Maximización de Rendimientos en la Obtención de Bioetanol a partir De Maíz J. E. Marignac, C.E. Díaz Yanevich, D. O: Brachna, E. Hryczyñski, W. G. López Ciencias Básicas y Aplicadas – Universidad Nacional del Chaco Austral, Cdte. Fernández 755, C.P. 3700. P. R. Sáenz Peña, Chaco. [email protected] Resumen La producción de bioetanol ha tenido un crecimiento importante en los últimos años y presenta buenas proyecciones a futuro. El maíz, como materia prima para la generación de biocombustibles, posee la capacidad de convertirse en la principal fuente de conversión, debido a su disponibilidad, como así también al elevado rendimiento que este presenta frente a otros cultivos. Es por ello que el presente trabajo pretende contribuir al desarrollo de biocombustibles evaluando la conversión de variedades de maíces cultivados en la región centro de la provincia del Chaco a bioetanol, mediante el manejo de parámetros específicos que contribuyen a la optimización de su rendimiento. Dentro de los parámetros que se consideraron se encuentran la concentración de enzimas y levaduras. El proceso consistió, inicialmente, con la preparación de la muestra, lo cual implica molienda y tamizado, tomando una porción representativa de la misma para establecer el contenido de almidón presente en el grano de maíz. Luego se efectuaron ensayos con diferentes concentraciones de enzimas (obtenidas a partir de cebada malteada), y material biológico, levaduras, analizando rendimientos en la conversión de los granos de maíz a bioetanol, mediante la selección de parámetros enfocados a la optimización del proceso para cada una de las muestras de maíz analizadas, realizando un examen comparativo. Del análisis de los datos se concluye que la variedad P30B39 presento un mayor porcentaje en el contenido de almidón. A si mismo dicha variedad exhibió un mayor rendimiento en bioetanol. Palabras claves: almidón– hidrolisis- fermentación- enzimas. Introducción En la actualidad hablar de energía y no hablar de biocombustibles es casi imperdonable. El creciente interés por el desarrollo de combustibles renovables encuentra su origen en dos preocupaciones: el calentamiento global y el desabastecimiento de petróleo. El calentamiento global es uno de los temas ambientales en discusión más importantes actualmente, debido a una serie de fenómenos que generan y se manifiestan a nivel global. Esto conlleva a la búsqueda y producción de combustibles proveniente de fuentes renovables que sean viables económicamente y menos contaminantes que los de origen fósil. Para solucionar este grave problema, una de las herramientas más aceptadas social y científicamente es la sustitución de los combustibles fósiles por energías alternativas y concretamente, hoy en día la más viable, la producción de bioetanol. Es por ello que el presente trabajo pretende contribuir al desarrollo de biocombustibles evaluando la conversión de variedades de maíces cultivados en la región centro de la provincia del Chaco a bioetanol, mediante el manejo de parámetros específicos que contribuyen a la optimización de su rendimiento. El proceso llevado a cabo para ello se describe en detalle a lo largo del trabajo. Marco Teórico Bioetanol Los alcoholes son compuestos orgánicos de formula R-OH, donde R es cualquier grupo alquilo y –OH el grupo “hidroxilo”. El alcohol etílico o etanol, de fórmula C2H5OH, es un líquido volátil, móvil, transparente e incoloro, de aroma agradable y característico. Este compuesto orgánico puede utilizarse como combustible en automóviles sin establecer mezclas o mezclado con naftas en cantidades variables. El bioetanol, destinado como fuente de energía, se produce a través de la fermentación de los carbohidratos (Glúcidos) contenidos en la materia orgánica de las plantas, estructuralmente presentes en forma de sacarosa, almidón, hemicelulosa y celulosa. A través de este proceso se obtiene el alcohol hidratado, con un contenido aproximado del 5 % de agua, que tras ser deshidratado se puede utilizar como combustible. Hidrolisis Fermentación Almidón Glucosa Etanol Mediante la fermentación directa de productos azucarados: Enzimas C6H12O6 2CH3CH2OH (l) + 2CO2 El bioetanol puro o mezclado con componentes derivados del petróleo constituye un biocombustible de alto poder energético con características muy similares a los combustibles de origen fósil pero con una importante reducción de las emisiones contaminantes en los motores tradicionales de combustión. Maíz El maíz, como materia prima para la generación de biocombustibles, posee la capacidad de convertirse en la principal fuente de conversión, debido a su disponibilidad, amplia capacidad de adaptación, como así también al elevado rendimiento que este presenta actualmente frente a otros cultivos, sumado a esto, el futuro desarrollo de nuevas variedades genéticamente modificadas orientadas a la producción de energía. El grano de maíz tiene 3 componentes principales almidón, proteína y aceite, los cuales están contenidos en tres estructuras: el germen (embrión), el endospermo y el pericarpio. Teniendo presente su composición estructural, el almidón es el principal componente del grano de maíz y por lo tanto influye en la funcionalidad que este presenta en los diferentes procesos industriales donde se lo utiliza. El almidón del maíz está formado por dos tipos de moléculas, la amilosa y la amilopectina, ambos son polímeros de unidades α – D – (+) glucosa. Estas se encuentran en proporciones diferentes de acuerdo a las diferentes especies de maíz, como así también, el porcentaje de almidón presente en el grano. Estas diferencias de especie hacen que el rendimiento en la obtención de bioetanol también varíe por lo cual es de suma importancia conocer las especies que presenten un mayor rendimiento en la conversión de almidón a bioetanol. Materiales y Métodos Para el análisis del proceso de obtención de bioetanol se llevaron a cabo las siguientes actividades: Molienda: Se molieron muestra de diferentes maíces aportados por la Estación experimental INTA Saenz Peña (E.E.A) y la empresa Agrolatina S.R.L., recolectados en campos de la zona centro de la Provincia del Chaco. Proceso efectuado con molinillo a cuchillas. Tamizado: en un tamiz de 2 mm para obtener una muestra de tamaño uniforme. Determinación del porcentaje de almidón en la muestra: se realizó la determinación mediante el método de Bertrand. En él cual se utilizó la técnica 920.44 para la hidrólisis ácida del almidón y la 906.03 para la precipitación y cuantificación del óxido de cobre (AOAC, 1988) Hidrolisis del almidón: se realizó la hidrolisis del almidón de los granos de maíz, para convertirlo en glucosa, mediante un método de hidrolisis enzimática utilizando las enzimas alfa y beta amilasa presentes en la cebada malteada. Para lo cual se prepara una suspensión de maíz molido en agua y se ensaya la hidrólisis con diferentes cantidades de cebada para determinar la concentración de enzima más eficiente. Fermentación: el almidón hidrolizado con las enzimas de la cebada, se fermenta utilizando levadura comercial en condiciones anaerobias para obtener etanol. Se ensaya con diferentes concentraciones de levadura para obtener la de mayor eficiencia en la fermentación. Destilación: se efectuó la separación del etanol mediante un equipo de destilación fraccionada Determinación de la concentración de etanol: se realizó midiendo grados Brix de diferentes soluciones de alcohol obtenidas mediante un refractómetro de ABBE. Discusiones Los resultados obtenidos se muestran en las siguientes tablas y gráficos. Tabla Nº 1. Contenido de almidón por especie. Especie de Peso de Muestra (g) Almidón (%) DKB299 5,00 63 474V13 5,02 72 B67049 5,00 68 SY138 5,05 70 INTA2012 4,98 66 P30B39 5,00 81 DM1820 5,00 73 maíz Fuente: Elaboración propia De los valores observados en la Tabla Nº 1 se puede establecer que contenidos de almidón de las especies difieren en valores cercanos al 70 %. Estos datos fueron utilizados posteriormente para determinar los rendimientos de los procesos de hidrolisis y fermentación. Luego de moler la muestra se continuó con el proceso de hidrolisis enzimática del almidón. Se utilizó como fuente de enzima los granos molidos de cebada malteada. Para determinar la relación optima entre gramos de maíz y gramos de cebada se realizaron ensayos con 30 gramos de muestra de maíz de cada una de las especies y se hidrolizaron con diferentes cantidades de cebada. Una vez que se completó la hidrolisis se determinó la cantidad de azúcar producida a partir de la conversión de almidón en glucosa y conociendo el porcentaje de almidón se pudo calcular el rendimiento teórico de la hidrolisis para cada ensayo. Los datos recogidos se encuentran en la Tabla Nº 2. Y en la Figura Nº 1 se puede apreciar la variación por especie de los rendimientos de la hidrolisis de acuerdo a los gramos de cebada utilizada. Tabla Nº 2. Rendimiento de hidrolisis por gramo de cebada utilizada Especie Gramos de cebada 10 gr 15 gr 20 gr 25 gr 30 gr DKB299 54,00 % 58,00 % 60,60 % 56,00 % 50,10 % 474V13 55,00 % 58,00 % 53,00 % 54,00 % 52,00 % B67049 51,00 % 55,00 % 52,00 % 52,00 % 49,00 % SY138 54,00 % 57,00 % 54,00 % 52,00 % 50,00 % INTA2012 54,00 % 57,00 % 54,00 % 52,00 % 50,00 % P30B39 58,00 % 65,00 % 59,00 % 58,00 % 55,00 % DM1820 57,00 % 65,00 % 63,00 % 56,00 % 52,00 % Fuente: Elaboración propia Figura Nº 1. Rendimiento de hidrolisis por gramo de cebada para cada especie Rendimiento de hidrólisis por Especie 70,00% 60,00% 50,00% 10 40,00% 15 30,00% 20 25 20,00% 30 10,00% 0,00% DKB299 474V13 B67049 SY138 INTA2012 P30B39 DM1820 Fuente: Elaboración propia Otro punto importante era conocer la concentración óptima que maximice los rendimientos de la fermentación. Por lo tanto se realizó la fermentación del almidón hidrolizado en los pasos anteriores para poder determinar la concentración de levadura óptima comparando los rendimientos en etanol obtenidos. Los resultados se observan en la Tabla Nº 3 y en la Figura Nº 2. Tabla Nº 3. Rendimientos de la fermentación en relación con la cantidad de levadura utilizada Concentración de levadura % Brix Índice de % V/V % p/v % p/v Refracción (20ºC) [g/100 ml] [g/l] 0,008 gr/ml 0,1 1,33 0,16 0,11 1,13 0,016 gr/ml 0,6 1,33 1,79 1,42 14,24 0,024 gr/ml 1,6 1,34 4,65 3,72 37,23 0,032 gr/ml 2,4 1,34 6,88 5,52 55,22 0,04 gr/ml 2,5 1,34 7,16 5,75 57,47 0,048 gr/ml 2,5 1,34 7,16 5,75 57,68 0,056 gr/ml 2,3 1,34 6,59 5,29 52,9 0,08 gr/ml 2,5 1,34 7,16 5,75 57,47 Fuente: Elaboración propia Figura Nº 2. Concentración de etanol vs levadura utilizada Gráfica de dispersión de concentración de vs. Gramos de levadu concentración de alcohol obteni 60 50 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 Gramos de levadura Fuente: Elaboración propia 12 14 16 Una vez que se determinó la concentración de cebada y de levadura a utilizar se procedió a realizar el proceso completo de obtención de etanol para cada muestra de maíz. Obteniéndose los valores de la Tabla Nº 4. En los cuales se puede apreciar la concentración en g/l que se obtuvo para cada especie ensayada. Tabla Nº 4. Concentración de etanol obtenida por especie de maíz Concentración Concentración Rendimiento de etanol (g/l) teórica (%) 2,5 10,775709 20,5333333 52 474V13 2,55 12,0158092 23,4666667 51 B67049 2,43 13,2559095 22,162963 59 SY138 2,48 14,3409972 22,8148148 62 INTA2012 2,5 15,5810974 21,5111111 59 P30B39 3 16,8211976 26,4 63 DM1820 2,9 16,0612978 23,7925926 63 Especie ° Brix DKB299 Conclusión Con base a los resultados presentados se puede inferir que el maíz es una excelente materia prima para la producción de bioetanol y presenta la posibilidad de convertirse en una alternativa mas para el desarrollo de los biocombustibles. Como se menciona a lo largo del reporte, se obtuvo etanol a partir de maíz evaluando los diferentes parámetros involucrados y realizando una puesta a punto en las etapas de hidrolisis y fermentación donde se pudo determinar los siguientes puntos. La relación entre la cantidad de cebada utilizada y la cantidad de maíz con la cual se obtiene mayor rendimiento es de 1 a 2. Es decir es necesario agregar la mitad de cebada que de maíz para obtener los mejores rendimientos en la hidrolisis. La concentración óptima de levadura a utilizar es de 0,04 gr/l. Con dicha concentración se obtuvieron los mejores rendimientos de conversión. De análisis, determinaciones y evaluaciones efectuadas, podemos indicar, que la especie P30B39 fue la que presento mejor rendimiento en la obtención de etanol. A si mismo esta especie fue también la que exhibió mayor porcentaje de concentración de almidón. Por lo tanto se puede reconocer una relación entre estos resultados. 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