INSTRUCCIONES DE USO Revisión 0 Abril 2010 AGAR DCLS (DESOXYCOLATO,CITRATO, LACTOSA, SACAROSA) Agar DCLS (Desoxycolato, Citrato, Lactosa, Sacarosa) presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1045 USO PREVISTO Agar DCLS es un medio moderamente selectivo diferencial recomendado para el aislamiento de Salmonella, Shigella y vibriones de cólera a partir de muestras de heces. FORMULA EN g/l Citrato Sódico 10.50 Extracto Carne 3.00 Proteosa Peptona 7.00 Desoxycolato Sódico 2.50 Tiosulfato Sódico 5.00 Rojo Neutro 0.03 Lactosa 5.00 Agar Bacteriológico Sacarosa 5.00 12.00 Final pH 7.2 ± 0.2 a 25ºC PREPARACION Agar DCLS (Desoxycolato, Citrato, Lactosa, Sacarosa) presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1045 (Medio deshidratado) Suspender 50 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar agitando frecuentemente y dejar hervir durante un minuto o hasta disolución completa. EVITAR SOBRECALENTAMIENTO. NO AUTOCLAVAR. Dejar enfriar hasta 45- 50 °C y distribuir en placas de Petri. Las placas preparadas deben almacenarse entre 8-15°C. El color del medio preparado es naranja-rojo El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. PRINCIPIO Y APLICACION DCLS AGAR es un medio selectivo para aislamiento primario de Salmonella y Shigella de muestras fecales. Los organismos Gram positivos, Coliformes y Proteus están parcialmente o completamente inhibidos por el Citrato sódico, el Tiosulfato sódico y el Desoxycolato sódico. La Proteosa peptona y el Extracto de carne aportan, nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. La lactosa y la Sacarosa son los hidratos de carbono fermentables, proporcionando carbono y energía. El Rojo neutro es el indicador de pH. Agar bacteriológico es el agente solidificante. Algunos coliformes fermentan la sacarosa con mayor facilidad que la lactosa. La adición de sacarosa permite la diferenciación entre patógenos entéricos tales como la Salmonella no fermentadora y los microorganismos no patógenos fermentadores de sacarosa. TIPO DE MUESTRAS Heces La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com PROCEDIMIENTO 1.- Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo. La inoculación también se puede hacer a partir de un cultivo de preenriquecimiento. 2.- Incubar a 35 ±2 ºC durante 18-24 horas 3.- Lectura e interpretación de los resultados Colonias rojas: Coliformes Colonias transparentes, incoloras o rosa claro: Salmonella, Shigella La mayoría de Shigellas producen colonias incoloras, pero algunas cepas de S. Flexneri, así como otras especies de Shigella, crecen rápidamente dando colonias que son rosa claro pero que se distinguen fácilmente de Proteus o de Coliformes. Si se sospecha de Salmonella o Shigella, las colonias deben ser subcultivadas en otros medios para su identificación como por ejemplo Agar Hierro de Kligler (Cat.1042) CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 18-24 horas. Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Salmonella choleraesuis ATCC 13312 Salmonella enteritidis ATCC 13076 Proteus vulgaris ATCC 13315 Desarrollo Color Colonia Precipitado Inhibido Bueno Bueno Bueno Moderado Rosa-rojo Incolora/rosa claro Incolora/rosa claro Incolora / rosa claro Incolora /rosa ± BIBLIOGRAFIA Hajna A.A. - J. Bact. 1945. 40: 516-517. Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación. Utilizable hasta la fecha de caducidad. 25ºC 2ºC Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com