendo el tucán toco o
grande (Ramphastos toco) el de mayor tamaño. Habitan en
los bosques tropicales, desde México hasta el norte de Sudamérica. A continuación se describe un caso de mortandad de
tucanes grandes (Ramphastos toco) tenidos en cautiverio en
la Estación Zoológica Experimental de la ciudad de Santa Fe,
durante febrero de 2010. Un total de nueve ejemplares murieron en el lapso de un mes. Ninguno de ellos había nacido en
cautiverio, y casi todos provenían de distintos orígenes; los
de mayor antigüedad se encontraban en el lugar desde hacía
4 años, y los más recientes habían sido incorporados en el
último semestre. Cuatro de ellos se alojaban en el mismo recinto, y los cinco restantes en otras jaulas ubicadas a una distancia de entre 10 y 50 metros; todos compartían la dieta y el
cuidador. Los animales, al exhibir anorexia y una disminución
en su actividad física, eran trasladados a jaulas de cuarentena, donde respondían bien al tratamiento con oxitetraciclina
intramuscular durante 7 días; sin embargo, al ser restituidos
a sus correspondientes recintos morían en un par de días.
Su dieta consistía en frutas (manzanas, bananas, naranjas)
alternadas día por medio con una mezcla de concentrado comercial para caninos, puré de papas y huevos cocidos. Una
vez por semana recibían carne cruda (pollo, ratones) con
huevos frescos. Se les practicó necropsia a todos ellos, no
encontrándose lesiones macroscópicas relevantes. Fueron
remitidos, para su análisis microscópico, distintos órganos de
un macho de 3 años y de una hembra de 5 años de edad.
El análisis histopatológico reveló en hígado numerosas áreas
multifocales de necrosis coagulativa distribuidas al azar, con
focos de calcificación distrófica, pequeños infiltrados de células mononucleares en los espacios portales y presencia de
megalocitos. Se observó neumonía intersticial aguda y pleuritis, ambas con predominio mononuclear. El intestino delgado
presentaba hiperemia activa en submucosa, engrosamiento
de la mucosa por la presencia de infiltrado inflamatorio mononuclear y necrosis de las vellosidades. El bazo mostraba áreas
multifocales de necrosis coagulativa distribuidas en todo el
órgano en forma masiva y grave, con depósitos de sales de
calcio, presencia de células inflamatorias mononucleares y
atrofia de pulpa blanca. Se evidenció además necrosis de los
túbulos renales en forma masiva, difusa, con abundantes
detritus celulares y depósitos de calcio, junto con zonas de
hiperemia. En todos los órganos analizados se apreció una
moderada a gran cantidad de macrófagos con hemosiderina,
dispuestos en forma aislada (intestino, riñón) o en agregados
de tamaño variable, que solían coincidir con las áreas de
necrosis (hígado, bazo). Las lesiones observadas sugieren
la presencia de un cuadro septicémico-toxémico, siendo el
Cólera aviar, causado por Pasteurella multocida la hipótesis
más probable, a partir de las lesiones halladas y la respuesta
favorable al tratamiento con tetraciclinas. Algunos posibles
diagnósticos diferenciales incluyen la enfermedad de Pacheco
(Herpesviridae) con presencia de cuerpos de inclusión intranucleares en hepatocitos, y otras bacterias como Escherichia
coli o Salmonella spp. La hemosiderosis, particularmente en
hígado y bazo, frecuentemente se asocia con la presencia
concurrente de anemia hemolítica, septicemia, neoplasia o
emaciación. En este caso, sin embargo, es posible que se
trate de Hemocromatosis, una condición genética asociada
a un desorden en el metabolismo del hierro ingerido con la
dieta, y que está bien documentada en algunas especies de
aves, particularmente en el orden de los ranfásidos. En esta
condición, los depósitos de hierro son abundantes y evidentes
no sólo en hígado o bazo, sino en otros tejidos, como intestino, riñón o corazón. Numerosos investigadores coinciden en
afirmar que la hemocromatosis no sería causa determinante
de enfermedad, aunque sí estaría asociada habitualmente
con la presencia de enfermedades infecciosas concurrentes
o neoplasias. Existe abundante evidencia de que la disponibilidad de hierro es un factor determinante en la interacción
patógeno-hospedador; en estos casos en los que la transferrina sérica estaría saturada, la disponibilidad de hierro para los
microorganismos sería mayor. Sin embargo, es necesaria la
realización de un mayor número de estudios in vivo, y particularmente en especies susceptibles, de manera tal de aclarar
la relativa importancia de esta condición genética como predisponente al desencadenamiento de enfermedad hepática
por almacenamiento de hierro o bien de otras enfermedades
concurrentes.
142
IV. 01.
Caracterización biologica de la citotoxina de distensión celular producidas por cepas
indígenas de Campylobacter fetus venerealis.
Catena M1, Chiapparrone M1,2, Teruel M1, Morán P1, Soto P1.
1. Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA,
Campus Universitario (B7000GHG), Tandil, Bs.As.
2. CONICET.
E–mail: [email protected]
Biological characterization of cytolethal distending toxin
produced by Campylobacter fetus venerealis.
Los mecanismos relacionados con la patogenia de las exotoxinas de Campylobacter fetus venerealis (Cfv) sobre las
células del aparato reproductor y el embrión bovino son aún
poco conocidos. Para estudiar el efecto de la CYTOLETHAL
DISTENDING TOXIN (CLDT), sobre las células blanco y el
desarrollo embrionario se realizaron ensayos en líneas celulares preestablecidas, cultivos primarios y embriones murinos inoculados con el filtrado libre de células (FLC). Para
obtener los FLC se cultivaron doce cepas indígenas de Cfv
en caldo Brucella a 37 oC en microaerofilia. El sobrenadante
poscentrifugación se trató con gentamicina. Los cultivos celulares primarios se realizaron a partir de biopsias de útero y
vagina de vaquillonas. Las líneas celulares utilizadas fueron
CHO y HeLa y los cultivos de embriones murinos se obtuvieron a partir de ratones hembras híbridos superovuladas y
machos BALB/c. Las mórulas fueron recolectadas por lavado
de oviductos y cuernos uterinos y divididas en tres grupos: experimental (GFLC; n: 119), control (GC; n: 97) y control caldo
(GB; n: 94). Los blastocistos obtenidos mediante lavado de
cuernos uterinos se agruparon en: adicionado con FLC (G2;
n: 35), control (G1: n: 24) y control caldo (G3: 25). El cultivo
in vitro se realizó en placas conteniendo MEM y SFB. Los
ensayos con animales se realizaron de acuerdo al Acta de
Bienestar Animal (Resolución 087/02. FCV–UNCPBA). Las
monocapas semiconfluentes de los cultivos primarios y las
líneas celulares fueron desafiadas con los FLC (relación de
1/10, volumen FLC/volumen medio de cultivo). Las placas se
incubaron a 37 ºC en una atmósfera humidificada con 5% de
CO2 durante tres días para los cultivos primarios y 5 días
para las líneas celulares. Se utilizó como control positivo FLC
de una cepa de Escherichia coli productora de CLDT y como
control negativo caldo Brucella estéril. Todos los ensayos se
realizaron por duplicado. Los cultivos fueron observados diariamente pre y posdesafío con microscopio óptico invertido
para evaluar su evolución. Luego de la incubación se colorearon las monocapas con solución de May-Grünwald-Giemsa.
El análisis de los cultivos celulares se realizó mediante microscopía y posterior aplicación del programa (Image Pro).
Fueron medidos los diámetros transversal y longitudinal de
25 células normales e igual número de células tratadas con
los FLC. Se calculó el coeficiente de distensión celular (F),
tomándose como límite inferior F< 1,3 para considerar a una
célula no distendida y CLDT positivos (+) aquellos cultivos
cuyos FLC produjeron una marcada y evidente distensión celular (F > 1,3). Los cultivos de mórulas y blastocistos fueron
desafiados con los FLC en relación 1/10 e incubados a 37 ºC.
En cada placa se usaron controles negativos de embriones
sin inocular y con caldo Brucella estéril. Los cultivos fueron
evaluados en fresco cada 24 horas para verificar la progresión
del desarrollo y la morfología. En los cultivos de mórulas se
determinaron los porcentajes de diferenciación a las 24 y 48
horas. Para evaluar el porcentaje de hatching, los embriones
fueron controlados a las 48 y 72 horas. En los blastocistos
se evaluaron los porcentajes de hatching, hatched, adhesión
y expansión celular a las 24, 48, 72 y 96 horas. Los resultados fueron analizados mediante Chi². Se observaron cambios morfológicos progresivos en las monocapas celulares.
La elongación celular fue similar para los FLC analizados con
respecto al control positivo a las 24 horas de incubación. A
las 96 horas el porcentaje de elongación fue similar para todos los FLC con un porcentaje de citoletalidad del 85% y del
10% para el control negativo. El curso de las lesiones de citotoxicidad fue comparable entre CHO y HeLa. En los cultivos
primarios (células blanco) se observaron progresivamente
vacuolización citoplasmática, redondeamiento celular, condensación nuclear y desprendimiento de la monocapa a las
72 horas posinoculación para la totalidad de FLC analizados.
En el ensayo de embriones, la diferenciación resultó menor
a las 24 horas para los grupos GA y GB respecto al control
(p<0,05). A las 48 horas sólo el grupo GF fue menor al control (p<0,05). El porcentaje de hatching a las 48 horas fue
superior en GF respecto al control (p>0,05), el GB no mostró
diferencias con el control tanto a las 48 como a las 72 horas
(p>0,05). En el ensayo de blastocistos no hubo diferencias
entre grupos para ninguno de los parámetros ni FLC evaluados. Se concluye que los FLC de las cepas de Cfv analizadas
causan distensión y letalidad celular en CHO, HeLa y en las
células blanco. Los cultivos celulares utilizados para caracterizar otras especies de Campylobacter permitieron analizar
las cepas en estudio. El efecto citotóxico se presenta antes en
los cultivos primarios que en las líneas celulares. En el modelo embrión, el FLC no afectó el desarrollo temprano, aunque
los porcentajes de diferenciación y hatching en el grupo desafiado mostraron diferencias respecto al control.
143
IV. 02.
Evaluación de la adhesión de Campylobacter fetus venerealis a células mdbk por
microscopía electrónica de barrido.
Chiapparrone M1,2, Soto P1, Morán P1, Catena M1.
1. Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA,
Campus Universitario (B7000GHG), Tandil, Bs.As.
2. CONICET.
E-mail: [email protected]
Evaluation of Campylobacter fetus venerealis adhesion
to mdbk cell culture by scanning electronic microscopy.
Campylobacter fetus venerealis (Cfv) se adhiere a las células endometriales y vaginales bovinas para comenzar
a desarrollar su patogenicidad. Actualmente se desconocen
la totalidad de las estructuras bacterianas involucradas en el
proceso de adhesión, como así también las particularidades
del mismo. Varios trabajos demuestran que el lipopolisacárido, el flagelo y sus epítopes participarían en este proceso.
Una de las causas del desconocimiento de esta temática, es
la inexistencia de un modelo experimental adecuado que permita el estudio de las enfermedades reproductivas del bovino,
entre ellas la campylobacteriosis genital, causada por este
agente. Se han estudiados diferentes estructuras, proteínas
y/o genes que codifican para la de adhesión en otras especies de Campylobacter sobre líneas celulares HeLa, Hep-2,
CHO, VERO e INT 407. Para Cfv nuestro grupo de trabajo
ha desarrollado modelos de estudio en cultivos celulares primarios de células uterinas y vaginales bovinas y líneas celulares HeLa, HEp-2, CHO y VERO. Con el objetivo de evaluar
la adhesión de Cfv a una línea celular de origen bovino empleando a la microscopía electrónica de barrido como herramienta, se desarrollaron cultivos de células MDBK que fueron
desafiadas con Cfv y procesadas para tal fin. Las monocapas
celulares semiconfluentes fueron desafiadas con Cfv a una
DO600 de 0,5 en una relación de 1/10 (vol inóculo/vol medio
de cultivo) e incubadas a 37 ºC en estufa con 5% CO2 y en
atmósfera húmeda. Como control se utilizaron monocapas sin
inocular. Todos los ensayos fueron realizados por triplicado.
Las placas se incubaron tres horas pos inoculación y posteriormente se realizaron lavados para eliminar las bacterias
no adheridas al cultivo celular. Las monocapas celulares se
fijaron y colorearon con Giemsa. Por otro lado, se fijaron con
una solución de glutaraldehído con lavados posteriores. Luego fueron sometidas a un proceso de deshidratación de alcoholes con pasaje por soluciones mezclas de etanol y agua
en una serie creciente. Para su secado fueron expuestas en
hexametildisilazane y montadas en tacos de aluminio para su
metalizado con oro y paladio. La lectura se realizó con el
microscopio electrónico de barrido perteneciente al laboratorio de Microscopía Electrónica de la Facultad de Ciencias Exactas de la Universidad Nacional de Mar del Plata.
El registro microscópico y fotográfico permitió observar Cfv
adheridos a células MDBK con elevada precisión y claridad.
Asimismo, se pudieron distinguir las estructuras bacterianas
intactas a pesar del procesamiento de la muestra, lo que indicaría que el tratamiento químico no induciría alteraciones
bacterianas ni celulares que conduzcan a una lectura errónea
de las muestras en análisis. Con esta técnica se confirma la
capacidad de adhesión de Cfv a células MDBK (cuantificada
por coloración de rutina), observando una o más bacterias
adheridas por célula y que la mayoría de las bacterias toman
contacto con la célula por su extremo apical. La puesta a
punto de la microscopía electrónica de barrido para este u
otros modelos similares a utilizar, constituye una herramienta
muy valiosa para el inicio del estudio de la adhesión de Cfv
a líneas celulares. También será de utilidad para una futura
identificación de las estructuras bacterianas involucradas y
aspectos intrínsecos del proceso de adhesión, de relevante
importancia en el conocimiento de la patogenia de la
enfermedad.
144
IV. 03.
Clonado de cepas de Tritrichomonas foetus a partir de cepas de campo.
Doumecq ML, Soto P, Echevarría H, Monteavaro C.
Laboratorio de Microbiología Clínica y Experimental, Dpto SAMP, FCV-UNCPBA. Tandil.
E-mail: [email protected]
Cloned of strains of Tritrichomonas foetus from field strains
isolates.
Tritrichomonas foetus fue cultivada por primera vez en 1933
por Witte, usando una solución de caldo peptonado con 5 a
10 % de sangre desfibrinada, desde allí ha sido cultivada y
evaluada en diferentes medios de cultivo. Entre los más empleados podemos citar al medio Plastidge modificado por
Fitzgerald en el año 1954 que contiene una pequeña cantidad de agar, el medio de Diamond también denominado TYM
(Trypticasa- extracto de levadura- maltosa) sin agar, medio
de leche descremada, medio Sutherland (caldo de inclusión
de hígado). La mayoría de los medios poseen una fuente de
aminoácidos de alto valor biológico, un glucósido, sustancias
reductoras, una fuente lipoproteica (suero de bovino o equino)
y una adecuada mezcla de antibióticos los más utilizados son
penicilina, estreptomicina y un antimicótico nistatina. Cuando
se comienza con los estudios de patogenicidad es importante
tener una población uniforme de protozoarios. Se conoce que
no hay recombinación genética en la reproducción, ya que
es a través de fisión binaria. Las primeras descripciones de
Asami en 1955, describe un método de crecimiento de
T. vaginalis en placas de Petri. Luego en 1958, Filadora y Orsi
describen un método de crecimiento en la superficie del medio
o por técnica de derrame en profundidad. Sin embargo, Ivey
en 1961 describe por primera vez una técnica favorable para
obtener colonias aisladas de T. vaginalis en medios sólidos,
que posteriormente pueden ser subcultivados. Excepto los
trabajos realizados por nuestro grupo no hemos encontrado
comunicación científica donde se describa esta metodología
para T. foetus. El objetivo del presente trabajo es describir una
técnica adecuada para la obtención de clones de T. foetus de
muestras clínicas, en un medio sólido. A partir de diferentes
cepas de campo se ensayaron dos técnicas denominadas
homogenizado en tubo y homogenizado en placa. Para cada
una de ellas se evaluaron diferentes concentraciones de agar
utilizando como base el medio TYM. Además se evaluaron el
tiempo y las condiciones de incubación más apropiadas. Las
concentraciones de agar ensayadas fueron 0,45; 0,5; 0,55 y
0,6 %. En este ensayo se agregaron eritrocitos bovinos lavados dos veces con PBS pH 7,2 estéril durante 10’ a 3000
rpm. Los inóculos utilizados de T. foetus fueron subcultivados
en caldo TYM por 24 a 48 h a 37 ºC en aerobiosis. Luego se
realizaron 2 lavados mediante centrifugados a 3000 rpm y se
resuspendieron con PBS pH 7,2 estéril. Por último se llevó a
una concentración de 3 x 103 Tf/ ml. Las dos metodologías
utilizadas fueron las siguientes: a) Prueba de homogenizado
en tubo: a partir de los erlenmeyer con las distintas concentraciones de agar mantenidos en baño María a 50ºC se agregó
el suero templado al 10 % y los antibióticos. Luego se homogenizó y se fraccionó en tubos de hemólisis tapa a rosca con
5 ml cada uno. Se rotularon los tubos según la concentración
de agar y se dejaron en el baño María a 50ºC. Se tomó cada
uno de los tubos, se le agregó 0,1 ml del inóculo y 0,1 ml de
eritrocitos bovinos lavados. Se homogenizó suavemente y se
colocó en la placa de Petri de 6 cm de diámetro. b) Prueba
de homogenizado en placa: a partir de los erlenmeyer con las
distintas concentraciones de agar mantenidos en baño María
a 50ºC se agregó el suero templado al 10%, glóbulos rojos al
2 % y los antibióticos. En cada placa de Petri de 6 cm de diámetro, se agregó 0,1 ml del inóculo y luego se adicionó 5 ml
del medio templado. Se homogenizó suavemente mediante
movimientos circulares. Luego de ambos procedimientos las
placas se dejaron solidificar sobre una bandeja refrigerada.
Se colocaron en jarra de anaerobiosis con sobres (Anaerogen
TM AN 35 OXOID) a 37 ºC por 4, 5 y 6 días, realizando las
observaciones y registrando los resultados. Los resultados
obtenidos demuestran que la técnica más adecuada fue la
prueba de homogenizado en placa, con una concentración de
agar 0,45 % y un tiempo de incubación de 5 días, obteniendo
la formación de colonias aisladas con bordes bien delimitados,
redondas de 1 a 2 mm de diámetro y con una leve depresión.
Las colonias fueron transferidas a un medio semisólido TYM,
y posteriormente subcultivadas en caldo TYM para su criopreservación en nitrógeno líquido para posteriores ensayos
de patogenicidad. El número de colonias obtenidas fue satisfactorio con un promedio de 35 colonias, teniendo en cuenta
que el número de protozoarios sembrados fue de 60 T. foetus
por placa. Ésta técnica permite: 1) clonar las cepas obtenidas
a partir de primoaislamiento de muestras clínicas de esmegma
prepucial, mucus cérvicovaginal o contenido abomasal fetal,
2) obtener cultivos puros a partir de muestras que presentan una contaminación bacteriana y/o fúngica resistente a los
antibióticos y antimicóticos utilizados de rutina, 3) evaluar la
producción de hemólisis cuando se agregan glóbulos rojos
bovinos al medio.
145
IV. 04.
Influencia del método anestésico en la respuesta temprana pulmonar a herpesvirus
equino de tipo 1 en un modelo murino.
Eöry ML1,*, Galosi CM2,#, Sguazza GH2, Fuentealba N2,*, Gimeno EJ3,*, Barbeito CG4,*.
1. Departamento de Cs. Básicas, UNLu, Ruta Nac. 5 y Av. Constitución, Luján, Bs.As.
2. Cátedra de Virología.
3. Instituto de Patología. FCV, UNLP, Av. 60 y 118, La Plata, Bs. As.
#CIC Pcia Bs As.
*CONICET.
E-mail: [email protected]
Influence of the anesthesic method in the early pulmonar
response to equine herpesvirus type 1 in a murine model.
El herpesvirus equino tipo 1 (EHV-1) que pertenece a la familia Herpesviridae, subfamilia Alphaherpesvirinae, género
Varicellovirus es uno de los patógenos equinos más importantes en nuestro país y que produce importantes pérdidas
económicas. La principal puerta de entrada del virus es el
epitelio respiratorio desde donde se disemina a otros órganos
por medio de una viremia asociada a leucocitos, a partir de
la cual genera abortos o signos neurológicos. Como todos
los alfaherpesvirus, genera infecciones latentes en ganglios
sensoriales desde donde puede reactivarse durante sucesos
de inmunodepresión. Como modelo animal de la enfermedad
se ha utilizado la inoculación intranasal de ratones de la cepa
BALB/c anestesiados. Inicialmente se utilizó éter como anestésico, que actualmente fue reemplazado por isofluorano. Los
distintos trabajos que describen la respuesta pulmonar temprana a EHV-1 fueron realizados con estos dos anestésicos.
En estos trabajos se encontraron incongruencias respecto de
las lesiones encontradas en las vías respiratorias, en particular
en relación a la llegada de neutrófilos, monocitos y linfocitos y
la magnitud de la respuesta inflamatoria. Conocer en detalle
cómo se desarrolla esta respuesta es fundamental en el estudio de la patogenia de la enfermedad. Este trabajo tiene como
objetivos evaluar la respuesta temprana en los pulmones de
animales infectados experimentalmente con EHV-1, según la
hipótesis de que esta respuesta a la infección por EHV-1 se
vería influenciada por el método anestésico utilizado. Esta hipótesis fue contrastada con un experimento factorial en el que
se evaluaron los cambios histológicos en ratones infectados
respecto de ratones controles bajo el efecto de dos anestésicos diferentes: éter y ketamina/xilacina (n=3). El manejo de
los animales se realizó de acuerdo a las normas internacionales y fue aprobado por el comité de ética de la FCV-UNLP
(CICUAL). Los animales fueron sacrificados a las 48 horas
post inoculación y los pulmones se procesaron para estudios
histológicos por tinción con Hematoxilina y Eosina (H-E) y
por Inmunohistoquímica (IHQ). La infección se confirmó por
reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y por titulación de
partículas virales infectivas. Durante el ensayo se evaluaron
cambios en el peso corporal de todos los anima-les, así como
la aparición de signos clínicos. Los grupos experimentales
mostraron diferencias significativas (DS) en la tasa de pérdida
de peso corporal durante el ensayo (ANOVA, p<0,001). Los
ratones anestesiados con éter e infectados (Grupo B) fueron
los que más peso perdieron (Tukey-Kramer-TK-, p<0,01). No
hubo DS en la tasa de pérdida de peso de los ratones controlanestesiados con éter (Grupo A) y en los ratones infectados
y anestesiados con ketamina/xilacina (Grupo D) (TK p>0,05).
Los ratones control-ketamina/xilacina (Grupo C) no mostraron
una tasa de pérdida de peso mayor a la que tenían durante la
aclimatación (test de t p>0,05) y fueron los que menor pérdida
presentaron (TK p<0,01). En correspondencia a la pérdida de
peso, los animales del grupo B presentaron signos clínicos
(disnea, taquipnea, pelo hirsuto, postura encorvada, agrupamiento entre congéneres y decaimiento) más intensos que el
resto y a las pocas horas de la inoculación. En el grupo D, estos
signos se presentaron en toda su intensidad recién a las 48
horas. Los animales del grupo A solo presentaron dificultades
respiratorias leves y los del grupo C no registraron signo clínico
alguno. La histopatología mostró, en los ratones del grupo A,
erosión de los epitelios, presencia de cuerpos apoptóticos,
engrosamiento de las paredes interalveolares y una notoria
reacción inflamatoria en la zona de la lámina propia de bronquios y bronquiolos. Los pulmones del grupo B poseían un
gran número de neutrófilos, monocitos y restos celulares en
la luz de las vías respiratorias, que también mostraron una
gran respuesta inflamatoria en la lámina propia. Además,
en los epitelios se encontraron lesiones características de la
infección viral: formación de sincítios, cuerpos de inclusión
intranucleares y células desprendidas de la lámina basal. A
diferencia del grupo B, en el grupo D se encontraron lesiones típicas de la infección, pero la reacción inflamatoria fue
mucho menor y en ningún caso hubo presencia de fagocitos
en la luz de los conductos aéreos. Esto puede ser explicado
por la capacidad de la glicoproteína G del EHV-1 para interferir la función de atracción de células del sistema inmune por
las quemoquinas. Los animales del grupo C no evidenciaron
lesiones pulmonares. La IHQ demostró que las células con
morfología típica de infección se corresponden con aquellas
que muestran antígenos propios de EHV-1. Estos resultados
nos permiten concluir que la anestesia con éter genera cambios independientes de la infección y que en combinación con
el virus provoca lesiones de mayor intensidad que los provocados por la infección o el anestésico por separado.
146
IV. 05.
Equine adipose tissue-derived progenitor⁄stem cells and their potential for the treatment
of endometrosis.
Mambelli LI1,3, Mattos RC2, Malschitzky E2, Miglino MA3, Kerkis I1.
1. Laboratory of Genetics – Butantan Institute, Sao Paulo, SP, Brazi.
2. Department of Animal Medicine – FAVET – UFRGS, Porto Alegre, RS, Brazil.
3. Department of Surgery – School of Veterinary Medicine and Animal Science - USP, Sao Paulo, SP, Brazil.
E-mail: [email protected]
E-mail: [email protected]
Endometrosis is a progressive and irreversible disease which
is defined as active or inactive periglandular and stromal
endometrial fibrosis, including glandular alterations within
fibrotic foci. Modifications induced by the disease alter the
surface of endometrium which, in consequence, led to infertility
(impaired embryo implantation). Conventional treatments do
not reduce the fibrotic process or even help to restore fertility.
Stem Cell (SC) therapy in horses is a promising tool for
tissue reconstruction, which also provides additional benefits,
such as anti-inflammatory and immunosuppressive activity.
To the best of our knowledge, there is no information about
the use of progenitor⁄stem cells derived from equine adipose
tissue, for the treatment of endometrosis. In order to reduce
the inflammatory process and to remodel periglandular fibrotic
tissues affected by disease, equine heterologous adipose
tissue-derived progenitor⁄stem cells, previously obtained and
characterized by our group, were used. Six estrus synchronized
mares with suspected endometrosis (four for treatment and two
for control) and three normal mares, also syncronized were used.
The diagnosis had been established by histomorphological
and immunohistochemical analyses, performed using formalinfixed, paraffin-embedded uterine biopsies. The sections were
stained with Hematoxilin⁄Eosin and Alcian Blue, as well as
anti-CD 10, anti-Cytokeratin (CK) 22, estrogen receptor,
progesterone receptor and anti-α-actinin antibodies. Equine
undifferentiated progenitor⁄stem cells were stained using a
vital dye Vybrant CFDA-SE Cell Tracer Kit®. These cells were
infused into the uterus of the four treatment mares. Each one
of these animals received 2.5x107 progenitor⁄stem cells. The
two control mares were infused with a placebo. After 7, 15, 25 and
35 days, new uterine biopsies were obtained and remodeling of
uterine tissues by progenitor⁄stem cells was analyzed following
protocol above. Histological changes were observed in the
uterine biopsies of the 4 treatment mares before treatment,
which confirmed the presence of fibrotic periglandular tissue
in affected animals. Analysis performed 7 days after treatment
confirmed the presence of injected cells in the uterine tissues,
by red fluorescent signal provided by vital dye, while control
animals did not show fluorescence. No signals of immunologic
reaction in response of cells application were registered, once
it was not observed the presence of T-cells infiltrating in the
site of cell graft. The presence of equine progenitor⁄stem cells
within uterine tissues was confirmed. Further investigations
are needed in order to prove the remodeling of uterine tissue
thought progentitor⁄stem cells differentiation.
The present work was supported by CAPES and FAPESP.
147
IV. 06.
Equid herpesvirus type 1 (EHV-1) show neurotropism and neurovirulence in a mouse
model.
Mori CMC1, Mori E1, Favaro LL1, Santos CR1, Lara MCCSH2, Villalobos EMC2,
Cunha EMS2, Brandão PE1, Richtzenhain LJ1, Maiorka PC1.
1. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, Brasil.
2. Instituto Biológico, São Paulo, Brasil.
E-mail: [email protected]
Equine herpesvirus-1 (EHV-1) is a major pathogen which has
long been implicated in the occurrence of abortion, neonatal
death, respiratory disease and neurological disorders in horses.
Encephalomyelitis is much less common than other forms
of EHV-1 infection; however, outbreaks can cause
devastating losses to the equine industry. The availability of
several mice strains which are susceptible to EHV-1 infection,
and the similarities between the immune responses of the
mouse and the horse, make these attractive models
for investigating the pathogenesis and immune mechanisms
responsible for virus clearance. The aim of this work was to
characterize the pathogenicity of three abortigenic EHV-1
strains in different inbred mice models. EHV-1 strains A4/72,
A9/92 and A3/97 were isolated from aborted fetuses in Brazil
and viral identification was made by PCR amplification and
DNA sequencing. In addition, A4/72 and A3/97 were
characterized as non-neuropathogenic genotype (N752)
of EHV-1 DNA polymerase enzyme gene (ORF 30). Viral
suspensions were prepared in Eagle’s minimal essential
medium (EMEM) to provide 25ml inocula containing 103
TCID50 of each virus. Eight-week-old female BALB/c (H2d),
BALB/c nude (H2d), C57BL/6 (H2b) and C3H/HeJ (H2k) mice
were inoculated intranasally with 25ml of the viral suspension
under anesthesia. For each virus tested, mice were randomly
divided into groups of three or four animals each with three
additional mice for controls. Control mice were similarly treated
with EMEM. The facilities and environment conditions
followed the international recommendations and all
experimental animal procedures were carried out with the
approval of the ethical committee of the Instituto Biológico
(70/08 CETEA-IB). Mice were euthanized by an overdose of
sodium pentobarbitone. Virus isolation was attempted with
tissue samples from brain, lungs, thymus, liver and spleen
inoculated on E-derm cell monolayer. For histopathological
and immunohistochemical analyses the animals were perfused
through the heart with 0.9% NaCl solution followed by 10%
buffered formalin as fixative. Tissue samples from visceral
organs and brain were embedded in paraffin wax, sectioned at
5 µm, and stained with haematoxylin and eosin or placed on
slides covered with 2% silane. Immunohistochemistry (IHC)
was carried out with polyclonal hyperimmune goat serum
raised against EHV-1. Intranasal inoculation of EHV-1 A4/72
and A9/92 induced severe disease in BALB/c, BALB/c nude,
C57BL/6 and C3H/HeJ mice. The symptoms that appeared
between the 2nd and 3rd dpi included weight loss, ruffled fur,
hunched posture, crouching in corners, nasal and ocular
discharges, dyspnea, dehydration and salivation at the onset
of disease followed by sensitive reaction to external stimulation,
seizures, recumbency and death. In addition, C57BL/6 and
C3H/HeJ mice exhibit spastic paralysis of the hind limbs and
tail. Virus was consistently recovered from brain and visceral
organs of all mice with neurological symptoms. On gross
examination, mice infected with A4/72 and A9/92 showed
congestion and hemorrhage in the brain and meninges, mildly
enlarged superficial cervical and mesenteric lymph nodes and
spleen, pulmonary edema, and thymic atrophy. Histopathological
changes consisted of leptomeningitis, focal hemorrhage,
ventriculitis, neuronal degeneration and necrosis, neuronophagia,
non-suppurative inflammation, and multi-focal gliosis, mainly
in cortical area and hippocampus. In addition, perivascular
infiltration of polymorphonuclear and mononuclear cells was
observed in the brains of infected mice. BALB/c, C57BL/6 and
C3H/HeJ mice inoculated with A3/97 showed neither weight
loss nor apparent clinical sings of the disease; however,
virus was consistently recovered from the lungs at 3 dpi, but
not from the brain or other organs. Since the immunodeficient
strain BALB/c nude showed mild conjunctivitis and virus was
recovered from lungs, brain and spleen of some mice
between 4th and 7th dpi. Neither gross abnormalities nor
histopathological changes were observed in the brain or other
organs, including liver, spleen and thymus of mice inoculated
with A3/97. Thickening of alveolar walls and infiltration of the
interstitium with lymphocytes, neutrophils, and macrophages
was observed in the lungs of all mice inoculated with EHV-1
Brazilian strains. A4/72, A9/92 and A3/97 antigens were
detected by immunohistochemical staining in brain tissue of
BALB/c, BALB/c nude, C57BL/6 and C3H/HeJ infected mice.
The three EHV-1 strains showed distinct virulence and tissue
tropism in mice. While A4/72 and A9/92 exhibit high tropism
to the CNS with neuroinvasiveness and neurovirulence, the
strain A3/97 was not neurovirulent despite to be detected
in the brains of infected mice. Further studies concerning
neuroinvasiveness and neurovirulence factors are required
to clarify the relation between molecular variations and high
virulence in the mouse model, which may help to understand
equine herpesvirus myeloencephalopathy in horses.
Financial support: FAPESP (Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo).
148
CHEQUEAR REFERENCIAS
IV. 07.
Patogenicidad de cepas argentinas y brasileñas de herpesvirus equino 1 en modelo de
ratones isogénicos.
Mori E1, Mori CMC1, Marconi ECM1, Lara MCCSH2, Cunha EMS2, Villalobos EMC2, Maiorka, PC1, Brandão PE1, Richtzenhain
LJ1, Eöry ML3,*, Fuentealba NA4,*, Zanuzzi CN3,*, Vissani A5, Barrandeguy M5, Gimeno EJ6,*, Barbeito CG3,6,*, Galosi CM4,#.
1. USP, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, São Paulo-SP, Brasil.
2. Instituto Biológico, São Paulo-SP, Brasil. Cátedras de 3 Histología, 4 Virología y 6 Patología,
Facultad de Cs. Veterinarias UNLP, 60 y 118, 1900 La Plata.
5. CICV-INTA Castelar.
* CONICET.
#CIC Pcia de Bs As.
E-mail: [email protected]
Patogenicity of argentine and brazilian equine
herpesvirus-1 strains in isogenic mouse model.
El herpesvirus equino 1 (EHV-1) produce sintomatología respiratoria y nerviosa, abortos y síndrome neonatal en equinos.
Existen diferencias en la virulencia y en el tropismo por el endotelio vascular de las cepas y estudios actuales han podido
relacionar que la presencia de ácido aspártico (D752) en lugar
de asparagina (N752) en la DNA polimerasa, está fuertemente
asociada con los brotes de enfermedad neurológica. Debido
a que los trabajos experimentales con equinos son laboriosos
y costosos, se ha desarrollado el modelo experimental ratón
para evaluar diferentes aspectos de la infección y las características de las cepas virales. En este trabajo se evalúa la
patogenicidad de tres aislamientos argentinos (AR N1, N2 y
N4) caracterizadas como mutantes neuropatogénicas (D752)
y dos aislamientos brasileños (A4/72 y A3/97) caracterizadas
como no-neuropatogénicas (N752) en la región del genoma
correspondiente al ORF30, en hembras de tres cepas de ratones: BALB/c (H2d), C57BL/6 (H2b) e C3H/HeJ (H2k). Los
animales, que fueron tratados de acuerdo a las normativas
internacionales, se inocularon con 25 µl de cada una de las
cepas por vía intranasal (entre 102.5 y 104 DICC/25µl) luego
de ser anestesiados con una mezcla de ketamina (100mg/kg)
y xilazina (20mg/kg). Los controles recibieron 25µl de medio
de cultivo. Todos los ratones fueron pesados individualmente,
examinados diariamente para observar la aparición de signos
clínicos y eutanasiados por sobredosis de anestésico entre
el 3er y 6to día posinfección (pi). Se tomaron muestras de
cerebro, hígado, pulmón, bazo, timo y útero que fueron conservados convenientemente y utilizados para aislamiento viral (AV) y para estudios histopatológicos e inmunohistoquímicos (IHQ). Las mismas muestras se usaron para la detección
de ADN por PCR con cebadores específicos para el gen que
codifica a la glicoproteína H y para cuantificación de la carga
viral por PCR en tiempo real con cebadores y sonda TaqMan
MGB específicos para el gen que codifica a la glicoproteína
B. Las tres cepas de ratones inoculadas con los virus argentinos y la cepa brasileña A3/97 no manifestaron signos clínicos
respiratorios o neurológicos ni pérdida de peso. Todos los
ratones inoculados con la cepa brasileña A4/72 de alta virulencia enfermaron y murieron con signos neurológicos al 3er
y 4to día pi. No se observaron mayores lesiones histológicas
atribuibles a EHV-1 ni detección positiva por IHQ. El AV de las
muestras de pulmón del día 3 pi fueron positivas. La técnica
de PCR resultó positiva en las muestras de cerebro, hígado,
pulmón y bazo en los días 3, 4 y 6 pi. En los pulmones de
los ratones inoculados con las cepas argentinas y la brasileña A3/97 se determinó una alta carga de ADN viral (207,5 a
6.483,3 copias/mg) mientras que en el cerebro se detectaron
cargas virales más bajas (0,8 a 84,7 copias/mg). El AV de
las muestras de cerebro, hígado, pulmón, bazo y timo del día
3 pi fue positivo. Las cepas argentinas mutantes neuropatogénicas no produjeron signos nerviosos reafirmando que los
mismos no son una consecuencia directa de la acción del virus sobre las células nerviosas. La dosis infecciosa utilizada
fue suficiente para causar signos clínicos porque los mismos
fueron observados en los ratones inoculados con el aislamiento brasileño A4/72. Estos resultados sugieren que todas
las cepas argentinas analizadas y la cepa brasileña A3/97 poseen baja patogenicidad en las cepas de ratones utilizadas. A
pesar de que cepas de EHV-1 son mutantes neuropatogénicas en el equino, la mutación D752 no es determinante para
causar neuropatogenicidad en el modelo ratón.
Trabajo financiado por: FAPESP Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo, CNPq Conselho Nacional de Desenvolvimento
Científico e Tecnológico, Comisión de Investigaciones Científicas de La Pcia de Bs As y Secretaría de Ciencia y Técnica de la UNLP.
149
IV. 08.
Efectos de la leche de búfala con mayor concentración de ácido linoleico conjugado y de
ácido graso omega-3 sobre el desarrollo del cáncer experimental del colon en ratas.
Ramírez GV1, Montenegro MA1, Catuogno MS1, Patiño EM2, Sánchez Negrette M1.
1. Cátedra de Patología General y Sistemática. Facultad de Ciencias Veterinarias. UNNE.
Sargento Cabral 2139. Corrientes.
2. Cátedra de Tecnología de los Alimentos. Facultad de Ciencias Veterinarias- UNNE.
Sargento Cabral 2139. Corrientes.
E mail: [email protected]
Effects of buffalo milk with higher concentrations of
conjugated linoleic acid and omega-3 fatty acid on
experimental development of colon cancer in rats.
Investigaciones epidemiológicas en seres humanos relacionan al cáncer intestinal, principalmente al cáncer colorrectal, con la ingestión de alimentos ricos en grasa de origen
animal y escaso consumo de fibra. Estudios epidemiológicos
en diferentes poblaciones y experimentales en animales de
laboratorio, mantienen la hipótesis de que la cantidad y tipo
de grasa de la dieta, así como la composición de los ácidos
grasos, son algunos de los factores determinantes en la carcinogénesis del colon. La incidencia de tumores de colon es
reducida en animales alimentados con una dieta alta en ácido graso Omega-3, debido a que inhibe el desarrollo de las
fases de iniciación y de promoción de tumores inducidos experimentalmente. La leche de búfala es rica en Omega-3 y en
Ácido Linoleico Conjugado (ALC), cuyo isómero cis-9, trans-11
repre-senta el 80 a 90% del total de ALC en la grasa de la
leche y al cual se le atribuye propiedades anticancerígenas.
Estudios experimentales en ratas han demostrado reducción
del número de papilomas en un modelo de carcinogénesis
epidérmica en ratón y disminución de tumores gástricos en
ratas, inducidos experimentalmente. Además, en ratas alimentadas con ALC se observó una disminución del número
de tumores de mamas inducidos experimentalmente con dimetilbenzantraceno. El interés por manipular las dietas de los
rumiantes mediante una suplementación estratégica a fin de
obtener una leche con altas concentraciones de ciertos componentes benéficos para la salud humana, ha cobrado importancia en los últimos años, realizándose numerosas investigaciones. En este sentido, nuestro grupo de investigación
se ha propuesto como objetivo investigar las propiedades
anticancerígenas de la leche de búfala con mayor concentración de Omega-3 y ALC, obtenidos mediante una suplementación estratégica con aceite de pescado. Se utilizó leche
de búfalas alimentadas con pasturas naturales y con pasturas naturales más la suplementación con aceite de pescado,
determinándose en cada caso los valores de ácidos grasos
Omega-3, Omega-6 y ALC mediante cromatografía de fase
gaseosa. La leche prove-niente de los dos lotes fue administrada durante 125 días a ratas, a fin de evaluar sus efectos sobre el desarrollo del cáncer experimental del colon, inducido
con 1,2-Dimethilhidrazina mediante inyecciones subcutáneas
en dosis de 20 mg/kg de peso, en forma semanal, durante
5 semanas. Para este fin fueron utilizadas 45 ratas Wistar
machos de aproximadamente 6 semanas de edad y 160 g de
peso, divididas en tres grupos experimentales de 15 animales
cada uno: Lote 1, alimentadas con alimento balanceado y agua
ad libitum; el Lote 2, alimentadas con alimento balanceado y
leche de búfala a base de pasturas naturales sin ningún tipo
de suplementación y el Lote 3, alimentadas con alimento balanceado y leche de búfala con suplementación de aceite de
pescado. Al final de la experiencia todas las ratas fueron sacrificadas, realizándose el análisis macroscópico del intestino
grueso a fin de determinar la presencia de tumores, su localización en las diferentes porciones anatómicas y el tamaño
de los mismos. Se aplicó Estadística descriptiva, no paramétrica. Los resultados obtenidos demostraron disminución de
más del 50% del número de tumores en las ratas del Lote 2, al
compararlas con el Lote 1 (09 vs 21). Por otra parte, las ratas
que recibieron leche con mayor concentración de Omega-3
y ALC (Lote 3) también redujeron el número de tumores al
comparar con las del Lote 1 (13 vs 21). Con respecto a la
localización, el colon distal fue asiento del mayor número de
tumores en los tres lotes (Lote 1=11, Lote 2=7 y Lote 3=8);
el colon proximal en el Lote 1 y en el Lote 3 presentaron 3
tumores, el ciego presentó 6 tumores en el Lote 1 y el recto
fue asiento del menor número de tumores en los tres lotes. En
cuanto al tamaño de los tumores, en los tres lotes osciló en el
rango de 0 a 5 mm. Los resultados obtenidos permiten inferir
que la leche de búfala disminuye el desarrollo de tumores de
colon en un modelo de carcinogénesis experimental del
intestino grueso en ratas.
150
IV. 09.
Descrição de técnica imunohistoquímica para detecção de receptores de lh em endométrio
de égua.
Santarém LO1, Preussler PS2, Malschizky E3, Esmeraldino AT4, Mattos, RC5.
1. Aluna de pós graduação em Patologia Veterinária pela Universidade Luterana do Brasil- ULBRA campus Canoas- RS.
2. Aluna de Graduação em Medicina Veterinária pela universidade luterana do Brasil- UlBRA campus Canoas-RS.
3. Médico Veterinário, Dr., professor Medicina Veterinária pela Universidade Luterana do Brasil- ULBRA campus Canoas- RS.
4. Médica Veterinária Patologista pela Universidade Luterana do Brasil- ULBRA campus Canoas-RS.
5. Médico Veterinário, Dr., professor pela UFRGS pesquisador Cnpq.
E-mail: [email protected]
Immunohistochemistry method for lh receptor on equine
endometrium.
Para que haja sucesso da técnica imunohistoquímica, todos
os procedimentos realizados devem ser cuidadosamente
controlados, desde a colheita das amostras até a finalização
da coloração. Cada antígeno possui características diferentes
tornando difícil a padronização da técnica sendo o sucesso
dependente de vários ajustes até que se encontre a técnica
adequada.O objetivo do presente trabalho foi descrever um
método imunohistoquímico ajustado para a detecção de
receptores do hormônio luteinizante (LH) em amostras de
endométrio da espécie eqüina. A presença destes receptores
foi detectada no epitélio luminal e glandular. A técnica utilizada
foi a de peroxidase anti-peroxidase (PAP) e nove etapas
deste processo foram ajustadas, como diluição dos anticorpos,
temperatura e tempos de incubação até chegarmos a uma
coloração adequada, com sensibilidade e sem coloração de
fundo, para a detecção deste receptor hormonal. Foram
processadas 10 amostras de endométrio eqüino, coletadas
em matadouro e através de biópsias. As amostras foram fixadas
em formol tamponado a 4% e após processamento histológico
foram armazenadas em blocos de parafina. Foram utilizados
como controle positivo cortes de hipófise eqüina e como
controle negativo cortes de endométrio, onde os anticorpos
foram substituídos por uma solução tampão de PBS pH 7.
Foram realizados cortes com 3µm de espessura, e as lâminas
utilizadas foram pré-filmadas com Histogrip (Invitrogen®)
evitando-se assim o desprendimento dos cortes ao longo da
realização da técnica. As lâminas parafinadas, após passarem
por estufa (10 minutos a 60ºC), foram desparafinadas em xilol
e hidratadas em concentrações decrescentes de álcool
etílico. O processo de recuperação antigênica (Retrieval) foi
realizado colocando-se as lâminas lavadas em água
destilada dentro de uma cuba contendo solução tampão de
tris- EDTA pH 9 previamente aquecido, sendo a mesma
mergulhada em banho-maria. Testes demonstraram que 30
minutos na temperatura de 96ºC foram suficientes para que
ocorresse a recuperação antigênica. Após esta etapa as
lâminas foram lentamente resfriadas com água destilada até
atingirem a temperatura ambiente. O bloqueio da peroxidase
endógena foi realizado através da imersão das lâminas em
uma solução a 5% de peróxido de hidrogênio diluído em
álcool metílico por um período de 30 minutos. Após a
conclusão deste procedimento, foi realizado o bloqueio dos
antígenos inespecíficos usando a solução bloqueadora do kit
Histostain plus (Invitrogen®). Após 10 minutos a solução é
escorrida e é pingado sobre os cortes o anticorpo primário
(Invitrogen®), diluição 1:100, sendo posteriormente incubados
em uma estufa úmida e armazenados em geladeira
por 24 horas. As lâminas foram lavadas com solução tampão
de PBS pH 7 e aplicado sobre elas o anticorpo secundário,
sendo incubadas em estufa úmida por 30min. Após nova
lavagem em PBS, foi colocado o complexo enzimático avidinabiotina-peroxidase; as lâminas foram novamente incubadas
em estufa úmida por 30 minutos em temperatura ambiente. A
reação foi então revelada pelo corante DAB disponível no
kit Histostain plus (Invitrogen®). O processo seguiu pela
desidratação, clareamento e montagem das lâminas. Pôde-se
observar que os procedimentos realizados permitiram a
identificação através do método de imunoperoxidase dos
receptores de LH tanto no controle positivo quanto
nas amostras de endométrio. Dos procedimentos descritos
acima, os principais ajustes realizados foram em relação ao
tempo de incubação do anticorpo primário, e temperatura e
tempo de Retrieval, pois esses são pontos chaves para que a
reação antígeno-anticorpo se complete.
151
IV. 10.
Modelo experimental para evaluar el efecto inducido por vacunas contra Tritrichomonas
foetus.
Soto P, Echevarría H, Monteavaro C.
Laboratorio de Microbiología Clínica y Experimental. Dpto SAMP.
Facultad de Ciencias Veterinarias,UNCPBA, Campus Universitario (B7000GHG), Tandil, Bs.As.
E–mail: [email protected]
Experimental model for evaluating the effect induced by
vaccination against Tritrichomonas foetus.
La trichomonosis bovina es una enfermedad de transmisión
venérea originada por Tritrichomonas foetus (T. foetus). En
los países con ganadería extensiva y monta natural, el programa de control se basa en la revisación de los toros previo
al servicio y la eliminación de los infectados. La enfermedad
en la hembra produce alteraciones en el tracto reproductor
que se tornan severas a partir de los 50 a 60 días pos infección originando la pérdida del conceptus. En algunos casos la
respuesta inmune (RI) que genera este proceso permite eliminar el protozoario al 4º o 5º mes pos infección. No obstante,
algunas hembras pueden quedar infectadas durante más de
un año, resultando una fuente de reinfección de los toros,
manteniendo la enfermedad en el rodeo. En los últimos años
se han desarrollado vacunas comerciales indicadas para su
uso en hembras bovinas, como estrategia para aumentar la
resistencia a la infección mejorando los índices productivos.
Teniendo en cuenta la importancia del uso de estas vacunas
dentro de un programa de control, presentamos un modelo
experimental alternativo al bovino para evaluar la eficacia de
diferentes inmunógenos de T. foetus y vías de aplicación en
ratón BALB/c. El inmunógeno se desarrolló en forma experimental con una cepa de T. foetus aislada de mucus vaginal
bovino. La cepa fue subcultivada en TYM caldo y luego centrifugada y lavada con PBS. El pellet fue resuspendido a una
concentración de 5x107 T. foetus/ml e inactivadas con formol
al 0,1 %. Se prepararon tres tipos de vacunas: A: un volumen
de T. foetus más un volumen de adyuvante oleoso; B:
T. foetus en PBS; C: T. foetus en PBS más 1 % de DMSO. Se
utilizaron 70 ratones hembras BALB/c de 6 a 8 semanas de
edad, distribuidas en 7 lotes experimentales de 10 animales
cada uno. Cada lote recibió el siguiente plan de vacunación:
Lote 1: dos dosis subcutáneas de vacuna A; Lote 2: dos dosis subcutánea de vacuna B; Lote 3: dos dosis por instilación
vaginal con vacuna B; Lote 4: dos dosis por instilación vaginal con vacuna C; Lote 5: dos dosis subcutánea de vacuna
A más instilación vaginal de vacuna B al momento de la segunda dosis; Lote 6: dos dosis subcutánea de vacuna B más
instilación vaginal con vacuna B al momento de la segunda
dosis; Lote 7: control sin vacunar. El intervalo entre dosis fue
de 15 días y el volumen utilizado fue: subcutáneo 200 μl,
instilación vaginal 20 μl. El diseño experimental se realizó con
el siguiente cronograma de actividades: día -30 1ra dosis; día
-15 2da dosis; día -2 tratamiento con benzoato de estradiol
para sincronizar el estro; días 0 y 1 con los animales en estro,
inoculación vaginal de 10 μl de una suspensión de T. foetus
de 9x107 T. foetus/ml (dosis infectante 9x105 T. foetus/ml).
El experimento se continuó hasta el día 30 pos infección. Durante el período experimental se tomaron muestras de sangre
y mucus vaginal para evaluar: 1) respuesta inmune sistémica
y en tracto reproductor por la técnica de ELISA, 2) instalación
y persistencia de la infección vaginal, comparando los lotes
vacunados y control. Los resultados obtenidos nos permitieron observar que los lotes 1, 2, 5 y 6 presentaron una rápida
RI sistémica a la vacunación con un nivel de anticuerpos (Ac)
que se mantuvieron hasta el fin del ensayo. En los Lotes 3 y
4 no se detectó RI y presentaron el mismo patrón que el lote
control, observándose una elevación de los Ac a partir del día
15 p.i. como respuesta a la instalación de la infección vaginal.
La RI en tracto reproductor presentó menor nivel de Ac que la
RI sistémica y se observó que los lotes 1, 5 y 6 llegaron al día
de la infección vaginal con una RI superior al resto de los lotes
experimentales y el control. El número de animales infectados
a la primera semana p.i. fue menor en los lotes 1, 2, 5 y 6
comparados con los lotes 3, 4 y control, disminuyendo gradualmente hasta el final del ensayo. A los 40 días p.i. el lote control mantuvo el 60 % de los animales infectados. El análisis
de los resultados nos permite concluir que la vía sistémica genera una RI con un nivel elevado de Ac. El uso de adyuvante
oleoso y el Booster vaginal generan un mayor nivel de Ac
en exudados vaginales. Esta respuesta vacunal contribuye
a disminuir el número de animales infectados y a una rápida
eliminación de los protozoarios. La vacunación por instilación
vaginal con los dos inmunógenos ensayados (Vacuna B y C)
no genera RI detectable. Estos resultados permiten presentar
un modelo experimental alternativo al bovino para profundizar
los estudios de RI y eficacia protectora de las vacunas contra
la trichomonosis bovina.
152
IV. 11.
Estudio de la respuesta inmune uterina en un modelo de tritrichomonosis bovina en
ratonas balb/c preñadas.
Woudwyk MA1,3, Monteavaro CE2, Soto P2, Gimeno EJ4, Zenclussen AC3, Barbeito CG1,4.
1. Histología y Embriología. 4 Instituto de Patología.
Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Nacional de La Plata. 60 y 118. La Plata. Buenos Aires.
2. Laboratorio de Microbiología Clínica y Experimental Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Tandil. Buenos Aires.
3. Ginecología y Obstetricia Experimental, Facultad de Medicina, Universidad de Otto-von-Guericke. Magdeburg. Alemania.
E-mail: [email protected]
La tritrichomonosis genital bovina es una enfermedad venérea
producida por el protozoario flagelado Tritrichomonas foetus
(T. foetus) caracterizada por repetición de celo, muerte embrionaria y aborto. La importancia de las pérdidas económicas
que genera y las dificultades a las que lleva el uso del bovino
como animal de experimentación, determinó la búsqueda de
modelos experimentales alternativos en los que se desarrolle la enfermedad tal como ocurre en el huésped natural
del parásito. En nuestro laboratorio hemos desarrollado un
modelo de tritrichomonosis en ratonas BALB/c preñadas, en
las que la muerte embrionaria ocurre entre el 5to y el 8vo día
de gestación. Se desconocen aspectos de la patogenia de
la muerte embrionaria en la tritrichomonosis bovina. Nuestra
hipótesis es que podría intervenir una respuesta inmune materna exacerbada contra el protozoario. El objetivo del presente trabajo fue estudiar los mecanismos de la respuesta inmune local uterina, tanto innata como adquirida, que podrían
ser los responsables de la pérdida temprana de la preñez que
ocurre en esta enfermedad. Se utilizaron muestras provenientes de ratones hembra BALB/c de 6-8 semanas de edad. En
el momento del estro un grupo de animales fue infectado por
vía intravaginal con T. foetus. Posteriormente, se realizaron
colpocitologías semanales para determinar la presencia del
protozoario. Otro grupo de animales fue utilizado como lote
control no infectado. Ambos grupos de hembras se aparearon con machos no infectados. A partir del día 5 posterior
al apareamiento y hasta el día 11, se sacrificaron cada día 6
hembras infectadas y sus correspondientes testigos. Durante
la necropsia, se extrajo el aparato reproductor de estos animales. Un cuerno uterino fue congelado a -70°C para evaluar
y cuantificar el ARNm de citoquinas mediante real time
RT-PCR. Las muestras provenientes del otro cuerno uterino
se fijaron en formol al 10 % tamponado y fueron procesadas
para su inclusión en parafina. De este material se realizaron
cortes de 5 mm sobre los que se realizaron las técnicas de
hematoxilina eosina (H-E), PAS y azul de toluidina para analizar los cambios histopatológicos, la distribución y cantidad de
las células natural killer uterinas (uNK) y mastocitos respectivamente. Para detectar células T reguladoras y T helper 17 y
otras sustancias como IL-6, TNF-α, IFN-γ, IL-10, IL-4 y HO-1
se utilizaron muestras de ARNm con las que se realizó real
time RT-PCR cuantitativa. En los cortes coloreados con H-E
se observó exudado en la luz de las glándulas endometriales, edema periglandular y un abundante infiltrado inflamatorio que incluyó neutrófilos, eosinófilos, linfocitos, macrófagos
y células plasmáticas. Además, se observaron células del
epitelio glandular y luminal del endometrio en apoptosis. En
las hembras infectadas que perdieron el conceptus, las uNK
fueron pequeñas y disminuyeron drásticamente su número.
Presentaron escasos gránulos y cambios degenerativos. En
el endometrio y el perimetrio se observaron mastocitos pero
no hubo diferencias significativas en la cantidad de células
presentes en ambos grupos. Las citoquinas Th1 estuvieron
aumentadas en el grupo infectado. Sin embargo, el ARNm de
las citoquinas Th2, IL-10 e IL-4 estuvo también más expresado en el grupo infectado, comparado con el grupo control. Por
otro lado, foxp3, un gen asociado a células T reguladoras, estuvo más expresado en el útero de los animales infectados. En
los animales que perdieron el embrión, el ARNm de HO1, una
enzima protectora de la preñez, estuvo disminuido. El ARNm
de RORγt, marcador de las células T helper 17, estuvo aumentado en el tejido uterino de ratonas infectadas. Los resultados
presentados sugieren que los cambios producidos en las uNK
de ratonas infectadas podrían deberse a la degranulación
temprana de estas células inducida por moléculas citotóxicas
producidas por el protozoario. La muerte y degranulación de
las uNK podría contribuir al malfuncionamiento placentario y
en consecuencia, al aborto. Por otro lado, nuestros resultados
no apoyan la participación de los mastocitos en la patogenia
de la muerte embrionaria que ocurre en la tritrichomonosis.
La apoptosis incrementada del epitelio luminal podría alterar
la implantación normal y la muerte de las células glandulares
la producción de histiotropo. Ambos procesos junto a una
respuesta T efectora tipo I y la alteración de mecanismos protectores como HO1 contribuirían a la pérdida de la preñez. El
aumento de las células T reguladoras, con funciones inmunosupresoras, podría favorecer la creación de un ambiente
hostil para la embriogénesis. En conclusión, nuestro modelo
revela variados mecanismos inmunes que podrían ser los
responsables de la muerte embrionaria que ocurre durante la
infección con T. foetus.
153
V. 01.
Encefalomalacia nigropálida en un equino pastoreando Centaurea solstitialis en el sur de
la provincia de Buenos Aires.
Giannitti F1, Rodríguez M2.
1. Laboratorio de Diagnóstico Veterinario, Calle 25 de Mayo Nº 139, Bahía Blanca (8000), Buenos Aires, Argentina.
2. Estudiante avanzado de la carrera de Veterinaria, Universidad Nacional del Centro
de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA), Tandil, Argentina.
E-mail: [email protected]
Nigropallidal encephalomalacia in a horse grazing
Centaurea solstitialis in the south of Buenos Aires
province.
En este trabajo se describe un episodio de encefalomalacia
nigropálida ocurrido en una manada de equinos en noviembre
del 2007 en un establecimiento de producción mixta ubicado
en el sur de la provincia de Buenos Aires, Argentina. Un total
de 26 equinos habían estado pastoreando un pastizal natural altamente invadido por la maleza Centaurea solstitialis
(abrepuño amarillo) durante los meses previos. Seis caballos
adultos de ambos sexos manifestaron signos clínicos neurológicos, entre ellos: hipertonicidad e incoordinación de los
músculos faciales, lengua y labios, incapacidad para deglutir
alimentos o beber, movimientos repetitivos de masticación
incluso en momentos en los cuales no estaban intentando
alimentarse, extensión del cuello con posicionamiento de la
cabeza hacia el suelo, adormecimiento, letargo, pérdida progresiva del estado corporal, depresión, debilidad, decúbito
y postración. Se practicó la eutanasia de los seis caballos
en estadios avanzados de la enfermedad debido al que el
pronóstico era desfavorable. Las tasas de morbilidad y mortalidad fueron ambas del 23% (6/26), y la tasa de letalidad del
100% (6/6). Macroscópicamente el cerebro de uno de los equinos afectados presentaba dos focos de reblandecimiento de
coloración amarillo-grisácea, de 1 cm de diámetro, de bordes
netos bien delimitados, de localización simétrica y bilateral en
los pedúnculos cerebrales, en concordancia anatómica con
los ganglios basales “globus pallidus” y “sustancia nigra”. Las
lesiones cerebrales microscópicas consistieron en áreas
focalmente extensivas y bien demarcadas de necrosis
licuefactiva (malacia) caracterizadas por pérdida del neuropilo y su reemplazo por abundantes macrófagos de citoplasma espumoso (células de gitter) y espacios claros, necrosis y
pérdida de neuronas y presencia de esferoides (tumefacción
axonal) en el neuropilo circundante. Los signos clínicos y
las lesiones cerebrales macro y microscópicas encontradas
son consistentes con las producidas por intoxicación con
Centaurea solstitialis en equinos.
154
V. 02.
First detection of equine herpesvirus 1 neuropathogenic genotype (G2,254) in a horse with
neurological disease in Brazil.
Mori E1, Borges AS2, Delfiol DJZ2, Oliveira Flho JP2, Gonçalves RC2, D. Cagnini2, Lara MCCSH3,
Cunha EMS3, Villalobos EMC3, Nassar AFC3, Brandão PE1, Richtzenhain LJ1.
1. Universidade de São Paulo (USP), Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ), São Paulo, SP, Brazil.
2. Universidade Estadual Paulista (UNESP), FMVZ, Botucatu, SP, Brazil.
3. Instituto Biológico, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Sanidade Animal, São Paulo, SP, Brazil.
E-mail: [email protected].
Equine herpesvirus type 1 (EHV-1) is a major cause of
respiratory disease, abortion, perinatal mortality, and
neurological disorders in horses worldwide. Although the first
isolation of EHV-1 in Brazil was reported in 1966 from an
equine aborted fetus, the first case report of equine herpesvirus
myeloencephalopathy (EHM) only occurred in 2005 (Lara et
al., 2008). Nugent et al. (2006) demonstrated that a single
nucleotide polymorphism (A2,254/G2,254) within the EHV-1 DNA
polymerase enzyme gene (ORF30) is highly associated with
EHM. This study describes for the first time the detection of
EHV-1 neuropathogenic genotype (G2,254) in Brazil in a mare at
an equestrian facility housing 10 horses. On 17 Februay 2009,
a 6-year-old Paint Horse from Botucatu County (Sao Paulo
State, Southeastern Brazil) was examinated at the Veterinary
Hospital of Universidade Estadual Paulista (UNESP) de
Botucatu. At that time, the animal showed pelvic and thoracic
limbs ataxia (grade 3), depression, dysphagia, hind
limb hypometria, mild left head tilt, horizontal nystagmus and
circling gait. On further neurological examination, there were
no signs of cauda equine syndrome, such as urinary
bladder paralysis, or hypotonia of tail or anus. The clinical
course didn’t improve despite supportive treatment (fluid therapy,
antibiotic therapy with ceftiofur, non-steroidal anti-inflammatory
drugs, DMSO and B1 vitamin) and recumbency developed.
On 21 Februay 2009, the animal died. Further laboratory
investigations were negative for equine encephalomyelitis and
rabies. Histopathological brain and spinal cord findings were
characteristic of EHM, including perivascular mononuclear
cuffing, diffuse gliosis, perineuronal and perivascular edema,
ischemic neuronal necrosis, congestion, hemorrhage, hyaline
thrombi and infarction. Virus was isolated from the brain and
CSF on E-Dermal cells and it was identity as EHV by PCR.
Employing ORF 30 primers, both original unprocessed brain
and CSF sample and cultured Brazilian EHV-1 isolate 13/09
were positive by PCR. Furthermore, this amplified region
was sequenced and showed 100% of identity when compared
with corresponding sequence of EHV-1 reference
neuropathogenic (G2,254) strain Ab4. In conclusion, sequencing
DNA techniques have enabled precise characterization of
viral genome as neuropathogenic genotype following their
recovery in the brain and CSF.
Financial support: FAPESP Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo, CNPq Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico
e Tecnológico.
155
V. 03.
Mortandad de equinos asociada al consumo de Solanum glaucophyllum (S. malacoxylon)
en Argentina.
Odriozola ER1, Rodríguez AM2, Caffarena RD2, Bodega JJ2, Gardey P2, Iseas FB3, Cantón GJ1, Giannitti F1.
1. Servicio de Diagnóstico Veterinario Especializado, INTA Balcarce,
Ruta Nacional 226 Km 73,5, (7620) Balcarce, Buenos Aires, Argentina.
2. Residencia Interna en Salud Animal, INTA Balcarce.
3 Veterinario Actividad Privada, Chascomús, Buenos Aires.
E-mail: [email protected]
Mortality of horses associated to Solanum glaucophyllum
(S. malacoxylon) intake in Argentina.
Se reporta un caso de intoxicación asociado al consumo de
Solanum glaucophyllum [(S. malacoxylon) “duraznillo blanco”]
en dos equinos de 2 y 4 años de edad, registrado en el mes
de octubre del 2009 en un establecimiento ganadero mixto del
partido de Chascomús, Buenos Aires. El mismo contaba con
300 has, 30 de las cuales estaban representadas por campo
natural y eran pastoreadas únicamente por una manada de
110 equinos durante todo el año. El potrero se correspondía
con un lote bajo y estaba altamente invadido por la maleza
Solanum glaucophyllum. A causa de la prolongada sequía
que afectó la zona en los meses previos la producción forrajera se vio disminuida, transformándose el “duraznillo blanco”
en la principal fuente de alimento. El cuadro clínico se hizo
evidente el día 06/08/09, con la aparición del primer equino
sintomático. Gradualmente en un periodo subsiguiente de
60 días otros nueve equinos de ambos sexos manifestaron
signos clínicos similares, seis de los cuales murieron y
cuatro aún presentaban signos al día 06/10/09. Los signos
manifestados por los animales afectados fueron de aparición
gradual y progresión lenta, estando caracterizados por reticencia a los movimientos (“envaramiento”), rigidez de las articulaciones de los 4 miembros, marcha rígida y con pasos
cortos, decúbito por periodos prolongados con dificultad para
incorporarse y tendencia a no cambiar de posición, aunque
la reincorporación era posible con ayuda manual. Finalmente
los equinos presentaron pérdida de la condición corporal, y en
seis animales el cuadro finalizó con la muerte. El día 06/10/09
uno de los de los equinos afectados se encontró en decúbito
lateral y fue sacrificado (Caso Nº 1); otro animal afectado
había muerto el día previo (Caso Nº 2), practicándose necropsia sobre ambos individuos. El Caso Nº 1 se correspondía
con un equino macho, entero, mestizo de 2 años de edad,
en mal estado corporal. Las lesiones macroscópicas se localizaron fundamentalmente en sistema cardio-circulatorio. Las
porciones torácica y abdominal de la arteria aorta presentaban pérdida de elasticidad, rigidez y aumento de la consistencia; engrosamiento y dureza de sus paredes, emitiendo
sonidos de crepitación al ser seccionadas. Sobre la superficie
interna se encontraron placas aplanadas rugosas, extensivas,
blanquecinas, de bordes irregulares, con tendencia a confluir,
que eran evidentes al observar estos vasos desde la íntima.
Ambas válvulas aurículo-ventriculares cardiacas se presentaron engrosadas, rugosas y con elasticidad disminuida. Por
último, aproximadamente 500 ml de líquido seroso ambarino
se encontraron libres en la cavidad abdominal. El Caso Nº 2
se correspondía con un equino macho, entero, mestizo, de 4
años de edad, en mal estado corporal, que presentó lesiones
cardíacas y aórticas similares a las descriptas en el Caso Nº 1.
En el Caso Nº1 se tomaron muestras de múltiples órganos
y del Caso Nº2 se tomaron muestras de corazón en solución de formol bufferado al 10%, que fueron embebidas en
parafina, seccionadas a 5 µm de espesor y coloreadas con
Hematoxilina y Eosina (HE) para estudio histopatológico. De
igual manera, secciones de corazón, pulmón y arteria aorta
del Caso Nº1 y secciones de corazón del Caso Nº2 fueron
coloreadas también según la técnica de Von Kossa para identificación de Calcio. Histológicamente en el Caso Nº1 se encontró metaplasia cartilaginosa multifocal en miocardio, con
presencia de áreas de mineralización (depósitos de material
amorfo granular basófilo), la túnica íntima y media de las
arteriolas coronarias presentaban mineralización e hipetrofia/
hiperplasia de la musculatura lisa, la túnica íntima y media de
las paredes de la arteria aorta presentaban metaplasia ósea
y depósitos minerales extensivos similares a los encontrados
en miocardio y arteriolas coronarias, los cartílagos bronquiales
presentaban áreas de mineralización similares a las anteriormente descriptas. Las lesiones miocárdicas en el Caso Nº2
fueron similares a las del Caso Nº1. La coloración de Von
Kossa permitió identificar un depósito negro finamente granular
en concordancia con los sitios de mineralización observados
en la coloración de HE para cada caso (arteria aorta, pulmón
y corazón para el Caso Nº1 y corazón para el Caso Nº2), lo
que permitió confirmar que los depósitos minerales contenían
Calcio. Los antecedentes del caso, los signos clínicos, las
lesiones macro y microscópicas y la presencia de Solanum
glaucophyllum como principal fuente de alimento son compatibles con intoxicación con esta especie vegetal. La intoxicación con esta planta es frecuentemente diagnosticada en
bovinos, pero no ha sido previamente descripta en la especie equina. Casos de “calcinosis enzoótica” en equinos son
infrecuentemente reportadas en otros países y relacionadas
con consumo de plantas conteniendo grandes cantidades de
análogos de la vitamina D, tales como Cestrum diurnum y
Trisetum flavescens.
156
V. 04.
Un caso de leucoencefalomalacia equina.
Sticotti EE1,3, Magnano GG1, Mació MN1, Giraudo JA1, Cuello H2, Schneider MO1, Macias AF1.
1. Departamento de Patología Animal, Facultad de Agronomía y Veterinaria, Universidad Nacional de Río Cuarto.
Ruta 36 Km. 601, Río Cuarto, Córdoba. [email protected]
2. Médico veterinario, actividad privada, Huinca Renancó, Córdoba.
3. Laboratorio Veterinario Babini, Río Cuarto.
A case of equine leukoencephalomalacia.
La leucoencefalomalacia es una enfermedad degenerativa
del sistema nervioso de los equinos que hace referencia a
necrosis licuefactiva de la sustancia blanca y es causada por
Fumomisina B1, micotoxina producida por el metabolismo de
Fusarium spp, hongo que afecta principalmente al maíz. El
objetivo de esta presentación es describir un caso de leucoencefalomalacia equina. El mismo se presentó en una yegua
de cuatro años que pastoreaba junto a otras 17 en un lote
de maíz con espigas maduras, que en su mayoría se encontraban en el suelo y enmohecidas. Los signos clínicos observados fueron: aislamiento, depresión, torneo, falta de la
visión, decúbito y muerte a las 12 horas posteriores. El animal
no mostró hipertermia en el examen clínico. En la inspección
macroscópica de los órganos se observó una leve congestión
del cerebro; a la palpación se apreciaba una zona de consistencia blanda, un tanto deprimida, que abarcaba aproximadamente un tercio del hemisferio izquierdo. Al corte se podía
ver un área de reblandecimiento, de contenido amorfo de
color blanco amarillento, con pequeños focos hemorrágicos.
El hemisferio derecho no presentaba alteración. El hígado
se observó de color borravino, con bordes tumefactos y congestivos. No se encontraron alteraciones macroscópicas en
otros órganos. Se tomaron muestras de ambos hemisferios
cerebrales e hígado para histopatología y aislamiento viral, y suero para investigar presencia de anticuerpos contra
Leptospira spp. También se recolectaron especímenes del
maíz que estaban consumiendo los animales. Al cereal se lo
sometió a cultivo de hongos y diagnóstico de Fumomisina por
métodos de ELISA. Para aislamiento de Herpesvirus, se inoculó macerado de sistema nervioso central sobre una monocapa de células MDBK y se realizaron dos pasajes ciegos.
El estudio histopatológico realizado a partir de muestras to-
madas del área de malacia, confirmó la presencia de necrosis en toda la sustancia blanca con pérdida de la estructura
del tejido. Se observó una respuesta de la microglia escasa y
difusa en toda el área. Algunos de los vasos sanguíneos de
mayor tamaño mostraban manguitos perivasculares con pocas células mononucleares. La sustancia gris no presentaba
lesiones significativas. En el estudio microscópico del hígado
se observó una fuerte distensión de los capilares sinusoides
y de las venas centrolobulillares por la cantidad de glóbulos
rojos. Los hepatocitos presentaban degeneración vacuolar. El
77% de los granos resultaron afectados con hongos aislándose Fusarium spp. Por ELISA se determinó la presencia de
Fumomisina B1. La serología para leptospirosis resultó negativa. En el cultivo viral no se observó efecto citopático. La
presentación clínica y los hallazgos macro y microscópicos,
confirman la presencia de una leucoencefalomalacia. Si bien
no se realizó un diagnóstico cuantitativo de Fumomisina B1
en el grano, la presencia de Fusarium spp sumado a la confirmación cualitativa de la micotoxina, es sugestivo de la causa.
El hecho de que se presentara en un solo animal se podría
atribuir a diferencias en la susceptibilidad individual o mayor
consumo de maíz enmohecido, entre otras; si bien, hay que
considerar que el resto de los equinos se retiraron del lote al
momento de iniciado el caso. La presentación esporádica de
esta afección podría responder a los cambios en las condiciones climáticas entre un año y otro. Consideramos que es
necesario prestar atención en la prevención de estos casos
especialmente en veranos como este (año 2010) donde la
alta humedad ambiente fue favorable para la proliferación de
hongos. Se resalta además, la importancia de realizar una
completa necropsia por parte de los médicos veterinarios, ya
que es probable que la presentación de esta patología este
subestimada.
157
REVISAR ITALICAS
VI. 01.
Tiflocolitis fibrinonecrótica asociada a Salmonella enterica subespecie enterica en el cerdo
negro canario.
Andrada M1, Acosta B2, Suárez A1, Arbelo M1, Espinosa de los Monteros A1, Herráez P1, Fernández A1.
1. Unidad de Histología y Anatomía Patológica Veterinaria. Departamento de Morfología.
Instituto Universitario de Sanidad Animal y Seguridad Alimentaria.
2. Enfermedades Infecciosas. Departamento de Patología Animal, Producción Animal, Bromatología y Tecnología de los Alimentos.
Facultad de Veterinaria. Universidad de Las Palmas de Gran Canaria. España.
[email protected]
Fibrinonecrotic typhlocolitis associated to Salmonella
enterica subespecie enterica in black canary pig.
En los porcinos, la salmonelosis con presentación clínica está
asociada a Salmonella enterica Choleraesuis, aunque también pueden presentarse cuadros relacionados con Salmonella
enterica Typhimurium y excepcionalmente con Salmonella
enterica Typhisuis. En esta especie animal en el intestino se
pueden encontrar serovariedades potencialmente patógenas
para el ser humano y, por consiguiente, los cerdos pueden
constituir una fuente de infección a través del consumo de sus
subproductos y ser un factor de riesgo para la salud pública.
Por otra parte, la única raza porcina autóctona del Archipiélago
Canario, reconocida oficialmente a nivel Nacional, catalogada
con la categoría de Protección Especial, o en grave peligro
de extinción por encontrase en grave regresión o en trance
de desaparición, es el Cerdo y/o Cochino Negro Canario.
Actualmente las explotaciones de Cochino Negro Canario
suelen ser de tipo complementario a otras actividades orientadas al autoconsumo y se crían en sistemas al aire libre y/ o
confinamiento. En la presente comunicación se describe un
caso de salmonelosis procedente de una explotación de 28
reproductores en total, de los cuales 25 son hembras y 3 machos. El cuadro se observó en un lechón post-destete, que
presentó diarrea, deshidratación grave, ictericia, hipertermia,
muriendo a las dos horas. Se realizó necropsia reglada y se
tomaron muestras para su estudio histopatológico que fueron
fijadas en formol tamponado al 10% e incluidas en parafina
siguiendo los procedimientos rutinarios. Simultáneamente,
se remitieron muestras para bacteriología, donde se realizó
bacterioscopia y cultivo en los medios de Agar Sangre, Mac
Conkey, Sabourad, Baird-Parker y Hektoen Agar. Las lesiones macroscópicas más relevantes se observaron en ciego y
colon, con enteritis necrótica y formación de placas difteroides,
linfoadenomegalia mesentérica, tonsilitis necrótica, hepatitis
necrótica y neumonía. Microscópicamente en hígado se observaron nódulos paratíficos, los cuales se inician como focos
de necrosis hepatocelular coagulativa, y posteriormente se
infiltran de células inflamatorias mononucleares, histiocíticas y linfocitos. La mucosa y submucosa del ciego y colon
presentaron importante áreas necróticas con participación
de numerosos macrófagos, polimorfonucleares y fibrina, y
acompañada de trombosis vascular. Microbiológicamente se
identificaron colonias bacterianas de Salmonella aplicando el
método API 20E Biomeriex, que posterioremente fueron
remitidas para su identificación al Laboratorio de Referencia
de Algete donde se tipificaron como S. enterica subespecie
Enterica Serotipo Enteritidis 9,12: g.m. Estudios bacteriológicos de heces realizados en los reproductores, posteriormente al diagnostico e identificación de Salmonella,
resultaron negativos al cultivo, por tanto nuestros hallazgos
se podrían corresponder con un caso individual donde la
fuente de infección podría estar relacionada con animales
silvestres (ratas). En España, se reportó un brote en cerdos
salvajes (Sus scrofa ferus) de la forma septicémica causada
por Salmonella Choleraesuis. Más recientemente, en
Brazil, se describieron hallazgos clínicos y anatomopatológicos de un brote de salmonelosis en una explotación de cerdos
salvajes de la forma enterocolítica de salmonellosis causada
por serovar Saintpaulen. Desde el punto de vista anatomopatológico en esta descripción se observaron lesiones que
se corresponderían con la forma de salmonellosis enterocolítica (enteritis, colitis, tiflitis) y lesiones que estarían más
relacionadas con la forma de presentación de salmonelosis
septicémica (Necrosis hepática, tonsilitis necrótica, trombosis, neumonía intersticial, ganglios edematosos). El informe
emitido por European Food Safety Authority en 2008 sobre la
prevalencia de Salmonella en cerdos de abasto de los países
Estados miembros de la Unión Europea, sitúa a España con
una elevada prevalencia (29 % Salmonella spp.) en muestras
obtenidas en matadero de nódulos linfáticos mesentéricos. El
Reglamento (CE) Nº 2160/2003 establece la obligatoriedad
de adoptar medidas apropiadas y eficaces para detectar y
controlar la presencia de Salmonella en todas las etapas de la
producción, con objeto de disminuir su prevalencia y el riesgo
que suponen para la Salud Pública; y atendiendo a nuestros
resultados se deberían incluir ejemplares de esta raza como
integrantes de la cadena epidemiológica en el riesgo de
transmisión de esta enfermedad.
158
VI. 02.
Hallazgos patológicos en el cerdo negro canario afectados con el síndrome del desmedro
multisistémico postdestete.
Andrada M1, Quesada O1, Paz Y1, Sierra E1, Ramírez AS2, Orós J1, Rodríguez F1.
1.Unidad de Histología y Anatomía Patológica Veterinaria. Departamento de Morfología.
Instituto Universitario de Sanidad Animal y Seguridad Alimentaria.
2. Unidad de Epidemiología y Medicina Preventiva. Departamento de Patología Animal, Producción Animal,
Bromatología y Tecnología de los Alimentos. Facultad de Veterinaria. Universidad de Las Palmas de Gran Canaria. España.
E-mail: [email protected]
Pathological findings in black canary pig affected by the
postweaning multisystemic wasting syndrome.
El síndrome del desmedro multisistémico postdestete
o síndrome multisistémico de adelgazamiento postdestete
(PMWS- “Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome”)
fue descrito inicialmente en Canadá en el año 1991 y, posteriormente, en Francia, el Reino Unido, España, Italia y
los Estados Unidos. Algunos investigadores consideran al
circovirus porcino tipo 2 (PCV-2) como el único agente infeccioso necesario para el desarrollo del PMWS. Este virus se
clasifica taxonómicamente como perteneciente a la familia
Circoviridae, género Circovirus. En el Archipiélago Canario,
se realizó la primera descripción de PCV-2 en el año 1999,
conjuntamente con el virus del PRRS causante del Síndrome
Respiratorio Porcino, en cerdos híbridos pertenecientes a una
explotación con sistema intensivo en confinamiento. En el
contexto de recuperar o preservar la raza autóctona denominada Cerdo y/o Cochino Negro Canario, que se encuentra
en grave regresión o en trance de desaparición, se iniciaron
líneas de trabajo, actualmente en desarrollo, que se centran
en lograr un mayor conocimiento de sus aspectos productivos
y sanitarios. En este marco y dado el reducido número de
ejemplares censados en el año 2009 (380 reproductores
en todo el Archipiélago), se realizó un estudio serológico contemplando algunos agentes etiológicos con tropismo por el
aparato respiratorio donde se incluyó PCV-2. Si bien los
resultados analizados en las distintas explotaciones revelaban que los individuos de esta raza habían tenido contacto
con el virus, no se habían observado signos clínicos, ni lesiones compatibles con PMWS. En la presente comunicación
se describen los hallazgos anatomopatológicos procedente
de una explotación de 18 reproductores de la raza de Cochino
Negro Canario. El proceso se observó en una camada de 8
lechones post-destete con síntomas de tos y debilidad en los
miembros generando incoordinación en los movimientos, finalmente distrés respiratorio y muerte. Se realizó la necropsia reglada de uno de los ejemplares remitido al Servicio de
diagnóstico y se tomaron muestras para su estudio histopatológico, las cuales fueron fijadas en formol tamponado al
10% e incluidas en parafina para ser procesadas mediante
las técnicas de rutina. Las lesiones macroscópicas más relevantes fueron bronconeumonía y neumonía intersticial,
linfoadenomegalia generalizada, hidrotórax, hidropericardio,
fibrosis hepática, congestión en meninges y hemorragias
petequiales en cerebro y cerebelo. Microscópicamente, los
pulmones presentaron edema intersticial, exudado en bronquios y alvéolos constituidos mayoritariamente por polimorfonucleares y macrófagos, proliferación de neumocitos tipo II
y células sincitiales. En los tejidos linforreticulares analizados
(linfonódulos, tonsila, timo y bazo) se apreció una importante
depleción linfocitaria, células gigantes multinucleadas y gran
cantidad de cuerpos de inclusión basófilos intracitoplasmáticos en los macrófagos. En SNC, la hiperemia y hemorragias
multifocales, el edema perineuronal y la vasculitis, fueron los
hallazgos más relevantes. Mediante inmunohistoquímica, utilizando anticuerpos monoclonales frente a PCV-2 (Mab I36A)
y PRRS (Mab 1AC7), se detectó antígenos de PCV-2 en el
citoplasma de macrófagos en pulmón, bazo, tonsila, timo,
placas de Peyer, riñón y SNC, no observándose inmunorreacción frente al PRRS. Múltiples trabajos hacen referencia a las
lesiones anatomopatológicas que se presentan en este síndrome PMWS, aún no estando muy claro el/los mecanismo
patogénico a través del cual el PCV-2 es capaz de causar
enfermedad. El caso descrito representa la primera observación de PCV-2 en su forma multisistémica en esta raza; y con
particular referencia a las lesiones observadas en el SNC. El
estudio de la prevalencia del PCV-2 en esta raza autóctona,
su posible asociación con otros patógenos y su participación
en cuadros de PMWS observados en las explotaciones, constituye una importante herramienta, tanto para la mejora del
estado sanitario del Cochino Negro Canario, como para el
impulso de programas de conservación que tengan en cuenta
la susceptibilidad de esta raza a estos patógenos de amplia
distribución en razas de cerdos convencionales.
159
VI. 03.
Intoxicação por sal em suínos alimentados com bagaço de cevada.
Diefenbach A1, Anjos BL1, Maran NB2, Peixoto PV1.
1. Curso de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, UFRRJ, Seropédica, RJ, 23890-000, Brasil.
2. Curso de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, UFRRJ, Seropédica, RJ, Brasil.
E-mail: [email protected]
Salt poisoning in pigs fed barley bagasse.
Os subprodutos da cevada, largamente empregada na
industrialização de bebidas como cerveja e destilados no
Brasil, vêm sendo muito utilizados na alimentação
de ruminantes e, mais recentemente, em monogástricos. O
bagaço de cevada, também chamado de bagaço de malte ou
polpa úmida de cervejaria, também tem se mostrado como
uma alternativa viável na dieta de suínos, uma vez que, o
milho e o farelo de soja, muito utilizados na suinocultura, têm
limitações pelo seu alto custo. O bagaço da cevada representa
aproximadamente 85% do total de subprodutos gerados pela
indústria cervejeira, sendo considerada a porção mais
importante e com o maior potencial de uso como ingrediente
em ração animal. O processo de estocagem desse resíduo
vem sendo tema de diversos estudos; por possuir alto teor
de umidade, seu acondicionamento é problemático e propicia
a proliferação de diversos microrganismos indesejáveis,
inclusive Aspergillus clavatus, fungo que, muitas vezes, utiliza
a cevada como substrato para sua proliferação e é capaz de
induzir graves alterações neurológicas. No Estado do Rio de
Janeiro, pequenos produtores eventualmente têm utilizado o
sal de cozinha sobre o bagaço da cevada, na tentativa de
melhor conservar o produto. O objetivo desse relato é
descrever um surto de intoxicação por sal em suínos
de recria alimentados com bagaço de cevada recoberto por
grande quantidade de cloreto de sódio. Em um pequeno
criatório no município de Seropédica, RJ, cinco suínos com
cerca de quatro meses de idade vinham sendo alimentados
com bagaço de cevada e sobras de alimento (restos
de comida humana). Usualmente, o bagaço de cevada era
acondicionado em tambores plásticos com capacidade para
200 L e recobertos por cerca de 1 kg de sal. Antes do fornecimento,
o sal era retirado e apenas o bagaço era oferecido aos
animais. Depois da alimentação dos animais, o sal era reposto
na porção superficial do bagaço de cevada no tambor.
Inadvertidamente, um dos tratadores não descartou a camada
superficial de sal e a forneceu juntamente com a cevada
para os suínos. Três animais apresentaram sinais clínicos
caracterizados por episódios convulsivos intermitentes que
ocorreram repentinamente após privação de água, e
se exacerbaram quando os animais ingeriam água. Entre os
episódios convulsivos os animais ficavam quietos, por vezes
apresentando posição de “cão sentado”, cambaleando ou
com pressão da cabeça contra a parede. O quadro evoluiu
para andar em círculos, severa depressão, cegueira
aparente, seguido de decúbito lateral, movimentos de
pedalagem e morte. Dois desses suínos foram necropsiados
e macroscopicamente apresentaram congestão, edema e
erosão da mucosa gástrica, congestão de diversos segmentos
da mucosa dos intestinos delgado e grosso, conteúdo intestinal
e fezes ressecadas. No encéfalo verificou-se achatamento
dos giros cerebrais. Microscopicamente, o córtex
telencefálico apresentou necrose neuronal simétrica com
edema perineuronal e moderado infiltrado eosinofílico
perivascular, sobretudo nas leptomeninges e no entorno de
vasos; foram observadas também áreas multifocais de
vacuolização da substância branca. Ainda havia edema
vasogênico em graus variáveis tanto no córtex como
na substância branca dos hemisférios cerebrais. No estômago
observaram-se áreas de ulceração da mucosa com hiperemia
e infiltrado perivascular eosinofílico. Os achados epidemiológicos
e clinicopatológicos confirmaram o diagnóstico de intoxicação
por sal. Essa condição patológica ocorre pela ingestão
excessiva de sal, ou esse em concentrações normais, porém
sem o fornecimento adequado de água. No caso em estudo,
ambos os fatores contribuíram para o desenvolvimento da
intoxicação. A competitividade pelo alimento na baia onde os
animais eram mantidos, fez com que os animais mais fortes
tivessem acesso a uma maior quantidade do bagaço e
consequentemente do sal. A forma de conservação do bagaço de cevada descrita nesse caso vem sendo bastante utilizada, em especial por pequenos produtores da região. Tendo
em vista a ocorrência desse surto nessas condições, se
faz necessário que criadores sejam informados dos riscos
que esse tipo de estocagem pode trazer para os animais
alimentados com esse subproduto. Além disso, a nosso ver, é
controversa sua eficácia no controle de microrganismos, em
especial a fungos.
160
VI. 04.
Estudio histopatológico de pulmones de cerdos infectados naturalmente por el virus de
influenza a subtipos H3N2 y H1N1 2009.
Quiroga MA1, Cappuccio J1, Pereda A2, Machuca MA1, Insarralde L1,3, Sanguinetti R4, Barrales H1,5, Perfumo CJ1.
1. Cátedra de Patología Especial, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata CC 296. B 1900 AVW.
2. Instituto de Virología (CIVyA) INTA Castelar.
3. Becario UNLP.
4. Dilacot (SENASA).
5. Becario FCV,UNLP.
E-mail: [email protected]
Lung histopathology from naturally infected pigs with
H3N2 and H1N1 2009 influenza virus.
El virus de influenza porcina (SIV) es un patógeno primario
del tracto respiratorio del cerdo. Los subtipos de SIV H1N1,
H3N2 y H1N2 han sido asociados con manifestaciones clínicas similares y de intensidad variable según el estado inmunitario. Dentro de cada subtipo existen cepas que difieren en
su origen como resultado de la recombinación con genes de
origen aviar y humano. En este sentido, la especie porcina
ha sido considerada como un recipiente mezclador con un
potencial papel en la aparición de una pandemia de gripe. El
virus replica en las células epiteliales del tracto respiratorio:
tráquea, bronquios, bronquiolos y alvéolos pulmonares con
necrosis epitelial e infiltración de neutrófilos. En la Argentina, recientemente se han descripto un brote de influenza
A subtipo H1N1 2009 y, en el 2008, un cuadro asociado al
subtipo H3N2. El objetivo del presente trabajo es describir las
lesiones microscópicas pulmonares provocadas por ambos
subtipos. El estudio se realizó sobre muestras de pulmón procedentes de 16 cerdos. Los casos seleccionados resultaron
positivos mediante IHQ y/o RT-PCR para influenza A;
8 correspondieron al subtipo H3N2 y 8 al subtipo H1N1 2009.
La lesión histopatológica dominante para ambos subtipos fue
una severa bronquiolitis necrotizante, más acentuada en los
bronquiolos de mediano y pequeño calibre. En los casos en
que la necrosis epitelial fue escasa o parcial estuvo acompañada de pequeños quistes intraepiteliales con presencia de
neutrófilos y exocitosis neutrofílica hacia la luz bronquiolar.
Cuando la necrosis fue extensa, se observó descamación
completa o una única capa de células epiteliales aplanadas
recubriendo la membrana basal. La luz bronquiolar presentó
un exudado neutrofílico, más abundante a mayor daño epitelial, e infiltración celular de la lámina propia y congestión capilar en la mucosa y submucosa. En los bronquios, las lesiones
de la mucosa fueron similares a las de los bronquiolos pero
menos severas. Adicionalmente, en la infección por H1N1, en
la luz bronquiolar se observaron membranas hialinas y trom-
bosis capilar en lámina propia y en los vasos peribronquiolares. Por otro lado, en los bronquios se observaron, además,
degeneración y necrosis de las células epiteliales de las glándulas mucosas. En los alvéolos, en el caso de la infección
por H3N2, se reconocieron áreas de enfisema y atelectasia,
con un patrón de distribución lobulillar, así como neutrófilos y
macrófagos en su luz. Un solo caso evidenció pleuritis fibrinosa focal. En la infección por H1N1, se identificaron marcada
congestión y edema intra-alveolar con presencia variable de
fibrina y hemorragia alveolar. Se reconoció la presencia de
membranas hialinas en la luz alveolar y trombosis de los capilares de la pared, con áreas de necrosis del epitelio alveolar.
Escaso número de alvéolos presentaron neutrófilos y macrófagos en su luz. En 6/8 casos de pulmones con infección
por H1N1 se observó linfangiectasia, linfangitis y hemorragia
en tabiques interlobulillares y, en ocasiones, pleuritis fibrinosa difusa o focal. Se concluye que, en la infección por el
subtipo H3N2, 1/8 pulmones no presentó lesión de carácter
diagnóstico, 3/8 sólo presentaron lesión bronquiolar y se clasificaron como bronquiolitis necrótica y 4/8 casos como bronconeumonía supurativa. En los pulmones con infección por
H1N1, 1/8 se trató de una bronquitis y bronquiolitis necrótica,
2/8 presentaron características de bronconeumonía fibrinosa
y 5/8 se clasificaron como bronconeumonía fibrinosupurativa.
Si bien el espectro de lesiones observadas en los cerdos en
el caso de infección por SIV no ofrecería diferencias entre los
dos subtipos, en nuestro estudio fue evidente que las lesiones
por H1N1 presentaron un carácter francamente exudativo, no
observado en los casos de H3N2, y coincide con la ocurrencia
de necrosis del epitelio alveolar que favorecería el ingreso de
fluido al interior del alvéolo. Las lesiones alveolares descriptas
para H1N1 son similares a las observadas en la pandemia humana de 1918. En nuestro caso, la distinta intensidad de las
lesiones encontradas entre ambos subtipos podría deberse a
la falta de experiencia inmune de los cerdos frente al subtipo
pandémico H1N1 2009.
Trabajo realizado con subsidios PICT 2005-33987 y Programa de Incentivos, proyecto V184, SECyT UNLP.
161
Revista de Medicina Veterinaria
Volumen 91 – N° 5 / 6 – Año 2010
Índice general del año 2010
INDICE POR AUTORES
INDICE POR TEMAS
Caione, J.C.; Carraro, M.C.; Vanina, L.; Tellechea, J.;
de Olavarrieta, M.; Späth, E.J.A.
Prevalencia de brucelosis bovina en el partido de Nueve
de Julio.
Prevalence of brucelosis in cattle in Nueve de Julio
district, Buenos Aires, Argentina.
59
Capitelli, G.M.; Ferrari, H.R.; López, H.
Introducción a la medicina veterinaria Darwiniana.
Aplicaciones de la teoría de la evolución en la práctica
veterinaria. Vaccinología, zoonosis y bienestar animal
como ejemplos de aplicación.
Introduction to the Darwinian veterinary medicine.
Applications of the theory of evolution in the veterinary
practice. Immunization, zoonosis and animal welfare as
examples of application.
71
Draghi, M.G.; Samartino, L.E.; Torioni de Echaide S.;
Conde S.; Piazza, E.; Schust, M.; Biotti, G.M.; Aguirre, N.
Persistencia de anticuerpos séricos en bovinos Hereford,
3/8 Hereford y 5/8 Cebú vacunados con Brucella abortus
cepa 19.
Persistence of antibodies in Hereford, 3/8 Hereford
and 5/8 Zebu vaccinated with Brucella abortus
strain 19.
53
Negro, V.B; Hernández, S.Z.; Rohr, A.A.; Duchene, A.
Meningioma lumbar: diagnóstico y tratamiento quirúrgico
en un perro.
Lumbar meningioma: diagnosis and surgical treatment
in a dog.
Russo, A.M.; Aguirre, N.; Mancebo, O. A.; Monzón C.M.;
Torioni de Echaide S.
Estudio epidemiológico de la brucelosis bovina en
rodeos de cría de la provincia de Formosa: evaluación
de las técnicas de polarización fluorescente y Elisa de
competición.
Epidemiological study of bovine brucellosis in herds from
Formosa province: Evaluation of fluorescent polarization
assay and competitive ELISA.
Negro, V.B; Hernández, S.Z.; Rohr, A.A.; Duchene, A.
Meningioma lumbar: diagnóstico y tratamiento quirúrgico
en un perro.
Lumbar meningioma: diagnosis and surgical treatment
in a dog.
63
Epidemiología
63
Caione, J.C.; Carraro, M.C.; Vanina, L.; Tellechea, J.;
de Olavarrieta, M.; Späth, E.J.A.
Prevalencia de brucelosis bovina en el partido de Nueve
de Julio.
Prevalence of brucelosis in cattle in Nueve de Julio
district, Buenos Aires, Argentina.
59
Russo, A.M.; Aguirre, N.; Mancebo, O. A.; Monzón C. M.;
Torioni de Echaide S.
Estudio epidemiológico de la brucelosis bovina en
rodeos de cría de la provincia de Formosa: evaluación
de las técnicas de polarización fluorescente y Elisa de
competición.
Epidemiological study of bovine brucellosis in herds from
Formosa province: Evaluation of fluorescent polarization
assay and competitive ELISA.
4
Inmunología
4
Varios
10
Segunda Jornadas y Reunión Anual de la Asociación
Argentina de Inmunología Veterinaria.
76
Séptima Reunión Argentina de Patología Veterinaria.
Clínica de pequeños animales
Capitelli, G.M.; Ferrari, H.R.; López, H.
Introducción a la medicina veterinaria Darwiniana.
Aplicaciones de la teoría de la evolución en la práctica
veterinaria. Vaccinología, zoonosis y bienestar animal
como ejemplos de aplicación.
Introduction to the Darwinian veterinary medicine.
Applications of the theory of evolution in the veterinary
practice. Immunization, zoonosis and animal welfare as
examples of application.
71
Draghi, M. G.; Samartino, L. E.; Torioni de Echaide S.;
Conde S.; Piazza, E.; Schust, M.; Biotti, G. M.; Aguirre, N.
Persistencia de anticuerpos séricos en bovinos Hereford,
3/8 Hereford y 5/8 Cebú vacunados con Brucella abortus
cepa 19.
Persistence of antibodies in Hereford, 3/8 Hereford and
5/8 Zebu vaccinated with Brucella abortus strain 19.
53
162
Resúmenes de Congresos
Segunda Jornadas y Reunión Anual de la Asociación
Argentina de Inmunología Veterinaria.
Séptima Reunión Argentina de Patología Veterinaria.
76
10
163
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