Subido por carlos alberto vazquez

AGAR DE DEXTROSA Y PAPA

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AGAR DE DEXTROSA Y PAPA
USO
Para cultivo y recuento de hongos y levaduras en productos lácteos, bebidas embotelladas y
alimentos. Como medio preparado
(Catálogo 1059-P) para la cuenta de hongos y levaduras en líquidos.
PRINCIPIO
La infusión de papa como fuente de almidones y la dextrosa son la base para el crecimiento
de hongos y levaduras. El bajo pH (3.5) evita el crecimiento de las bacterias.
Cuando se va a usar para el recuento de hongos y levaduras, agregar al medio de cultivo
una vez esterilizado y enfriado aproximadamente a 45ºC, 14 ml de una solución estéril de
ácido tartárico al 10% para obtener un pH aproximado de 3.5.
Sembrar el medio de cultivo por estría en la superficie o adicionar la muestra para la técnica
de vaciado en placa. Incubar hasta 7 días a temperatura ambiente.
FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA
Agar..... ....................................15.0
Dextrosa...................................20.0
Infusión de papa.......................4.0
Ph............................................. 5.6 ± 0.2
PREPARACION
Rehidratar 39 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar
agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por
completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar
aproximadamente a 45ºC. Vaciar de acuerdo a la técnica a seguir en cajas de Petri estériles.
Cuando se requiera el medio inclinado en tubo, distribuirlo antes de esterilizar. Si se
acidifica el medio, no sobrecalentar y fundir solo una vez, para evitar la hidrólisis del agar.
CONTROL DE ACTIVIDAD
MICROORGANISMO
Candida albicans
Saccharomyces cerevisiae
Trichophyton mentagrophyte
Aspergillus niger
CEPA RESULTADO
ATCC
10231
Colonias crema, lisas
ATCC
9763
Colonias crema, lisas
ATCC
9533
Colonias blancas, reverso blanco
A marrón, algodonosas.
ATCC 16404
Colonias de apariencia lanosa de
blanco a negro, reverso amarillo
BIBLIOGRAFIA
Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 13th De. APHA. Inc, New York
1960
American Public Health Association. Compendium of Methods for the Microbiological
examination of foods. Segunda Edición. 1984
Medio SIM
El medio SIM se utiliza para la diferenciación de microorganismos sobre la base de la
producción de sulfuro de hidrógeno, la producción de indol y la motilidad en un entorno de
laboratorio. El medio SIM no está destinado a ser utilizado en el diagnóstico de
enfermedades u otras condiciones en humanos.
Los medios semisólidos se han utilizado ampliamente en la determinación de la motilidad
bacteriana. La producción de sulfuro de hidrógeno, formación de indol y motilidad son
pruebas diagnósticas útiles en la identificación de Enterobacteriaceae, especialmente
Salmonella spp. y Shigella spp.
En 1940, Sulkin y Willett demostraron la motilidad, producción de sulfuro de hidrógeno y
fermentación de carbohidratos por miembros de los grupos de Salmonella y Shigella.
Señalaron el “crecimiento parecido a un cepillo” o la motilidad de los organismos tifoideos.
Greene et al. Usaron el medio SIM para detectar la motilidad en una amplia gama de
cultivos de organismos tifoideos.
Fórmula
Litro
Digerido enzimático de caseína
..............20 g
Digerido enzimático de tejido animal........6.1 g
Citrato amónico férrico
.............................0.2 g
Tiosulfato de sodio.....................................0.2 g
Agar............................................................3.5 g
pH Final:..................................................... 7.3 ± 0.2 a 25°C
La fórmula se puede ajustar y/o complementar según sea necesario para cumplir con las
especificaciones de rendimiento.
Instrucciones
1.
Disuelva 30 g del medio en un litro de agua purificada.
2.
Caliente con agitación frecuente para disolver completamente el medio.
3.
Autoclave a 121°C durante 15 minutos.
CARACTERISTICAS
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- lizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar.
ALMACENAMIENTO
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a
2-8 ºC.
PROCEDIMIENTO SIEMBRA
por punción profunda utilizando aguja de inoculación recta. inocular el centro del tubo,
y la punción debe abarcar 2 tercios de profundidad del medio de cultivo desde la
superficie.
INCUBACION
En aerobiosis. a 35-37 °C, durante 18-24 horas.
INTERPRETACION DE RESULTADOS
observar la movilidad y el color del medio de cultivo. luego realizar la prueba de indol.
MOVILIDAD
Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas allá de la línea de siembra.
Resultado negativo: crecimiento solamente en la línea de siembra.
PRODUCCION DE SH2:
Resultado positivo: ennegrecimiento del medio de cultivo a lo largo de la línea de
siembra o en todo el medio.
Resultado negativo: el medio permanece sin cambio de color.
PRUEBA DE INDOL:
Agregar al medio de cultivo 3 a 5 gotas de indol reactivo (ReF B1550361).
Resultado positivo: color rojo.
Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece in- coloro-amarillento.
Agar extracto de glucosa triptona (Agar de glucosa y tripcaseina)
El agar extracto de glucosa triptona se utiliza para el cultivo y enumeración de
microorganismos en productos lácteos y agua embotellada en un entorno de laboratorio. El
agar extracto de glucosa triptona no está destinado a ser utilizado en el diagnóstico de
enfermedades u otras condiciones en humanos.
En los 1930, Bower y Hucker desarrollaron un medio para detectar bacterias en la leche y
otros productos lácteos. Prickett utilizó un agar glucosa que contenía triptona para estudiar
bacterias termófilas en la leche. En 1948, la Asociación Americana de Salud Pública
(APHA) adoptó el agar extracto de glucosa triptona para su uso en las pruebas de leche y
productos lácteos. Actualmente, la APHA especifica el agar extracto de glucosa triptona
para el procedimiento de recuento heterotrófico en placa en pruebas de agua embotellada.
El agar extracto de glucosa triptona también se conoce como agar levadura dextrosa.
Fórmula
Litro
Extracto de carne de res......................3 g
Digerido enzimático de caseína...........5 g
Dextrosa...............................................1 g
Agar......................................................15 g
pH final: ...............................................7.0 ± 0.2 a 25°C
La fórmula se puede ajustar y/o complementar según sea necesario para cumplir con las
especificaciones de rendimiento.
Instrucciones
Suspenda 24 g del medio en un litro de agua purificada.
Caliente con agitación frecuente e hierva durante un minuto para disolver completamente el
medio.
Autoclave a 121°C durante 15 minutos.
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