UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL FACULTAD DE TECNOLOGÍA MÉDICA ESCUELA DE LABORATORIO Y ANATOMÍA PATOLÓGICA ELECTROFORESIS EN ORINA – PROTEÍNA DE BENCE JONES ALUMNO: ORELLANA BALBOA PAOLO CESAR CURSO: INMUNOLOGÍA II DOCENTE: LIC. TM MIRTHA HERNANDEZ ACASIETE 2019 Electroforesis La electroforesis es una técnica basada en los movimientos de moléculas cargadas en un campo eléctrico, cada molécula se mueve hacia el electrodo de carga opuesta (cátodo y ánodo dependiendo de: 1) su carga eléctrica, 2) su tamaño, 3) la intensidad del campo eléctrico y 4) la temperatura del medio Electroforesis de Proteínas en Orina Se utiliza con frecuencia para cribar muestras de orina para las cadenas ligeras libres monoclonales (proteínas de Bence-Jones). Utilidad limitada en la evaluación de la proteinuria que no está asociado con gammapatía. El origen y la magnitud de las proteínas presentes en orina, aportan valiosa información acerca de los desórdenes renales. El análisis proteico cualitativo se basa en dos herramientas fundamentales: las que separan proteínas de acuerdo a su carga eléctrica (habitual) las que separan proteínas de acuerdo a su peso molecular (utilizando SodioDodecilSulfato). De acuerdo a su PESO MOLECULAR: Se utiliza para ello el dodecil sulfato de sodio (SDS), que es un detergente que las desnaturaliza. En consecuencia, al realizar una corrida electroforética tratando la muestra con SDS, que puede estar contenido en el gel, aquellas proteínas de PM menor a 67 Kda.( origen tubular) se desplazan mas allá de la Albúmina y las de PM mayor a 67 Kda. ( origen glomerular) lo hacen mas lento que la Albúmina. La movilidad electroforética de las proteínas halladas se compara con la de un patrón de peso molecular conocido, lo que orienta sobre su identidad. De acuerdo a su carga eléctrica. Proteinograma Normal en Orina PROTEINURIA Describe una condición en la cual la orina contiene una cantidad aumentada de proteínas. Se presenta por una alteración en la barrera de filtración glomerular que deja escapar las proteínas hacia la orina. La concentración de proteínas en la orina depende del estado de hidratación del paciente y raras veces excede los 150 mg al día (20 mg/dL), cifra sobre la cual se considera que existe proteinuria. La proteinuria se clasifica en tres categorías dependiendo del origen de la patología y de las proteínas excretadas en la orina: 1. proteinuria glomerular 2. proteinuria tubular 3. proteinuria por sobreflujo. Proteinuria Glomerular Es la más común y resulta por un daño en el glomérulo que causa un aumento en la permeabilidad de los capilares glomerulares a las proteínas, predominantemente a la albúmina. NO SELECTIVA Alteraciones estructurales de la membrana basal SELECTIVA Pérdida de la funcionalidad del filtro aniónico del glomérulo Proteinuria Tubular La proteinuria tubular se presenta cuando hay lesiones agudas o crónicas que comprometen la región túbulointersticial. Ocurre como resultado de una alteración en la reabsorción de proteínas de bajo peso molecular que normalmente son filtradas. Sustancias de bajo peso molecular tales como las β2 -microglobulinas, aminoácidos y cadenas livianas de inmunoglobulinas que tienen un peso molecular de alrededor de 25.000 daltons (la albúmina pesa 69.000). Proteinuria Mixta • El análisis del patrón electroforético urinario también revela tipos mixtos de proteinuria glomerular/tubular, ya que alteraciones primarias del glomérulo pueden acabar afectando al intersticio tubular y viceversa. • Los tipos mixtos son frecuentes en enfermedades renales avanzadas. PROTEINA DE BENCE JONES En 1845 Henry Bence Jones describe la presencia de un precipitado termolábil en la orina de un paciente con fuertes dolores óseos y fracturas espontáneas y lo relaciona con la severidad de su falla renal. • Primer marcador tumoral descrito. Henry Bence Jones • La PBJ puede estar presente en todos los tipos de gammapatías: mieloma múltiple (MM) y sus variantes, macroglobulinemia de Waldenström (MGW), gammapatía monoclonal de significado indeterminado (GMSI), linfomas u otros desórdenes linfoproliferativos. Proteinuria por Sobreflujo o Pre-renal Ocurre en ausencia de una enfermedad renal de base y se debe al aumento en la concentración plasmática de inmunoglobulinas anormales y otras proteínas de bajo peso molecular. La causa más común de este tipo de proteinuria es el mieloma múltiple, en el cual se producen grandes cantidades de cadenas livianas de inmunoglobulinas, que son excretadas en la orina (proteína de Bence Jones). Se puede identificar en la electroforesis de proteinas urinarias por un «pico» anormal usualmente en la región de las γ-globulinas Las Proteínas de Bence Jones (BJP) son, por definición, Cadenas Ligeras LIBRES MONOCLONALES (CLLM), (ya sea κ o λ) que son sintetizadas por células plasmáticas neoplásicas . La producción excesiva de estas cadenas ligeras ocurre en discrasias de células plasmáticas como el mieloma múltiple y la amiloidosis primaria. Debido a su bajo peso molecular y alta concentración, se excretan en la orina (proteinuria por desbordamiento). Electroforesis de proteínas en orina que muestra una fuerte proteinuria de Bence Jones (flecha roja) junto con pérdida de albúmina y otras proteínas de bajo peso molecular en la orina. Otros términos: Cadenas Ligeras (Light Chains) Cadenas Ligeras Libres (Free Light Chains) Cadenas Kappa y Lambda
