INSTITUTO TECNOLOGICO DE TUXTLA GUTIERREZ
Ingeniería bioquímica
Microbiología
18 de marzo del 2018
PRACTICA 3
MEDIOS DE CULTIVO SELECTIVO Y DIFERENCAL
García Aguilar Mayela, Sarmiento Gómez Erick Javier, Velasco Velasco Diana Karen, Victoria Ruiz Laura Lizeth
Resumen
Se realizó la inoculación por estría cruzada en condiciones de asepsia de Escherichia coli y Bacillus subtillis en agar SalmonellaShigella, XLD, Bilis verde brillante y MacConkey, así también de Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermis en agar
Estafilococos y ASM. Enseguida se incubo a 35°C, habiendo realizado previamente prueba de esterilidad de 48 horas. Finalmente, se
evaluó el crecimiento, la morfología macroscópica y se realizó tinción de Gramm en las cajas donde hubo crecimiento.
Palabras clave:
Medio selectivo, Medio diferencial, crecimiento bacteriano.
Introducción
Gran parte de los estudios en microbiología depende de la
capacidad de cultivar y mantener microorganismos en un
laboratorio y esto es sólo posible si se dispone de los
medios de cultivo adecuado. Un medio de cultivo es una
preparación líquida o sólida utilizada para el crecimiento,
transporte o mantenimiento de microorganismos. Si se
desea utilizar para el crecimiento, deberá contener todos
los nutrientes esenciales para ese microorganismo
concreto. (Prescott, 2004)
Los medios de cultivo se utilizan para diferentes
propósitos: aislamiento de ciertos tipos de bacterias, el
mantenimiento de los cultivos para su uso posterior y para
facilitar el reconocimiento de algún tipo de bacteria en
particular. Para estos fines se han desarrollado una gran
cantidad de medios, los cuales, con base en su uso o
función, se han clasificado como medios selectivos,
diferenciales, de mantenimiento, entre otros.
(Garcia, 2007)
La selección del medio de cultivo depende, principalmente,
del tipo de microorganismo empleado y del producto que
se quiera obtener. Por ejemplo, si se desea producir
biomasa, se debe emplear un medio de cultivo que
incentive la reproducción del microorganismo.
(Hernandez, 2003)
Los medios selectivos favorecen el crecimiento de
microorganismos particulares. Las sajes biliares o
colorantes favorecen el crecimiento de bacterias Gram
negativas. al inhibir el crecimiento de las Gram positivas,
sin afectar a las primeras.
Los medios diferenciales son medios que diferencian
entre grupos distintos de bacterias e incluso permiten una
identificación tentativa de los microorganismos, según sus
características biol6gicas.
(Prescott, 2004)
Objetivo
Seleccionar los medios de cultivo en base a su
función y composición química.
Determinar la morfología macroscópica de las
cepas en los diferentes medios.
realizar tinción de Gramm en las cajas donde
hubo crecimiento.
Metodología
Se prepararon los medios de cultivo siguientes conforme a
las indicaciones del fabricante: XLD, Salmonella Shigella
agar, Agar para estafilococos, Agar bilis verde brillante,
Agar sal y manitol y Agar Mc. Conkey y fueron sometidos
a prueba de esterilidad.
Posteriormente cuando se verificó en los medios dicha
prueba, se procedió a inocularlos por técnica de estría
cruzada con los siguientes microorganismos: para XLD,
Agar Salmonella Shigella, Agar verde bilis brillante y Agar
Mc. Conkey E. coli, B. subtillis y muestra problema; Agar
para estafilococos y Agar sal y manitol S. aureus, S.
epidermis y muestra problema. Las cajas inoculadas fueron
incubadas de 24-48 horas a 35°C.
A continuación, se procedió a realizar la tinción de Gram
para las cajas que mostraron mayor crecimiento de
colonias de las cepas E. Coli, S. aureus y muestra problema
del siguiente modo.
Colocar el puente de tinción sobre el cristalizador, con el
portaobjetos, sobre él una gota pequeña de agua destilada,
seguidamente se tomó en condiciones asépticas inoculo de
la cepa, se suspendió en el portaobjetos con ayuda del asa,
y se secó al mechero, se colocó cristal violeta por 1 minuto,
después se lavó con agua para que se agregara yodo-Lugol
por 1 minuto y se enjuagó, se cubrió la muestra alcoholacetona entre 15 seg – 30 seg y se lavó. Finalmente se
añadió safranina por 15 seg- 1 minuto, se lavó, se dejó
secar y se observó al microscopio.
INSTITUTO TECNOLOGICO DE TUXTLA GUTIERREZ
Ingeniería bioquímica
Microbiología
17 de abril del 2018
Conclusion
Resultados y discussion
Bibliografía
Garcia, V. (2007). Introduccion a la microbiologia .
EUNED.
Hernandez, A. (2003). Microbiologia industrial .
Prescott, L. M. (2004). Microbiologia. McGrawHill/Interamericana.
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