XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
EXTRACCIÓN DE RNA DE PLANTAS DE AGAVE TEQUILANA WEBER VARIEDAD
AZUL CON PUDRICIÓN SECA DEL COGOLLO RELACIONADOS CON LA
INFECCIÓN DE FUSARIUM SPP
Carmen Zintya Chavolla Alvarado. Ingeniería en Industrias Alimentarias del Instituto Tecnológico
Superior de Uruapan, [email protected]. Asesora. Lucila Méndez Morán. Centro
Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Universidad de Guadalajara,
[email protected].
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
El cultivo de agave (Agave tequilana Weber variedad azul) ocupa una superficie de más
de 50,000 hectáreas en el estado de Jalisco. En los últimos años, el cultivo de agave se
ha visto afectado por una serie de problemas fitosanitarios, destacando entre estos,
aquellos causados por fitopatógenos. Entre los fitopatógenos más importantes de este
cultivo destacan aquellos asociados a la pudrición seca del cogollo, los síntomas de
esta enfermedad se ha asociado a fitopatógenos tales como el Fusarium spp., el cual
provoca necrosis del cogollo y encarrujamiento de hojas.
En esta investigación se pretende estandarizar un método de extracción de RNA de alta
calidad a partir de muestras de Agave tequilana Weber variedad azul con pudrición
seca del cogollo, ya que durante la infección con Fusarium spp. causante de esta
enfermedad se incrementa la cantidad de compuestos fenólicos, los cuales interfieren
en la extracción y obtención de RNA libre interfiriendo en los ensayos de RT-PCR.
METODOLOGÍA
Después de la revisión teórica para el planteamiento del problema, se estableció la
metodología a emplear. Para este trabajo se estandarizo un método de extracción de
RNA total de alta calidad a partir de muestras de plantas de Agave tequilana Weber
variedad azul infectadas con Fusarium spp. que presentan altos contenidos en
polisacáridos y principalmente polifenoles. La calidad del RNA se determinó por geles
de agarosa y espectrofotometría.
CONCLUSIONES
Se utilizaron varias metodologías de extracción de RNA total de muestras de Agave
tequilana Weber variedad azul, variando los procesos de precipitación para eliminar el
alto contenido de polisacáridos y polifenoles que interfieren en su extracción y
cuantificación. La importancia de este trabajo radica en que la calidad del RNA debe ser
alta (1.8-2) para ser utilizado en los métodos de RT-PCR durante el análisis de
expresión genética.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del
Pacífico
Agosto 2014