Aplicación a escala de laboratorio Índice de contenidos Velcorin® – Aplicación a escala de laboratorio págs. 3–5 Introducción pág. 3 Medidas de precaución pág. 3 Método de trabajo (sensorial) pág. 4 Método de trabajo (microbiológico) págs. 4–5 Protocolo: Experimento de laboratorio Velcorin® págs. 6–8 Advertencias Secuencia de imágenes pág. 6 págs. 7–8 Velcorin® – Aplicación a escala de laboratorio Introducción En la industria de bebidas y refrescos, la sustancia Velcorin® (DMDC) se añade a las bebidas inmediatamente antes del envasado mediante un equipo especial de dosificación. Sólo así se pueden garantizar el suministro preciso y el reparto homogéneo de la sustancia, el tiempo máximo de actuación, así como el mantenimiento estricto de las medidas de seguridad necesarias por parte de personal debidamente capacitado. En trabajos de microbiología realizados en el laboratorio no se puede emplear el equipo de dosificación. Debido a que el Velcorin® se descompone rápidamente en la bebida, es escasamente miscible en agua y presenta una baja velocidad de disolución, recomendamos para trabajos a escala de laboratorio, el método especial de trabajo que se describe a continuación. Medidas de precaución Al manipular Velcorin® se han de mantener las mismas medidas generales de precaución recomendadas para productos químicos. Se deben seguir las instrucciones de la ficha de seguridad más reciente, que contiene información adicional sobre el etiquetado, el transporte y el almacenamiento, así como sobre la manipulación, la seguridad del producto, la toxicidad y su comportamiento ecológico. En el laboratorio debe haber un ejemplar de la ficha de datos de seguridad y también información adicional sobre comportamiento en caso de accidentes, medidas de primeros auxilios, etcétera. Es importante subrayar lo siguiente: En todas las tareas de manipulación de Velcorin® es preciso llevar un equipo de protección personal adecuado (indumentaria de laboratorio/ropa de protección, gafas y guantes protectores de desechables). El producto sólo se puede manipular si existe la suficiente ventilación (instalación de aspiración de aire); en caso de que no haya instalación de aspiración de aire habrá que llevar una mascarilla protectora adecuada. 3 Método de trabajo (sensorial): 1.Se escogerán recipientes de líquido que sean lo suficientemente pequeños como para que sea posible llenarlos en poco tiempo, de tal manera que cada recipiente sea tapado y el Velcorin® homogenizado inmediatamente (max. 10 min.). 2.Se trabajará a temperatura ambiente. Hay que tener en cuenta de que a 20 °C/68 °F (= temperatura ambiente) en aprox. 17 minutos ya ha hidrolizado el 50 % del Velcorin® añadido. La bebida tendrá que estar a temperatura ambiente. 3. Por regla general, la dosificación referida a Velcorin® es de entre 80 y 200 µL por litro de bebida preparada = 100–250 mg por litro de bebida preparada. La cantidad de Velcorin® que hay que dosificar se calcula a partir de la concentración de deseada de Velcorin® y del volumen de bebida preparada empleada en el experimento. Se añadirá a la bebida empleando una micropipeta adecuada. A continuación se tapa el recipiente con tapas nuevas y se agita intensamente (10 veces; una agitación consiste en mover 30 cm hacia arriba y hacia abajo en 10 segundos). Es importante asegurar el contacto interior de la tapa con bebida tratada con Velcorin®. 4. Después de unas 4 horas de almacenamiento a temperatura ambiente (20 °C/68 °F), el Velcorin® añadido a la bebida se ha hidrolizado por completo. Las bebidas tratadas con Velcorin® no se pueden probar ni consumir antes de que la hidrólisis haya concluido completamente. Método de trabajo (microbiológico): 1.Para comprobar la efectividad de Velcorin® se realiza una contaminación intencionada con microorganismos perjudiciales para las bebidas y refrescos. En primer lugar habrá que esterilizar la bebida con métodos adecuados. A continuación se añaden a la bebida los microorganismos de comprobación (p. ej. 5, 50 y 500 cfu/mL). Después se dosifica Velcorin® conforme a procedimiento descrito arriba. 4 2.Las muestras se cultivan de acuerdo con la temperatura óptima de crecimiento de los microorganismos (p. ej., 26 °C/79 °F y 37 °C/99 °F). Las bebidas tratadas se controlarán durante un periodo de 4 a 6 semanas, o más extenso, según objetivo del experimento. Dependiendo del plan del experimento, se extraen muestras para valoración al cabo de 24 horas, y después de 1, 2, 4, 6 (8 y 12 semanas), bajo condiciones de esterilidad. Como método de observación se pueden citar, además de la valoración visual, los siguientes: •M étodo de placas de Koch: Una determinada cantidad de bebida (10 mL) se coloca en 30 mL de un caldo nutritivo de agar (preparar según indicaciones del fabricante) estéril adecuado (ver anexo de caldos de cultivo). Tras la solidificación, se incuba de 2 a 5 días a la temperatura adecuada (observar la temperatura óptima de crecimiento de los microorganismos y del incubado aerobio/ anaerobio). A continuación se valoran las muestras. •F iltración a través de membrana (sólo es apropiada para bebidas transparentes y poco densas): Dependiendo del número de gérmenes que se esperen, al cabo de 24 horas se filtran entre 10 y 100 mL en un equipo adecuado a través de un filtro de membrana. Los filtros se colocan en un caldo nutritivo en cápsulas de Petri (emplear caldo de cultivo específico o no específico), se incuban de 2 a 7 días a la temperatura correspondiente y se someten a examen visual para comprobar el crecimiento de microorganismos. • También se puede realizar un test logarítmico de eliminación de microorganismos. Para la valoración se pueden aplicar sistemas de Neogrid, Sartorius, Merck, etc. Es preciso observar el protocolo de fabricación. Para comprobar la presencia de microorganismos dañinos para las bebidas recomendamos los siguientes caldos de cultivo: Organismo dañino para las bebidas Caldo de cultivo Consideraciones generales Agar suero de naranja, p. ej. Merck 1.10673 Levaduras y mohos Agar extracto de malta, p. ej. Oxoid CM 59 Bacterias de ácido láctico y ácido acético Agar MRS, p. ej. Oxoid CM 361 Bacterias Agar sangre base, p. ej. Oxoid CM 55 5 Protocolo: Experimento de laboratorio con Velcorin® Instrucciones: 1.Sólo podrá manipular el Velcorin® el personal de laboratorio con experiencia (manipulación segura de pipetas y productos químicos). 2. Solalmente personal capacitado por el agente o distribuidor esta autorizado a realizar ensayos de laboratorio. La presentación y capacitación local directa, no puede ser sustituida por material fotografico o digital. 3. En el documento «Aplicación a escala de laboratorio» se detalla el procedimiento exacto. 6 Protocolo: Experimento de laboratorio con Velcorin® 1 2 3 4 5 6 7 8 9 7 Protocolo: Experimento de laboratorio con Velcorin® 10 11 12 13 14 15 16 17 18 8 Esta información, así como nuestros consejos sobre las técnicas de aplicación, ya sean verbales, por escrito o mediante ensayos, se realizan según nuestro leal saber y entender, pero se deben considerar sólo como indicaciones no vinculantes, también por lo que respecta a los posibles derechos de protección de terceros. Los consejos ofrecidos aquí no le eximen de realizar una comprobación propia específica de nuestras indicaciones, en particular con respecto a nuestras fichas de seguridad y nuestras especificaciones técnicas, así como la prueba propia de nuestros productos, para comprobar si son adecuados para los procesos y propósitos previstos. La aplicación, el empleo y la transformación de nuestros productos y de los productos fabricados por ustedes sobre la base de nuestro asesoramiento técnico se efectúan fuera de nuestras posibilidades de control y radican exclusivamente en la esfera de responsabilidad de ustedes. La venta de nuestros productos se realiza según nuestras Condiciones Generales de Venta y Suministro vigentes. Edición 2009-06 Velcorin® es una sustancia peligrosa que posee las siguientes características de peligrosidad según las directivas de la CE: nocivo (por ingestión), tóxico (por inhalación), cáustico.