Boletin MAYO 2012 - Laboratorio Echavarria

mayo 2012
COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD
Y TRASPLANTE
Los Antígenos Leucocitarios Humanos - HLA son moléculas que se encuentran en los glóbulos blancos (o
leucocitos) de la sangre y en la superficie de casi todas las células de los tejidos de un individuo. Cumplen
con la función de reconocer lo propio y lo ajeno y aseguran la respuesta inmune, capaz de defender al
organismo de algunos agentes extraños que generan infecciones. Ese conjunto de moléculas constituyen
un sistema también denominado Complejo Mayor de Histocompatibilidad (de histo = tejido) o de la
Individualidad (lo propio y lo ajeno). Su descubrimiento ha permitido a la medicina dar un salto cualitativo
en las posibilidades de éxito de un trasplante. El trasplante como tratamiento de ciertas enfermedades es
relativamente reciente. Los primeros se efectuaron en los años sesenta, abriendo un camino prometedor
cuyo gran tropiezo fue el rechazo.
Después, de la década de los setenta, descubierto el Sistema HLA, se puede comprender mejor el fenómeno
del rechazo y de la enfermedad del injerto contra el receptor, y trasplantar con menos inconvenientes, según
criterios de compatibilidad. Existen “lugares estratégicos” en el Sistema HLA que sirven para examinar si
una persona puede ser compatible con otra en caso de injerto: HLA-A, HLA-B , HLA-C, HLA-DR y HLDQ. El
tipo de molécula – antígeno - presente en A, B, C, DR y DQ es lo que determina la posibilidad de aceptación
del tejido (órgano o médula ósea) de un donante por el organismo de un receptor.
TECNOLOGIA LUMINEX X MAP
Una nueva dimensión en el diagnóstico de trasplante
La tipificación de HLA basada en la amplificación del
ADN por PCR es un método de laboratorio muy
difundido. Dicha amplificación se utiliza para
multiplicar el
número de copias de una región
seleccionada del ADN. En la tipificación de HLA se han
empleado diversos tipos de ensayos, como 1. SSP, 2.
SSOP directo, 3. RFLP, 4. dot blot inversa, 5. sistema
Luminex (tecnología de punta). El sistema LUMINEX
basado en una plataforma X MAP a proporcionado una
nueva dimensión en el diagnostico de trasplante,
utilizado a nivel mundial. LUMINEX utiliza los kits de
tipificación LIFECODES HLA-SSO de Gen-Probe.
Al igual que los métodos de SSOP y dot blot inversa, los kits de tipificación LIFECODES HLA-SSO emplean
oligonucleótidos con especificidad de secuencia (SSO) para determinar qué alelos HLA están presentes en
una muestra amplificada por PCR. No es el método, sino el conjunto de SSO utilizado, lo que determina la
capacidad de distinguir entre los diversos alelos presentes en la amplificación por PCR. Los métodos de
SSOP y dot blot inversa emplean marcadores enzimáticos y sustratos colorimétricos que requieren un
revelado ulterior, mientras que el ensayo LIFECODES es un sistema múltiple homogéneo. Es decir, todos los
SSO se analizan simultáneamente y todo el ensayo se lleva a cabo en un solo recipiente de reacción, con la
adición de un solo reactivo.
El procedimiento de tipificación de LIFECODES HLA-SSO se basa en la hibridación con sondas SSO del ADN
marcado obtenido por PCR. En la amplificación del ADN por PCR se genera tanto productos bicatenarios
como monocatenarios que, una vez desnaturalizados, participarán en la reacción de hibridación con
sondas. Estas sondas se han creado para que cada una de ellas hibride preferentemente con una región
complementaria que puede estar presente o no en el ADN amplificado. Además, el ADN amplificado hibrida
también con una o más sondas de consenso homólogas a secuencias presentes en todos los alelos de un
locus del sistema HLA.
RASTREO DE ANTICUERPOS LUMINEX XMAP
Los Antígenos Leucocitarios Humanos (HLA) constituyen un sistema de
glicoproteínas que desempeña un papel funcional en la presentación de péptidos al
sistema inmunitario.1,2 Sin embargo, por tratarse de un sistema muy polimórfico,
las moléculas HLA pueden convertirse en el blanco de respuestas humorales (de
anticuerpos) durante el embarazo, la transfusión de hemoderivados o el rechazo a
trasplantes de órganos. Por lo general, la aloinmunización conduce a la producción
de anticuerpos anti-HLA aproximadamente en el 33% de los individuo expuestos.3
La presencia o ausencia de estos anticuerpos específicos anti-HLA es uno de los
4
factores que determinan la supervivencia de los alotrasplantes.
Las microesferas LIFECODES LifeScreen Deluxe se han ideado para detectar anticuerpos IgG contra los HLA
de clase I y II. LifeScreen y ID se compone de microesferas Luminex específicas conjugadas a las
glicoproteínas de HLA de clase I y II purificadas por afinidad.
En nuestro laboratorio contamos con la mas alta tecnologia, poseemos un Instrumento Luminex desde hace
año y medio, prestando así el mejor servicio a nuestros clientes. Contamos con todos los exámenes tanto
para realizar la evaluación pretrasplante como el seguimiento inmunológico postrasplante: Tipificación HLA
clase I y clase II ( A,B,C, DR, DR alta resolución, DQ), PRA cualitativo, PRA cuantitativo clase I y clase II,
Antigeno Unico (LSA), Anticuerpos Especificos de Donante (DSA), Anticuerpos Citotóxicos (técnica antiKappa-CDC) , Anticuerpos Autólogos, técnica del DTT para diferenciación de anticuerpos IgG de IgM.
Realizado por: Martha Ramirez de Olano MSc.
REFERENCIAS
1. Klein, J, Sato, A. The HLA System. N. Engl. J. Med. 2000; 343:702 and 343:782.
2. Parham, P. The Immune System. Garland Publishing, N.Y. and London. 2000; 55.
3. Rodey, GE. HLA Beyond Tears (2nd Edition). DeNovo, Inc. Durango, CO. 2000; 163.
4. McKenna, RM; Takemoto, SK; Terasaki, PI. Anti-HLA Antibodies after Solid Organ Transplantation. Transplantation 2000; 69:319.