INSTRUCCIONES DE USO Revisión 0 Abril 2010 BASE DE AGAR SANGRE Nº2 Base de Agar Sangre nº2 presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1328 USO PREVISTO Base de Agar Sangre nº2 está recomendado para el aislamiento, cultivo y detección de la actividad hemolítica de microorganismos de difícil crecimiento en muestras clínicas. FORMULA EN g/l Proteosa Peptona 15.00 Extracto Hígado 2.50 Extracto Levadura 5.00 Agar Bacteriológico 12.00 Cloruro sódico 5.00 Final pH 7.0 ± 0.2 at 25ºC PREPARACIÓN Base de Agar Sangre nº2 presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1328 (Medio deshidratado) Suspender 39.5 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien hasta obtener una suspensión uniforme. Calentar agitando frecuentemente y hervir durante 1 minuto. Esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15 minutos. Dejar enfriar a 4550°C y añadir de 7% de sangre desfibrinada y estéril, homogeneizar evitando la formación de burbujas y verter en placas de Petri. Las placas preparadas deben almacenarse entre 8-15 ºC. El Color del medio preparado sin sangre es ámbar ligeramente opalescente. El color del medio preparado es rojo cereza sin hemolisis. El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. PRINCIPIOS Y APLICACIÓN BASE DE AGAR SANGRE Nº 2 es rico en nutrientes, utilizado para la preparación de placas de Agar sangre. Es utilizado para el aislamiento cultivo y recuperación de microorganismos de difícil crecimiento, y para estudios de la actividad hemolítica. El Extracto de Hígado y El Extracto de Levadura aportan nitrógeno, vitaminas, minerales y amino ácidos esenciales para el crecimiento. Cloruro sódico mantiene el equilibrio osmótico. La sangre es una fuente adicional de factores de crecimiento para los microorganismos y es la base para determinar las reacciones hemolíticas. Agar Bacteriológico es el agente solidificante. TIPO DE MUESTRAS Torundas de garganta, torundas genitales La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1. Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo. 2. Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 24 - 48 horas. 3. Lectura e interpretación de los resultados Resultados: 1. Alpha-hemolisis: decoloración verdosa de medio 2 .Beta-hemolisis: zona clara alrededor de la colonia 3. Gamma-hemolisis: sin cambio 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo con el 7% de sangre desfibrinada de carnero, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 24 - 48 horas. Microorganismos Neisseria meningitidis ATCC 13090 Desarrollo Bueno Hemolisis - Staphylococcus aureus ATCC 25923 Bueno Beta Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 Bueno - Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 Bueno Alpha Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Bueno Beta BIBLIOGRAFIA WATERWORTH, P.M.: BRIT. J. Exp. Pathol., 36(02); 186-194 (1955) ISO 7932 Horizontal Method for the enumeration of Bacillus cereus ISO 11290-1 Microbiología de los alimentos para consume humano y para animales. Método horizontal para la detección y el recuento de Listeria monocytogenes Parte 1 Método de detección Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com ISO ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación. Utilizable hasta la fecha de caducidad 25ºC 2ºC Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com