ISSN “en trámite” Congreso Internacional “CUCCAL” “Sobre Inocuidad, Calidad y Funcionalidad de Alimentos en la Industria y Servicios de Alimentación” Hacia una Cultura de Calidad en el Consumo de Alimentos. Del 4 al 8 de Noviembre, 2013. Hotel Oasis y Hotel Grand Oasis Cancún, Quintana Roo, México. México D.F.13 de Enero del 2014 INDICE Nombre del trabajo Pág. OPTIMIZACIÓN DEL SECADO CONVECTIVO DE CHILE (Capsicum annuum L.) VARIEDAD POBLANO ENTERO (In extenso) 1 ACTIVIDAD VOLATIL DE ACEITES ESENCIALES DE DOS ESPECIES DE EUCALYPTUS SOBRE Rhyzopertha dominica (COLEOPTERA: BOSTRICHIDAE) Y SU EFECTO EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE PROGENIES" (In extenso) 6 PUNTOS CRÍTICOS DE CONTROL EN EL EMPAQUE DE MANGO ATAULFO DE EXPORTACIÓN (In extenso) 11 EFECTO DE LA FUERZA IÓNICA SOBRE LA REMOCIÓN DE PROTEÍNA SOLUBLE DEL MANTO DE CALAMAR GIGANTE (Dosidicus gigas) Y EVALUACIÓN FUNCIONAL DE LAS PROTEÍNAS INSOLUBLES (Resumen) 16 EVALUACIÓN DE LA ESTABILIDAD FISICOQUÍMICA EN SOPA A BASE DE ALMIDÓN DE BANANO GRAN ENANO Y CALABAZA Cucurbita maxima) (In extenso) 17 PROPIEDADES TERMOFÍSICAS DE FLORETES DE BRÓCOLI (Brassica oleracea L.) (In extenso) 20 CALIDAD SANITARIA DE PRODUCTOS ELABORADOS EN UNA INDUSTRIA DE LACTEOS (In extenso) 26 DISPONIBILIDAD DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN LA DIGESTIÓN In vitro DE EXTRACTOS DE TALLOS DE Vitex mollis (Resumen) 35 EFECTO DEL CONSUMO DE CEREALES COMERCIALES PARA DESAYUNO ALTOS EN FIBRA SOBRE LA DIGESTIBILIDAD Y UTILIZACIÓN DE LA PROTEÍNA MEDIANTE BIOENSAYOS EN RATAS. (In extenso) 36 “EVALUACIÓN DE LA CALIDAD Y VIDA DE ANAQUEL DEL MÚSCULO DE CAMARÓN AZUL (Litopenaeus stylirostris) DURANTE EL ALMACENAMIENTO EN HIELO” (Resumen) 41 PERFIL DE COMPUESTOS FENÓLICOS Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE EXTRACTOS DE CASCARILLA DE Jatropha curcas NO TÓXICA (Resumen) 42 EFECTO DE LA TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO SOBRE EL RIGOR MORTIS Y LA CALIDAD DEL FILETE DE TILAPIA (Resumen) 43 INFLUENCIA DE LA FUNCIONALIDAD DE MEZCLAS DE PROTEÍNAS SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS DE ESTABILIDAD Y TEXTURA EN SALCHICHAS ELABORADAS CON SETAS Y CARNE DE CONEJO (In extenso) 44 COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL ACEITE CRUDO DE SEMILLAS DE MAMEY (Pouteria sapota) Y CALABAZA (Cucurbita spp.) CULTIVADAS EN YUCATÁN. (In extenso) 50 APLICACIÓN DE LAS MICROONDAS EN LA DESHIDRATACIÓN DE ALIMENTOS (In extenso) 55 PRODUCCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DE DESECHOS AGROINDUSTRIALES (In extenso) 61 PRODUCTOS SECOS TIPO BOTANA A PARTIR DE MANTO DE CALAMAR GIGANTE (Dosidicus gigas) (Resumen) 68 IMPACTO DE DOS MÉTODOS COMERCIALES DE TRANSPORTE EN VIVO SOBRE LA CONDICIÓN FISIOLÓGICA DEL OSTIÓN JAPÓNES (CRASSOSTREA GIGAS) (Resumen) 69 COMPUESTOS BIOACTIVOS DE FRUTAS TROPICALES CULTIVADOS EN YUCATÁN. (In extenso) 70 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE UNA BEBIDA FUNCIONAL (In extenso) 77 IDENTIFICACIÓN DE COMPUESTOS POLIFENÓLICOS POR CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN EN MIELES PROCEDENTES DEL ESTADO DE TABASCO (In extenso) 82 LECHUGA (Lactuca sativa): ESTUDIO DE INACTIVACIÓN DE FORMAS PARASITARIAS ALOJADAS EN LA SUPERFICIE DE SUS HOJAS (In extenso) 87 LECHUGA (Lactuca sativa): ESTUDIO CON MICROSCOPÍA ELECTRONICA DEL EFECTO DE AGENTES DESINFECTANTES SOBRE FORMAS PARASITARIAS Y SOBRE LA SUPERFICIE DE HOJAS DE LECHUGA. (In extenso) 92 ELABORACIÓN DE UNA GOLOSINA GELIFICADA CON ANTIOXIDANTES A BASE DE CONCENTRADO DE UVA (In extenso) 98 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN CONJUNTA DE BACILLUS COAGULANS Y LACTOBACILLUS RHAMNOSUS EN LOS NIVELES DE COLESTEROL, TRIGLICÉRIDOS Y GLUCOSA EN RATONES ALIMENTADOS CON DIETA ALTA EN GRASA (In extenso) 104 EFECTO BIOLÓGICO DE LA SUPLEMENTACIÓN DE OMEGA-3 DE SEMILLA DE CHÍA EN UN MODELO MURINO ALIMENTADO CON UNA DIETA ALTA EN ACEITE DE FRITURAS. (In extenso) 109 INFLUENCIA DE LA TALLA Y TRATAMIENTO EN EL GRADO DE DESACETILACIÓN DE QUITOSANO DE LANGOSTINO (In extenso) 114 Evaluación de la incidencia de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Salmonella sp y E. coli en camarón crudo muestreado en expendios y restaurantes en Mazatlán, Sinaloa (In extenso) 119 APLICACIÓN EN PRODUCTOS FRITOS DE PELÍCULAS Y RECUBRIMIENTOS A BASE 125 DE BIOPOLÍMEROS. (In extenso) SALADO DE CARNE DE CERDO (Longissimusdorsi) POR DESHIDRATACIÓN OSMÓTICA PRETRATADA CON CONGELACIÓN (In extenso) 133 ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE HIDROLIZADOS ENZIMÁTICOS DE COLÁGENO A PARTIR DE SUBPRODUCTOS DE CALAMAR GIGANTE (Dosidicus gigas) (Resumen) 139 FUENTES DE ÁCIDOS GRASOS PARA MEJORAR LA CALIDAD DE LA CARNE DEL 140 CERDO PELÓN MEXICANO (In extenso) EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE LAS PROTEÍNAS DE RESERVA DE LA NUEZ (Carya Illinoenensis) (In extenso) 145 IDENTIFICACIÓN DE PÉPTIDOS CON POTENCIAL ANTICARCINOGENICO EN PROTEÍNAS DE RESERVA DE LA NUEZ (CARYA ILLINOINENSIS) (In extenso) 151 CONSERVACIÓN DE BEBIDAS ELABORADAS CON LECHE Y MAÍZ (Resumen) 156 CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN SEMILLAS DE AMARANTO (Amaranthus hypochondriacus) EN FUNCIÓN DEL MÉTODO, EL DISOLVENTE Y EL TIEMPO DE EXTRACCIÓN (Resumen) 157 ENRIQUECIMIENTO DE QUESO DE SAL (QUESO FRESCO) CON PROTEÍNA VEGETAL EXTRAÍDA DE SOYA (Glycine max) EN EL INSTITUTO TECNOLÓGICO SUPERIOR DE CINTALAPA. (In extenso) 158 “DESARROLLO Y ESTANDARIZACIÓN DE LA TECNOLOGÍA PARA LA ELABORACIÓN DE PASTAS ALIMENTICIAS CON HOJA DE CHIPILIN (CROTALARIA LONGIROSTRATA)” (In extenso) 160 MICROESTRUCTURA Y ANALISIS MICROBIOLOGICO DE UN RECUBRIMIENTO COMESTIBLE A BASE DE QUITOSANO APLICADO A FRESA (In extenso) 165 CARNE DE CORDEROS ALIMENTADOS CON ANTIOXIDANTES NATURALES EN LA DIETA (In extenso) 171 SÍNTESIS Y CARACTERIZACIÓN DE CARBOXIMETILCELULOSA DE RESIDUOS LIGNOCELULÓSICOS DE AVENA Y CEBADA (In extenso) 176 INCIDENCIA DE ENFERMEDADES GASTROINTESTINALES EN ALUMNOS DE LA DICIVA POR MALAS PRÁCTICASDE HIGIENE EN LOS EXPENDIOS DE COMIDA (In extenso) 182 EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD QUELANTE MEDIANTE SISTEMAS MODELOS (AMINOÁCIDO-AZÚCAR) COMO PRECURSORES DE LOS PRM IMPLICADOS EN LOS ALIMENTOS (In extenso) 191 EVALUACIÓN DEL ÍNDICE GLICÉMICO DE MALTODEXTRINAS ENZIMÁTICAMENTE RESISTENTES DE YUCA Y SU INCORPORACIÓN EN LA FORMULACIÓN DE PAN BLANCO (In extenso) 196 Efecto del procesamiento sobre la concentración de linamarina en yuca (Manihot esculenta Crantz) (In extenso) 201 MUCILAGO DE NOPAL PARA EL CONTROL DE ANTRACNOSIS EN PAPAYA (CARICA PAPAYA VAR. MARADOL). (In extenso) 207 RESIDUOS AGROINDUSTRIALES: PUNTOS CRÍTICOS QUE LIMITAN SU APLICACIÓN COMO PRODUCTOS DE ALTO VALOR AGREGADO (Resumen) 213 BIOACTIVE DIPEPTIDES IN MEAT AND MEAT PRODUCTS (In extenso) 214 ESTUDIO DE FACTORES DE PATOGENICIDAD EN CEPAS DE Streptococcus AISLADAS DEL POZOL (In extenso) 219 EVALUACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE LAS ENZIMAS SINTASAS I, III Y LA UNIDA AL GRÁNULO DE ALMIDÓN EN GRANO DE TRIGO SEMBRADO CON Y SIN PANZA BLANCA. (Resumen) 222 PROPIEDADES VISCOELÁSTICAS EN MASA PARA CROISSANTS: EFECTO DE LA TEMPERATURA DE AMASADO (In extenso) 223 EFECTO DE LEVADURA (saccharomyces cerevisiae) Y ALMACENAMIENTO CONGELADO SOBRE TEXTURA, VOLUMEN Y PÉRDIDA DE PESO EN MASA INTEGRAL PARA PAN DULCE. (Resumen) 227 VALIDACIÓN DEL MÉTODO DE PLACAS 3M™ PETRIFILM™ FRENTE AL MÉTODO TRADICIONAL PARA EL RECUENTO DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS EN PRODUCTO CÁRNICOS PROCESADOS MEXICANOS. (In extenso) 228 EVALUACIÓN DE CALIDAD DE TOMATE (Lyopersicon esculentum) DE TRES VARIEDADES COMERCIALES MEDIANTE TÉCNICA DE INJERTO Y PODA DE FRUTOS. (Resumen) 232 ESTUDIO DE LAS CONDICIONES HIGIÉNICO-SANITARIAS EN TORTILLERÍAS (In extenso) 233 CONTENIDO DE LICOPENO EN ALIMENTOS DE USO COTIDIANO PARA UNA DIETA HIPOLIPEMIANTE (In extenso) 238 EFECTO DEL GRUPO GENÉTICO SOBRE LA COMPOSICIÓN DE ÁCIDOS GRASOS DE LA CARNE DE OVINOS DE PELO EN EL ESTADO DE YUCATÁN (In extenso) 243 INOCUIDAD EN EL PROCESO DE SACRIFICIO DE AVES (In extenso) 248 PRINCIPALES COMPONENTES DEL EXTRACTO CLOROFÓRMICO DEL HONGO COMESTIBLE Agaricus subrufescens (In extenso) 253 IMPLEMENTACIÓN DEL ESTANDAR GLOBAL DE SEGURIDAD EN ALIMENTOS BRC EN LA CADENA DE SUMINISTRO DE BOTANAS (In extenso) 258 SISTEMA DOCUMENTAL PARA LA IMPLEMENTACIÓN DE LA NORMA ISO 22000:2005 EN UNA EMPRESA EMBOTELLADORA DE BEBIDAS CARBONATADAS (In extenso) 261 CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS DE QUITINA Y QUITOSANO OBTENIDOS A PARTIR DE LANGOSTA DE RIO (Cherax quadricarinatus) (In extenso) 264 PROPIEDADES ÓPTICAS, MECÁNICAS Y DE BARRERA DE PELÍCULAS A BASE DE QUITOSANOS OBTENIDOS DE LANGOSTA DE RIO (Cherax quadricarinatus) (In extenso) 269 AISLAMIENTO DE CEPAS DE Salmonella RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS A PARTIR DE CARNE CRUDA (In extenso) 274 EFECTO DE LA EXTRACCIÓN SECUENCIAL DE LAS FRACCIONES PROTEICAS EN LAS PROPIEDADES TÉRMICAS DE LA HARINA DE MAÍZ NIXTAMALIZADA (In extenso) 279 PROPUESTA DE MUROS VERDES CON PRODUCTOS ORGÁNICOS PARA RESTAURANTES Y HOGARES. (In extenso) 283 Diferencias en la capacidad antioxidante de dos tipos de extracto de ginkgo biloba (In extenso) 286 INHIBICIÓN DEL SISTEMA RENINA ANGIOTENSINA POR FRACCIONES PEPTÍDICAS DE FRIJOL TERCIOPELO (Mucuna pruriens) (In extenso) 293 “CARACTERIZACIÓN QUÍMICA Y FUNCIONAL DE HOJAS DE Stevia rebaudiana PROVENIENTES DE LA PENINSULA DE YUCATÁN” (In extenso) 298 ELABOPRACION DE UN DULCE DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris. L) DIRIGIDO A NIÑOS 302 DE PRIMARIA ADICIONADO CON FIBRA. (In extenso) Elaboración de productos tipo cajeta con adición de amaranto, soya o frijol para niños de primaria. (Resumen) 315 SPIROTETRAMAT UNA ALTERNATIVA PARA EL CONTROL DEL PIOJO HARINOSO (Planococcus ficus) EN VID (Resumen) 316 EFFECTO DEL ULTRASONIDO DE POTENCIA SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS DEL MÚSCULO L. DORSI DE RES (Resumen) 317 “APROVECHAMIENTO DEL SUERO LÁCTEO PARA LA OBTENCIÓN DE UN PRODUCTO ALIMENTICIO EN LA REGIÓN VALLE DE CHIAPAS, MÉXICO.” (In extenso) 318 “PAPEL DE UN QUÍMICO DE ALIMENTOS EN EL DESARROLLO Y GESTIÓN DE UN ESTABLECIMIENTO DE COMIDA RÁPIDA” (In extenso) 325 CONFITES CON ANTIOXIDANTES (In extenso) 331 POSTRES FRIOS FUNCIONALES (In extenso) 336 EFECTO DE LA INCLUSIÓN DE SUBPRODUCTOS DE MANGO Y UN EXTRACTO DE JAMAICA SOBRE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE UN ALIMENTO PARA TILAPIA (In extenso) 339 EFFECT OF GRAIN SORGHUM ON BLOOD GLUCOSE AND INSULIN RESPONSES (Resumen) 343 “ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE LOS PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS DEL QUESO DE PORO” (In extenso) 344 “ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE LOS PARÁMETROS FÍSICO-QUÍMICO, MICROBIOLÓGICO Y SENSORIAL DEL QUESO DE PORO ELABORADO EN EL MUNICIPIO DE BALANCÁN” (Resumen) 349 DETERMINACION DE CAPSAICINA EN CHILE MIRASOL MEDIANTE CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCION Y ESPECTOMETRIA DE MASAS (In extenso) 350 AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE THERMOPHILUS DEL SUERO DE LECHE PARA LA SUSTITUCIÓN DE CULTIVOS LÁCTICOS EN LA ELABORACIÓN DE QUESO TIPO CHIHUAHUA. (In extenso) 355 "CONTENIDO FENÓLICO DE LA CHÍA (SALVIA HISPÁNICA L.)". (In extenso) 360 EL PROYECTO INVESTIGATIVO EN EL APRENDIZAJE DE LA CIENCIA DE LOS ALIMENTOS. (In extenso) 365 EFECTO ANTIMICROBIANO DEL QUITOSANO Y OLIGOQUITOSANOS SOBRE MUESTRAS DE MICROORGANISMOS AISLADOS DE EMBUTIDOS CÁRNICOS (In extenso) 370 “DIAGNÓSTICO DE LAS NECESIDADES EN MATERIA DE PROCESAMIENTO Y VENTA DE ALIMENTOS EN TEOCELO, VERACRUZ” (In extenso) 375 INFORMACIÓN LEGAL. 387 OPTIMIZACIÓN DEL SECADO CONVECTIVO DE CHILE (Capsicum annuum L.) VARIEDAD POBLANO ENTERO IBQ. Yessica Viridiana Vázquez López, MC. Jorge A. Zazueta Niebla, Dr. José de Jesús Caro Corrales, Dr. Roberto Gutiérrez Dorado. Universidad Autónoma de Sinaloa, Maestría en Ciencia y Tecnología de Alimentos, México. Ave. De las Américas S/N C.U. Posgrado. Email: [email protected]. Palabras clave: Secado, optimización, chile poblano Objetivo general El objetivo es optimar el secado convectivo de chiles (Capsicum annuum L.) poblanos verdes enteros, pelados, sin semillas y deshidratados con base en parámetros fisicoquímicos. Objetivos específicos Realizar un estudio preliminar para definir las condiciones de inactivación enzimática y empleo de aditivos. Obtener chiles poblanos verdes enteros, pelados, sin semillas y deshidratados por secado convectivo aplicando diferentes condiciones de proceso. Optimizar, con base en parámetros fisicoquímicos para obtener las mejores condiciones de proceso. Resumen La deshidratación de alimentos es una técnica de conservación que permite estabilizar el alimento química y microbiológicamente. Se utilizó metodología de superficie de respuesta para optimar con base en parámetros fisicoquímicos [firmeza (F), diferencia total de color (ΔE), encogimiento (%E) e índice de rehidratación (%IR)]. Se empleó un diseño de composición central rotable con cinco niveles de variación. Las variables de proceso (niveles bajo y alto) fueron: temperatura (39.6 y 75.2°C) y velocidad del aire (0.8 y 2.2 m/s). Las muestras fueron escaldadas a fuego directo durante 6 minutos, enseguida se sumergieron en una disolución acuosa de CaCl2 (1%) y Na2S2O5 (0.3%) durante 10 minutos a 25°C. En firmeza se midió la fuerza de compresión necesaria para penetrar el tejido; para diferencia total de color se midieron los parámetros L, a, y b en chiles deshidratados y rehidratados, empleando como referencia chiles escaldados-pelados; y el encogimiento por diferencia de volúmenes entre chiles escaldados-pelados y deshidratados, utilizando tolueno como fluido desplazante; el índice de rehidratación se calculó a partir de la masa de agua adsorbida y la masa de la muestra deshidratada. Los valores para F, ΔE, %E, %IR se encontraron en un rango de: 10.6N a 52.3N, 8.4 a 11.6, 92% a 94% 211.7% a 312.6%, respectivamente. Para firmeza e índice de rehidratación se obtuvieron modelos de predicción adecuados. Se obtuvieron dos conjuntos de condiciones óptimas, (39.5 °C, 2.3 m/s) y (39.5°C, 0.79 m/s). Metodología Se empleó chile (Capsicum annuum L) variedad poblano, adquirido en el mercado de abastos de la ciudad de Culiacán, Sinaloa. Se seleccionaron aquellos chiles que reunían las características de madurez uniforme (color, dureza, forma y tamaño), libres de defectos, finalmente fueron lavados con agua. 1|Página Posteriormente a los chiles se les retiró pedúnculo y placenta. El escalado de los chiles se realizó a fuego directo durante un tiempo aproximado de 6 minutos, empleando un mini asador con una altura de 9 centímetros desde la estufa. Los chiles fueron colocados en bolsas de plástico con un tiempo de reposo de 30 minutos para facilitar el pelado. Una vez pelados los chiles se llevó a cabo un corte transversal para facilitar el flujo de aire sobre las muestras. Los chiles fueron sumergidos por diez minutos en una solución que contenía 1 % de cloruro de sodio y 0.3 % metabisulfito de sodio a 25°C (1), para conservar el color característico de las muestras y contribuir en la firmeza de los chiles. Finalmente, los chiles fueron colocados en mallas de alambre (orificios de 4x4 milímetros) sujetados con cinchos de plástico para mantener la forma de los chiles e introducidos al secador de túnel (2). Se aplicaron 13 tratamientos de secado acorde con un diseño experimental de composición central rotable con cinco niveles de variación. Las variables de proceso (niveles bajo y alto) fueron: temperatura (39.6 y 75.2°C) y velocidad del aire (0.8 y 2.2 m/s) y las variables de respuesta fueron parámetros fisicoquímicos [firmeza (F), diferencia total de color (ΔE), encogimiento (%E) e índice de rehidratación (%IR)] (3). La actividad de agua se midió empleando un higrómetro electrónico de punto de rocío Decagon CX-2 (Pullman, EUA) previamente calibrado con agua destilada neutra (a w=1.00) y una solución sobresaturada de NH4NO3 que generó una humedad relativa de 0.5 a 25°C. La medición se realizó en muestras deshidratadas a diferentes condiciones de proceso, con la finalidad de determinar el tiempo necesario en el que las muestras alcanzan un valor a w de 0.6 (4). Para evaluar la firmeza se midió la fuerza de compresión máxima, expresada en Newtons, utilizando un texturómetro universal Instron 3342 (USA) con una punta cónica de 9 mm de diámetro y velocidad de penetración constante de 2 mm/s (5). La ΔE se calculó empleando la siguiente expresión (6): 1/2 ΔE = [( L ¿− Lr )2 +(a ¿− a r )2 +( b¿− b r ) 2 ] ¿ ¿ ¿ Para medir los parámetros de color L, a, y b en las muestras frescas y deshidratadas, se empleó un colorímetro triestímulo Minolta CR-200 (Osaka, Japón), calibrado con los valores Y=93.5 x=.3139 y=.3196. Donde el subíndice r se refiere a las muestras de referencia que corresponden al chile escaldado, pelado y sin deshidratar. El porcentaje de encogimiento se calculó a partir de la razón entre la reducción del volumen de la muestra deshidratada (f) y el volumen de la muestra fresca (i) (7). V −V f E= i × 100 Vi El volumen de las muestras frescas y deshidratadas se determinó por desplazamiento de tolueno dentro de una probeta de 50mL. El porcentaje de índice de rehidratación se calculó a 2|Página partir de la razón entre el incremento de masa en la muestra rehidratada (f) y la masa de la muestra deshidratada (i). IR= m f − mi × 100 mi Las muestras secas se sumergieron en agua a 40ºC durante 30 minutos, posteriormente fueron retiradas y colocadas en papel secante para eliminar el exceso de agua superficial (8). Se empleó metodología de superficie de respuesta para llevar a cabo la optimización con base en parámetros fisicoquímicos (9). Se aplicó el método numérico para la optimización del secado, con la finalidad de encontrar una combinación idónea de los niveles de las variables de proceso. La optimización se realizó con base a los siguientes criterios: valores máximos de F e IR. Resultados Los resultados de las variables de respuesta en función de la velocidad de aire y la temperatura de secado se presentan en la Figura 1. a c b d Figura 1. Gráficas de superficie de respuesta, mostrando el efecto de la velocidad del aire y temperatura de secado sobre: firmeza (a), ΔE (b), %E (c) y %IR (d) de chile poblano verde secado. 3|Página Análisis Los valores de firmeza de chiles deshidratados se encontraron en un rango de 10.6N a 52.3N (Fig. 1a). El modelo de predicción obtenido para la firmeza después de eliminar los términos no significativos fue: F= 33.20-14.67T-5.98V2, el cual puede explicar 94% de la variación de los datos experimentales. Es evidente que el mayor efecto lo induce la temperatura. La firmeza es un indicador muy importante de la calidad del alimento (10), el valor máximo de F (52.3 N), corresponde al tratamiento de 39.5 °C y 1.5 m/s (Fig. 1a), lo cual puede atribuirse, a que bajo estas condiciones se causó menor daño celular, conservando la integridad estructural del alimento, en consecuencia la fuerza necesaria para penetrar el alimento fue mayor (11). Los valores experimentales de ΔE para chiles deshidratados estuvieron en un rango de: 8.5 a 14.2. Al llevar a cabo el análisis de regresión de los datos no fue posible ajustar un modelo de predicción adecuado ya que no mostró una dependencia significativa de los términos de la temperatura y velocidad del aire (Fig. 1c), es por esto que no será considerado dentro de los criterios para el proceso de optimización. Los valores experimentales obtenidos para %E fueron altos, 92.1 a 94.5% (Fig. 1d). El análisis de regresión de los datos no indicó una dependencia significativa de los términos de la temperatura y velocidad del aire. El intervalo de los valores obtenidos es muy pequeño, por lo tanto los resultados obtenidos son favorables ya que a cualquier condición de proceso que se desee trabajar se obtendrán %E muy parecidos. Por lo tanto esta variable no será considerada dentro de los criterios para el proceso de optimización. Los valores obtenidos para IR se encontraron en un rango de 212 a 313%. El modelo de predicción después de eliminar los términos no significativos, presenta un comportamiento cuadrático: IR= 220.77+28.62T+22.04T2+28.12V2 el cual puede explicar 93% de la variación de los datos experimentales. Para este trabajo, el valor que interesaba fue el máximo de IR (313%), el cual corresponde a las condiciones de proceso 70 °C y 2 m/s (Fig. 1b). La temperatura ejerció un mayor efecto que la velocidad, tal y como lo predice la suma de cuadrados, debido que bajo estas condiciones se causa el mayor daño celular (12). Conclusiones y/o recomendaciones Para firmeza e índice de rehidratación se obtuvieron modelos de predicción adecuados. Se obtuvieron dos conjuntos de condiciones óptimas, (39.5 °C, 2.3 m/s) y (39.5°C, 0.79 m/s). Se aconseja evaluar valores nutricionales (vitamina C) bajo las condiciones óptimas encontradas, para definir la zona óptima a recomendar. 4|Página Referencias 1.Wiriya P, Somchart S, Paiboon T. 2010, Chemical pretreatments affecting drying characteristics of Chilli (cv. Huarou Yon). Drying Technology 28:1466-1476. 2.González-Pérez NE. 2010. Estudio comparativo de los métodos de secado convectivo y con microondas en rodajas de tomate (Solanum lycopersicum L.). Tesis de maestría. Culiacán, México: Universidad Autónoma de Sinaloa. Disponible en: Biblioteca de la Facultad de Ciencias Químico-Biológicas, Universidad Autónoma de Sinaloa, Culiacán, México. 3.Myers RH. 1971. Response surface methodology. Boston, MA: Allyn and Bacon. 338 p. 4.Valenzuela Lagarda JL. 2013. Comparación de los métodos de secado convectivo, con microondas y combinación convectivo-microondas con base en parámetros fisicoquímicos, nutrimentales e ingenieriles en rodajas de manzana (Malus domestica) cv. Granny Smith [Tesis de maestría], Culiacán, México: Universidad Autónoma de Sinaloa. Disponible en: Biblioteca. [Tesis de maestría], Culiacán, México: Universidad Autónoma de Sinaloa. Disponible en: Biblioteca de la Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Sinaloa, Culiacán, México. 39 p. 5.Calderón Castro A. 2012. Obtención de películas comestibles a partir de una formulación de almidón de maíz alto en amilosa utilizando el proceso de extrusión. [Tesis de maestría], Culiacán, México: Universidad Autónoma de Sinaloa. Disponible en: Biblioteca. [Tesis de maestría], Culiacán, México: Universidad Autónoma de Sinaloa. Disponible en: Biblioteca de la Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Sinaloa, Culiacán, México. 75 p. 6.Dolz ZP. 2008. Evaluación de la calidad de fruto en manzano: Estudio de métodos no destructivos de análisis. Tesis de licenciatura. La almunia de doña Godina, Zaragoza, España. 7.Kerdpiboon S, Devahastin S. 2007. Fractal characterization of some physical properties of a food product under various drying conditions. Drying Technology 25:135-146. 8.Marín BE, Lemus MR, Flores MV, Vega GA. 2006. The rehydration of dehydrated foods. Revista Chilena de Nutrición 33(3):527-538. 9.Derringer G, Suich R. 1980. Simultaneous optimization of several response variables. Journal of Quality Technology 12:214-219. 10.Vandivambal R, Jayas DS. 2007. Changes in quality of microwave-treated agricultural products-a review. Biosystems Engineering 98:1-16. 11.Xiao HW, Lin H, Yao XD, Du ZL, Lou Z, Gao ZJ. 2009. Effects of different pretreatment on drying Kinetics and Quality of sweet potatoes bars undergoing air impingement drying. International Journal of Food Engineering 5: Art 5. 12. Jayaraman KS, Das Gupta DK, Babu Rao N. 1990. Effect of pretreatment with salt and sucroce on the quality and stability of dehydrated cauliflower. International Journal of Food Science and Technology 25: 47–60. 5|Página ACTIVIDAD VOLATIL DE ACEITES ESENCIALES DE DOS ESPECIES DE EUCALYPTUS SOBRE Rhyzopertha dominica (COLEOPTERA: BOSTRICHIDAE) Y SU EFECTO EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE PROGENIES" Reyes-Guzmán R.1, Borboa-Flores J.1, Cinco-MoroyoquiF. J1, Wong-Corral F. J.1, Osuna-Amarillas P.1, RosasBurgos E. C1, Ortega-Nieblas M. M2 y León-Lara. D. D3 1 Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos. Universidad de Sonora. Blvd. Luis Encinas y Rosales s/n, Col. Centro CP 83000, Hermosillo, Sonora, México. [email protected] : categoría posgrado 2 Departamento de Investigaciones Científicas y Tecnológicas. Universidad de Sonora. Blvd. Luis Encinas y Rosales s/n, Col. Centro CP 83000, Hermosillo, Sonora, México. [email protected]. Posgrado 3 Departamento de Ingeniería Industrial. Universidad de Sonora. Blvd. Luis Encinas y Rosales s/n, Col. Centro CP 83000, Hermosillo, Sonora, México. [email protected]. Posgrado RESUMEN Los aceites esenciales de Eucalyptus globulus(Labill) y Eucalyptus camaldulensis ( Dehnh) fueron utilizados para evaluar su actividad insecticida sobre el barrenador menor de los granos Rhyzopertha dominica (F.). Muestras de granos de trigo infestadas con el insecto y expuestas a diferentes volúmenes (5, 10 y 15 µL) de los aceites por diferentes periodos de tiempo (24, 48 y 72 h). A las progenies (F1) que emergieron de los granos se les determinó la actividad enzimática amilolítica. Los resultados mostraron que E. globulus presentó un efecto insecticida ocho veces mayor que E. camaldulensis de acuerdo a los valores de CL50 y CL99. Ambos aceites ocasionaron una estimulación en la actividad enzimática amilolítica de las progenies, sin embargo solamente el de E. globulus ocasionó la muerte de las progenies (P <0.05). E. camaldulensis promovió alta actividad amilolítica a medida que se incrementó el volumen de aceite empleado, y no se observó diferencia estadística con otras progenies emergidas. Los volátiles del aceite esenciales de eucalipto E. globulus, es una agente insecticida efectivo para el control de R. dominica en trigo almacenado. Se recomienda realizar nuevas pruebas con otras dosis y otras especies de insectos. Palabras clave: grano de trigo, almacenamiento, insecto, toxicidad de aceite, control. Introducción El insecto Rhyzopertha dominica es una de las especies más destructoras y con mayor abundancia y distribución en grano de trigo almacenado (Cuperus, 1986). Los insectos que infestan al grano de trigo durante su almacenamiento poseen un sistema enzimático muy eficiente que les permite alimentarse exitosamente. En el caso de R. dominica, posee varias isoamilasas que hidrolizan eficientemente el almidón del grano de trigo (Cinco et al., 2006), así como varias enzimas del tipo serina proteasas (Zhu & Baker, 1999). Durante las últimas décadas, las medidas de control sobre las plagas que atacan los granos almacenados están limitadas al empleo de productos químicos líquidos o gaseosos, que resultan peligrosos para la salud y el ambiente (Isman, 2000). Para minimizar estos problemas, se han llevado a cabo numerosos estudios utilizando compuestos naturales como los aceites esenciales de eucaliptos, en cuya composición se encuentran sustancias volátiles aromáticas (Zhang et al., 2010). En este contexto, los objetivos de este trabajo fueron evaluar el efecto insecticida de la fracción volátil de los aceites esenciales de E. camaldulensis y E. globulus en el control de R. dominica en trigo 6|Página almacenado, así como evaluar el efecto de dichos aceites en la actividad amilolítica y proteolítica de las progenies del insecto. Metodología Los aceites esenciales evaluados en este estudio fueron obtenidos de E. camaldulensis y E. globulus. El primero fue obtenido de hojas de eucalipto colectadasen la primavera de 2011 en un sitio ubicado en las coordenadas geográficas 29° 00’ 44’’ LN y 111° 08’ 02’’ LE. La identificación de E. camaldulensis se hizo en el herbario del Departamento de Investigaciones Científicas y Tecnológicas de la Universidad de Sonora (Voucher 2011-225; catálogo del herbario 17277) (McClintock, 1993). El aceite esencial de E. globulus (marca Soria Natural) fue adquirido a través de la distribuidora Herbofarm (Madrid,España), el cual se obtiene por arrastre de vapor de agua en gran escala con un grado de pureza de 99 %. Extracción del aceite esencial de E. camaldulensis Las hojas de eucalipto fueron secadas a la sombra por dos semanas acorde con lo recomendado por Moreno, López, y Siche (2010). La extracción del aceite esencial se hizo con la técnica de arrastre de vapor empleando un equipo extractor de destilación tipo Clevenger, de acuerdo con el método oficial 6.0006 de la Association of Official Analytical Chemists (AOAC, 1990). Insectos de R. dominica Los ejemplares de R. dominica provinieron de una colonia desarrollada en el laboratorio de Entomología del Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos de la Universidad de Sonora. La colonia se desarrolló bajo condiciones controladas de temperatura (27 ± 2 °C), humedad relativa (70 ± 5 %) y fotoperiodo (12L:12O). Bioensayo de mortalidad de R. dominica Se acondicionaron tubos de polipropileno (Corning,50 mL), modificándolos en la parte interna de las tapas para adherirles un trozo de esponja de poliuretano (0.5 x 0.5 cm). En cada uno de los tubos se agregaron 20 g de trigo y se infestaron con 20 ejemplares no sexados de R.dominica. Las esponjas fueron impregnadas con 5, 10 o 15 μL de aceite de E. globulus o de E. camaldulensis. Un tubo con trigo infestado y sin aceite fue empleado como control. El experimento se realizó por triplicado. Al final de cada tiempo de exposición, los insectos fueron removidos y la tasa de mortalidad fue calculada de acuerdo con la siguiente ecuación publicada por Abbott (1925): Obtención de extractos enzimáticos de progenies de R. dominica Los extractos enzimáticos se prepararon utilizando el procedimiento de Cinco-Moroyoqui et al. (2008). Las progenies que emergieron de las muestras de trigo expuestas a los vapores de aceites esenciales se colectaron y maceraron en un mortero de porcelana. En el macerado se utilizaron 10 mL de solución amortiguadora de TrisHCl 20 mM, pH 8, conteniendo NaCl 20 mM y CaCl2 10 mM (solución A). Posteriormente, el macerado se centrifugó a 4 °C por 30 min a 10,000 g. Los sobrenadantes fueron pasados a través de filtros de nylon Cameo 17N (0.45 μm; Osmonics Laboratory Products, Minnetonka, MN, USA). 7|Página Determinación de la actividad enzimática de las progenies de R. dominica La determinación de la actividad amilolítica de las progenies de R. dominica se realizó mediante el procedimiento descrito por Cinco-Moroyoquiet al. (2008) y Kakade, Rackis, Mcghee, y Puski (1974), respectivamente. Determinación de proteína en extractos enzimáticos La determinación de proteína en los extractos enzimáticos obtenidos de la cromatografía de interacción hidrofóbica fue llevada a cabo de acuerdo con el procedimiento de Bradford (1976) usando seroalbúmina como estándar. Análisis estadístico El experimento se realizó con tres réplicas empleando un diseño completamente al azar con arreglo factorial teniendo como fuentes de variación: fuente de aceite con dos niveles (E. globulus y E. camaldulensis), volumen de aceite con cuatro niveles (0, 5, 10 y 15 μL) y tiempo de exposición con tres niveles (24, 48 y 72 h). Las variables respuestas fueron porcentaje de mortalidad de insectos y actividad enzimática amilolítica de las progenies. Se hizo un análisis de varianza y una comparación de medias mediante la prueba de Tukey (P < 0.05), empleando el paquete estadístico JMP versión 8. Resultados Mortalidad de R. dominica En el Cuadro 1 se puede apreciar que la fracción volátil del aceite esencial de E. globulus causó significativamente una mortalidad mayor de la población de R. dominica que el aceite de E. camaldulensis (P < 0.05). E. globulus ocasionó el 100 % de mortalidad del insecto a cualquier dosis del aceite y en todos los tiempos de exposición del grano. Cuadro 1. Porcentaje de mortalidad de poblaciones de Rhyzopertha dominica en trigo expuesto a la fracción volátil de aceites esenciales de Eucalyptus globulus y Eucalyptus camaldulensis1, 2. E. globulus E. camaldulensis Tiempo (h) Tiempo (h) Volumen de 24 48 72 24 48 72 aceite (µL) 0 0 (a)B 0 (a)B 0 (a)B 0 (a)C 0 (a)C 0 (a)C (a)A (a)A (a)A (b)B (b)B 5 98.3±0.6 100 100 8.3±0.6 11.7±1.2 21.7±0.6(a)B 10 100 (a)A 100 (a)A 100 (a)A 13.3±0.6(b)B 20.0±1.0(ab)A 23.3±1.5(a)B (a)A (a)A (a)A (a)A (a)A 15 100 100 100 25.0±1.0 26.7±0.6 31.7±1.2(a)A 1 Los valores son el promedio de tres réplicas ± desviación estándar. 2 Valores con letra diferente en minúscula en paréntesis en una fila dentro de una misma fuente de aceite son diferentes (P ˂0.05). Valores con letra diferentes en mayúscula en una columna dentro de una misma fuente de aceite son diferentes (P˂0.05). 8|Página Actividad enzimática de progenies de R. dominica Actividad amilolítica. Las progenies de R. dominica que emergieron del trigo expuesto a los vapores de aceites esenciales de E. globulus y E. camaldulensis mostraron valores de actividad amilolítica que incrementaron a medida que aumentó el tiempo de exposición y el volumen de aceite empleado (Cuadro 2). Sin embargo, la actividad amilolítica de las progenies del insecto expuestas al aceite de E. globulus fue mayor que las expuestas al de E. camaldulensis (P < 0.05). Cuadro 2. Actividad amilolítica de progenies de Rhyzopertha dominica emergidas de muestras de trigo expuestas a la fracción volátil de aceites esenciales de Eucalyptus globulus y Eucalyptus camaldulensis1,2,3. E. globulus Tiempo (h) Volumen de aceite (µL) 0 5 E. camaldulensis Tiempo (h) 24 48 72 24 48 72 342±12 (c)C 512±30 (b)A 468±17 (b)C 769±22 (a)B 530±14 (a)A 0.0 (c)B 127±21 (c)C 236±39 (b)B 260±8 (b)C 228±11 (b)C 335±48 (a)D 589±68 (a)C 10 472±24 (b)A 768±15 (a)B 0.0 (c)B 554±44 (c)A 682±50 (b)B 790±17 (a)B 15 439±13 (b)B 824±21 (a)A 0.0 (c)B 616±30 (c)A 750±11 (b)A 1198±55 (a)A 1 Los valores son promedio de tres réplicas ± desviación estándar. La actividad amilolítica está expresada como actividad específica (unidades de actividad/mg proteína). 3 Valores con letra diferente en minúscula en paréntesis en una fila dentro de una misma fuente de aceite son diferentes (P ˂0.05). Valores con letra diferentes en mayúscula en una columna dentro de una misma fuente de aceite son diferentes (P ˂0.05). 2 Análisis El porcentaje de mortalidad de R. dominica con el aceite esencial E. globulus, fue significativamente mayor que E. camaldulensis encantándose mortalidad de 98% a las 24 horas en concentración de 10 y 15 µl , mientras E. camaldulensis en ningún tiempo controlo al insecto. La actividad amilolítica a la progenie (F1) de R. dominica con aceite esencial E. globulus presenta en la concentración de 15 µl a 48 horas muestra una diferencia significativa, sin embargo aceite esencial E. camaldulensis difiere ya que los resultados obtenidos tienen diferencias significativas siendo la concentración de 0 µl a las 48 horas el valor más alto. En relación a la actividad proteolítica del insecto el aceite E. globulus se observó una mayor actividad en concentración de 15 µl a las 48 horas. Conclusiones La fracción volátil del aceite de E. globulus fue más efectivo que E. camaldulensis causando tasas altas de mortalidad. Las actividades de enzima en las progenies aumentan cuando los insectos son expuestos a los aceites esenciales, lo que puede interpretarse como una forma fisiológica para contrarrestar los efectos tóxicos que éstos ocasionan. Lo anterior lleva a concluir que los aceites esenciales ocasionan a las progenies un gasto energético, lo que eventualmente les ocasiona la muerte. 9|Página Recomendaciones Se debe realizar un análisis para determinar el contenido y cantidad de los componentes de los aceites esenciales E. globulus y E. camaldulensis recolectados en diferentes estaciones del año. Se recomienda realizar una separación de los compuestos elementos químicos de los aceites esenciales como monoterpenos y determinar el porcentaje de mortalidad con R. dominica por separado, así, como, determinar el posibles afectaciones de las nuevas progenies (F2). Referencias. Abbott, W.S. (1925). A method of computing the effectiveness of an insecticide. Journal of Economic Entomology. 18: 265-267. doi: 10.4067/S0718 AOAC. (1990). Official Methods of Analysis (15th Ed.). Association of Official Analytical Chemists. Arlington, VA. USA Cinco-Moroyoqui, F.J.; Díaz-Malváez, F.I.; Alanís-Villa A.; Barrón-Hoyos, J.M.; Cárdenas-López, J.L.; Cortez-Rocha, M.O.; Wong-Corral, F.J. (2008). Isolation and partial characterization of three isoamylases of Rhyzopertha dominica F. (Coleoptera: Bostrichidae). Comparative Biochemistry and Physiology, part B 150: 153-160. doi: 10.1016/j.cbpb.2008.02.008 Cinco-Moroyoqui, F.J.; Rosas-Burgos, E.C.; Borboa-Flores, J.; Cortez-Rocha, M.O. (2006). α-Amylase activity of Rhyzopertha dominica (Coleoptera: Bostrichidae) reared on several wheat varieties and its inhibition with kernel extracts. Journal of Economic Entomology 99: 2146-2150. doi: 10.1603/0022-0493-99.6.2146 Cuperus, G.W.; Prickett, C.K.; Bloome, P.D.; Pitts, J.T. (1986). Insect populations in aerated and unaerated stored wheat in Oklahoma. Journal of the Kansas Entomology Society 59: 620–627. Isman, M.B. (2000). Plant essential oils for pest and disease management. Crop Protection 19: 603-608. doi: 10.1016/S0261-2194(00)00079-X Mcclintock, E. (1993). Myrtaceae-Myrtle Family. In: Hickman, James C. The Jepson Manual: Higher Plants of California. p. 766. University of California Press. Berkeley and Los Angeles, California). Zhang, J.; An, M.; Wu, H.; Stanton, R.; Lemerle, D. (2010). Chemistry and bioactivity of Eucalyptus essential oils. Allelopathy Journal 25(5): 313-330. Zhu, Y.-C.; Baker, J.E. (1999). Characterization of midgut trypsin-like enzymes and three trypsinogen cDNAs from the lesser grain borer, Rhyzopertha dominica (Coleoptera: Bostrichidae). Insect Biochemistry and Molecular Biology 29: 1053–1063. doi: 10.1016/S0965-1748(99)00081-8 10 | P á g i n a PUNTOS CRÍTICOS DE CONTROL EN EL EMPAQUE DE MANGO ATAULFO DE EXPORTACIÓN Ma. de Lourdes C. Arévalo Galarza1*, Gregorio Luna Esquivel2, Marcos V. Hernández Vazquez3 1 Linea Prioritaria de Investigación en Inocuidad, Calidad de Alimentos y Bioseguridad (LPI-7). Campus Montecillo. Colegio de Postgraduados Campus Montecillo, Km 36.5 Carretera México- Texcoco C. P. 56230, Texcoco, Estado de México. *Autor para correspondencia: [email protected] 2 Unidad Académica de Agricultura de la Universidad Autónoma de Nayarit, Km 9 Carretera Tepic-Compostela, Xalisco Nayarit. 3 INIFAP, Campo Experimental Cotaxtla. Km. 36.4 Carretera Veracruz-Córdoba, Medellín, C.P. 94270, Veracruz RESUMEN México es el quinto productor mundial de mango: uno de cada veinte mangos que se consumen en el mundo procede de México, las exportaciones para 2011 ascendieron a 281.7 miles de toneladas, siendo el mango Ataulfo el de mayor importancia. Debido a restricciones cuarentenarias en la exportación y movilización nacional el mango se somete a un tratamiento hidrotérmico (46.1 °C). En agosto-septiembre del 2012, se presentó un brote epidémico causado por la cepa de Salmonella Braenderup, enfermando a 121 personas en 15 estados de Estados Unidos. Este brote se asoció con mangos procedentes de México. Por lo anterior, en este trabajo se analizan los puntos críticos de control durante el proceso de recepción, tratamiento hidrotérmico y empaque de una empresa exportadora de mango Ataulfo durante dos años consecutivos. Los resultados del trabajo mostraron que los mangos presentan mayor cantidad de coliformes totales y fecales durante la recepción y lavado, las cuales se reducen significativamente después del tratamiento hidrotérmico. La fuente de agua (pozo) presentó entre 24,500-31,633 UFC g-1 de bacterias mesófilas aerobias, en el primero y segundo año, respectivamente. Sin embargo, solo se encontraron de 4-21 NMP g-1 de coliformes fecales en la misma fuente. Durante el tratamiento hidrotérmico se aplica cloro y se monitorea constantemente, además de realizar cambios de agua, lo cual reduce el riesgo de contaminación. En frutos empacados no se presentaron coliformes fecales ni Salmonella. Por lo anterior la carga microbiana en frutos de mango ‘Ataulfo’ de exportación, fue menor a los límites establecidos por las normas internacionales. Palabras clave: Salmonella, tratamiento hidrotérmico, coliformes totales, coliformes fecales, bacterias mesófilas aerobias. INTRODUCCIÓN En los últimos años el consumo de frutas frescas se ha incrementado sustancialmente, pues además de ser una fuente de vitaminas, minerales, fibra y energía, las frutas pueden ser vehículo de contaminantes químicos, biológicos y físicos (Fernández, 2000). Dentro de los contaminantes biológicos se menciona a bacterias, virus, parásitos y hongos productores de toxinas, microorganismos capaces de colonizar y sobrevivir en o sobre las frutas y verduras (Berger et al., 2010). Cuando estos microorganismo causan enfermedades se consideran patógenos por ejemplo Salmonella spp y E. coli O157:H7 son los que se han relacionado con mayor frecuencia como agentes causales de brotes de enfermedades transmitidas por alimentos (Fernández, 2000). EL 13 de septiembre del 2012, la FDA puso a la empresa Agrícola Daniella de Sinaloa México en alerta de importación por 11 | P á g i n a la presencia de Salmonella Braenderup asociada con mangos. Por lo anterior el objetivo del presente trabajo fue detectar los puntos críticos de control en el empaque de mango ‘Ataulfo’ (CDC, 2013) MATERIALES Y MÉTODOS Se realizaron muestreos para el análisis microbiológico de frutos de mango y agua de una empacadora de mangos del Istmo, denominada MAGMAR, ubicada en Chahuites, Oaxaca, México. El muestreo se hizo en dos fechas durante dos años consecutivos; en total se colectaron 16 muestras de frutos y 2 de agua en cada uno. La toma de muestras de los frutos se realizó en cuatro puntos del proceso de empaque: 1) recepción, 2) después del lavado, 3) después del tratamiento hidrotérmico y 4) en frutos empacados. En cada punto se tomaron cuatro muestras espaciadas por 2 horas y cada una estuvo compuesta de cuatro frutos tomados al azar. Una muestra de agua se tomó del pozo de abastecimiento y la segunda se tomó en la tina de lavado, después de una jornada de trabajo. Los frutos y agua fueron colocados asépticamente en bolsas de polietileno y frascos respectivamente, se trasladaron en hieleras al laboratorio para realizar el análisis microbiológico. La dilución de muestras se realizó según el método propuesto en la Norma Oficial Mexicana NOM-110-SSA11994 (SS, 1994a). Cuenta total de bacterias mesófilas aeróbias (BMA: La determinación de BMA se realizó según el método descrito en la Norma Oficial Mexicana NOM-092-SSA1- 1994 (SS, 1994b), aplicando la siguiente fórmula: BMA= Determinación de coliformes totales por el número más probable (NMP): La determinación de bacterias coliformes totales (BCT) se realizó según la Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994 (SS, 1994c). Determinación de coliformes fecales: Para cuantificar bacterias coliformes fecales, se utilizó caldo EC en tubos (BBL®), que se inocularon a partir de los tubos positivos de la fase de presunción. Los cultivos se incubaron a 44.5 ºC por 48 h en baño maría con agitación. Se registraron los tubos con presencia de gas en las campanas Durham (Tubos positivos) y se calculó el número de coliformes fecales en las tablas de NMP (Refai, 1981). Detección de Salmonella: La prueba se determinó mediante la técnica propuesta por Anderson y Calderón (2000). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Cuenta total de bacterias mesófilas aeróbias (BMA): La cuenta total de BMA estuvo por debajo de los límites permitidos por WHO, 2005, que establece un máximo de 100,000 unidades formadoras de colonias por gramo (UFC g-1). En las dos fechas de evaluación se observó que la fuente de contaminación más importante fue el agua de pozo (Cuadro 1). Con estos resultados se puede asumir que el tratamiento con cloro en la tina de lavado estaba funcionando positivamente, contrario a lo que sucedió en el primer muestreo. La manipulación de fruta durante el empaque incrementó ligeramente la concentración de BMA (Cuadro 2), lo que significa que la sanidad de los guantes y manos de los empacadores si influye en la contaminación cruzada de los frutos de mango ‘Ataulfo’ (Fernández, 2000). 12 | P á g i n a Cuadro 1. Cuenta total de bacterias mesófilas aerobias (UFC g-1) en agua de pozo y tina de lavado de mango ‘Ataulfo’. Punto de muestreo de agua 1° muestreo (UFC g-1) 2º muestreo (UFC g-1) Agua de pozo 24,500 31,633 Agua después de la jornada 31,750 226 UFC= Unidades formadoras de colonias Cuadro 2. Cuenta total de bacterias mesófilas aerobias (UFC g-1) en epidermis de mango ‘Ataulfo’ durante el procesamiento postcosecha Punto de muestreo de fruta y agua 1° muestreo (UFC g-1) 2º muestreo (UFC g-1) Recepción 151.9 459.2 Después de lavado 283.8 321.7 Después del hidrotérmico 67.5 12.5 Después del empaque 32.5 395.8 UFC= Unidades formadoras de colonias Bacterias coliformes totales y fecales (BCT y BCF): El límite microbiológico que especifican las normas de España e Israel, para bacterias coliformes totales y fecales es de 1000 coliformes g-1 (WHO, 2005) y de acuerdo a los resultados que se muestran en el cuadro 3 todas las muestras de mango cumplen satisfactoriamente con los límites. Con relación a las muestras de agua de pozo y de la tina de lavado, las concentraciones de BCT y BCF rebasaron los límites establecidos en la NOM-127-SSA1-MOD-1994 (Cuadro 4), la cual indica límites de 2 NMP 100 mL-1 y ausencia de NMP 100 mL-1 de totales y fecales respectivamente. Por lo tanto, la presencia de BCT en los frutos de mango en varios puntos de muestreo, pudo tener su origen manipuladores durante la cosecha y contaminación con agua en la fase de lavado y empaque, por el contacto con tierra, manos o agua contaminada (Beauchat, 1995; Fernández, 2000). Cuadro 3. Número de coliformes totales y fecales (NMP g-1) en epidermis de frutos de mango ‘Ataulfo’ durante el procesamiento postcosecha. Punto de muestreo Recepción Coliformes totales NMP g-1 1° Muestreo 2°Muestreo Ausencia 9 Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Coliformes totales NMP g-1 1° Muestreo 2°Muestreo Ausencia 4 Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia 13 | P á g i n a Después del lavado Después del hidrotérmico Empacado Ausencia Ausencia 9 Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia 4 9 Ausencia Ausencia Ausencia 3 Ausencia Ausencia 4 15 4 Ausencia 4 Ausencia Ausencia 23 Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia 4 Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia Ausencia 4 Ausencia Ausencia Ausencia Cuadro 4. Número de coliformes totales y fecales (NMP g-1) en agua de pozo y tina de lavado de mango ‘Ataulfo’ Punto de muestreo Agua de pozo Agua de lavado Coliformes totales NMP g-1 1° Muestreo 2°Muestreo 4 210 43 150 Coliformes totales NMP g-1 1° Muestreo 2°Muestreo 4 21 240 43 Salmonella: No se detectó su presencia en las muestras de mango y agua analizadas. La ausencia de ésta bacteria se explica por la baja carga microbiana, ya que cuando existe E. coli en los alimentos, es probable encontrar Salmonella. CONCLUSIONES Las concentraciones de bacterias mesófilas aerobias, bacterias coliformes totales y bacterias coliformes fecales en frutos de mango ‘Ataulfo’ y agua del tratamiento hidrotérmico fueron inferiores a los límites permisibles en especificaciones microbiológicas y hubo ausencia de Salmonella, por lo que el mango procedente de esta empacadora en las fechas de muestreo no representó un riesgo con infecciones gastrointestinales. Los puntos críticos de control son el agua utilizada en el lavado y el tratamiento hidrotérmico, y en el empaque la manipulación del personal. Por lo anterior es importante considerar que el monitoreo del agua y las buenas prácticas de higiene del personal deben ser constantes pues la contaminación puede ocurrir en cualquier momento. LITERATURA CITADA Anderson M., R. P., y P. Calderón Y. 2000. Microbiología alimentaria: metodología analítica para alimentos y bebidas. Ed. Acribia. Madrid, España. 441 p. Berger C.N., Sodha V.S., Shaw R.K., Griffin P.M., Pink D., Hand P., Frankel G. 2010. Fresh fruit and vegetables as vehicles for the transmission of human pathogens. Environmental Microbiology 12 (9): 2385–2397. CDC (Centers for Disease Control and Prevention). 2013. http://www.cdc.gov (Consultado el 25 de Julio 2013). 14 | P á g i n a Fernández E., E. 2000. Microbiología e inocuidad de los alimentos. Editado por la Universidad Autónoma de Querétaro. 931 p. Refai M., K. 1981. Manuales para el control de calidad de los alimentos: Análisis microbiológico. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO), Roma, Italia. 77 p. SS (Secretaria de Salud). 1994a. Norma Oficial Mexicana NOM-110-SSA1-1994, Bienes y Servicios. Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico. Secretaría de Salud. México D. F. 5 p. SS (Secretaria de Salud). 1994b. Norma Oficial Mexicana NOM-092-SSA1-1994, Bienes y Servicios. Método para cuenta de bacterias aerobias en placa. Secretaría de Salud. México D. F. 7 p. SS (Secretaria de Salud). 1994c. Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994, Bienes y Servicios. Determinación de Bacterias Coliformes. Técnica del Número Más Probable. Secretaría de Salud. México D. F. 16 p. SS (Secretaría de la Salud). 1994. Norma Oficial Mexicana Modificada NOM-127-SSA1-MOD-1994. Salud Ambiental, Agua para uso y consume humano-límites permisibles de calidad y tratamientos a que debe someterse el agua para su potabilización. Secretaría de la Salud. México D.F. 8 p WHO (World Health Organisation). 2005. Database of microbiological specifications for selected Countries Ryan, Tomasino, M. (Eds.) In: http://www.euro.who.int/foodsafety/microbiological. 15 | P á g i n a EFECTO DE LA FUERZA IÓNICA SOBRE LA REMOCIÓN DE PROTEÍNA SOLUBLE DEL MANTO DE CALAMAR GIGANTE (Dosidicus gigas) Y EVALUACIÓN FUNCIONAL DE LAS PROTEÍNAS INSOLUBLES Encinas-Arzate JJ1, Ezquerra-Brauer JM2, Ocano-Higuera VM1, Ramirez-Wong B2, Armenta-Villegas L3, TorresArreola W2 y Marquez-Rios E2* Categoría: Posgrado 1 Departamento de Ciencias Químico Biológicas. Universidad de Sonora, Encinas y Rosales s/n. Hermosillo, Sonora, 83000. México. 2 Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos. Universidad de Sonora, Encinas y Rosales s/n. Hermosillo, Sonora, 83000. México. 3 Departamento de Polímeros. Universidad de Sonora, Encinas y Rosales s/n. Hermosillo, Sonora, 83000. México. *Autor para correspondencia: Dr. Enrique Márquez Ríos Correo electrónico: [email protected] RESUMEN El calamar gigante (Dosidicus gigas) es una especie pesquera con un amplio potencial de desarrollo tecnológico en noroeste de México. Dadas las características de este recurso pesquero y su abundancia, el calamar gigante tiene el potencial para utilizarse como materia prima para la obtención de concentrados proteicos, dándole así valor agregado a la especie. Por ello, el objetivo de este trabajo fue la extracción de las proteínas sarcoplásmicas del musculo de calamar gigante en función de la fuerza iónica y la evaluación de las propiedades funcionales del concentrado proteico obtenido (proteína insoluble). Para esto se usaron soluciones de NaCl con diferentes fuerzas iónicas (0.0, 0.1 y 0.3), obteniendo 3 concentrados proteicos. A partir de cada uno de los concentrados proteicos (pasta de proteínas) se elaboraron soles de proteína. Los geles se obtuvieron mediante un tratamiento térmico de estos soles a 90°C por 30 minutos. En éstos se evaluó la propiedad gelificante por medio perfil de textura, capacidad de retención de agua (CRA) y prueba de doblado, así como también el color. Con la finalidad de explicar la capacidad gelificante se evaluaron algunos cambios conformacionales. En soles y geles se determinó el contenido de sulfhídrilos totales y reactivos, hidrofobicidad de superficie de las proteínas, mientras que la calorimetría de barrido diferencial y reología sólo se realizó en los soles. Los resultados demuestran que la remoción de proteínas sarcoplásmicas presentes en el manto afecta las propiedades gelificantes, en donde, una mayor remoción repercutió en geles de mejor calidad. Palabras clave: calamar gigante, concentrado proteico, funcionalidad 16 | P á g i n a EVALUACIÓN DE LA ESTABILIDAD FISICOQUÍMICA EN SOPA A BASE DE ALMIDÓN DE BANANO GRAN ENANO Y CALABAZA Cucurbita maxima) López-Hernández E*. Aparicio-Trápala M.A., Centeno-Zúñiga Martha I., Rodríguez Blanco, L. Valadez Villarreal. A. División Académica de Ciencias Agropecuarias. Universidad Juárez Autónoma de Tabasco. México. Km 25 Carr VHSA-Teapa [email protected] Palabras clave: Vida útil, almidón resistente, calabaza, índice glicémico CATEGORÍA: POSGRADO ANTECEDENTES El término vida útil define el periodo de tiempo en el que un alimento mantiene características organolépticas aceptables para el consumidor o el tiempo necesario para que alcance un nivel máximo aceptable de deterioro, almacenado bajo condiciones óptimas preestablecidas (Charm, 2007). Los factores que más influyen son, temperatura, humedad, nivel de oxígeno y luz. Además, los distintos métodos de procesamiento de los alimentos y los sistemas de empaque en que son colocados, determinan en buena medida los periodos de vida útil de los mismos. Sin embargo, los factores ambientales mencionados interactúan con dichos sistemas pudiendo acelerar o disminuir procesos de deterioro tales como crecimiento y actividad microbiana, reacciones físicoquímicas, actividad enzimática, rancidez (oxidación lipídica), degradación de vitaminas, especialmente A y C, y cambios en color y otras características físicas de los distintos productos (Wittig, 2004). El estudio de la cinética de los procesos de transformación de los alimentos ha sido objeto de gran atención, debido principalmente a los esfuerzos para optimizar la calidad de los productos durante el procesado y el almacenamiento. Aunque tradicionalmente la cinética química se ha aplicado para explicar los cambios químicos que ocurren en un sistema, también se puede aplicar a cambios físico-químicos. Por ejemplo, los cambios en la textura y el color que sufren los alimentos también pueden describirse por medio de asimilación a las velocidades de reacción (Villota y Hawkes, 1992). OBJETIVO GENERAL El objetivo fue, Determinar la estabilidad química de una sopa deshidratada elaborada con calabaza y almidón de plátano gran enano. 17 | P á g i n a OBJETIVO ESPECÍFICO Determinar la estabilidad química de una sopa deshidratada elaborada con calabaza y almidón de plátano gran enano, almacenada durante 90 días a temperaturas de 25°, 35° y 45°C. METODOLOGÍA La materia prima de banano Gran Enano Gigante caracterizado de color verde – amarillo, fue obtenido al azar de la plantación Martín Bananas, ubicado en el Km 45 de la carretera Villahermosa – Teapa y la calabaza adquirida en el mercado José María Pino Suárez del municipio del Centro. Para la obtención del almidón de plátano se siguió el método que reporta Waliszewski et al., (2002). En base a formulaciones comerciales se elaboró la sopa utilizando: leche entera deshidratada (39.51 g), almidón de banano (40 g), cebolla en polvo (0.1 g), consomé de pollo deshidratado (2.0 g), aceite (5.29 g) y sal (1.2 g) (Aparicio, 2009. Para evaluar la estabilidad de la sopa se determinó el índice de peróxido (IPO) el cual representa la cantidad determinable de oxígeno activo contenido en 1 Kg (Matisseek et al, 1999) y la actividad de agua (Aw) fue medida en un equipo sensor de humedad AquaLab modelo Pullman WA 99163. Se almacenó a temperaturas de 25 °C, 35 °C y 45 °C, durante 0, 15, 30, 45, 65, 75 y 90 días. RESULTADOS El Logaritmo de la vida útil de la sopa de calabaza en función de las temperaturas fue de 102.2751 – 0.0079T, del cual se obtuvo la vida útil de sopa de calabaza =10 (2.2751 – 0.0079T). El tiempo de vida útil estimado por medio de la ecuación cinética de Arrhenius de pérdida de calidad para la sopa de calabaza en función al índice de peróxido y asumiendo una reacción de deterioro de orden cero, fue de117 días. También se aprecia una disminución en el tiempo de vida útil a medida que se incrementa la temperatura, ya que a 45°C fué de 83 días. Por otra parte, los valores de Aw se han usado como indicador de la estabilidad de los alimentos, se obtuvo un valor inicial de 0.555 y valor final 0.549 (y =-7E.05x + 0.5539. Este valor disminuyó conforme el tiempo transcurrió presentándose desorción en el alimento. El parámetro de Q10 fue de 0.843, esto significa que la velocidad de la reacción de deterioro se acelera 0.843 veces por cada 10°C que se aumente la temperatura. Estos valores son bajos ya que es un alimento con bajo contenido de humedad y grasas comparados con los reportados por Chica y Osorio (2003), para chocolate de mesa un Q10 de 2.88 y para mayonesa 2.54 García (2008), estos alimentos son altos en lípidos, los cuales son componentes que aceleran las reacciones de óxido-reducción, deterioro y pérdida de nutrientes Labuza (1998). La Aw inicial a 45 °C en la formulación de calabaza la Aw inicial fué 0.553 y el valor final 0.372 (y = -0.002x + 0.5029). Esta pérdida de humedad beneficia a los tratamientos, ya que confiere mayor estabilidad durante su almacenamiento pues a valores de actividad entre 0.5- 0.6, se presentan reacciones químicas, enzimáticas y desarrollo microbiano lo que conlleva al deterioro del producto García (2007). Estos resultados coinciden con los reportados por Pacheco et al., (2004), quienes al evaluar formulaciones de alimentos en polvo para preparar bebidas a base de papaya, plátano verde y salvado de arroz, obtuvieron valores de 0.4 y 0.43. Además, Sáenz et al; (2002) reportó un promedio de Aw de 0.48 en un alimento de preparación instantánea formulado como un flan de vegetales. 18 | P á g i n a No obstante también se considera que a valores de Aw de aproximadamente 0.4 existe la capa monomolecular BET que actúa como un filtro y no deja pasar oxígeno hacia las partes internas donde están los lípidos evitando así, la oxidación, lo cual ayudó en parte a que no se presentaran valores más altos Badui, (2013). Los valores bajos de Aw también contribuyeron a minimizar las posibles reacciones de deterioro de origen químico o microbiano que deterioran la calidad física y sensorial del producto. La baja actividad de agua confiere gran estabilidad a los nutrientes del alimento durante el almacenamiento, es el factor principal en la seguridad y calidad de un producto alimenticio. La actividad de agua influye en su estabilidad, sabor, color, olor y consistencia (Richard y Labuza, 1990). CONCLUSIONES Se comprobó que la vida útil de un alimento disminuye conforme se incrementa la temperatura pues se aceleran las reacciones bioquímicas, disminuyendo su vida útil, así como los valores bajos de actividad de agua contribuyeron a minimizar las reacciones de deterioro en la sopa. REFERENCIAS Aparicio, T. M. A. 2009. Efecto de la lactosa sobre el índice glicémico y digestibilidad de un alimento a base de almidón de plátano Macho y Enano Gigante. Fundación Produce. 19-21. Charm, S. E. 2007. Food engineering applied to accommodate food regulations, Chica C. B. A. y Osorio S. S. L. 2003. Determinación de la vida de anaquel del chocolate de masa sin azúcar en una película de polipropileno biorientado. Universidad Nacional de Colombia. 63-64. Garcia Baldizon C, Molina Córdoba M. E. 2008. Estimación de la vida útil de una mayonesa mediante pruebas aceleradas. Ingeniería 18 (1.2): 57.64. ISSN: 1409 – 2441. García, A. Pacheco–Delahaye, E. Tovar, J. Pérez, E. 2007. Caracterización fisicoquímica y funcional de las harinas de (Arracacia xanthorriza) para sopas instantáneas. Cienc. Tecnol. Aliment. 5(5): 384-393. Labuza, T. P. Hyman, C. R. 1998. Moisture migration and control in muti-domain foods. Trends Food Sci. Technol. 9. 47-55. Matisseek, R. Schnepel, F-M. Steiner, G. 1999. Análisis de los alimentos. Ed. Acribia, España. 51-53 Pacheco D. E, Pérez R. Schenell M. 2004. Evaluación nutricional y sensorial de polvos para bebida a base de papaya, plátano verde y salvado de arroz. Índice glucémico. 29 (1): 46-51. Villota, R. y Hawkes, J. G. 1992. Reaction kinetics in food systems. En Handbook of food engineering, Ed. D. R. Heldman and D.B. Lund. Marcel Dekker, New York. 39- 144. Waliszewski K. N, Aparicio M. A, Bello L. A y Monroy J. A. 2002. Changes of banana starch by chemical and physical modification. Carbohydrate polymers. 52. 237-242. Wittig de P. E. (2004). II Simposio Internacional de Ciencia y tecnología de los Alimentos Un Enfoque Multidisciplinario. Memorias. Tabasco. 31-32. 19 | P á g i n a PROPIEDADES TERMOFÍSICAS DE FLORETES DE BRÓCOLI (Brassica oleracea L.) IQ. Rosalina Iribe Salazar, Dr. José de Jesús Caro Corrales, Dr. Oscar Martín Hernández Calderón, MC. Jorge A. Zazueta Niebla. Universidad Autónoma de Sinaloa, Maestría en Ciencia y Tecnología de Alimentos, México. Ave. De las Américas S/N C.U. [email protected]. Posgrado. OBJETIVO GENERAL Evaluar las propiedades termofísicas de floretes de brócoli (Brassica oleracea L.) en función de la temperatura. OBJETIVOS ESPECÍFCOS Determinar las propiedades termofísicas: a) conductividad térmica ( k ), b) densidad aparente ( ) y c) capacidad calorífica específica (Cp) en tallo e inflorescencia de floretes de brócoli (Brassica oleracea L.) en función de diferentes temperaturas (5, 10, 20, 40, 60, 80 y 90°C). RESUMEN Las propiedades termofísicas son importantes en el diseño de los procesos de alimentos, especialmente para las transformaciones que incluyen transferencia de calor como en secado, pasteurización, esterilización, escaldado y congelación de alimentos. El brócoli se adquirió en un mercado de Culiacán, Sinaloa. Se empleó un diseño completamente al azar con dos factores: tipo de material (tallo e inflorescencia) y temperatura (5, 10, 20, 40, 60, 80 y 90°C). Las variables de respuesta fueron: conductividad térmica ( k , fuente lineal de calor), capacidad calorífica especifica (Cp, calorimetría diferencial de barrido), densidad aparente (ρ, desplazamiento de volumen) y difusividad térmica, α=k/(ρCp). La conductividad térmica, capacidad calorífica específica y difusividad térmica estuvieron en los rangos: 0.561 a 0.777 W m-1K-1, 3,216 a 5,109 J kg-1 K-1 y 1.70×10–7 a 1.46×10–7 m2 s-1 para tallo y 0.326 a 0.760 W m-1·K-1, 2,795 a 5,018 J kg-1 K-1 y 1.29×10–7 a 1.62×10–7 m2 s-1 para inflorescencia, respectivamente. Estas propiedades mostraron un comportamiento lineal con la temperatura y la densidad aparente no fue afectada por este factor en ambos materiales. Estos resultados permitirán predecir los perfiles e historias de temperatura durante el escaldado e hidroenfriado de floretes de brócoli. 20 | P á g i n a METODOLOGÍA Determinación de las propiedades termofísicas. La conductividad térmica ( k ), se determinó utilizando el método de la fuente lineal de calor o método de la sonda (Sweat 1974; Espinoza-Guevara y col 2010), el método consiste en suministrar un flujo de calor a la muestra mediante una fuente de calor ubicada en su interior y medir la variación de la temperatura a una distancia conocida de ésta, asumiendo sólo conducción radial en estado inestable (Baik y Mittal 2003). La fuente de calor y el elemento sensor están ubicados en una aguja de un diámetro pequeño en comparación con el diámetro de la muestra (Murakami 1996). La ecuación que gobierna este fenómeno se deriva de la ecuación general de difusión de calor de Fourier, que en coordenadas cilíndricas para la componente radial, r, está dada por: ( ) De la solución analítica de la ecuación (1) se obtiene la temperatura tiempo ( ). é æ öù T - T1 = QL êln ç t ÷ ú 4p k ë è t1 ø û (1) de la sonda a cualquier (2) La fuente lineal de calor (sonda) se insertó en el centro de los tallos e inflorescencia respectivamente, hasta cubrir totalmente la sonda. Ambos materiales se equilibraron a la temperatura de trabajo (5, 10, 20, 40, 60, 80 y 90°C) al sumergirlos en agua en un baño maría (Modelo 9500, Fisher Scientific, EUA) y previamente fueron aislados con película plástica para evitar penetración de humedad o lixiviación durante las determinaciones. Se colocó un termopar en la parte exterior de ambos materiales para corroborar que no hubiese incremento de temperatura durante la prueba, lo cual es una condición para la confiabilidad del método. La temperatura de la sonda se registró en función del tiempo, utilizando para ello un registrador de temperatura (Data Adquisition System, modelo OMB-DAQ-56, Omega Engineering Company, EUA) y un software de cómputo (DaqView). Los registros de temperaturas se realizaron a intervalos de 5 segundos y finalmente se efectuó un análisis de regresión entre la temperatura y el logaritmo natural del tiempo para obtener la pendiente con mejor ajuste. El valor de k se obtuvo de la pendiente de la recta ajustada: Pendiente QL 4 k (3) Donde: QL = Calor suministrado por unidad de longitud (W/m), k = Conductividad térmica (W/mK), para ello el valor de QL se obtuvo de la siguiente ecuación: QL I 2R L (4) 21 | P á g i n a En donde: I = Intensidad de corriente (A), R = Resistencia de la sonda (Ω), L = Longitud de la sonda (m). Los valores de conductividad térmica se obtuvieron al despejar k de la ecuación correspondiente a la pendiente. La densidad aparente ( ) se obtuvo utilizando un método de desplazamiento de volumen (Tocci y col 2008). Se empleó tolueno como medio de desplazamiento líquido y se obtuvo mediante la siguiente ecuación: m V (5) La capacidad calorífica especifica ( Cp ), de tallo e inflorescencia, se obtuvo siguiendo la metodología descrita por Caro-Corrales 2002, utilizando un calorímetro diferencial de barrido (TA Instruments 2920, EUA). La calibración se realizó con zafiro estándar. Se utilizó una masa promedio de muestra de aproximadamente 15 mg ( ). El calorímetro diferencial de barrido (DSC) se programó para alcanzar una temperatura de equilibrio de 2°C, luego se mantuvo la isoterma durante 5 minutos y posteriormente se calentó la muestra a una velocidad de barrido de 20°C/min hasta 110°C. La línea base se obtuvo a partir de 2 charolas vacías. El rango de temperaturas a evaluar fue de 5 a 90°C. La energía absorbida durante el barrido se registró en un termograma, en donde, para cada temperatura, la velocidad de absorción de energía es proporcional al cambio de entalpia ( H ), el cual se obtuvo de la diferencia entre la línea base y la línea correspondiente a la muestra. Se empleó la siguiente ecuación: Cp E H dT m dt (6) Donde E es una constante de calibración que se obtuvo utilizando el material de referencia, que en este caso fue zafiro, H = Cambio de entalpía (mW), dT dt = Velocidad de barrido (°C/s). El valor de la capacidad calorífica específica se obtuvo al sustituir en esta última ecuación las condiciones que se utilizaron en la determinación. La difusividad térmica (α) se calculó a partir de su definición: k /( Cp) (7) 22 | P á g i n a RESULTADOS En las Figuras 1, 2, 3 y 4 se presentan los resultados para conductividad térmica, densidad aparente, capacidad calorífica específica y difusividad térmica, respectivamente, en función de la temperatura. 1100 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 TALLO INFLORESCENCIA 0.2 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 Densidad aparente (kg/m3) Conductividad térmica (W/m K) 0.8 1050 1000 950 900 TALLO INFLORESCENCIA 850 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 Temperatura (°C) Temperatura (°C) Figura 1. Conductividad térmica en tallo e inflorescencia de floretes brócoli en función de la temperatura. (LSD=0.043 W m-1 K-1, α=0.05). Figura 2. Densidad aparente en tallo e inflorescencia de floretes de brócoli en función de la temperatura. (LSD=53 kg/m3, α=0.05). 5500 1.8E-07 5000 Difusividad térmica (m2/s) Capacidad calorífica específica (J/kgK) 6000 4500 4000 3500 3000 2500 2000 1500 TALLO 1.6E-07 1.4E-07 1.2E-07 1.0E-07 TALLO INFLORESCENCIA INFLORESCENCIA 8.0E-08 1000 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 Temperatura (°C) Figura 3. Capacidad calorífica específica en tallo e inflorescencia de brócoli en función de la temperatura. (LSD=467 J kg-1 K-1, α=0.05). 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 Temperatura (°C) Figura 4. Difusividad térmica en tallo e inflorescencia de brócoli en función de la temperatura. (LSD= 2.35E-08 m2s-1, α=0.05). 23 | P á g i n a ANÁLISIS En la figura 1 se grafican los valores de conductividad térmica de tallo e inflorescencia en función de la temperatura. En el gráfico es posible observar como la conductividad térmica aumenta linealmente conforme aumenta la temperatura en ambos materiales. El rango encontrado para tallo fue de 0.561 a 0.777 W m-1K-1 y para inflorescencia de 0.326 a 0.760 W m-1·K-1. El modelo de predicción obtenido para esta variable en tallo fue: , con un valor de 2 coeficiente de determinación (R ) de 0.994 y para inflorescencia fue: , con un R2=0.975, lo que expresa un buen ajuste lineal en ambos casos. Se observa que la conductividad térmica en tallo del florete de brócoli fue mayor que en la inflorescencia, lo que indica que el tallo posee mayor capacidad para transferir energía, consecuencia del mayor contenido de humedad en éste. Este comportamiento concuerda con lo reportado (Espinoza-Guevara y col 2010 y Magerramov y col 2006) para diferentes frutos. Es importante resaltar que en el caso de alimentos, la conductividad térmica es una propiedad que se ve influenciada por factores como: temperatura, contenido de humedad, densidad, porosidad, disposición y homogeneidad del tejido del material. Sin embargo, son la temperatura y el contenido de humedad los factores de mayor influencia sobre la conductividad térmica del alimento (Orrego 2003). El efecto de la temperatura sobre la densidad aparente se observa en la Figura 2, en ella se puede apreciar que la densidad no varió significativamente (p>0.05) a medida que se incrementó la temperatura de la muestra en los niveles estudiados para tallo e inflorescencia, aunque la densidad del tallo de brócoli fue mayor que en la inflorescencia, lo cual puede deberse a las diferencias estructurales ente los materiales. Tocci y col 2008 reportan un comportamiento similar al evaluar el cambio de densidad aparente en un kiwi en un rango de temperaturas de 0 a 25°C. En la Figura 3 se muestra el gráfico correspondiente de la capacidad calorífica específica de tallo e inflorescencia de brócoli a diferentes temperaturas. Los valores de Cp aumentaron linealmente conforme se incrementó la temperatura en un rango de 3216 a 5109 J kg-1 K-1 en tallo, y en inflorescencia el rango encontrado fue de 2795 a 5018 J kg-1 K-1. El modelo de predicción obtenido para tallo fue: , con un valor de coeficiente de determinación (R2) de 0.990 y para inflorescencia fue: , con un R2=0.986. La capacidad calorífica específica en tallo fue mayor, lo que indica mayor capacidad para almacenar energía, este comportamiento puede atribuirse a su mayor contenido de humedad. En ambos casos se aprecia un ajuste adecuado. La tendencia en el incremento de la capacidad calorífica anteriormente descrita concuerda con lo reportado por Espinoza-Guevara y col 2010. En la Figura 4 se presenta el comportamiento de la difusividad térmica en función de la temperatura. En éste gráfico se puede observar que los resultados obtenidos de difusividad térmica (1.23 x10-7 a 1.70 x10-7 m2 s-1) se encontraron en el rango reportado para alimentos. . El modelo de predicción obtenido para esta variable en tallo fue: , con un 2 valor de coeficiente de determinación (R ) de 0.939 y para inflorescencia fue: , con un R2=0.947. La difusividad térmica fue mayor para tallo en el rango de 5 a 60°C, lo que indica que en este intervalo la energía se propaga más rápidamente que lo que se almacena en tallo, en estado inestable. En el rango de 80 a 90°C la difusividad térmica es superior en la inflorescencia. 24 | P á g i n a CONCLUSIONES Y/O RECOMENDACIONES Las propiedades termofísicas conductividad térmica, capacidad calorífica específica y difusividad térmica mostraron un comportamiento lineal con la temperatura en el intervalo estudiado en ambos materiales (tallo e inflorescencia). Sin embargo, la densidad aparente no resultó afectada significativamente por este factor (p>0.05). Se recomienda verificar la utilidad de estos resultados en la simulación de la transferencia de calor durante el escaldado e hidroenfriado en floretes de brócoli (Brassica oleracea L.). REFERENCIAS Baik OD y Mittal GS 2003. Determination and modeling of thermal properties of tofu. International Journal of Food Properties 6 (1): 9-24. Citado por Ochoa O, Amézquita A, Chejne F 2006. Propiedades termofísicas de la carne (review). Universidad Nacional de Colombia. Revista DYNA 73(148):103-118. Caro-Corrales JJ. 2002. Simulación de la transferencia de calor durante el enfriamiento de galletas utilizando el método de Monte Carlo. [Tesis de doctorado]. Cd. de México, México. Instituto Politécnico Nacional, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. Espinoza-Guevara R, Jose Caro-Corrales, Cesar Ordorica-Falomir, Jose ZazuetaMorales and Misael Vega-Garcia. 2010. Thermophysical Properties of Pulp and Rind of Papaya cv. Maradol. International Journal of Food Properties 13: 65-74. Magerramov MA, Abdulagatov AI, Azizov ND y Abdulagatov IM 2006. Thermal Conductivity of pear, sweet-cherry, apricot, and cherry-plum juicesas a function of temperatura and concentration. Journal of Food Science 71(5):E238-E244. Murakami EG 1996. Recommended desing parameters for thermal conductivity probes for nonfrozen food materials. Journal of Food Engineering, 27:109-123. Orrego CE 2003. Procesamiento de Alimentos. Primera edición. Universidad Nacional de Colombia, Sede Manizales 323 p. Sweat VE 1974. Experimental values of thermal conductivities of selected fruits and vegetables. Journal of Food Science 39:1080-1083. Tocci A. M, Mascheroni Rodolfo H. 2008. Some thermal properties of fresh and osmotically dehydrated Kiwifruit above and below the initial freezing temperature. Journal of Food Engineering 88:20-27. 25 | P á g i n a CALIDAD SANITARIA DE PRODUCTOS ELABORADOS EN UNA INDUSTRIA DE LACTEOS Mendoza-Rodríguez N. A1, Basurto-Cadena M. G. L1*, Vázquez-Arista M1 1 División Ciencias de la Vida, Ingeniería en Alimentos, Universidad de Guanajuato, Carretera Irapuato -Silao Km.9. A.P. 311 CP: 36500 Irapuato, Gto. Tel: (462)624 2484 y 62 45 215, ext. 1585. *[email protected] RESUMEN El presente trabajo es un estudio preliminar sobre la calidad sanitaria de los quesos elaborados con leche de cabra por una empresa familiar en Irapuato, Guanajuato. Se tomaron 6 muestras en total, en dos visitas semanales, dos de leche bronca de cabra, dos de leche pasteurizada y dos de los quesos frescos elaborados. A estas muestras se le realizaron las pruebas microbiológicas de mesofílicos aerobios, coliformes totales, coliformes fecales, hongos y levaduras, y la presencia de Salmonella. La inspección visual del lugar mostró tener muchas deficiencias desde la ordeña hasta la producción del queso fresco. Los valores de los resultados obtenidos por el análisis microbiológico de las muestras tomadas se compararon con la NOM-243-SSA1-2010, la cual establece parámetros sanitarios en la elaboración de productos lácteos y resultó que únicamente la leche pasteurizada se encuentra dentro de norma y que la leche bronca así como los quesos no están aptos para el consumo humano. Sin embargo, como el proceso de pasteurización de la leche se está realizando en forma eficiente, se sugirió que antes de realizar cualquier modificación del establecimiento, era prioritario y más económico establecer un lugar apropiado para la elaboración de producto lácteo y seguir en forma más eficiente las buenas prácticas de manufactura. PALABRAS CLAVES: leche de cabra, queso fresco, calidad sanitaria, Salmonella INTRODUCCIÓN Los alimentos que consume el hombre proceden básicamente de las plantas y de los animales o de productos derivados de los mismos, resulta comprensible que dichos alimentos puedan contener microorganismos que interaccionen con ellos. Los microorganismos utilizan nuestros alimentos como fuente de nutrientes para su propio crecimiento [1]. 26 | P á g i n a La leche es una secreción de la glándula mamaria de los mamíferos que desde el punto de vista fisicoquímico es una emulsión de materia grasa, en forma globular que contiene material proteico en suspensión, así como lactosa y sales minerales en solución. A nivel nutricional es un alimento de valor biológico elevado, muy rico y balanceado. Las cualidades nutritivas de la leche y de los productos lácteos los convierten en alimentos deseables para los seres humanos y los animales jóvenes. Estos mismos valores nutritivos permiten también el crecimiento de muchos microorganismos, algunos de los cuales pueden ocasionar cambios indeseables. Las cualidades sanitarias de la leche están influidas por muchos factores que intervienen en el curso de su producción, elaboración y entrega al consumidor [2]. La industria lechera es un gran ejemplo de un campo en el que las bacterias, las levaduras, los mohos, los virus, entre otros, tienen gran importancia para determinar la calidad de los productos finales. En esta industria la lucha y destrucción lanzadas contra los microorganismos indeseables, así como la introducción y la utilización de los que son deseables constituyen problemas que exigen mucha atención [3]. Para controlar o destruir los microorganismos presentes en la leche y productos lácteos, como el queso fresco, es importante conocer cómo estos microorganismos llegan a la leche. La flora bacteriana de la leche puede variar considerablemente en número y especies dependiendo cómo se contamina la leche. La leche en la ubre contiene pocas bacterias pero posteriormente sufre una contaminación procedente del hombre y de su entorno. La contaminación de la leche por el hombre depende de los métodos empleados en la producción animal y de las prácticas utilizadas para el ordeño. En principio, se puede considerar que los microorganismos que habitualmente están presentes en la leche pueden dividirse en dos grandes categorías: los microorganismos que se encuentran en la leche cruda y los que se hallan en la leche y productos lácteos pasteurizados. El control o destrucción de los microorganismos una vez que han llegado a la leche no es fácil ni eficaz, pero sí lo es evitar la contaminación desde el primer momento. Una técnica para controlar los microorganismos es la utilización de calor, dado que el número de células bacterianas y esporas disminuyen de forma logarítmica por acción del calor, es posible construir una gráfica o calcular una curva tiempo-temperatura para predecir la muerte microbiana. Sin embargo, es de gran importancia que el equipo utilizado durante el procesamiento pueda limpiarse y sanitizarse con facilidad y también que el personal encargado de la producción, procesado y distribución proceda de forma correcta [4]. 27 | P á g i n a MATERIALES Y MÉTODOS Material biológico Las muestras que se analizaron fueron tomadas en una empresa familiar ubicada en Irapuato, Guanajuato. El muestreo se llevó a cabo en condiciones asépticas durante la ordeña de leche bronca de cabras, después de su pasteurización y durante la elaboración de los quesos frescos, en dos días de dos semanas continuas. METODOLOGÍA Las muestras tomadas fueron identificadas como: 1. Leche bronca 2. Leche pasteurizada 3. Queso fresco Las pruebas microbiológicas que se realizaron a dichas muestras fueron: Determinación de Mesofílicos Aerobios [5] I. Se tomaron 25 ml o gramos de muestra, según corresponda, y se colocaron en 225 ml de agua peptonada previamente esterilizada. II. Se realizaron diluciones de 10-1 a 10-3. III. Se sembró cada dilución, por duplicado, en Agar Cuenta Estándar mediante la técnica de vertido en placa. IV. Se incubaron a 35±2°C durante 24 horas. V. Se observaron las colonias desarrolladas, se realizó el conteo y se calculó las Unidades Formadoras de Colonias (UFC). Determinación de Coliformes Totales en Placa [6] I. Se sembró 1 ml de las diluciones preparadas anteriormente, por duplicado, en Agar Rojo Bilis Brillante por la técnica de vertido en doble capa. II. Se incubaron a 35±2°C durante 24 horas. III. Se observaron las colonias desarrolladas, se realizó el conteo y se calculó las Unidades Formadoras de Colonias (UFC). Determinación de Coliformes Totales y Coliformes Fecales por el Método NMP [7] I. II. III. Se sembró 1 ml de las diluciones preparadas anteriormente, en tres tubos de ensaye por cada dilución, con 9 ml de caldo lauril sulfato y tubos de Durham. Se incubaron los tubos a 35±2°C por 24 horas y se observó la presencia de gas en los tubos de Durham, producto de la fermentación del caldo, y se determinó el Número Más Probable (NMP) de organismos coliformes totales. De los tubos con fermentación se transfirieron de 2 a 3 asadas en tubos de ensaye con caldo bilis verdes brillante y tubos de Durham. 28 | P á g i n a IV. Se incubaron los tubos a 48±2°C de 24 a 48 horas y se observó la presencia de gas en los tubos de Durham, producto de la fermentación del caldo y se determinó el Número Más Probable (NMP) de organismos coliformes fecales. Determinación de Hongos y Levaduras [8] I. II. III. Se sembró 1 ml de las diluciones preparadas anteriormente, por duplicado, en Agar Papa Dextrosa, previamente acidificado con 1 ml de ácido tartárico al 10% por cada 100 ml de medio de cultivo, por la técnica de vertido en placa. Se incubaron, una serie de cajas para hongos a 28±2°C durante 72 horas y otra serie de cajas para levaduras a 35±2°C por 48 horas. Se observaron las colonias desarrolladas, se realizó el conteo y se calculó las Unidades Formadoras de Colonias (UFC). Aislamiento de Salmonella [9] Esta prueba se realizó únicamente a las muestras de queso fresco con el siguiente procedimiento: Enriquecimiento I. Se colocaron 15 g de muestra en 125 ml de caldo selenito cistina y se incubó a 43°C de 18 a 24 horas. Aislamiento I. Se sembró mediante estría cruzada en placas con Agar Mac Conkey y Agar de Salmonella y Shigella. II. Se incubaron a 35±2 °C durante 24 horas. III. Se observó el crecimiento microbiano en los dos medios de cultivo para identificar las colonias que presentaron las características propias de Salmonella. Identificación bioquímica I. II. III. Se seleccionó de 1 a 2 colonias presuntamente de Salmonella. Se tomaron con asa dichas colonias y se inocularon en tubos con agar TSI y en tubos con agar LIA por picadura y estría. Se inocularon los tubos a 35±2°C durante 24 horas y se observaron los cambios ocurridos en los tubos. 29 | P á g i n a RESULTADOS Y DISCUSIÓN La Tabla 1 muestra el promedio del análisis microbiológico realizado a las muestras tomadas en la empresa familiar por el método de vaciado en placa. Tabla 1. Análisis microbiológico en placa Muestra NOM-243-SSA1-2010 Leche Bronca Leche Pasteurizada Queso Fresco Mesofílicas Coliformes Hongos Levaduras Aerobias Totales (UFC/ml/g) (UFC/ml/g) (UFC/ml/g) (UFC/ml/g) 100,000 ≤100 500 500 48,575 Incontables Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo 4,300 5,725 Negativo Negativo Notación: UFC=Unidades Formadoras de Colonias Los resultados presentados en esta tabla nos indican que el recuento de bacterias mesofílicas aerobias, de los tres productos lácteos, están dentro de los límites permitidos por la NOM-243-SSA1-2010 [5]. Sin embargo, el recuento de coliformes totales, para la leche bronca y los quesos frescos, están fuera del límite establecido por esta norma, lo que sugiere que éstos no son aptos para su consumo. El análisis realizado a la leche pasteurizada resultó ser negativo en todas sus determinaciones. Por otro lado, en la Tabla 2 se puede también observar el promedio de los resultados de coliformes totales y fecales por el método del Numero Más probable (NMP). Tabla 2. Análisis microbiológico de NMP Muestra NOM-243-SSA12010 Leche bronca Leche pasteurizada Queso fresco Coliformes Coliformes Totales Fecales (NMP/ml/g) (NMP/ml/g) ≤3 ≤3 1,100 Negativo 571.5 780 7.3 Notación: NMP=Número Más Probable De acuerdo a esta tabla, el recuento de coliformes totales y fecales en las muestras de leche bronca y de queso fresco superan los límites permitidos por la NOM-243-SSA12010[5], lo que significa que no se siguen las buenas prácticas de manufactura durante la elaboración del queso fresco. El análisis microbiológico de la leche pasteurizada, de nueva cuenta, resulto negativo en todas las determinaciones. 30 | P á g i n a Finalmente, la Tabla 3 presenta el resultado obtenido en las muestras de queso fresco por presencia de Salmonella. Tabla 3 Salmonella en queso fresco Muestra NOM-243-SSA12010 Queso fresco Salmonella en 25 g Ausente Presente La NOM-243-SSA1-2010 establece la ausencia del género Salmonella en queso freso y su presencia en las muestras analizadas y confirmadas por pruebas bioquímicas, confirma que este producto lácteo no es apto para el consumo humano. [10] Las Figuras 1, 2, 3, 4, 5 y 6 muestran la presencia de los microorganismos encontrados en las muestras analizadas. Figura 1. Mesofílicos aerobios en leche bronca Figura 2. Coliformes totales en leche bronca 31 | P á g i n a Figura 3. Coliformes totales en queso Figura 5. Salmonella spp en Agar Salmonella y Shigella Figura 4. Salmonella spp en Agar Mac Conkey Figura 6. Bioquímicas con agar LIA y TSI CONCLUSIONES De acuerdo a los análisis microbiológicos realizados en este trabajo sobre la leche bronca de cabra, leche pasteurizada y queso fresco elaborado en una pequeña empresa de Irapuato, Guanajuato, pone de manifiesto que, en general, el lugar requiere de modificaciones que a todas luces serían difíciles de realizar por el costo que implicaría realizarlas. 32 | P á g i n a Sin embargo, de acuerdo a los análisis microbiológicos efectuados, el proceso de pasteurización se está llevando en forma satisfactoria; por lo tanto, la contaminación microbiana del producto terminado se lleva a cabo durante el proceso de elaboración del queso. Por tal motivo, se ha sugerido que antes de realizar alguna modificación en el lugar y la forma de ordeña de las cabras, como lo ha expresado el jefe de la familia, lo cual sería muy costoso, es prioritario realizar una modificación al lugar donde se lleva a cabo el proceso de elaboración del producto lácteo, lo que sería más fácil y económico de realizar, además de observar, en forma más rigurosa, las buenas prácticas de manufactura durante la elaboración del queso fresco. Es importante poner de manifiesto que este establecimiento está registrado por la Jurisdicción y Regulación Sanitaria No. VI, en Irapuato, de la Secretaría de Salud del Estado y por lo tanto está siendo supervisado por la misma. Sin embargo, esta pequeña empresa familiar tiene la autorización de esta Jurisdicción, por escrito, para producir y vender sus quesos. AGRADECIMIENTOS A la familia de la pequeña empresa que me abrió las puertas de su casa y las facilidades para realizar este trabajo. REFERENCIAS [1] Frazier William C., Westhoff Dennis C. (1993), Microbiología de los alimentos, ACRIBIA, S.A. [2] Ávila Téllez Salvador, Gutierrez Chávez Abner J. (2010) Producción de leche con ganado bovino, El Manual Moderno S.A de C.V [3] Foster Edwin M., Nelson F. Eugene, Speck Marvin L., Doestsch Raymond N., Olson Joseph C., (1965) Microbiología de la leche, Herrero S.A. [4] Robinson R.K. (1987) Microbiología lactológica. Microbiología de la leche, volumen I, ACRIBIA S.A [5] NOM-092-SSA1-1994. Norma Oficial Mexicana, bienes y servicios. Método para la cuenta de bacterias aerobias en placa. [6] NOM-113-SSA1-1994. Norma Oficial Mexicana, bienes y servicios. Método para la cuenta de microorganismos coliformes totales en placa. 33 | P á g i n a [7] NOM-112-SSA1-1994. Norma Oficial Mexicana, bienes y servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del número más probable. [8] NOM-111-SSA1-1994. Norma Oficial Mexicana, bienes y servicios. Método para la cuenta de mohos y levaduras en alimentos. [9] NOM-114-SSA1-1994. Norma Oficial Mexicana, bienes y servicios. Método para la determinación de salmonella en alimentos. [10] NOM-243-SSA1-2010. Norma Oficial Mexicana, productos y servicios. Leche, fórmula láctea, producto lácteo combinado y derivados lácteos. Disposiciones y especificaciones sanitarias. 34 | P á g i n a DISPONIBILIDAD DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN LA DIGESTIÓN In vitro DE EXTRACTOS DE TALLOS DE Vitex mollis Del Toro Sánchez Carmen Lizette1*, Morales Del Río Juan Alfredo1, Cázares Rivera Jessica Idalia2, Gutiérrez Lomelí Melesio1, Guerrero Medina Pedro Javier1, Robles García Miguel Angel1 1Centro Universitario de la Ciénega-Universidad de Guadalajara, Av. Universidad No. 1115, Col. Linda Vista, Ocotlán, Jal. México 2Instituto Tecnológico de Morelia. Avenida Tecnológico No. 500, Col. Lomas de Santiaguito. Morelia, Mich. México *[email protected], [email protected] CATEGORÍA POSGRADO Introducción: Vitex mollis es un planta nativa de México. Las hojas y tallos son utilizados para diversas enfermedades. Los tallos tienen gran capacidad antioxidante que proveen beneficios a la salud, sin embargo se desconoce la disponibilidad de esta actividad en el organismo después de pasar por la digestión. Palabras clave: Disponibilidad, capacidad antioxidante, Vitex mollis Objetivo general: Determinar la disponibilidad de la capacidad antioxidante en la digestión in vitro de extractos de tallos de Vitex mollis. Objetivos específicos: Obtener extractos metanólicos de tallos de V. mollis. Determinar la capacidad antioxidante antes y después de la digestión in vitro. Metodología: Se utilizaron extractos metanólicos (0.075 g/mL) de tallos de V. mollis de tres lugares de Jalisco: 1,850 (T1), 1,750 (T2) y 1,800 msn (T3). Antes y después de la digestión (pepsina y pancreatina) en membrana de diálisis, se midió la capacidad antioxidante (DPPH y ABTS ) y fenoles totales (Folin-Ciocalteu). Resultados: Con el radical DPPH se observó baja sensibilidad y una disminución de fenoles totales al final de la digestión. La muestra T3 tuvo la mayor capacidad antioxidante. En la parte dializada (simulando el suero sanguíneo) se tiene una absorción considerable presentando el 90 % de inhibición con el radical ABTS que fue la prueba más sensible. Conclusiones: La muestra T3 puede ser una fuente de capacidad antioxidante conservando la mayor parte de dicha actividad después de la digestión. Estos resultados podrán explicar en un futuro el mecanismo para prevención y/o tratamiento de enfermedades y así formular suplementos o alimentos funcionales. 35 | P á g i n a EFECTO DEL CONSUMO DE CEREALES COMERCIALES PARA DESAYUNO ALTOS EN FIBRA SOBRE LA DIGESTIBILIDAD Y UTILIZACIÓN DE LA PROTEÍNA MEDIANTE BIOENSAYOS EN RATAS. Palabras clave: Cereales comerciales “altos en fibra”, Fibra, Calidad Proteica. María del Refugio Falcón Villa, Jesús Manuel Barrón Hoyos Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos. Universidad de Sonora. Boulevard Luis Encinas y Rosales s/n, Hermosillo, Son. 83000, MEXICO, e-mail: [email protected] Categoria: Posgrado Objetivo General Evaluar el efecto del consumo de cereales comerciales para desayuno altos en fibra sobre la digestibilidad y la utilización de la proteína mediante bioensayos en ratas. Objetivos específicos Determinar el contenido de fibra dietética total, sus fracciones (soluble e insoluble) y β-glucanos en 13 cereales comerciales para desayuno "altos en fibra". Evaluar la calidad proteica de 6 cereales comerciales para desayuno "altos en fibra" mediante bioensayos de rata, empleando los indicadores de calidad proteica de Razón Neta de Proteína y Digestibilidad. Resumen El efecto beneficioso del consumo de fibra dietética (FD) se ha reconocido desde hace tiempo. La política comercial de mercado abierto y la economía mundial tienden a incrementar la disponibilidad de alimentos en los mercados mexicanos, lo que resulta en una gran variedad de productos comerciales como los cereales para desayuno clasificados como "altos en fibra" (CCDAF). Esta investigación tiene como propósito evaluar el contenido de fibra dietética total, sus fracciones: soluble (FDS) e insoluble (FDI) y β-glucanos en 13 cereales comerciales para desayuno "altos en fibra", así como evaluar su calidad proteica mediante bioensayos de rata. Los indicadores de calidad proteica evaluados fueron, Razón Neta de Proteína (RNP), y Digestibilidad (Materia Seca, Aparente y Verdadera). Los CCDAF tuvieron de 7.42-39.82 % de fibra dietética insoluble, 2.53-12.85 % de fibra dietética soluble y 0.45-4.96% de β-glucan. Estos CCDAF mostraron diferencia significativa en su contenido de fibra dietética total, sus fracciones soluble e insoluble y también en su contenido de β-glucanos. Cuando se suministra como dietas experimentales, en los ensayos de alimentación de ratas de 14 días, los cereales para desayuno "altos en fibra “ mostraron tener un efecto adverso sobre la digestibilidad del Nitrógeno, pero no en la utilización de proteínas, medida como Razón Neta de Proteína (NPR), la cual no se vio afectada significativamente. El consumo de estos cereales comerciales para desayuno, especialmente aquellos que tiene avena como ingrediente básico es muy recomendable, ya que estos productos, como fuente concentrada de fibra dietética no parecen afectar a su calidad proteica. 36 | P á g i n a Metodología Descripción de la muestra. Se seleccionaron trece cereales comerciales para desayuno altos en fibra basados en la aceptabilidad por el consumidor. Las muestras comerciales se molieron a un tamaño de1.0 mm, se empacaron, sellaron y se mantuvieron en refrigeración. Se realizó un análisis de composición química a todas las muestras por los métodos de la AACC, 2000. El contenido de fibra dietética se determinó por el método propuesto por Prosky et al., (1988), basado en el método 985.29. AOAC (1997). Dietas experimentales. Se prepararon dietas experimentales empleando seis cereales comerciales para desayuno altos en fibra, como fuente de proteína; además se elaboró una dieta basada en caseína empleada como control de calidad proteica y una dieta basal que contiene todos los nutrientes excepto proteína a esta dieta se le denomina dieta libre de nitrógeno (DLN). Las dietas se elaboraron de acuerdo a la composición dada por el AOAC (1990). Todas las dietas experimentales y la dieta de proteína de caseína fueron elaboradas basándose en el contenido de nitrógeno total de los cereales de prueba, calculando para que estas dietas obtengan un 10% de proteína (Hackler, 1978). Bioensayo en ratas. El estudio de alimentación de 14 días fue conducido con 32 ratas Sprague Dawley recién destetadas, de 21- 23 días de edad, con peso promedio de 45-55 g, las ratas fueron proporcionadas por la Unidad de Experimentación Animal del Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos de la Universidad de Sonora. Se pesaron las ratas y se distribuyeron en bloques al azar en 8 grupos de 4 ratas, los cuales fueron empleados para cada una de las dietas experimentales y se mantuvieron en forma individual en jaulas de acero inoxidable con malla en la base. La dieta y el agua fueron suministradas ad-libitum, la temperatura del laboratorio se mantuvo a 25 °C, con una humedad relativa de 65-80%, y ciclos de iluminación de 12 h luz-oscuridad. El experimento de alimentación fue repetido ocho veces para un mismo lote de dieta experimental. Digestibilidad de Materia Seca (DMS). La digestibilidad de materia seca se obtiene de la relación del alimento total consumido menos el peso de las heces excretadas con respecto al alimento total consumido (Church y Pond, 1974). Digestibilidad In vivo. Se determinó la digestibilidad Aparente (DA) y verdadera (DV). La DA considera la cantidad de alimento digerido, calculado por la diferencia entre el alimento consumido y lo eliminado por el animal. La DV se determina considerando el nitrógeno excretado en heces proveniente del recambio metabólico, éste se determina en las heces del grupo de animales mantenidos con la dieta libre de nitrógeno, durante el desarrollo del experimento. (Pellet, 1980). Determinación de Razón Neta de Proteína (RNP). Es calculado por las variaciones en peso, este coeficiente considera la eficiencia de la proteína en el mantenimiento y crecimiento del animal experimental. El aumento en peso por el consumo de las dietas experimentales fue medido cada tercer día durante los 14 días del experimento, Bender y Doell (1957). Análisis Estadístico. Para el análisis estadístico de los bioensayos de las dietas experimentales de los cereales comerciales para desayuno altos en fibra, se realizó un análisis de varianza en bloques con un nivel de significancia de 5 %, seguido de una comparación de medias por el método de Tukey (α≤ 0.05) utilizando para ello, el paquete estadístico JMP versión 5.0 (2002). 37 | P á g i n a Resultados y Análisis Composición Química y Fibra Dietética. De los cereales comerciales altos en fibra analizados los basados en salvado de trigo mostraron valores altos de proteína variaron de 13.9% a 17.8%. Rzedzicki et al. (2008) reportó cereales basados en sémola de trigo con promedio de 15.35% de proteína. El cereal elaborado con mezcla de avena, trigo, maíz, psyllum y salvado de trigo, tuvo el más bajo contenido de proteína de 6.15%. El contenido de proteína para el cereal de avena fue de 12.96 %, similar a los valores reportados por Rzedzicki et al. (2008). El contenido de cenizas mostró diferencias significativas entre los cereales comerciales, con valores bajos como 1.8%, en el cereal basado en avena y en los cereales elaborados con salvado de trigo el rango fue de 4.28-5.26 % de cenizas. Muchos de los cereales comerciales para desayuno analizados mostraron bajo contenido de grasa, dos de los cereales basados en salvado de trigo y trigo entero y el cereal de avena tuvieron valores altos de grasa (8.5% y 6.6%, respectivamente). Los cereales basados en salvado de trigo y maíz y el cereal con la mezcla de trigo entero, arroz y maíz tuvieron el contenido de grasa más bajo (0.73% y 0.21%, respectivamente). La fibra dietética es el componente que mayormente determina la calidad de estos productos comerciales. El contenido de fibra dietética total de estos trece cereales comerciales altos en fibra varió de 16.30% para el cereal basado en trigo entero, arroz y maíz a 43.28% para el cereal basado en salvado de trigo. Esta diferencia se puede explicar en términos de las proporciones de los ingredientes empleados en su formulación. Los productos con alto contenido de FDI son recomendados porque mejoran el peristaltismo intestinal. Comúnmente, se emplean las capas externas de los granos de cereales para la preparación industrial de estos productos. Los resultados mostraron que los cereales comerciales basados en salvado de trigo tuvieron los mayores contenidos de FDI (25.0% - 39.82%). En cambio el cereal comercial basado en una mezcla de avena, trigo, maíz, cáscara de psyllum y salvado de trigo, tuvo el valor más bajo de FDI (7.42 %). De acuerdo a estos resultados el uso de un gran número de ingredientes en la formulación de estos productos altos en fibra, no necesariamente asegura una mayor fuente concentrada de fibra dietética. El cereal comercial basado en una mezcla de avena, trigo, maíz, cáscara de psyllum y salvado de trigo, mostró el valor más alto de FDS (12.85 %), seguido del cereal basado en avena con 8.83 % y el cereal basado en salvadillo de trigo y trigo entero tuvo el valor más bajo de FDS (2.53 %). Plaami & Kumpulainen (1993) midieron fibra dietética de cereales para desayuno importados encontraron un contenido de FDS de 3.2 % en productos de hojuelas de trigo. Los cereales para desayuno recomendados deberían primeramente suplir una cantidad adecuada de fibra dietética total, así como cantidades suficientes de otros componentes importantes como los β-glucanos, con efectos hipocolesterolemicos e hipoglicemicos. El proceso de extrusión ejerce un efecto en las dos principales fracciones de la fibra de estos productos comerciales. Una parte importante de la FDS de estos productos proviene de los productos de descomposición de la FDI (Rzedzicki, et al., 2008). 38 | P á g i n a El cereal comercial basado en avena mostró el mayor contenido de β-glucan, 4.96%, los cereales basados en salvado de trigo presentaron un rango de 2.58% a 2.03%, El cereal basado en una mezcla de trigo entero, arroz y maíz presentó el valor más bajo de β-glucanos, 0.45%. Estos resultados concuerdan con los encontrados por Batthy (1992), reportó contenidos de avena entre 2.7% y 5.5%. Calidad de la proteína mediante bioensayos en ratas. Las dietas basadas en cereales comerciales altos en fibra mostraron valores de % de digestibilidad de materia seca de 72.54 - 93.04, la dieta de avena registró el valor más alto y las dietas elaboradas con cereales con alto contenido de FDT dieron valores de %DMS más bajos. Entre los cereales basados en salvado de trigo los que presentaron menor contenido de FDT, registraron mayor % DMS (84.8%). Entre las dietas experimentales la dieta del cereal de avena registró los valores más altos de digestibilidad de nitrógeno aparente (DNA) y verdadero (DNV) de 83.8% y 86.0% respectivamente, resultado similar al encontrado en diferentes cultivos de avena, las cuales variaron en un rango de 80.41% a 85.67%, de acuerdo con Pedó et al., 1999. Entre las dietas elaboradas con cereales basados en salvado de trigo, la dieta basada en el cereal con menor contenido de FDT, presentó altos valores de DNA y DNV (78.0 a 81.19%, respectivamente). Aparentemente, dietas con altos % de FDT registraron baja digestibilidad de nitrógeno. En general tanto la DNA y la DNV mostraron una relación inversa con respecto al % de FDT de estos cereales comerciales, durante los 14 días del bioensayos, por lo que altos contenidos de FDT ejerce un efecto negativo, causando una reducción significativa en el % de digestibilidad de nitrógeno. Los resultados de razón neta de proteína (RNP) mostraron una calidad de proteína intermedia para estos cereales comerciales altos en fibra, comparados con la dieta control de caseína. Las dietas de los cereales comerciales presentaron valores de RNP de 1.98-3.23 unidades de RNP. La dieta basada en avena dio el valor más alto de RNP (3.23). La dieta del cereal con 30% de FDT mostró el valor más bajo de RNP (1.98). Las dietas de los cereales con mayor %FDT presentaron valores altos de RNP, la dieta del cereal con 40% de FDT presentó el valor más alto entre los cereales basados en salvado de trigo (3.1). A pesar de la reconocida baja calidad de la proteína en los cereales como fuente de proteína en la dieta de humanos, estos productos de cereales comerciales mostraron una aceptable calidad proteica, medida como Razón Neta de Proteína en bioensayos en ratas. Los resultados de estos bioensayos mostraron que el cereal de avena presentó diferencia significativa en la utilización de la proteína medida como RNP, en comparación a los cereales basados en salvado de trigo como ingrediente principal. Este estudio mostró la variabilidad en la calidad de la proteína que puede ser encontrada en una gran variedad de estos cereales para desayuno altos en fibra. Conclusiones Los cereales comerciales para desayuno altos en fibra mostraron diferencias significativas en el contenido de FDI y FDS, así como también en el contenido de β-glucanos. Estas diferencias son muy probablemente debidas al tipo de granos de cereales empleados para la elaboración de estos productos. 39 | P á g i n a El posible efecto adverso de estas fuentes concentradas de fibra dietética sobre la calidad de la proteína de la dieta, empleando bioensayos en ratas, mostró influencia en la digestibilidad pero no en la utilización de la proteína medida como Razón Neta de Proteína. El consumo de estos cereales comerciales es ampliamente recomendado, especialmente los elaborados con salvado de trigo no solo por su alto contenido de FDI, sino también por su relativamente alto contenido de β-glucanos. Los cereales para desayuno basados en avena ocupan un lugar muy especial debido al balance en sus fracciones de fibra dietética, su relativamente alto contenido de FDS y β-glucanos en comparación con otros cereales comerciales basados en otros granos como ingrediente principal. Referencias American Association of Cereal Chemists. Approved Methods Committee. (2000). Approved Methods of the American Association of Cereal Chemists. AACC. AOAC. (1997). Official Methods of Analysis of AOAC. 16 th ed. Vol. 1, Sec. 12.1.07, Method 960.52. Bhatty, R. S. (1992). Total and extractable β-glucan contents of oats and their relationship to viscosity. Journal of Cereal Science, 15(2), 185-192. Bender, A. E., & Doell, B. H. (1957). Biological evaluation of protein: A new concept. Brit. J. Nutr, 11, 140-148. Church, D. C., & Pond, W. G. (1974). Basic animal nutrition and feeding. Basic animal nutrition and feeding. Hackler, L. R. (1978). An overview of the AACC/ASTM collaborative study on protein quality evaluation. Food Technology, 32. (12), 62-64 Pedó, I., Sgarbieri, V.C., & Gutkoski L.C. (1999). Protein evaluation of four oat (Avena sativa L.) cultivars adapted for cultivation in the south of Brazil. Plant Foods for Human Nutrition, 53: 297–304. Pellett, P. L., & Young, V. R. (1980). Nutritional evaluation of protein foods.Food and Nutrition Bulletin, (Suppl. 4). Plaami, S., & Kumpulainen, J., 1993. Soluble and insoluble dietary fiber and BGlucan contents in domestic and imported breakfast cereals consumed in Finland. J. of food Composition and Analysis, 6, 307-315 Rzedzicki, K., Sykut-Domanska, E., & Popielewicz, J. 2008. Quallity of wheat breakfast cereals available on the polish market. Pol. J. Food Nutr Sci, 58 3, 307-312. 40 | P á g i n a “EVALUACIÓN DE LA CALIDAD Y VIDA DE ANAQUEL DEL MÚSCULO DE CAMARÓN AZUL (Litopenaeus stylirostris) DURANTE EL ALMACENAMIENTO EN HIELO” Canizales-Rodríguez, D.F.1*, Ocaño-Higuera, V.M.1, Márquez-Ríos, E.2, CastilloYáñez, F.J.1, Graciano-Verdugo, A.Z.1, Montoya-Camacho N.1, Jiménez-Ruiz, E.I.3 1Departamento de Ciencias Químico Biológicas. Universidad de Sonora. 2 Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos. 3Unidad de Tecnología de Alimentos. Universidad Autónoma de Nayarit Luis Encinas y Rosales s/n. Hermosillo, Sonora 83000, México. *Email: [email protected] El camarón azul representa una de las pesquerías de mayor importancia en México. Dicha importancia radica en su elevada producción, sabor y precio. Pese a ello, poco se ha estudiado en aspectos relacionados con su calidad. De ahí que el presente trabajo tenga como objetivo caracterizar parcialmente la calidad y vida de anaquel del músculo del camarón azul almacenado en hielo. Para ello, se capturaron organismos de la especie Litopenaeus stylirostris en Empalme, Sonora, México, los cuales se descabezaron y almacenaron inmediatamente en hielo durante 18 días, periodo en el cual se cuantificaron índices de frescura y deterioro con la finalidad de monitorear su calidad y vida de anaquel. Entre las técnicas evaluadas se encuentran al ATP y productos de degradación, índice K, microbiología y determinaciones físicas. Se encontró un incremento significativo (P<0.05) para el índice K, bases volátiles totales, trimetilamina y cuenta total viable de microorganismos mesófilos y psicrófilos, de un valor inicial a uno final de 1.37±0.59% a 59.42±6.05%, 29.56±1.33 a 39.04±0.96 mg de N/100 g, 0.69±0.25 a 2.04±0.59 mg de N/100 g, 3.48±0.44 UFC/g a 6.27±0.21 UFC/g y 2.61±0.28 a 7.14±0.38 UFC/g, respectivamente. Asimismo, se observaron cambios significativos en las determinaciones físicas como el pH, capacidad de retención de agua y color, mientras que en textura no se observaron cambios (P>0.05). En base a los resultados del presente estudio se concluye que el músculo de camarón azul mantuvo su calidad comestible al menos durante 13 días en hielo cuando se emplean buenas prácticas de manejo poscaptura. 41 | P á g i n a PERFIL DE COMPUESTOS FENÓLICOS Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE EXTRACTOS DE CASCARILLA DE Jatropha curcas NO TÓXICA Perea-Domínguez, X.P1, Hadinezhad, M.2, Espinosa-Alonso, L.G.1,3, Valdez-Morales, M.1, Hosseinian, F.S.2 y Medina-Godoy, S1. 1Lab. Alimentos Funcionales, Departamento de Biotecnología Agrícola, Instituto Politécnico Nacional. CIIDIR-IPN Unidad Sinaloa, Juan de Dios Bátiz Paredes 250, Guasave, Sin., México. 2Food Science and Nutrition, Departamento de Química, Universidad de Carleton, 1125 Colonel By Dr Ottawa, ON, Canadá. 3E-mail: [email protected] POSGRADO Jatropha curcas L. es una planta con gran potencial en la producción de biocombustibles. Sus semillas cuentan con una almendra con elevados contenidos de aceite y proteína. La cascarilla o testa (35-40% de la semilla), rica en fibra y pigmentos, es un subproducto poco aprovechado del proceso de obtención de aceite. Por otra parte, los compuestos fenólicos representan el grupo más abundante de metabolitos secundarios en las plantas, siendo ampliamente estudiados por su capacidad antioxidante. El objetivo de este estudio es identificar los compuestos fenólicos presentes en la cascarilla de J. curcas no tóxica, así como la valoración de su potencial bioactivo para determinar si ésta es fuente importante de antioxidantes naturales. Se realizó un fraccionamiento para extraer compuestos fenólicos, que fueron analizados por HPLC. Además, se evaluó la capacidad antioxidante por los métodos ORAC y blanqueamiento del β-caroteno. Los ácidos p-coumárico y ocoumárico así como los flavonoides miricetina y quercetina fueron identificados en la fracción de fenólicos libres, siendo estos últimos los mayoritarios en la fracción de fenólicos conjugados. Los ácidos protocatecuico y p-coumárico y los flavonoides rutina y quercetina se encuentran presentes en altas concentraciones en la fracción de fenólicos ligados. Los extractos de J. curcas mostraron buena actividad antioxidante mediante el método ORAC, por lo que podrían considerarse como una potencial fuente de antioxidantes naturales; no obstante, la capacidad antioxidante se redujo al valorarse mediante el método del β-caroteno, en el cual las condiciones propias del ensayo pueden afectar la bioactividad de algunos compuestos de la cascarilla. Palabras clave: compuestos-fenólicos, antioxidantes, HPLC, Jatropha. 42 | P á g i n a EFECTO DE LA TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO SOBRE EL RIGOR MORTIS Y LA CALIDAD DEL FILETE DE TILAPIA Nathaly Montoya Camacho1*, Víctor Manuel Ocaño Higuera2, Edgar Iván Jiménez Ruiz3, Dalila Fernanda Canizales Rodríguez2, Enrique Márquez Ríos1 y Francisco Javier Castillo Yáñez1 1 Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos. Universidad de Sonora. Blvd. Luis Encinas y Rosales s/n. C.P. 83000. Hermosillo, Sonora, México. 2 Departamento de Ciencias Químico Biológicas, Universidad de Sonora. Blvd. Luis Encinas y Rosales s/n. C.P. 83000. Hermosillo, Sonora, México. 3 Unidad de Tecnología de Alimentos. Secretaría de Investigación y Posgrado. Universidad Autónoma de Nayarit. Blvd. Tepic-Jalisco s/n. C.P. 63190. Tepic, Nayarit, México. *Autor de correspondencia: [email protected] POSGRADO RESUMEN El rigor mortis es uno de los cambios posmortem de mayor importancia en los productos de la pesca, lo cual se debe a su impacto en la apariencia y calidad del producto final. Por lo anterior, en el presente trabajo de investigación se evaluó el efecto de la temperatura de almacenamiento (0 y 5 ºC) sobre el rigor mortis y la calidad del músculo de tilapia. Para ello, se recolectaron tilapias (Oreochromis niloticus) adultas, las cuales se dividieron en 4 lotes. Dos lotes se almacenaron enteros. Uno a 0 y otro a 5 °C durante 266 h, mientras que de los 2 lotes restantes se obtuvieron los filetes los cuales se almacenaron a 0 y 5 °C durante 20 días. A los organismos enteros, se les determinó el índice de rigor (IR), y a los filetes almacenados se les cuantificó ATP y productos de degradación, índice K, pH, textura, CRA, BVT-N y recuento de microorganismos (mesófilos y psicrófilos) por 20 días. Los resultados mostraron que el tiempo y la temperatura de almacenamiento presentaron un efecto significativo (p < 0.05) sobre el IR, índice K, BVT-N y recuento de microorganismos, mientras que en pH, textura y CRA no hubo cambios significativos (p ≥ 0.05). Por lo anterior, se concluye que los organismos almacenados a 5 ºC presentaron un rigor mortis más rápido y pronunciado que los de 0°C, lo cual coincide con una menor vida de útil. Palabras clave: Rigor mortis, calidad, tilapia. 43 | P á g i n a INFLUENCIA DE LA FUNCIONALIDAD DE MEZCLAS DE PROTEÍNAS SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS DE ESTABILIDAD Y TEXTURA EN SALCHICHAS ELABORADAS CON SETAS Y CARNE DE CONEJO PROYECTO – CLAVE: TLC – 24 Corona Esparza Valeria, López García Virginia, Reyes-Martínez Omar, Ramírez Ortiz Ma. Eugenia* Facultad de Estudios Superiores de la UNAM- Cuautitlán Izcalli Av. 1° de Mayo, Col. Sta. María las Torres Cuautitlán Izcalli, Estado de México CP.54740 *Correo electrónico:[email protected] Licenciatura Objetivo General: Evaluar la propiedad funcional emulsionante de 3 proteínas (caseinato de sodio, albúmina de huevo y proteína de soja), en una emulsión (salchizeta) mediante pruebas de estabilidad y texturales. Objetivos Específicos 1. Evaluar los cambios texturales y de estabilidad de la salchizeta de acuerdo a las propiedades funcionales de las proteínas (Caseinato de sodio, albumina de huevo, proteína de soja) en diferentes concentraciones para comparar el efecto de las proteínas sobre el sistema respecto a la salchicha base. 2. Comparar los cambios texturales y de estabilidad al sustituir 40% de la carne de conejo por el hongo seta para analizar la estabilidad del sistema. 44 | P á g i n a Resumen En este proyecto fueron evaluados los efecto producidos por 3 proteínas (caseinato de sodio, albúmina de huevo y aislado de soya) usadas como agentes emulsificantes en la elaboración de salchichas a base de seta y carne de conejo, además fueron utilizados dos diferentes tipos de grasa (manteca vegetal y lardo de cerdo), la evaluación se llevó a cabo mediante un Análisis de Perfil de Textura (TPA por sus siglas en ingles), prueba de cocción y de freído. La prueba de TPA se llevó a cabo en un texturómetro Lloyd TA 500, considerando como relevantes los parámetros de dureza, elasticidad, masticabilidad y cohesividad. Las muestras se elaboraron a partir de la homogenización de la masa cárnica, embutidas, escaldadas, envasadas y almacenadas en refrigeración. Los resultados obtenidos muestran que las salchichas elaboradas con manteca vegetal presentan separación de fases después del escaldado debido a la débil interacción generada por las proteínas en la interfase aceite-agua, a diferencia de las salchichas elaboradas con lardo de cerdo, las cuales se mantienen estables durante todo el proceso. Las salchichas elaboradas con caseinato de sodio presentan mayor dureza, respecto a las elaboradas con albúmina de huevo y aislado de soya; mientras que la cohesividad y elasticidad no presentan diferencia significativa. La prueba de cocción muestra que las salchichas elaboradas con lardo de cerdo y caseinato de sodio son más estables puesto que el peso ganado después de la prueba fue inferior al 2%. La proteína caseinato de sodio, presentó mejores características para ser utilizada como emulsificante. Metodología Las salchichas fueron realizadas a base de carne de conejo y setas, se utilizó manteca vegetal marca Inca y lardo de cerdo. La carne, las setas y las grasas fueron trituradas en longitudes de aproximadamente de 3-5 cm; la carne fue curada con sal nitrificante y sal común, posteriormente a la carne se le agregó hielo escarchado y se realizó el triturado fino, después de ello, la carne las setas y la grasa se homogenizaron con el resto de los ingredientes para ser posteriormente embutidos, y el producto fuese escaldado, enfriado y almacenado. Se realizaron pruebas de TPA con la finalidad de analizar parámetros como; dureza, elasticidad, masticabilidad y cohesividad, esta prueba se realizó en un texturómetro Lloyd TA 500. Se elaboraron dos salchichas base o patrón, una de ellas únicamente con carne de conejo y a la segunda se le añadió la seta. El uso de la proteína se realizó a dos concentraciones, del 1 y 2% en base a la NMX-F-065-1984. 45 | P á g i n a Resultados y análisis Se analizó la capacidad emulsionante de cada proteína en cuestión encontrando que la que presenta mayor capacidad es el caseinato de sodio sobre el resto de las proteínas. Su explicación radica sobre su misma composición, ya que está se constituye de cuatro diferentes proteínas: en una porción en peso aproximada de 4:1:4:1 (Herley f. Casanova Y. y Sara c. Cardona t., 2004), así mismo, la naturaleza anfifílica de las caseínas permite su fuerte adsorción sobre la interfaz sólido-líquido, con lo cual se genera una reducción significativa de la tensión superficial o interfacial del sistema. Los caseinatos, durante el calentamiento, evitan la separación de grasa, lo que obedece en parte a que incrementan la viscosidad y en parte a que participan en la formación de una membrana proteica alrededor de los glóbulos de grasa (Herley f. Casanova Y. 2004). En la figura1 se presenta el comportamiento de la dureza en las diferentes combinaciones realizadas, la dureza de la salchicha producida con caseinato y manteca vegetal (M) es inferior a la que contiene lardo de cerdo (L), debido a que la manteca vegetal no posee colágeno como el lardo de cerdo ya que el colágeno provoca que la interacción entre las proteínas miofibrilares de la carne de conejo formen una emulsión más estable, obteniendo una salchicha con mayor dureza y menor gomosidad, requiriéndose menor esfuerzo para masticar. Dureza (Kgf) 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 0.00% 0.50% 1.00% 1.50% 2.00% 2.50% Caseinato (L) Albúmina (L) Prot. Soja (L) Caseinato (M) Albúmina (M) Salchicha lardo conejo salch. Manteca conejo Concentración Figura 1: Comparación de dureza entre las distintas formulaciones 46 | P á g i n a La salchicha elaborada con caseinato al 1% y lardo de cerdo, presenta el comportamiento más aproximado a la formulación base, en los parámetros de cohesividad, elasticidad y masticabilidad. En las pruebas de estabilidad por cocción, se registra una pérdida de peso en las formulaciones por una ruptura en la emulsión cárnica conocida como coalescencia o re agregación, en donde las partículas de grasa dispersas en todo el sistema se unen hasta formar partículas macro visibles (Forrest, 1979); fenómeno que puede suceder en el escaldado y que se debe a que las partículas no están recubiertas completamente de proteína, esta grasa se puede observar en el agua utilizada para la cocción. Otra explicación a la pérdida o ganancia de peso es la capacidad de retención de agua que poseen las proteínas tanto internas como externas (Cuenca, 2004). Cuanto más fuertemente se hallan unidos los iones a la proteína, es mayor el efecto hidratante esto porque los aniones desplazan el punto isoeléctrico de las proteínas hacia valores de pH más bajos, lo que ocasiona una ganancia de peso en las muestras. La figura 2 muestra el porcentaje de peso ganado y/o perdido para cada formulación, considerando la siguiente simbología; L=Lardo de cerdo, M=Manteca, C=Caseinato, A=Albumina, S=Soya y los números 1 y 2 para las concentraciones utilizadas. 8 6 4 % de Peso 2 0 -2 LC1 LC2 LA1 LA2 LS1 LS2 MC1 MC2 MA1 MA2 -4 -6 -8 Figura 2. Estabilidad de las diferentes formulaciones. La interacción lardo de cerdo-caseinato de sodio creó una matriz mucho más estable que el resto de las interacciones con otras proteínas o con la manteca vegetal. La matriz se mantuvo estable durante el homogenizado, el escaldado y días después de su elaboración. 47 | P á g i n a En la figura 3 se muestra una propuesta de la interacción entre el caseinato de sodio y el lardo de cerdo como principales componentes de la matriz más estable en la elaboración de salchichas. Figura 3: Propuesta de modelo de interacción entre caseinato y lardo de cerdo. Las salchichas elaboradas a base de lardo de cerdo y caseinato de sodio presentaron una buena emulsificación; esto debido a la presencia de colágeno que ayuda a la formación de la matriz proteica, además de que el caseinato resiste altas temperaturas, corte de cizalla, buena solubilidad y retención de agua, lo que fortalece la matriz generada. La incorporación de sales de ácidos fuertes, como el cloruro de sodio, aumenta la capacidad de retención de agua, debido al complejo sal-proteína que se forma. Cuanto más fuertemente se hallan unidos los iones a la proteína, es mayor el efecto hidratante. Los aniones desplazan el punto isoeléctrico de las proteínas hacia valores de pH más bajos y que aumentan la capacidad de retención de agua, lo que ocasiona una ganancia de peso en las muestras. En general las diferencias entre cada salchicha, se ven directamente afectadas por el tipo de proteína utilizada, la concentración de la misma así como la interacción existente con cada tipo de grasa. La salchicha elaborada con lardo de cerdo y caseinato al 1% presenta una mejor estabilidad ya que obtuvo una ganancia en peso del 2%, con respecto a las demás, la importancia radica en la formación de la matriz proteica ya que se mantiene estable durante los procesos críticos como la homogenización y el escaldado. 48 | P á g i n a Conclusiones. La proteína que presenta mayor capacidad emulsionante es el caseinato de sodio, la razón radica en su misma composición, esta proteína durante el calentamiento evitan la separación de grasa, lo que obedece a que participan en la formación de una membrana proteica alrededor de los glóbulos de grasa, confiriéndole estabilidad coloidal a las gotas recién formadas. La salchicha elaborada con lardo de cerdo y caseinato al 1% presenta una mayor estabilidad, representada en una ganancia en peso de <2%. Referencias 1. Damodaran, S., “Food Proteins and Their Applications”. Marcel Dekker, Inc. New York. 1997. 2. Lawson, Harry. “Aceites y Grasas alimentarios”. Ed. Acriba. Zaragoza, España. 1999. 3. Garrido Castelán Edgar., “Efecto de las proteínas de la piel de cerdo sobre la textura de salchichas”. Tesis, 2006. 4. Casanova, Herley F.” Emulsiones O/W estabilizadas con Caseinato de sodio: efecto de los iones calcio, concentración de proteína y temperatura”. Rev. 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Kielty CM. Elastic fibres in health and disease. Expert reviews in molecular medicine. 8; 1-23. 2006. 49 | P á g i n a COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL ACEITE CRUDO DE SEMILLAS DE MAMEY (Pouteria sapota) Y CALABAZA (Cucurbita spp.) CULTIVADAS EN YUCATÁN. Víctor Moo-Huchin1*., Cesia Gutiérrez-Canul2., Mariela Moo-Huchin3., Wilma PiñaCanché1, Raciel Estrada-León1, Enrique Sauri-Duch2. 1 Instituto Tecnológico Superior de Calkiní en el Estado de Campeche. Av. AhCanul por Carretera Federal Campeche-Mérida, Calkiní, Campeche, México. 2 Instituto Tecnológico de Mérida. Av. Tecnológico Km 5 Carretera antigua MéridaProgreso S/N, Mérida, Yucatán, México. 3Universidad Tecnológica del Poniente. Col. Las Tres Cruces, C.P. 97800, Maxcanú, Mérida, Yucatán, México *Autor para correspondencia: [email protected] Categoría: Posgrado RESUMEN Debido a la gran importancia de los aceites para la alimentación, industria y científicos, en la actualidad se estudian nuevas fuentes de aceites vegetales. En este sentido, el objetivo del presente trabajo fue determinar la composición química del aceite crudo de semillas de calabaza y mamey. Se obtuvieron semillas de mamey, calabaza var. ‘Xnuuk K´úum’ y calabaza var. 'Xmejen K'úum' a partir de frutos maduros procedentes de huertos locales en el estado de Yucatán, México. Tras el acondicionamiento de las muestras, se realizó una extracción continua del aceite crudo. Se determinaron en cada muestra por triplicado los siguientes parámetros: índice de yodo, índice de refracción, índice de peróxido, índice de acidez y el perfil de ácidos grasos. Los resultados indican que las semillas de calabaza y mamey obtuvieron 40 y 50 % de aceite crudo, respectivamente. El índice de refracción evaluado a 25 °C y el índice de peróxido resultaron significativamente mayores para aceite de semillas de mamey cuando fue comparado con el aceite de la calabaza var. 'Xmejen K'úum'. Asimismo, el índice de acidez y el índice de yodo fueron significativamente mayores en aceite crudo de mamey. Los ácidos grasos mayoritarios encontrados fueron el ácido oleico para mamey (60.32%) y ácido linoleico (de 63.11 hasta 69.12%) para las dos variedades de calabaza estudiados. Los resultados obtenidos sugieren que los aceites de las semillas de calabaza y mamey pueden ser utilizados en la industria de alimentos, cosméticos y farmacéuticos. Palabras claves: Aceites, mamey, calabaza, ácidos grasos INTRODUCCIÓN En la Península de Yucatán se produce una gran diversidad de frutas tropicales y especies vegetales originarias de la región como el mamey (Pouteria sapota Jacq.) y la calabaza (Cucurbita spp.). El primero pertenece a la familia de las sapotáceas y es originario de Centro América y sur de México, en donde se encuentra ampliamente distribuido en todo el país. 50 | P á g i n a Se caracteriza por tener una pulpa suave y aromática de sabor agradable y se consume principalmente en forma fresca y en otros casos se aprovecha en la elaboración de productos tales como mermeladas, helados, refrescos, batidos, jaleas y crema (Sauri, 1997). Durante el procesado de la pulpa de mamey se desechan semillas de poco valor, lo cual es una oportunidad para la obtención de aceite de importancia en la dieta y dar valor agregado. Otra especie vegetal importante en Yucatán son las calabazas (Cucurbita spp.) que pertenecen a la familia Curcubitaceae y son, después del maíz, el género más importante de la milpa (Terán et al., 1998). Sus semillas es el producto más importante ya que es utilizado por la gente campesina en la elaboración de sus alimentos (Terán et al., 1998). De las tres especies que se cultivan en Yucatán, las más abundantes son Curcubita moschata y C. argyrosperma. De la primera se reconocen a dos grandes variantes de esta especie, de acuerdo al ciclo de maduración, la Xmejen k'úum o de ciclo corto o calabaza chica y la Xnuuk k’úum, o de ciclo largo o calabaza grande. Es sabido que las semillas de especies vegetales contienen cantidades significativas de aceite de importancia en la dieta (González et al., 2002), que puede ser aprovechado por la industria y dar valor agregado a estas semillas obtenidas de especies vegetales de la región. Adicionalmente hay muy poca información científica en relación a sus características de composición química de estos aceites, lo cual indica una necesidad de más investigaciones con el fin de caracterizar sus atributos de calidad que permitan potencializar su uso en la dieta habitual. El objetivo del presente trabajo fue determinar la composición química del aceite obtenido de las semillas de mamey (Pouteria sapota Jacq) y calabaza (Cucurbita spp) cultivados en Yucatán. METODOLOGIA -Material vegetal y extracción de aceite. Se realizó una colecta de 1 kg de semillas de mamey, semillas de calabaza ‘xmejen k´úum’ y semillas de calabaza ‘Xnuuk K´úum’ durante el período de Febrero-Abril 2013 a partir de frutos procedentes de huertos locales en el estado de Yucatán y Campeche. De cada especie vegetal se formaron 5 lotes de semillas, las cuales fueron previamente lavados con agua corriente y secados en una estufa por convección forzada (SHELL LAB 1350FX-10) a una temperatura de 60 °C durante 48 h, hasta alcanzar una humedad aproximada del 10 %. Finalmente las semillas secas fueron pulverizadas en una licuadora Osteriser® y almacenadas en bolsas de polietileno a -20 °C hasta la extracción del aceite crudo. Se realizó una extracción continua del aceite crudo con 50 g de muestra mediante equipo Soxhlet, empleando como solvente n-hexano (350 mL) durante un tiempo de 6 h a 70 °C. Después de la extracción se evaporó el disolvente para obtener el aceite crudo, el contenido de aceite de las semillas se determinó por diferencia de peso del matraz usado en la extracción. El aceite crudo se envasó en frascos de plástico (PET) con rosca y se almacenó a -20 ºC hasta su análisis. 51 | P á g i n a -Métodos analíticos El índice de refracción, índice de peróxido, índice de acidez y el índice de yodo se determinaron por triplicado de acuerdo a la A.O.A.C (1995). Para determinar el perfil de ácidos grasos se siguió la técnica de extracción de los lípidos descrita por Hanson y Olley (1963) y para la formación de los ésteres metílicos se siguió la técnica de Morrison y Smith (1964). La composición de ácidos grasos fue analizado mediante cromatografía de gases utilizando las condiciones cromatográficas descritas por Moo-Huchin et al. (2013). Los resultados se presentan como porcentaje del total de ácidos grasos. -Análisis estadístico Se utilizó el paquete estadístico Statgraphics® Plus, versión 2.1 (Manugistic, Inc., Rockville, Md., USA) para el análisis de varianza (ANOVA) entre las diferentes especies, y en caso de significancia la comparación de medias se realizó con la prueba de Tukey (p<0.05) (Montgomery, 2005). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Las características físico-químicas promedio del aceite crudo obtenido de las semillas de calabaza y mamey se presentan en la tabla 1. El aceite de semillas de mamey mostró un índice de refracción (a 25 °C) promedio de 1.4716+0.001, valor similar que el mostrado por el aceite de semillas de calabaza grande 'Xnuuk K'úum' (1.4586+0.003) pero fue significativamente mayor (p<0.05) al aceite de semillas de calabaza pequeña ‘Xmejen K’úum’ (1.4538+0.013). Por otro lado el índice de peróxido expresado como meq. O2/kg de aceite fue significativamente mayor en aceite de semillas de mamey (5.45+0.974 meq. O2/kg) y de calabaza 'Xnuuk K'úum' (semilla grande) (4.51+0.558) con respecto a la calabaza‘Xmejen K’úum’ (semilla menuda o pequeña) (3.67+1.125). Estos índices de peróxido obtenido corresponden a un aceite fresco, dentro de lo que se pudiera considerar su período de inducción con respecto al deterioro oxidativo (SchmidtHebbel et al., 1981). En otro resultado, el índice de acidez (expresado como % ácido oleico) y el índice de yodo (expresado como g de I2/100 g) fueron significativamente superiores en aceite de semillas de mamey (2.23+1.101 y 174.00+4.63, respectivamente) en relación al aceite de semillas de calabaza grande 'Xnuuk K'úum' (1.00+0.134 y 129.23+8.23, respectivamente) y calabaza pequeña ‘Xmejen K’úum’ (1.10+0.017 y 133.03+7.57, respectivamente). En función de los resultados correspondientes a la acidez oleica de las tres especies se puede considerar bajo o similar al compararlo con las recomendaciones de la normatividad venezolana COVENIN (1980) para aceites que no han sido sometidos a procesos de refinación (valores de 2 % de ácido oleico) , lo cual permite considerar a los aceites evaluados como resistentes a reacciones hidrolíticas, proceso que genera ácidos grasos libres en aceites y grasas por desdoblamiento de los triacilgliceroles que lo forman (Guajardo, 1997). Tabla 1. Comparación de características físico-químicas del aceite crudo obtenido de semillas de mamey (Pouteria sapota Jacq.) y calabaza (Cucurbita spp.)a. 52 | P á g i n a Porcentaje de ácidos grasos (%) Índice de Índice de Índice de Índice de acidez (% yodo refracción a peróxido ácido (g de I2/100 Aceite crudo 25 °C (meq O2/kg) oleico) g) 2.23+1.101 174.00+4.63 Mamey 1.4716+0.001b 5.45+0.974b b b Calabaza 'Xnuuk 1.4586+0.003a 4.51+0.558a 1.00+0.134 129.23+8.23 K'úum' b b a a Calabaza ‘Xmejen 1.10+0.017 133.03+7.57 K’úum’ 1.4538+0.013a 3.67+1.125a a a a Valores promedios + desviación estándar de cinco determinaciones por triplicado. En otro resultado, el porcentaje de aceite crudo obtenido de semillas de mamey y calabaza (ambas variedades) fue 40 y 50%, respectivamente, la cual fue superior a lo encontrado por Rezig et al. (2012) para calabaza (31.57%). En la figura 1 se presenta la composición de ácidos grasos del aceite crudo de semillas de mamey y calabaza. Se observa que el aceite de mamey tuvo una concentración significativamente mayor de ácido oleico (60.32%) que los aceites de semilla de calabaza, mientras que en el aceite de éstas, el ácido linoleico fue el mayoritario (71.32% para calabaza 'Xnuuk K'úum' y 67% y para calabaza ‘Xmejen K’úum’), y significativamente mayor que el contenido en el aceite de semilla de mamey. El segundo ácido graso en abundancia en el aceite de semilla de mamey fue el esteárico (25.95%), mientras que en el aceite de las semillas de calabaza el segundo ácido graso en abundancia fue el palmítico (33%). 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Mamey Calabaza 'Xnuuk K'úum' Calabaza 'Xmejen K'úum' Palmítico EsteáricoOleicoLinoleico Ácidos grasos Figura 1. Comparación de la composición en ácidos grasos (%) del aceite crudo obtenido de semillas de mamey (Pouteria sapota Jacq.) y calabaza (Cucurbita spp.)a. CONCLUSIONES El producto obtenido de las semillas de las tres especies presentan, de manera general, características fisicoquímicas y perfil de ácidos grasos característicos de un aceite con baja estabilidad química y constituida mayoritariamente por ácidos grasos insaturados (oleico y linoleico), lo que sugiere su uso tecnológico como aceite secante. 53 | P á g i n a Las proporciones de ácido oleico y linoleico determinadas, permiten proponer estudios encaminados a purificar y fraccionar estos metabolitos de interés farmacológico y nutricional, logrando establecer el aprovechamiento de las semillas de calabaza y mamey. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Association of Official Agricultural Chemists. (1995). Official methods of Analyses. Washington, DC: Association of Official Analytical Chemists. COVENIN. (1980). Norma No 325: Aceites y Grasas Vegetales. Determinación de Índice de la Acidez, Comisión Venezolana de Normas Industriales, Caracas. González M., Sauri E. (2002). 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Santiago, Chile. p 265. 54 | P á g i n a APLICACIÓN DE LAS MICROONDAS EN LA DESHIDRATACIÓN DE ALIMENTOS Flores Ortega A.a, González Rincón E.b, Abraham Juárez R.b, López Orozco M.b, Martínez Soto G.b Universidad de Guanajuato, Campus Irapuato-Salamanca, División Ciencias de la Vida, aDepartamento de Mecánica Agrícola, bDepartamento de Alimentos. ExHacienda El Copal carr. Irapuato-Silao km 9. Irapuato, Guanajuato, México. Categoría: Licenciatura * [email protected] OBJETIVO Evaluar la cinética de secado y algunos parámetros de calidades de fresa (variedad Camino Real) y papa (variedad Fianna) deshidratadas mediante microondas así mismo realizar una comparación con otro método de deshidratación. RESUMEN La aplicación de microondas a un proceso de deshidratación proporciona un medio eficiente de transferencia de energía para la remoción de la humedad. Papa variedad Fianna y Fresa variedad Camino Real, se sometieron a deshidratación por microondas, comparando con el método de deshidratación convencional de aire caliente. Se obtuvieron los datos experimentales del contenido de humedad libre con respecto al tiempo. Se realizaron pruebas de humedad, actividad de agua, encogimiento, textura, color, análisis sensorial de los alimentos deshidratados, así como un análisis en los costos energéticos de los equipos empleados. Durante las pruebas, se encontró que para combinaciones a diferentes intervalos de tiempo de exposición a la radiación y tiempo de evacuación de la humedad, el tiempo de secado puede reducirse hasta en un 80% comparado con el secado convencional con aire caliente en muestras similares de papa y fresa. PALABRAS CLAVE Deshidratación, ondas electromagnéticas, actividad de agua ÁREA: Tecnología de Alimentos y Procesos de Alimentos METODOLOGÍA Se aprovechó la cámara de radiación de un horno de microondas de la marca PANASONIC, modelo NN-6407, de 1 ft3 y 1300 W. Adicionalmente se utilizó un extractor de aire para la remoción de humedad de marca CENTRIMAX B2 DIVER, modelo 119, de 370 W con un caudal nominal de 467 m 3/h. La velocidad del aire se determinó mediante un anemómetro marca PROVA, modelo AVM-07, con 55 | P á g i n a capacidad de 0.3 a 45 m/s. La pérdida de masa durante la deshidratación se realizó utilizando una balanza digital marca OHAUS, modelo Scout pro SP 2001 con capacidad de 2000g 1g. El color de los materiales frescos y deshidratados se determinó considerando los parámetros L, a, y b mediante un espectrofotómetro Hunter COLORFLEX EZ. Para la deshidratación por microondas, las muestras se colocaron en una base de porcelana con perforaciones. Para la deshidratación con aire caliente se utilizó un secador experimental tipo túnel con una resistencia eléctrica de 2000 W, equipado con un ventilador 170 W y 233 m3/h de caudal de aire. En la Figura 1 se muestra el esquema general del diseño conceptual del secador, donde se indican sus principales componentes, los cuales son disponibles comercialmente. Figura 1. Esquema general del prototipo experimental del secador: 1- Cámara de secado; 2- Puerta para manejo de material; 3- Extractor de aire. Para verificar el funcionamiento del secador, se utilizaron muestras de papa y fresa, éstas fueron desinfectadas utilizando una solución de hipoclorito de sodio y posteriormente se cortaron en rodajas con un espesor de 1.8 mm en el caso de la papa y 3 mm para la fresa aproximadamente. Después, las rodajas de papa se sometieron a un proceso de escaldado a 85ºC para inactivar la oxidación enzimática y posteriormente se les adicionó ácido ascórbico al 0.1% como antioxidante con un contenido de agua inicial de 82.22%. En el caso de la fresa, el contenido de humedad inicial de la fresa fue de 92.57 % de agua y 11.13ºBx. La fresa se colocó con sacarosa grado comercial en proporción de 1:1 y se dejó en reposo a temperatura ambiente durante 4 h, el contenido de humedad y el contenido de grados °Brix al final de este pretratamiento fueron de 65.10%. Y 30.12°Brix respectivamente. Posteriormente las muestras se colocaron en una base de porcelana y se inició la operación de secado. Las muestras se expusieron a distintos intervalos de tiempo a la radiación y después de cada intervalo se midió la masa y se hicieron observaciones de apariencia del producto y temperatura superficial, hasta que el producto alcanzó la humedad de equilibrio. Adicionalmente, muestras similares de papa y de fresa se sometieron a secado con aire caliente a 60ºC en un secador tipo túnel. Con esta información se construyeron las curvas de secado y se realizaron algunos de los análisis básicos para caracterizar el producto deshidratado, tales como porcentaje de humedad, actividad de agua (aw), color, textura, encogimiento y análisis sensorial. 56 | P á g i n a RESULTADOS Y ANALISIS Curvas de secado PAPA Se simuló un proceso de secado continuo, como se muestra en la Figura 2. Aquí se combinaron dos potencias de radiación, hasta obtener una humedad de equilibrio a los 10 minutos con un coeficiente de correlación de 0.96 por medio de un ajuste Polinomial. Comparando con el secador tipo túnel (aire caliente), como se muestra en la Figura 3, éste logró una humedad de equilibrio a los 180 minutos prolongando así el tiempo de secado con un coeficiente de correlación de 0.98 por medio de un ajuste Polinomial grado 2. Fig.2 Variación del contenido de humedad en el secado de papa por microondas. Fig.3 Variación del contenido de humedad en el secado de papa por aire caliente. FRESA Para el caso de la fresa, después de que se sometió a un tratamiento osmótico previo, está se redujo hasta un 60% en peso, lo cual facilitó el deshidratado por microondas. Posteriormente fue sometida a dos niveles de potencia, hasta alcanzar una humedad de equilibrio de 7 minutos, con un 0.97 de correlacion, con un ajuste Polinomial grado 2. Comparado con el deshidratado por túnel, este alcanzó una humedad de equilibrio a los 360 minutos, como se muestra en la Figura 5, con un coeficiente Fig.4 Variación del contenido de humedad en el secado en fresa por microondas. Fig.5 Variación del contenido de humedad en el secado en fresa por aire caliente. Actividad de agua En la Figura 6 se puede apreciar la disminución de la actividad de agua durante el deshidratado por túnel y microondas de rodajas de papa. Los valores obtenidos de la deshidratación fueron de 0.324 y 0.289 respectivamente, a esta actividad se inhibe el crecimiento de un gran número de microrganismos. El comportamiento de la actividad de agua es similar a lo reportado por (Roca, 2010) quienes estudiaron los factores que afectan el procesamiento del deshidratado de papa. Para la Figura 7 los valores finales de la actividad de agua para la fresa deshidratada son 0.406 para el deshidratado por microondas y 0.322 para el secado por túnel, el comportamiento de la disminución de fresa es similar a lo reportado por (Sagñay, 2009). 57 | P á g i n a Fig.6 Variación de la actividad de agua en la papa deshidratada. Fig.7 Variación de la actividad de agua en la fresa deshidratada Encogimiento En la Figura 8 y 9 se muestran los valores del volumen de las rodajas de papa y fresa deshidratadas por túnel con un porcentaje de volumen final de 83.41% para la papa y 98.17% para la fresa; en cambio cuando se sometió al deshidratado por microondas estas tuvieron un encogimiento menor con 77.6% para la papa y 96.33% para la fresa. Lo que logra favorecer la geometría durante el secado por microondas. Fig.8 Variación del volumen en la papa deshidratada. Fig.9 Variación del volumen en la fresa deshidratada. Textura La textura tiende a aumentar conforme va pasando el tiempo debido a la cantidad de agua que se va perdiendo, cabe resaltar que hay un cambio drástico de Fuerza aplicada para su ruptura en ambos tratamientos de secado, esto causado por el tipo de energía empleada en cada secador. Para el caso del secado por microondas para ambas muestras, estas requirieron una fuerza mayor (casi el doble) en comparación con el secado por túnel; cómo se logra apreciar en la Figura 10 y 11. Datos similares fueron reportados por (Arballo, 2013 & Contreras2006) donde se deshidrata por microondas. Fig.10 Variación de la Fuerza en la papa deshidratada. Fig.11 Variación de la Fresa en la fresa deshidratada. Color En la Figura 12 y 13 se muestra la variación de tonalidad y la intensidad en la que se presenta el color, en cada una de las rodajas de papa y fresa deshidratadas, 58 | P á g i n a dando como resultado una tonalidad mayor para el secado por microondas en ambos productos, esto se ve influenciado por las temperaturas a las que son sometidos. El comportamiento de color obtenido es similar a los resultados reportados por (Sagñay, 2009 & Contreras, 2006). Fig.12 Variación de la tonalidad (H) y la intensidad (C*) de color en la papa deshidratada. Fig.13 Variación de la tonalidad (H) y la intensidad (C*) de color fresa deshidratada. Análisis Sensorial El grado de aceptabilidad como un producto de botana, es muy aceptable para los jueces evaluadores, para el caso del deshidratado por microondas en ambas muestras. En cambio hay un nivel de agrado para el caso del deshidratado por túnel para las rodajas de fresa, esto debido al tratamiento osmotico previo al que fue sometido. Fig.14. Evaluación sensorial de papa deshidratada Fig.15 Evaluación sensorial de fresa deshidratada Donde 7Me gusta mucho hasta 1Me disgusta mucho Costos de operación En la Tabla 1 se muestra que los mayores costos energéticos son para el secado por túnel teniendo en cuenta el tiempo de 3 horas para el secado de rodajas de papa y 6 horas en las rodajas de fresa. Por otra parte el menor costo se puede observar para las muestras tratadas mediante microondas, teniendo en cuenta el corto tiempo de duración del proceso y la velocidad a la que el equipo puede llegar a secar las muestras. Tabla 1. Costos energéticos de operación durante el deshidratado por microondas y túnel PRODUCTO EQUIPO ACCESORIOS POTENCIA DEL EQUIPO (kW-h) PAPA Túnel Microondas FRESA Túnel Microondas EQUIPO VENTILADOR EQUIPO EXTRACTOR EQUIPO VENTILADOR EQUIPO EXTRACTOR 2.4 0.17 1.3 0.37 2.4 0.17 1.3 0.37 ENERGIA CONSUMIDA (kW-h) 0.8 0.17 1.3 0.37 0.8 0.17 1.3 0.37 COSTO DE LA ENERGIA (Kw-h) $1.01 COSTO TOTAL $3.03 $0.168 $1.01 $6.06 $0.117 59 | P á g i n a CONCLUSION El uso de microondas es factible para procesos de secado, aunque la forma de empleo va a depender de las características reológicas del producto, ya que son muchos los factores que influyen en el secado con microondas entre los que se destacan: la potencia del campo electromagnético, la cantidad del producto, la cantidad de agua a eliminar, el caudal de aire, el tiempo de exposición a la radiación. En todas las determinaciones realizadas, cabe señalar que el secado por microondas logro favorecer las características de calidad de ambos productos. En este trabajo únicamente se consideró el tiempo de radiación, dos potencias del campo electromagnético y un caudal de aire. También se encontró, que para el caso de la papa y la fresa se logró reducir hasta en un 80% el tiempo de secado, comparado con el método térmico tradicional. REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍCAS Arballo, R. J. 2013. Modelado y simulación de la deshidratación combinada osmótica y microondas de Frutihorticolas. Tesis Doctoral. Departamento de Ingeniería Química. Universidad Nacional de la Plata. Casp, A.; Abril, J. 1998. Procesos de conservación de alimentos. Editorial MundiPrensa. pp. 259, 332-333, 384-385. Contreras, M.C. 2006. Influencia del método de secado en parámetros de calidad relacionados con la estructura y el color de manzana y fresa deshidratadas. Tesis Doctoral. Departamento de Tecnología de Alimentos. Universidad Politécnica de Valencia. Geankoplis, G. J. 2002. Procesos de transporte y operaciones unitarias. Tercera Edición. CECSA. pp. 579-580. Karel, M.; Lund, D. B. 2003. Physical principles of food preservation. Second Edition. Ed. Marcel Dekker Inc. pp. 378-379. Quintero-Ramos, A. 2012. Tendencias y aplicaciones en el secado de alimentos. Conferencia Magistral en el XIV Congreso Nacional de Ciencia y Tecnología, Monterrey NL, México [25 de Mayo del 2012]. Rocca-Della, P. 2010. Secado de alimentos por métodos combinados: Deshidratación osmótica y secado por microondas y aire caliente. Tesis de Maestría en Tecnología de Alimentos. Universidad Tecnológica Nacional, Facultad regional de Buenos Aires Sagñay R. N. 2009. Control de calidad de frutilla deshidratada por microondas a tres potencias. Tesis de Licenciatura. Escuela superior Politécnico de Chimborazo. Zhenfeng, L.; Raghavan, G. S. V. 2010. Optimal power control strategies in microwave drying. Journal of Food Engineering 99: 263-268. 60 | P á g i n a PRODUCCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DE DESECHOS AGROINDUSTRIALES a a b a Gerardo Martínez-Soto , Lorena, Figueroa-Flores , Teresa Vieyra-Hernández , Mayela Bautista-Justo , a a a Ernesto A. Camarena-Aguilar , Juan Mercado-Flores , Ma. Rosario Abraham-Juárez , Ma. Fabiola Leóna Galván a Universidad de Guanajuato, División Ciencias de la Vida, Campus Irapuato-Salamanca, Departamento de b Alimentos, Departamento de Ciencias Ambientales, ExHacienda El Copal carr. Irapuato-Silao km 9. Irapuato, Guanajuato, México. Licenciatura RESUMEN Los residuos de diferentes frutas y vegetales que se desechan en la industria procesadora de alimentos contienen una gran cantidad de tejido lignocelulósico, el cuál puede ser aprovechado para la obtención de metabolitos fermentables y productos de la fermentación. En este trabajo, se estudió la producción de etanol a partir de los residuos agroindustriales de mango, naranja y piña. Los residuos agroindustriales se sometieron a diferentes tratamientos: físicos y químicos. Cuando se obtuvo el sustrato, este se sometió a una fermentación, para la cual se usó Saccharomyces cerevisiae. Se realizaron diferentes pruebas para caracterizar los residuos. En la determinación de solidos solubles se obtuvo que, estos aumentan cuando el tratamiento químico es más severo En la prueba de determinación de etanol se confirmó que los sustratos de mango y naranja tratados al 6%, son los sustratos que proporcionan mayor cantidad de etanol. Palabras claves: Tratamientos, fermentación, Saccharomyces cerevisiae, etanol. INTRODUCCIÓN Actualmente, el bioetanol es el biocombustible con mayor producción mundial, del que se elaboraron más de 40,000 millones de litros durante el año 2004 en todo el mundo. Para su fabricación se pueden utilizar una gran cantidad de materias primas (García, 2007). Una opción para producir de etanol es mediante fermentación, usando materias primas ricas en carbohidratos tales como azúcar, almidón, celulosa entre otros. 61 | P á g i n a Estos carbohidratos provienen de frutas y vegetales como la caña de azúcar, cereales (trigo, maíz y sorgo), tubérculos (papa) y de algunas otras materias lignocelulosas o residuos orgánicos (Vázquez y Dacosta, 2007). Sin embargo hoy en día se buscan materias primas baratas, que sustituyan a las tradicionales materias azucaradas, como melazas (Hernández, 2007), además se busca que estas materias primas no atenten contra la seguridad alimentaria. La producción de etanol a partir de lignocelulosa (residuos agroindustriales) no atenta contra cultivos que son utilizados principalmente para consumo humano. La producción de etanol a partir de la celulosa, en lugar de usar el almidón, evitaría competir con productos alimentarios. (Marcano y col., 2009). La celulosa requiere de tratamientos para convertirse en azúcares simples. En la conversión de materiales lignocelulósicos a azúcares reductores fermentables, la hidrolisis acida ha sido la tecnología más usada, para su posterior obtención de bioetanol (Domínguez y col., 2011). Una vez que se tienen los azúcares disponibles, se requiere de un microorganismo para la fermentación. En la actualidad Saccharomyces cerevisiae es una de las cepas más utilizadas en la obtención de etanol a partir de material lignocelulósicos (Carballo, 2000). El objetivo del presente trabajo fue establecer un procedimiento para la obtención de bioetanol a partir de los residuos agroindustriales provenientes de mango, naranja y piña; los cuales se generan por empresas de la región. MATERIALES Y MÉTODOS Los desechos fueron recolectados en la ciudad de Irapuato Guanajuato, estos se sometieron a un secado solar, posteriormente se molieron. Una vez que se obtuvo una harina de cada uno de los residuos, esta se caracterizó en cuanto a humedad (AOAC 16th método 934.01), cenizas (Pearson, 1993) y grados Brix usando un refractómetro digital marca HANNA modelo HI 9680 (0-85 %). Hidrólisis La hidrólisis ácida se realizó utilizando las diferentes concentraciones de las soluciones de ácido sulfúrico al 5 y 6%, considerando una proporción de 30:1 (partes de solución: partes de residuo) a 80 ºC durante 40 minutos. 62 | P á g i n a Los experimentos se realizaron por triplicado de acuerdo con la metodología propuesta por Ferrer y col. (2002) realizando algunas modificaciones. Determinación de azucares totales Una vez que se enfriaron las muestras, se realizó por triplicado la determinación de sólidos solubles totales (ºBrix) para cada una de las muestras previamente hidrolizadas utilizando un refractómetro digital marca HANNA modelo HI 9680 (085 %). Cuantificación de etanol La determinación de etanol se llevó a cabo por el método espectrofotométrico Técnica del dicromato de potasio (Isarankura 2007) Análisis estadístico Se realizó la prueba t-Student para observar las diferencias entre las medias de los diferentes tratamientos a un nivel de confianza del 95 %. Se utilizó el paquete estadístico Statgraphics ver. 2011. RESULTADOS En la tabla se muestras las características de cada uno de los residuos antes de la una vez que se sometieron proceso de secado y molienda. Tabla 1.- Determinación de humedad y cenizas en porcentaje Residuo Mango Naranja Piña Humedad % inicial Final 81.96 10.55 74.58 13.48 83.37 13.13 Cenizas % Final 4.433a 4.263a 4.008a En la tabla 1 se presentan los porcentajes de humedad de los diferentes residuos. La humedad inicial se determinò con los desechos en fresco, asi mismo se determino la humedad finalizar con los desechos deshidratados. 63 | P á g i n a Se puede observar que la naranja es el residuo que continen menor cantidad de agua con un porcentaje aproximado de 75 %, esto se debe a que son solo desechos de la càscara; Ceron y Cardona (2011) reportan que la naranja contiene un 80% de agua. En el caso de la cascara del mango Zuluaga y col.,(2010) determinaron un contenido de humedad de 85.5 %. para la cascara de piña se reporto un contenido de humedad del 83 % (Tejada, 2010). Al realizar el proceso de secado lo que se busca principalmente es la conservacion de los desechos. Una vez que se sometieron los residuos al secado solar estos perdieron de un 60 % de humedad, parecido al porcentaje que maneja Mejía y col. (2007) del 70 % al trabajar con residuos de mango con el objetivo de obtener azúcares fermentables para la producción de etanol. Según lo reportado por Mejía. (2009) el mango tiene un porcentaje de cenizas de 3.48%, la naranja tiene 3.29 % de cenizas (Cerón y Córdoba 2011), de la misma manera Rincón. (2005) reporta un porcentaje de 4.86 % de cenizas. Los grados Brix iniciales para cada uno de los residuos fueron semejantes: mango 1.83, naranja 1.13 y 1.4 piña. Tabla 2.- Solidos solubles de cada uno de los desechos después del tratamiento de hidrolisis con ácido sulfúrico. 5% 6% Mango Naranja Piña Mango Naranja Piña 8.967±0.21a 13.7±0.43c 9.5±0.4ab 10.733±1.3b 15±0.1c 14.75±0.45c Cada una de la muestras presenta diferencias estadísticamente significativas. Se observa que al aumentar la cantidad de ácido los sólidos solubles aumentan. La naranja fue el desecho del que se obtuvo una mayor cantidad de azucares. Esto se debe a que la cascara de naranja es rica en celulosa, hemicelulosa, lignina, sustancias pépticas y compuestos fenólicos (Ligor y Buszewski, 2003) los cuales son hidrolizados a glucosa durante la hidrólisis ácida a temperaturas elevadas. 64 | P á g i n a Cantidad de etanol (g/L) 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0.0 M 5% M 6% N 5% N 6% P 5% P 6% Sustrato Figura 1.- Etanol producido por la levadura Saccharomyces cerevisiae bajo diferentes condiciones. Como se observa en la Figura 1 al aplicar un tratamiento más severo a los residuos, estos nos producirán mayor cantidad de etanol. La mayor cantidad de etanol se obtuvo tanto en el sustrato de mango y naranja hidrolizados al 6, ya que se obtuvo una cantidad superior de 4.1 g/L para ambos sustratos. El sustrato que tuvo menor rendimiento fue el mango y la naranja al 5%. CONCLUSION En el presente trabajo se evaluó el potencial de los residuos agroindustriales de mango, naranja y piña, para llevar a cabo la obtención de sustratos fermentables con Saccharomyces cerevisiae para producir etanol. En la prueba de sólidos solubles, se determinó que la naranja es el residuo que contiene una mayor cantidad de Brix, así mismo se observó que al aumentar la cantidad de ácido sulfúrico, aumentan los sólidos solubles. Los tres sustratos se obtuvieron cantidades de etanol entre 2 y 4.La respuesta a la concentración de ácido en la hidrólisis de los sustratos fue semejante, tanto la naranja como el mango hidrolizados con ácido al 6% presentaron un mayor rendimiento de etanol. La cantidad de etanol obtenida dependerá del tratamiento y el residuo que se use. Los residuos de mango, naranja y piña representan una opción la para llevar a cabo la obtención de etanol. 65 | P á g i n a REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS AOAC (1999). Official methods of analysis of the AOAC INTERNATIONAL. Cunniff P. (Ed.), 16 th Edition, 5th Revision, Gaithersburg, Maryland. Carballo, F. 2000. Microbiología industrial: microorganismos de interés industrial. Editorial Acribia. España,pp. 20-31 Cerón, S. I.; Carbona, A.C. 2011. Evaluación del proceso integral para la obtención de aceite y pectina a partir de cáscara de naranja. Revista ingeniería y ciencia, pp 65-86 Domínguez, D. M.; Álvarez, C. A.; Castrejón, R. T †, Granados, B. M. J., Hernández, C. F. J.; Alcalá, O. V. H.; Tapia, P. J. C. 2011. Estudio de la cinética de la hidrolisis acida del bagazo de caña de azúcar sin pretratamiento para la obtención de azúcares reductores. Revista Iberoamericana de polímeros. 12(3), pp. 153-159. Isarankura-Na-Ayudhya. C.; Tantimongcolwat, T.; Kongpanpee, T.; Prabkate, P.; Prachayasittikul V. 2007. 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(17), pp. 33-42 Mejía, G. L.F.; Martínez, C. H.A.; Betancourt, G. J.E.; Castrillón, C. C.E .2007. Aprovechamiento del residuo agroindustrial del mango común (Mangifera indica L.) en la obtención de azúcares fermentables. Ingeniería y Ciencia.3 (6). pp. 41-62 Mejía, L. F.; Albán, D. C.; Murcia, N.; Cuervo, R.; Durán J. 2009. Hidrólisis y fermentación alcohólica simultánea (HFS) del residuo agroindustrial del mango común (Mangifera indica L) utilizando levaduras Saccharomyces cerevisiae spp y cepa recombinante RH 218. Revista Científica Guillermo de Ockham. 7 (2). pp 51-64 Pearson. D; 1993.Técnicas de laboratorio para el análisis de alimentos; Acribia, S.A. Zaragoza (España), pp. 68-75 Rincón, A.; Vázquez, M.; Padilla, F. 2005. Composición química y compuestos bioactivos de las harinas de cáscaras de naranja (Citrus sinensis), mandarina (Citrus reticulata) y toronja (Citrus paradisi) cultivadas en Venezuela. Unidad de Análisis de alimentos, Facultad de Farmacia. 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Red de Revistas Científicas de América Latina y el Caribe, España y Portugal Sistema de Información Científica. 8(4). pp. 249-259 67 | P á g i n a PRODUCTOS SECOS TIPO BOTANA A PARTIR DE MANTO DE CALAMAR GIGANTE (Dosidicus gigas) Dal Pozzo-Valenzuela V.2, Lohr-Valenzuela A.2, Ezquerra-Brauer J.1, Márquez Ríos E.1 y Torres-Arreola W.1*. 1 Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos. Universidad de Sonora. Bulevar Luis Encinas y Rosales s/n, CP 83000. Hermosillo, Sonora, México. 2Departamento de Ciencias Químico-Biológicas. Universidad de Sonora. Bulevar Luis Encinas y Rosales s/n, CP 83000. Hermosillo, Sonora, México. *Autor para la correspondencia: Dr. Wilfrido Torres Arreola correo: [email protected] Categoría: Licenciatura Resumen El calamar gigante (Dosidicus gigas) es uno de los principales recursos pesqueros a nivel nacional, el cual puede llegar a representar un excelente nicho de oportunidades de mercado. Sin embargo, generalmente este recurso solo se comercializa en forma de filetes fresco-congelados, cocido o cocido-congelado. Lo anterior obliga a los industriales a buscar alternativas para darle un valor agregado, con el fin de impulsar el desarrollo de la industria pesquera en nuestro país y de aprovechar las cualidades nutricionales y económicas del calamar gigante, el cual posee un músculo magro, además de presentar alto rendimiento proteico. Por tal motivo, en este trabajo se desarrolló un producto tipo botana a partir de manto fresco de calamar gigante con una adecuada calidad sensorial, nutricional y microbiológica; donde se definieron las condiciones de proceso, las cuales incluyen cocción, secado y condimentado del producto final. Dicho producto fue sometido a una evaluación sensorial donde la mayoría de los panelistas calificaron los atributos del producto de manera favorable. Por otro lado, al compararlo con manto de calamar fresco, se observó un aumento en el contenido de proteínas lo que hace que la botana pueda ser una alternativa de alimentación, enfocada principalmente al publico infantil o personas que no consumen carnes rojas, además de ser un alimento bajo en grasa. Con la metodología aplicada en este estudio se logró desarrollar un producto seco/deshidratado que cumple con las características sanitarias y organolépticas óptimas para su comercialización. 68 | P á g i n a IMPACTO DE DOS MÉTODOS COMERCIALES DE TRANSPORTE EN VIVO SOBRE LA CONDICIÓN FISIOLÓGICA DEL OSTIÓN JAPÓNES (CRASSOSTREA GIGAS) V.M. Ocaño-Higuera1*, E. I. Jimenez-Ruiz1, E. Marquez-Rios2, F. J. CastilloYañez1, D.F. Canizales-Rodríguez1, N. Montoya-Camacho2, M. E. DuarteFigueroa1, A. Z. Graciano-Verdugo1 y C.B. Otero-León1 1 Departamento de Ciencias Químico Biológicas, Universidad de Sonora, Encinas y Rosales s/n, Hermosillo, Sonora 83000, México. 2 Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos, Universidad de Sonora, Encinas y Rosales s/n, Hermosillo, Sonora 83000, México. * Corresponding author: [email protected] Tel/Fax: + 52 (662)2592265 Categoria: Licenciatura Resumen Se evaluó el efecto de dos métodos comerciales de transporte in vivo (cajas de cartón y sacos de ixtle) sobre la condición fisiológica de ostión Japonés Crassostrea gigas. Para esto, se determinó el contenido de carbohidratos totales, glucógeno, adenosina 5’trifosfato (ATP), adenosina 5’difosfato (ADP), adenosina 5’monofosfato (AMP), la carga energética adenilada (AEC) y el pH en ostiones vivos transportados bajo condiciones simuladas. Los valores de carbohidratos totales y glucógeno iniciales fueron 77.16 y 63.30 mg/g de músculo seco. Para las muestras transportadas en cajas de cartón, estos valores disminuyeron durante el transporte hasta 37.24 y 28.80 mg/g para carbohidratos totales y glucógeno, respectivamente. De igual forma, para las muestras transportadas en sacos de ixtle se observó una disminución significativa durante el transporte, con valores finales de de 27.90 y 23.48 mg/g para carbohidratos totales y glucógeno, respectivamente. Con respecto a la concentración de ATP, su valor fue bajo desde el inicio del experimento debido al estrés severo que presentaron los ostiones durante la cosecha. La AEC mostró variación, con un valor inicial de 0.26 en ambos métodos de transporte y valores finales de 0.19 y 0.16 para las muestras transportadas en cajas de cartón y sacos de ixtle, respectivamente. De manera similar, se observaron cambios significativos en el pH, con un valor inicial de 6.68 para ambos métodos y valores finales de 6.40 y 6.96 para las muestras transportadas en cajas de cartón y sacos de ixtle respectivamente. Los resultados obtenidos mostraron que fisiológicamente el mejor método de transporte in vivo para el ostión Japonés es el de cajas de cartón. Palabra clave: ostión Japonés; transporte; caja de cartón; saco de ixtle, fisiología 69 | P á g i n a COMPUESTOS BIOACTIVOS DE FRUTAS TROPICALES CULTIVADOS EN YUCATÁN. 1* Víctor Moo-Huchin ., Iván Estrada-Mota1., Wilma Piña-Canché1., Abraham CanCauich1., Luis Cuevas-Glory2., Enrique Sauri-Duch2. 1 Instituto Tecnológico Superior de Calkiní en el Estado de Campeche. Av. AhCanul por Carretera Federal Campeche-Mérida, Calkiní, Campeche, México. 2 Instituto Tecnológico de Mérida. Av. Tecnológico Km 5 Carretera antigua MéridaProgreso S/N, Mérida, Yucatán, México. *Autor para correspondencia: [email protected] Categoría: Posgrado RESUMEN En la actualidad hay un interés creciente por determinar la presencia de ciertos compuestos bioactivos de frutas tropicales para usar su potencial como alimento funcional. El objetivo del estudio fue determinar los compuestos bioactivos de frutas tropicales cultivadas en Yucatán que presentan un potencial funcional. Se realizó una colecta de 19 frutas con madurez comestible, cultivados en diversas localidades del estado de Yucatán. Se obtuvo la parte comestible de cada fruta y se determinó el contenido de vitamina C, antocianinas totales, compuestos fenólicos totales, flavonoides totales, carotenoides totales, fibra soluble, fibra insoluble y fibra dietética total mediante metodologías estandarizadas o adaptadas. De acuerdo a los resultados, el nance amarillo, nance verde, marañón rojo y nance rojo obtuvieron altas cantidades de vitamina C (116.67-148.41 mg de ácido ascórbico/100 g). El zapote negro exhibió alto contenido de antocianinas totales (14.19 mg AT/100 g). Los frutos ricos en compuestos fenólicos totales fueron: saramuyo verde, nance amarillo, anona amarillo, nance rojo, marañón rojo, uaya, anona roja y zapote blanco (207.60-373.27 mg de ácido gálico/100 g). El contenido de flavonoides totales resultó mayor en zapote blanco, marañón rojo, zapote negro y anona roja (341.88-418.24 mg de Quercetina/100 g). El contenido de carotenoides totales obtenido en mamey fue superior (36.12 mg de β-caroteno /100 g) a los demás frutos. Las frutas estudiadas mostraron mayor contenido de fibra insoluble que de fibra soluble. Estos resultados indican una perspectiva para la explotación de los frutos estudiados que muestran niveles considerables de compuestos bioactivos beneficiosos a la salud humana. Palabras claves: Compuestos bioactivos, frutas tropicales, antioxidantes INTRODUCCIÓN El consumo de frutas en la alimentación humana, ha dejado de ser solamente un placer deleitando el exquisito sabor y aroma que las mismas presentan para convertirse en una necesidad, dadas las buenas características que las frutas tienen para la salud y bienestar del hombre, ya que también aportan vitaminas, minerales y otros compuestos bioactivos para la dieta humana (Vasco et al., 2008). En este sentido el consumo de frutas tropicales o exóticas se ha incrementado en el mercado local e internacional debido al reconocimiento de su valor nutricional y terapéutico (Vasco et al., 2008; Rufino et al., 2010). Según la OMS y la FAO (2003) recomiendan un consumo diario de 400 g de fruta para la prevención de enfermedades como el cáncer, diabetes tipo 2 y la obesidad. 70 | P á g i n a Es de señalar que la Península de Yucatán produce una gran variedad de especies frutícolas nativas y “exóticas” con muy buena calidad y gran aceptación por parte de los consumidores (Sauri, 2001). Estas frutas representan una oportunidad para el crecimiento local que permitan el acceso a mercados especiales donde los consumidores hacen énfasis sobre lo carácter de exótico y la presencia de nutrientes capaces de prevenir enfermedades degenerativas (Alves et al., 2008). Estudios epidemiológicos han demostrado que el consumo de frutas y hortalizas frescas (FHF) juega un papel importante en la dieta humana, debido a los efectos positivos en la prevención de enfermedades crónico-degenerativas como las cardiovasculares, distintos tipos de cáncer y problemas neurológicos (Wu et al., 2004). Este efecto protector ha sido atribuido a los compuestos bioactivos como los ácidos fenólicos, flavonoides, vitamina C y carotenoides, los cuales se encuentran de manera natural en las FHF y la mayoría de ellos poseen actividad antioxidante (Borowska, 2003). Ante este evento hay un interés creciente por determinar la presencia de estos compuestos bioactivos en pulpas de frutas para usar su potencial como alimentos nutracéuticos o funcionales (Beltrán-Orozco, 2009). La finalidad de la investigación es contribuir al valor y reconocimiento de las frutas tropicales no tradicionales cultivadas en la Península de Yucatán mediante el estudio de los compuestos bioactivos con lo cual se contribuiría a mejorar la nutrición y la salud a través de la alimentación. Asimismo la investigación permitiría visualizar o avanzar en el conocimiento sobre la evaluación de ingredientes bioactivos y por lo tanto la comercialización de éstas y de los ingredientes bioactivos derivados o que se pudieran obtener a partir de ellas. De esta forma, el desarrollo del estudio podría contribuir de forma significativa para el desarrollo socioeconómico de la región peninsular en la medida en la que se divulgue de forma maximizada los resultados que se obtengan. METODOLOGIA -Obtención de los frutos Se cosecharon 5 kg de cada fruta en diversas localidades de Yucatán, México (Tabla 1) y se realizó una selección de frutos en base a la ausencia de daños visibles, buena apariencia y con madurez comestible. Los frutos fueron lavados con agua y secados manualmente. La parte comestible fue separada del fruto entero de forma manual, cortado en fragmentos pequeños y se trituró hasta obtener una masa homogénea. Las muestras fueron distribuidas en tres lotes y almacenadas a -20 °C en bolsas herméticamente selladas hasta su análisis. Tabla 1. Frutas colectados en Yucatán para el estudio. Número 1 Nombre común Caimito morado Nombre científico Chrysophyllum cainito L. Muestra Pulpa 2 Caimito verde Chrysophyllum cainito L. Pulpa 3 Marañón amarillo Annacardium occidentale Pulpa 4 Marañón rojo Annacardium occidentale Pulpa 5 Ciruela roja Spondias sp. Pulpa + cáscara 6 Ciruela verde Spondias sp. Pulpa + cáscara 71 | P á g i n a 7 Mamey Pouteria sapota Jacq. Pulpa 8 Zapote blanco Casimiaroa edulis Pulpa 9 Saramuyo verde Annona squamosa L. Pulpa 10 Saramuyo morado Annona squamosa L. Pulpa 11 Chicozapote Manilkara sapota L. Pulpa 12 Pitahaya Pulpa 13 Nance amarillo Hylocereus undatus, Haworth Byrsonima crassifolia 14 Nance verde Byrsonima crassifolia Pulpa + cáscara 15 Nace rojo Byrsonima crassifolia Pulpa + cáscara 16 Anona roja Annona reticulata Pulpa 17 Anona amarilla Annona reticulata Pulpa 18 Uaya cubana Melicoccus (Jacq.) 19 Zapote negro Diospyros digyna bijugatus Pulpa + cáscara Pulpa Pulpa -Flavonoides y compuestos fenólicos totales Para la determinación de compuestos fenólicos libres y flavonoides totales en la pulpa, se prepararon extractos metanólicos siguiendo la metodología descrita por Molina-Quijada et al. (2010). Los compuestos fenólicos libres se determinaron mediante el método espectrofotométrico de Folin-Ciocalteu (Singleton y Rossi, 1965) modificado por González-Aguilar et al. (2007). El contenido de flavonoides totales fue determinado en base al método descrito por Zhishen et al. (1999) modificado por González-Aguilar et al. (2007). -Antocianinas totales Las antocianinas totales se determinaron mediante el método descrito por Almeida et al. (2011). -Carotenoides totales La determinación de carotenoides se realizó de acuerdo al método desarrollado por Chen et al. (2004). -Vitamina C o ácido ascórbico El contenido de vitamina C se determinó siguiendo la metodología descrita por Strohecker y Henning (1967) basado en la titulación de ácido ascórbico con 2,6dicloroindofenol en solución ácida. -Fibra dietética total: soluble e insoluble El contenido de fibra dietética fue determinado utilizando un procedimiento enzimático-gravimétrico descrito por DeVries et al. (2005). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Los resultados obtenidos de la vitamina C, antocianinas totales, compuestos fenólicos totales, flavonoides totales y carotenoides totales se muestran en la tabla 2. 72 | P á g i n a La vitamina C se considera como un compuesto antioxidante de origen natural de la dieta (Almeida et al., 2011). En este estudio, el contenido de vitamina C expresado como mg de ácido ascórbico/100 g varió de 21.43 a 148.41 mg/100 g de muestra fresca. De las 19 frutas tropicales estudiados, se encontró valores bajos en caimito morado, chicozapote, anona roja, caimito verde, anona amarillo, mamey, ciruela verde, ciruela rojo y pitaya (21.4-37.3 mg/100 g de vitamina C), mientras que los siguientes frutos: nance amarillo, nance verde, marañón rojo y nance rojo obtuvieron altas cantidades de vitamina C (116.67-148.41mg/100 g). Valores moderados de vitamina C fueron encontrados en uaya, saramuyo morado, saramuyo verde, zapote negro, zapote blanco y marañón amarillo. Comparando estos resultados con la literatura, valores inferiores fueron reportados para yaca (1.2 mg AA/100 g), nance (11.8 mg AA/100 g), chicozapote (3.9 mg/100 g), guanábana (3.3 mg AA/100 g), umbú (18.4 mg AA/100 g) y caimito (7.05 mg AA/100 g (Almeida et al., 2011; Rufino et al., 2010; Contreras-Calderón et al., 2011). Por otra parte, el zapote negro exhibió alto contenido de antocianinas totales (expresado como mg AT/100 g) (14.19 mg/100 g), seguido de mamey (5.57 mg/100 g) y caimito morado (3.24 mg/100 g). El resto de los frutos mostraron cantidades menores a 2.0 mg/100 g de antocianinas totales. Tabla 2. Contenido de compuestos bioactivos de las principales frutas tropicales cultivadas en Yucatán, México. Fruta mg de vitamina C/100 g Antocianinas totales (mg AT/100 g) Compuestos fenólicos totales (mg de AG/100 g) Flavonoides totales (mg de quercetina/100 g) Anona roja Anona amarillo Caimito morado Caimito verde Chicozapote Ciruela roja Ciruela verde Mamey Marañón amarillo Marañón rojo Nance amarillo Nance rojo Nance verde Pitaya Saramuyo morado Saramuyo verde Uaya cubana Zapote blanco Zapote negro 23.02+1.94 26.98+2.46 21.43+4.99 26.19+2.61 21.43+2.61 36.51+2.46 33.33+3.01 29.37+3.58 92.06+4.92 1.55+0.01 1.31+0.01 3.24+0.02 0.18+0.07 1.16+0.02 1.77+0.10 1.67+0.09 5.57+0.07 1.17+0.01 358.25+17.04 246.29+62.06 14.91+0.19 18.10+4.46 15.35+0.73 115.53+6.41 130.73+10.08 14.21+3.08 186.29+18.19 418.24+3.73 230.53+3.57 35.76+1.46 1.25+0.61 0.18+0.14 38.31+18.57 152.35+4.08 65.24+4.49 59.27+10.0 Carotenoides totales (mg de ßcaroteno/100 g) 2.25+0.40 1.57+0.62 2.97+0.64 4.25+1.45 1.69+0.06 17.16+0.89 25.07+0.04 36.12+1.24 13.99+0.75 131.75+4.92 116.67+3.98 148.41+3.58 116.67+4.99 37.30+3.58 50.0+3.98 1.84+0.03 0.37+0.02 0.91+0.01 1.17+0.11 0.36+0.01 1.15+0.01 287.28+5.38 240.76+16.61 266.26+13.39 195.35+23.80 58.89+11.79 81.78+19.31 344.61+4.30 127.27+12.31 131.98+7.41 98.80+1.83 25.51+5.26 78.73+1.55 11.62+0.67 14.54+0.42 14.22+0.29 12.82+0.28 2.93+0.73 1.30+0.01 50.79+4.92 0.47+0.02 207.60+17.85 200.92+3.83 1.44+0.11 44.44+3.89 64.29+4.99 59.52+7.22 0.32+0.01 1.91+0.01 14.19+0.01 295.35+17.54 373.27+26.68 158.48+1.02 275.76+8.08 341.88+1.43 376.04+72.29 3.85+0.08 15.86+2.40 7.99+0.38 *Los valores son expresados como media+ desviación estándar (n=6) 73 | P á g i n a Los compuestos fenólicos encontrados en frutas y verduras han cobrado un especial interés debido a su potencial antioxidante. Siguiendo los ejemplos de Vasco et al. (2008) y Rufino et al. (2010), los frutos fueron clasificados en tres categorías: bajo (<20 mg/100 g equivalentes al ácido gálico), medio (20-200 mg/100 g de EAG) y alto (>200 mg/100 g de EAG). Los frutos ricos en compuestos fenólicos totales fueron: saramuyo verde, nance amarillo, anona amarillo, nance rojo, marañón rojo, uaya, anona roja y zapote blanco (207.60-373.27 mg/100 g de EAG). Con respecto a los frutos con nivel intermedio de compuestos fenólicos fueron: pitaya, saramuyo morado, ciruela roja, ciruela verde, zapote negro, marañón amarillo y nance verde (58.88-195.35 mg/100 g de EAG). Finalmente, los frutos clasificados con contenido bajo de compuestos fenólicos totales resultaron el mamey, caimito morado, chicozapote y caimito verde. Se ha demostrado que los flavonoides muestran un efecto sobre la actividad antioxidante y en la prevención de enfermedades cardiovasculares y enfermedades mediadas por radicales libres (Yao et al., 2004). En el presente trabajo, el contenido de flavonoides totales resultó mayor en zapote blanco, marañón rojo, zapote negro y anona roja (341.88-418.24 mg equivalentes a Quercetina/100 g), mientras que fue menor en chicozapote, caimito verde, pitaya, caimito morado, ciruela roja, marañón amarillo, mamey, saramuyo morado y nance verde (0.17-98.80 de EQ mg/100 g). El resto de los frutos mostraron cantidades moderadas de flavonoides totales entre 127.27 mg de EQ/100 g y 275.76 mg de EQ/100 g. Estos resultados son superiores a los reportados para cuatro cultivares de uva de mesa de calidad exportación (valores entre 7.0 y 11.0 mg de EQ/100 g) (Molina-Quijada et al., 2010). Por otra parte, los carotenoides no sólo son precursores de la vitamina A, también muestran un nivel considerable de actividad antioxidante (Rufino et al., 2010). En este estudio el contenido de carotenoides totales obtenido en mamey fue superior (36.12 mg/100 g de ß-caroteno) cuando fueron comparados con los demás frutos; seguido de ciruela verde (25.07 mg/100 g de ß-caroteno) y ciruela roja (17.16 mg/100 g de ß-caroteno). Por otro lado, numerosos estudios epidemiológicos demuestran el papel de la fibra dietética presente en las frutas sobre la salud intestinal y la prevención de enfermedades cardiovasculares, cáncer, obesidad y diabetes (Anderson et al., 2009). La Tabla 3 muestra los contenidos de fibra dietética total (TDF), fibra dietética insoluble (IDF) y fibra dietética soluble (SDF) de la parte comestible de las frutas tropicales estudiadas. La fibra dietética total de las frutas varió de 11.69 g/100 g (uaya) a 50.62 g/100 g (zapote blanco), de 10.15 g/100 g (ciruela verde) a 41.86 g/100 g (zapote blanco) para fibra dietética insoluble y de 0.31g/100 g (uaya) a 10.17 g/100 g (zapote negro) para fibra dietética soluble. Estos resultados indican que las frutas estudiadas mostraron mayor contenido de fibra dietética insoluble que de fibra soluble. Tabla 3. Contenidos de fibras dietéticas de la parte comestible de frutas tropicales cultivadas en Yucatán, México. 74 | P á g i n a Fruta Fibra dietética total (g/100 g) Fibra soluble (g/100 g) Fibra insoluble (g/100 g) Anona roja 40.41+0.21 5.41+0.21 35+0.42 Anona amarillo 27.90+1.04 0.71+0.69 27.20+1.73 Caimito morado 35.68+0.83 2.72+0.17 32.96+1.00 Caimito verde 30.78+0.42 7.68+0.14 23.10+0.28 Chicozapote 40.58+0.56 0.73+0.07 39.85+0.64 Ciruela roja 18.11+0.08 7.07+0.20 11.04+0.12 Ciruela verde 17.54+1.06 7.39+0.42 10.15+1.49 Mamey 21.50+1.13 2.37+1.03 19.13+0.12 Marañón amarillo 25.42+3.16 1.28+0.76 24.14+2.40 Marañón rojo 28.26+0.72 4.61+0.22 23.65+0.49 Nance amarillo 46.33+0.92 6.48+0.57 39.85+0.35 Nance rojo 46.33+0.88 6.48+0.50 39.85+0.30 Nance verde 43.34+0.15 7.64+0.58 35.70+0.42 Pitaya 44.58+0.77 6.89+0.50 37.70+1.27 Saramuyo morado 18.63+0.21 6.93+0.50 11.70+0.28 Saramuyo verde 26.15+0.46 6.91+0.01 19.24+0.47 Uaya cubana 11.69+1.19 0.31+0.01 11.39+1.19 Zapote blanco 50.62+3.73 8.76+2.05 41.86+2.55 Zapote negro 20.44+1.86 10.17+0.98 10.27+0.88 *Los valores son expresados como media+ desviación estándar (n=6) REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS -Almeida, M. 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Se determinaron hongos y levaduras, coliformes totales por el método de vertido en placa y bacterias coliformes por la técnica del número más probable (NMP), de acuerdo a las normas NOM-111-SSA1-1994, NOM-113-SSA1-1994 y NOM-112-SSA1-1994. El monitoreo se realizó los días, 0, 11, 17, 25, 33 y 45. Cada uno de los análisis anteriormente mencionados se realizaron por triplicado. La calidad microbiológica del polvo de maíz y la bebida funcional estuvieron dentro de los rangos establecidos de acuerdo a la norma (NOM-086). Los coliformes totales determinados tanto en placa como por la técnica del NMP fueron <1 UFC/mL después del día 45. Para el caso de hongos y levaduras no se detectó la presencia de estos microorganismos. Palabras clave: análisis microbiológico, vida de anaquel Introducción Los alimentos funcionales (nutracéuticos, fortificados, enriquecidos, adicionados, suplementados, etc.) que, además de propiedades nutricionales, también son terapéuticas, tienen un desarrollo interesante de la industria alimenticia (Navas, 2010). Las bebidas a base de maíz, contienen ingredientes saludables como carbohidratos, vitaminas y minerales (Blandino y otros, 2003). Por otro lado, la inserción de bebidas funcionales en el mercado requiere de una conservación a corto, mediano y largo plazo; por lo que es importante asegurar la inocuidad en este tipo de bebidas. La evaluación de la vida útil en tiempo real, de una bebida se puede realizar a través de análisis microbiológicos como variable de respuesta, que nos aseguren la inocuidad del alimento. Entre los indicadores microbiológicos más utilizados para detectar una contaminación por heces fecales son los coliformes (Ekanem y otos, 1983). 77 | P á g i n a Es el grupo de microorganismos más ampliamente utilizado en la microbiología de los alimentos como indicador de prácticas higiénicas inadecuadas (Frazier, 1995). El número de organismos coliformes se establece mediante la cuenta de unidades formadoras de colonias o el uso de la técnica del número más probable. Por lo tanto, la detección y cuantificación de coliformes totales, hongos y levaduras y bacterias coliformes, como microorganismos indicadores de contaminación tienen gran importancia en el control microbiológico de la calidad sanitaria en alimentos (Manafi, 1994). El objetivo de este trabajo fue realizar un análisis microbiológico de los ingredientes de la bebida funcional y con ello determinar el tiempo de anaquel de la misma, después de haber sido tratada térmicamente. Materiales y Métodos Reactivos Agar dextrosa papa, agar de bilis y rojo violeta, caldo verde brillante bilis al 2%, agar de azul de metileno de eosina, todos los reactivos fueron de la marca Bioxón, alcohol al 96% GL. La leche fresca de vaca fue adquirida del ITAT, y los ingredientes en polvo así como la bebida comercial fueron proporcionados por la empresa Mauiztic S de RL. MI. Todas las bebidas después de haber sido preparadas, fueron puestas en refrigeración a una temperatura de 0 °C y éstas fueron analizadas microbiológicamente en los días: 0, 11, 17, 25, 33 y 45. El muestreo se realizó en condiciones estériles, en una campana de flujo laminar, que fue desinfectada con alcohol; la toma de muestras se realizaron en frascos estériles con tapa de rosca de 25 mL. Análisis Microbiológicos Para el polvo de maíz, leche cruda, bebida comercial, bebida funcional sin y con tratamiento térmico se determinaron hongos y levaduras, coliformes totales (método de vertido en placa) y bacterias coliformes (técnica del número más probable), de acuerdo a las normas NOM-111-SSA1-1994, NOM-113-SSA1-1994 y NOM-112-SSA1-1994 respectivamente. Se utilizaron diluciones de 10-1 a 10-5 para la inoculación en los diferentes medios de cultivo, los análisis se realizaron 78 | P á g i n a por triplicado. Para la determinación de la vida de anaquel se considero como variable, el contenido microbiano, cuantificado por medio del análisis de coliformes totales y bacterias coliformes de las bebidas funcionales a base de maíz, después de haberles aplicado el tratamiento térmico y estar en conservación a 0°C. Resultados y discusiones Los resultados de los análisis microbiológicos de los componentes de la bebida funcional se presentan en el Cuadro 1. En las muestras de la leche cruda y la bebida sin tratamiento, se observó la presencia de microorganismos, puesto que no se les realizó un tratamiento térmico. La bebida funcional tratada térmicamente presentó una disminución en coliformes totales y en bacterias coliformes, lo cual indicó la efectividad del tratamiento térmico. También se observó que el polvo de maíz presentó <1 UFC/mL, tanto para bacterias coliformes como para hongos y levaduras; lo cual muestra que el polvo de maíz puede tener un efecto mínimo en la contaminación de la bebida. En el análisis microbiológico para la bebida comercial se cuantificó <1 UFC/mL; que comparando con los límites de la NOM184.SSA1.2002 se encuentra dentro de los limites de calidad, esta muestra fue analizada en el día cero (después de haber sido formulada y tratada térmicamente de acuerdo a las condiciones establecidas por la empresa productora de este tipo de bebidas). Cuadro 1. Análisis microbiológicos de los componentes de la bebida Ingrediente Polvo de maíz Leche cruda Bebida funcional después de T.T. Bebida funcional sin T.T Bebida funcional comercial Hongos y Levaduras Coliformes totales (vertido en placa) Bacterias coliformes (NMP) <1 UFC/mL <1 UFC/mL 2,716 2.4x10 2–2 <1 UFC/mL <1 UFC/mL <1 UFC/mL 2,300 2.4x10 2-2 <1 UFC/mL <1 UFC/mL ---- 3 3 <1 UFC/mL 79 | P á g i n a Límites máximos de la norma NOM184.SSA1.2002 <10 UFC/ml 39 UFC/mL 22 T.T. Tratamiento Térmico; NMP Número Más Probable; UFC: unidad formadora de colonia. La vida útil de la bebida fue de 45 días, ya que se obtuvo como resultado <1 UFC/mL tanto en coliformes totales como en bacterias coliformes; y debido a que no se detectó gas en los tubos de la técnica del NMP se descartó la determinación de Escherichia Coli. Por lo tanto, se puede aseverar que la bebida funcional tuvo un periodo de vida de 45 días, mayor que la comercial cuyo tiempo de vida es de 15 días. Por lo que se puede decir que el tratamiento térmico aplicado, así como las condiciones de conservación son las adecuadas para prolongar el tiempo de conservación de la bebida a 0°C. Conclusiones Los análisis microbiológicos para el polvo de maíz, leche cruda, bebida comercial, bebida funcional sin y con tratamiento térmico, confirmaron la ausencia de carga microbiana en la bebida funcional. Agradecimientos Los autores agradecen, a la DGEST su apoyo, por el financiamiento de este trabajo a través del proyecto 4228.11-P Literatura citada Blandino A.; Al-Aseeri M.E., Pandiella S.S., Cantero D., Webb C. 2003. Cereal-based fermented foods and beverages. Food. Res. Int. 36 (6): 527543. Ekanem, E., DuPont, H., Pickering, L., Selwyn, B., & Hawkins, C. (1983). Transmission dynamics of enteric bacteria in day care centers. Am. J. Epidemiol. 118(4):562-72. 80 | P á g i n a Frazier, W. (1995). Microbiologia de los alimentos (4ed. ed.). 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Bienes y servicios. método para la cuenta de microorganismos coliformes totales en placa. NOM-184-SSA1-2002, Productos y servicios. Leche, fórmula láctea y producto lácteo combinado. Especificaciones sanitarias 81 | P á g i n a IDENTIFICACIÓN DE COMPUESTOS POLIFENÓLICOS POR CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN EN MIELES PROCEDENTES DEL ESTADO DE TABASCO López-Hernández E1., Valadez Villarreal A.2, Miranda Cruz E.1, Córdova Rocher R.2, Martínez Hernández D.1 1 División Académica de Ciencias Agropecuarias. Universidad Juárez Autónoma de Tabasco. México. Km 25 Carr VHSA-Teapa [email protected]. 2Universidad Tecnológica de Tabasco. Carr. Villahermosa-Teapa Km. 14.6 S/N. Fracc. Parrilla II. Parrilla Centro Tabasco. CATEGORÍA: POSGRADO Palabras clave: Miel, antioxidantes, polifenoles La miel, producida por abejas (Apis mellifera), contiene compuestos fenólicos, con propiedades antioxidantes. Los antioxidantes, retardan la oxidación y retrasan el envejecimiento de otras moléculas inhibiendo la iniciación y/o propagación de las reacciones en cadena de los radicales libres. El objetivo fue separar e identificar los compuestos fenólicos presentes en mieles tabasqueñas. Las muestras de miel fueron colectadas en municipios del estado de Tabasco, basándose en el padrón geo-referenciado apícola SAGARPA 2012; colocadas en envases translúcidos, etiquetadas y trasladadas al Laboratorio de Tecnología de Alimentos de la UJAT. Se aplicó previamente un muestreo probabilístico, considerando igual oportunidad de participar, a cada apiario de la población, según el esquema simple aleatorio, a partir de siete municipios, los cuales aportan más del 80% de la producción de miel del estado. Después del muestreo probabilístico, resultaron seleccionados los municipios de Tacotalpa, Tenosique, Centro y Huimanguillo. El análisis de los extractos de miel se realizó utilizando un cromatógrafo de líquidos Waters 1525, bomba binaria y detector UV dual 2487, columna Simmetry C-18 de 0.46 x 75 mm, tamaño de partícula 3.5 µm, usando como fase móvil agua-ácido fórmico (19:1, v/v) y acetonitrilo al 30 % a velocidad de flujo 1 mL/ min y en gradiente. La separación fué monitoreada a 290 y 330 nm. Se identificaron a ácido gálico, ácido cinámico, ácido transabsícico, daidzeína, kaempferol, ácido caféico, ácido clorogénico, genisteína, p-hidroxibenzoico, apigenina, quercetina y ácido cumárico. Se encontró que los fenoles encontrados, tienen relación con el tipo de flora existente en la zona muestreada. Materiales y métodos. Para el presente trabajo se utilizaron muestras obtenidas de los siguientes municipios productores del estado de Tabasco, Centro, Huimanguillo, Tenosique y Tacotalpa, que son los que poseen mayor cantidad de producción a nivel estatal, y el origen de las diferentes muestras colectadas fue de acuerdo al padrón de 82 | P á g i n a productores de la SAGARPA, que sirvió de base para el diseño del plan de muestreo. Todas las muestras fueron de tipo multifloral. Se utilizaron estándares de genisteína, daidzeina, quercetina, ácido gálico, kampferol y de apigenina fueron de la marca SIGMA y los disolventes metanol y ácido fórmico fueron grado HPLC de la marca Baker. La amberlita fue marca Merck y los demás reactivos fueron grado análítico de la marca Fermont. Purificación de compuestos fenólicos con resina de Amberlita XAD-4 en miel. La purificación se realizó tomando en consideración la metodología descrita por (Muñoz et al., 2007). Se llevó a cabo la purificación de la miel a través de una columna cromatográfica empacada de resina de Amberlita XAD-4, tamaño de poro 9 nm y tamaño de partícula (0.3–1.2 mm) humedecida en metanol por 10 min, se empacó en una columna de 25.0 cm x 2.0 cm. La extracción se realizó utilizando muestras de 25 g miel, disuelta en agua destilada acidificada con HCl 0.01 M a pH 2.1, se pasó a través de una columna de Amberlita XAD-4 y los azúcares y compuestos polares fueron eluídos con agua acidificada (Fracción 1). Posteriormente, la columna fue humedecida con 100 mL de agua neutra (Fracción 2) y los compuestos fenólicos fueron removidos con metanol. El extracto de metanol fue concentrado a 40 ºC a sequedad y redisuelto en 5 mL de agua. Esta solución conteniendo los flavonoides fue purificada en tres tiempos con 5 mL de éter etílico anhidro. Los extractos se disolvieron en 0.25 mL de metanol (Fracción 3) y se almacenaron a 0 ºC para su análisis. Las otras tres fracciones fueron almacenadas a refrigeración (6°C) ºC para su posterior análisis, cada muestra fue filtrada y analizada por triplicado. Cuantificación de los flavonoides por Cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC). El análisis de los extractos de mieles se realizó utilizando un cromatógrafo de líquidos modelo Waters 1525, bomba binaria y detector UV dual 2487, se empleó una columna Simmetry C-18 tamaño de partícula 3.5 µm de 0.46 x 75 mm, usando como fase móvil agua-ácido fórmico (19:1, v/v) (solvente A) y metanol (solvente B) en un rango constante de 1 mL/ min. El siguiente gradiente fue usando, de acuerdo a los métodos reportados de Ferreres et al., 1994; Gheldof et al., 2002; Yao et al., 2003; Yao et al., 2005, metanol al 30 % (solvente B), circulado por una columna isocrática con el solvente A por 15 min, incrementándose hasta 40 % de metanol en 20 min, 45% de metanol en 30 min, 60 % de metanol en 50 min, 80% de metanol en 52 min y 90% de metanol en 60 min. Finalmente, la elución con metanol al 90 % fue hecha hasta los 65 min. Los extractos de miel fueron inyectados al cromatógrafo, usando un detector UV dual 2487, obteniéndose el correspondiente cromatograma. El cronograma fue monitoreado de 290 a 340 nm, la mayoría de los flavonoides presentaron su máximo longitud de onda, alrededor de estas dos absorciones. 83 | P á g i n a Resultados En la tabla 1 se muestran los compuestos detectados por cromatografía de líquidos de alta resolución Miel miel 1 miel 2 miel 3 miel 4 miel 5 miel 6 miel 7 miel 8 Miel 9 Miel 10 Miel 11 Miel 12 Miel 14 Tiempo de retención(min) 1.572; 1.798 1863; 2.095 2.306 2.827 3.653 6.625 1.605 1.833 2.271 3.647 1.585 1.831 2.050 2.285 1.593 1.799 2.866 3.675 1.523 1.792 2.845 3.641 1.536 1.797 2.832 3.636 1.563 1.852 2.838 3.735 4.024 6.156 1.560 1.754 1.992 2.848 3.667 4.002 1.541 1.788 3.649 1.610 1.801 2.890 3.821 4.079 1.626 1.834 1.600 Compuesto detectado Ácido gálico Ácido gálico Ácido cinámico Ac. Trans, trans abscisico Daidzeina Kampferol Galico Caféico Trans,trans abscisico Daidzeina Gálico Caféico Clorogénico Trans,trans abscisico Gálico Gálico Trans,trans abscisico Daidzeina Gálico Gálico Trans,trans abscisico Daidzeina Gálico Galico, caféico Trans,trans abscisico Daidzeina Gálico Gálico; caféico Trans,trans abscisico Daidzeina Apigenina mas genisteina Ac para hidroxi benzóico Gálico Gálico Clorogénico Trans,trans abscisico Daidzeina Quercetina Gálico Gálico Daidzeína Gálico Gálico; caféico Trans,trans abscisico Daidzeína Quercetina Gálico Gálico Gálico 84 | P á g i n a Miel 15 Miel 16 Miel 17 Miel 18 Miel 19 2.768 2.948 1.603 1.738 1.907 3.724 1.636 1.909 3.718 1.814 1.545 1.800 2.481 3.708 1.565 1.803 2.275 2.946 3.704 4.341 Trans,trans abscisico Cis, trans abscisico Gálico Gálico Clorogénico Daidzeína Gálico Gálico Daidzeína Gálico Gálico Gálico Cis,trans abscisico Daidzeína Gálico Gálico Para cumárico Cis,trans abscisico Daidzeína Quercetina De los resultados obtenidos observamos una gran variabilidad en los componentes de cada muestra no obstante que todas son multiflorales e incluso entre muestras de una determinada zona. Las mieles de la 1 a la 11 corresponden al municipio de Tacotalpa, que es el principal productor de miel en el estado de Tabasco y se observa que tienen como común, ácido gálico, ac. Trans,trans abscisico, daídzeína, ácido caféico, quercetina, apigenina, principalmente. Algo semejante reporta Jasicka-Misiak y col, 2012 y Kecˇkeš y col, 2013 para mieles de Polonia y de tipo monofloral. De manera parecida se observa para los demás municipios. Conclusión. Las mieles de Tabasco muestran una amplia variedad de compuestos polifenólicos, lo que puede deberse a su carácter multifloral y a la gran diversidad de flora en la zona. Sería recomendable hacer este estudio de manera mas prolongada considerando el municipio de mayor producción y determinar que tanta variabildad se encuentra año con año, considerando las dibversas temperaturas debido al efecto del cambio climáticoBibliografía. Alvarez-Suarez J., Tulipani S., Romandini S.,Vidal A., Battino M., 2009b. 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El objetivo del trabajo es investigar el potencial de eliminación de la viabilidad de quistes de Giardia lamblia y de huevos de Hymenolepis nana alojados en la superficie de hojas de lechuga al someterlos a las radiaciones en un horno de microondas. Se desarrollaron ensayos por duplicado con quistes y huevos viables de G. lamblia e H. nana respectivamente, fueron inoculados en la superficie de secciones de hojas de lechuga y se trataron en un horno de microondas durante 9, 12 y 15 segundos para G. lamblia y de 18, 22 y 30 segundos para H. nana. La pérdida de viabilidad se estableció realizando lecturas de 100 parásitos en microscopio óptico empleando azul de metileno y eosina como indicadores de viabilidad. Se corrieron controles negativos paralelamente. Como resultado, se logró un 46% de eliminación de viabilidad con 30 segundos de tratamiento para los huevos de H. nana con alteración de las características organolépticas de la lechuga, y un 98% con 15 segundos de tratamiento para G. lamblia sin daños para el vegetal. Concluimos que las microondas pueden ofrecer una alternativa para eliminar el potencial infectivo de vegetales contaminados con formas parasitarias. Introducción Diversos investigadores han empleado microondas (ondas electromagnéticas generadas por un magnetrón) con la finalidad de lograr una metodología alternativa para eliminar agentes patógenos, los resultados contradictorios pues algunos reportan eliminación de la viabilidad de las bacterias y otros no1,2,3. En el caso de los parásitos no existen trabajos que refieran la eliminación de la viabilidad de quistes o huevos por efecto térmico de microondas, lo anterior cortaría el ciclo vital de protozoarios y helmintos parásitos presentes en hortalizas irrigadas con aguas negras. Bajo la hipótesis de que al someter al efecto de microondas a quistes y huevos de parásitos, su naturaleza semihermética favorecerá que la presión y temperatura interna se eleve y mueran se llevó a cabo el presente trabajo. 87 | P á g i n a Objetivo General Investigar el potencial de eliminación de la viabilidad de huevos de Hymenolepis nana y de quistes de Giardia lamblia alojados experimentalmente en la superficie de hojas de lechuga al someterlos a las radiaciones en un horno de microondas. Objetivos Particulares 1. Obtener concentrados de huevos y quistes viables de parásitos de importancia médica en México. 2. Determinar el tiempo requerido para eliminar “ in vitro” la viabilidad de las formas parasitarias incluidas en el estudio mediante el empleo de microondas. 3. Determinar el tiempo requerido, empleando microondas, para eliminar “ in situ” la viabilidad de las formas parasitarias en vegetales de hortaliza . Metodología Se obtuvieron huevos de H. nana a partir de proglótidos grávidos de cestodos adultos extraídos de intestino de ratones infectados previamente, se concentraron y se purificaron mediante lavados sucesivos. Los quistes de G lamblia se obtuvieron a partir de muestras de heces humanas, se concentraron por técnica de flotación y se purificaron. Se prepararon controles de huevos y de quistes no viables para lo que fueron puestos en contacto con hipoclorito de sodio al 5%, formol al 5% y fenol al 5% respectivamente durante 3, 5 y 7 días. Para los ensayos experimentales, se emplearon segmentos de hojas sanas de lechuga de 2 cm de largo por 0.75 mm de ancho los cuales se inocularon con 10 μl del concentrado de quistes de G. lamblia y de huevos de H nana respectivamente (todos ellos viables), se secaron a 37°C durante 1 hora, una vez transcurrido el tiempo de secado, los segmentos de lechuga se colocaron en tubos de ensaye y a continuación se irradiaron a tiempos de 9,12 y 15 segundos para G. lamblia y de 18, 22 y 30 segundos para H. nana, se extrajeron del horno y se sometieron a agitación por 30 segundos y se centrifugaron para obtener a los parásitos. Posteriormente se aplicaron 100 μl de soluciones de Eosina al 0.5% y de Azul de metileno diluido 1:32 respectivamente a cada grupo de formas parasitarias para revelar el porcentaje de pérdida de viabilidad tras el tratamiento, para lo cual se observó al microscopio óptico y se revisaron 100 huevos o 100 quistes respectivamente. 88 | P á g i n a Resultados y Discusión Respecto al control de formas parasitarias no viables, se logró un 99% de eliminación de viabilidad con diez días de efecto de Hipoclorito de Sodio. Los huevos y quistes no viables se observaron teñidos con los colorantes empleados, las formas viables se observan refringentes (figuras 1 y 2). Los resultados de tratamiento a huevos de H. nana mostraron 46% como máxima eliminación de viabilidad con 30 segundos de tratamiento (Gráfica 1). Los resultados de tratamiento a quistes de G. lamblia mostraron 98% como máxima eliminación de viabilidad con 15 segundos de tratamiento (Gráfica 2). Figura1. Quistes viables translucidos, la flecha señala uno no viable (10X). Figura 2. Se observan quistes teñidos los cuales no son viables (10X). Gráfica 1. El 46% de los huevecillos inoculados en lechuga perdieron viabilidad cuando se irradiaron con ondas electromagnéticas durante 30 segundos, utilizando azul de metileno como indicador. 89 | P á g i n a Grafica 2. A los 15 segundos se logró un 98% de pérdida de viabilidad de los quistes de G. lamblia que se inocularon en lechuga utilizando eosina como indicador. El logro de resultados confiables inicia con el proceso de obtención de formas parasitarias viables y reviste gran importancia para que puedan ser evaluados y puestos en evidencia con los colorantes vitales empleados en el estudio. De la misma forma, la preparación de un stock de formas parasitarias no viables nos permitió contar con un control de referencia con el que por comparación visual al microscopio fuera posible poner de manifiesto de forma clara la diferencia entre quistes viables (no teñidos) y quistes no viables (teñidos). Los experimentos realizados a este respecto, sin ser parte de los objetivos, nos revelan que lograr un 99% de eliminación de viabilidad de quistes de G. lamblia y huevos de H. nana, requiere de al menos 10 días de tratamiento con hipoclorito de sodio o con formol, para este trabajo se decidió utilizar hipoclorito de sodio por ser menos toxico e irritante que el formol. En cuanto a las pruebas con lechuga inoculada con H. nana, los resultados mostraron un 40% de inactivación con 18 segundos de tratamiento y de 46% con 30 segundos de tratamiento (gráfica 1), en este caso la integridad organoléptica de la lechuga se vio deteriorada pues los segmentos de las hojas sometidas al tratamiento perdieron humedad, se contrajeron sobre si mismas y mostraron inicios de cocción. Podríamos especular que las condiciones de humedad de la superficie de la lechuga favorecen la eliminación de viabilidad en los huevos de H. nana lo cual podría estar asociado a las condiciones microambientales que se generan en torno a los mismos, no obstante esto requerirá estudios específicos que permitan afirmarlo. Para los quistes de G. lamblia sobre la lechuga, cuando se aplicaron las microondas durante 15 segundos, la eficiencia de eliminación de viabilidad fue de 96% (gráfica 2), lo cual es un alto nivel de eliminación sin dejar de considerar que en una población normal de quistes no todos son viables. 90 | P á g i n a El tiempo de exposición a las ondas electromagnéticas mostró ser un factor que influye determinantemente sobre la viabilidad de los quistes de Giardia lamblia, de tal manera con 12 segundos la pérdida de viabilidad fue del 92% y con 15 fue del 98%. Un factor que se debe tomar en cuenta en este trabajo son las características organolépticas del vegetal y lo resultados mostraron con 15 segundos de tratamiento en microondas la hoja de lechuga no pierde sus cualidades de forma, textura, color y humedad. CONCLUSIONES 1. Los quistes de Giardia lamblia pierden su viabilidad al ser sometidos al efecto de ondas electromagnéticas (microondas). 2. Los huevos de Hymenolepis nana presentan resistencia parcial el efecto de las microondas. 3. Se logró un máximo de 46% de eliminación de viabilidad de huevos de H. nana someterse a 30 segundos de exposición a las microondas. al 4. Se logró un máximo de 98% de eliminación de viabilidad de quistes de G. lamblia someterse a 15 segundos de exposición a las microondas. al 5. Las microondas constituyen una potencial alternativa para la eliminación de la transmisión de parasitosis a través de vegetales de hortaliza. BIBLIOGRAFÍA: 1. Buono M, Niroomand F, Fung Y C. 1989.Destruction of Indigenous Bacillus spores in soyamilk by heat. J. Food Prot.. 52:825-826. 2. Marriot N. Principles of Sanitation. 1989. 2nd. Ed. NY. Academic Press. 3. Craven S E, Lillard HS. 1974. Effect of microwave heating of precooked chicken on Clostridium perfringens. 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Se secaron a 28 grados centígrados para su fijación a la superficie vegetal. Se sometieron a tratamiento con tres productos comerciales desinfectantes que denominamos Citricus, Ftt y Coloiplata siguiendo las indicaciones de uso de los fabricantes. Posteriormente las muestras se procesaron para poder ser estudiadas al microscopio electrónico de barrido en busca de posibles daños tanto en las formas parasitarias como en la superficie del vegetal. Se obtuvieron 4 stocks de quistes de Entamoeba spp y de Giardia lamblia respectivamente. Las observaciones mediante microscopia electrónica pusieron en evidencia que Ftt y Coloiplata no afectaron la integridad de la superficie de los quistes ni de los vegetales. Citricus mostró la capacidad de romper la integridad de la pared quística particularmente con Entamoeba spp cuyos quistes se fragmentaron completamente, en el caso de Giardia lamblia la fragmentación fue mas discreta. La microscopía electrónica no evidenció alteraciones de la superficie vegetal en ninguno de los casos. Los agentes desinfectantes valorados durante el estudio poseen cualidades que han mostrado efectividad contra bacterias pero en el caso de quistes de protozoarios solo Citricus mostró ser efectivo a nivel de pared quística. OBJETIVO El objetivo de este estudio consistió en investigar con microscopia electrónica, el efecto de tres agentes desinfectantes sobre la estructura de formas parasitarias de protozoarios y sobre la superficie de lechuga. METODOLOGÍA La primera etapa consistió en obtener concentrados con quistes de G. lamblia y de E. histolytica a partir de muestras positivas de humanos, para tal fin se empleó inicialmente la técnica de concentración por flotación con Sulfato de Zinc para confirmar el diagnóstico de presencia de formas parasitarias en las muestras, de cada parásito, a continuación se procedió a extraer la mayor cantidad de quistes 92 | P á g i n a de cada muestra por el mismo método, se lavaron y se concentraron en tubos de ensayo que se almacenaron en refrigeración hasta su uso. La segunda etapa inició con la selección de hojas de lechuga sanas, en las cuales se inocularon 100 µl de concentrado de los parásitos bajo estudio respectivamente, cada inóculo contenía al menos 500 quistes y se depositó en un área no mayor a 1 cm2, a continuación las hojas de lechuga se incubaron en una estufa a 28 0 C durante 60 minutos para su fijación a la superficie del vegetal. Al salir, se cortaron secciones de lechuga de 1 cm2 en las áreas donde se aplicaron los quistes de G. lamblia y de E. histolytica. La tercera etapa inició con la inmersión de los segmentos de lechuga inoculados con quistes en soluciones de Citricus, Ftt y Coloiplata las cuales se prepararon de acuerdo a las indicaciones de los fabricantes y el tiempo de permanencia fue de 10 minutos, a continuación las muestras se procesaron de acuerdo al protocolo para la microscopia electrónica de barrido. RESULTADOS Se obtuvieron 4 stocks de concentrados de quistes de G. lamblia y de E. histolytica respectivamente con las concentraciones indicadas en la tabla 1, la figura 1 muestra un concentrado de E. histolytica. Tabla 1. Concentración de quistes de Entamoeba sp y Giardia lamblia por mililitro en cada uno de los concentrados obtenidos. Figura 1. Quistes de E. histolytica observados a 40X en uno de los concentrados obtenidos. En los controles de lechuga se observó que el procesamiento con los productos no ejerce ningún efecto sobre la capa externa del vegetal, las células conservan su forma característica y se mantiene la integridad del tejido. (Figuras 2 y 3). 93 | P á g i n a Figura 2. Testigo de lechuga observada a 150X en microscopo electrónico de barrido, la superficie se observa homogénea y sin daños. Figura 3. Aumento a 1000X de la imagen anterior, un estoma (flecha) y células circunvecinas se aprecian integras. Los controles de parásitos mostraron que el procesamiento para la microscopia electrónica no les afectó (fig. 4). Figura 4. Testigo negativo (sin desinfectante) de quiste de Entamoeba histolytica. Los resultados obtenidos al someter a los quistes de los parásitos al tratamiento con los tres productos mostraron que FTT y Coloiplata no afectaron la estructura de las formas parasitarias (figuras 5 y 6). 94 | P á g i n a Figura 5. Quistes de Entamoeba histolytica tratados con FTT con morfología no alterada (1000X). Figura 6. Quistes de Giardia lamblia tratados con Coloiplata sin daños en su superficie y morfología intacta (4000X) Los resultados arrojados por la microscopía electrónica en el caso de los quistes de Entamoeba histolytica sometidos al efecto del Citricus mostraron a un aumento de 500X alteraciones en la capa externa, perdiendo su forma característica (figura 7). Al aumentar la imagen a 3,000X, la figura 8 nos permite observar la existencia de fisuras en la superficie del quiste (flecha amarilla) y en algunos casos incluso se fragmentaron en dos partes (flecha roja). Figura 7. Quistes de Entamoeba histolytica con morfología alterada en general. (500X). Figura 8. Se observa un Quiste de E.histolytica fragmentado en dos partes y otro con rupturas de superficie (3000X). Para el caso de Giarda lamblia, los efectos de Citricus fueron similares presentándose alteraciones y daños en su superficie como se puede observar e las figuras 9 y 10. 95 | P á g i n a Figura 9. Quistes de Giardia lambliacon pérdida de la morfología característicaobservado a 500X. Figura 10.- Quistes de Giardia lambliacontraído con pérdida de citoplasma observado a 4000X DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES La transmisión de enfermedades entéricas a través del consumo de vegetales y frutas contaminadas, es un problema conocido desde hace bastante tiempo. Esta contaminación proviene principalmente del agua empleada para el riego, la cual puede ser un vehículo de transmisión de bacterias, virus y protozoarios provenientes de material fecal humana y animal1. Dentro de los protozoarios capaces de causar enfermedades gastrointestinales se encuentran E. histolytica y G. lamblia, los cuales llegan al humano mediante la ingesta de bebidas y alimentos contaminados con sus formas de resistencia2, como el caso de las hortalizas como la lechuga, la cual se recomienda lavar y desinfectar antes de su consumo 3. Los desinfectantes empleados en hortalizas, generalmente se enfocan en la eliminación de microorganismos como las bacterias, delegando a los parásitos4. Por lo anterior, se procedió a determinar entre tres agentes desinfectantes comerciales (Citricus, FTT, Coloidplata), cuál presenta un mayor efecto negativo en contra de la superficie de formas de resistencia (quistes) de protozoarios. En el caso de las observaciones realizadas para los quistes de E. histolytica sometidos a tratamiento con desinfectante “Citricus”, en la figura 7 se observa que los quistes han perdido su forma característica, después en la figura 8 se observan las fisuras presentes en la capa externa de estos quistes y en algunos casos estos llegaban a fragmentarse en dos o más piezas. Debido a estos resultados, podemos determinar que al agente desinfectante “Citricus” elimina los quistes o los hace no viables para causar enfermedades gastrointestinales en el ser humano. En el caso de las observaciones realizadas para los quistes de Giardia lamblia sometidos a tratamiento con desinfectante “Citricus”, en la figura 9 se aprecia a un quiste, el cual aparentemente perdió su forma ovalada característica. En la figura 10 se observa a un mayor aumento y es posible apreciar que el quiste presenta pequeñas fisuras en la capa externa y este se ha contraído, esta contracción puede ser a causa de las fisuras presentes en la capa externa, ya que al existir una diferencia de presión, en el interior y el exterior del citoplasma, el contenido citoplasmático tiende a salir del quiste y entonces se puede generar la contracción. 96 | P á g i n a El mecanismo de acción del Citricus sobre la pared quística de estos protozoarios es algo que queda como tarea para futuros estudios. Por lo anterior nuestras conclusiones son las siguientes: 1. Los controles de las formas parasitarias empleadas en el estudio (quistes de Entamoeba sp. yGiardia lamblia), demuestran que el tratamiento empleado para microscopia electrónica no compromete la capa externa de los mismos.; 2. La integridad de la lechuga no se ve afectada por el tratamiento preparativo para microscopia electrónica de barrido ni por el tratamiento con soluciones desinfectantes.; 3. De los agentes desinfectantes empleados solamente “Citricus” es capaz de alterar la estructura superficial de los quistes empleados en el estudio,ya que “FTT” y “Coloiplata” aparentemente no poseen ningún efecto negativo en las formas parasitarias. BIBLIOGRAFIA 1. Lopez V, Luis, Romero R y Ureta V. Tratamientos de desinfección de lechugas (Lactuca saliva) y frutillas (Fragaria chiloensis). ALAN. [online]. dic. 2001, vol.51, no.4, p.376-381. Disponible en la World Wide Web: <http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S000406222001000400009&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0004-0622. 2. Glynn H. J. y Heinke G. W.Traducido por Héctor Javier Escalona y GarcíaColaborador J. Glynn Henry, Ian Burton.Ingeniería ambiental. Segunda edición, ilustrada. México D.F.Publicado por Pearson Educación, 1999Páginas: 271-288. ISBN: 970-17-0266-2. 3. Devera R. B. Gonzalez Y.H. Parásitos intestinales en lechugas comercializadas en mercados populares y supermercados de Ciudad Bolívar, Estado Bolívar, Venezuela.Rev. Soc. Ven. Microbiol. [online]. 2006, vol.26, no.2, p.100-107. Disponible en la World Wide Web: <http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562006000200007 &lng=es&nrm=iso>. ISSN 1315-2556. 4. Lopez V, Romero R y Ureta V. Acción germicida in vitro de productos desinfectantes de uso en la industria de alimentos. ALAN. [online]. mar. 2002, vol.52, no.1, p.74-76. Disponible en la World Wide Web: <http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S000406222002000100011&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0004-0622. 97 | P á g i n a ELABORACIÓN DE UNA GOLOSINA GELIFICADA CON ANTIOXIDANTES A BASE DE CONCENTRADO DE UVA Karina Reyes Bernal, Laura Eugenia Pérez Cabrera, Gloria Cristina Díaz Narváez, Héctor Manuel Rocha Díaz Universidad Autónoma de Aguascalientes, Centro de Ciencias Agropecuarias, Departamento de Tecnología de Alimentos. Av. Universidad N. 940 Ciudad Universitaria Ags. México. [email protected] RESUMEN Se elaboraron cinco formulaciones de golosinas gelificadas a base de concentrado comercial de uva y se evaluaron sus propiedades mecánicas, color y capacidad antioxidante-DPPH• en base a la presencia/ausencia de acido cítrico, cantidad de concentrado de uva y efecto de la etapa del proceso en la cual se adiciona el concentrado de uva. Los resultados muestran que la formulación G5 presento tendencias favorables para los parámetros analizados debido a su relación concentrado de uva: acido cítrico mostrando una mayor estabilidad al proceso de elaboración, obteniendo una golosina gelificada con una estabilidad física y capacidad antioxidante total, indicativo de menor degradación de los compuestos antioxidantes en comparación con las demás formulaciones desarrolladas. Palabras Clave: Golosinas gelificadas, actividad antioxidante, concentrado de uva. ABSTRACT Five formulations were prepared based gelled candy commercial grape concentrate and evaluated their mechanical properties, color and antioxidantDPPH • based on the presence / absence of citric acid, grape concentrate amount and effect stage process in which the concentrate grape is added. The results show that the present formulation G5 favorable trends for the parameters analyzed because of their relationship grape concentrate: citric acid showing greater process stability, obtaining a gelled candy with physical stability and total antioxidant capacity, indicating less degradation of the antioxidant compounds as compared with other formulations developed. Key Words: Gelled candy, antioxidant capacity, grape concentrate. INTRODUCCIÓN Hoy día, las tendencias hacia una alimentación saludable y a la reducción de alimentos de alto valor calórico se ha generado una oportunidad de mercado para que las golosinas sean vehículos de vitaminas, minerales y otros nutrientes indispensables para un buen desarrollo físico y mental de los niños consumidores (Chaudhari, 2010). A raíz de esta oportunidad de innovación, los productos de confitería, ingresan al grupo de los alimentos funcionales donde las golosinas van más allá de la fortificación con vitaminas y minerales (Abete, 2008). Debido a que existe una amplia gama de compuestos nutrimentales aplicables a la industria de las golosinas, se tiene una buena oportunidad para reformular este tipo de productos, con el fin de obtener productos con menos calorías, pero que promuevan beneficios a la salud (Beaver, 2010; Bogue et al., 2009). 98 | P á g i n a Los gelificados son productos de confitería comúnmente denominados gomitas, gominolas o jaleas, son elaborados básicamente con sacarosa, jarabes de maíz y agentes de gelificación entre los que destacan la grenetina, los almidones modificados, la pectina, el agar-agar y la goma arábiga, la elección de estos dependerá básicamente el costo, la textura final del producto y vida de anaquel (Ramírez-Gómez y Orozco-Sánchez, 2011). La funciones del acido cítrico en la formulación de golosinas gelificadas son principalmente incrementar la capacidad gelificante, ser acidulante (sabor), retardar la cristalización de la sacarosa, regulador de la acidez y agente secuéstrate de iones metálicos. Los parámetros de calidad mayormente reconocidos es la elaboración de gomitas son la textura y color del producto, los cuales son modificables de acuerdo a los ingredientes y aditivos utilizados. La textura es una función sensorial y constituye un complejo de parámetros relacionados con propiedades reológicas (elasticidad y firmeza). El color es otro atributo de calidad importante en las gomitas, aunque no necesariamente refleja valores nutricionales, de sabor o funcionalidad, determina la aceptabilidad de un producto por parte de los consumidores (Serpil y Gulum, 2009). El objetivo de este trabajo fue desarrollar golosinas gelificadas a base de concentrado de uva comercial y evaluar las propiedades mecánicas, color y capacidad antioxidante ocasionadas por la influencia de la presencia de acido cítrico, cantidad de concentrado de uva y efecto de la etapa de adición del concentrado. MATERIALES Y METODOS Formulación y elaboración de golosina gelificada (gomita): Se formularon cinco diferentes muestras, partiendo de una formulación base (Tabla 1.) golosinas gelificadas con grenetina, según el protocolo de Ramírez-Gómez y OrozcoSánchez (2011). Tabla 1. Ingredientes base para las formulaciones en porcentaje. Grenetina Agua-1 Agua-2 Sacarosa refinada Glucosa 5 10.5 10.6 28 30.5 La grenetina (250°Bloom) se hidrato en el agua-1 y se dejo reposar por 30min. Se disolvió la sacarosa en el agua-2 a 70°C, posteriormente se adiciono la glucosa y se concentro a 84ºBrix, se enfrió a 100°C inmediatamente se adiciono la grenetina hidratada y se mezclo para lograr homogenizar los ingredientes. Se utilizo concentrado de uva comercial (CU;MegaUva®) como ingrediente funcional y para dar sabor y color a la golosina gelificada en las cantidades (%) que se indican en la Tabla 2. A las formulaciones G1, G3 y G5 se les adiciono acido cítrico (AA) previamente disuelto en agua-3. El CU fue adicionado para las formulaciones G1 y G2 junto con el agua-2, es decir el CU fue sometido al proceso de concentración (durante 35 a 45 min a 106 - 110ºC), mientras que las formulaciones G3, G4, G5 el CU fue incorporado como última etapa del proceso, es decir posterior a la homogenización. 99 | P á g i n a Tabla 2. Ingredientes MegaUva®, acido cítrico-agua-3 en porcentajes para las formulaciones. Ingrediente G1 G2 G3 G4 G5 CU 11 11 14 14 14 AA 1.17 --1.17 --0.7 Agua 3 1.17 --1.17 --0.7 Las formulaciones (G1 a G5) se depositaron en embudos dosificadores y se extendieron en cofres de almidón previamente impresos, se dejaron secar a temperatura ambiente por 24h, posteriormente las golosinas gelificadas se desmoldaron, se retiro el exceso de almidón y se almacenaron en bolsas de plástico con cierre hermético para su posterior análisis. Determinación de propiedades mecánicas: La textura de las golosinas gelificadas de las formulaciones G1 a G5 fue determinada en un analizador de textura (Texture Analyzer TAXT2). Se realizaron dos ensayos, el primero utilizando el protocolo adaptado Gummy confectionery Test (P/75) y con ello determinar la firmeza (fuerza máxima) y el porcentaje de elastisidad. El segundo ensayo se utilizo el estándar de la Gelatin Manufacturers Institute of America (GMIA) (P/0.5R) para determinar la fuerza del gel, ambos ensayos se determinaron a una velocidad de 1.0 mm/sec y a una distancia 4mm. Se realizaron una decena de repeticiones para cada formulación. Determinación de color: Se utilizó un colorímetro Minolta (CR-200) empleando el iluminante D65 observador 10° y se obtuvieron las coordenadas CIE-L*a*b*, a partir de las cuales se calculo la luminosidad (L*). Croma (C*) y tono (h*). Donde L* es la diferencia entre la luz (L*=100) y la oscuridad (L*=0); C* es la coordenada croma, que es la distancia perpendicular desde la luminosidad; y h* es el ángulo de tono expresado en grados. Se realizaron las medicines en una veintena de muestras provenientes de las formulaciones G1 a G5, se utilizó como control el CU (G6). Determinación de actividad antioxidante: La actividad antioxidante se determino por el método de DPPH•, equivalente a Trolox. Se realizo una curva de calibración preparando soluciones de trabajo con una solución patrón de Trolox 1mM, 0 (metanol absoluto), 50, 100, 150, 200, 250 µM. En 6 tubos de ensaye se coloco 100µL de las soluciones de trabajo posteriormente se agrego 600µL de DPPH• 0.13mM y se dejaron en oscuridad total por 20min y temperatura ambiente por duplicado. Transcurrido el tiempo se leyó la absorbancia a 515nm en un espectrofotómetro UV-visible (Thermo scientific), calibrando a cero de absorbancia con metanol absoluto. Se tabularon y graficaron los resultados obteniendo la curva de calibración. El CU fue utilizado como control (G6). De las muestras (G1, G2, G3, G4, G5 y G6) se extrajo compuesto metanolito y se deposito en tuvo de ensaye 100µL de cada muestra y 600µL de DPPH, se dejaron en oscuridad total por 20 min y se leyó la absorbancia a 515nm. Usando la ecuación de la recta y=mx+b, se calculo la concentración µM de equivalentes de Trolox de las 100 | P á g i n a muestras (G1, G2, G3, G4, G5 y G6). Calculando los moles o gramos de Trolox por peso de muestra. Los resultados se expresaron como actividad antioxidante equivalente a Trolox (TEAC) por unidad de peso de la muestra húmeda. Análisis Estadístico: Los datos obtenidos de las mediciones fueron analizados mediante un análisis de la varianza (Anova) a un nivel de significancia de P<0.05 con el software Statgraphics plus® en su versión 4.0. RESULTADOS Y DISCUSIÓN En la Tabla 3 se observan resultados obtenidos del análisis de las formulaciones G1 a G5. Los parámetros de fuerza de gel (N), firmeza (N) están relacionados con la fuerza que debe imprimir el consumidor al realizar el primer mordisco a la golosina. La elasticidad (%) indica el comportamiento que tendrá en la cavidad bucal traducido como la fuerza necesaria para desintegrar la golosina. Los resultados (Tabla 3.) de las formulaciones G1 a G5 indican que no existen diferencias significativas para los parámetros de fuerza de gel y firmeza, sin embargo existe una tendencia de que G1 registra mayores fuerza del gel (0.02N) y firmeza (3.85N), y una significativa menor elasticidad con respecto a las demás formulaciones analizadas, indicativo de una mayor adherencia, menor gomosidad y mayor fracturabilidad, comportamiento ocasionado por el aumento del AA en relación con el CU. Las muestras provenientes de la formulación G4 comportaron una nula fuerza de gel, indicando golosinas con menor adherencia al primer mordisco y un significativo mayor %E, comportamiento asociado a la carencia de AA quien promueve la gelificación de la golosina. Tabla 3. Propiedades mecánicas de formulaciones de golosina gelificada. MUESTRA Fuerza del Firmeza Elasticidad Gel N % N G1 0.02±0.01 3.85±0.8 45±1a G2 0.01±0.01 2.94±0.9 50±3b G3 0.01±0.01 2.91±0.9 55±2c G4 0.00±0.04 2.52±0.7 53±3d G5 0.01±0.01 2.28±0.6 59±2bc 0.1757 0.5119 0.0000 ANOVA La formulación G5 en la cual se reduce el contenido de AA y el CU es añadido al final del proceso registra un %E (%59) significativamente mayor en relación con las demás formulaciones, indicativo de una mayor gomosidad, mayor esfuerzo requerido para desintegrar la golosina gelificada en la boca y menor adherencia al primer mordisco En este tipo de golosinas, la mayor firmeza asociada a la elasticidad es una característica ampliamente deseable. Como se observa en la Tabla 4 todos los parámetros de color (L*, C* y h*) resultaron significativos para las formulaciones G1 a G5 y el control (G6). El parámetro luminosidad (L*) fue significativamente mayor para muestras G2 y G4 indicativo de muestras más luminosas y brillantes debido a una formación del gel deficiente, cristalización de azucares y baja estabilidad de las antocianinas 101 | P á g i n a derivado de la carencia de AA. Las antocianinas son compuestos inestables en medios no ácidos, ocasionando su degradación y por tanto cambiando el color. Tabla 4. Parámetros de color para formulaciones de golosinas gelificadas. MUESTRA L* C* h* G1 25.6±1.2ab 2.3±0.2a 49.6±1.9c G2 30.2±3.1c 1.7±0.5b 91.4±2.6bc G3 25.3±0.6ab 1.1±0.5b 82.4±1.8ab b b G4 27.3±0.8 1.0±0.4 87.0±1.6a G5 23.6±0.7a 1.0±0.1b 58.3±1.1a ab b G6 24.8±3.7 1.3±0.7 81.0±1.9ab ANOVA 0.0009 0.0021 0.0025 Las muestras G1, G3 y G5 que contenían AA en sus formulaciones comportaron valores similares al control (G6). Para el tono (h*) se muestra los ángulos situados en el plano cromático comportando tonalidades purpura-azulado para las muestras G2, G3, G4 y G6 y tonalidades purpuras-rojizas para las muestras G1 y G5. En la Tabla 5. Se muestran los resultados del ensayo de DPPH• de las formulaciones G1 a G5 y el control (G6); los valores se registraron a 515 nm, durante 20 min; se usó una curva de calibración de DPPH•, la que se encontraba en un rango de 1 a 100 μM (y=0.0878x + 1.408, R 2= 0,9977). En la Tabla 5. Se observa capacidad para captar el radical DPPH•·, expresado como µmolEq de Trolox de las formulaciones G1 a G5 y el control, en general el proceso tecnológico de elaboración de golosinas gelificadas disminuye la capacidad antioxidante total de todas la formulaciones (G1 a G5) con respecto al control, indicativo de que la temperatura provoca una degradación. La formulación G5 tiene una actividad antioxidante total significativamente mayor a las demás golosinas gelificadas comportamiento ocasionado por el aumento del CU en relación con el AA. Tabla 5. Capacidad Antioxidante de golosinas gelificadas determinada por el método DPPH·• MUESTRA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE (µmolEq de Trolox/g)* G1 5.6109±0.0254a G2 6.0982±0.0296ab G3 6.7478±0.0070ab G4 7.0523±0.0106ab G5 7.7223±0.0254b G6 27.820±0.0028c ANOVA 0.0000 (*) En base húmeda La capacidad antioxidante de uvas y productos derivados (semillas, piel, concentrados, jugos, vinos, licores, entre otros) se ha evaluado empleando diferentes ensayos y sustratos de oxidación. Los resultados obtenidos por 102 | P á g i n a diferentes autores muestran una gran variabilidad, ya que la capacidad antioxidante total está influenciada por factores analíticos como el ensayo aplicado, el sustrato de oxidación, la fase en que tiene lugar la reacción (lipofílica o hidrofílica), el método de extracción, etc., y por factores propios de las muestras ensayadas (agronómicos, varietales, tecnológicos entre otros). CONCLUSIONES Se lograron obtener golosinas gelificadas con aceptables valores de color, propiedades mecánicas (textura) y capacidad antioxidante DPPH•·. La formulación G5 presento tendencias favorables para los parámetros analizados debido a su relación CU-AA mostrando una mayor estabilidad al proceso de elaboración, obteniendo una golosina gelificada con una estabilidad física y capacidad antioxidante total indicativo de menor degradación de los compuestos antioxidantes en comparación con las demás formulaciones desarrolladas. El proceso tecnológico de elaboración de las golosinas gelificadas deberá mejorarse para evitar una pérdida significativa de las características biofuncionales del producto final. Por último serán necesarios más estudios acerca de las propiedades antioxidantes de productos elaborados con CU y los efectos de su ingesta sobre las defensas antioxidantes del consumidor. BIBLIOGRAFÍA Abete, E. (2008) “El mercado de la confitería en México” Oficina Económica y Comercial de la Embajada de España en México, Instituto Español de Comercio Exterior (ICEX) 15-25 [En línea]. Disponible en: http://www.icex.es/ . Fecha de consulta: Abril de 2012. Beaver, M. (2010) “Confectionery for healthy lifestyles”. Confectionery, Cereal & Snack Division, Baker Perkins Ltd, p.6. [En línea]. Disponible en: http://www.bakerperkinsadvantage.com/processexpo/white%20paper%205% 20SFX_3.pdf. Fecha de consulta: Enero 2012. Bogue, J., Sorenson, D., y O´Keeffe, M. (2009). “Cross-category innovativeness as a source of new products ideas. Consumer´s perceptions of over-the counter pharmacological beverages”. Food Quality and Preference, 20(5): 363-371. Chaudhari, R (2010). “Golosinas Funcionales: Satisfacción Saludable para los Golosos”, en Mundo Alimentario, Mayo/Junio. [En línea]. Disponible en: http://www.alimentariaonline.com/media/ma036_golo.pdf. Fecha de consulta: Febrero de 2013. Ramírez-Gómez, M. M. y Orozco-Sánchez, N. E. (2011) Confitería: De lo artesanal a la tecnología. México, Editorial Universidad Autónoma de Aguascalientes pp. 60-93,106-109, 174-205. Serpil, S y Gulum, S (2009) Propiedades físicas de los Alimentos. España, Editorial Acribia pp. 106-111 y 185-200. . 103 | P á g i n a EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN CONJUNTA DE BACILLUS COAGULANS Y LACTOBACILLUS RHAMNOSUS EN LOS NIVELES DE COLESTEROL, TRIGLICÉRIDOS Y GLUCOSA EN RATONES ALIMENTADOS CON DIETA ALTA EN GRASA Zurisadai Rodríguez Montes de Oca¹, Aurelio López Malo Vigil², María Armida Patricia Porras Loaiza¹, Yolanda Arlette Santacruz López, Aracely Angulo Molina¹ Universidad de las Américas Puebla, Ciencias de la Salud¹ e Ingeniería de Alimentos². Sta. Catarina Mártir. Cholula, Puebla. C.P. 72810. México. [email protected] Licenciatura. Objetivo general Estudiar el efecto dislipidémico de la administración de las especies probióticas Bacillus coagulans y Lactobacillus rhamnosus de forma individual y combinada en un modelo animal con una dieta rica en grasa a través del análisis de triglicéridos, colesterol y glucosa. Objetivos específicos Inducir altos niveles de colesterol y triglicéridos en ratones a través de una dieta alta en grasa. Administrar Bacillus coagulans y Lactobacillus rhamnosus de forma combinada e individual a diferentes grupos de ratones. Evaluar el efecto de los diferentes tratamientos en el peso y en las heces fecales. Determinar niveles de colesterol total, triglicéridos y glucosa. Resumen Aun cuando las grasas son imprescindibles para la vida, su ingesta en exceso y su mala calidad son factor de riesgo para el desarrollo de enfermedades cardiovasculares. Actualmente el desarrollo de nuevas alternativas para disminuir los niveles de lípidos en sangre se han enfocado en el diseño de productos probióticos. El objetivo del estudio fue comprobar el sinergismo efectuado por bacterias probióticas en la disminución de los niveles de colesterol, triglicéridos y glucosa en un modelo biológico de ratones CD1. Metodología: Se utilizaron treinta ratones divididos en cinco grupos, dos grupos controles y tres grupos alimentados con dieta alta en grasa y tratamiento probiótico (1. 104 | P á g i n a Dieta Estándar [DE], 2. Dieta Alta en Grasa [DAG], 3. Bacillus coagulans [Bc], 4. Lactobacillus rhamnosus [Lr] y 5. Lactobacillus rhamnosus + Bacillus coagulans [Bc+Lr]). Se midieron niveles de colesterol, triglicéridos y glucosa en la cuarta y séptima semana. Resultados: A la cuarta semana sólo los niveles de glucosa de los grupos Bc, Lr y Bc+Lr fueron significativamente menores que los del grupo DAG y al término del estudio el grupo Bc+Lr fue el único capaz de disminuir de manera importante los niveles de glucosa y de triglicéridos. Los niveles de colesterol no variaron significativamente en ningún grupo. Conclusiones: El sinergismo efectuado por Bacillus coagulans y Lactobacillus rhamnosus es efectivo para la disminución de niveles de triglicéridos y glucosa en sangre. Metodología a) Manejo de animales Se siguieron las especificaciones técnicas indicadas en la Normal Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999. b) Elaboración de alimento alto en grasa i. Pulverizado del alimento 2018S Teklad Global 18% Protein Rodent Diet (Sterilizable), Harlan®. ii. Adición de 16 g de manteca animal por cada 100 g de alimento 2018S Teklad Global 18% Protein Rodent Diet (Sterilizable), Harlan®. iii. Moldeado y horneado de pellets c) Elección de probióticos Se eligieron a las cepas Bacillus coagullans y Lactobacillus (bacterias comercializadas como fármacos en México). - LIOLACTIL cápsulas®: Lactobacillus casei variedad Rhamnosus - SINUBERASE comprimidos®: Lactospore (Lactobacillus sporogenes) d) Agrupación Se formaron 5 grupos de 6 animales cada uno: 1. GRUPO 1 CONTROL POSITIVO: Dieta estándar (DE) 2. GRUPO 2 CONTROL NEGATIVO: Dieta alta en grasa (DAG) 3. GRUPO 3 PROBIÓTICO 1: DAG y Bacillus coagulans (Bc) 4. GRUPO 4 PROBIÓTICO 2: DAG y Lactobacillus rhamnosus (Lr) 5. GRUPO 5 PROBIÓTICO 1 Y 2: DAG y Bc y Lr (Bc+Lr) e) Tratamiento - La dieta para el grupo control positivo y para el resto fueron suministradas ad libitum durante 7 semanas. - La administración de los probióticos se realizó 6 veces por semana durante 7 semanas, vía oral con cánula. - Los Grupos 3, 4 y 5 recibieron 1x107 UFC de las bacterias correspondiente. f) Medición de peso y registro de heces fecales g) Toma de muestras de sangre y determinación de elementos sanguíneos. 105 | P á g i n a Se determinaron en dos ocasiones (semana 4 y 7 del tratamiento) los niveles de colesterol, triglicéridos y glucosa de todos los ratones. h) Análisis estadístico Utilizando el programa SPSS versión 11.0 se analizaron los valores sanguíneos obtenidos por la prueba de comparación de medianas del modelo Mann-Whitney, Se consideraron significativas las diferencias en el nivel de confianza P <0,05. Dichos datos se presentan como mediana ± (intercuartiles P25-P75). Resultados Con una dieta alta en grasa sin tratamiento (grupo DAG) durante 7 semanas el peso promedio de los individuos aumentó 13.8% . De igual forma se observó un incremento en el peso de los grupos Bc y Bc+Lr (12.4 y 11.5 % respectivamente). El grupo de ratones en tratamiento con Lactobacillus rhamnsosus tuvo una ganancia de 7.2% de peso, de manera similar al grupo alimentado con una dieta estándar (8.4%). A la cuarta semana de tratamiento sólo los niveles de glucosa de los grupos Bc, Lr y Bc+Lr fueron significativamente menores que los del grupo DAG. Al final del estudio el grupo Bc+Lr fue el único capaz de disminuir de manera importante los niveles de glucosa sanguínea y de triglicéridos. Los niveles de colesterol no variaron significativamente en ninguno de los grupos. Análisis a) Medición de peso Las variaciones irregulares en el peso de los ratones a lo largo del estudio son atribuibles entre otros posibles factores a los diversos cambios ambientales a los que estuvieron expuestos y que pudieron generar periodos de estrés en los animales. Ante una dieta alta en grasa saturada los ratones del grupo DAG tuvieron un mayor porcentaje de aumento de peso que los alimentados con una Dieta estándar después de 7 semanas. Sólo el grupo Lr mantuvo un porcentaje de ganancia de peso semejante al de los ratones con Dieta estándar, consecuentemente se considera que de manera individual Lactobacillus rhamnosus puede generar un control sobre la ganancia de peso a pesar de consumir una dieta rica en grasa. b) Medición de elementos sanguíneos Los niveles de glucosa de los ratones con una dieta alta en grasa sin tratamiento en la semana número 4, se vieron aumentados de manera significativa. Es posible confirmar lo que algunos autores como Contreras, (et al., 2012) y Martínez (et al., 2003), señalan acerca de la relación de una dieta alta en grasa con un estado de 106 | P á g i n a Resistencia a la Insulina (RI). El uso de Bacillus coagullans, Lactobacillus rhamnosus, así como la combinación de ambos, resultaron favorecedoras para la reducción de glucosa en sangre. Los niveles de triglicéridos en sangre no se vieron afectados de manera significativa en ninguno de los grupos del experimento, concordando con la teoría que indica que la hipertrigliceridemia se debe al consumo excesivo de hidratos de carbono y de alcohol. Los niveles de colesterol tampoco se vieron afectados de manera importante en ninguno de los grupos de estudio probablemente a los mecanismos de regulación propios del cuerpo (excedentes destinados a la síntesis de hormonas esteroideas, síntesis de ácidos biliares, secreción de colesterol libre hacia la bilis, disminución de síntesis de colesterol endógeno, entre otros) (Navarro et al., 2009). Para la semana 7 de tratamiento, aumentaron los niveles de glucosa de los grupos con Bc y Lr, manteniéndose en un rango similar al grupo con DAG por lo tanto es posible afirmar que Bacillus coagullans y Lactobacillus rhamnosus retardan el aumento de glucosa en sangre generado ante una resistencia a la insulina. Por el contrario la combinación de ambas cepas disminuyó notablemente la concentración de glucosa, logrando así confirmar que la combinación de Bacillus coagullans y Lactobacillus rhamosus es capaz de reducir la aparición de la resistencia a la insulina y por consiguiente a la diabetes (a diferencia de su uso individual en el cual no se obtuvieron resultados similares). De igual forma, la combinación de las cepas demostró mayor capacidad de reducción en los niveles de triglicéridos que al administrarse de manera individual. Al igual que en la semana 4, durante la semana 7 los niveles de colesterol se mantuvieron constantes en los cinco grupos de estudio. c) Observaciones de heces fecales Respecto a las observaciones realizadas en las heces fecales, se puede afirmar que una dieta alta en grasa se producen heces más voluminosas que en una dieta estándar. Por otro lado la administración de Bacillus coagullans y Lactobacillus rhamnosus generaron en promedio heces más alargadas, blandas y en ocasiones con cierta mucosidad. Comparando los resultados obtenidos con la Escala de Bristol las heces generadas por los grupos Bc, Lr y Bc+Lr entran en la clasificación del Tipo 4 y 3, lo que significa dichas bacterias generan un tránsito intestinal regular. 107 | P á g i n a Conclusiones La ingesta de una dieta alta en grasa en ratones de la cepa CD1 provocó el aumento de glucosa y de triglicéridos sanguíneos después de siete semanas de tratamiento, sin generar un efecto en la concentración de colesterol. Posiblemente Bacillus coagulans y Lactobacillus rhamnosus actúan retrasando el incremento de glucosa en sangre ante una dieta rica en grasa. Por su parte, de manera individual la bacteria Lactobacillus rhamnosus provocó que el aumento del porcentaje de peso ganado a pesar de ingerir una dieta alta en grasa fuera similar al grupo control. De igual forma, la administración conjunta de las dos bacterias probióticas generó un efecto sinérgico en la reducción de los valores de glucosa y triglicéridos del grupo con una dieta rica en grasa después de 7 semanas de tratamiento. Por lo anterior, el sinergismo efectuado por Bacillus coagulans y Lactobacillus rhamnosus puede considerarse como un tratamiento alternativo para la mejora de la salud. Referencias BUAP. (2012). Manejo y vías de administración en el ratón de laboratorio. Bioterio Claude Bernard: Puebla. CONTRERAS, É., & Santiago, J. (2011). Obesidad, síndrome metabólico y su impacto en las enfermedades cardiovasculares . Revista Biomédica , 22 (3), 103-115. MARTÍNEZ, B., Rodríguez, M., & Martínez, J. (2003). Síndrome metabólico, resistencia a la insulina y metabolismo tisular. Endocrinol Nutr , 50 (8), 324-333. NAVARRO, V., Zabala, A., Gómez, S., & Portillo, M. (2009). Metabolismo del colesterol: bases actualizadas . Revista Española de Obesidad , 7 (6), 360-384. 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Las recomendaciones actuales promueven que las grasas no excedan el 30% de las calorías totales diarias, sin embargo, datos de la OMS/FAO registran que en casi todas las regiones se supera dicho porcentaje, llegando a alcanzar incluso un 45% en algunos países. El objetivo principal de este estudio fue determinar el efecto biológico en ratones alimentados con una dieta alta en aceite de frituras con o sin suplementación de omega-3 de semilla de chía. Por otro lado, los objetivos específicos fueron evaluar el peso y modificaciones en los patrones de ingesta de alimento de los ratones, evaluar colesterol total, HDL y LDL sanguíneos, comparar el efecto de una dieta alta en aceite de fritura con una dieta normal y comparar el efecto de la suplementación con Ω-3 de semilla de chía en una dieta alta en aceite de fritura y en una dieta normal. Se alimentaron ratones macho cepa CD1 durante 6 semanas y se trabajaron 4 grupos: dieta alta en aceite recalentado de frituras (grupo 1), dieta alta en aceite recalentado de frituras más suplementación con aceite de semilla de chía (grupo 2), dieta estándar (grupo 3) y dieta estándar más suplementación con aceite de semilla de chía (grupo 4). Posteriormente se realizaron evaluaciones físicas, neurológicas y biológicas. Los grupos 1 y 2 presentaron mayor aumento de peso y niveles de colesterol sanguíneo elevados. Por su parte, la suplementación con aceite de semilla de chía no tuvo efectos protectores significativos ante los efectos adversos antes mencionados pero si tuvo un notable efecto benéfico en la destreza y en el comportamiento de los ratones de los grupos 2 y 4. Se concluye que una dieta alta en aceite recalentado de frituras puede tener efectos adversos en el colesterol sanguíneo y que la suplementación con aceite de semilla de chía no es suficiente para contrarrestarlos en su totalidad aunque sí mostró tener efectos benéficos en el comportamiento y la destreza. 109 | P á g i n a Metodología La metodología se dividió en 2 etapas. En la primera se definieron, calcularon y elaboraron las dietas de los ratones. En la segunda etapa se llevaron a cabo las evaluaciones físicas, biológicas y neurológicas. Durante la primera etapa se eligió un porcentaje de grasa de 45% para las dietas altas en grasa de acuerdo a lo establecido por Haught et al. (2003). Posteriormente, se modificó el contenido en grasa del alimento original tomando en cuenta el artículo de Laboratory Animal Diets (Ricci y Ulman, 2005). Finalmente, de acuerdo a las recomendaciones establecidas por la FAO y OMS, se decidió proporcionar un 2.4 % de Ω-3 proveniente de aceite de semilla de chía a las dietas con suplementación de este AGPI. Para la obtención del aceite recalentado de frituras se siguió el procedimiento realizado por Abdulkarim et al. (2007) con algunas modificaciones. Posteriormente se hicieron los pellet en forma similar al alimento original, con medidas aproximadas de 3cm de largo x 2 cm de ancho y 1 cm de alto. Finalmente se secaron en secador y se guardaron en bolsas de polipapel. Se decidió trabajar con cuatro grupos de ratones macho cepa CD1, los cuales se obtuvieron del bioterio de la BUAP. El primero, el segundo y el cuarto grupo corresponden a los grupos experimentales, mientras que el tercero corresponde al grupo control. El grupo 1 tuvo una dieta alta en aceite de fritura; el grupo 2 tuvo una dieta alta en aceite de fritura y fue suplementado con aceite de semilla de chía; el grupo 3 tuvo dieta normal y el grupo 4 tuvo dieta normal y fue suplementado con aceite de semilla de chía. Se eligió un periodo de alimentación de 6 semanas en base a lo reportado en varios estudios similares (Totani y Ojiri, 2007; Garrido et al., 2004; Pérez et al.,1998; Sánchez y Cuesta, 1998; Conon, 1988). Para la segunda etapa del estudio se realizaron pruebas físicas, neurológicas y biológicas. Las pruebas físicas consistieron en un registro semanal tanto del peso de los ratones como de su consumo de alimento y agua. Por su parte, en las pruebas neurológicas se hicieron pruebas para evaluar el perfil neurofarmacológico de los ratones al inicio, a la mitad y al final del estudio siguiendo la metodología establecida en el Manual de Laboratorio de Farmacología General (Angulo, 2010).Finalmente para las pruebas biológicas se obtuvieron muestras sanguíneas de cada ratón a las cuales se les determinó colesterol total y sus fracciones HDL, LDL y VLDL. Resultados y Análisis La ingesta de alimento puede evaluarse de acuerdo a los gramos o de acuerdo a las kilocalorías consumidas. Al hacer el análisis de acuerdo a las kilocalorías consumidas se observó que durante todo el tiempo del estudio los grupos 1 y 2 tuvieron una mayor ingesta calórica que los grupos 3 y 4 y que ésta 110 | P á g i n a fue similar a lo largo de todo el estudio a excepción de las semanas 1 y 4. De manera general se puede observar que aquellos grupos con suplementación de aceite de chía (grupos 2 y 4) tuvieron una menor ingesta calórica respecto a los grupos con las mismas características de porcentaje de grasa. Esto último puede interpretarse de dos maneras: una es que el Ω-3 tiene un efecto reductor del apetito o genera algún tipo de sabor indeseable en el alimento que finalmente produce una menor ingesta (Garrido et al., 2004). Otra opción, la cual se considera más certera, es que debido a que hay menor absorción intestinal de los aceites recalentados (Totani y Ojiri, 2007; Márquez et al, 1991), los ratones que no consumen aceite de chía (el cual sí se absorbe de manera adecuada) se ven obligados a aumentar su ingesta para satisfacer sus necesidades. Con esto podría observarse una muy ligera adaptación para ajustar las calorías totales consumidas, efecto mencionado por Ricci y Ulman (2005). Para todos los grupos el aumento de peso más significativo se da en la primera semana, lo cual corresponde a su etapa de crecimiento (Harlan Laboratories, 2008). En el caso del grupo 2 (45% de grasa y suplementación con aceite de chía) hay un menor aumento peso respecto a los demás grupos (aproximadamente 2.8g de diferencia); sin embargo en la segunda semana este grupo fue el que tuvo el mayor incremento en el peso, por lo que probablemente tuvo un ligero retraso en el crecimiento. En la semana 3 los grupos 1 y 2 (ambos alimentados con 45% de grasa proveniente de aceite de frituras) fueron los que tuvieron un mayor aumento en el peso, dato que concuerda con su alta ingesta tanto calórica como en gramos. Para la semana 4 el aumento de peso no tuvo diferencias significativas entre los grupos. En la semana 5 el grupo 1 tuvo un aumento de peso notablemente mayor que el del resto de los grupos; sin embargo su ingesta calórica fue muy similar a la del grupo 2 pero el aumento de peso en éste último no se vio tan incrementado. En la última semana, los grupos 1, 2 y 4 tuvieron un aumento de peso similar. Mediante el perfil neurofarmacológico se pudo evaluar el comportamiento de los ratones durante las distintas etapas del estudio. De los parámetros analizados, los que dieron resultados más relevantes fueron: pasividad, escape, facilidad de manejo, aumento en la base de sustentación, piloerección, fuerza muscular y cuerda tirante. En cuanto a la piloerección, los grupos alimentados con dietas altas en aceite de fritura (grupos 1 y 2) presentaron más frecuentemente esta característica que aquellos que no lo consumieron. Esto puede deberse a alguna respuesta hacia los compuestos tóxicos generados en el aceite de frituras. Por su parte, en términos generales la fuerza muscular fue mejor en los grupos que no consumieron aceite de frituras. Lo anterior puede ser consecuencia de la deficiencia proteica en las dietas de los grupos con dietas altas en aceite de fritura debido a la adición de aceite extra y la consecuente dilución del resto de los nutrimentos (Ricci y Ulman, 2005). Finalmente, el desempeño en la cuerda tirante fue mejor en los grupos suplementados con aceite de chía. Se ha reportado que el aprendizaje, la destreza y la memoria son mejores cuando la relación de la ingesta Ω-6:Ω-3 es adecuada (Coronado et al., 2006). 111 | P á g i n a En cuanto a los análisis sanguíneos, se encontró que los valores de colesterol total y LDL son mayores en los grupos que consumieron una dieta alta en aceite de frituras. El grupo 2 (dieta alta en aceite de fritura y suplementación con aceite de chía) presentó mayores valores de colesterol total, seguido del grupo1, el grupo 4 y el grupo 3, en ese orden. A pesar de que en el grupo 1 no se observó lo mismo, éstos datos sugieren que una dieta alta en grasa con un alto porcentaje proveniente de aceite de frituras favorece el aumento de los niveles plasmáticos de colesterol total (Totani y Ojiri, 2007). Según lo reportado por Xin-Fang et al. (2012), la ingesta elevada de aceites recalentados tiende a aumentar los niveles séricos de la lipoproteína LDL. Los escasos datos recolectados en este estudio muestran que, en general, los grupos con dietas altas en aceite de fritura, es decir los grupos 1 y 2, tuvieron valores de LDL más altos que los grupos 3 y 4. Sin embargo, como se mencionó anteriormente esto solo se reporta como una tendencia. Se esperaba que el grupo suplementado con aceite de semilla de chía (grupo 2) tuviera un menor incremento de LDL, no obstante en ese grupo es donde se presentan los valores más altos, por lo que se infiere que el Ω-3 de semilla de chía no tuvo el efecto protector deseado. Esto puede deberse a que el Ω-3 no protege ante ingestas sumamente elevadas de aceite de fritura. Finalmente, para los grupos 1 y 2, los valores de HDL fueron los más altos, siendo casi todos mayores a 100 mg/dl. Según lo reportado por Garrido et al. (2004), al ingerir aceites de fritura disminuye la ingesta de ácido linoléico debido a que éste es un ácido graso poliinsaturado que pierde sus dobles enlaces al ser termoxidado. Esta disminución en la ingesta se acompaña del aumento tanto de LDL como de HDL. Con estos datos se infiere que una dieta alta en aceite de frituras favorece el incremento de colesterol HDL, lo cual puede deberse a un efecto protector del organismo para contrarrestar los efectos adversos. Conclusiones Con este estudio se encontró que la ingesta de una dieta con 45% de grasa de la cual un alto porcentaje provenía de aceite recalentado de frituras, durante un periodo de experimentación de 6 semanas en ratones machos de la cepa CD1, sí tuvo efectos adversos que fueron detectables en el aumento de peso y las evaluaciones biológicas. Por su parte, la suplementación de un 2.4% de la ingesta calórica total de Ω-3 de aceite de semilla de chía no tuvo efectos protectores significativos ante los efectos adversos antes mencionados, aunque sí mostró una tendencia a reducir el daño hepático y tuvo un notable efecto benéfico en la destreza y en el comportamiento. 112 | P á g i n a Referencias ABDULKARIM, S., Long, K., Lai, O., Muhammad, S., y Ghazali, H. 2007. Frying quality and stability of high-oleic Moringa oleifera seed oil in comparison with other vegetable oils. Food Chemestry. 105(4):1382-1389. ANGULO, A. 2010. Manual de Laboratorio de Farmacología General. Recopilación. Perfil Neurofarmacológico del ratón. 25-28. Puebla, Puebla, México: UDLAP. CONON, J. 1988. Food Toxicology. Nueva York: Marcel Decker, Inc. CORONADO, M., Vega, S., Gutiérrez, R., García, B., y Díaz, G. 2006. Los ácidos grasos omega-3 y omega-6: Nutrición, bioquímica y salud. REB. 25(3):72-79. GARRIDO, C., García, C., García, T., López, S., García, C., Terpstra, A., y SánchezMuñiz, F. (2004). Thermally oxidised sunflower-seed oil increases liver and serum peroxidation and modifies lipoprotein composition in rats. British Journal of Nutrition. 92:257-265. HARLAN LABORATORIES. 2008. ICR (CD1). Disponible en línea: http://www.harlan.com/online_literature/research_models.hl HAUGHT, D., Koepke, M., Goldberg, L., Griffin, A., y Cunha, T. 2003. The Essentials of Custom Diets for Laboratory Animals. Disponible en línea:: www.TestDiet.com MÁRQUEZ, G., Pérez, M., Ruiz, V., y Dobarganes, M. 1991. Absorción de grasas termoxidadas. i. Reproducibilidad y exactitud de las técnicas analíticas previas a la evaluación de los lípidos no absorbidos. Grasas y aceites. 42(1):32-37. OMS/FAO. 2003. Serie de informes técnicos Dieta, Nutrición y Prevención de enfermedades crónicas. Informe consulta mixta de expertos. Organización Mundial de la Salud. PÉREZ, A., Vaquero, M., y Navarro, M. 1998. Ingesta y evolución ponderal de ratas alimentadas con diferentes aceites crudos y fritos. Grasas y aceites. 49(2):175185. RICCI, M., y Ulman, E. 2005. Laboratory animal diets: an critical part of your in vivo research. Animal Lab News. 4(6): 1-6. SÁNCHEZ, F., & Cuesta, C. 1998. Lipid metabolism in experimental animals. Grasas y Aceites. 49:340-346. TOTANI, N., y Ojiri, Y. (2007). Thermal deterioration of oil and frying food stuffs. Journal of Oleo Science. 56(10):543-551. XIN-FANG, L., Jumat, S., Mohd Rais, M., y Kamshia, J. 2012. Effect of Repeatedly Heated Palm Olein on Blood Pressure–Regulating Enzymes Activity and Lipid Peroxidation in Rats. J Med Sci. 19(1):20-29. 113 | P á g i n a INFLUENCIA DE LA TALLA Y TRATAMIENTO EN EL GRADO DE DESACETILACIÓN DE QUITOSANO DE LANGOSTINO Omar Alejandro Galván Padilla*, Diana Alejandra Armendáriz Esparza, Rosa Elena Ramírez Carrillo, Laura Eugenia Pérez Cabrera. Depto. de Tecnología de Alimentos, Centro de Ciencias Agropecuarias, Universidad Autónoma de Aguascalientes, Aguascalientes, México. Email: [email protected] Categoría: Licenciatura. Área temática: Tecnología de Alimentos y Procesos de Alimentos Objetivo general Evaluar la influencia de la talla y el orden de las etapas del proceso termo alcalino en el grado de desacetilación del quitosano obtenido a partir de exoesqueletos de langostino australiano (Cheraxquadricarinatus). Objetivos específicos Extracción de quitosano proveniente de exoesqueletos de langostino australiano así como determinar características fisicoquímicasmás importantes. Resumen: El objetivo de este trabajo fue evaluar la influencia de la talla y del orden de las etapas del tratamiento termoalcalino (TTA) en el grado de desacetilación del quitosano obtenido a partir de langostino australiano (Cheraxquadricarinatus). Se analizaron muestras de exoesqueletos deshidratados, molidos y tamizados de langostino de dos tallas (talla 1 de 30-50g y talla 2 de 10-30g), los cuales se dividieron y se les aplico el TTA. El TTA -A se llevó a cabo la desproteinización seguido de una desmineralización, el TTA- B se invirtieron las etapas, así se obtuvo quitina. La transformación química quitina a quitosano fue similar para ambos. El quitosano obtenido fue evaluado mediante la determinación del grado de N-desacetilación utilizando el método potenciométrico y se expresó en porcentaje (%GD), se utilizó como referencia quitosano de camarón comercial. El %GD es significativamente menor para las muestras provenientes de langostino con respecto a la muestra comercial. Los resultados muestran que la talla del langostino no es significativa para el %GD, sin embargo las tallas grandes están correlacionadas significativamente con el orden de las etapas del TTA. El TTA- B la talla 2 es en el que se obtiene el %GD mayor. Se concluye que la talla de los especímenes no es significativa para el grado de desacetilación. Aun y cuando los valores obtenidos son significativamente diferentes con respecto al QC, existe gran potencial de su uso como aditivo alimentario. Futuros estudios centraran su atención en la conservación de alimentos como un método muy aplicable. Palabras clave: Quitosano, langostino, desacetilación 114 | P á g i n a Summary The aim of this study was to evaluate the influence of the size and the order of the steps of the thermoalcaline treatment(TTA ) in the degree of deacetylation of chitosan obtained from Australian prawn ( Cheraxquadricarinatus ) . Samples from exoskeletons dehydrated , ground and sieved prawn two sizes ( size 1 30 size 2 -50g and 10- 30g ) , which were divided and they applied the TTA . TTA -A was carried out deproteinization followed by demineralization, the TTA- B stages were reversed and chitin was obtained . Chemical transformation chitin chitosan was similar for both . Chitosan obtained was evaluated by determining the degree of N -deacetylation using the potentiometric method and expressed in percentage (% GD ) was used as reference commercial shrimp chitosan . The % GD is significantly lower for shrimp samples from the sample with respect to trade . The results show that the size of the shrimp is not significant for% GD , however larger sizes are significantly correlated with the order of the stages of the TTA . The TTA B size 2 is where you get the % GD greater. We conclude that the size of the specimens is not significant for the degree of deacetylation . Even when the values obtained are significantly different with respect to the QC , there is great potential for use as a food additive . Future studies will focus attention on food preservation as a very applicable . Palabras clave: chitosan,prawn, deacetylation Metodología: Obtención de materia prima:Se obtuvieron especimenes vivos de langostinos australianos (Cheraxquadricarinatus) de dos tallas (talla 1 de 30-50g y talla 2 de 10-30g). Se sacrificaron mediante congelación a -15°C durante 72h, posteriormente se descongelaron a 8°C durante 24h, se separó el cefalotórax y exoesqueleto abdominal (exoesqueletos), se realizó un lavado con agua corriente para retirar los residuos orgánicos, y posteriormente fueron sanitizados con una solución de hipoclorito de sodio 300ppm durante 10 min. Los exoesqueletos fueron desecados a 60°C hasta peso constante, se molieron y tamizaron durante 30min. Extracción de quitosano: Para la obtención de quitina-quitosano se utilizaron las fracciones provenientes de los tamices de 300, 250 y < 250mm, las cuales se sometieron a un tratamiento químico termoalcalino (TTA) con la variación en el orden de las etapas. En el tratamiento A se llevó a cabo en primer lugar la desproteinización (NaOH 8%)durante 2h a 65°C, posteriormente se desmineralizo con HCl (15%) durante 1h a 40°C. Para el tratamiento B se invirtió el orden de las etapas y con ello se obtuvo quitina. Para la obtención del quitosano se utilizó un proceso de modificación química de la quitina, en el cual las unidades acetilo son eliminadas (desacetilación), se colocócon NaOH (50%) durante 2h a 100°C, posteriormente se realizaron lavados con agua destilada, hasta lograr eliminar la alcalinidad del medio. Grado de N-desacetilación:El quitosano obtenido de las muestras (M1A, M1B, M2A y M2B)fue evaluado mediante la determinación del grado de N-desacetilación expresada en porcentaje (%GD)utilizando el método potenciométrico. Para la determinación del contenido de grupos amino del quitosano se procede a la disolución de 1g en HCl 1M. La valoración se lleva a cabo con NaOH 0.1N midiendo el cambio de pH, la adición se realiza de forma lenta y con agitación continua para homogenizar la solución y evitar errores debidos a la posible precipitación del biopolímero. De esta manera se obtuvieron curvas de pH vs ml 115 | P á g i n a de NaOH añadidos, las cuales presentan dos puntos de inflexión; la diferencia entre ellos corresponde a la cantidad de ácido requerido para protonar los grupos amino del quitosano; la concentración de estos se determinó utilizando la siguiente expresión: 16.1 y x % NH 2 Ecuación 1. f w Donde el punto y es el punto de inflexión mayor, x corresponde al punto de inflexión menor, ambos expresados como volúmenes, f es la molaridad de la solución de NaOH, w es la masa en gramos de la muestra y el número 16.1 es un factor asociado al tipo de proteína utilizada. Esta parte se realizó con una repetición para cada muestra. Porcentaje de materia insoluble: con la finalidad de evaluar la calidad del quitosano obtenido, se determinó el porcentaje de materia insoluble (%MI) disolviendo 0.5 g de las muestras en ácido acético (0.1 M) y ácido láctico al 85% (0.7%) incluyendo quitosano de camarón como referencia (control) siendo este de la marca Sigma Adrich. Resultados y análisis: De las muestras procesadas de langostino solo el 16.19% es una fracción integrada por una parte comestible y no comestible siendo contenido visceral, es decir que el resto (83.80%) es exoesquetelo que es susceptible a procesamiento para la obtención de quitina-quitosano, valores similares son indicados para desechos de crustáceos entre el 70 y 80% (Parada et al., 2004), el uso de estos desechos, aporta de forma directa un método de control de la contaminación ambiental. El contenido de grupos amino en las muestras de quitosano se determinó por titulación potenciométrica. Con esto se obtuvieron las curvas de titulación (Figura 1 y 2) con dos puntos de inflexión(X) y (Y) cuyos valores nos ayudaron a tener el grado de desacetilación gracias a la ecuación 1. 12 10 8 6 pH 4 2 0 700 750 800 850 900 950 1000 ml de NaOH gastados M1A m1a M1B m1b Figura 1. Curvas de la determinación potenciométrica del quitosano de la talla uno 116 | P á g i n a 12 10 8 pH 6 4 2 0 800 850 900 950 1000 ml de NaOH gastados M2A m2A M2B m2b Comercial Figura 2.Curva de la determinación potenciométrica del quitosano de la talla dos y comercial. A partir de estas curvas y la ecuación uno se obtuvo los grados de desacetilación para cada muestra, promediándolos con el resultado de su repetición. Estos datos se muestran en la tabla 1. Muestra % de desacetilación Comercial 89.27 ± 0.79 M1A 74.86 ± 0.91 M1B 76.31 ± 1.82 M2A 74.62 ± 0.11 M2B 82.02 ± 3.30 Tabla 1. Grado de desacetilación expresado en porcentaje y desviaciones estándar El %GD es significativamente menor para las muestras provenientes de langostino con respecto a la muestra comercial (89.27±0.79) (Figura 3). La talla del langostino no es significativa para el %GD, sin embargo se obtuvo que las tallas grandes (M1A y M1B) están correlacionadas significativamente con el orden de las etapas del TTA. En las tallas pequeñas no existe una correlación a pesar de que en el tratamiento B de talla 2 (M2B) es en el que se obtiene el %GD mayor (82.02±3.30). Los factores que afectan el grado del N-desacetilación incluyen: concentración del álcali, tratamiento previo, tamaño de partícula, El grado de acetilación es probablemente el parámetro más importante de estos polisacáridos y determina de forma importante sus características funcionales. Para obtener un producto soluble, este debe tener un grado de desacetilación entre 80 y 85% o mayor (Tolaimate et al., 2000; Ferreira et al., 2009). En este estudio se obtiene que tres de las muestras están por debajo del límite inferior 117 | P á g i n a Figura 3. Relación de la talla y el tratamiento con el %GD El %MI en ácido acético fue significativamente mayor para muestras provenientes del TTA B (M1B=22.48% y M2B=24.84%), para ácido láctico resultaron valores similares para todas las muestras (10.11 a 12.54%). El %MI de las muestras provenientes de langostino es significativamente mayor con respecto al quitosano comercial. Conclusiones:con el trabajo experimental que se realizó, se logró determinar que la talla de los especímenes no es significativa para los parámetros estudiados (%GD y %MI). El orden del tratamiento tiene correlación no significativa, pero se identificó que el tratamiento B dio como resultado un %GD más alto. Aun y cuando los valores obtenidos son significativamente diferentes con respecto al quitosano comercial,existe gran potencial de su uso como aditivo alimentario. Se deberán mejorar las técnicas y los métodos utilizados para lograr acercarnos más a las características de nuestra referencia. Se podría aplicar un tratamiento de decoloración para obtener un quitosano más limpio y que al utilizarse logre una transparencia adecuada. Futuros estudios centraran su atención en la conservación de alimentos aplicándolo como película comestible. Referencias: Parada, L. G., Crespín, G. D., Miranda, R., Katime, I. (2004) Caracterización de quitosano por viscosimetría capilar y valoración potenciométrica, Revista Iberoamericana de Polímeros, 5, 1-16. Tolaimate, A., Debrieres, J., Rhazi, M., Alagui, A., Vincendon, M., Vottero, P., (2000) The influence of deacetylation process on the physicochemical characteristics of chitosan from squid chitin. Polimer, 41, 2463- 2469. Chatelet, C., Damour, O., Domard, A. (2001) Influence of the degree of acetylation on some biological properties of chitosan films. Biomaterials, 22(3): 261-268. 118 | P á g i n a Evaluación de la incidencia de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Salmonella sp y E. coli en camarón crudo muestreado en expendios y restaurantes en Mazatlán, Sinaloa Espinoza-Murillo Tania Yamilet1, Rivas-Montaño Ana María1, Méndez-Gómez Evaristo1 y Cortés-Ruiz Juan Antonio1 1 Instituto Tecnológico de Mazatlán, Calle Corsario 1 No. 203 Col. Urías, C.P. 82070, Mazatlán, Sinaloa, México. [email protected] Categoría Posgrado Introducción La pesca y la acuacultura son actividades económicas y productivas de gran importancia a nivel mundial, siendo el camarón uno de los productos pesqueros con mayor valor económico (FAO, 2012). México ocupó el cuarto lugar por volumen de pesca y Sinaloa a nivel nacional, ocupó el segundo lugar por volumen y primero en valor económico (INEGI, 2010). En la actualidad el camarón es de los alimentos más consumidos a nivel mundial, pero puede representar un riesgo para la salud humana causando enfermedades (Chávez y Montoya, 2009) gastrointestinales, diarreas agudas (EDA´s) e incluso la muerte, al estar contaminado por patógenos como Escherichia coli, Salmonella (FAO, 2009) seguida por los vibrios que han adquirido gran importancia, favorecidos por el cambio climático, el deterioro ambiental y por una manipulación inadecuada al consumirse crudo, principalmente durante las épocas del año más calurosa cuando las bacterias encuentran las condiciones ambientales más propicias para su proliferación (SAGARPA, 2008). La Organización Mundial para la Salud en el 2007, estimó que las enfermedades diarreicas agudas, cada año son responsables de 1,8 millones de muertes en el mundo, principalmente en países vía de desarrollo (OMS, 2011). Scallan et al (2005), señalaron que la carga de morbilidad por enfermedades diarreicas, también ocurren en un nivel alto en los países desarrollados. Durante 2003 y finales de septiembre de 2004, se registraron más de 1,230 casos de gastroenteritis en el sur del estado de Sinaloa, noroeste de México. Todos los casos se atribuyeron al consumo de camaron crudo o poco cocinada recolectado en el sistema de lagunar Huizache-Caimanero. Vibrio parahaemolyticus, fue identificado por métodos bioquímicos estándar y PCR, encontrando los genes de tlh y tdh (Cabanillas-Beltrán et al 2006). En México las Enfermedades Diarreicas Agudas (EDA), en el periodo del 2011 registraron 6, 030,193 casos con una tasa de incidencia de 5,521 casos por cada 100,000 habitantes (Secretaria de Salud, 2009). Objetivos Evaluar la incidencia de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Salmonella sp y E. coli en camarón crudo muestreado en expendios y restaurantes en Mazatlán, Sinaloa y su posible correlación entre lugar de procedencia del camarón, y el manejo y la conservación que se le da. 119 | P á g i n a Evaluar la incidencia de V. parahaemolyticus en muestras de camarón crudo obtenido en expendios de Mazatlán, Sinaloa, mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), Evaluar la incidencia de V. vulnificus en muestras de camarón crudo obtenido en expendios de Mazatlán, Sinaloa, mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), Evaluar la incidencia de Salmonella sp en muestras de camarón crudo obtenido en expendios de Mazatlán, Sinaloa, mediante la técnica establecida la NOM-242SSA1-2009. Evaluar la incidencia de Escherichia coli en muestras de camarón crudo obtenido en expendios de Mazatlán, Sinaloa, mediante la técnica del NMP Metodología Bimestralmente se recolectaron 225 g de muestra de camarón crudo en cada punto de muestreo, seleccionando 6 expendios de camarón, ubicados en la ciudad Mazatlán, Sinaloa. 1) De los 225g de muestra 200g se homogenizaron con 200g de solución buffer de fosfatos (PBS), este homogenizado se utilizó para la estimación de; a) El Número Más Probable (NMP) de Coliformes Totales, Coliformes Fecales y de Escherichia coli, sembrando en serie de 3 diluciones(1/10, 1/100 y 1/1000) con 3 repeticiones, para la fase de prueba presuntiva, prueba confirmada, resiembra en medios selectivos para el aislamiento de cepas para la aplicación de pruebas bioquímicas a las colonias que resulten sospechosas a E. coli; b) A partir de las mismas diluciones del homogenizado, se sembraron también en series de tres diluciones y tres repeticiones en Agua Peptonada Alcalina (APA) para la identificación por medio de la técnica de PCR y conteo de vibrios mediante la técnica del NMP; y 2) Para la estimación de la presencia o ausencia de Salmonella sp se utilizó la técnica establecida en la NOM242-SSA1-2009, en la cual 25g de muestra se homogenizan en 225g de caldo lactosado, se incubaron por 24h a 35° Celsius, enseguida resembraron en tubos con medio de enriquecimiento, a) Caldo Tetrationato y b) Caldo Selenito para lograr la multiplicación bacteriana, sembrando 1 ml del homogenizado en 10 ml., se incubaron a 35° Celsius durante 24h, a partir de cada tubo que desarrolló turbidez, se resembró por estrías en cajas con Agar XLD, Agar Verde Bilis Brillante y Agar Selenito Cistina, se incubaron y de las cajas que desarrollaron colonias sospechosas se resembraron en tubos con Agar Hierro Triple Azúcar (TSI) y Agar Lisina Hierro (LIA) inclinados y se evalúan con las características coloniales correspondientes a Salmonella sp. y posteriormente se les practican pruebas bioquímicas. Los resultados se validan con lo establecido en la NOM-242-SSA12009 para cada patógeno. 120 | P á g i n a Resultados En febrero, abril, junio y agosto se colectaron 6 muestras en forma bimestral en diferentes expendios de camarón en la ciudad Mazatlán, Sinaloa, obteniendo un total de 24 muestras. La presencia de Vibrio parahaemolyticus se detectó utilizando la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en 5 de 24 muestras analizadas durante el periodo en los meses de abril, junio y agosto, detectando el gen tlh con valores de NMP dentro de lo establecido en la NOM242-SSA1-2009, que establece como máximo permisible 10 4 NMP/g de Vibrio parahaemolyticus en muestra. En cuanto a la detección de los oligos tdh y trh correspondientes a la evaluación de la presencia de los genes toxigénicos, no se registró la presencia en ninguna muestra. Se utilizó la técnica de PCR para analizar la presencia de Vibrio vulnificus con el oligonucleótido vvha, característico de la bacteria Vibrio vulnificus. La bacteria estuvo ausente en todas muestras, por lo que las muestras analizadas cumplieron con lo establecido en la norma NOM242-SSA1-2009, establece que V. vulnificus debe estar ausente en 50g de muestra. Los resultados microbiológicos realizados para estimar la bacteria Salmonella sp, señalan que no estuvo presente en ningún muestra analizada en estos meses, y por ello, cumplieron con la normatividad mexicana que establece que debe estar ausente en 25g de muestra. Los resultados para la identificación y cuantificación de E. coli, señalan la presencia de dicha bacteria en todas las muestras, de las cuales, 10 estuvieron fuera de la norma, ya que establece como límite máximo 400 NMP/g de E. coli en muestra. Las muestras que sobrepasaron el límite fueron 4 del mes de febrero y 6 del mes de agosto. Tabla 1. Muestreo Muestreo 1 Febrero 2013 Muestreo 2 Abril 2013 Muestreo 3 Junio 2013 Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 NMP/g de V. parahaemolyticus <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 70 150 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 NMP/g V. vulnificus <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 UFC/g de Salmonella Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente NMP/g de E. coli 920 920 350 >1600 79 1600 25 17 350 24 6 25 280 17 33 14 33 13 Temperatura Ambiental 30.8 30.8 30.8 30.8 30.8 30.8 32.7 32.7 32.7 32.7 32.7 32.7 36.2 36.2 36.2 36.2 36.2 36.2 121 | P á g i n a 19 20 21 22 23 24 Muestreo 4 Agosto 2013 <0.3 <0.3 62 48 62 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 <0.3 Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente Ausente >1600 >1600 >1600 >1600 >1600 >1600 38.2 38.2 38.2 38.2 38.2 38.2 El aumento de microorganismos se puede ver afectado por el incremento de temperatura, como se observa en la figura 1, durante el mes de junio y agosto la temperatura estuvo por encima de los 35°C, en la tabla están los resultados en los que se puede apreciar que en el mes de agosto prolifero la presencia de V. parahaemolyticus, bacteria autóctona de las aguas salobres y marinas a temperaturas usual en aguas cálidas, también aumento la presencia de E. coli con valores que sobrepasan los permitidos por la normatividad. Correlacion entre T°C y NMP/g 1600 40 1400 35 1200 1000 30 800 25 600 20 400 15 200 10 0 Febrero 2013 abr-13 jun-13 ago-13 Meses E. coli Índice del NMP/g de V. parahaemolyticus T°C max ambiente V. vulnificus UFC/g de Salmonella T°C min ambiente Figura 1. Correlación entre Temperatura en grados Celsius y NMP/g de V. parahaemolyticus, V. vulnificus, Salmonella sp. y Escherichia coli Conclusiones Vibrio parahaemolyticus no represento un riesgo para la salud de los consumidores, por contraer enfermedades gastrointestinales y diarreicas, porque los genes toxigénicos estuvieron ausentes y el gen característico de la bacteria que si se detectó, sus valores estuvieron siempre dentro de lo establecido como límite máximo establecido en la NOM-242-SSA1-2009. Durante las fechas muestreadas Vibrio vulnificus no represento riesgo para los consumidores al estar ausente en todas las muestras. 122 | P á g i n a NMP/g de microorganismos T°C ambiente 45 No se encontró Salmonella sp durante el muestreo, por lo que se puede descartar la posibilidad de enfermar de diarreas o enfermedades gastrointestinales, ocasionadas por esta bacteria durante los meses muestreados. E. coli si representó un riesgo para los consumidores, pudiendo ocasionar diarreas, al estar en 10 muestras con valores superiores a los límites permitidos por la NOM-242-SSA1-2009, que estable el límite máximo 400 NMP/g de E. coli en muestras. En el muestreo de agosto se observó un incremento en la identificación de Vibrio parahaemolyticus, en comparación con los meses anteriores, por lo que este hecho se puede atribuir probablemente al aumento de temperatura, ya que esta bacteria prolifera en ambientes cálidos. Referencias bibliográficas Cabanillas-Beltrán, H., Llausás-Magaña, E., Romero, R. Espinoza, A., García-Gasca, A., Nishibuchi, M., Ishibashi, M. y Gómez-Gil, B. (2006), Brote de gastroenteritis causada por la pandemia de Vibrio parahaemolyticus O3: K6 en México. FEMS Microbiology Letters, 265: 76-80. Editor: Jorge Crosa Chávez S. M., y Montoya R. L., 2009. Evaluación Preliminar Para Sinaloa. Peligros de introducción de patógenos en camarón importado. Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A. C., Unidad Mazatlán FAO, 2009. Directrices para la inspección del pescado basada en los riesgos. Organización De Las Naciones Unidas Para La Agricultura Y La Alimentación Estudio Fao Alimentación Y Nutrición. No 90 FAO, 2012. El Estado Mundial De La Pesca Y La Acuicultura 2012. Departamento de Pesca y Acuicultura de la FAO. Gómez-Gil B. y Lizárraga P. L. 2012. Análisis de V. parahaemolyticus, V. vulnificus y V. cholerae en productos pesqueros por método combinado de microbiología (NMP) y biología molecular. CIAD, A.C y CICESE. Versión 3.1. Metodología para la detección de vibrios. Instituto Nacional de Estadistica y Geografia (México), 2010. El sector alimentario en México 2010. Serie estadísticas sectoriales. México NOM-242-SSAI-2009. Productos y Servicios. Productos de la pesca frescos, refrigerados, congelados y procesados. Especificaciones Sanitarias y métodos de prueba. OMS, 2007. Brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos-directrices para la investigación y el control. Red Internacional de Autoridades en materia de Inocuidad de los Alimentos (INFOSAN). http://www.who.int/foodsafety/fs_management/No_07_FBDmanual_Dec07_sp.pdf OMS, 2011. Alerta Epidemiológica Nº 162 Situación en Venezuela, América Latina y el Mundo. VI Noticias Epidemiológicas Mundiales. Red de Sociedades Científicas Médicas de Venezuela. Comisión de Epidemiología www.ovsalud.org/doc/red162.pdf 123 | P á g i n a SAGARPA, 2008. Practicas eficientes para la captura de camarón. Estudio De Mercado Para El Camaron Congelado Para El Mercado Nacional. México. Scallan, E., Majowicz, S.E., Hall, G., Banerjee, A., Bowman, C.L., Daly, L., Jones, T., Kirk, M.D., Fitzgerald, M. y Angulo y F.J. 2005. Prevalence of diarrhoea in the community in Australia, Canada, Ireland, and the United States. Int. J. Epidemiol. 34(2): 454-460. Secretaría de Salud, Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiologíca (2009). Paratifoidea y otras Salmonelosis. No. 40 Vol. 26:40 http://www.epidemiologia.salud.gob.mx/doctos/boletin/2009/sem40.pdf 124 | P á g i n a APLICACIÓN EN PRODUCTOS FRITOS DE PELÍCULAS Y RECUBRIMIENTOS A BASE DE BIOPOLÍMEROS. Aguilar Romero María Mayela, Abraján Villaseñor Myrna Alicia, Romo Bacco Carlos Eduardo, Pareja Sena Nadir y Esparzas Flores Marisol Janeth. Departamento de Tecnología de Alimentos. Centro de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma de Aguascalientes. [email protected] ABSTRACT El elevado consumo de lípidos en la dieta de las personas se ha relacionado con problemas de salud. Por lo anterior, se ha originado una búsqueda de alternativas para reducir la absorción de grasas en los alimentos; en este sentido, los recubrimientos comestibles representan una alternativa viable que pudiera minimizar la absorción de grasa durante el proceso de fritura. El objetivo de este trabajo fue evaluar la firmeza, humedad, grasa y aspectos sensoriales de papa frita (variedad α) recubiertas con mucílago de nopal. Se analizó el contenido de humedad (%), grasa (%), firmeza (mm/s), cromaticidad (a* y b*), claridad (L*) de tiras de papa de 0.7x0.7x5 cm; las cuales se frieron en aceite vegetal de girasol a 170°C. Se compararon (ANOVA) las muestras recubiertas de mucílago de nopal contra muestras sin recubrimiento. El contenido de grasa, la firmeza, claridad (L*) y cromaticidad (a*) no presentaron diferencias significativas (P ˃0.05) por la aplicación de mucílago de nopal. La aplicación de la película de nopal mostró influencia (P˂0.05) en el índice de cromaticidad (b*) y en el % de humedad de la papa frita; por lo que, la aplicación de una película de mucílago de nopal como pre-tratamiento para el proceso de fritura de papa variedad α, contribuye a una mayor retención de humedad en el interior de la misma y se requiere el estudio de 125 | P á g i n a otros biopolímeros en el pre-tratamiento de este tipo de productos. Palabras clave: fritura, biopolímeros, papa, mucílago de nopal. OBJETIVO GENERAL Evaluar el efecto de la absorción de aceite y las características de fritura en la aplicación de películas a base de mucílago de nopal y quitosano. OBJETIVO ESPECIFICO 1. Evaluar las características de calidad, absorción de aceite y sensoriales de productos fritos a partir de la aplicación de películas de mucílago de nopal. INTRODUCCIÓN Los plásticos biodegradables son Materiales que cuando son expuestos a condiciones determinadas de humedad, flora microbiana y oxígeno durante un tiempo de varios meses son transformados en sustancias sencillas y biomasa mediante la acción enzimática de los microorganismos presentes en el medio ambiente (Parzanese, 2011). En el área de alimentos se aplican en la fabricación de empaques biodegradables, empaques activos, películas comestibles (PC) y recubrimientos comestibles (RC), sobre frutas, carnes, pescados y otros alimentos, como también en el procesado de alimentos para la obtención de estabilizantes y gelificantes (Parzanese, 2011). El mucílago de nopal se considera importante para la industria de alimentos debido a sus propiedades de viscosidad. Tiene la capacidad de formar redes moleculares y retener fuertemente grandes cantidades de agua, así como de modificar propiedades como viscosidad, elasticidad, textura, retención de agua, además de que es un buen gelificante, espesante, y emulsificante. En los productos fritos en grasa, la salud y los aspectos sensoriales deben ser dirigidos a satisfacer la demanda de los consumidores. Freír en grasa es ampliamente utilizado para preparar comidas sabrosas. 126 | P á g i n a El interior suave y húmedo, junto con la corteza crujiente son las características deseables de la mayoría de los alimentos fritos. El alto consumo de lípidos se ha relacionado con la obesidad y otros problemas de salud como la enfermedad coronaria. El objetivo es encontrar los productos y/o métodos para reducir la absorción de aceite durante la fritura. Los recubrimientos de alimentos pueden ser una buena alternativa para resolver este problema. La eficacia de una capa se determina por sus propiedades mecánicas y de barrera, que dependen de su composición y microestructura, y por las características del sustrato. HIPÓTESIS H1. Las películas comestibles elaboras a base de mucílago de nopal disminuyen la absorción de aceite en fritura. H2. Las películas comestibles elaboradas a base de mucílago de nopal, mejoran las características sensoriales y de calidad de las frituras. MATERIALES Y MÉTODO Los ingredientes que se utilizaron fueron: papas (Solanum tuberosum var. α), aceite de girasol y películas comestibles de mucílago de nopal (Opuntia ficusindica). 1. Metodología para Películas Se elaboraron las películas comestibles a base de mucílago de nopal según el protocolo de la investigación de Abraján 2010-11: 1g de mucílago de nopal, 1% (v/v) polietilenglicol, 1% (v/v) glicerol. 2. Materia Prima Se hicieran tiras de papa de 0.7x0.7x5 cm, se sumergieron en las suspensiones de recubrimiento durante 10min e inmediatamente se llevaron a freír. Con y sin recubrimiento muestras (control) se fríen en una freidora (Eecko) a temperatura controlada de 170°C, llena de 1.5l de aceite de girasol comerciable. 127 | P á g i n a La composición del aceite es de 99.93% de lípidos, con el 25.71% de monoinsaturados y 64.29% de poli-insaturados ácidos grasos. El aceite usado fue sustituido por el aceite fresco después de seis lotes de papa frita. 3. Métodos Estadísticos Se realizaron análisis de varianza ANOVA como prueba de comparación, el nivel de significación ha utilizarse fue f < 0.05, y se utilizó el software: Systat-software (SYSTAT, Inc., de Evanston, Illinois, EE.UU., 1992) versión 5.0. 4. Estandarización de Técnicas El contenido de agua (WC) se determinó midiendo la pérdida de peso de los productos fritos. El contenido de lípidos (LC) se determinó en muestras secadas utilizando la técnica con un equipo Soxhlet. Determinación del pH. Método Oficial 943.02 de la AOAC. Color: Colorimetría CIELAB, haciendo uso de un colorímetro Minolta, Chroma 300. La crujencia se determinó usando la fuerza requerida para la fractura del material durante la compresión del primer ciclo usando el Texture Analyzer. RESULTADOS Y DISCUSIÓN En este estudio se determinaron las características de la papa variedad α (alfa) como materia prima para la producción de papa frita. Castro (2008) determinó que el contenido de humedad y otras características como firmeza, claridad (L*) y cromaticidad (a* y b*) de las papas pueden estar influenciadas principalmente por la variedad. En este estudio se observó un contenido de humedad (71.8%) similar al obtenido por Castro (2008), quien reporta valores del 70.01 al 76.7% de humedad en papa de variedades Agria, Hermes e Innovator. La claridad (L*) de las papas analizadas (71.4) es similar al obtenido por Castro (2008), el valor reportado por este autor se encuentra comprendido entre el 64.92 y el 69.94. 128 | P á g i n a Por el contrario, los valores de cromaticidad (a* y b*) difieren con los reportados por Castro (2008), ya que la variedad de papa α (alfa), utilizada en este estudio, presenta cromaticidad con tendencia al rojo y azul (Cuadro 1). Cuadro 1. Caracter sticas de papa (α) cruda. Claridad Cromaticidad Humedad Firmeza L* a* b* 71.8 ± 2.52 19.6 ± 6.03 71.4 ± 1.96 4.0 ± 0 12.0 ± 0 Valores de la media y desviación estándar El intercambio de calor entre la pared externa de la papa y el aceite hace que se pierda humedad superficial de la papa; por lo que se forma una capa rígida que por un periodo corto de tiempo no permite la migración del agua para su evaporación (Mellena, 2003). En la Figura 1 se muestran los grados de firmeza de la papa-α para los diferentes tiempos y temperatura de fritura (P < 0.05), se observa un incremento de la firmeza a medida que aumenta el tiempo de la fritura. Se observó que la tasa de incremento de la firmeza para los minutos 6 y 7 fue menor, lo anterior concuerda con lo estudiado por Alvis et al. (2010), quienes determinaron que la humedad superficial del producto tiende a estabilizarse después de los 5 minutos de fritura. Medias y 95.0% de Fisher LSD 8 7.5 7.5 7.3 Firmeza (mm/s) Firmeza (mm/s) Medias y 95.0% de Fisher LSD 7 6.5 7.1 6.9 6.7 6 6.5 5.5 2 3 4 5 Tiempo (min) 6 7 170 180 Temperatura (ºC) Figura 1. Gráficos de comparación de medias del grado de firmeza de la papa según el tiempo y temperatura de fritura (LSD de Fisher 95%). 129 | P á g i n a Se observó que la temperatura interna de la papa para los minutos 2, 3, 4 y 5 no alcanzó a gelatinizar la mayor parte del almidón presente. Alvis et al. (2008) analizaron las temperaturas de gelatinización del almidón en papa y concluyeron que esto se alcanza cerca de los 66ºC. Para 6 y 7 minutos de fritura se observó una temperatura interna que sugiere que el almidón se encuentra gelatinizado casi en su totalidad, por lo que se infiere que la temperatura interna de la papa sobrepasó los 60ºC. El grado de firmeza de la papa frita disminuyó con el incremento de la temperatura, se lograron obtener características organolépticas aceptables a 170 y 180ºC; Mellema (2003) sugiere que la temperatura óptima de fritura es de 175ºC, a su vez, Suárez et al. (2004) identifican la temperatura óptima para la fritura de papa en 180ºC. Por lo anterior, se determinó realizar las pruebas a 170ºC en un tiempo de 6 minutos de fritura. Se observó que la pérdida de humedad después de fritura (P < 0.05) fue mayor en las papas sin mucílago (48%) en comparación con las recubiertas con la película (35%); en cuanto a la absorción de grasa se comportaron de manera opuesta, las primeras tuvieron una menor absorción de aceite (Cuadro 2). Lo anterior sugiere que el recubrimiento impidió el movimiento de agua y aceite del interior al exterior de la papa, esto debido a que el mucílago de nopal es un polisacárido soluble con una gran capacidad hidrofílica, por la presencia de restos de azúcares con grupos polares libres (Chamorro, 2010). En relación a la cromaticidad (b*), se observó una lectura superior en las papas con mucílago de nopal (P < 0.05); lo anterior indica que el incremento en la lectura es provocado por el mucílago de nopal, a la temperatura de fritura (170 ºC) se forman compuestos de color mediante reacciones de Maillard (Hasbún et al., 2009). 130 | P á g i n a Cuadro 2. Características de papa-α frita sin mucílago y con mucílago. Característica Humedad (%) Grasa (%) Firmeza (mm/s) Claridad (L*) Cromaticidad (a*) Cromaticidad (b*) 1 Sin mucílago 37.2 ± 2.47ª 12.7 ± 2.67ª 7.63 ± 0.11ª 72.1 ± 1.29ª 2.70 ± 0.67ª 16.3 ± 0.45ª Con mucílago 46.3 ± 2.71b 14.0 ± 1.58ª 8.20 ± 1.38ª 69.6 ± 5.84ª 2.14 ± 0.79ª 17.9 ± 0.25b Los resultados expresan la media y la desviación estándar. Letras diferentes en el mismo renglón, indican diferencias significativas (P < 0.05) por el tratamiento. Los parámetros del % grasa, la firmeza, la claridad (L*) y cromaticidad (a*) no fueron diferentes para las papas fritas sin mucílago y con mucílago (P > 0.05). Lo anterior sugiere que el mucílago de nopal interfiere en la transferencia neta de agua al interior de la papa, así como en la modificación de la lectura de cromaticidad (b*). CONCLUSIONES Con las pruebas realizadas no se determinó una diferencia significativa (P > 0.05), por la aplicación de una película de mucílago de nopal en papas fritas en las características de calidad como la firmeza y absorción de grasa. La aplicación de la película de mucílago de nopal mostró influencia (P < 0.05) en el índice de cromaticidad (b*) y en el % de humedad de la papa frita. La aplicación de una película de mucílago de nopal como pre-tratamiento para el proceso de fritura de papa variedad α, contribuye a una mayor retención de humedad en el interior de la misma, por lo que se requiere el estudio de otros biopolímeros en el pretratamiento de este tipo de productos. 131 | P á g i n a BIBLIOGRAFÍA Alvis, A., Vélez, C., Villada, H. y Rada-Mendoza, M. 2008. Análisis fisicoquímico y morfológico de almidones de ñame, yuca y papa y determinación de la viscosidad de las pastas. Información Tecnológica. Vol. 19 (1). pp. 19-28. 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LICENCIATURA Objetivo General Evaluar el efecto de la congelación y la descongelación sobre la estructura y la ganancia de solutos en el salado por ósmosis de carne de cerdo (Longissimusdorsi) mediante el estudio de la transferencia de masa Objetivos específicos Analizar el daño estructural en carne de cerdo (Longissimusdorsi) resultante de la congelación y descongelación sobre la ganancia de solutos mediante la determinación del coeficiente de difusión de solutos. Estimar la capacidad de retención de aguadurante el salado por ósmosis carne de cerdo (Longissimusdorsi). Resumen La deshidratación osmótica (DO) es ampliamente usada para remover parcialmente el agua de los tejidos por inmersión en una solución hipertónica (osmótica). La fuerza impulsora para la difusión de agua desde los tejidos hacia la solución es provista por la alta presión osmótica de la solución, acompañada de una contra difusión simultánea de solutos de la solución osmótica hacia las fibras. La velocidad de difusión de agua desde cualquier material constituido de fibras depende de factores como: temperatura y concentración de la solución osmótica, el tamaño y la geometría del material, la proporción en masa de solución-material y el nivel de agitación de la solución. (Rastogi y colaboradores, 2002). La carne es un sistema celular con una alta complejidad bioquímica y estructural. Desde un punto de vista estructural, el musculo está formado por una red de fibras (miofibrillas) musculares. Los espacios entre los filamentos gruesos (miosina) y delgados (actina) de las miofibrillas no son constantes y varían con el pH, fuerza iónica, presión osmótica y el estado del músculo, ya sea en rigor mortis o en estado de relajación. Hamm (1975) enfatizó el hecho de que las proteínas tienen una carga electroestática y por lo tanto se repelen entre sí; el aumento en la carga electrostática produce un aumento en la fuerza de repulsión y lleva al hinchamiento. Por lo tanto, el tratamiento osmótico de carne fresca puede guiar al hinchamiento de miofibrillas, que viene acompañado del volumen de agua 133 | P á g i n a consumido por los espacios intercelulares o puede guiar al encogimiento del músculo, con el correspondiente flujo de agua afuera de las células. Así que la dirección del flujo de agua cuando la carne está inmersa en una solución de sal está relacionado con la concentración de la solución osmótica. (Castro-Giráldez y colaboradores, 2010; Offer yTrinick,1983). Por medio de la congelación, se transforma la mayoría del agua presente en las células y espacios intracelulares en cristales de hielo. El agua dentro de los tejidos biológicos se encuentra tanto en el interior de las células como en el espacio intercelular. Durante la congelación lenta los primeros núcleos de cristalización en los tejidos biológicos tenderán a formarse en el agua intercelular; al comenzar a cristalizar el agua extracelular alrededor de estos núcleos, la solución líquida remanente se concentra en las sales naturales presentes. Esto se traduce en la formación de un número relativamente pequeño de cristales grandes de hielo, mayormente extracelulares. De esta manera, las soluciones intra y extracelulares presentes se van concentrando cada vez más durante el proceso de congelación lenta, pudiendo perder o reducir su capacidad de retención de agua por adsorción superficial. De igual forma, al crecer los cristales de hielo extracelulares, estos pueden perforar con sus aristas la membrana celular, derramándose el contenido citoplasmático y dañándose la estructura del tejido. Durante en proceso de descongelación, ocurre el proceso contrario: primero funde el agua extracelular y por efectos osmóticos es trasferida hacia dentro de la célula, en donde se encontraran las soluciones más concentradas de sales naturales. Si el alimento fue congelado en forma lenta, habrá una fracción importante de proteínas desnaturalizadas y daños celulares, con lo cual la capacidad de retener agua del tejido se habrá reducido. Esta irreversibilidad resulta en que parte del agua líquida formada en la descongelación no será retenida por el tejido y por lo tanto se generara el fenómeno de exudado durante la descongelación (Barreiro Méndez & Sandoval Briceño, 2006; Amerling, 2001). Metodología Se utilizó carne de cerdo (Longissimusdorsi)fresca obtenida 48 h después de la matanza se obtuvo de un mismo proveedor para garantizar que los cambios en los análisis fueran provocados por el efecto de los tratamientos y no por otras variables. El lomo se corto en cubos de 1 cm3 yfueron congelados a 4°C en una cámara (TorRey CV, México) con una velocidad de aire de 1.7 m/s.Para estimar el daño estructural provocado por la congelación lenta, ladescongelación se llevó a cabo a temperatura ambiente (20° C) hasta una temperatura interna de 16°C, colocando las muestras sobre una toalla absorbente; se calculó el % de jugos exudados después de la descongelación con la ecuación 1. (1) Dónde Mit es la masa inicial de la toalla, Mft la masa final de la toalla y Mic la masa inicial de la carne. 134 | P á g i n a Para la deshidratación osmótica se utilizó una solución al 15 % de NaCl a 4 °C por 2h; se tomaron muestras cada 5 min en la primera hora y después cada 10 min, hasta el final del tratamiento, para determinar su peso y la humedad según la NOM-116-SSa1-1994. El contenido de sal en las muestras a cada tiempo se obtuvo preparando la muestra según Graiver y colaboradores (2006) y midiendo con un refractómetro de salinidadATC-S/Mill-E (Atago Co, LTD, Japón), con la ecuación 2. (2) Dónde Ms es la masa de la solución, Xs la Fracción de NaCl en la solución y Mms la masa de muestra seca A partir de estos datos se obtuvo la ganancia de sólidos (SG) y la pérdida de humedad (WL) con las ecuaciones 3 y 4 (Kayman-Ertkin y Sultanoglu, 2000). (3) 4) DondeM0 es la masa inicial de la muestra,Mtes la masa de la muestra al tiempo t, X0w la concentración de agua inicial de la muestra, Xtw la concentración de agua en la muestra al tiempo t, X0ts la concentración inicial de solidos totales y Xtts la concentración de solidos totales al tiempo t.De la cinética de deshidratación se obtuvo el coeficiente de difusión de NaCl a partir de la solución analítica de la segunda ley de Fick en estado transiente (Crank, 1975), considerando una configuración de placa infinita (ec. 5), dado que la estructura fibrosa de la carne permite que la transferencia se efectúe en una solo dirección (Mohan y colaboradores, 2010). s seq 8 D 2t (5) Ms exp s0 seq 2 4 L2 La capacidad de retención de agua y la solubilización de proteínas se obtuvieron para cada tiempo de deshidratación con la ecuación 6 y la ecuación 7. ( 6) Donde Mw es el contenido de agua en la carne al tiempo t y Mwo es el contenido de agua inicial en la carne. (7) Donde Mso es la masa inicial de la muestra seca, Mst es la masa de muestra seca al tiempo t y la masa de NaCl en la muestra al tiempo t. Resultados y análisis La carne congelada y descongelada a temperatura ambiente, antes de la deshidratación, presentó un 12.44 % de jugos exudados. Se considera un porcentaje elevado de exudación y se presume que fue debido a que el alimento fue congelado en forma lenta, donde se forman cristales grandes de hielo que desgarran la estructura celular. 135 | P á g i n a Según Ranken (2003), el exudado consiste en una solución de proteínas fibrosas de la carne, que se forma a expensas de la pérdida de textura en la carne. En la figura 1, se puede observar que la solubilización de proteínas existe durante el salado por inmersión de la carne. Una fracción de proteínas fue desnaturalizada, con lo cual la capacidad de retener agua del tejido se redujo. Esta irreversibilidad resultó en que parte del agua líquida formada en la descongelación no fue retenida por el tejido y por lo tanto se generó el fenómeno de exudado durante la descongelación (Barreiro Méndez & Sandoval Briceño, 2006). Lo anterior puede observarse en la figura 2, donde la mayor solubilización de proteínas conlleva a menor CRA alrededor de los 6000 s de deshidratación. Las cinéticas de humedad y sólidos se presentan en la figura 3. La pérdida de humedad corresponde a la ganancia de sólidos hasta que se sobrepasa el 5% en concentración, donde el agua empieza a ser retenida por las sales; la carne pierde agua con soluciones superiores a 6%además de que los grupos polares de los extremos de las cadenas de aminoácidos hacen Figura 1- Proteína solubilizada a diferentesconcentraciones de NaCl Figura 2- Capacidad de retención de agua a diferentes concentraciones de NaCl enlaces con las moléculas de agua (Poulanne & Halonen, 2010). También se sabe que entre el 3-4% se incrementa la ganancia de peso debido al inchamiento de las fibras y la retención del agua en las mismas. La retención de agua es causada por repulsiones electrostáticas entre las proteínas miofibrilares (miofilamentos), lo que resulta en el hinchamiento de miofibrillas, o en algunos casos (con sales o a pH muy altos o bajos) causan una solubilización parcial de filamentos(Offer yTrinick,1983). Un comportamiento similar a las cinéticas lo observamos en la figura 4, donde se presentan los parámetros osmóticos obtenidos; alrededor de los 900 s de deshidratación, cuando la carne alcanza un 6% en SG, se presenta enseguida la mayor pérdida de humedad. A partir de esta concentración, a cada aumento de SG le corresponde una baja en WL, lo cual se atribuye a los enlaces que puede formar la proteína, ya sea con la sal o con el agua. Aunque se observa una ganancia de sólidos, la retención de sal también se ve disminuida con la disminución de contenido proteico debido a que las proteínas estructurales atraen los iones opuestos (iones de sodio) muy cerca de la superficie de los filamentos (Poulanne & Halonen, 2010). 136 | P á g i n a 12 20 74 18 10 16 72 12 6 66 4 10 % 68 NaCl (%) Himedad (%) 14 8 70 SG WL 8 6 4 64 2 2 0 8000 -2 0 62 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 0 1000 2000 3000 Tiempo (s) 4000 5000 6000 7000 8000 Tiempo (s) Figura 3- Cinética de Humedad y %NaCl Figura 4- Parámetros osmóticos A partir de la cinética de captación de sal, se obtuvieron los datos para determinar el coeficiente de difusión de la misma. La curva esperada no fue una línea recta, si no que presentó quiebres a los diferentes tiempos experimentales, indicativo de los cambios en el coeficiente de difusión (Martínez-Navarrete y colaboradores, 1999) con la retención o pérdida de agua en las muestras de carne. La tabla 1 muestra los ciedicientes de difusión efectiva para la sal, reportados con la concentración promedio en el intervalo de tiempo calculados. Los valores obtenidos se comparan con los obtenidos por otros autores en el salado de carne (Barat y colaboradores, 2011; Graiver y colaboradores, 2006). Tabla 1 Coeficientes de difusión para NaCl % NaCl * 5.79 6.15 6.98 7.12 7.52 7.83 8.15 9.21 10.32 *Valores promedio 10 2 De x10 (m /s) 0.25 0.53 0.25 3.32 0.26 8.04 0.11 0.77 0.17 Conclusiones y recomendaciones La pérdida de proteínas en el exudado, resultante de la congelación y la descongelación, así como aquellas que se pierden por solubilización durante el tratamiento osmótico, restan oportunidades de establecer enlaces con la sal de la solución y con el agua propia de la carne, por lo que se ve modificado el coeficiente de difusión y la capacidad de retención de agua. Para mejorar la transferencia de masa en el salado por ósmosis de carne, se recomienda que ésta sea congelada por un método rápido y descongelada lentamente, para producir menor exudado y pérdida de proteínas. 137 | P á g i n a Referencias Amerling, C. (2001). Tecnología de la Carne. EUNED. Barat J.M., Baigts, D., Aliño, M., Fernandez F.J.,&Perez-GarciaV.M. (2011) Kinetics studies during NaCl and KCl pork meat brining. Journal of Food Engineering 106, 102–110 Barreiro Méndez, J. A., & Sandoval Briceño, A. J. (2006). Operaciones de Conservación de Alimentos por Bajas Temperaturas.Caracas: Editorial Equinoccio. Castro-Giráldez, M., Fito, P.J., &Fito, P. (2010) Non-equilibrium thermodynamic approach to analyze the pork meat(Longissimusdorsi) salting process. Journal of Food Engineering 99,24-30. Crank, J. (1975). The mathematics of diffusion (2nd ed.). Oxford: Clarendon Press. Graiver, N., Pinotti, A., Califano, A., &Zaritzky, N. (2006) Diffusion of sodium chloride in pork tissue. 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El objetivo de este trabajo es obtener hidrolizados enzimáticos de colágeno de subproductos de calamar gigante, con actividad biológica. Se aisló tejido conectivo de aleta y cabeza mediante un tratamiento álcali/ácido. Se produjeron hidrolizados utilizando las enzimas tripsina de páncreas bovino y proteasa tipo XIV, de origen bacteriano. Se determinó el grado de hidrólisis mediante el método con OPA. Se obtuvo el perfil electroforético y de aminoácidos, tanto del colágeno y como de sus hidrolizados. La actividad antioxidante fue determinada mediante la actividad secuestrante de radical DPPH, así como del radical ABTS•+. Los hidrolizados de colágeno de tentáculo, con las enzimas tripsina y proteasa respectivamente, tienen alta actividad secuestrante del radical DPPH (44 y 45%), mayor a los de aleta (32 y 34%). La capacidad antioxidante de los hidrolizados, evaluada con el radical ABTS•+, fue de 22.4 y 26.9 M ET/mg hidrolizado, valores mayores a los reportados en hidrolizados enzimáticos de otras especies marinas. Los resultados obtenidos muestran que los hidrolizados enzimáticos de aleta y cabeza de calamar gigante presentan un potencial efecto protector contra enfermedades ocasionadas por radicales libres; sin embargo, es necesario llevar a cabo mayor investigación para determinar otras posibles actividades biológicas. PALABRAS CLAVES: calamar gigante, hidrolizados, actividad antioxidante 139 | P á g i n a FUENTES DE ÁCIDOS GRASOS PARA MEJORAR LA CALIDAD DE LA CARNE DEL CERDO PELÓN MEXICANO Dzib-Cauich D.A*1., Sierra-Vásquez Á. C.1., Ortíz-Jorge R.1., Lara y Lara P.1 y Piña-Canché W., Moo-Huchin V2. 1 Instituto Tecnológico de Conkal, km 16.3 antigua carretera Mérida-Motul, Conkal, Yucatán, México. Tel. y Fax: 9999 12 41 30 y 9999 12 41 35. 2 Instituto Tecnológico Superior de Calkiní en el estado de Campeche, Av. Ah Canul S/N por Carretera Federal. Campeche, México Tel 996-8134870. e-mail: [email protected] *Estudiante de Maestría en Producción Pecuaria Tropical (POSGRADO) Algunas prácticas de producción animal modifican la composición de ácidos grasos de la dieta para cambiar el perfil de ácidos grasos de la carne de cerdo. Al respecto, diversos autores manipulan la alimentación animal para incrementar el contenido de ácidos grasos de la carne que son beneficiosos a la salud. En este sentido, el presente trabajo tuvo como objetivo determinar el perfil de lípidos de Moringa oleífera (MO) y Brosimum alicastrum (BA) cultivados en Yucatán para su posible inclusión en la dieta del Cerdo Pelón Mexicano para la modificación del perfil de ácidos grasos de su carne. Las hojas de ambas plantas fueron recolectadas en el Estado de Yucatán y colocadas en una estufa a 65 °C durante 48 h. Tras este tiempo, las muestras fueron pulverizadas hasta obtener harina. La composición de ácidos grasos en la muestra seca, fue determinada mediante cromatografía de gases con detector de Ionización de llama. De acuerdo a los resultados, la composición de ácidos grasos de BA resultó predominantemente insaturado que saturado. Los ácidos grasos saturados encontrados en MO (palmítico=55.26%, esteárico=8.86%) fueron superiores a lo reportado para BA (palmítico=23.99, esteárico=4.70%). La composición de ácidos grasos insaturados fue mayor para BA (Oleico= 10.29%, linoleico=22.23%, Linolénico=38.78%) en comparación al MO (Palmitoleico= 2.76%, oleico=4.58%, linoleico=7.32%, linolénico=21.22%). Estos resultados indican, que ambos materiales vegetativos muestran un nivel de ácidos grasos insaturados importantes que posibilitan su uso en la dieta del Cerdo Pelón Mexicano para su modificación del perfil lipídico de su carne. Palabras claves: Ácidos grasos, Brosimum alicastrum, Moringa oleífera. 140 | P á g i n a INTRODUCCIÓN En las regiones tropicales existe gran disponibilidad alimentos de origen vegetal en este tenor especies como Brosimum alicastrum (BA) y Moringa oleífera (MO) son incluidos en la nutrición de cerdos por presentar ambos un alto contenido de proteína. Sin embargo en los forrajes hay poca información sobre la composición de ácidos grasos (AG); asimismo, se sabe que los niveles de ácidos grasos de la carne de origen porcina se modifica mediante estrategias nutricionales al incluir en las dieta grasas con diferentes grados de insaturación. En este sentido, diversos autores estudian la inclusión de algunos aceites vegetales en la dieta diaria de los cerdos, ya que modifican el espesor y la composición de ácidos grasos del tejido adiposo y grasa intersticial, haciendo más saludable la carne para el consumidor (Quiles 2011). Por otra parte, la calidad de la grasa de los cerdos depende fundamentalmente de su composición en ácidos grasos, estando estrechamente relacionada con el tipo de pienso y las materias primas utilizadas para su elaboración. Lizardo et al. (2002) indican que la conservación y características organolépticas del tejido adiposo están íntimamente relacionadas también con la composición porcentual de ácidos grasos, hasta tal punto que independientemente del genotipo, sexo, edad, peso vivo y grado de engrasamiento se distribuyen de manera diferencial en la grasa subcutánea con predominio de los ácidos grasos insaturados en la capa externa y los saturados en la interna (Villegas et al, 1973; Girard et al, 1988). Muchos autores comprueban la importancia del enriquecimiento de la dieta con aceites ricos en ácidos grasos omega-3 confirmando que se modifican de manera saludable las características de la grasa y el perfil de los ácidos grasos, mejorando considerablemente los resultados productivos de los lechones y la productividad en general de la explotación (Echenique et al., 2009). En este sentido, el objetivo del trabajo fue determinar el perfil lipídico de dos materiales vegetativos cultivados en Yucatán, Brosimum alicastrum y Moringa oleífera para su posible inclusión en la dieta del Cerdo Pelón Mexicano. 141 | P á g i n a MATERIALES Y METÓDOS -Muestra vegetal Las hojas de ambos materiales vegetativos (MO y BA) fueron recolectados en el Estado de Yucatán. Moringa oleífera se cultivó bajo un sistema de producción intensivo de forraje con una edad al corte de 55 días de rebrote de cada cosecha, mientras que Brosimum alicastrum fue recolectada en sistemas de traspatio con un promedio de edad de 10 años, donde el forraje se cosecha cada seis meses. La hoja colectada para cada material fue inmediatamente colocada en una estufa a 65 °C durante 72 h. Tras este tiempo, las hojas secas fueron pulverizadas hasta obtener un polvo y fueron almacenados en frascos herméticos a -20 °C hasta su uso. Se realizó una extracción continua del aceite crudo con 30 g de muestra mediante equipo Soxhlet empleando como solvente n-hexano (350 mL) durante un tiempo de 6 h a 70 °C. Después de la extracción se evaporó el disolvente para obtener el aceite crudo. El aceite crudo se envasó en frascos de plástico (PET) con rosca y se almacenó a -20 ºC hasta su análisis. -Métodos analíticos Para determinar el perfil de ácidos grasos se siguió la técnica de extracción de los lípidos descrita por Hanson y Olley (1963) y para la formación de los ésteres metílicos se siguió la técnica de Morrison y Smith (1964). La composición de ácidos grasos fue analizado mediante cromatografía de gases utilizando las condiciones cromatográficas descritas por Moo-Huchin et al. (2013). Los resultados se presentan como porcentaje del total de ácidos grasos. RESULTADO Y DISCUSIÓN La alimentación es el factor que más afecta a la calidad de la canal y los vegetales ricos en ácidos grasos representa el mayor recurso que maneja el ganadero para mejorar la producción y el perfil lipídico de la carne, junto a la raza, sistema de explotación, edad de sacrificio, etc. Este hecho ha favorecido la necesidad del estudio de la búsqueda de fuentes vegetales ricos en ácidos grasos que puedan ser incluidos en la dieta de los cerdos. En este sentido, en el presente trabajo se reporta la composición de ácidos grasos de las hojas de Brosimum alicastrum y Moringa oleífera (Tabla 1). Se puede observar que se identificaron 5 ácidos grasos comunes en ambos materiales: palmítico, esteárico, oleico, linoleico y linolénico. El ácido palmitoleico solo se encontró en MO. La composición de ácidos grasos para 142 | P á g i n a BA resultó ser más insaturado (71.31%) que saturado (28.69%), mientras que para MO fue predominantemente saturado (64.12%) que insaturado (35.88%). Cuando se comparó ambos materiales estudiados, resultó que los ácidos grasos, palmítico (55.26%) y esteárico (8.86%), fueron superiores para MO. En otro resultado, las hojas de BA exhibieron mayor contenido de ácido oleico (10.29%), linoleico (22.23%) y linolénico (38.78%) en relación a las hojas de MO (oleico=4.58%, linoleico=7.32%, linolénico=21.22%). La composición de ácidos grasos, saturados e insaturados, de los materiales vegetativos evaluados en este trabajo es diferente a la composición de ácidos grasos reportados por Anwar and Bhangar. (2003); Soliva et al. (2005) De acuerdo a todos estos resultados, se puede destacar que los dos materiales vegetativos cultivados en Yucatán, caracterizados por sus altos niveles de ácidos grasos insaturados, pueden ser considerados para su inclusión en la dieta del Cerdo Pelón Mexicano y modificar el perfil lipídico de su carne, contribuyendo a la obtención de una carne más saludable. Tabla 1. Perfil de ácidos grasos de las hojas de Brosimum alicastrum y Moringa oleífera. Ácidos grasos Saturado Palmítico (16:00) Esteárico (18:00) Insaturados Palmitoleico (16:1) Oleico (18:1) Linoleico (18:2) Linolénico (18:3) Brosimum alicastrum (%) 28.69 23.99 4.70 71.31 10.29 22.23 38.78 Moringa oleífera (%) 64.12 55.26 8.86 35.88 2.76 4.58 7.32 21.22 CONCLUSIONES De acuerdo a los resultados, se puede concluir que la composición de ácidos grasos de las hojas de Brosimum alicastrum y Moringa oleífera indica que contienen altos niveles de ácidos grasos insaturados, lo cual favorecería el uso de estos dos materiales vegetativos para su inclusión en la dieta del Cerdo Pelón Mexicano con el objetivo de diseñar una estrategia para la modificación del perfil de lípidos de la carne. 143 | P á g i n a REFERENCIAS Anwar, F., and Bhanger, M.I. (2003). Analytical characterization of Moringa oleifera seed oil grown in temperate regions of Pakistan. J. Agric. Food Chem. 51 (22), 6558-6563. Echenique, A., Repiso, L., and Capra, G. 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Sci. 36 (4). 144 | P á g i n a EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE LAS PROTEÍNAS DE RESERVA DE LA NUEZ (Carya Illinoenensis) abMares Mares E*., aGarcia Herandez A., cOrdoñez Acevedo L. G., aBautista Justo M., aDel Rincon Castro C., aMartinez Soto G., bGarnica Rodríguez B. C., aLeón Galván Ma. F. a Universidad de Guanajuato. Campus Irapuato-Salamanca. División Ciencias de la Vida. Dpto. de Alimentos. Carretera Irapuato-Silao km 9. Col. Ex-Hacienda el Copal. CP 36500. Irapuato Gto. b Instituto Tecnológico Superior de Guanajuato, Coord., De Ingeniería en Industrias Alimentarias, Carretera a Puentecillas Km. 10.5, Col. Predio del Carmen, C.P. 36250. Guanajuato, Gto, México. c Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica A.C, División de Biología Molecular. Camino a la Presa San Jose No. 2055, Lomas 4ta Sección; San Luis Potosí, S.L.P. México. *[email protected] Categoría: POSGRADO Resumen La nuez Carya illinoinensis brinda un equilibrado aporte de grasas y representan casi dos tercios de su peso (65%), es una buena fuente de proteína (aproximadamente un 9%) rica en arginina lisina y treonina. Las proteínas de reserva proveen una fuente de nitrógeno y azufre durante los estadios tempranos de desarrollo y crecimiento de la plántula. Osborne (1924) las clasifico de acuerdo a la solubilidad en Albuminas, Globulinas, Prolaminas y Glutelinas. En este trabajo se realizó la extracción de dichas fracciones, partiendo del método propuesto por Barba de la Rosa (1992), cuantificándolas con el método de Bradford y caracterizándolas por SDS-PAGE y el análisis de aminoácidos esenciales por RP-HPLC. El contenido de proteína total fue del 13.43%, superior a lo reportado, de esta, el 53.27% corresponde a las Glutelinas Alcalinas (18.08mg/g de Harina de Nuez) y segundo lugar a las Globulinas (26.63%). El análisis electroforético determinó que ambas fracciones contienen proteínas de peso similar (50, 25 y 25 kDa), sin embargo se encontró una proteína de peso 60 kDa en las Albuminas, Prolaminas y Globulinas. Con el análisis de aminoácidos se evaluó su puntaje químico por fracción y harina de nuez total, siendo la metionina el aminoácido limitante. Sin embargo la calidad proteica de las glutelinas (89.47) es superior al aportado por maíz (54), leche (73) y trigo (60). De acuerdo a los resultados es posible que la nuez sea considerado un alimento funcional y puede contener péptidos bioactivos en sus proteínas de reserva. Palabras Clave: Nuez, Proteínas de Reserva, SDS-PAGE, HPLC. Antecedentes 1. Composición química y propiedades biológicas de la Nuez La nuez Carya illinoinensis también conocida como nuez pecanera, pertenece a la familia Junglandaceae. La nuez es una drupa, fruta del Nogal. Brinda un equilibrado aporte de grasas, las cuales representan casi dos tercios de su peso (65%). Rica en ácidos grasos mono y poli insaturados, como los omega 3 y omega 6, mismos que tienen funciones protectoras en la prevención de coágulos de la sangre y reducen el riesgo de cardiopatía coronaria, contribuyen en el desarrollo normal del sistema nervioso. Aproximadamente 98% de los triacilglicéridos de la nuez son compuestos por los ácidos palmítico, esteárico, oleico, linoleico y linolénico. 145 | P á g i n a Los ácidos grasos insaturados representan la mayor parte de la fracción lipídica, siendo el ácido oleico el ácido graso predominante (Oro et al., 2008) Aproximadamente contiene un 14% carbohidratos, lo cual la hace muy bien tolerada por los diabéticos. Es una buena fuente de proteína (aproximadamente un 9%) rica en arginina lisina y treonina, aunque es carente en metionina, que abunda en los cereales (como arroz, trigo y avena); estos a su vez son carentes en aminoácidos abundantes en la nuez (lisina, treonina). Contiene además fotoesteroles y compuestos fitoquímicos contiene vitamina E, Complejo B y Hierro (SAGARPA, 2010). 2. Proteínas de Reserva Las proteínas de reserva se caracterizan por tener, en su mayoría, pesos moleculares altos y son poco solubles en agua (Mandal y Mandal, 2000), y se pueden definir como: cualquier proteína que se sintetiza y se acumula en grandes cantidades durante el desarrollo y maduración de las semillas, se almacenan dentro de compartimentos subcelulares llamados cuerpos proteínicos. Son rápidamente hidrolizadas durante la germinación para proveer una fuente de nitrógeno y azufre durante los estados tempranos de desarrollo y crecimiento de la plántula y generalmente son ricas en asparagina, glutamina, arginina y prolina (Segura- Nieto et al.,1994; Mandal y Mandal, 2000; Shewry et al., 1995). Osborne (1924) quien inició los estudios sistemáticos de las proteínas presentes en los granos de cereales, clasifico mediante extracción secuencial (solubilidad) en cuatro grupos las proteínas de reserva: a) Albuminas: son proteínas solubles en soluciones salinas diluidas y en agua (Badui, 2006). Las albúminas 2S fueron inicialmente definidas como un grupo de proteínas de acuerdo a su coeficiente de sedimentación y se encuentran ampliamente distribuidas en semillas dicotiledóneas b) Globulinas: es el grupo de proteínas que más prevalece en las plantas dicotiledóneas en floración y en semillas de leguminosas. Se clasifican en tres grupos de acuerdo a su coeficiente de sedimentación: Globulinas 2S; Globulinas 7S (7.1- 8.7S) y Globulinas 11S (10.1-14S), donde el contenido de aminoácidos azufrados de las globulinas 11S es más alto que el de las globulinas 7S (Utsimil, 1992; Silva, 2007). Sonsolubles en soluciones salinas. c) Prolaminas: es el grupo de proteínas cuantitativamente más importante en todos los cereales. Son solubles en soluciones alcohólicas entre 70 y 90%, y se caracterizan por tener mayoritariamente dos aminoácidos: prolina y glutamina, que pueden encontrarse en el 30% y 70% del total de los aminoácidos. d) Glutelinas: son polímeros de alto peso molecular estabilizados por puentes disulfuro, son un grupo altamente heterogéneo y están formadas por subunidades. Silva et. al., en 2007 sugieren que las glutelinas son un grupo de proteínas tipo globulinas que tienen una estructura hexamérica oligomérica de aproximadamente 300kDa. Son solubles en álcalis o ácidos diluidos. Los problemas actuales de salud pública en México y en el mundo, han llevado a la investigación de nuevas alternativas para la prevención o en su caso tratamiento de las enfermedades más frecuentes como son el cáncer, la obesidad y la hipertensión. Por lo que, una alternativa para la prevención y/o tratamiento de estas es el uso de componentes bioactivos obtenidos de fuentes naturales en la dieta (Torruco et al., 2008), estos compuestos son llamados péptidos bioactivos. La nuez es una oleaginosa originaria del norte de México y el sur de Estados Unidos. Debido a que en su composición proximal de la nuez, el contenido lipídico es más de dos tercios de su peso, los trabajos de 146 | P á g i n a investigación de la nuez solo están enfocados, a la extracción del aceite de la nuez, y sus beneficios a la salud, y no existen reportes que exploren y exploten todas sus características bioquímicas. Por tal motivo este trabajo está enfocado al análisis proteomico preliminar de la nuez, con la finalidad de caracterizar las proteínas de reserva y de estas, identificar péptidos con actividades biológicas en estudios posteriores. Materiales y Métodos 1. Material Biológico: Moler nuez de la variedad “Wichita” y desengrasar de acuerdo al método 920.39 de la AOAC. Tamizar hasta obtener una harina de malla No. 100. 2. Extracción de Proteínas: En una relación 1:10 (g de Harina desengrasada/mL de solvente). Para Albuminas (Agua), Globulinas (0.1 M NaCl, 0.010 M K2HPO4, pH 7.5, 0.001 M EDTA), Globulinas 11S (0.8 M NaCl, 0.010 M K2HPO4, pH 7.5, 0.001 M EDTA), Prolaminas (Etanol 70%) y Glutelinas Alcalinas (0.1M de NaOH) y Glutelinas Acidas (HCl 0.1 M) 3. Cuantificación de proteínas: Las fracciones de proteínas se cuantificaron utilizando el método de Bradford con el kit Protein assay de Biorad de acuerdo con las especificaciones del fabricante. 4. Análisis Electroforético: SDS-PAGE en condiciones de desnaturalización y reductoras con β-mercaptoetanol. 5. Caracterización de Aminoácidos Esenciales. Se realizó mediante cromatografía de líquidos de fase reversa (RP-HPLC) con el kit AccQ-Tag (Waters). Con los datos obtenidos es posible estimar su puntaje químico corregido por la digestibilidad. Todas las pruebas se realizaron por triplicado. Resultados 1. Cuantificación de proteínas Tabla 1. Cuantificación de las fracciones proteicas Las medias con diferente literal superíndice indica diferencia significativa (p<0.05) No existen reportes de la cuantificación de proteínas en la nuez. En la tabla 1 se indica la cuantificación de las fracciones proteicas, estadísticamente no existe una relación de concentración entre las fracciones de las proteínas de reserva. Las globulinas y glutelinas son las fracciones más importantes en la nuez, estas últimas son las más abundantes ya que representaron más del 50% de la fracción soluble. 147 | P á g i n a 2. Análisis Electroforético En el análisis de electroforesis SDS-PAGE no se detectó la presencia de globulinas 7S. La fracción de albuminas presenta 4 bandas principales de 52 kDa, 55 kDa, 60 kDa y 170kDa. La fracción globulinas 11S mostró las bandas principales a 60kDa, 50 kDa, 40 kDa, y 29 kDa, 25kDa y 20 kDa. La fracción glutelinas alcalinas (Alc) mostró una alta similitud con las globulinas 11S. En la Figura 1d pueden observarse en el gel las bandas principales a 20 kDa, 22kDa 25 kDa, 35 kDa, 50 kDa y 80kDa. Algunos de estos valores son similares a las globulinas, lo que nos indica que las glutelinas son una familia de proteínas tipo globulinas con una estructura Hexomerica de 300KDa. Figura 1. Patrón electroforético de la fracciones proteicas de la nuez. (M) Marcador de peso molecular, (Pt) Proteína Total; a) Albuminas, b) Globulinas 11S, c) Prolaminas, d) Glutelinas (Alc-Alcalinas y Acd-Acidas). 3. Caracterización de Aminoácidos esenciales La Tabla 2 muestra la composición de aminoácidos esenciales de las diferentes fracciones de las proteínas de reserva de nuez obtenidas en este estudio. Los aminoácidos esenciales con mayor contenido fueron leucina y treonina, estos aminoácidos coinciden con los reportados por la SAGARPA, 2010. Tabla 2. Composición de Aminoácidos esenciales de las fracciones proteicas 148 | P á g i n a Entre las fracciones con mayor balance de aminoácidos fueron Albuminas y Glutelinas que tuvieron una composición similar según lo reportado por la FAO, 1981. Con los datos obtenidos es posible evaluar la calidad (Puntaje químico o Score) de la proteína de la harina de nuez y de las fracciones de reserva según los requerimientos nutricionales en la dieta por la FAO. No existen reportes que evalúen el puntaje químico de las proteínas de reserva, más en específico, en la nuez. En la Tabla 3, el PDCAAS de la harina de nuez, se encuentra por debajo de los valores reportados por la FAO (1981) para niños y adultos, pero es similar al reportado por Suarez et al., (2006) para el caso de adultos. Por lo anterior, la nuez debe complementarse con otra fuente de proteína en la dieta debido a su baja calidad proteica. Sin embargo la calidad de las glutelinas para adultos (89.47), comparado con 54 de maíz, 60 del trigo, 68 de la soya y 73 de la leche es superior. De acuerdo a los resultados de la Tabla 3, para las fracciones de las Albuminas, Prolaminas y la Harina de nuez, el aminoácido limitante es la metionina. Sin embargo para las Globulinas 11S es la Valina, esté aminoácido es indicado como el limitante para la nuez. Para las Glutelinas corresponde a la fenilalanina. Conclusiones En este trabajo de tesis se realizó la caracterización bioquímica de la nuez, debido a que no existen reportes que exploten sus propiedades proteicas. En la caracterización molecular de las proteínas de reserva, se determinó que las glutelinas fueron la fracción de reserva más importante en la nuez, debido a que, más del 50% de la proteína soluble correspondía a ésta, sin embargo, en el patrón electroforético se encontraron similitudes estructurales con las Globulinas 11S en cuanto a los pesos moleculares de 50, 25 y 20kDa. El perfil de aminoácidos fue comparable con lo reportado en la literatura por la FAO y se comprobó que la nuez es deficiente en metionina en la harina de nuez, albuminas y en las prolaminas, sin embargo la calidad de las glutelinas es alto en comparación con maíz, leche y trigo. Tabla 3. Puntaje Químico de Aminoácidos en Adultos y Niños 149 | P á g i n a Bibliografía Abugouch LE, Martinez EN, Añon MC. 2003. Influence of the extracting solvent upon the structural properties of amaranth (Amaranthushypochondriacus) glutelin. J Agric Food Chem 51: 4060-4065 Badui, D. S. 2006. Química de los alimentos. 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México. *[email protected] Categoría: POSGRADO Resumen En los últimos años hay un creciente interés en alimentos que además de nutrir y que tengan bajo costo tengan propiedades funcionales, tal es el caso de las proteínas de origen vegetal que se pueden encontrar en semillas como cereales, leguminosas y oleaginosas, ya que el consumo de semillas ha sido asociado a una menor incidencia de padecer diferentes enfermedades crónicas. La nuez Carya illinoinensis brinda un equilibrado aporte de grasas, las cuales representan casi dos tercios de su peso (65%), es una buena fuente de proteína (aproximadamente un 9%). En el presente trabajo se realizó la identificación de péptidos de digeridos trípticos de las fracciones de reserva de la nuez por espectroscopia de masas. Los extractos de los digeridos proteicos de las glutelinas mostraron actividad antihipertensiva y anti-carcinogénica por su mayor frecuencia de ocurrencia. Para la actividad anticarcinogenica se evaluó la progresión del ciclo celular por citometria de flujo y la inducción a apoptosis (Por Túnel). La inducción de apoptosis mediada por las glutelinas (50μg/mL) en las líneas celulares HeLa y CasKi (30.43% y 29.22%, respectivamente) fue estadísticamente significativo e inferior en comparación al inducido por Cis-platino (Control). Las células tratadas con el agente citotóxico (Cis-platino 2uM) mostró que induce a apoptosis en 70 % en células HeLa, 52% en las células CasKi, y un 72%. En tanto se concluye que los péptidos provenientes de las proteínas de reserva en la nuez cumplen con una función regulatoria en el metabolismo, y en la progresión del ciclo celular. Palabras Clave: Nuez, Péptidos-Anticarcinogenicos, Espectroscopia MM. Antecedentes En los últimos años se ha presentado un creciente interés en el mejoramiento de la dieta y el estilo de vida como una estrategia para reducir el riesgo de enfermedades cardiovasculares y de cáncer. En este sentido, la ciencia de los alimentos está promoviendo un nuevo concepto de nutrición y de diseño del alimento, el cual consiste en el desarrollo de productos alimenticios con una composición definida para el tratamiento de enfermedades o síndromes específicos. Muchas proteínas de la dieta pueden ejercer efectos fisiológicos benéficos en el cuerpo humano, ya que poseen propiedades biológicas que hacen a estos componentes, ingredientes potenciales por su bioactividad o como alimentos promotores de la salud (Torruco et al., 2008). Tales alimentos son denominados como alimentos funcionales o nutracéuticos. Péptidos Bioactivos Los componentes de los alimentos que funcionan como nutracéuticos tienen potencial bajo como compuestos bioactivos si son comparados con fármacos, pero, dado que son ingeridos regularmente en cantidades significativas como parte de la dieta, pueden presentar un efecto fisiológico a largo plazo perceptible (Espin et al., 2007). Los mecanismos mediante los cuales las proteínas pueden exhibir sus efectos benéficos incluyen un incremento en la ingesta de aminoácidos biológicamente activos o péptidos bioactivos (Appel, 2003; Elliot, 2003). 151 | P á g i n a La hidrólisis enzimática de las proteínas vegetales es el bioproceso que incrementa las propiedades químicas y funcionales de la proteína original sin perjudicar su valor nutritivo. Esta es la forma más común para la obtención de péptidos bioactivos (Conde et al., 2009).Existen péptidos con actividad anticarcinogenica en los alimentos, se han reportado péptidos que inhiben el factor de transcripción STAT3, que actúa como mediador en la expresión de diversos genes en respuesta a determinados estímulos celulares, jugando un importante papel en multitud de procesos celulares como la proliferación celular y la apoptosis (Dourlat, et al., 2009). El estudio de las proteínas de los alimentos está recibiendo una gran atención para abatir dichas enfermedades crónicas. En este sentido, se investiga la presencia de diferentes péptidos bioactivos en proteínas de reserva (Albuminas, Globulinas, Prolaminas y Glutelinas, (Osborne, 1904)) de diversos tipos de alimentos de origen vegetal, como cereales, leguminosas y oleaginosas. Generalidades de la Nuez La nuez (Carya Illinoenensis) es un fruto oleaginoso originario del norte de México que brinda un equilibrado aporte de grasas (65%). Su contenido proteico (9 al 15%) es superior al aportado por algunos cereales, lo que hace a la nuez una excelente fuente de proteína en la dieta (SAGARPA, 2010). De acuerdo con Mares et al., (2012), las glutelinas son la fracción de reserva más importante en la nuez, debido a que, más del 50% de la proteína soluble corresponde a ésta. Los problemas actuales de salud pública en México y en el mundo, han llevado a la investigación de nuevas alternativas para la prevención o en su caso tratamiento de las enfermedades más frecuentes como son el cáncer, la obesidad y la hipertensión. Por tal motivo este trabajo está enfocado a determinar el potencial y anticarcinogenico de las glutelinas básicas de la nuez, evaluando la actividad anticarcinogenica en la que se analizó la progresión del ciclo celular de las líneas celulares HeLa y CasKi, y de cultivos primarios de fibroblastos (células sanas). Materiales y Métodos 1. Extracción de fracciones Proteicas y Digeridos Trípticos Las fracciones solubles de las proteínas de reserva se obtienen a partir de harina desengrasada y en diferentes disolventes. Para Albuminas (Agua), Globulinas (0.1 M NaCl, 0.010 M K2HPO4, pH 7.5, 0.001 M EDTA), Globulinas 11S (0.8 M NaCl, 0.010 M K2HPO4, pH 7.5, 0.001 M EDTA), Prolaminas (Etanol 70%) y Glutelinas Alcalinas (0.1M de NaOH). Las suspensión de harina/solvente (1:10 p/v) se extrajeron con agitación magnética por 1h a 4°C y se centrifugó a 13000 rpm por 15 min a 4°. Las fracciones se cuantifican utilizando el método de Bradford con el kit Protein assay de Biorad de acuerdo con las especificaciones del fabricante. Se tomó una alícuota de cada una de las fracciones y se precipitan para obtener 200 μg de proteína. La pastilla se resuspendió en 100 μL de buffer de urea (Urea 6M, Tris-HCl 50 mM pH 8). La muestra se redujo con DTT a temperatura ambiente y se alquiló con iodoacetamida en la obscuridad. La digestión se realizó con tripsina en una relación 1:50 (p/p, tripsina: proteína) por 16 horas a 37°C. La reacción se detuvo ajustando el pH de 3 a 4 con ácido fórmico. 2. Espectroscopia de Masas Cada uno de los digeridos se sometió a espectroscopia de masas. El análisis de cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas se llevó a cabo en un sistema SYNAP-NanoUPLC (Waters co.) (Palo Alto, CA) equipado con una fuente de ionización Nano TM ion spray de la unidad de espectrometría de masas. La identificación de péptidos se realizó usando MASCOT (Matrix Sciences, http://www.matrixcience.com/). La identificación de péptidos bioactivos se realizó haciendo una búsqueda en la base de datos para péptidos activos (http://www.uwm.edu.pl/biochemia 152 | P á g i n a 3. Ensayos de actividad anticarcinogenica Se analizó la progresión del ciclo celular de las líneas celulares HeLa y CasKi (cáncer cervicouterino genotipo VPH 18 y 16 respectivamente), y de cultivos primarios de fibroblastos como control de células sanas. Como control, las células fueron tratadas con cis-platino (agente citotóxico). Las líneas celulares HeLa y CasKi se crecieron en Medio Eagle Modificado Dulbecco (DMEM, por sus siglas en inglés) (GIBCO), adicionado con 10% de suero fetal bovino (GIBCO) y 1% de antibiótico. Se incubaron a 36°C en una atmósfera húmeda con 5% de CO2. Se realizaron ensayos de apoptosis (por TUNEL) y de progresión del ciclo celular (Mitosis, Arresto Celular y Síntesis) mediante citometria de flujo la determinación se realizó en un citómetro FAC-Scan (Becton-Dickinson, EE.UU). Las células con una confluencia del 85% fueron tratadas con diferentes concentraciones (20, 50 y 100 μg/mL) de extracto de glutelinas y tiempo de incubación de (12, 24, 36 y 48 horas). Se realizó un diseño factorial con un nivel de significancia del 95% bajo las siguientes condiciones para evaluar el efecto de tratamiento. También se evaluó la comparación múltiple de medias utilizando la prueba de Tukey con un nivel de significancia del 95%. 2. Actividad Anticarcinogenica Se analizó la actividad biológica anticarcinogenica de las glutelinas, debido a que en el análisis MS/MS se encontró que esta fracción presentó la mayor frecuencia. 153 | P á g i n a Se analizó la progresión del ciclo celular de las líneas celulares HeLa y CasKi, y de cultivos primarios de fibroblastos como control de células sanas, tratadas con diferentes concentraciones de digeridos trípticos de glutelinas. Resultados preliminares revelan que los digeridos trípticos de glutelinas de nuez posee actividad anti proliferativa, y selectiva de las células neoplásicas principalmente, induciendo en un periodo de 36 horas el fenómeno de apoptosis, siendo la concentración de 50 μg/mL de las glutelinas la que mostro mayor diferencia estadística significativa según la prueba de Tukey con el mismo nivel de significancia (Datos no presentados). Los resultados de la progresión celular medida por citometria de flujo se muestran en la Figura 1. En Células HeLa, los datos revelaron que el extracto proteico (glutelinas 50 μg/mL) a las 36 horas inducía un 30.43% de las células a entrar en apoptosis, 18.79% a entrar en arresto celular, 14.79% a entrar en síntesis de DNA y a un 38.99% a entrar a la fase de mitosis. Para Células CasKi a la misma concentración y tiempo de incubación, las glutelinas inducen un 29.22% de las células a entrar en apoptosis, a un 14.86% a entrar en arresto celular, a un 15.33% a entrar en síntesis de DNA y a un 40.59% a entrar a la etapa de mitosis. 154 | P á g i n a En células de Fibroblastos se encontró que el 3.71% de las células fueron inducidas a apoptosis con el extracto proteico de las glutelinas (50 μg/mL), a las 36 horas, y el 55.75% entró en etapa de mitosis, favoreciendo la división celular. Las células tratadas con el agente citotóxico (Cis-platino 2uM) mostró que induce a apoptosis en 70 % en células HeLa, 52% en las células CasKi, y un 72% en células de fibroblastos. La inducción de apoptosis mediada por las glutelinas en las líneas celulares HeLa y CasKi (30.43% y 29.22%, respectivamente) fue estadísticamente significativo e inferior en comparación al inducido por Cis-platino. Conclusiones De todas las fracciones digeridas analizadas, los digeridos trípticos de las glutelinas de nuez podrían ser considerados nutracéuticos anticarcinogenicos, es decir, sustancias provenientes de un alimento que proveen algún beneficio a la salud que pudiera ayudar en el tratamiento o prevención de enfermedades. Los ensayos de actividad biológica de las glutelinas de nuez, indicaron que tenían un efecto antiproliferativo En tanto se concluye que los péptidos provenientes de las proteínas de reserva en la nuez cumplen con una función regulatoria en el metabolismo, y en la progresión del ciclo celular. Bibliografía Appel L.J. (2003) The effects of protein intake on blood pressure and cardiovascular disease. Curr Opin Lipidol, 14:55–9. Conde et al., 2009 Could antioxidants play a role in high rates of coronary herat idease in Czech Republic-Éur Clin Nutr 1998:52(9);632-6. Dourlat, J., W. Q. Liu, F. Sancier, T. Edmonds, P. Pamosinlapatham, F. Cruzalegui and C. Garbay. 2009. A novel non-phosphorylated potential antitumoral peptide inhibts STAT3 biological activity. Biochimie, 91: 996-1002. Elliott P. (2003) Protein intake and blood pressure in cardiovascular disease. Proc Nutr Soc, 62:495–504. -Conesa, M.T., y Tomas-Barberan, F.A. 2007. Nutraceuticals: facts y fiction. Phytochemistry 68: 2986-3008 FitzGerald, R.J., y Meisel, H. 2000. Milk protein-derived peptide inhibitors of angiotensin-I-converting enzyme. Br J Nutr 84 Suppl 1: S33-37. -Mares E., Espitia Orozco F.a, Del Rincón Castro C., Barboza Corona E., Bautista Justo M.,Ordoñez Acevedo L.G., León Galván M.F. 2012. Estudio y caracterización molecular de las proteínas de reserva de la nuez (Carya illinoinensis). XIV Congreso Nacional de Alimentos. 24 y 25 de mayo de 2012. pp. 53-59.. Osborne TB. 1924. The vegetable proteins. Disponible en: http://www.archive.org/details/vegetableprotein00osbouoft Alimentación. -Uco, J. G., M. A. Domínguez-Magaña, G. Dávila-Ortíz, A. Martínez-Ayala, L. A. Chel-Guerrero, and D. A. Betancur. 2008. Péptidos antihipertensivos, una alternativa de tratamiento de Origen natural: una revisión. Ciencia y Tecnología Alimentaria. 6 (2): 158168. 155 | P á g i n a CONSERVACIÓN DE BEBIDAS ELABORADAS CON LECHE Y MAÍZ 1 Cano-Hernández Maribel*, 1Castorena-García Hugo ,1Cruz-Hernández Alheli, 1 Silva-Guerrero Erika, 2García-Bueno Ma. del Refugio; 3Díaz-Reyes Joel,.4ArizaOrtega José Alberto. 1Sainos-Carrillo Eduardo. 1 Instituto Tecnológico del Altiplano de Tlaxcala, San Diego Xocoyucan, Tlax., México. 2Mauiztic S de RL. MI, Tenancingo, Tlaxcala., 3 CIBA-IPN Tepetitla Tlax. 4 México Instituto Tecnológico Superior de Libres, Libres Puebla, México. *e-mail: maribel_cano @hotmail.com; categoría posgrado Introducción: Las proteínas de la leche contienen aminoácidos, que se asocian a la pérdida de peso y reducción de grasa corporal. En tanto que el maíz está constituido principalmente por carbohidratos, proteínas, minerales, vitaminas, y fibra. La elaboración de bebidas a base de leche y polvo de maíz, representa una alterativa de las bebidas convencionales que requieren un tratamiento térmico, para su conservación. Palabras clave: Tratamiento térmico, leche, maíz Objetivo general: Evaluar dos procedimientos para la conservación de bebidas funcionales a base de maíz y leche. Objetivos específicos: Determinar el tiempo de vida útil, por medio del monitoreo de pH y análisis microbiológico, en tiempo real. Metodología: Se aplicaron dos procedimientos térmicos a 96 °C sostenido por 5 minutos, con choque térmico a 0 °C, y a 25 °C. Se estudió la influencia de los sólidos sedimentables en la conservación de las bebidas. Se monitoreo el pH y la carga microbiana durante los días 0, 11, 17, 25, 33 y 46 en la bebida conservada en refrigeración a 0°C. Se determinó la acidez, proteína, lactosa, cenizas y grasas; se realizó un análisis sensorial. Resultados: Los resultados obtenidos de pH, acidez, cenizas y proteína después del Tratamiento Térmico a 0 °C y después de haber sido conservadas en refrigeración, se mantuvieron dentro del rango establecido por las normas oficiales; no se encontró diferencia significativa entre los dos tratamientos térmicos aplicados Conclusiones: Los dos tratamientos térmicos que se aplicaron a la bebida funcional fueron efectivos, de acuerdo a los análisis bioquímico y bromatológico, y prolongaron la vida útil de la bebida, hasta por 45 días. Recomendaciones: Continuar los estudios incrementando el tiempo de tratamiento térmico. 156 | P á g i n a CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN SEMILLAS DE AMARANTO (Amaranthus hypochondriacus) EN FUNCIÓN DEL MÉTODO, EL DISOLVENTE Y EL TIEMPO DE EXTRACCIÓN ÁREA: Química de Alimentos O. A. López-Mejía*, A. López-Malo y E. Palou Departamento de Ingeniería Química, Alimentos y Ambiental. Universidad de las Américas Puebla. Sta. Catarina Mártir. Cholula, Puebla. C.P. 72820. México. *[email protected] (Posgrado) RESUMEN El amaranto es un pseudocereal, ampliamente investigado por sus cualidades nutrimentales. Actualmente, su estudio se ha enfocado a compuestos bioactivos como los antioxidantes. El objetivo de este trabajo fue evaluar los efectos del método, disolvente y tiempo de extracción de antioxidantes en semillas de amaranto (A. hypochondriacus). Los métodos de extracción aplicados fueron la homogeneización y el ultrasonido, de forma aislada y combinada. Como disolventes se utilizaron metanol, etanol y hexano; se probaron dos tiempos de tratamiento para cada método. A los extractos obtenidos se les determinó capacidad antioxidante y compuestos antioxidantes. La capacidad antioxidante se determinó usando una ecuación de regresión entre la concentración de Trolox (ácido 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcroman-2-carboxílico), reaccionando con DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazil) y el porcentaje de inhibición a 515 nm, misma que se expresó en mg Trolox/g de materia seca. Los compuestos antioxidantes se determinaron cualitativamente mediante un cromatógrafo de gases acoplado a un detector de masas. Los resultados obtenidos indicaron que hay un efecto método. El disolvente con el que se logró mayor extracción de compuestos antioxidantes fue el hexano, seguido del metanol. El etanol fue el disolvente con el que se obtuvo menor capacidad antioxidante. En general, un mayor tiempo de tratamiento correspondió a una mayor capacidad antioxidante. Los principales compuestos antioxidantes encontrados en los extractos metanólicos fueron 2,4-bis (1-1dimetiletil) fenol y escualeno; en los etanólicos, 2,4-bis (1-1 dimetiletil) fenol, escualeno y vitamina E; y, en los hexanólicos, 2,4 diterbutil fenol, escualeno y vitamina E. Palabras clave: Amaranto, Amaranthus hypochondriacus, capacidad antioxidante, antioxidantes 157 | P á g i n a ENRIQUECIMIENTO DE QUESO DE SAL (QUESO FRESCO) CON PROTEÍNA VEGETAL EXTRAÍDA DE SOYA (Glycine max) EN EL INSTITUTO TECNOLÓGICO SUPERIOR DE CINTALAPA. AUTOR: Figueroa Chacón, César Antonio. COAUTORES: Villalobos Arreola, Juan Carlos, Valdespino León, Mariana, Lam Gutiérrez, Anayancy. INSTITUCIÓN DE AFILIACIÓN: Instituto Tecnológico Superior de Cintalapa. PAÍS: México. DIRECCIÓN: Carretera panamericana km. 995, s/n. Cintalapa de Figueroa, Chiapas. México. Tel. 9686844779. CORREO ELECTRÓNICO: [email protected] CATEGORÍA: Licenciatura. Introducción En el presente proyecto se realizó la estandarización y formulación de una tecnología encaminada a la elaboración de un alimento enriquecido, ya que en la búsqueda de alternativas orientadas a mejorar la demanda nutrimental de la alimentación de un sector de consumidores, se propone en este proyecto la opción de elaborar un alimento que combine las propiedades del queso de sal (queso fresco) con proteína vegetal extraída de soya (Glycine max). Palabras clave: soya, queso enriquecido. Objetivo general: Desarrollar y estandarizar una para elaborar queso de sal (queso fresco) enriquecido con proteína vegetal extraída de soya (Glycine Max). Objetivos específicos: procesamiento del queso de sal enriquecido con proteína de soya. materia prima (leche bronca) antes del procesado (elaboración de queso fresco enriquecido con proteína vegetal). Mexicanas (NOM-121-SSA1-1994 y NOM-086-SSA1-1994) y a la Normas del CODEX ALIMENTARIO (CODEX STAN 221-2001 y CODEX STAN 283-1978) para la elaboración de queso de sal enriquecido con proteína vegetal de soya. enriquecido con proteína vegetal extraída de soya). vida de anaquel del producto terminado (queso de sal o fresco enriquecido con proteína vegetal extraída de soya). enriquecido con proteína vegetal extraída de soya). la tecnología desarrollada de queso de sal o fresco enriquecido con proteína vegetal extraída de soya a nivel banco (Planta piloto de alimentos). pruebas hedónicas a una muestra significativa de consumidores potenciales. 158 | P á g i n a Metodología Para la elaboración del queso fresco enriquecido se estableció un proceso que constó de 3 etapas: la elaboración del queso de sal a partir de leche bronca, la extracción de proteína de soya y la elaboración y formulación del producto final. Para los análisis proximales se efectuó humedad por secado en estufa, extracto etéreo por Soxhleth modificado, fibra por Kennedy, proteína por micro Kjeldahl y cenizas por incineración en mufla. Se realizó la elaboración y formulación del producto terminado mediante la realización de pruebas para la mezcla de los dos ingredientes del producto final. De las mismas se logró obtener la concentración adecuada y el sabor aceptable para el consumidor. Resultados Se obtuvo un producto que alcanzó las expectativas de características físicas finales y valor energético aceptable, así como la apreciación del incremento del valor nutricional proteico. Conclusiones Con la ejecución de este proyecto se produjo un tipo de queso enriquecido con proteína de origen vegetal utilizando soya como fuente de la misma, generando opciones alternas para el mercado consumidor mediante la innovación en el sector de los derivados lácteos. 159 | P á g i n a “DESARROLLO Y ESTANDARIZACIÓN DE LA TECNOLOGÍA PARA LA ELABORACIÓN DE PASTAS ALIMENTICIAS CON HOJA DE CHIPILIN (CROTALARIA LONGIROSTRATA)” Palabras clave: chipilín, pasta alimenticia. AUTORA: Valdespino León, Mariana. COAUTORES: Figueroa Chacón, César Antonio, Lam Gutiérrez Anayancy. INSTITUCIÓN DE AFILIACIÓN: Instituto Tecnológico Superior de Cintalapa. PAÍS: México. DIRECCIÓN: Carretera Panamericana Km. 995, s/n. Cintalapa de Figueroa, Chiapas. México. Tel. 019686844779. CORREO ELECTRÓNICO: [email protected] CATEGORÍA: Licenciatura. Objetivo general Estandarizar y desarrollar la tecnología para la elaboración de pastas alimenticias con chipilín (Crotalaria longirostrata). Objetivos específicos Realizar el análisis proximal de la materia prima. Estandarizar la tecnología para la elaboración de pastas alimenticias con chipilín (Crotalaria longirostrata) tipo seca compuesta y tipo fresca rellena. Establecer el valor energético de los productos terminados. Resumen El chipilín (Crotalaria longirostrata) es un vegetal nativo de Centroamérica, en México es consumido principalmente en la región Sur, Sur-oeste. En Chiapas es altamente consumido en la comida tradicional; sin embargo la población no conoce del todo las propiedades nutritivas que aporta a la dieta. Sus hojas tiernas se utilizan para la elaboración de platillos regionales y también se utiliza para fines medicinales. Sin embargo, a pesar de lo anterior, esta hortaliza es aún desconocida en la mayor parte del país. Las pastas alimenticias son un producto de alto consumo y aceptación en el país, ya que por la naturaleza de su preparación y su sabor se han convertido en uno de los productos básicos en la alimentación del mexicano. Existen diversos tipos de pastas alimenticias, en México se prefieren las pastas secas simples, sin embargo la introducción de productos extranjeras han despertado el interés por las pastas compuestas. En el presente proyecto se desarrolló una tecnología de procesamiento del chipilín para ofrecerlo en forma dos variedades de pasta alimenticia: tallarines y raviolis rellenos de queso y chipilín; esperando proyectar su consumo y brindarle un valor agregado. Metodología Para elaborar las pastas alimenticias se utilizó como materia prima principal sémola de trigo duro y hojas frescas de chipilín; para conocer su estado inicial, se realizaron los análisis de contenido de humedad por el método de secado en estufa de convección forzada, extracto etéreo por el método de Soxhleth modificado, fibra por el método de Kennedy, proteína por el método de micro Kjeldahl utilizando un digestor y destilador marca Labconco y cenizas por el método de incineración en mufla; estos análisis también se desarrollaron para los productos obtenidos. Además se desarrolló el análisis físico – químico del chipilín, comprendiendo las determinaciones de acidez por titulación volumétrica con HCl, pH utilizando un potenciómetro marca Hanna y sólidos solubles mediante refractómetro de Abbe. 160 | P á g i n a El proceso de elaboración se divide en tres etapas, la primera etapa es preparación de la materia prima y las dos siguientes comprenden la elaboración de los dos tipos de pastas a elaborar. De este proceso, se obtienen dos tipos de pastas alimenticias con chipilín: tallarines y raviolis rellenos de queso y chipilín. Para llevar a cabo las operaciones de laminado y cortado de las pastas, se utilizó un laminadora de mesa marca Imperia, la cuál incluye dos adaptadores, uno para cortar las laminas de pasta en forma de tallarines y el otro para formar la pasta rellena en forma de raviolis. Para el secado de las pastas se utilizó un secador de bandejas de aire forzado sin marca y para el empacado de las pastas frescas se utilizó una empacadora con cierre al vacío de marca desconocida. Para el caso de los tallarines se aplicaron pruebas físicas durante y después del cocimiento, las cuáles comprenden el análisis de calidad culinaria (Callejo, 2002). En las pruebas durante la cocción se incluyó la determinación del tiempo de cocimiento que consiste en pesar una muestra de piezas enteras de la pasta y colocarla en ebullición, tomando el tiempo a partir del punto en el cual se introdujo la pasta al agua y después de cada minuto ir tomando una muestra y verificar su cocimiento oprimiéndola entre dos vidrios de reloj para verificar la presencia de puntos blanquecinos, que indica que aun no está cocida. Otra prueba es la determinación del porcentaje de sedimentación que consiste en pesar una muestra de pasta en piezas enteras para después cocerla de acuerdo a lo obtenido en la metodología anterior, finalizado el tiempo de cocción, se separar el agua de cocción y se homogeniza el agua de cocción para después reposar 3 horas en una probeta, reportando como el porcentaje de sedimentación los mililitros de sedimento obtenido. La última prueba realizada durante el proceso de cocción fue la determinación del índice de tolerancia al cocimiento la cuál consistió en pesar una muestra de pasta en piezas enteras para después cocerla de acuerdo a lo obtenido en la metodología anterior, al llegar al punto de cocción, se continúa su calentamiento hasta observar al menos tres piezas de pasta rota y se reporta el tiempo en el que se alcanza esta fragmentación, como tiempo de desintegración. El índice de tolerancia al cocimiento se calcula por diferencia del tiempo de cocimiento y el tiempo de desintegración de la pasta. Respecto a la evaluación de las pastas cocidas se determinó la ganancia de peso, primeramente pesando una muestra de pasta en piezas enteras para después cocerla de acuerdo a lo obtenido en la metodología anterior. Una vez cocida la pasta, se deposita en un embudo Buchner y se coloca en una probeta de 1 litro para reposar durante 10 minutos y pesar la pasta escurrida. La ganancia de peso se expresa en porcentaje y se calcula por diferencia entre el peso de la pasta seca y el peso de la pasta cocida y escurrida. Para la determinación de grado de hinchamiento se pesó una muestra de pasta seca en trozos pequeños y se deposita en una probeta graduada de 1 L que contenga 500ml de agua (V1ps) (dando pequeños golpes para eliminar las burbujas de aire). Se registra el volumen alcanzado por el desplazamiento del agua debido a la pasta (V 2ps) y se calcula el volumen de pasta cruda de la siguiente manera: 161 | P á g i n a Finalmente, se determinó el volumen de pasta cocida, introduciendo una muestra de pasta cocida de peso conocido a una probeta graduada que contenga 500ml de agua (V1pc) (eliminando las burbujas de aire de la probeta mediante pequeños golpes). Se registra el volumen que se alcanzo por el desplazamiento de agua debido a la pasta cocida (V2pc) y se calcula el volumen de la pasta cocida de la siguiente manera: RESULTADOS Se obtuvieron 3 formulaciones para las pastas secas. Para establecer las proporciones en cada una de las formulaciones de pastas secas, se tomaron en cuenta criterios de evaluación tales como consistencia y manejabilidad de las masas obtenidas, dureza y flexibilidad de la pasta cruda, color, olor y sabor de pasta cruda y cocida. De las tres formulaciones desarrolladas, se eligió la PS3 debido a que presentó una mayor resistencia al tacto y al cocimiento, además de poseer un color agradable a la vista y un sabor marcado a chipilín, sin ser demasiado excesivo. A esta formulación se le practicaron las pruebas físicas antes y después del cocimiento. De las pruebas físicas durante el cocimiento se obtuvo que su tiempo de cocimiento fue de 16.66 minutos, el porcentaje de sedimentación fue de 8.33 y el índice de tolerancia al cocimiento fue de 30.37 minutos. De las pruebas después del cocimiento se tuvo que el porcentaje de grado de hinchamiento fue del 79.1% y la ganancia de peso fue de 407.17 g/100g. Respecto al análisis proximal, la pasta seca con chipilín presentó un valor energético de 370.61 Kcal. Para el caso de pasta fresca se obtuvieron 2 formulaciones, en las cuáles únicamente se tomó en cuenta para la selección de la fórmula final, el efecto de la cocción y sabor de la pasta cocida. De las los dos muestras, se eligió la PFR2, debido a que presentó mayor resistencia y manejabilidad en su manipulación durante el relleno y empacado del producto, lo que contribuyó para obtener una apariencia agradable y una buena presentación del producto final. La vida útil del producto en condiciones de refrigeración fue de 7 días, sin presentar alteraciones importantes en su composición y propiedades físico – químicas y su valor energético fue de 273.38 Kcal. ANÁLISIS De los análisis desarrollados, se tuvo que el tiempo de cocimiento para obtener una pasta firme cocida “al dente” fue de aproximadamente 16 minutos, tiempo que se encuentra dentro del promedio de los productos comerciales. El porcentaje de sedimentación se refiere las perdidas por cocción del almidón de la pasta, debido a que éste se hidrata y luego se solubiliza en el agua de cocción al no haber una matriz proteica suficientemente fuerte para retener el almidón gelatinizado (Bustos, Acosta y Román, 2007), por lo que se puede decir que la pasta con chipilín conserva en gran medida esta matriz proteica formada por el gluten de la sémola y puede ser reforzada por la proteína del chipilín. 162 | P á g i n a El índice de tolerancia al cocimiento fue de media hora, lo que nos indica que al someter a un cocimiento del doble de tiempo provoca la desintegración del producto, lo cual es indeseable para el consumo. La ganancia de peso estuvo dentro de lo esperado y los aumentos de volumen fueron moderados, en gran similitud con los pastas de trigo. Respecto al análisis proximal, la pasta seca con chipilín presentó un valor energético de 370.61 Kcal comparable a al valor reportado para la pasta con espinaca reportada por el Instituto de Nutrición de Centro América y Panamá (INCAP) en 2012 que fue de 372 Kcal, lo que presenta a nuestro producto como una alternativa importante para este tipo de alimentos. El valor energético de la pasta fresca fue de 273.38 Kcal, menor respecto al valor de la pasta seca, lo cuál se debe a la mayor presencia del chipilín en este producto, pues sustituye en gran medida el porcentaje de sémola de trigo la cual da el aporte de los carbohidratos en el producto, elevando el aporte energético. CONCLUSIONES El chipilín (Crotalaria longirostrata) es una hortaliza regional consumida de manera tradicional en platillos típicos chiapanecos. Con la generación de este proyecto se generaron dos tipos de pastas para sopa utilizando al chipilín como aditivo principal y además poseen características comparables a la de los productos comerciales en cuanto a sabor y características sensoriales; con esto se introduce al mercado consumidor, innovadoras alternativas en esta rama de productos. Además representa una gran oportunidad para fomentar el uso y aprovechamiento agroindustrial de esta hortaliza tan poco conocida, contribuyendo al desarrollo económico y social del sector agrario y a la generación de nuevos productos en la región. RECOMENDACIONES Para poder darle utilidad práctica a este trabajo se recomienda elaborar un proyecto integral cuyo objetivo primordial sea el establecimiento de una planta procesadora de sopas con chipilín a nivel semi-industrial en el Estado de Chiapas, en el cuál se desarrolle un análisis económico de costos y ganancias sobre la tecnología desarrollada, un estudio de factibilidad para determinar su zona de establecimiento; el diseño de la planta industrial, con equipo y especificaciones de requerimientos de servicios básicos; el diseño de la estructura administrativa para manejar la planta; entre otros puntos importantes. Como comentario final, es importante que se le dé el valor real a los proyectos de este tipo, ya que generan tecnologías aplicables y redes de beneficios entre las distintas personas que interactúan a su alrededor. 163 | P á g i n a REFERENCIAS 1. Bustos Vázquez, Z.G. Acosta Rueda, K. Román Gutiérrez, A.D (2007). Evaluación de la Calidad Culinaria y durante su Cocimiento de una Pasta Elaborada a partir de Sémola de Cebada y Trigo. IX Congreso de ciencia de los alimentos y v foro de ciencia y tecnología de alimentos.UANL 2. Callejo Gonzáles Ma. de Jesús.(2002).Industrias de cereales y derivados. 1ª edición. Editorial Mundi Prensa. Madrid, España. 3. Food and Agriculture Organization, FAO. (2011). Capítulo II: Hortalizas. Recuperado de http://www.rlc.fao.org/es/agricultura/produ/cdrom/contenido/libro11/cap2.htm el día 28 enero de 2011. 4. Hayes, G. D. (1992). Manual de datos para ingeniería de los alimentos, 1ª Edición. Zaragoza, España: Editorial Acribia S. A. 5. Hoseney C (1991) Principios de Ciencia y Tecnología de los Cereales. Acribia. Zaragoza, España. 6. INCAP. (2012). Tabla de composición de alimentos de Centroamérica. 2da Edición. Serviprensa S.A. Guatemala. 7. Instituto Nacional de Tecnología Industrial. (2008). Pastas frescas. Tallarines de sémola con huevo. 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Aguascalientes, Ags. México. * [email protected] CATEGORIA: Posgrado AREA: Desarrollo de nuevos productos RESUMEN El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar la microestructura y adherencia de los RC mediante un análisis de microscopía electrónica de barrido (SEM), de 3 formulaciones a partir de mucílago de linaza (ML) (70,80 y 100%), + quitosano (Q) (1%), + Tween 80 (0.1%), + glicerol (0.3%), y acido láctico (0.5%)L) aplicado a fresas mínimamente procesadas. Así como el análisis microbiológico del recubrimiento (FA) mucílago de linaza (100%),+ quitosano (1%)+ glicerol (0.3%)+ ácido láctico (0.5%). El recubrimiento comestible a base de mucílago de linaza y quitosano, forma una capa que cubre el fruto y demuestra su propiedad fungicida ya que presenta menor crecimiento donde tenemos un RC a diferencia del control y Blanco. Palabras clave: Recubrimiento comestible, Quitosano, Mucilago de linaza. ABSTRACT The present study aimed to evaluate the microstructure and adhesion of RC by analyzing scanning electron microscopy (SEM) of 3 formulations from flaxseed mucilage (ML) (70,80 and 100%), + chitosan (Q) (1%) + Tween 80 (0.1%) + glycerol (0.3%) and lactic acid (0.5%) L) applied to minimally processed strawberries. As the coating microbiological analysis (FA) flaxseed mucilage (100%) + chitosan (1%) + glycerol (0.3%) + lactic acid (0.5%).The edible coating based on linseed mucilage and chitosan, forming a layer which covers the fruit and demonstrating fungicidal property because it has less growth where we have edible coating unlike control and White. Keywords: Edible coating, chitosan, linseed mucilage. INTRODUCCION El uso de recubrimientos comestibles (RC) en alimentos altamente perecederos es una solución para proteger el deterioro de los mismos, ya que proporcionan una cubierta protectora adicional a frutas y hortalizas mínimamente procesadas cuyo impacto tecnológico es equivalente al de una atmósfera modificada, representando una alternativa a la conservación, además presentan la ventaja de poder aplicarse a todo tipo de frutas, inclusive aquellas que se consumen con piel, como la fresa. La fresa (Fragaria ananassa) es un fruto no climatérico altamente perecedero debido a su elevada tasa de respiración (Manning, 1993). Posee una epidermis muy delgada y frágil lo que hace ser muy susceptibles al ataque por microorganismos y al daño mecánico durante la cosecha, almacenamiento y comercialización (Sistrunk and Morris, 1985). 165 | P á g i n a El quitosano, es un polisacárido, natural, biodegradable y no tóxico que se obtiene principalmente de la parte externa de crustáceos. El quitosano se ha empleado como película comestible siendo una alternativa de conservación en cultivos agrícolas durante la fase postcosecha (Hernández-Muñoz et al., 2006). Los efectos antifúngicos del quitosano sobre diferentes fitopatógenos se han relacionado con el nivel de desacetilación de la molécula, la concentración aplicada y la masa molecular del compuesto, entre otros factores (Bautista-Baños et al., 2006, Hernández-Lauzardo, et al., 2008). Los retos técnicos involucrados en la elaboración de recubrimientos comestibles (RC) con propiedades funcionales incluyen la selección del tipo y concentración de los materiales usados en la formulación, las técnicas de preparación, durabilidad, adherencia, entre otras. El objetivo del presente trabajo fue determinar la microestructura y la adherencia de RC a base de mucílago de linaza y quitosano aplicados a fresa mínimamente procesada utilizando un análisis de microscopía electrónica de barrido (SEM). Y comparar su calidad sanitaria a través del almacenamiento como la efectividad microbiológica del mismo. MATERIALES Y METODOS. Materia prima Se utilizaron fresas (Fragaria ananassa) var. “Zamorana” adquiridas en el mercado local de venta por mayoreo en una bodega especializada del Centro Comercial Agropecuario, Ags., e inmediatamente se trasladaron al laboratorio para su análisis, selección y clasificación en base a la norma NMX-FF-062-2002, se escogieron las fresas que cumplían con las especificaciones de requerimientos mínimos y que se clasificaron en el grado de calidad Extra (México 1), posteriormente fueron enjuagadas e higienizadas con Nicon-PQ® 2 mL/20L durante 3 min., y se eliminó el exceso de agua-sanitizante por centrifugación. Formulación y aplicación del recubrimiento comestible Para la elaboración del recubrimiento se extrajo el mucílago de la semilla de linaza en una relación semilla-agua 2:10 a 40º C en baño maría durante 1 h con agitación a 1400 rpm (IKA RW20), posteriormente se separó la semilla de linaza del mucílago por filtración. Se formularon tres recubrimientos (Tabla 1) para la evaluación de microestructura y adhesión. Los recubrimientos comestibles fueron aplicados a las fresas mediante inmersión por 8 min., secado por convección a 10° C, se utilizaron fresas sin recubrir como testigo. 166 | P á g i n a Preparación de muestras y observación en microscopio electrónico. Para observar en el microscopio electrónico de barrido las muestras se acondicionaron deshidratándose gradualmente con etanol del 60 a 100%, posteriormente se fijaron y se llevaron a punto crítico donde son secadas interior y exteriormente con LCO2. Se recubrieron las muestras con una película de oro a 100 Angstroms mediante un nebulizador Dentonvacuum. Las muestras se analizaron en el microscopio electrónico (JEOLJFM-59LV) a 10kV, a 5, 10, 20 y 50μm. Análisis microbiológico de las muestras. Se formulo un recubrimiento FA para el análisis microbiológico mucílago de linaza 100%, + quitosano 1%+ glicerol 0.3%+ ácido láctico 0.5%. Se cubrieron las fresas almacenaron a 4°C. durante 15 días. Se utilizaron fresas sin recubrir como Control y fresas sin sanitizar directo del proveedor como Blanco. Para la realización de este análisis las muestras fueron preparadas como lo indica la Tabla 2. Posteriormente se almacenaron en bolsas Bolco® y almacenadas a 4 °C durante 15 días, monitoreándolas a los 0, 5, 10 y 15 días donde se realizaron las siguientes actividades: 1. Se abrieron las bolsas en condiciones estériles para tomar 10 gr de cada una de las muestras. 2. Se colocan en bolsas para Stomacher y se agrega 90 ml de agua peptona y se agita a una velocidad de 240 rpm durante 3 minutos. 3. Se toma un ml de la bolsa de stomacher dilución -1 para hacer las diluciones -2 y 4. Se siembra en agar PDA por el método de vaciado en placa. 5. Se toma lectura a las 72 hrs y/o 120 hrs. RESULTADOS Y DISCUSION. Microestructura. Por lo que podemos apreciar en las micrografías, los recubrimientos FA, FB y FC si se adhieren al fruto y la película comporta mayor homogeneidad que en muestras control (sin quitosano) esto debido a la buena interacción de los componentes ricos en polisacáridos como son el mucilago de linaza, el quitosano y el glicerol, utilizado como agente plastificante, que tiene como función incrementar la flexibilidad y favorecer la formación de una red estructural más homogénea. 167 | P á g i n a El análisis realizado por SEM (Figuras 1 a la 5) de las fresas con los diferentes RC (Figura 1 a 4) reveló que hubo una estrecha relación entre la morfología de la superficie. Las microfotografías muestran que la morfología, tamaño y distribución de los glóbulos de la fase hidrofóbica guardaron relación con la mezcla lipídica empleada. El espesor del los RC se midió en las microfotografías observándose que existe diferencia significativa en muestras con 0.1 y 0.3% de glicerol 2.63±0.16 y 1.89±0.21μm, respectivamente. 168 | P á g i n a A diferencia de los otros recubrimientos la de control no forma una película continua ya que se aprecia con huecos, no uniforme y no cubren por completo la fresa. Los resultados muestran que la superficie de las fresas con los recubrimientos (FA, FB y FC) presentan microestructuras diferentes a las fresas sin recubrir (Testigo), esto es atribuido a que el recubrimiento se encuentra presente en la superficie del fruto. Análisis microbiológico de las muestras. 169 | P á g i n a Al término del almacenamiento pudimos apreciar que las fresas que tienen recubrimiento (M1 y M2) es menor su crecimiento de hongos y levaduras comparadas con la Control, el Blanco y la infectada (M3) con Alternaria Alternata. La que solo tiene recubrimiento sin infección (M4), es la de mejor comportamiento como lo podemos apreciar en la figura 6. Esto debido a su actividad fungicida que actúa inhibiendo el crecimiento de los hongos, manifestándose esta inhibición en el crecimiento micelial y esporulación o en ambos estados de desarrollo. (El Ghaout y Arul, 1991). CONCLUSIONES El estudio de microscopia electrónica muestra que el recubrimiento a base de mucílago de linaza y quitosano se adhiere a las fresas por lo que la superficie presenta microestructuras diferentes a las fresas testigo no recubiertas. El recubrimiento comestible a base de mucílago de linaza y quitosano, forma una capa que cubre el fruto la cual podría alargar su vida útil. La aplicación de RC a base de quitosano demuestran su propiedad fungicida ya que presenta menor crecimiento donde tenemos un RC a diferencia del Control y Blanco y las Fresas infectadas con Alternaria Alternata la cual no prolifero en ningún lote con RC REFERENCIAS. Bautista-Baños, S., Hernández-Lauzardo, A. N., Velázquez-del Valle, M. G., Hernández-López, M., Ait Barka, E., Bósquez-Molina, E., & Wilson, C. L. Chitosan as a potential natural compound to control pre and postharvest diseases of horticultural commodities. Crop Protection 25: 108-118 (2006).. El Ghaout, A., Arul, J., Ponnampalam, R. y Boulet, M. 1991. Chitosan coating effect on storability and quality of fresh strawberry. Journal of Food Science, 56: 1618-1622. Hernández-Muñoz, P., E. Amenar, M. J. Ocio and R. Gavara. 2006. Effects of calcium dips and chitosan coatings on postharvest life strawberries (Fragaria x ananassa). Postharvest Biology and Technology. 39: 247-253. Manning, K. Soft Fruit. In: Seymour, G. B., Taylor, J. E., Tucker, G. A. (Eds.). Biochemistry of Fruit Ripening.Chapman and Hall, London, 347-377 (1993). NMX-FF-062-SCFI-2002 Productos alimenticios no industrializados para consumo humano-fruta fresca-fresa (fragaria x ananassa, dutch) especificaciones y método de prueba. Sistrunk, W. A. & Morris, J. R. Strawberry quality: influence of cultural and environmental factors. In: H. E. Patlee (Ed.). Evaluation of Quality ofFruit and Vegetables.AVI, Westport, Conn., 217-256 (1985). 170 | P á g i n a CARNE DE CORDEROS ALIMENTADOS CON ANTIOXIDANTES NATURALES EN LA DIETA Velázquez MM1, Hernández MO2*, López OS2, Pérez ES2, Hernández SD2 1 C.E. San Luis Potosí, INIFAP. 2Campus Montecillo, 3Campus Veracruz, Colegio de Postgraduados. *Responsable (Doctorado): [email protected] RESUMEN. El cambio de patrón en el consumo de alimentos por el ser humano, sugiere modificación en la dieta del animal para obtener productos de calidad e inocuos. El objetivo del estudio fue determinar las características fisicoquímicas de la carne de corderos alimentados con taninos condensados (TC) en la dieta. Se utilizaron muestras de carne de 36 corderos Pelibuey, distribuidos homogéneamente en cuatro grupos y alojados al azar a uno de cuatro tratamientos: dieta testigo, dieta con heno de Gliricidia sepium (TC 12.3 gr/kg MS), dieta con heno de Guazuma ulmifolia (TC 24.5 gr/kg MS), y dieta con extracto de quebracho (TC 20.0 gr/kg MS). Los corderos se sacrificaron a 40.3±4.2 kg de peso vivo. Se evalúo el color (L, a, b) y pH de la carne hasta 14 días post-mortem, y composición química. Los datos se analizaron con un modelo mixto, y prueba de Tukey. Los tratamientos no afectaron (P>0.05) color (a, b) ni pH. Tampoco proteína cruda (21.4%), lípidos totales (3.26%) ni cenizas (1.12%) en la carne. La luminosidad (L) en la carne fue menor (P<0.05) en los tratamientos con G. sepium y G. ulmifolia. La humedad de la carne (72.89%) fue mayor (P<0.05) cuando se incluyó extracto de Quebracho. El follaje de árboles forrajeros aun cuando contengan taninos, no afecta sustancialmente la composición fisicoquímica de la carne, considerándose por tanto, una alternativa en la alimentación de ovinos. Es pertinente más investigación, profundizando mayormente en el perfil de ácidos grasos y el papel de los taninos como antioxidantes naturales. Palabras clave: Corderos, Taninos, Arboles forrajeros, Inocuidad, Calidad. Referirse a la calidad de la carne para consumo humano, hoy día ha cobrado especial importancia, donde el color ocupa un lugar preferente entre los factores que definen la calidad y poder de decisión de compra por el consumidor. Por lo tanto, el objetivo general de la presente investigación fue determinar el efecto en las características fisicoquímicas de la carne de corderos Pelibuey alimentados con diferentes fuentes y concentraciones de taninos condensados en sus dietas. El objetivo particular, fue determinar la estabilidad del color de los taninos como fuentes de antioxidantes naturales. 171 | P á g i n a METODOLOGIA La presente investigación se realizó de marzo a diciembre de 2011 en el Laboratorio de Nutrición Animal del Programa de Ganadería del Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo, Estado de México, ubicado 19° 28’ 4.26” LN, 98° 53’ 42.18” LO, a una altitud de 2250 msnm (García, 2004). Las muestras de carne provinieron de 36 corderos Pelibuey de 5-6 meses de edad, con peso inicial de 23.74±4.57 kg, distribuidos en cuatro grupos homogéneos, de 9 animales cada uno. Los grupos fueron asignados al azar a uno de cuatro tratamientos, dieta testigo (DT), dieta con heno de Gliricidia sepium (DGS, taninos condensados 12.3 gr/kg MS), dieta con heno de Guazuma ulmifolia (DGU, taninos condensados 24.5 gr/kg MS), y dieta con extracto de quebracho (DEQ, taninos condensados 20.0 gr/kg MS). El aporte de taninos fue del heno de G. sepium y G. ulmifolia, con 6.15% y 18.4%, respectivamente, y extracto de quebracho INDUSOL ATO (Schinopsis balansae, Indunor S.A.C.F.I.F) contenía 76±1.5% de taninos. Las dietas se formularon considerando los requerimientos nutricionales recomendados por el NRC (2007). Obtención de las muestras de carne. Los corderos se sacrificaron a 47, 61 y 82 días del periodo experimental (tres animales de cada tratamiento en cada fecha), a un peso vivo de 40.27±4.24 kg, previo ayuno de 20 horas. Posteriormente las canales se guardaron en una cámara de refrigeración a 5°C. Transcurridas 24 horas del sacrificio, se tomó de cada animal aproximadamente 1 kg del Longissimus dorsi (entre la 11 y 12 vértebras torácicas y 2 y 3 vértebras lumbares), divididas en submuestras para su posterior análisis químico. Dichas muestras se guardaron individualmente en bolsas de polietileno (17 X 17 cm) selladas herméticamente a temperatura de 5°C. Variables medidas y análisis estadístico. Se midió color y pH en un filete de carne de aproximadamente 1 cm de grosor y 7 cm de diámetro, utilizando un colorímetro Konica Minolta CR-400 (Konica Minolta), y un potenciómetro portátil (Meat pH meter HI 99163, HANNA instruments), respectivamente. La medición fue al día 4 pos-mortem y posteriormente cada 24 horas hasta el día 14. El contenido de humedad, proteína, lípidos y cenizas se determinó de acuerdo a la AOAC (AOAC, 2005). Los datos de las variables obtenidos bajo un diseño de bloques completos al azar, se analizaron con un modelo de efectos mixtos, empleando SAS/STAT (2010) y el paquete estadístico R (versión 3.0.0, 2013); cuando se observaron diferencias estadísticas entre tratamientos se realizó una prueba de Tukey. Resultados y discusión Los tratamientos no afectaron (P>0.05) los atributos del color (con promedios de a= 12.46, b= 4.43,), pH (5.44), proteína cruda (21.40%), cenizas (1.12%), ni lípidos totales (3.26%) en la carne (Cuadro 1 y 2), excepto la luminosidad (L) de la carne, siendo menor (P<0.05) para los tratamientos con taninos de G. sepium y G. ulmifolia (Cuadro 2). En la carne con el tratamiento testigo, la humedad fue menor (P<0.05) (71.4%) que con el tratamiento con extracto de Quebracho (72.9%), pero similar a los tratamientos con G. sepium y G. ulmifolia (Cuadro 2). 172 | P á g i n a El comportamiento de la luminosidad (L) de la carne, sugiere efecto de los taninos, aunque el valor obtenido en el presente estudio es menor al tratamiento testigo, contrario al obtenido por Priolo et al. (2000), donde corderos Camisana se alimentaron con 2.5% taninos condensados de Ceratonia siliqua, produciendo mayor luminosidad de la carne (L*= 51.23), respecto a la carne de corderos que no consumieron taninos. Es posible que estas diferencias se deban a que dichos autores alimentaron a los corderos aproximadamente 55 días con dietas enriquecidas con taninos y utilizaron corderos más jóvenes. Respecto a intensidad de rojo (a) y amarillo (b), los resultados en el presente estudio, coinciden con los obtenidos por Priolo et al. (2000). Cuadro 1. Atributos del color en carne de corderos alimentados con diferentes fuentes y concentraciones de taninos condensados en su dieta de finalización. Taninos, gr/kg. 0.0 12.3 24.5 20.0 DT DGS DGU DEQ L 34.83 33.03 32.82 a b Variable Valor de P para los contrastes: DT vs. DGS DT vs. DGU DT vs. DEQ DGS vs. DGU DGS vs. DEQ DGU vs. DEQ 34.03 0.68 0.04 0.02 0.65 0.99 0.47 0.29 12.34 12.75 12.33 12.44 0.39 0.70 1 0.99 0.69 0.84 0.99 4.86 4.76 0.38 0.12 0.15 0.99 1.00 0.21 0.25 4.02 4.06 EE DT= dieta testigo; DGS= dieta con heno de Gliricidia sepium (taninos 12.3 gr/kg MS); DGU= dieta con heno de Guazuma ulmifolia (taninos 24.5 gr/kg MS); DEQ= dieta con extractos de Quebracho (taninos 20.0 gr/kg MS); EE= error estándar. Atributos del color: L= luminosidad; a= tonalidad de rojo; b= tonalidad de amarillo. Cuadro 2. Características fisicoquímicas de la carne de corderos alimentados con dietas enriquecidas con taninos de arbóreas. Variables pH, promedio Humedad, % Proteína, %BH. Lípidos, %BH. Cenizas, %MS. DT 5.48 71.39a 21.77 3.79 1.108 Tratamientos DGS DGU 5.43 5.40 ab 72.14 72.64ab 21.16 21.09 3.12 3.29 1.152 1.099 DEQ 5.45 72.90b 21.59 2.85 1.120 EEM 0.055 0.336 0.280 0.282 0.015 Valor de P 0.759 0.021 0.277 0.152 0.112 DT= dieta testigo; DGS= dieta con heno de Gliricidia sepium (taninos 12.3 gr/kg MS); DGU= dieta con heno de Guazuma ulmifolia (taninos 24.5 gr/kg MS); DEQ= dieta con extractos de Quebracho (taninos 20.0 gr/kg MS). a, b: medias con literales distintas en cada fila son diferentes (P<0.05). EEM= error estándar de la media; BH= base húmeda; MS= materia seca. El pH de la carne no fue afectado por los tratamientos, y los valores están en el rango normal, con promedio de 5.44, similar al obtenido por Hernández (2011) y HernándezCruz et al. (2009) en corderos de pelo. Este resultado pudo deberse a que los corderos mantuvieron una buena nutrición (Bray et al., 1989), además que no fueron estresados. 173 | P á g i n a El contenido de humedad en la carne fue afectado por las dietas, siendo mayor la humedad en el tratamiento con extractos de Quebracho (72.9) respecto al testigo, y similar en los tratamientos con dietas que contenían taninos de heno de G. sepium y G. ulmifolia (en promedio 72.4%). Los resultados similares en la carne del tratamiento con la dieta testigo respecto a las dietas con heno de G. sepium y G. ulmifolia, pudieron deberse a que los taninos estaban contenidos en el forraje y no como extractos. Lo anterior es importante mencionarlo, debido a que la diferencia del tratamiento testigo con el tratamiento con extracto de quebracho, pudo deberse a que el extracto de quebracho es un polvo, que pudo provocar que la dieta tuviera palatabilidad más seca y propiciara que los animales consumieran más agua y se mantuvieran más hidratados. Los resultados promedios de proteína son similares a los obtenidos (20.9%, 21.2 y 20.4%) por Hernández (2011), Reséndiz (2011) y Hernández-Cruz et al. (2009) cuando alimentaron corderos de pelo, respectivamente; pero mayores al promedio obtenido (16.9%) por Peraza-Mercado et al. (2006) en corderos Pelibuey. La diferencia de 4.5% de contenido de proteína en la carne obtenida por Peraza-Mercado et al. (2006) con respecto a nuestros resultados, probablemente difiere por la edad de sacrificio de los animales y su dieta (Hernández, 2011). El contenido promedio de lípidos (3.26%) en la carne de corderos Pelibuey encontrado en el presente estudio fue similar al promedio (3.22%) obtenido por Peraza-Mercado et al. (2006), para el mismo tipo de animales; pero menor al obtenido (4.6% en base húmeda) por Hernández (2011) en Pelibuey x Katahdin. Es importante mencionar que el contenido de lípidos fue similar entre las diferentes fuentes y concentraciones de taninos en la dieta, lo cual es importante debido a que los lípidos presentes en la carne están relacionados con algunas características como la jugosidad, terneza y aroma (Almela et al., 2009). CONCLUSIONES La composición fisicoquímica de la carne de ovinos Pelibuey, específicamente la luminosidad y la humedad en la carne se altera por la fuente y concentración de taninos en las dietas aquí utilizadas, sin embargo, los resultados están en el rango normal para carne de ovinos. Ante tal consideración, la dieta de los ovinos puede adecuarse para incluir forrajes de arbustivas y arbóreas que contienen taninos, en función del precio y la disponibilidad de los ingredientes en la región de producción. AGRADECIMIENTOS Al CONACyT, por la beca otorgada para los estudios de Doctorado en Ciencias del primer autor, al Fideicomiso 2009-167304 y las LPI-2 (Agroecosistemas sustentables) y LPI-7 (Inocuidad, Calidad de Alimentos y Bioseguridad), del Colegio de Postgraduados, por el financiamiento parcial para llevar a cabo este estudio. LITERATURA CITADA Almela, E., Jordán, M. J., Martínez, C., Sotomayor, J. A., Bedia, M. y Bañon, S., 2009. El flavor de la carne cocinada de cordero. EUROCARNE. 178: 01-12. AOAC, 2005. Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL. 18th Ed., AOAC INTERNATIONAL, Gaithersburg, MD, USA. 174 | P á g i n a Bray, A.R., Graafhuis, A.E., Chrystall, B.B., 1989. The cumulative effect of nutritional, shearing and preslaughter washing stresses on the quality of lamb meat. Meat Sci., 25:59-67. García, E. 2004. Modificaciones al sistema de clasificación climática de Köppen. Universidad Nacional Autónoma de México, Instituto de Geografía. México, pp. 91. Hernández, C.L., 2011. Calidad de la canal y carne de corderos complementados con aceites y rastrojo de maíz. Tesis de Doctorado en Ciencias. Colegio de Postgraduados. Montecillo, Texcoco. Edo. de México. México. Hernández-Cruz, L., Ramírez-Bribiesca, J.E.,Guerrero-Legarreta, M.I., Hernández-Mendo, O., Crosby-Galvan, M.M., Hernández-Calva, L.M., 2009. Effects of crossbreeding on carcass and meat quality of Mexican lambs. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec., 61: 475483. NRC, 2007. Nutrients Requirements of Small Ruminants: Sheep, Goats, Cervids and New World Camelids. The National Research Council. The National Academies Press. Washington D.C. Peraza-Mercado, G., Jaramillo-López, E., Chávez del Hierro, S., Alarcón-Rojo, A.D., 2006. Diet effect upon chemical composition of Pelibuey and Polipay x Rambouillet meat. Am-Euras. J. Sci. Res., 1 (1): 08-11. Priolo, A., Waghorn, G. C., Lanza, M., Biondi, L., Pennisi, P., 2000. Polyethylene glycol as a means for reducing the impact of condensed tannins in carob pulp: effects on lamb growth performance and meat quality. J. Anim. Sci., 78: 810-816. R Development Core Team (2013), Version 3.0.0. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria. ISBN 3-900051-07-0, URL http://www.R-project.org/. Reséndiz, C.V. 2011. Finalización de borregos Pelibuey utilizando dietas con diferentes niveles de alfalfa: respuesta en producción y calidad de la carne. Tesis de M en C. Colegio de Postgraduados, Montecillo, Texcoco. Edo. de México. SAS/STAT. 2010. SAS systems for windows. Version 9.3. SAS Institute Inc., Campus Drive, Cary, North Carolina 27513. 175 | P á g i n a SÍNTESIS Y CARACTERIZACIÓN DE CARBOXIMETILCELULOSA DE RESIDUOS LIGNOCELULÓSICOS DE AVENA Y CEBADA Elihú Josafat Pelcastre-García, Adriana Rojas–León, Alma Delia Román– Gutiérrez*. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Carretera PachucaTulancingo Km 4.5 Ciudad del conocimiento, Mineral de la Reforma, Hidalgo. México C.P. 42184 Tel: (01)771 7172000 Ext. 2514 (* [email protected] ) Categoría: Licenciatura OBJETIVO GENERAL: Obtener carboximetilcelulosa sódica a partir de los subproductos agrícolas de cebada y avena mediante el método Druvacell con su posterior caracterización para determinar sus aplicaciones potenciales en los diferentes sectores de la industria alimenticia. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: Determinar las propiedades físicas y químicas de los subproductos agrícolas a utilizar como materia prima por medio de técnicas estandarizadas y metodologías establecidas para conocer sus características intrínsecas y su influencia en la elaboración de carboximetilcelulosa. Obtener de carboximetilcelulosa sódica mediante el método Druvacell adaptado a escala de laboratorio a partir de las muestras analizadas y evaluar rendimientos. Comparar y caracterizar de la Carboximetilcelulosa obtenida a partir de las muestras de subproductos agrícolas mediante pruebas de pureza, grado de sustitución y solubilidad para evaluar su calidad y así determinar su aplicación en la industria alimenticia. RESUMEN: La alta demanda en la producción de cereales como la avena para el consumo humano y de la cebada en la industria cervecera, ambos en el estado de Hidalgo, México, generan anualmente grandes cantidades de subproductos lignocelulósicos compuestos principalmente por celulosa, hemicelulosa y lignina, de las cuales a partir de la fracción de celulosa se pueden obtener gran variedad de derivados con importancia industrial, como es el caso de la carboximetilcelulosa (CMC), la cual es ampliamente usada como aditivo en la industria alimentaria. En este trabajo los subproductos obtenidos de las cosechas antes mencionadas fueron sometidos a caracterización física, análisis proximal y de contenido lignocelulósico para poder así obtener pasta de celulosa a través de un pretratamiento térmico-alcalino-oxidativo, obteniéndose rendimientos de pulpa de celulosa desde 21.8% en muestras de cebada y de cascarilla de avena, hasta 46.4% en muestras del residuo del trillado de la avena. Posteriormente se trató la pulpa de celulosa obtenida mediante la metodología estandarizada para lograr su transformación en carboximetilcelulosa, obteniendo hasta ahora rendimientos máximos de CMC de 41% en subproductos provenientes del residuo del trillado de avena. 176 | P á g i n a El producto obtenido fue caracterizado mediante pruebas de pureza, grado de sustitución y de solubilidad, los resultados mostraron que el grado de sustitución (GS) fue de 0.426 a 0.513 y los porcentajes de pureza fueron de 95.2–98.9%. Palabras claves: celulosa, holocelulosa, carboximetilación, aditivos alimentarios METODOLOGÍA Obtención de la muestra: Se utilizaron como muestras de estudio residuos del trillado de los cereales (RETRICE) y grano rechazado (que no cumple con normas alimenticias y de comercialización) de avena y cebada, obtenidos en el municipio de Apan, Hidalgo cosechados en el año 2010 obtenido mediante un muestreo aleatorio simple en cada uno de los sacos con los residuos anteriormente descritos. Microestructura: Se utilizó microscopio electrónico de barrido (MEB, marca JOEL, modelo JSM-G-3000) a un voltaje de 20 KV, 18 mm. Las fotografías se tomaron por triplicado a diferentes amplitudes: 100X, 500X, 1000X, 1500X, 2000X. Análisis proximal: Humedad (44-15A), Fibra: se determinó mediante el método establecido en la norma mexicana NMX-F-090-S-1978. Contenido de holocelulosa:La composición lignocelulósica se determinó por normas TAPPI (1988): Extraíbles (264 om-88), Holocelulosa (203 om-88) y Lignina (220 om-88). Pretratamiento (térmico-alcalino-oxidativo) para obtención de pasta de celulosa: Descrito por Juárez et al., 2010. Obtención de carboximetilcelulosa: Variante adaptada del proceso Druvacell® (Gebrüder Lödige Maschinenbau, GmbH, Paderborn, Germany) a escala de laboratorio (Juárez Barrientos, 2011) Caracterización de la cmc obtenida:Grado de sustitución según el procedimiento establecido en el estándar ASTM D1439-03 (ASTM, 2003). Pureza de la cmc obtenida mediante la metodología descrita en el estándar ASTM D143972 (ASTM, 1973). Solubilidad de la cmc obtenida según Serrano, 2007. RESULTADOS Y DISCUSIONES ANÁLISIS FÍSICO PARA MUESTRAS DE RETRICE Y GRANO: Posterior al acondicionamiento de la muestra se realizaron los análisis de tamaño de partícula y de micro estructura por MEB para las muestras de subproductos de avena y cebada. 177 | P á g i n a Microscopía electrónica de barrido a b c d Figura 1. a) Micrografía del grano de cebada; b). Micrografías del grano de avena; c) Micrografías de RETRICE de avena d).; e). Micrografías de RETRICE de cebada. Las muestras con mayor contenido de celulosa son las de RETRICE de avena y cebada, ya que se observan claramente las fibras de celulosa en forma tubular. Mientras que en las muestras de grano de avena se puede observar presencia de gránulos de almidón, el cual no es útil en el proceso de obtención de CMC. De las muestras de grano solo su gluma es útil en la conversión a CMC ya que es la parte del grano con el mayor contenido de celulosa. Por lo tanto las muestras más viables en el proceso son las de RETRICE de avena y cebada. Análisis proximal: Los resultados obtenidos muestran que el grano de avena y el RETRICE de cebada muestran una humedad semejante (7.62% y 7.29%). La muestra con mayor humedad fue la del grano de cebada (8.54%); y la de menor humedad fue el RETRICE de avena (5.57%). En conclusión, los resultados de este análisis demuestran que los subproductos agrícolas utilizados en este trabajo no presentarán problemas en su almacenamiento por causa de un contenido de humedad elevado, lo que es favorable durante el procesamiento de las muestras para la obtención de CMC si se requieren largos periodos de almacenamiento.En cuanto al contenido de carbohidratos se observa que la muestra con mayor contenido de fibra fue el RETRICE de avena (16.97%), mientras que la muestra con menor cantidad de fibra es el grano de avena (8.34 %). Con lo que se concluye que las muestras analizadas, a pesar de que tienen un contenido de fibra muy bajo, son viables para la obtención de carboximetilcelulosa ya que el análisis de contenido de celulosa es favorable para todas las muestras de subproductos agrícolas. Determinación de contenido de celulosa: En este análisis se observó que la muestra con la mayor cantidad de celulosa es la de RETRICE de avena con 35.72%, seguida del grano de avena con 32.86% y la de menor cantidad es el RETRICE de cebada (21.8%). Esto es debido a que el grano de de cebada tiene una cantidad mínima o nula de gluma y mayormente de endospermo. 178 | P á g i n a Los datos anteriores son importantes dado que el contenido de celulosa está relacionado con la obtención de carboximetilcelulosa, la cual es un éter derivado de la celulosa (Barba, 2002). De acuerdo a todo lo anterior se puede concluir que las muestras seleccionadas y caracterizadas contienen la suficiente cantidad de celulosa para poder obtener altos rendimientos de carboximetilcelulosa, especialmente las muestras de grano y RETRICE de avena. Pretratamiento (térmico-alcalino-oxidativo) para obtención de pasta de celulosa: Los rendimientos obtenidos desde el tratamiento en autoclave con H 2O, con NaOH 2M y finalmente con H2O2 6% tienen variaciones entre valores desde 21.8g hasta 46.4g. Con los resultados obtenidos se puede concluir que se obtuvieron menores cantidades de pasta de celulosa a partir de los subproductos agrícolas que en las muestras reportadas por otros autores debido a la gran cantidad de compuestos no celulósicos (almidón principalmente) presentes en los subproductos agrícolas estudiados que se terminaron desechando en el proceso, reduciendo así los rendimientos finales. OBTENCIÓN DE CARBOXIMETILCELULOSA: Rendimiento:El rendimiento final durante el proceso de obtención de CMC indica que la mayor cantidad obtenida de este compuesto se obtuvo del RETRICE de Avena con 40.89% y el menor cantidad fue de 15.57% para la muestra de RETRICE de cebada, con lo cual se concluyó que el mayor rendimiento de CMC se puede obtener a partir del RETRICE de avena (46.4%); mientras que de las demás muestras solo se obtuvieron rendimientos de 15.57-22.42%. Aunque el rendimiento de la muestra de RETRICE de avena es alto, en comparación con las demás muestras tiene el menor grado de pureza (95.19%), y el mayor grado de sustitución (0.513). Caracterización de la cmc obtenida Grado de sustitución: En la determinación del grado de sustitución en las muestras de carboximetilcelulosa obtenidas de los residuos agrícolas de cereales estudiados. Se observaron valores entre 0.426 y 0.513, lo cual significa que estas son completamente solubles en agua. De acuerdo a los resultados se puede concluir que el grado de sustitución está influenciado por el substrato de partida, ya que las condiciones y cantidad de reactivos en la reacción de carboximetilación fue siempre la misma, coincidiendo con lo encontrado por Rodríguez (2009). Pureza de las muestras de cmc obtenidas: Las muestras de RETRICE de cebada, grano de avena y de cebada tienen una pureza entre 98.19 y 98.86%, superando el requerido para CMC de grado comercial (98 %) pero no igualando el valor mínimo requerido para una CMC de grado alimenticio de 99.5%. 179 | P á g i n a Por lo tanto y de acuerdo a la clasificación de grados de pureza de CMC de Heinze (2005), las CMC obtenidas son clasificadas como de grado purificado, por lo cual tienen un uso potencial en las industrias de recubrimiento de papel, textiles, cerámica, vidrio y aceite de lodos de perforación. En cambio la CMC de RETRICE de avena al tener una pureza del 95.2% se le clasifica en el grado de CMC semi – purificada, por lo cual solo tiene aplicaciones en la industria del petróleo y de gas de lodos de perforación. Solubilidad de la cmc obtenida: Todas las muestras de CMC mostraron ser solubles en H2O e insolubles en metanol, etanol, éter y acetona, lo cual es característico de los éteres de celulosa, Lo que asegura que la materia obtenida si corresponde a la carboximetilcelulosa. CONCLUSIONES Se obtuvo Carboximetilcelulosa mediante el método Duvracel con características semejantes a las de las CMC comerciales a partir de los residuos agrícolas de cereales analizados (grano de avena y cebada; RETRICE de avena y de cebada) con rendimientos de 40.89% para la muestra de RETRICE de Avena; la muestra del grano de avena tuvo un rendimiento de CMC de 22.42%; la muestra de grano de cebada presentó un rendimiento similar (22.22%), mientras que la muestra con el menor rendimiento fue la de RETRICE de cebada (15.57%). Se encontró que el contenido de α- celulosa es mayor en muestras de grano y RETRICE de avena (33% y 36% respectivamente) comparado con muestras de grano y RETRICE de cebada (27% y 22% respectivamente), por lo cual se obtiene mayor rendimiento en la obtención de CMC, sin embargo la pureza es menor en RETRICE de Avena modificando su alternativa de uso. Mediante un pretratamiento térmico-alcalino-oxidativo TCF se obtuvo pasta de celulosa a partir de residuos lignocelulósicos no madereros con rendimientos desde 21.8% hasta 46.4%. Las muestras obtenidas de los residuos agrícolas de cereales se encuentran entre 0.426 y 0.513 GS, por lo tanto no han alcanzado el GS necesario para considerarse aptas para usos en la industria alimenticia (0.65-0.9 GS), pero si para otros usos comerciales como detergentes, en la industria papelera, en pesticidas para agroquímicos, para adhesivos, cosméticos y pinturas de base acuosa. De acuerdo a la clasificación de grados de pureza de CMC de Heinze (2005), las CMC obtenidas son clasificadas como de grado purificado, por lo cual tienen un uso potencial en las industrias de recubrimiento de papel, textiles, cerámica, vidrio y aceite de lodos de perforación. Por otro lado la CMC de RETRICE de avena al tener una pureza del 95.2% se le clasifica en el grado de CMC semi – purificada, por lo cual solo tiene aplicaciones en la industria del petróleo y de gas de lodos de perforación. 180 | P á g i n a Hasta ahora ninguna muestra ha superado el grado de pureza requerido para ser utilizado en la industria alimenticia o farmacéutica, en las cuales se requieren valores de purezas por encima del 99.5%. Bibliografía: ASTM. 1973. American Society for Testing and Materials (ASTM International). Methods for testing carboxymethyl cellulose. Standard ASTM D1439-72. ASTM. 2003. American Society for Testing and Materials (ASTM International). Standard test methods for sodium carboxymethylcellulose. Standard ASTM D1439-03. Barba-Pacheco, Claudia. (2002). Síntesis de carboximetilcelulosa a partir de pastas de plantas anuales. Tesis Doctoral. Departament d'Enginyeria Química, Escola Técnica Superior d'Enginyeria Química, Universitad Ruvira i Virgili. Tarragona, España. Juárez-Barrientos, J.M.; Ramírez Rivera, E.; Ramírez-Figueroa, E.; Ramón Canul, L. y Rodríguez Miranda, J. (2011). Aplicación y comparación de pretratamientos totalmente libres de cloro en residuos de piña (Ananas comosus) y zapote mamey (Pouteria sapota) para la obtención de carboximetilcelulosa. Revista Venezolana de Ciencia y Tecnología de Alimentos. 2 (1): 108-126. Enero-Junio, 2011 http://www.rvcta.org ISSN: 2218-4384 (versión en línea) Juárez-Barrientos, J.M.; Ramírez-Figueroa, E.; Herman-Lara, E.; NogueiraTerrones, H. and Ramírez- Rivera, E. (2010). Properties of carboxymethyl cellulose (CMC) obtained from pineapple (Ananas comosus) and mamey sapote peel (Pouteria sapota) mixes. In Innovations in food science and food biotechnology in developing countries. (pp. 281-290). México: Asociación Mexicana de Ciencia de los Alimentos, A. C. ISBN: 978607-95455-0-5. Serrano, J.C. 2007. Obtención y caracterización de carboximetilcelulosa (CMC) a partir del bagazo de piña. Tesis de Maestría. Instituto Tecnológico de Tuxtepec, Oaxaca, México. Rodriguez-Lobatón, J. 2009. Síntesis y caracterización de geles de carboximetilcelulosa obtenidos del pericarpio del maíz, y sus potenciales aplicaciones. Escuela de ciencias departamento de química. Universidad de oriente, Núcleo de sucre. Venezuela. Technical Association of the Pulp and Paper Industry, TAPPI 264 om 88, Preparación de Madera para análisis químico, Traducción al español realizada por DMCyP, 1988, 9. Technical Association of the Pulp and Paper Industry, TAPPI 203 om-88, alfa, beta y gamma celulosa en pulpa, Traducción al español realizada por DMCyP, 1993, 11. Technical Association of the Pulp and Paper Industry, TAPPI 220 om-88, Lignina de Madera y pulpa insoluble en ácido, Traducción al español realizada por DMCyP, 1988, 3. 181 | P á g i n a INCIDENCIA DE ENFERMEDADES GASTROINTESTINALES EN ALUMNOS DE LA DICIVA POR MALAS PRÁCTICAS DE HIGIENE EN LOS EXPENDIOS DE COMIDA Márquez García R. I. 1, Basurto Cadena M. G. L. 1 *, Vázquez Arista M. 1 1 Universidad de Guanajuato, División de Ciencias de la Vida, Departamento de Alimentos, Carretera Irapuato-Silao, Km. 9, C.P. 36500, Irapuato, Guanajuato, México. * [email protected]. RESUMEN La venta de alimentos fuera de la División de Ciencias de la Vida (DICIVA) de la Universidad de Guanajuato ha venido en aumento a raíz de que sus cafeterías no se han establecido regularmente, debido principalmente a dificultades administrativas, y por el aumento de alumnos por la apertura de nuevos programas académicos. Las industrias de los alimentos de venta callejera, generalmente no están reguladas y casi en clandestinidad, tienden a no observar normas adecuadas de higiene y a plantear considerables problemas de salud pública. Por lo tanto, los objetivos de este trabajo fueron establecer los problemas que se han presentado entre el alumnado de la DICIVA, a través de una encuesta, con el consumo de alimentos que se expenden y verificar la calidad sanitaria de estos alimentos por medio de un análisis microbiológico. La encuesta puso de manifiesto, además de las preferencias de los estudiantes en el consumo de alimentos, que aproximadamente el 50% de ellos sufren diferentes síntomas de enfermedades gastrointestinales y los análisis de microorganismos en los alimentos confirmaron que los resultados de la encuesta no están lejos de la realidad, al presentar valores fuera de los límites establecidos por la NOM-093-SSA1-1994. Palabras clave: Venta callejera de alimentos, enfermedades gastrointestinales, calidad sanitaria de alimentos 182 | P á g i n a INTRODUCCIÓN La División de Ciencias de la Vida (DICIVA) tiene dos cafeterías, las cuales no han funcionado en forma regular debido, básicamente, a problemas administrativos. Con la formación de nuevos Programas Académicos en la DICIVA se ha incrementado la matrícula de estudiantes, los cuales tienen que satisfacer sus necesidades nutricionales con expendios establecidos alrededor de las instalaciones académicas. En México y en general en Latinoamérica estos expendios surgen por múltiples causas como son el deterioro de las condiciones de vida en el campo y la consecuente migración, al subempleo y desempleo, y finalmente la ausencia de establecimientos que sirvan alimentos a precios razonables en centros de trabajo (1, 2). Si bien, la venta de alimentos en la vía pública, por lo general no regulada y casi clandestina, alivia un poco los problemas económicos de quienes la practican; sin embargo, desde el punto de vista sanitario, es controversial porque las deficientes prácticas de higiene en la preparación de esos alimentos tiende a presentar riesgos considerables para la salud, los cuales han ocasionado epidemias de acuerdo a organismos Internacionales como la Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO) (3 y 4). Por lo anterior, se realizó una encuesta para determinar si los estudiantes estaban conscientes del tipo de problemas que acarrea el consumo de alimentos en los expendios que tienen a la mano y determinar la calidad sanitaria de los mismos a través de análisis microbiológicos. MATERIALES Y MÉTODOS MATERIALES Los materiales que se analizaron en este trabajo se aprecian en la Tabla 1. Tabla 1. Alimento analizado Expendio V1 V2 V3 V4 V5 V6 V7 V8 V9 Alimento Burrito (tinga de pollo, tortilla de harina, jitomate, lechuga) Torta (chorizo,pan, aguacate, jitomate) Quesadilla (tortilla, queso, pastor) Taco (asada, tortilla, cebolla, cilantro) Churros Quesadilla (guisado, tortilla de harina) Quesadilla de aceite ( queso asadero, nopales, carne de puerco) Hot-dog (salchicha, pan, cebolla, jitomate) Quesadilla (pollo, tortilla de harina) 183 | P á g i n a MÉTODOS Encuesta. Con el fin de conocer las condiciones sanitarias de los expendios de comida, se invitó a 143 estudiantes de los 1121 inscritos en la DICIVA a contestar una encuesta que cubría las siguientes preguntas: 1. ¿Con que frecuencia consume alimentos preparados en el rancho “El Copal”? 2. ¿Qué lugar es el que más frecuenta para consumir sus alimentos? 3. ¿Cuál de los siguientes productos consume más? 4. ¿En qué medida los siguientes aspectos son importantes al seleccionar el lugar donde compra sus alimentos? 5. ¿Ha presentado alguno de los siguientes síntomas al consumir estos alimentos? 6. Si la respuesta anterior fue afirmativa, ¿Recuerda en qué lugar consumió sus alimentos el día que presento dichos síntomas? 7. ¿Con que frecuencia los ha presentado? 8. ¿Se siente usted seguro al consumir estos alimentos? Cuenta de Bacterias Mesófilas Aerobias. De acuerdo a la NOM-092-SAA1-1994 para Bienes y Servicios, se siguió el siguiente procedimiento: 1. Se tomaron 10 g de muestra y se colocaron en un mortero con un poco de agua peptonada, se molió hasta obtener una pasta y se completó con 90 ml de agua peptonada previamente esterilizada. 2. Se realizaron diluciones de 10-1 a 10-3. 3. Se sembró cada dilución, por duplicado, en Agar Cuenta Estándar por la técnica vertido en placa. 4. Se incubaron a 35±2 °C durante 24 h. 5. Se observaron las colonias desarrolladas, se realizó el conteo y se calcularon las Unidades Formadoras de Colonias (UFC). Cuenta de Coliformes Totales y Fecales. De acuerdo a la NOM-112-SAA1-1994 para Bienes y Servicios, se siguió el siguiente procedimiento: 1. Se inocularon, de las diluciones 10-1 a 10-3 preparadas en la determinación anterior, 1 ml en tres tubos por cada dilución con 9 ml de caldo lauril sulfato y tubos de Durham. 2. Se incubaron los nueve tubos a 35±2 °C por 24 h y se observó si hay presencia de gas en los tubos de Durham, producto de la fermentación del caldo y se determinó el Número Más Probable (NMP) de organismos coliformes totales. 3. Se agitaron los tubos con caldo lauril sulfato fermentado y se transfirieron 2 a 3 asadas de estos tubos a tubos con caldo bilis verde brillante con tubos de Durham. 4. Se incubaron los tubos a 48±2 °C de 24 a 48 h y se observó si hay presencia de gas en los tubos de Durham, producto de la fermentación del caldo y se determinó el Número Más Probable (NMP) de organismos coliformes fecales. 184 | P á g i n a Cuenta de Hongos y levaduras. De acuerdo a la NOM-111-SAA1-1994 para Bienes y Servicios, se siguió el siguiente procedimiento: 1. De las diluciones 10-1 a 10-3 preparadas en la determinación de organismos aerobios se sembraron, por duplicado, en Papa dextrosa Agar acidificado por la técnica vertido en placa. Dos cajas para hongos y dos para levaduras. 2. Las cajas para la determinación de hongos se incubaron a 28±2 °C durante 4-5 días. 3. Las cajas para la determinación de levaduras se incubaron a 35±2 °C por 24 h. 4. Se observaron las colonias desarrolladas, se realizó el conteo y se calcularon las Unidades Formadoras de Colonias (UFC). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Encuesta. Las Figuras 1, 2, 3 y 4 muestran los resultados a las preguntas realizadas a los estudiantes en la encuesta. Fig. 1. Aspectos importantes para seleccionar un lugar para comer 140 120 100 80 60 40 20 0 Ubicación Muy importante 74 Hora servicio 65 Variedad Precio 91 Higiene local 118 Higiene personal 129 98 Algo importante 59 69 45 48 24 13 Para nada importante 10 9 0 4 1 1 185 | P á g i n a Fig. 2. Síntomas 45 Número de personas 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Series1 fiebre diarrea escalofrios 1 33 6 dolor de cabeza 10 dolor estomacal 42 vomito 3 Fig. 3. Frecuencia de los síntomas 54% 80 Número de personas 70 44% 60 50 40 30 20 2% 10 0 Series1 1-2 veces 62 3-4 veces 3 0% mas de 5 veces 0 ninguna vez 78 186 | P á g i n a Fig. 4. Seguridad al consumir alimentos 45% 70 36% 60 50 19% 40 30 20 10 0 Series1 si 52 no 63 a veces 28 De acuerdo a los resultados de las Figuras 1, 2, 3 y 4, obtenidos de la encuesta realizada a los alumnos de la DICIVA, éstos para seleccionar el lugar donde consumirán sus alimentos dan primordial importancia a la higiene del lugar, así como a la higiene del personal que elabora los alimentos. Los otros aspectos que determinan la selección son el precio de los alimentos y la variedad de los mismos. Sin embargo, aproximadamente el 50% de los estudiantes se enferman presentando principalmente dolor estomacal, seguido de diarrea. Por lo que, el 45% de ellos no sienten seguridad de consumir los alimentos que les ofrecen los diferentes establecimientos. Cuenta de Microorganismos. La Figura 5 presenta la presencia de organismos mesofílicos aerobios en los alimentos analizados, mientras que las Figuras 6 y 7 se muestra el contenido de coliformes totales y fecales respectivamente. 187 | P á g i n a Fig. 5. Bacterias Mesofílicas Aerobias 700000 Fuera de norma Dentro de norma 600000 500000 400000 300000 200000 Permitido por la NOM 150,000 100000 0 V1 V2 V3 V4 V5 V6 V7 V8 V9 La presencia de organismos mesofílicos aerobios en los alimentos preparados (Figura 5) indica malas condiciones higiénicas durante la preparación de éstos y de acuerdo a los resultados, aproximadamente el 44.4 % de los establecimientos donde los estudiantes de la DICIVA consumen sus alimentos presentan valores superiores a los permitidos por la NOM-093-SSA1-1994. 188 | P á g i n a Fig. 6. Bacterias Coliformes Totales 80000 60000 Fuera 40000 Permitido por la NOM= Menos de 100 20000 0 V1 V2 V3 V4 V5 V6 V7 V8 V9 Fig. 7. Bacterias Coliformes Fecales 60 50 40 Fuera 30 20 10 0 V1 V2 V3 V4 V5 V6 V7 V8 V9 Permitido por la NOM=10/g En cuanto a la presencia de organismos coliformes en los alimentos, indica la falta de higiene del personal que los prepara y como se aprecia en las Figuras 6, el 100% de los coliformes totales exceden el límite de la NOM-093-SSA1-1994, mientras que en la Figura 7, el 88.8% de los coliformes fecales, también están por arriba de dicha NOM. 189 | P á g i n a CONCLUSIONES Con los resultados obtenidos en el presente trabajo, podemos concluir que: 1. Los aspectos que los alumnos de la DICIVA más toman en cuenta para seleccionar el lugar donde consumen sus alimentos son la presentación del lugar y el aseo del personal que los prepara y vende. 2. De cada 2 estudiantes que consumen alimentos en los lugares establecidos, uno presenta síntomas de alguna enfermedad, siendo el dolor estomacal el más frecuente, seguido por diarrea. 3. El 45% de los expendios de alimentos rebasó la NOM en lo que respecta a la presencia de organismos aerobios. 4. El 100% de los alimentos rebasó el límite máximo permitido por la NOM en lo que respecta a organismos coliformes totales. 5. Aproximadamente el 90% de los coliformes totales detectados son coliformes fecales. 6. En general podemos decir que hay un desconocimiento total de parte de los vendedores para establecer un local apropiado para le venta de alimentos y de las normas de higiene en la preparación de los mismos. 7. Los estudiantes, a pesar de manifestar que es importante el lugar y el personal, y de tener conocimiento de la importancia de la sanidad de los alimentos, la necesidad del consumo de éstos los obliga a recurrir a los expendios existentes, a pesar de poner en riesgo su salud. 8. Por lo tanto, se necesita educar al vendedor de alimentos en lo que respecta a las buenas prácticas de manufactura y al consumidor para que haga valer su derecho de exigir que los expendios cumplan con las mínimas reglas de higiene. REFERENCIAS 1. Food and Agriculture Organization of the United Nations. A summary of FAO studies and other aclivities relating to Street foods. Rome: FAO; 1989. 2. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura v la Alimentación. La venta de alimentos en las calles: informe de una consulta de expertos de la FAO, Yogyakarta, Indonesia, 5-9 de diciembre 1990. Roma: FAO; 1990. 3. Codex Alimentarius Commission. Report of the eighth session of fhe Codex Coordinating Committe for Latin America and the Caribbean. Brasilia: Codex Alimentarius Commission; 1993. 4. Pan American Health Organization. Final report of the Joint FAO/PAHO/WHO Technical Consultation on Food Safety and Commercialization in view of the cholera epidemic in the Americas. Buenos Aires: P’O; 1992. [Document HPV/FOS 1. 0051921] 190 | P á g i n a EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD QUELANTE MEDIANTE SISTEMAS MODELOS (AMINOÁCIDO-AZÚCAR) COMO PRECURSORES DE LOS PRM IMPLICADOS EN LOS ALIMENTOS Flores-Quezada, J.B1., Rodríguez-Ramírez, R1*.,González-Córdova, A.F2., VallejoCórdoba, B2., Ávila-Villa, L. A3.,Reyes-Blanco, B.L1. 1 Laboratorio de Biotecnología y Trazabilidad Molecular de los Alimentos. Instituto Tecnológico de Sonora. 5 de febrero 818 sur, Colonia Centro. Ciudad Obregón, Sonora. México, C.P.85000. *Autor de correspondencia [email protected] (Categoría: Licenciatura) 2 Laboratorio de Calidad, Autenticidad y Trazabilidad de los Alimentos, Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo A.C. Carretera a La Victoria Km. 0.6,. Hermosillo Sonora, México, CP 83000. 3 Departamento de Ciencias Químico Biológicas, Universidad de Sonora, Campus Cajeme. Blvd. Bordo Nuevo s/n Ejido Providencia. Cd. Obregón, Sonora, México . RESUMEN La reacción de Maillard es una reacción de pardeamiento no enzimático y se le atribuye ser responsable de la formación de algunos sabores, colores y aromas en algunos alimentos. Durante el transcurso de la reacción de Maillard se produce un amplio número de compuestos con estructura y actividades biológicas desconocidas. Se sabe que determinados productos de la reacción de Maillard (PRM) pueden tener un impacto, tanto positivo como negativo, en la salud. Por ello, es importante la selección de condiciones apropiadas que favorezcan la formación de compuestos beneficiosos para la salud y reduzcan la formación de posibles tóxicos. Uno de los aspectos más novedosos de PRM es la actividad quelante y antioxidante, por lo que la búsqueda de compuestos con propiedades funcionales es un reto para mejorar la salud. El objetivo del presente trabajo es evaluar in vitro sistemas modelo aminoácido-azúcar para el estudio de su actividad quelante. Se evaluaron cuatro sistemas modelo acuosos equimolar: LisinaGlucosa, Cisteína-Glucosa, Glicina-Glucosa, Isoleucina-Glucosa donde estos fueron calentados a 100 °C y 130 °C durante 30, 60 y 90 min. Los parámetros analizados fueron capacidad quelante en Fe+2 y Cu+2 mediante espectrofotometría UV-visible (562, 632 nm, respectivamente). El sistema Lisina-Glucosa presento el mayor poder quelante en Fe+2 con 88.91 % (100 °C) y 80.92 % (130 °C) mientras que para Cu+2 fue Cisteína-Glucosa con 34.51 % (100 °C) y 37.39 % (130 °C), los sistemas modelo que presentaron menor capacidad quelante en Fe+2 y Cu+2 fueron Cisteína-Glucosa y Lisina-Glucosa respectivamente. Palabras clave: Quelación, propiedades funcionales, reacciones de Maillard 191 | P á g i n a OBJETIVOS Objetivo general Evaluar el potencial quelante de los productos de la reacción de Maillard implicados en los alimentos mediante sistemas modelo aminoácido azúcar. Objetivos específicos Optimizar el método para determinar la capacidad quelante de los iones cobre y hierro en los productos de la reacción de Maillard. Determinar la capacidad quelante mediante sistema modelos conformados por Glicina, Lisina, Cisteína, Isoleucina y glucosa como carbohidrato. Evaluar el potencial quelante en los productos formados de la reacción de Maillard a la temperatura de 100 °C y 130 °C durante 30, 60, 90 minutos MATERIALES Y METODOS El presente trabajo de investigación fue desarrollado dentro del Laboratorio de Biotecnología y Trazabilidad Molecular de los Alimentos del Instituto Tecnológico de Sonora. Los productos químicos utilizados fueron de grado analítico de los cuales D-(+)-Glucosa, L-Cisteína, L-Isoleucina, sulfato de cobre (II) penta-hidratado (CuSO4•5H2O), cloruro de hierro (II) tetra-hidratado (Cl2Fe•4H2O), FerroZinaTM (C20H13N4NaO6S2•xH2O), Piridina (C5H5N) y Violeta de Pirocatecol (C19H14O7S) se adquirieron de Sigma-Aldrich®. El agua fue grado MilliQ®. Preparación de la Reacción de Maillard. Para obtener los productos de la reacción de Maillard (PRM) se prepararon sistemas modelos siguiendo la metodología de Jeong et al., con algunas modificaciones, donde esta consistió en preparar soluciones equimolares acuosas 0.2 M cada aminoácido (Lisina, Isoleucina, Glicina y Cisteína), las cuales fueron mezcladas con una solución de Glucosa 0.2 M en relaciones equimolares (1:1) para obtener una concentración final de 0.1 M, dentro de un vial de 10 mL posteriormente los sistemas modelos fueron calentados en horno a la temperatura de 130 °C por intervalos de tiempo separados a 30, 60 y 90 minutos. Una vez obtenido el tiempo para cada tratamiento térmico se procedió a inactivar o parar la reacción de formación de los productos de Maillard mediante inmersión de los viales en agua con hielo. Una vez inactivada la reacción se procedió a filtrar cada muestra a través de un filtro de 0.45 µm de marca Millipore mediante jeringas de plástico de 5 mL. Una vez filtradas las muestras estas se diluyeron 16 veces donde se encontraban contenidos los productos de la reacción de Maillard. 192 | P á g i n a Todos los sistemas modelos fueron preparados por triplicado para la determinación de la capacidad quelante de Cu+2 mediante un ensayo espectrofotométrico en la región de UV-visible. Determinación de Capacidad Quelante. La capacidad de los productos de la reacción de Maillard (PRM) para quelar los iones de cobre (Cu +2) fue realizada de acuerdo a Kim y Lee con algunas modificaciones. Donde 300 µL de sulfato cúprico (CuSO4•5 H20) 2 mM fue mezclado con 300 µL de piridina y 6 µL de pirocatecol violeta (0.1 %), por último se agregaron 300 µL de los productos de la reacción de Maillard (diluidos 16 veces) dentro en un vial de 10 mL, esto se realizó para cada sistema modelo Aminoácido-Azúcar. Posteriormente 302 µL de cada muestra fueron depositados de manera individual en (micro pozo) una placa tipo ELISA NUNC-F 96 de acuerdo a Bersuder et al., la desaparición del color azul debido a la disociación de Cu +2 con la unión de los productos de la reacción de Maillard, fue registrada por la medición de la absorbancia a una longitud de onda de 632 nm en un espectrofotómetro UV Thermo Scientific Multiskan go, Como Blanco se sustituyó de la mezcla los productos de la reacción de Maillard por 300 µL de agua desionizada. Para la determinación de la quelación de Fe+2, se mezcló 100 µL de muestras de PRM diluido dieciséis veces, 600 µL de agua desionizada Milli-Q® y 100 µL de FeCl2•4H2O 0.2 mM. La mezcla se dejó en reposo a temperatura ambiente durante 30 segundos. La mezcla así obtenida se completó más tarde con 200 µL 1 mM de FerroZinaTM. Posteriormente se monitorearon los cambios de color de las muestras a 562 nm. El blanco consistió en la mezcla de reacción conteniendo 100 µL de agua desionizada Milli-Q® en lugar de la muestra. La capacidad quelante de Cu+2 y Fe+2 se calculó utilizando la siguiente formula: Capacidad quelante (%) = [(A0 – As)/A0] x 100 Donde A0 es la absorbancia del blanco y As la absorbancia de cada muestra. Diseño experimental y Análisis estadístico. El diseño experimental consistió en la aplicación de un modelo factorial 2X3X4, obteniendo un total de 24 tratamientos para todos los modelos. El análisis estadístico consistió en un análisis de varianza al 95 % de confianza entre los tratamientos, teniendo variable respuesta la capacidad quelante y utilizado el programa Statgraphics 5.1 del 2000. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Los resultados encontrados indican que el sistema modelo Lisina-Glucosa fue el que presento mayor porcentaje de capacidad quelante en Fe +2 con un 88.91 %, a una temperatura de 100°C durante 30 minutos, mientras que para este mismo metal se obtuvo 80.92 % de quelación a 130°C por 30 minutos (Tabla 1). 193 | P á g i n a Este mismo comportamiento fue encontrado por Ruiz (2009), donde el autor evaluó sistemas modelo Lisina-Glucosa a 100°C y 150°C durante 15, 30, 60 y 90 minutos obteniendo resultados que oscilan entre 85.15 a 96.18 y 81.60 a 89.89 % respectivamente. Sin embargo en presente estudio se observó que el modelo Lisina-Glucosa en los tiempos de 60 y 90 minutos (100°C y 130°C) mostraron un descenso en el porcentaje de quelación, lo que nos permite inferir que el tiempo calentamiento en ambas temperaturas influye en el poder quelante de los metales de estudio. El mayor potencial quelante para Cu+2 lo presento el modelo glucosa-cisteína, con 34.50 y 37.39 % al tiempo de 30 min en ambas temperaturas. Cabe mencionar que este modelo presento diferencias significativas en la quelación de este metal con respecto a los otros modelos evaluados (Tabla 2). Caso contrario se observó en las muestras calentadas a 100°C y 130°C durante 90 minutos. La investigación efectuada por Kwak, (2003) sugirió que los aminoácidos que contienen azufre tales como cisteína son generalmente eficaces para presentar quelación para este metal con el desarrollo de poco color. El menor porcentaje de quelación en todos los modelos de estudio se observó en Lisina-Glucosa e Isoleucina-Glucosa (Tabla 3). CONCLUSIONES De acuerdo a los resultados obtenidos los sistema que presentaron mayores porcentajes de quelación en Fe+2 y Cu+2 fueron Lisina-Glucosa, Cisteína-Glucosa respectivamente, por lo que el consumo de alimentos que contenga estos aminoácidos y azúcar podría resultar de cierta forma benéfico para la salud. Todos los sistemas presentaron capacidad quelante lo cual indica que estos podrían ser utilizados como un posible aditivo en los alimentos. REFERENCIAS Bersuder, P., Hole, M., Smith, G. (2001). Antioxidants from a heated histidine-glucose model system. Investigation of the copper(II) binding ability. J. Am Oil Chem Soc., 78, 1079-1082. Jeong, H. S., Hwang, I. G., Kim, H. Y., Woo, K. S., y Lee, J. (2010). Biological activities of Maillard reaction products (MRPs) in a sugar-amino acid model system. Food Chemistry, 126, 221-227. Kwak, J. & Lim, S. (2004). The effect of sugar, amino acid, metal ion, and NaCl on model Maillard reaction under pH control. Amino Acids 27: 85-90. Kim, J. S. y Lee, Y. S. (2010). Characteristics and antioxidant activity of Maillard reaction products from fructose-glycine oligomer. Food Science and Biotechnology, 19, 929-940. Ruíz, B. (2009). En Propiedades antioxidantes de los productos de las reacciones de Maillard y su influencia en la absorción de hierro y cobre. Relación con la capacidad quelante de metales. Granada: Editorial de la Universidad de Granada. Pp 177. 194 | P á g i n a Tabla 1. Capacidad Quelante de los PRM mediante Sistemas Modelo Amino-Azúcar en Fe Temperatura (°C) 100 Tiempo (Minutos) 30 60 90 30 b Cys-Glu 2.7903 ± 0.0039(1.0965) 2.6767 ± 0.002(0.5422) 2.1216 ± 0.0033(0.9199) 2.6467 ± 0.0008(0.2278) b ab Gly-Glu 7.02800 ± 0.002(0.5691) 4.4711 ± 0.0014(0.3859) 8.2133 ± 0.0141(4.1359) 10.4429 ± 0.0151(4.5634) b a Iso-Glu 7.8862 ± 0.0058(1.6862) 5.6768 ± 0.0061(1.7485) 2.4607 ± 0.0012(0.3271) 5.1044 ± 0.0027(0.7617) Lys-Glu 88.9149 ± 0.0003(0.6907) 54.1559 ± 2.9694(5.4832) 15.7097 ± 0.2939 (1.8709) 80.9279 ± 0.002(2.789) 130 60 a a a 90 3.6382 ± 0.002(0.5648) 8.7317 ± 0.0116(3.4446) 6.2211 ± 0.0012(0.3400) a a a 15.5962 ± 0.0154(4.9431) 3.2744 ± 0.0028(0.7885) 5.8482 ± 0.0061(1.7485) 5.8091 ± 0.0055(1.5687) a 7.0359 ± 0.0118(3.427) Cifras con mismas letras dentro de cada columna son estadísticamente iguales (Duncan, P ≤ 0.05%) (n=3); % Quelación ± SD (CV). Cis-Glu = Cisteína-Glucosa, Iso-Glu = Isoleucina-Glucosa, Gli-Glu = Glicina-Glucosa, Lis-Glu = Lisina-Glucosa. Tabla 2. Capacidad Quelante de los PRM mediante Sistemas Modelo Amino-Azúcar en Cu Temperatura (°C) 100 Tiempo (Minutos) 30 60 90 Cys-Glu 34.501 ± 0.0028(2.0224) 32.299 ± 0.0037(2.652) 34.485 ± 0.0022(1.6163) a a Gly-Glu 15.499 ± 0.0037(2.0881) 17.0879 ± 0.005(2.8764) 16.0162 ± 0.0012(0.6870) ab a Iso-Glu 13.3077 ± 0.0028(1.5587) 14.2301 ± 0.0011(0.5904) 5.0064 ± 0.0011(0.5587) b Lys-Glu 12.1454 ± 0.0033(1.7924) 9.9062 ± 0.0017(0.9277) 7.9068 ± 0.0033(1.7452) 130 60 30 37.396 ± 0.0059(4.5527) a a a 5.8381 ± 0.0043(2.1861) 7.1577 ± 0.0033(1.6933) 9.9968 ± 0.0108(5.4835) 90 35.1647 ± 0.0014(1.0292) a 11.5243 ± 0.0015(0.8053) ab 8.3893 ± 0.0122(6.4075) b 2.8671 ± 0.0038(1.6836) 32.5896 ± 0.004(2.8355) a a a 4.3586 ± 0.0043(2.1877) 3.9347 ± 0.0016(0.7770) 2.0033 ± 0.0009(0.3504) Cifras con mismas letras dentro de cada columna son estadísticamente iguales (Duncan, P ≤ 0.05%) (n=3); % Quelación ± SD (CV). Cis-Glu = Cisteína-Glucosa, Iso-Glu = Isoleucina-Glucosa, Gli-Glu = Glicina-Glucosa, Lis-Glu = Lisina-Glucosa. Tabla 3. Rangos encontrados de % Capacidad Quelante considerando las dos temperaturas a los tres tiempos Metal Cu Temperatura (°C) Modelo Cys-Glu Gly-Glu Iso-Glu Lys-Glu Fe 100 130 100 130 32.299 a 34.501 32.5896 a 37.396 2.1216 a 2.6767 2.7903 a 3.6382 15.499 a 17.0879 4.3586 a 16.0162 7.0280 a 10.4429 4.4711 a 8.7317 5.0064 a 14.2301 3.9347 a 8.3893 2.4607 a 7.8862 5.6768 a 6.2211 7.9068 a 12.1454 2.0033 a 9.9968 15.7097 a 88.9149 7.0359 a 80.9279 Cis-Glu = Cisteína-Glucosa, Iso-Glu = Isoleucina-Glucosa, Gli-Glu = Glicina-Glucosa, Lis-Glu = Lisina-Glucosa. 195 | P á g i n a EVALUACIÓN DEL ÍNDICE GLICÉMICO DE MALTODEXTRINAS ENZIMÁTICAMENTE RESISTENTES DE YUCA Y SU INCORPORACIÓN EN LA FORMULACIÓN DE PAN BLANCO Palabras clave: Maltodextrinas, yuca, resistencia a digestión, glicemia, pan blanco Rocío Toraya-Avilés, Enrique Barbosa-Martín, Maira Segura-Campos, David BetancurAncona Facultad de Ingeniería Química, Universidad Autónoma de Yucatán. Periférico Norte. Km. 33.5, Tablaje Catastral 13615, Col. Chuburná de Hidalgo Inn, Mérida, Yucatán, México. CP. 97203, Email: [email protected]. Categoría: Posgrado Objetivo general. Evaluar el índice glicémico de maltodextrinas enzimáticamente resistentes (MER) obtenidas por piroconversión e hidrólisis enzimática de almidón de yuca (Manihot esculenta) e incorporarlas la formulación de pan blanco Objetivos específicos. 1. Determinar el índice glicémico de las maltodextrinas enzimáticamente resistentes obtenidas a partir del almidón de yuca. 2. Evaluar sensorialmente la incorporación de maltodextrinas enzimáticamente resistentes en pan blanco. Resumen. Las maltodextrinas enzimáticamente resistentes (MER) resultan de la aplicación de tratamientos de piroconversión e hidrólisis enzimática a almidón nativo. Son compuestos de bajo peso molecular, no endulzantes, que contienen enlaces α 1-4 y α 1-6 como el almidón nativo y también uniones β 1-2, β 1-3 y levoglucosonas, tienen una baja viscosidad y alta solubilidad. En la producción de éstas, se han encontrado componentes indigeribles de almidones tales como dextrinas, y maltodextrinas, lo cual les proporciona propiedades fisiológicas similares a las de la fibra dietética. 196 | P á g i n a En este trabajo se determinó el índice glicémico de MER obtenidas por piroconversión e hidrólisis enzimática a partir del almidón de yuca, así como la aceptación al ser incorporada en la formulación de pan blanco. El índice glicémico estimado para la MER fue 59% en individuos sanos. La evaluación hedónica de las muestras de pan blanco con MER, ubicó a éstas cerca del nivel de agrado “me gusta poco” y no existió diferencia estadística (p>0.05) con la aceptación del pan control. El alto contenido de almidón indigerible y fibra dietética de la MER, así como su alta solubilidad, hacen que sea un adecuado ingrediente para aumentar el contenido de fibra dietética en productos de panificación sin afectar la aceptación por parte de los consumidores, también pudiera ser utilizada en una amplia gama de alimentos, particularmente bebidas, cremas, sopas y productos lácteos. Metodología Extracción de almidón nativo de Yuca. Se usaron aproximadamente 12 kg de ejemplares frescos de yuca (Manihot esculenta), los cuales fueron adquiridos en un ejido productor de Xohuayán, localidad situada en el municipio de Oxkutzcab del estado de Yucatán. La extracción del almidón se realizó de acuerdo al método de Hernández et al. (2008). Los rizomas de Manihot esculenta fueron pelados y cortados en cubos de aproximadamente 3 cm por cada lado y luego se remojaron durante 30 min en una solución de bisulfito de sodio con una concentración de 1500 ppm, en una relación 1:3 (p/v). Obtención de las maltodextrinas enzimáticamente resistentes (MER). La piroconversión se realizó de acuerdo al método de Laurentin et al. (1996). Se colocaron 15 g de almidón nativo seco en una caja petri de 20 ml y se añadió HCl 2.2 M. El ácido se dispersó en el almidón y se dejó reaccionar por 16 h. Luego las cajas petri se colocaron en un horno de convección a la temperatura de 90 ºC durante 3 horas. Con el almidón modificado se procedió a realizar la hidrólisis enzimática de acuerdo a la patente N°5, 620, 873 de la United State Patent (1997), utilizando la enzima α-amilasa (Sigma A-3306). Evaluación del índice glicémico. El estudio se realizó de acuerdo al método de Granfeldt y Bjorck (1991), con la participación de 10 individuos sanos, con edades comprendidas entre 18 y 40 años. Para la cuantificación de la glícemia se empleó un glucómetro Optimun Exceed (Abbot) utilizando glucosa como (50g) como control. Incorporación de la maltodextrina enzimáticamente resistente en la elaboración de pan blanco. El pan blanco fue elaborado de acuerdo a la formulación de Palomo (2011). La incorporación de la MER en la formulación se realizó sustituyendo el 50 y 100% del azúcar empleado. Se elaboró un pan blanco control siguiendo la formulación original: harina de trigo (500g), sal (5g), mejorante (5g), azúcar (50 g), aceite (50ml), agua (300 ml), levadura seca (7.5 g). La masa fue horneada a 180 °C durante 30 min. 197 | P á g i n a Evaluación sensorial. Los productos elaborados se rebanaron para ser evaluados sensorialmente por medio de un panel de 80 jueces no entrenados, los cuales señalaron el nivel de agrado o desagrado mediante una escala hedónica estructurada de siete puntos descriptores de acuerdo a Anzaldúa-Morales, (2005). Resultados y análisis Índice glicémico. Para el análisis de los resultados de la evaluación del índice glicémico se elaboraron curvas de incremento de glucosa para la MER y para la glucosa (estándar). Se observó que la MER proporcionó valores promedio menores (42.4, 53.2, 25.6, 20.6, 8.4, -10.6 mg/dl) en la curva de incremento de glucosa (Figura 1), que los arrojados al consumir glucosa (59.2, 61, 31.8, 26.4, 24.6, -7 mg/dl), esto puede ser precisamente por la formación de enlaces atípicos en el almidón de yuca durante la piroconversión, generando enlaces resistentes a las enzimas digestivas y, por lo tanto, disminuyendo la absorción de las unidades de glucosa presentes. Este comportamiento se encuentra relacionado directamente con el aumento en el contenido de almidón indigerible y de fibra dietética total. En ambos alimentos se encontró el nivel máximo de concentración de glucosa a los 45 minutos y después de los 120 minutos regresó a niveles de ayuno. El índice glicémico (IG) estimado para la MER elaborada a partir de almidón de yuca fue 59 %, lo cual la clasifica como un ingrediente de IG moderado de acuerdo a la escala que utiliza como estándar a la glucosa (Noriega, 2004). En general, el menor índice glicémico de estos compuestos se ha relacionado con su bajo contenido de almidón digerible, tasa de digestión lenta y con el bloqueo del mecanismo de absorción de la glucosa en el intestino. La mayor parte de los estudios (Sajilata et al., 2006; Kendall et al., 2008) indican que entre el 30 y 70 % del almidón resistente es metabolizado, la otra parte es excretada por las heces. Los alimentos que contienen almidón resistente moderan la velocidad de digestión, ya que el metabolismo de este tipo de almidón ocurre entre 5 y 7 h después de su consumo, en contraste con el almidón cocinado de consumo habitual, el cual es digerido prácticamente inmediatamente. La lenta digestión de éste a lo largo de un periodo de 5 a 7 h reduce la glicemia e insulinemia postprandial y además tiene el potencial de incrementar el período de saciedad. 198 | P á g i n a Elaboración y evaluación sensorial de pan blanco. Con base en la prueba afectiva aplicada a los panes, se puede situar a las tres muestras cerca del nivel de agrado “me gusta poco”. El análisis de varianza de éstas arrojó un P-Valor de 0.9733 a un nivel de confianza del 95 %. Puesto que el P-valor fue superior a 0.05, se puede concluir que no hay diferencia estadísticamente significativa entre las medias de los tres panes evaluados (Figura 2). Este resultado es favorable, ya que el nivel de agrado de los panes con MER es prácticamente el mismo que el de un pan sin ella; por lo tanto, la sustitución de sacarosa por MER en la fórmula de pan blanco es una buena forma de incorporar a este producto las propiedades de la fibra dietética soluble sin afectar la aceptación por parte de los consumidores. a Letras iguales en las barras indican que no hay diferencia estadística (p>0.05) Figura 2. Calificaciones asignadas a las muestras de la prueba afectiva. Conclusiones. El índice glicémico (IG) estimado para la MER fue 59 % en individuos sanos, lo cual, la clasifica como un ingrediente de IG moderado tomando como estándar a la glucosa. La evaluación sensorial de los dos prototipos de pan blanco con MER los ubicó cerca del nivel de agrado “me gusta poco”, al igual que el pan blanco control; no existiendo una diferencia estadísticamente significativa (p>0.05) entre los niveles de agrado de las 3 muestras 199 | P á g i n a Referencias. Anzaldúa - Morales, M. (2005). La Evaluación Sensorial de los Alimentos. Zaragoza, España: Editorial Acribia. Granfeldt, Y., y Bjorck, I. (1991). Glycemic response to starch in pasta: a study of mechanisms of limited enzyme availabilty. Journal of Cereal Sciences, 14, 47-61. Hernández, M., Torruco, J.G., Chel, L. y Betancur, D. (2008). Caracterización fisicoquímica de almidones de tubérculos cultivados en Yucatán, México. Ciencia y Tecnología de los alimentos, 28 (3), 718-726 Kendall, C., Esfahani, A., Hoffman, A.J., Evans, A., Sanders, L.M., Josse, A.R., Vidgen, E. y Potter, S.M. (2008). Effect of novel maize-based dietary fibers on postprandial glycemia and insulinemia. Journal of the American College of Nutrition, 27 (6), 711–718 . Laurentin, A.I., Pérez, E. y Tovar, J. (1996). Efectos de la irradiación con microondas y la dextrinización por calor sobre la digestión in vitro del almidón de lenteja (Lens culinaris). En Memorias de la Conferencia Internacional de Almidón. Propiedades Fisicoquímicas, Funcionales y Nutricionales (págs. 275-281). Quito, Ecuador. Palomo, A. I. (2011). Pan de Caja. Mérida, Yucatán, México: Instituto Gastronómico Probapan. Sajilata, M., Singhal, R. S., y Kulkarni, P. R. (2006). Resistant Starch- A review. Comprehensive reviews in food science and food safety, 5, 1-17. 200 | P á g i n a Efecto del procesamiento sobre la concentración de linamarina en yuca (Manihot esculenta Crantz) Rivadeneyra-Domínguez1, E., Torres-Cano, G.,1,2 Durand Niconoff S.,2Díaz-Sobac, R.1,2., Vázquez-Luna, A.1,2+. 1 2 Facultad de Química Farmacéutica Biológica, Universidad Veracruzana / Zona Universitaria, Xalapa, Ver. CP 91000/[email protected] Instituto de Ciencias Básicas, Universidad Veracruzana / Rafael Sánchez Altamirano s/n, Xalapa, Ver. CP 91190/[email protected], [email protected] + Autor a quien la correspondencia debe ser enviada; Tel.: +52-228-8421700 ext 13155; Lab. De Química y Biología Molecular de frutas. Instituto de Ciencias Básicas. Universidad Veracruzana. A. Dr. Luis Castelazo Ayala s/n. Col. Industrial Ánimas. 91190. Xalapa, Ver. Categoría: Licenciatura Objetivo General:Establecer si la forma de preparación de la yuca influye en la concentración de linamarina y acetonacianohidrina. Resumen: La yuca (ManihotesculentaCrantz) es de las fuentes de carbohidratos más importantes del mundo, después del arroz, maíz y caña de azúcar. En México, es consumida principalmente en Tabasco, Michoacán, Morelos, Guerrero y Veracruz. La yuca contiene linamarina (97%) y lotaustralina (3%), que hidrolizados por la enzima linamarasa, producen acetonacianohidrina, potencialmente tóxicos y responsables de enfermedades que afectan al sistema nervioso central, como el Konzo y la Neuropatía Atáxica Tropical (TAN). El objetivo del presente trabajo fue establecer si la forma de preparación de la yuca afecta la concentración de linamarina y acetonacianohidrina, para lo cual se preparó: jugo de yuca, yuca cocida y su respectiva agua de cocción; y harina mediante un proceso de secado y molido. Para la cuantificación de linamarina y acetonacianohidrina se prepararon extractos acuosos y acidificados. La cuantificación se hizo mediante Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (CLAR) y curvas de calibración de los estándares de linamarina y acetonacianohidrina. Se encontró que en la harina de yuca hay una mayor concentración de linamarina que en las demás muestras, seguido del agua de cocción y la yuca cocida que al consumirse en forma de caldo, representan una concentración alta de linamarina. En cuanto a la acetonacianohidrina, el extracto crudo fue el que presentó mayor concentración y la harina la menor concentración. La forma de preparación influyó en las concentraciones de linamarina y acetonacianohidrina. La información obtenida resulta de interés, ya que la yuca es un producto cuyo consumo está en aumento. Palabras clave:yuca, linamarina, procesamiento 201 | P á g i n a Abastract:Cassava (ManihotesculentaCrantz) is one of the most important carbohydrate sources in the world, after rice, corn and sugarcane. In Mexico, it is consumed mainly in Tabasco, Michoacán, Morelos, Guerrero and Veracruz. Cassava contains linamarin (97%) and lotaustralin (3%), which hydrolyzed by the enzyme linamarase, produce acetonecyanohydrin, potentially toxic and responsible for diseases affecting the central nervous system, such as Konzo and Tropical Ataxic Neuropathy (TAN). The aim of this work was to study if the form of preparation of cassava affectslinamarin and acetonecyanohydrin concentration, for which were prepared: cassava juice, boiled cassava and its respective cooking water, and flour by drying and ground. For quantification of linamarin and acetonecyanohydrin aqueous and acidified extracts were prepared. Quantification was done by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and calibration curves of linamarin and acetonecyanohydrinstandards. It was found that in cassava flour linamarin concentration was higher than in the other samples, followed by cooking water and boiled cassava, that when consumed in the form of stock, represents a high concentration of linamarin. Regarding the acetonecyanohydrin, the crude extract presented the highest concentration and the lowest was found in flour. The form of preparation influenced concentrations of linamarin and acetonecyanohydrin. The information obtained is of interest, as cassava is a product which consumption is increasing. Keywords:cassava,linamarin,processing Introducción La yuca (Manihot esculenta Crantz) es un arbusto leñoso perteneciente a la familia Euphorbiaceae. Se encuentra distribuida en la mayoría de los países del trópico [18, 15, 12], su raíz(la cual es la parte de la planta que más se consume), es rica en almidón [17, 6], siendo el contenido de proteínas y vitaminas muy bajo [21, 14]. La yuca es una planta capaz de crecer en suelos poco fértiles y en climas desfavorables, por lo que su cultivo resulta económico. Por esto, la yuca es el alimento principal para millones de personas en todo el mundo, especialmente en las regiones que se encuentran en crisis económica de África [7, 10]. Esta planta es consumida en diversas formas, como lo son frita, cocida o en forma de harina [7, 4]. Por otra parte, la yuca es una planta que contiene dos glucósidos cianogénicos, linamarina (97%) y lotaustralina (3%) [1, 5, 2]. Al fracturar las células de la planta, la linamarina es hidrolizada por la enzima linamarasa formando glucosa y acetonacianohidrina. Posteriormente, ésta última se transforma, mediante una αhidroxinitriloliasa, en ácido cianhídrico y acetona [19, 9, 3]. Este mecanismo es utilizado por la planta como defensa contra los depredadores, ya que el ácido cianhídrico es tóxico [13]. Es por esto que el consumo prolongado y en grandes cantidades de yuca resulta dañino, principalmente para el SNC causando dos enfermedades, Neuropatía Atáxica Tropical (TAN) y Konzo; además puede exacerbar las enfermedades por deficiencia de yodo como son el bocio y el cretinismo [5, 16, 3, 11]. Por lo anterior, resulta importante determinar en el presente trabajo, el contenido de linamarina y acetonacianohidrina, ya que se desconoce su concentración después de que la yuca ha sido procesada. Materiales y métodos Materia prima Se utilizó yuca amarga de la especie Manihot esculenta Crantz. Fue colectada en el municipio de Misantla, Veraruz. Se seleccionaron las raíces que no estuvieran dañadas o contaminadas por algún hongo. Se lavó y peló la raíz y se procesó de diferentes formas 202 | P á g i n a dividiéndola en 4 lotes. En el primer lote se obtuvo el extracto crudo de yuca mediante un extractor de jugos. En el segundo y tercer lote la yuca se puso a cocer durante 10 minutos, obteniendo agua de cocción y yuca cocida, respectivamente. En el cuarto lote, la yuca se cortó en trozos de aproximadamente 1 cm2, se secaron a 60°C en un secador de charolas y una vez deshidratada se molió en licuadora para obtener polvo o harina de yuca. Obtención de extractos para cuantificación de linamarina y acetonacianohidrina en raíz de yuca Para obtener los extractos de linamarina se siguió la metodología propuesta por Haque y Bradbury (2004) y por Sornyotha y colaboradores (2007), ocupando el mismo medio ácido de extracción y modificando la cantidad de muestra, la agitación del extracto y la temperatura y revoluciones por minuto de la centrifugación. Se tomaron 10 g de cada lote y se homogenizaron en 200mL de HCl 0.1M, de H2SO4 0.2M y de agua destilada. Se pusieron en agitación durante dos horas. Se centrifugaron a 5000rpm, durante 10min a 10°C. Se recolectó el sobrenadante y se almacenaron en refrigeración a 7°C. Para obtener los extractos de acetonacianohidrina se siguió la metodología propuesta por Bradbury (2009), ocupando el mismo medio ácido de extracción, modificando la cantidad de muestra y agregando las condiciones de centrifugación. Se tomaron 10g de cada lote y se homogenizaron en 200mL de HCl 0.1M. Se pusieron en agitación durante una hora. Se centrifugaron a 5000rpm, a 10°C y durante 10min. Se recolectó el sobrenadante y se almacenó en refrigeración a 7°C. Cuantificación de linamarinay acetonacionahidrinaen raíz de yuca mediante CLAR Se utilizó un equipo Varian model ProStar 210 con una columna C18 de fase reversa 4.6x250mm, 5µm (Agilent, Wilmington, DE, USA) y con detector UV. Se siguió la metodología propuesta por Sornyotha y colaboradores (2007) modificando la velocidad de flujo. El volumen de inyección de todas las muestras fue de 20 µL. Se utilizó una longitud de onda de 240nm para linamarina y 510nm para acetonacianohidrina. La fase móvil A fue agua:acetonitrilo (80:20). La fase móvil B fue acetonitrilo. La velocidad de flujo fue de 0.6mL/minpara linamarina y 0.8mL/min para acetonacianohidrina. Se realizaron curvas de calibración con estándares de linamarina y acetonacianohidrina (Sigma Aldrich), para obtener las concentraciones de muestras de yuca. Análisis de datos. Los resultados de las concentraciones de linamarina de las diferentes muestras de yuca fueron sometidos a un ANOVA de una vía y las medias se analizaron mediante la prueba de Tukey. Resultados y Discusión En las lecturas de los diferentes extractos se observó una línea base estable y reproducible en todos los análisis.En la tabla 1 se observa que la concentración de linamarina fue significativamente diferente (α<0.05) en las 4 muestras evaluadas, sobre todo entre el extracto crudo y la harina, siendo esta última la que tuvo la mayor concentración de linamarina (3.7 g/Kg). Estos resultados fueron mayores a los reportados por Sornyotha et al. (2007) quienes obtuvieron una concentración de 1.86 g/Kg de tejido seco. Esta diferencia puede deberse a la variedad de yuca utilizada en dicho estudio. Con respecto a la acetonacianohidrina, la muestra en la que se observó mayor contenido fue en el extracto crudo, con 1.02g/Kg. WHO (2004) reportó que este compuesto se descompone fácilmente con el calor, sin embargo, en el agua de cocción tuvimos una concentración alta 203 | P á g i n a de acetonacianohidrina (0.507g/Kg). Si comparamos la pérdida de linamarina en cada una de las muestras analizadas podemos observar que el agua de cocción y la yuca cocida presentaron un 45.15% y 82% de pérdida, respectivamente. Considerando que las personas consumen tanto el agua de cocción como la yuca cocida estaríamos hablando de un 72.62% de linamarina del 100% que contiene el extracto crudo, lo que originaría un problema de toxicidad en las personas que consumen la yuca preparada de esta forma de manera frecuente o por un tiempo prolongado. Tabla 1. Concentración de linamarinay acetonacianohidrinaen extracto de ácido clorhídrico de raíz de yuca Linamarina Promedio (g/Kg) Extracto crudo Agua de cocción Cocido Harina DE Acetonacianohidrina Promedio (g/Kg) DE 1.41 0.038 1.02 0.016 0.773 0.095 0.507 0.012 0.251 3.79 0.023 0.035 0.162 0.061 0.009 0.002 En la tabla 2 se presentan las concentraciones de linamarina utilizando soluciones de ácido sulfúrico, como podemos observar hubo una mayor concentración de linamarina en los extractos de ácido sulfúrico en comparación con los de la tabla 1, excepto para la harina, la cual tuvo una concentración significativamente menor que en las otras muestras (α<0.05). Sornyotha et al. (2007) reportó una concentración de 5.77 g/Kg de tejido fresco, cantidad que fue menor a la observada en el presente estudio para el extracto fresco.La acetonacianohidrina es inestable en ácido sulfúrico (WHO,2004), probablemente debido a que en ese medio la reacción de hidrólisis se lleva a cabo con mayor rapidez, formando ácido cianhídrico y compuestos cetónicos, por lo que no se pudo realizar la cuantificación de este compuesto en este extracto. Tabla 2. Concentración de linamarina en extracto de ácido sulfúrico de raíz de yuca Extracto crudo Agua de cocción Cocido Harina Promedio (g/Kg) DE 7.3 0.69 4.4 0.38 3.8 0.05 0.17 0.04 En la tabla 3 se muestra la concentración de linamarina en extracto de yuca fresca, no se observaron diferencias significativas (α = 0.05) entre el extracto crudo, el agua de cocción y la yuca cocida, pero sí con respecto a la harina, cuya concentración fue significativamente mayor (1.23 g/Kg). Las concentraciones obtenidas para el extracto fresco fueron menores a las obtenidas para los extractos ácidos, lo cual era de esperarse ya que el medio ácido facilita la hidrólisis y por otra parte consideramos que las personas que 204 | P á g i n a lo consumen deben saber que aún cuando la yuca se somete a un proceso de cocción o de secado, la concentración de linamarina se reduce en 26.42% para el agua de cocción y en un 20.76% para la yuca cocida con respecto al extracto crudo, y en el caso de la harina aumenta ya que estamos eliminando el contenido de agua libre de la yuca.En cuanto a la acetonacianohidrina, no se obtuvieron lecturas adecuadas en el extracto fresco, lo cual puede atribuirse a la forma de preparación de la muestra. Por tal motivo, no se pudo cuantificar dicho compuesto en este tipo de extracto. Tabla 3. Concentración de linamarina en extracto acuoso de raíz de yuca Extracto Agua de cocción Cocido Harina Promedio (g/Kg) DE 0.53 0.101 0.39 0.088 0.42 1.23 0.056 0.136 Conclusión La forma de preparación de la yuca influyó en las concentraciones de linamarina y acetonacianohidrina, observándose que en el jugo, en la harina, en el agua de cocción y en la yuca cocida, la concentración es mayor que el límite de glucósidos cianogénicos que establece la OMS (10 mg/Kg). Esto podría repercutir en la salud de las personas que consumen yuca mal procesada, si bien no van a presentarse enfermedades como el Konzo y la TAN, sí pueden presentarse otros trastornos similares que afecten al SNC. Referencias 1 Andersen M.D., Busk P.K., Svendsen I., Moller B.L. 2000. 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Journal of FoodComposition and Analysis.18:451 – 460. 6 FAO/FIDA. 2008. La economía mundial de la yuca: Hechos, tendencia y perspectiva. Fondo Internacional de Desarrollo Agrícola. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación. Roma. 205 | P á g i n a 7 Gobierno del Estado de Veracruz. 2009. Monografía de la yuca. Comisión Veracruzana de Comercialización Agropecuaria. 8 Haque M. y Bradbury J. 2004. Preparation of linamarin form cassava leaves for use in a cassava cyanide kit. Food Chemistry. 85:27 – 29. 9 Harbor C.I. y Ogundu E.C. 2009.Effect of processing on cyanide reduction in different cassava products. Journal of Biochemistry and Molecular Biology, pp 35 – 37. 10 Lebot Vincent. 2009. Tropical root and tuber crops: Cassava, Sweet Potato, Yams and Aroids. Crop Production Science in Horticulture. CABI, pp 14 – 18. 11 McKey D., Cavagnaro T.R., Cliff J., Gleadow R.M. 2010. 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Trends in Food Science and Technology.17:634 – 641. 206 | P á g i n a MUCILAGO DE NOPAL PARA EL CONTROL DE ANTRACNOSIS EN PAPAYA (CARICA PAPAYA VAR. MARADOL). Vázquez-Luna A.1,2, Solano-Doblado LG2 Durand Niconoff S.2 Rivadeneyra-Domínguez E1 1 Facultad de Química Farmacéutica Biológica. Circuito Gonzalo Aguirre Beltrán s/n. Zona Universitaria. 91000. Xalapa, Ver. 2 Instituto de Ciencias Básicas. Av. Dr. Luis Castelazo Ayala s/n, Col. Industrial Animas. Xalapa, Veracruz. Universidad Veracruzana. Autor principal: [email protected] Categoria: Posgrado Objetivo general: Evaluar una dispersión de mucílago de nopal (Opuntia ficusindica) para ser utilizada en el control de antracnosis en papaya maradol. Objetivos específicos: Evaluar el efecto fungicida y fungistático de la dispersión de mucílago in vitro e in situ, para ser utilizada en el control de la antracnosis. Analizar los cambios en los índices de maduración poscosecha en la papaya tratada con la dispersión para observar los cambios en la calidad sensorial del fruto Resumen La papaya maradol es un producto frutícola de alta producción a nivel nacional. Durante la pre y poscosecha el fruto es susceptible al desarrollo de antracnosis causada por el hongo Colletotrichum gloeosporioides. Para el control pre y poscosecha de la antracnosis se utilizan fungicidas químicos que son catalogados desde ligeramente tóxicos hasta altamente peligrosos que ponen en riesgo la salud de las personas involucradas en el proceso y del consumidor; por lo que se busca un control utilizando tratamientos inocuos y seguros. Con base en lo anterior, el objetivo del presente trabajo fue evaluar la actividad antifúngica del mucilago de nopal frente a Colletotrichum gloeosporioides, para su potencial aplicación como tratamiento superficial en papaya var. maradol. El mucílago se obtuvo por extracción acuosa de cladodios de nopal (Opuntia ficus-indica). La papaya (Carica papaya L. Maradol) fue donada por productores de la zona de Actopan, Veracruz, Se realizaron pruebas de inhibición de propagación in vitro e in situ estimando visualmente las superficies afectadas tanto en placa, como en la epidermis. El mucílago de nopal en pruebas in vitro demostró que retarda las etapas de germinación y de esporulación del hongo Colletotrichum gloeosporioides. El mucílago de nopal presento una buena compatibilidad sobre la superficie de la papaya. Las pruebas de inhibición in vivo mostraron que el tratamiento inhibe el crecimiento de C. gloeosporioides y no permite que la enfermedad se desarrolle por 15 días a una temperatura de 25±2°C, y por 30 días a una temperatura de 12±1°C. Palabras clave: nopal, antracnosis, papaya 207 | P á g i n a Resumen: Papaya is a fruit product maradol high production national. During the pre and postharvest fruit is susceptible to the development of anthracnose caused by the fungus Colletotrichum gloeosporioides. For pre and postharvest control of anthracnose used chemical fungicides are classified from slightly toxic to highly dangerous that endanger the health of the people involved in the process and the consumer, for what is sought control treatments using safe and safe. Based on the above, the objective of this study was to evaluate the antifungal activity of cactus mucilage against Colletotrichum gloeosporioides, for their potential application as a surface treatment on papaya var. maradol. Mucilage was obtained by aqueous extraction of cactus cladodes (Opuntia ficus-indica). Papaya (Carica papaya L. Maradol) was donated by Actopan´s producers, inhibition tests were performed in vitro propagation and in situ visually estimating both plate surfaces affected, as in the epidermis. The cactus mucilage in vitro tests showed that slows the stages of germination and sporulation of the fungus Colletotrichum gloeosporioides. The cactus mucilage present a good compatibility on the surface of the papaya. Inhibition tests in vivo showed that treatment inhibited the growth of C. gloeosporioides and didn’t allow the disease to develop for 15 days at a temperature of 25±2°C, and for 30 days at a temperature of 12±1°C. Key words: cactus, antracnosis, papaya Introducción La papaya maradol es uno de los productos frutícolas de mayor producción a nivel nacional. Chiapas y Veracruz, son los principales productores del país. De acuerdo a SAGARPA (6) en el 2012, la producción total de México fue de 1,100,000 toneladas, México es el principal exportador del fruto en Estados Unidos por encima de Brasil y la India, generando divisas por 580 millones de dólares y la 68,000 empleos directos, lo cual sustenta la importancia socioeconómica de este cultivo. Durante la pre y poscosecha el fruto es más susceptible al desarrollo de hongos y enfermedades, entre ellas la de mayor importancia es la antracnosis provocada por el hongo Colletotrichum gloeosporioides. El hongo afecta desde los primeros brotes florales y hasta la poscosecha, penetra por los estomas o por heridas observándose manchas acuosas en forma de anillos hundidos color café oscuros, de apariencia seca y tamaño variable que van desde pequeños puntos oscuros hasta 5 cm sobre la superficie. Para el control pre y poscosecha de la antracnosis se utilizan fungicidas químicos como Azoxistrobim, Fosetil, Cymoxanil, ó Carbendazim que son mezclados con antibióticos como estreptomicina y oxitetraciclina, estos fungicidas son catalogados desde ligeramente tóxicos y peligrosos, poniendo en riesgo la salud de los consumidores, por lo que se busca un control de manera natural, utilizando tratamientos inocuos y seguros. Una alternativa que se ha propuesto es el uso de películas, recubrimientos y tratamientos superficiales formulados a base de proteínas, lípidos y polisacáridos que actúen como barreras selectivas al paso de los gases y como vehículo para aceites esenciales de plantas con actividad antifúngica. Una opción que merece mayor estudio es el uso de tratamientos formulados con moléculas con actividad biológica que por su naturaleza química actúen como antimicrobianos. 208 | P á g i n a El mucílago de nopal es un polisacárido con peso molecular que va desde 2.3 x 104 hasta 4.3 x 106 Da., su composición es aproximadamente de 47% de arabinosa, 23% de xilosa, 18% de galactosa, 7% de ramnosa y 5% de ácido galacturónico (4). El nopal dentro de su composición contiene calcio, tan solo 100 g contienen 20.4 mg de calcio, esto en nopal fresco, cuando la penca tiene mayor edad y tamaño se encuentra mayor cantidad de calcio en este. Mahmud et al., en 2008 (5) encontró que el calcio es eficiente para la inhibición de la esporulación, lo que es un buen efecto en el control de la antracnosis, esto se debe a que el calcio afecta el balance osmótico en las células e inhibe enzimas pectinolíticas y un incremento de calcio en el citosol resulta toxico para los hongos y bacterias. En 2008 se desarrolló y caracterizó de una película protectora a base de mucílago de nopal (Opuntia ficus-indica) y se aplicó a jícama mínimamente procesada, demostrando que mejoraba la evolución de la pérdida de la firmeza (2). En 2010 se desarrolló y caracterizó un recubrimiento con base en mucílago de nopal buscando la formulación a diferentes pH y concentraciones de cloruro de calcio, encontrando que a pH entre 4 y 8 se forman mejor los recubrimientos, y observando que es una buena barrera para evitar transferencia de vapor de agua (3). En ese mismo año se desarrolló otro recubrimiento para reducir la tasa de respiración del mismo nopal, utilizando plastificantes como el glicerol, polietilenglicol y ácido oleico para aumentar su vida de anaquel, obteniéndose un 92.65% de disminución de la respiración con el recubrimiento (1). Metodología Se utilizaron cladodios de nopal (Opuntia ficus-indica) sin daños aparentes con un peso aproximado de 300g. La papaya (Carica papaya L. maradol) fue adquirida con madurez comercial, homogéneas y sin tratamientos fungicidas químicos,. Los cladodios fueron seleccionados, lavados, cortados en cubos, y licuados hasta obtener una mezcla homogénea, la que se centrifugó por 18 minutos a 25ºC a 6000 rpm en una centrifuga Hemlet Z-383, se desechó el sedimento y el sobrenadante se precipitó con etanol al 65% y se mantuvo por 20 horas a 4ºC. El mucílago fue recolectado y se congeló por 8 horas a -12ºC, fue secado en estufa (Novatech serie 05554) por una hora y se pulverizó en mortero. Posteriormente se formó una dispersión con mucílago, glicerol y agua en proporción 2:1:50 respectivamente, manteniéndolo 10 horas en agitación magnética a 25ºC, este procedimiento garantiza la desintegración de agregados del mucílago para una dispersión más homogénea, posteriormente se agregó cloruro de calcio, un 30% en relación al peso seco del mucílago. Se realizaron 2 pruebas in vitro; la prueba fungistática se llevó a cabo de la siguiente manera: El hongo Colletotrichum gloeosporioides fue inoculado por triplicado en cajas petri con agar papa dextrosa, posteriormente se colocó una capa con la dispersión de mucílago de nopal, estas fueron incubadas a 30±1°C, se verificaron los resultados a las 24, 48 y 72 h, para verificar resultados negativos se tomó una muestra de la dispersión sobre el agar y se sembró nuevamente verificando resultados durante las siguientes 72 h. Para la prueba fungicida in vitro se colocó primeramente una capa de la dispersión de mucílago de nopal en placas petri con agar papa-dextrosa, se dejaron secar y posteriormente se inocularon las placas, se llevaron a incubación a 30±1°C y para el hongo y a 37±1°C y se verificaron a distintos tiempos, 24, 48 y 72 horas. 209 | P á g i n a Para corroborar resultados negativos se tomaron muestras del tratamiento sobre el agar y se sembraron nuevamente. Se realizó una prueba adicional en la cual se inoculó el hongo en el centro de las placas en agar papa dextrosa y se midió el crecimiento radial máximo a 30±1°C, a las placas con crecimiento de 48 h y 72 h se les colocó 1 mL de la dispersión y se midió el crecimiento en la placa por 72 h, los criterios bajo los cuales se verifico la presencia de los microrganismos fueron estimando visualmente las superficies afectadas y midiendo el crecimiento cada 24 h. Todas las pruebas fueron realizadas por triplicado. Se realizó un conteo en placa para microrganismos viables y un conteo en la cámara de Neubauer para utilizar una concentración 1x10³ conidios/mL para todas las pruebas. El ensayo in vivo de propagación de Colletotrichum gloeosporioides por aplicación del tratamiento con la dispersión de mucílago de nopal, se llevó a cabo de la siguiente manera: Se lavaron las frutas con agua de la llave para eliminar toda la tierra y suciedad proveniente del comercio, por medio de un aspersor se colocó una capa fina de la dispersión sobre la epidermis de los frutos y se dejaron secar, con ayuda de una gasa estéril se diseminaron 1x10³ conidios/mL por todo el fruto, dejando uno sin tratamiento como control, y se mantuvieron a 2 temperaturas; 25±2°C y 12±1°C, posteriormente a los días 3, 6, 9 y 15, se tomó un gramo de epidermis de la papaya, esta se homogeneizo con un mililitro de agua estéril y se colocó en las placas con agar papa dextrosa y se incubaron a 30±1°C. y 37±1°C respectivamente. Después de 72 horas se realizó el conteo de los microrganismos. Como indicadores de maduración durante el almacenamiento poscosecha se evaluó en el cambio en sólidos solubles y pH. Resultados y Discusión. Los resultados in vitro demostraron que la dispersión de mucílago es capaz de evitar ambas faces, tanto de esporulación como de germinación, esto podría deberse a la presencia de iones calcio, por lo cual a la dispersión se le cuantificó la cantidad de calcio presente, sin el cloruro de calcio el resultado obtenido muestra que en 2 mL de dispersión de mucílago hay 2.66% de calcio, al cuantificarlo con la dispersión adicionada con cloruro de calcio el resultado fue 2.84%, (α=0.008), se adiciona el cloruro de calcio a la dispersión para mejorar las propiedades reológicas, otro motivo por el cual el mucílago es efectivo como agente antimicrobiano se encuentra en las lectinas, el mucílago presenta lectinas específicas para manosa y glucosa, lo que lo hace un inhibidor de Colletotrichum gloeosporioides. En el resultado del crecimiento radial del hongo se observó inhibido en ambos crecimientos tanto de 48 h como de 72 h, el crecimiento máximo obtenido en el control a 30±1 fue de un diámetro de 2.3±0.2 cm, en el crecimiento a 48 h mantuvo un diámetro de 1.1±0.02 cm y el crecimiento de 72 h, 1.3±0.01 cm. Por lo tanto en esta prueba se observó que independientemente del crecimiento y del tiempo de incubación el tratamiento con mucílago resulta efectivo para inhibir el crecimiento del hongo hasta por 30 días. En las siguientes tablas se observa que la dispersión de mucílago en la prueba in vivo fue capaz de inhibir el crecimiento del hongo Colletotrichum gloeosporioides durante 9 días a 25°C y por 15 días a 12°C. 210 | P á g i n a Tabla 1 Resultados obtenidos después de 15 días en papayas con temperatura controlada a 25°C. Día Papaya tratada con dispersión mucílago 0 UFC/mL 0 UFC/mL 2± 0.5 UFC/mL 14±2 UFC/mL 19±1 UFC/mL 3 6 9 12 15 la Papaya control 0 UFC/mL 147 UFC/mL 576 UFC/mL incontables incontables Tabla 2 Resultados obtenidos durante 15 días en papayas con temperatura controlada a 12°C. Día Papaya tratada con dispersión mucílago 0 UFC/mL 0 UFC/mL 0 UFC/mL 0 UFC/mL 0 UFC/mL 3 6 9 12 15 la Papaya control 0 UFC/mL 0 UFC/mL 1 UFC/mL 2 UFC/mL 5 UFC/mL La dispersión de mucílago evita la contaminación por Colletotrichum gloeosporioides, la mezcla evito su crecimiento por 6 días a 25°C, a los días 9 y 15 se observa crecimiento, sin embargo comparándolo con el control después de 15 días se observa una severa inhibición; a 12°C se observa que no se encontró crecimiento del hongo, sin embargo en el control se comenzó a desarrollar a partir del día 9 (Figura 1). Figura 1. Muestras de papaya tratada con recubrimiento de mucilago (izquierda) y papaya control (derecha). Conclusiones El mucílago de nopal en pruebas in vitro demostró que retarda las etapas de germinación y de esporulación del hongo Colletotrichum gloeosporioides. Las pruebas de inhibición in vitro por tiempo de crecimiento de los microrganismos demuestran que el tratamiento es efectivo por 72 horas. El mucílago de nopal presento una buena compatibilidad sobre la superficie de la papaya. 211 | P á g i n a Las pruebas de inhibición in vivo demuestran que el tratamiento inhibe el crecimiento de Colletotrichum gloeosporioides y no permite que la enfermedad se desarrolle por 15 días a una temperatura de 25±2°C, y por 30 días a una temperatura de 12±1°C. Los análisis de los indicadores de maduración pos cosecha indican que a 12°C la papaya continua su maduración, manteniéndose los estándares de calidad del fruto. Bibliografía 1. Aguirre-Cárdenas M., R. García-Delgado, R. González-González, A. JofreGarfias, R. Legorreta-Siañez, y J. F. Buenrostro-Zagal. 2007. 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Abril de 2012. página 212 | P á g i n a RESIDUOS AGROINDUSTRIALES: PUNTOS CRÍTICOS QUE LIMITAN SU APLICACIÓN COMO PRODUCTOS DE ALTO VALOR AGREGADO Luz María Alzate Tamayo, Dubán González, Nataly Saavedra Hortúa, María Victoria Álvarez, Sara Hincapié Ávila, Julián Londoño-Londoño* Facultad de Ingenierías, Grupo de Investigación en Ingeniería de Alimentos - GRIAL Corporación Universitaria Lasallista Caldas-Antioquia, Colombia *E-mail: [email protected] Categoría: Posgrado Introducción: Los residuos agroindustriales son fuente de compuestos bioactivos que tienen efectos benéficos sobre la salud humana, sin embargo, no han sido aprovechados debido, principalmente, a la falta de métodos de extracción efectivos para obtener sustancias con la calidad e innocuidad requerida para servir como materia prima en productos destinados al consumo humano. Adicionalmente, los costos de secado, almacenamiento y transporte de estos subproductos son factores que limitan económicamente su aplicación industrial. Objetivo: Desarrollar un modelo de aprovechamiento de residuos agroindustrial para la obtención de productos de alto valor agregado. Metodología: Las operaciones más críticas para el proceso fueron: 1) aseguramiento de la calidad microbiológica de la materia prima, 2) aplicación de métodos de secado (lecho fluidizado) para conservar la composición química, en especial los carotenos y la capacidad antioxidante, 3) metodologías limpias de extracción basada en la aplicación de fluidos supercríticos (CO2-SFE) para la obtención selectiva de carotenos. Resultados y conclusiones: Fue posible plantear una modificación del plan de manejo de residuos en un mercado público que genera más de 70 Tm/día de residuos orgánicos, obteniendo materias primas que cumplen parámetros microbiológicos y que al ser sometidas a un proceso de secado conservan su composición química, lo cual permitió finalmente la recuperación selectiva por CO2SFE del carotenoide luteína, una sustancia de alto valor agregado para la industria química, farmacéutica y de alimentos. Conclusiones: Para los residuos agroindustriales, es necesario cambiar el paradigma de basura por el de co-productos, así será posible plantear destinos viables para su aplicación. Palabras clave: residuos agroindustriales, inocuidad, extracción, valor agregado 213 | P á g i n a BIOACTIVE DIPEPTIDES IN MEAT AND MEAT PRODUCTS E. Szerdahelyia., A. Nagya., A. D. Alarcon-Rojob., H. Janacua-Vidalesc., E. Gelencsera a, Biology Unit, Department of Food Science, Central Environmental and Food Research Institute, Herman Otto u 15., H-1022 Budapest, Hungary. [email protected], [email protected], [email protected] b, Universidad Autonoma de Chihuahua, Periferico Francisco R Almada km 1 Chihuahua, Chih. 31453, Mexico. [email protected] c, Universidad Autónoma de Ciudad Juárez, Instituto de Ciencias Biomédicas, Departamento de Ciencias Veterinarias, Henri Dunant 4016. Ciudad Juarez, Chih., 32310, Mexico. [email protected] Introduction: There are many functional compounds found in skeletal muscle of vertebrate animals. The imidazole dipeptides (carnosine and anserine) are prominent among them, because they have multifarious physiological functions and therapeutic effects, such as neurotransmitters in the brain (Tomonaga et al., 2004), buffering capacities (Harris et al., 1990), antiglycation (Alhamdani et al. 2007) and antiischemic effects (Stvolinsky and Dobrota 2000), modification of enzymic activities (Jonson and Hammer, 1989), antineoplastic effects (Holliday and McFarland, 1996) antioxidant and membrane protective effect (Stuerenburg and Kunze 1999). The meat is the main contributor of supply of imidazole dipeptides in humans. The absorption of carnosine was investigated and verified in rat (Tomonaga et al., 2007), in minipig (Bauchart et al. 2007) and in pig models (Ma et al., 2010) and also in human studies (Park et al. 2005). Carnosine and anserine were suggested as biomarker of meat intake (Dragsted 2010). These dipeptides - as natural antioxidant in meat - are effective in preventing oxidative rancidity and undesirable colour changes during the storage of meat (Kohen et al. 1988) so they could be used as potential markers of meat quality. Das et al. (2005) found that carnosine preblending extended the shelf life of ground buffalo meat under refrigerated storage. Ma et al. (2010) reported that dietary supplementation with carnosine improves antioxidant capacity and quality of pork meat. The imidazole dipeptide content of meat varies from a few hundreds to a several thousands of ppm depending on the species of the animal (Zapp and Wilson 1938) metabolic type of the muscle (Cornet and Busset 1999), gender, age and breeding (Intarapichet and Maikhuntod 2005) and others. The content of imidazole dipeptides is significantly higher in glycolytic muscles than in oxidative type muscles (Aristoy and Toldrá 1988). 214 | P á g i n a The high anserine/carnosine ratio is typical of the poulty meat, in contrast with pork and beef meat (Peiretti et al., 2011). The imidazole dipeptides are fairly heat stable (Maikhunthod and Intarapichet, 2005), and unlike other endogenous polypeptides, they are relatively resistant to the hydrolytic breakdown of many common proteases (Bellia et al., 2011). In contrast with raw meat samples, few studies have described the effect of food technologies on imidazole dipeptides and the carnosine and anserine contents of processed food products (Hermanussen et al., 2010). Our aim is to assess imidazole dipeptides of selected meat samples and investigate the resistance of them against different food technologies, and study the digestive stability of carnosine. Capillary electrophoresis was developed for determination carnosine level in raw meat samples and meat based food products. Accute rat model was developed to assess carnosine release during digestion and absorption after oral administration of rats with meat models. Materials and methods: Longissimus dorsi (LD) and masseter (MS) muscles of pork (M0) was obtained from IRTA (Spain). Other raw meat samples of different species and cuts together with the processed meat samples were purchased from local supermarkets (Hungary and Mexico). Heat treatment: slices of about 2 millimetres were placed into small plastic bags and vacuum packed and cooked at 75 °C for 45 minutes (M1) or at 90 °C for 60 minutes (M2) minutes in thermostat controlled water bath, and finally cooled for 2 minutes in water ice bath. Extraction of imidazole dipeptides: Muscle and food were finely ground by a meat cutter. 5g of this sample was accurately weighed, and then fully homogenized with 10 ml of distilled water. The homogenates were centrifugated at 20000 g for 30 min. at 4 °C. The supernatant was deproteinized by treatment in boiling water for 10 minutes then centrifugated at 5000 g for 10 min. at 4 °C and the filtered through 0.45 µm membrane. Capillary zone electrophoresis (CZE): A BioFocus 2000 System (BioRad, Hercules, CA, USA) with UV detector was used for the experiments. The sample was separated in uncoated fused-silica capillary with dimension of 50 m I.D. and effective length of 45.5 cm, thermostated at 38 °C under voltage of 15 kV. As carrier electrolyte 100 mmol/l phosphate buffers (pH 2.5) was used. The dipeptides were detected at 200 nm. The concentrations were determined from peak area with calibration and the relative standard deviations were determined from three independent samples. 215 | P á g i n a Acute rat digestion model: Meat based model foods (500 mg) were homogenized in 1 ml distilled water by ultra turrax and giving to rats (Wistar,Toxi Coop kft, Hungary) by intragastic intubation. Animals in the control group were fed distilled water only. Rats were killed at different time points (0, 15, 30 60 min) after oral administration of meat and the gut was removed and washed out (stomach: 1ml ; small intestine : 2ml) with washing buffer (0,01M PBS, pH 7.4 containng 10 µl of 10mM PMFS per ml of washing solution). Gut fluids were centrifuged (3000 rpm, 15 min) and the supernatants were heated (100 °C, 10 min) and centrifuged (6000 rpm, 20 min) again. Supernatants of small intestine were freeze dried and reconstructed in 400 l distilled in water before measurements. Results: The developed CZE method is useful for determination of imidazole dipeptides in meat and also in heat treated products. The highest carnosine content was measured in a Mexican dried meat (beef and horse) product (Fig1). Cooking conditions did not modify meat carnosine contents in meat models (Fig. 2) and the carnosine bioavailability was not affected by cooking at different time point of observation. During digestion carnosine disappeared from the stomach digesta (Fig.3a) by the time and the same was observed in the small intestinal digesta (Fig. 3b). Fig.1. Imidazole dipeptides in Hungarian and Mexican meat products 1 stuffed pork shop, 2 salami (pork) 3 Debrecen sausage (pork), 4 smoked ham (pork), 5 Prague ham (pork), 6 liverwurst, 7 lunch ham (pork), 8 baked ham (pork) 9 chop ham (pork), 10 Wienerwurst (pork/beef) 11 liverwurst (beef/pork), 12 lunch meat (pork/beef/poultry) 13 Bologna sausage (beef), 14 turkey breast ham A, 15 turkey breast ham B, 16 chicken breast ham A, 17 chicken breast ham B, 18 turkey ham, 19 smoked turkey sausage, 20 frankfurter (turkey) 21 peperami salami (beef), 22 salami español 23 dried beef meat, 24 dried meat (beef/horse), 25 dried horse meat 216 | P á g i n a Fig. 2. Carnosine contents of Longissimus Dorsi (LD), Massater (MS) of individually slaughtered pigs (N=10); raw (M0) and cooked at for 10 min at 75 °C (M1) or 45 min at 90 °C (M2) samples. Carnosine, mg/kg Meat models a b Fig. 3. Effect of heat treatments on the realese of ingested carnosine in the stomach (a) and small intestine (b) measured after 15, 30 and 60 minutes giving LD based meat meals. Conclusions: The results can serve as scientific basis for the product development of functional foods or dietary supplements. Stomach Carnosine, mg/l Carnosine, mg/l Small intestine Acknowledgement: The research leading to these results has received funding from the Hungarian – Mexican Intergovernmental S&T Cooperation programme (TÉT_10-12011-0473) (CONACYTCooperación Bilateral México- Hungría (NIO) Proyecto 122010) and European Community’s Seventh Framework Programme DREAM (FP7/ 2007-2013) under the grant agreement n°FP7-222 654 217 | P á g i n a References: Alhamdani, M-S.S., Hasan Fayadh Al-Azzawie, H. F., Abbas, F.K.H. 2007, Peritoneal Dialysis International 27, 86–89. Aristoy, M-C., Toldrá, F., 1988, Meat Science 50, 327-332. Bauchart, C., Savary-Auzeloux, I., Mirand, P. P., Thomas, E., Morzel, M., Rémond, D., 2007, The Journal of Nutrition 137, 589-593. Bellia, F.,Vecchio, G., Cuzzocrea, S., Calabrese, V., Rizzarelli, E., 2011, Molecular Aspects of Medicine, 32, 258–266 Cornet, M., Bousset, J., 1999, Meat Science 51, 215-219 Das, A. K., Anjaneyulu, A.S.R., Biswas, S., 2005, Food Chemistry 97, 531-538. Dragsted, L. O., 2010, Meat Science 84, 301-307. Harris, R.C., Marlin, D.J., Dunnett, M., Snow, D. H., Hultman, E.,1990, Comparative Biochemistry and Physiology 97A, 249-251. Hermanussen, M., Gonder, U., Jakobs, C., Stegemann, D., Hoffmann, G. 2010, European Journal of Clinical Nutrition, 64, 88-98 Holliday, R., McFarland, G. A., 1996, British Journal of Cancer 73, 966-971. Intarapichet, K. O., Maikhunthod, B., 2005, Meat Science, 71, 643-642 Jonson, P., Hammer, J. L., 1989, Comparative Biochemistry and Physiology 94B, 45-48. Kohen, R., Yamamoto, Y., Cundy, K. C., Ames, B.N., 1988, Proccedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 85, 3175-3179. Ma, X.Y., Jiang, Z. Y., Lin, Y. C., Zheng, C. T., Zhou, G. L., 2010, Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition 94, 286-295. Maikhunthod, B., Intarapichet, K. O., 2005, Meat Science 71, 364-374. Park, Y. J., Volpe, S. L., Decker, E. A., 2005, Journal of Agricultural and Food Chemistry 53, 4736-4739. Peiretti, P. G., Medana, C., Visentin, S., Giancotti, V., Zunino, V., Meineri, G. 2011, Food Chemistry, 126, 1939-1947 Stvolinsky, S. L., Dobrota, D., 2000, Biochemistry (Moscow) 65, 849-855. Tomonaga, S., Tachibana, T., Takagi, T., Saito, E.S., Zhang, R., Denbow, D.M., Furuse, M., 2004, Brain Research Bulletin 63, 75-82. Tomonaga, S., Hayakawa, T., Yamane, H., Maemura, H., Sato, M., Takahata, Y., Morimatsu, F., Fureuse. M., 2007, Nutritional Neuroscience 10, 181-186. Zapp, J. A., Wilson, D.W., 1938, The Journal of Biological Chemistry, 126, 19-27 218 | P á g i n a ESTUDIO DE FACTORES DE PATOGENICIDAD EN CEPAS DE Streptococcus AISLADAS DEL POZOL 1Nallely Magaña, 2Carlos Eslava, 2Luis Perea, 2Alma Inzunza 1Gloria Díaz, 1Carmen Wacher 1Departamento 2Departamento de Alimentos y Biotecnología, Facultad de Química, UNAM, 04510 México, D.F., de Salud Pública, Facultad de Medicina, UNAM, 04510 México, D.F., [email protected] Categoría: Posgrado Resumen. En el pozol, bebida indígena de origen mexicano preparada a partir de masa de maíz nixtamalizada y fermentada, predominan las bacterias del género Streptococcus (1). Sin embargo, existe poca información con respecto a la presencia de factores de virulencia en los cultivos que pudieran utilizarse como iniciadores y sobre todo de su potencial de patogenicidad, por lo que antes de proponer el uso de estas bacterias como cultivos iniciadores o la introducción comercial de esta bebida, deberá asegurarse su inocuidad. El objetivo del presente trabajo es estudiar, en los Streptococcus aislados del pozol, características fenotípicas y genotípicas de los factores de patogenicidad considerados más importantes para este género; con la finalidad de determinar si es posible distinguir aquellos potencialmente patógenos de los que no lo son y así poder proponer su empleo como microorganismos probióticos. Teniendo como objetivos específicos determinar: la actividad hemolítica; la capacidad de adherencia a células epiteliales, que en el caso de S. pyogenes estas interacciones iniciales con el hospedero dan paso a la expresión de factores de virulencia e invasión, que contribuyen al desarrollo de la enfermedad (2); y la presencia del gen emm que codifica para la proteína M, principal antígeno de virulencia de los estreptococos del grupo A (3). Palabras clave: pozol, Streptococcus, patogenicidad Introducción. En México el pozol es la fuente principal de alimentación de muchas comunidades rurales, sobre todo de la zona sureste, siendo también consumido de manera habitual en otras regiones del país como bebida refrescante. Se valora su calidad nutricional, las propiedades curativas que se le atribuyen, y su importancia religiosa. En esta bebida predominan las bacterias del género Streptococcus (1). El género Streptococcus ha sido relacionado como parte de la microbiota fermentadora de varios alimentos tradicionales, y se sabe que su participación en estos procesos es importante. Este es el caso de S. infantarius subsp infantarius y otros miembros del complejo Streptococcus bovis / Streptococcus equinus (SBSEC por sus siglas en inglés), que están siendo aislados cada vez más de productos tradicionales lácteos y vegetales fermentados en Europa, México y África (4). Sin embargo, este género también incluye a microorganismos patógenos de importancia para el ser humano, entre ellos Streptococcus pyogenes, causante de “faringoamigdalitis estreptocócica” que puede producir fiebre reumática y cardiopatía (5), por lo cual es importante estudiar a estos estreptococos aislados de los alimentos fermentados -en este caso del pozol- y su posible uso como probióticos; descartando que existan factores de patogenicidad que puedan causar una enfermedad en quien los consuma. 219 | P á g i n a Metodología. Se obtuvieron 30 aislados a partir de la colección de estreptococos del pozol procedente de Villahermosa, Tabasco, del laboratorio 324 de Alimentos y Biotecnología de la Facultad de Química de la UNAM. Se determinó la presencia del gen emm que codifica para la proteína M mediante la técnica de PCR; se evaluó la actividad hemolítica mediante cultivo en agar sangre; y se observó el patrón de adherencia que estas bacterias presentan en células epiteliales HEp-2, comparándola con controles de cepas de E. coli para identificar el tipo de adherencia. Se utilizaron controles de cepas patógenas de S. pyogenes, las cepas Escherichia coli enteropatógena (EPEC) como patrón de adherencia localizada y E. coli 49766 como patrón de adherencia agregativa. Resultados. Ninguno de los estreptococos en estudio presentó el gen emm. El 56% presentó α hemólisis, y el 44% restante γ hemólisis. El 90% son adherentes a células HEp-2, mostrando patrones similares a los observados en las cepas control de E. coli, sin daño celular aparente (figura 1). Discusión. La proteína M es el principal antígeno de virulencia de los estreptococos del grupo A, ya que está relacionado directamente con la virulencia del organismo, y su acción antifagocítica protege a la bacteria patógena de la ingestión por los leucocitos, lo que le permite multiplicarse rápidamente e iniciar la enfermedad. También relacionados con este grupo, se encuentran los estreptococos beta hemolíticos (SBHGA) que producen infecciones severas en el ser humano. En cuanto a la adherencia, en los microorganismos patógenos se conoce su capacidad de adherencia específica a los epitelios y cómo esta interacción conduce a la posterior colonización responsable de la infección y al desarrollo de la enfermedad. No obstante, en relación a las bacterias Gram positivas con propiedades probióticas la adherencia tiene un papel benéfico, interfieren con la colonización de la mucosa intestinal por microorganismos patógenos, protegiendo al hospedero contra las infecciones gastrointestinales. Por ejemplo, las variedades patógenas de E. coli poseen adhesinas (estructuras de superficie celular), que les permiten colonizar diferentes regiones del epitelio intestinal. (6). 220 | P á g i n a En el caso de S. pyogenes ya mencionado antes en este trabajo, las adhesinas son las responsables de las interacciones iniciales de estas bacterias con el hospedero, para dar paso a la expresión de factores de virulencia e invasión, como lo es la proteína M (2). Las bacterias probióticas presentan sustancias poliméricas extracelulares (EPS) y material capsular que contribuyen al desarrollo de la matriz extracelular: las cápsulas y las biopelículas también pueden ser adhesinas. Dado el doble papel que presenta la capacidad de las bacterias para adherirse a la superficie intestinal, se ha realizado este tipo de ensayo y se describen las características observadas a fin de poder determinar el tipo de adherencia que presentan. Hasta ahora los resultados nos guían hacia la ausencia de patogenicidad de los estreptococos aislados del pozol: no muestran destrucción de eritrocitos y no poseen el gen emm, se adhieren a células en cultivo y no presentan algún mecanismo observable de adherencia que dañe a las células hospederas, lo cual es un resultado deseable para estas bacterias en estudio; teniéndose en cuenta que éste último es un criterio que puede utilizarse para comprobar el potencial probiótico de los mismos. Conclusiones. Los resultados indican que las cepas de Streptococcus sp. aisladas del pozol no presentan factores relacionados con la patogenia del género. Las cepas estudiadas se adhieren a células en cultivo, por lo que podrían colonizar el epitelio intestinal. Lo antes expuesto da elementos para sugerir su uso como microorganismos probióticos. Agradecimientos. Se agradece el apoyo del programa de becas de Conacyt. Bibliografía. (1) Diaz-Ruiz, G. Guyot, J.P., Ruiz-Terán, F. Morlon –Guyot, J., Wacher , C., 2003 Microbial and physiological characterization of weakly amylolitic but fast-growing lactic acid bacteria: a functional role in supporting microbial diversity in pozol, a Mexican maize beverage. Applied and Environmental Microbiology. 69: 4367-4374 (2) Nobbs, A. H.; Lamont, R. J.; Jenkinson, H. F. 2009. Streptococcus Adherence and Colonization. Microbiology and Molecular Biology Reviews. Vol. 73. No. 3. P. 407-450. (3) Alma Edna Inzunza-Montiel, Francisco Figueroa-Martínez, Leafar Pérez-Romano, Rocio Dávila-Mendoza, Raúl Garza Velasco, Alejandro Cravioto, Luis Manuel PereaMejía, 2004. Prevalencia de los genes (emm, speA, speC, sof, prtF y sic) asociados a la virulencia de cepas de Styreptococcus pyogenes de origen clínico. Bioquimia, Vol. 29 Suplemento 1. (4) Jans, C.; Christophe Lacroix & Leo Meile. 2011. A novel multiplex PCR/RFLP assay for the identification of Streptococcus bovis/Streptococcus equinus complex members from dairy microbial communities based on the 16S rRNA gene. FEMS Microbiol Lett 326 (2012) 144–150. (5) Kenneth J. Ryan, C. George Ray. 2011. Sherris. Microbiología Médica. 5a Edición. Mc Graw Hill. 703 pp. (6) Chavarín, 2010. Identificación de factores de colonización relacionados con la adherencia a células de bacterias lácticas aisladas del pozol. Informe de estanca posdoctoral. Facultad de Medicina, UNAM. 221 | P á g i n a EVALUACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE LAS ENZIMAS SINTASAS I, III Y LA UNIDA AL GRÁNULO DE ALMIDÓN EN GRANO DE TRIGO SEMBRADO CON Y SIN PANZA BLANCA. López Ahumada, Guadalupe Amanda1*; Ramírez Wong, Benjamín1; Sosa Aguirre, Carlos Rubén2. 1Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos, Universidad de Sonora. Hermosillo, Sonora. 2 Instituto de Ciencias Químico Biológicas de la Universidad Michoacana de san Nicolás de Hidalgo. Morelia, Michoacán. México. *[email protected], Posgrado. En el estado de Sonora, en los últimos años se ha presentado en el grano de trigo, un desorden fisiológico conocido como panza blanca; que se caracteriza por ser un grano almidonoso. Las características del almidón dependen en gran medida de su biosíntesis. El objetivo de esta investigación fue evaluar las enzimas sintasas I, III y la unida al gránulo de almidón, durante el desarrollo de trigo panadero con y sin el desorden fisiológico panza blanca. Para lo cual se sembró trigo panadero con panza blanca (TSCPB) y trigo sano (TSS) con 50, 150 y 250 Kg de nitrógeno. Se muestreó a los 8, 14, 21, 28 y 35 días después de la antesis, las espigas se congelaron con N líquido y se mantuvieron a -20°C hasta su uso. De los endospermos de trigo se obtuvo el ADNc que se sometió a RT-PCR cuantitativa, para medir la expresión de los genes en un equipo Light Cycler, modelo 480 de la marca System Roche, Se utilizó un diseño experimental completamente al azar. La máxima expresión de las enzimas fue entre los 14 y 21 días, en las sintasas I y III se observaron diferencias significativas (p≤ 0.05), siendo mayor en los TSCPB, en la sintasa unida al gránulo de almidón la expresión fue muy similar en las muestras. Se concluye que el almidón de TSCPB, presente cambios en la estructura de la amilopectina y que el de ambas 222 | P á g i n a PROPIEDADES VISCOELÁSTICAS EN MASA PARA CROISSANTS: EFECTO DE LA TEMPERATURA DE AMASADO Héctor Manuel Rocha Díaz*, María Almendra Álvarez Muro, Diego Alejandro Valdivia, Myrna Alicia Abraján Villaseñor, María Magdalena Ramírez Gómez Universidad Autónoma de Aguascalientes. Centro de Ciencias Agropecuarias. Departamento de Tecnología de Alimentos. Av. Universidad # 940, Ciudad Universitaria. C. P. 20100. Aguascalientes, Ags. México. *email: [email protected] Categoría: Licenciatura RESUMEN En panificación, las condiciones de procesamiento tienen un efecto directo sobre las propiedades viscoelásticas del producto final. El objetivo de este trabajo fue evaluar las características mecánicas de la masa para Croissants manipulada a diferentes temperaturas (18, 23 y 25º C), las variaciones en la temperatura de amasado fueron ajustadas por medio del agua, que actúa como medio de dispersión del resto de los ingredientes. Las muestras fueron evaluadas en el texturómetro modelo TA – XT plus, obteniendo la deformación (m) y el esfuerzo a la fractura (MPa). El mayor esfuerzo se obtuvo para la muestra amasada a 18º C, debido a que temperaturas más bajas ocasionan mayor “apelmazamiento” de los ingredientes, mientras que en la muestra amasada a 25º C se observó un nivel menor de deformación al mismo tiempo que se requiere de menor esfuerzo. Se concluye que muestras amasadas a 25º C, son masas maleables, y presentan mejores propiedades viscoelásticas y de retención de gas, debido a que éstas mostraron menor esfuerzo a la deformación y menor índice de deformación, lo que es indicio de su estabilidad una vez formadas las piezas, debido a que requieren menor trabajo mecánico a la vez que la red glutínica es mas elástica, lo que también presenta un notorio efecto sobre la estabilidad. Palabras clave: Masa, temperatura, deformación, esfuerzo mecánico. ABSTRACT During baking, processing conditions have a direct effect upon viscoelastic properties of the finished product. The aim of this work was to evaluate the mechanic characteristics of Croissants dough manipulated at different temperatures (18, 23 and 25° C), these variations in temperature where adjusted by the water, which plays a role as scattering medium of the rest of the ingredients. The samples were evaluated at the texturometer model TA – XT plus, obtaining by this the deformation (m) and the braking effort (MPa). The highest effort was obtained for the sample mixed at 18° C, because lowest temperatures causes more “caking” of the ingredients, while the sample mixed at 25° C obtained less deformation at the same time that less effort is required. It is concluded that samples mixed at 25° C, are going to be malleable doughs, and they present better viscoelastic properties and CO2 retention properties, due to they showed less effort to deformation, as well as deformation index, which are trace of their stability once the pieces had been formed, due to less mechanic work is required at the same time that the gluten grid is more elastic, which also presents a notorious effect above stability. Key words: Dough, temperature, deformation, mechanic effort. 223 | P á g i n a INTRODUCCIÓN Dentro del mundo de la panificación podemos decir que la fuerza, la tenacidad y la extensibilidad son parámetros que observamos en la masa cada vez que se le aplica alguna energía, como por ejemplo con la laminadora, los rodillos, las formadoras, etc. La fuerza en las masas de bollería aumenta gradualmente, por un lado, por la propia gasificación de la levadura, por la reducción de la masa a una lámina fina, así como por la propia proteína de la harina. Esta acumulación de fuerza ha de ser contrarrestada con periodos de descanso para permitir la relajación de esta energía, para que al volver a laminar, cortar la pieza o darle forma, éstas mantengan su formato y uniformidad. (Cauvan, Young, 2006). La formación de la estructura en los sistemas de masa para panificación es el resultado de la interacción entre las condiciones de procesamiento e interacciones subsecuentes en la fase proteica (Peressini, D., et. al., 2008). Como regla general, la masa es definida como el producto conformado por harina, agua, sal y condiciones de procesamiento. Dependiendo de dichas condiciones, las propiedades de la misma, tales como la viscoelasticidad y la capacidad de retención de gas pueden variar de un modo considerable. El gluten es la proteína que tiene mayor presencia en la masa de trigo, y es responsable de su comportamiento viscoelástico; esta proteína está conformada por monómeros de gliadina y polímeros que conforman a la glutenina. La fracción conformada por la glutenina es polidispersa, debido a que los diferentes monómeros que la conforman pueden ser recombinados en oligómeros e incluso agregados a otras estructuras proteicas. Es conocido entonces, que esta parte de glutenina que es agregada está relacionada directamente con las propiedades de la masa (Peressini, D., et. al., 2008). MATERIALES Y MÉTODOS Elaboración de la masa Se incorporaron los ingredientes tal como se indica en la siguiente formulación (tabla1): Nota: La harina se toma como base 100% y la cantidad del resto de los ingredientes se calcula tomando como base el peso de la harina. La masa formada fue separada en tres partes iguales para amasar a las tres diferentes temperaturas propuestas (18, 23 y 25º C), ajustando la temperatura del agua requerida para dicha operación mezclando en batidora “Kitchen”. Una vez obtenidas las tres diferentes muestra de masa, se formaron láminas de 0.3 cm, las cuales fueron cortadas en tiras de aproximadamente 10 cm de largo. Evaluación de las propiedades mecánicas 224 | P á g i n a Las tiras de masa obtenidas fueron sometidas a pruebas de elasticidad y resistencia a la fractura en el texturómetro modelo TA – XT plus, cada muestra por triplicado, con el fin de obtener la cantidad de deformación y el esfuerzo (MPa). Obtención de los gráficos esfuerzo – deformación Para efectos de interpretación de resultados, los parámetros de esfuerzo deformación fueron obtenidos en Mega Pascales y en metros, respectivamente. Durante la realización de las pruebas, el texturómetro arrojo los datos en términos de fuerza (kg), distancia (m) y tiempo (s) expresando los valores de la prueba en un gráfico con dichos términos hasta la ruptura de la masa. Siendo el valor de ruptura el que se observa en el pico más alto de la curva. Para obtener los valores en las unidades requeridas, la fuerza se transformó a Newtons a lo cual se le determinó su producto con la distancia, y posteriormente el residual con respecto al espesor de las láminas como valor constante para todos los tiempos tomados durante la prueba, al resultado se le realizó ajuste dimensional, es decir, el resultado que fue obtenido en Pascales, fue transformado a Mega Pascales, término que finalmente fue definido como la variable dependiente a la deformación de las láminas. La deformación de las láminas fue definida como la integral de la distancia expresada en milímetros, por lo que el resultado obtenido de dicha integración tuvo que ser transformado a metros. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Para cada una de las pruebas, se obtuvo una gráfica como la que se muestra en la Figura 1 En la tabla 2 se muestran los valores promedio de los resultados de las pruebas y obteniendo la desviación estándar. Tabla 2.- Valores promedio y desviación estándar de esfuerzo y deformación para las diferentes temperaturas de amasado. Figura 1.- Curva del comportamiento de la masa moldeada a 23º C durante la primera repetición. Donde: La prueba que muestra menor deformación y mayor esfuerzo para el rompimiento es con la temperatura de 25º C, aumentando la deformación conforme disminuye la temperatura, siendo ésta mayor a los 18º C. 225 | P á g i n a La temperatura final de la masa es un factor crítico durante el acondicionamiento de una masa leudada. (Kohli, et. al. 2001), en este sentido, se deben considerar otros factores (además de la temperatura del liquido de dispersión) que afectan a la misma, tales como el calor aportado por la maquinaria (batidora), asi como la temperatura del medio ambiente y temperatura inicial de ingredientes críticos como es el caso de la harina. CONCLUSIONES La temperatura final en la masa para “Croissants” durante el proceso de amasado, tiene gran relevancia para efectos de calidad; con temperaturas de 25º C, se obtienen masas con mayor resistencia, que presentarán mejores características reológicas, y consecuentemente organolépticas. REFERENCIAS Bufort S.L. Manual Panadero. Harinas Albacete, Alicante. Cauvan, Young. (2006). Productos de Panadería: Ciencia, Tecnología y Práctica. Pp. 211 – 217. Peressini, D., Peighambardoust, S.H., Hamer, R.J., Sensidoni, A., van der Goot, A.J. (2008). Effect of shear rate on microstructure and rheological properties of sheared wheat doughs. Journal of Cereal Science 48. Udine, Italy. Pp. 426 – 438. Quaglia, G. (1991). Ciencia y tecnología de la panificación. Segunda edición. Acribia. Zaragoza, España. Pp. 242 – 243. 226 | P á g i n a EFECTO DE LEVADURA (saccharomyces cerevisiae) Y ALMACENAMIENTO CONGELADO SOBRE TEXTURA, VOLUMEN Y PÉRDIDA DE PESO EN MASA INTEGRAL PARA PAN DULCE. Patricia Lizeth Flores Meraz1, Miriam Medina Maldonado1, Vicente Ledezma García2, Jorge Aguilar Valenzuela2, Gerardo Chew Madinaveitia2. Universidad Juárez del Estado de Durango, Facultad de Ciencias Químicas Campus Gómez Palacio Durango. Av. Artículo 123 s/n Fraccionamiento Filadelfia Gómez Palacio Durango México. Licenciatura. El pan es un alimento básico, es por esto que en los últimos años, la industria de la panificación se ha aprovechado de las ventajas de la tecnología de la congelación. La aplicación de bajas temperaturas en la panificación proporciona una manera fácil de procesar diferentes tipos de pan y masas (fresco, refrigerado y congelado), que garantice una tasa constante de crecimiento de este campo. El objetivo de este trabajo fue determinar sí el incremento del porcentaje de levadura (saccharomyces cerevisiae) en conjunto con el tiempo de almacenamiento congelado en la elaboración de masa integral para pan dulce, modifica significativamente la textura, el volumen y la pérdida de peso a la hora de ser horneada. Metodología: El diseño experimental realizado fue un ANOVA unifactorial con cuatro repeticiones, modificando la concentración de levadura (saccharomyces cerevisiae) (3%, 4% y 5%) y el tiempo de almacenamiento congelado (7, 14 y 28 días) y un control. Los factores evaluados en el pan horneado a base de la masa congelada, fueron textura, volumen y el porcentaje de pérdida de peso. Los resultados obtenidos revelan que el aumento en la concentración de levadura y el almacenamiento congelada afectan significativamente las características del pan horneado. En la medición de textura, los resultados muestran que el tratamiento 8 con 5% de levadura y había sido congelado por 14 días, es el que presentó las características más similares al control, mientras que para el estudio del volumen y el porcentaje de pérdida de peso, el tratamiento que obtuvo los mejores resultados, siendo estos, los más parecidos al control, fue el tratamiento 9 que corresponde al 5% de levadura y 28 días de almacenamiento congelado. Se logra concluir que agregar 5% de levadura y almacenar la masa por 28 días en congelación nos permite tener un volumen igual al de un pan recién horneado y tener una menor pérdida de peso a la hora de ser horneada. Palabras clave: levadura, almacenamiento congelado, masa integral. 227 | P á g i n a UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE QUÍMICA Departamento de Alimentos y Biotecnología 3M™MÉXICO Servicios Profesionales Microbiología VALIDACIÓN DEL MÉTODO DE PLACAS 3M™ PETRIFILM™ FRENTE AL MÉTODO TRADICIONAL PARA EL RECUENTO DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS EN PRODUCTO CÁRNICOS PROCESADOS MEXICANOS. Olga Velázquez Madrazo1, Pedro Durán León1, Guadalupe Mondragón Herrera2 1Universidad Nacional Autónoma de México, Facultad de Química. Facultad de Química, Departamento de Alimentos y Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México, México D.F. 04510, México. 2 3MTM México. [email protected] Palabras clave: Bacterias ácido lácticas, Petrifilm, BAL en cárnicos procesados Categoría: Licenciatura OBJETIVO Validar el uso de las placas 3M™Petrifilm™ AC para la determinación de Bacterias Ácido Lácticas (BAL) en productos cárnicos procesados producidos en México. RESUMEN En todos los países, las leyes y reglamentos relativos a la producción industrial y comercialización de alimentos establecen especificaciones microbiológicas para los alimentos más importantes y/o para los que implican mayores riesgos para el consumidor. Las empresas que producen alimentos tienen la obligación, por lo tanto, de hacer los análisis microbiológicos para demostrar que sus productos cumplen dichas especificaciones (Forsythe, 2002). La realización de análisis microbiológicos es, sin duda, una actividad laboriosa y que requiere de total dedicación de profesionales especializados en la industria o en laboratorios de servicio. Un problema aun mayor es la estandarización ya que pequeñas variaciones debidas al personal, entre turnos o plantas, pueden llevar a resultados significativamente diferentes en los análisis (Barembuem, 2003). De ahí el amplio desarrollo que en los últimos años, han tenido los métodos rápidos y los medios de cultivo ya preparados, entre los que destacan las Placas 3MTM Petrifilm™. Éstos facilitan a la Industria la estandarización de procesos analíticos, agilizan los análisis y facilitan la interpretación. Todo ello hace que se reduzcan los costos en general, por lo que muchas industrias están interesadas en utilizarlos para hacer más productivos sus procesos (3MTM Food Safety, 2006). Las Placas 3MTM PetrifilmTM AC para recuento de aerobios, en combinación con caldo MRS (Man, Rogosa and Sharpe) y una incubación anaerobia favorecen el crecimiento de bacterias ácido-lácticas (BAL) homo y heterofermentativas. Adicionalmente, 3MTM PetrifilmTM ha desarrollado otro método para el recuento de BAL en el cual se incorpora rojo de clorofenol como indicador de pH al caldo MRS y la incubación se lleva a cabo aeróbicamente (3MTM Food Safety, 2006). La determinación de BAL es muy importante en los productos cárnicos procesados porque son las responsables del deterioro de estos productos empacados al vacío, generando olores, sabores y viscosidad indeseables. Por ello, el recuento de BAL puede ser muy útil en la determinación y seguimiento de la vida de anaquel de productos cárnicos procesados y empacados al vacío (3MTM Food Safety, 2006). Aunque los métodos de 3MTMPetrifilmTM cuentan con validaciones internacionales que incluyen algunas de AOAC, se requiere de una validación para utilizarlos en matrices alimentarias específicas; ésta consiste en comparar, verificar y documentar la eficacia del método. 228 | P á g i n a Este trabajo ha permitido validar el nuevo método 3M™Petrifilm™ con incubación aerobia (PFAE), frente al método tradicional (MT) de vertido en placa con agar MRS e incubación en anaerobiosis (Hirata, 2006), para la determinación de BAL en matrices mexicanas de jamón. Éstas se inocularon con dos cepas de BAL aisladas de los mismos productos y una de Leuconostoc mesenteroides (NRRL 512F) proporcionada por el Cepario de FQ, UNAM. El análisis estadístico mostró que no hay interferencia de las matrices con la determinación por el método Petrifilm™ y que no hay diferencias estadísticamente significativas entre los métodos, por lo que ambos pueden utilizarse con certeza. Cabe resaltar la comodidad del método PFAE al no requerir anaerobiosis y por la facilidad de interpretación; además, permite distinguir a las BAL homofermentativas de las heterofermentativas que presentan gas atrapado en la película. METODOLOGÍA Las muestras fueron suministradas por el fabricante: Sigma Alimentos y se utilizaron los siguientes productos: Jamón de cerdo y pavo marca FUD y Jamón de pavo marca FUD. Las muestras en presentación comercial de 250 g, empacadas al vacío, se mantuvieron en refrigeración hasta el momento del análisis. La validación consistió en determinar si existe o no diferencia estadísticamente significativa entre los métodos siguientes para el recuento de BAL: 96 h, en jarra de anaerobiosis marca Gas Pack con sobre generador correspondiente. Para el recuento por MT, se ajustó el pH a 5.5 con ácido acético glacial estéril (APHA en Pouch, 2011). indicador de pH (rojo de clorofenol LabMedia, 42 mg/100 mL de caldo). Se siembra una mezcla de 0.5 mL de MRS y 0.5 de la dilución de la muestra, en placas 3M™Petrifilm™ AC; incubación a 37°C por 36 h, en condiciones aerobias. La fig 1 muestra todo lo realizado. Figura 1. Metodología general Todas las muestras fueron analizadas por duplicado, diluyendo 10 g de la muestra en 90 mL de buffer de fosfatos estéril (1:10). Esta es la dilución de la muestra que se inoculó intencionalmente y se analizó por ambos métodos. 229 | P á g i n a Para inocular intencionalmente las matrices se utilizaron inóculos estandarizados: Una cepa de Leuconostoc mesenteroides (NRRL 512F) proporcionada por el Cepario de la Facultad de Química de la UNAM y dos cepas aisladas de las muestras comerciales estudiadas inicialmente. Las cepas se identificaron como: Lactococcus lactis spp lactis y Lactobacillus brevis. Las matrices inocularon con un nivel medio de ~ 100 ufc de BAL/ mL de dilución 1:10, a partir de cultivos de 24 h en MRS incubado en anaerobiosis con GasPack. RESULTADOS Y DISCUSIÓN A partir de los logaritmos de los promedios obtenidos de BAL en jamón de cerdo y pavo FUD, inoculado con L. mesenteroides (NRRL 512F) se aplicó, la prueba tStudent pareada, nivel de significancia de 5%. El resultado muestra que no existen diferencias significativas entre Las metodologías, ya que P=0.397 siendo P>0.05. Los promedios obtenidos por MT fueron de 0.520 y por PFAE de 0.764. El gráfico de distribución de datos (fig. 2) muestra media y dispersión de los recuentos obtenidos. Fig 2. Log de ufc/g de muestra de los promedios de los recuentos de BAL en jamón de cerdo y pavo FUD inoculado intencionalmente con Leuconostoc mesenteroides. En la fig 2. se aprecia que el método tradicional (MT) genera un promedio ligeramente más bajo y una mayor dispersión de datos; al no encontrarse diferencias significativas estadísticamente Petrifilm resulta ser un método confiable y sensible, que presenta además otras ventajas: menor tiempo de incubación (48 horas) vs. 96 h referidas en el Compendio de Métodos de Análisis de la APHA y facilidad en la lectura gracias a la visibilidad de las colonias lo que minimiza errores. El resumen de los resultados obtenidos es el siguiente: 230 | P á g i n a Tabla 1. Comparación de MT y PFAE mediante t-Student pareada, significancia 5% CONCLUSIONES placas 3MTMPetrifilm™AC (con rojo de clorofenol y en aerobiosis) en matrices cárnicas cocidas y empacadas al vacío, elaboradas en México; jamón de cerdo y pavo y en jamón de pavo; se demostró que éstas no inhiben el crecimiento y desarrollo de las BAL en las placas 3MTM PetrifilmTM. TMPetrifilm TM aerobio frente al Método Tradicional (MT) para la determinación de BAL en jamones de pavo y de cerdo y pavo. No hay diferencias estadísticamente significativas entre ambas metodologías. material, medios, tiempo y espacio de incubación. El método PFAE no requiere anaerobiosis, lo que implica comodidad y ahorro; es una metodología más rápida que el MT, los resultados son más fáciles de interpretar y permite distinguir BAL heterofermentativas. BIBLIOGRAFÍA Barembuem C. 2003. Guía para Validación de Métodos de Ensayo, Organismo Argentino de Acreditación, Argentina, 26/09/2003. Durán de León, P. Evaluación de placas PetrifilmTM para el recuento de bacterias lácticas en productos cárnicos procesados y para estimación de vida de anaquel. Tesis de Licenciatura en Química de Alimentos. Facultad de Química, UNAM. 2012. México. Forsythe, S.J & P.R. Hayes. 2002. Higiene de los Alimentos, microbiología y HACCP. Acribia, Zaragoza. García E., Gago L., Fernández J.L., 2006. Tecnologías de envasado en atmósferas protectoras. Vt mi+d. Disponible en: http://www.madrimasd.org/informacionidi/biblioteca/publicacion/doc/vt/vt3_tecnologias _de_envasado_en_atmosfera_protectora.pdf Hirata Polanco, M.E. 2006. ¿Por qué validar métodos analíticos? Instituto Argentino de Normalización. Disponible a través de internet: http://www.scribd.com/doc/4925527/porque-validar-metodos-analiticos Pouch F., Ito K., 2001 Compendium of methods for the microbiological examination of foods, fourth edition, American Public Health Association. USA. 3M México. 2006. Food Safety. Placas Petrilfilm™3M™. 3M en el mundo. Cuidado de la Salud. Disponible a través de Internet en: http://www.3m.com/cms/MX/es/0253/kRecrFS/view.html 231 | P á g i n a EVALUACIÓN DE CALIDAD DE TOMATE (Lyopersicon esculentum) DE TRES VARIEDADES COMERCIALES MEDIANTE TÉCNICA DE INJERTO Y PODA DE FRUTOS. Ramírez Flores Romana1, Chew Madinaveitia Rodolfo G1, Aguilar Valenzuela Jorge1, Chew Madinaveitia Yasmín I 2. Facultad de Ciencias Químicas1. División de Estudios de Posgrado e Investigación. Av. Articulo 123 S/N Fracc. Filadelfia. Gómez Palacio, Dgo. Instituto Nacional de investigaciones forestales, agrícolas y pecuarias. Matamoros, Coah. 2 [email protected] DIVISIÓN DE POSGRADO La demanda de tomate fresco para consumo y materia prima para la industria alimenticia requiere mejorar los aspectos en calidad como calibre, firmeza, pH, grados brix, número de lóculos, espesor de pericarpio y color del mismo. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del tipo de planta, injertada y sin injertar, en la calidad de 3 variedades comerciales de tomate Sahel, Kikapoo y Aníbal. Las variedades fueron injertadas sobre el portainjertos multifort y sometidas al manejo cultural de podas a 4 y 5 frutos por racimo y sin poda, en un ciclo largo de producción en la Comarca Lagunera (agosto 2011- agosto 2012), dividido en periodos precoz, intermedio y tardío, bajo condiciones protegidas. El diseño experimental fue multifactorial con tres repeticiones. Los resultados fueron: calibre: 5.2 cm, firmeza: 0.8 N, pH: 4.5 y grados brix: 4.13; para planta injertada: calibre: 4.9 cm, firmeza: 0.68 N, pH: 4.3 y grados brix: 3.9 para planta sin injertar, la tendencia se mantuvo a lo largo el ciclo de producción. En cuanto al número de lóculos y espesor de pericarpio fueron iguales entre los tratamientos. No hubo diferencia significativa en parámetros del color L, *a, *b y estado de maduración de los frutos a/b. El incremento de atributos se debe al injerto mejorando la calidad del tomate. Palabras clave: Tomate, calidad, injerto y podas. 232 | P á g i n a ESTUDIO DE LAS CONDICIONES HIGIÉNICO-SANITARIAS EN TORTILLERÍAS Santos-Lara Mirna Elizabeth, Quevedo-Garza Patricia Amanda, Soto-Vázquez Pedro, TreviñoChapa Melissa, Cantú-Martínez Pedro César. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓN FACULTAD DE SALUD PÚBLICA Y NUTRICIÓN AVE. DR. EDUARDO AGUIRRE PEQUEÑO Y YURIRIA, COL. MITRAS CENTRO MONTERREY, NUEVO LEÓN, MÉXICO C.P. 64460 CORREO ELECTRÓNICO: [email protected] CATEGORÍA: LICENCIATURA En la cocina mexicana son populares las tortillas de maíz, a finales del siglo XIX comenzaron a aparecer en México las primeras tortillerías mecánicas, y para su elaboración se requiere cumplir con los requisitos que marca la NOM-187SSA1/SCFI-2002.Por lo que nos dimos a la tarea de identificar las condiciones higiénico-sanitarias que prevalecen en los establecimientos que se dedican a la elaboración de tortillas. Realizando un estudio piloto en 30 tortillerías del Área Metropolitana de Monterrey, de mayo a junio del 2013; utilizando como instrumento de evaluación 12 parámetros de acuerdo a personal, instalaciones físicas, instalaciones sanitarias, expendios a granel, acordes a la NOM 187-SSA1/SCFI-2002. Los parámetros con mayor índice de incumplimiento en la NOM 187-SSA1/SCFI-2002 fueron: falta de lavabos 53 %, uniforme de trabajo 60 %, lavado de manos adecuadamente y manipulación de dinero con la mano 70 %, falta de capacitación 73%. Las tortillerías son el quinto giro con mayor número de empresas en México, los estudios versan particularmente en aspectos económicos referentes a la venta del producto. La Secretaría de Economía ha determinado un rezago tecnológico y efectos contaminantes en el producto. Mientras que nuestro estudio identifica el cumplimiento de la especificaciones sanitarias en establecimiento para la elaboración de tortillas. Siendo la tortilla un alimento de alto consumo, representando un riesgo para la salud, cuando su elaboración no cumple con la NOM-187-SSA1/SCFI-2002 que se creó con el propósito de normalizar la calidad del producto en México. Palabras claves: Tortillerías, Condiciones higiénico-sanitarias, Calidad. INTRODUCCION. México es el principal consumidor de tortilla en el mundo, pues se estima que es consumida por el 94% de la población, por lo que el volumen de producción y consumo es cercano a los 12 millones de toneladas de tortillas por año, lo que representa un porcentaje importante entre los productos alimentarios comercializados en el país. Cabe también señalar que es un alimento de suma importancia en la alimentación de diversos países de Centroamérica. 233 | P á g i n a La elaboración de tortillas en América Central es, probablemente, el trabajo que más tiempo y esfuerzo diario exige a la mujer rural y a muchas que viven en zonas urbanas. En la cocina mexicana, a finales del siglo XIX comenzaron a aparecer en México las primeras tortillerías mecánicas, siendo en la actualidad las más utilizadas, que consisten en maquinaria (molino y horno de gas). Este procedimiento lo encontramos sobre todo en áreas urbanas, donde la necesidad de adquirir los alimentos ya preparados resulta fundamental para el ama de casa, quien generalmente tiene otras actividades que le impiden elaborar las tortillas directamente. A raíz de ello, el proceso se concentra generalmente en una pequeña industria que da servicio al barrio o colonia en que se ubica. Este tipo de empresa funciona generalmente con trabajo asalariado y utiliza masa de maíz pre-elaborada industrialmente. Actualmente, se siguen buscando alternativas para hacer más barato y menos contaminante la elaboración de tortillas, a la par que se busca enriquecer sus propiedades nutrimentales. Por esta razón se elaboró la NOM-187-SSA1/SCFI-2002, Productos y servicios. Masa, tortillas, tostadas y harinas preparadas para su elaboración y establecimientos donde se procesan. Especificaciones sanitarias. Información comercial. Métodos de prueba. Al no haber suficientes estudios que nos hablen de las condiciones higiénicosanitarias que prevalecen en los establecimientos que se dedican a la elaboración de tortillas. Las investigaciones relacionadas con este tema buscan mejorar las condiciones económicas, nutricionales, usos y de seguridad e higiene para el personal. Se propuso revisar el punto específico 6.2 de la NOM, correspondiente a personal, instalaciones físicas, instalaciones sanitarias, expendios a granel. OBJETIVO GENERAL. Identificar las condiciones higiénico-sanitarias que prevalecen establecimientos que se dedican a la elaboración de tortillas en los OBJETIVOS ESPECÍFICOS: Identificar el nivel de cumplimiento de las especificaciones sanitarias establecidas por la NOM-187-SSA1/SCFI-2002. Estimar la calidad higiénica del proceso de la elaboración de la tortilla de maíz. MATERIAL Y MÉTODOS. Se realizó un estudio piloto, descriptivo, observacional, en tortillerías del área metropolitana de Monterrey, de mayo a junio del 2013, utilizando una encuesta como instrumento de evaluación a 30 establecimientos, en donde se seleccionaron 12 parámetros de la NOM-187-SSA1/SCFI-2002, correspondiente al punto especifico 6.2 de este giro, a personal (Tabla 1), instalaciones físicas (Tabla 2), instalaciones sanitarias y expendios a granel (Tabla 3), valorando el nivel de cumplimiento. Se realizaron las observaciones de un total de 30 tortillerías por personal capacitado, donde se calificó el cumplimiento o no cumplimiento de los artículos de este punto. Se contó el nivel de cumplimiento en cada uno de los puntos, para obtener un porcentaje total y así se logró realizar un diagnostico situacional de los establecimiento e identificar los riesgos y daños a la salud que se pueden ocasionar. 234 | P á g i n a Tabla 1. Condiciones Específicas 6.2, correspondientes a 6.2.1 Personal Articulo Indicador Cumple % 6.2.1.1 El personal debe presentarse aseado al área de trabajo y con ropa limpia. Durante el tiempo que duren sus labores debe usar uniforme limpio, bata o mandil y una protección que cubra totalmente el cabello. El personal que está en contacto directo 40 con el producto, que lo manipule antes de su envasado o que tenga barba o bigote debe usar cubre boca. 6.2.1.2 Lavarse las manos con agua y jabón, secarse con toallas desechables o secador de manos, antes de iniciar el trabajo y después de cada ausencia en el mismo y en 30 cualquier momento en que las manos estén sucias. 6.2.1.3 El personal que está en contacto directo con el producto o que lo manipule debe mantener las uñas cortas, limpias y libres de esmalte para uñas y el rostro sin 65 maquillaje. 6.2.1.4 No deben trabajar en el área de proceso o venta personal que presente enfermedades contagiosas. Las cortadas o heridas sobre la piel deben cubrirse 70 apropiadamente con material impermeable. 6.2.1.5 El personal que manipule dinero no debe tocar directamente con las manos el producto para lo cual debe aplicar cualquiera de las siguientes indicaciones: a) Usar guantes desechables o bolsas de plástico cuando se manipule el producto y quitárselo cuando manipule dinero. Los guantes o bolsas deben sustituirse al 60 menos en cada reanudación de operaciones o cuando se hayan deteriorado. b) Asignar una persona para manipular el dinero y que ésta no tenga contacto directo con el producto 6.2.1.6 El personal debe estar capacitado y cumplir con las buenas prácticas de higiene. Los responsables del proceso deben contar con la evidencia documental de dicha 27 capacitación. Fuente: Indicadores de NOM-187-SSA1/SCFI-2002 Tabla 3. Condiciones 6.2 Específicas correspondientes a 6.2.4 Proceso Articulo Indicador No cumple % 60 70 35 30 40 73 Cumple % No cumple % 89 11 95 5 80 20 6.2.4.1 Expendios a granel. 6.2.4.1.1 Las mesas y mostradores que se utilicen en el expendio de masa, tortillas y tostadas deben estar limpias y ser de superficies lisas, de material inocuo e impermeable, con la finalidad de facilitar su limpieza. 6.2.4.1.2 Para la protección de la masa y las tortillas, se deben emplear recipientes o lienzos limpios. 6.2.4.1.3 Sólo se permite reprocesar masa, tortillas y tostadas que en la línea de producción hayan presentado lo siguiente: a) Cambios en su forma como: dobladas, quebradas o agujeradas. b) No haber sido expuestas a contaminación (polvo, grasa de la maquinaria, contacto con el piso, entre otros). c) Se debe asegurar que reúnan las características de olor, color y sabor propios; que indican que son aptas para su reproceso. d) El desperdicio o residuo que quede en las tolvas de la maquinaria al terminar la jornada no se debe incorporar al proceso del día siguiente. Fuente: Indicadores de NOM-187-SSA1/SCFI-2002 Tabla 2. Condiciones Específicas 6.2 Correspondientes a 6.2.2. Instalaciones físicas y 6.2.3 Instalaciones sanitarias Articulo Indicador 6.2.2.1 6.2.2.2 6.2.2.3 6.2.2.4 Los establecimientos deben proveerse de instalaciones sanitarias para lavarse las manos en el área de elaboración y venta. No debe tener comunicación directa con habitaciones. No debe utilizarse como habitación o dormitorio ni permitirse la presencia de animales de ningún tipo. Los establecimientos que expendan además otros alimentos, deben tener áreas o secciones específicas y delimitadas para su almacenamiento y exhibición. 6.2.3.1 Los servicios sanitarios no deben usarse como bodega, ni para otros fines distintos a los que están destinados. Fuente: Indicadores de NOM-187-SSA1/SCFI-2002 Cumple % 47 No cumple % 53 65 85 35 15 58 42 70 30 235 | P á g i n a RESULTADOS. Las áreas evaluadas se consideran vulnerables debido a que pueden afectar la calidad e higiene del producto, en este caso pudimos observar que dentro de los establecimientos de elaboración de tortilla prevalece el incumplimiento de la higiene del personal, en donde un 60% de las tortillerías no cumple con los requisitos que muestra la Figura 1, además de desconocer el correcto lavado de manos y no estar capacitado en cuanto a las buenas prácticas de higiene (Figura 2). Las instalaciones físicas y sanitarias de los establecimientos de producción de tortilla de maíz carecen de una estación de lavado de manos (Figura 3). Durante las etapas del proceso de la elaboración de la tortilla se distinguen puntos críticos en donde existe riesgo de contaminación que el manipulador debe conocer a través de capacitación (Figura 4), un ejemplo es la adecuada protección de la masa y la limpieza de las superficies, todos ellos favorables en el presente estudio (Tabla 3). Figura 1. El personal debe presentarse aseado al área de trabajo; uniforme o ropa limpia, protección que cubra totalmente el cabello y cubreboca. El personal debe El personal presentarse debe presentarse aseado al área de aseado al trabajo y con área de trabajo y con ropa… Lavarse las Lavarselaslas Figura 2. Lavarse manos con agua y jabón, secarse con manos con toallas desechables o secador de manos, antes de iniciar el manos con agua trabajo y después de cada ausencia en el mismo y enycualquier agua y momento en que las manos estén sucias. jabón, jabón, secarse con toallas… secarse con toallas… ropa… Fuente: Indicadores de NOM-187-SSA1/SCFI-2002 Figura 3. Los establecimientos deben proveerse de instalaciones sanitarias para lavarse las manos en el área de elaboración y venta Cumple % Los estableci mientos deben provee… No cumple % Los estableci mientos deben provee… Fuente: Indicadores de NOM-187-SSA1/SCFI-2002 Fuente: Indicadores de NOM-187-SSA1/SCFI-2002 Figura 4. El personal debe estar capacitado y cumplir con las buenas prácticas de higiene. Los responsables del proceso deben contar con la evidencia documental de dicha El personal capacitación. El personal debe estar capacitado y cumplir con las buenas… Fuente: Indicadores de NOM-187-SSA1/SCFI-2002 236 | P á g i n a debe estar capacitado y cumplir con las buenas… ANÁLISIS. Considerando que las tortillerías son el quinto giro con mayor número de empresas en México, los estudios versan particularmente en aspectos económicos referentes a la venta del producto. La Secretaría de Economía ha determinado un rezago tecnológico y efectos contaminantes en el producto. Mientras que nuestro estudio identifica el nivel de cumplimiento de la especificaciones sanitarias en establecimiento para la elaboración de tortillas. Las especificaciones de la presente norma nos conducen a mejorar la calidad y la higiene del producto. Existen pocas publicaciones que evalúen la higiene de los establecimientos de elaboración de tortilla de maíz; sin embargo, es importante conocer los puntos críticos del proceso para evitar las enfermedades trasmitidas por los alimentos. En este caso, se deberá prestar atención al almacenamiento de la materia prima debido a que puede generar hongos los cuales provocan contaminación por medio de micotoxinas con alto grado de toxicidad. La falta de capacitación del personal sobre la manipulación de alimentos, es un riesgo para la salud del consumidor ya que numerosas enfermedades pueden ser transmitas por medio de bacterias, virus y parásitos. Si hablamos de calidad del producto final, de acuerdo a los incumplimientos del presente estudio, podemos encontrar un producto contaminado por material biológico, es decir cabello o uñas y por contaminación física, como la joyería las cuales pueden provocar un accidente en la maquinaria. CONCLUSIONES. Los criterios de evaluación utilizados en el presente estudio arrojan resultados preliminares negativos acorde a la calidad higiénico sanitaria que se desarrolla en los establecimientos de elaboración de tortillas de maíz. Sin embargo, sería interesante conocer si estos incumplimientos afectan la higiene de la tortilla y por consecuente provocan enfermedades de transmisión alimentaria, por lo tanto sería necesario aplicar un cuestionario más detallado y una serie de análisis sanitarios para identificar los puntos críticos en donde podría verse alterada la calidad sanitaria de la tortilla. REFERENCIAS: Salud, S. d. (07 de mayo de 2002). NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-187-SSA1/SCFI-2002, PRODUCTOS Y SERVICIOS. MASA, TORTILLAS, TOSTADAS Y HARINAS PREPARADAS PARA SU ELABORACION Y ESTABLECIMIENTOS DONDE SE PROCESAN. ESPECIFICACIONES SANITARIAS. INFORMACION COMERCIAL. METODOS DE PRUEBA. Albores, A. M. (agosto de 2007). Aflatoxinas en las tortillas de maíz. Revista ciencia y desarrollo. Amador, L. (diciembre de 2005). La tortilla. Economía, S. d. (abril de 2012). Análisis de la cadena de valor maíz-tortilla: situación actual y factores de competencia local. públicas, C. d. (febrero de 2007). México: el mercado del Maíz y la agroindustria de la tortilla. Rangel, E., Abel, M., Griselda, V., & Jesús, C. (2004). NIXTAMALIZACIÓN, ELABORACIÓN Y CALIDAD DE TORTILLA DE MAÍCES DE ECATLÁN, PUEBLA, MÉXICO. Agrociencia. Cruz, H. E. y Verdalet, G. I. (2007). Tortillas de maíz una tradición muy nutritiva. Revista de Divulgación Científica y Tecnológica de la Universidad Veracruzana. Vol. XX numero 3. 237 | P á g i n a CONTENIDO DE LICOPENO EN ALIMENTOS DE USO COTIDIANO PARA UNA DIETA HIPOLIPEMIANTE Palabras clave: licopeno, carotenoides, hipolipemiante *Cruz- Bojórquez R.1, Pérez- Flores V.2, Ramayo-Chacón, G.2, Rubio-Zapata, H.1, González-Gallego, J.3, Sánchez-Collado, P.3 1 Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Yucatán, México.* Av. Itzaes No. 498, Col. Centro, Mérida Yucatán, México C.P. 97000. Correo electrónico: [email protected] y [email protected] 2 Facultad de Ingeniería Química, Universidad Autónoma de Yucatán, México. 3 Departamento de Ciencias Biomédicas, Universidad de León, España. Categoría: Posgrado Objetivo General: determinar el contenido de licopeno en 100 g de alimento de uso cotidiano para promover su consumo en dietas hipolipemiantes. Resumen: debido al reconocimiento científico que actualmente se le ha dado a los efectos antioxidantes de algunos alimentos sobre la salud, los consumidores se interesan cada vez más en saber cuál es la riqueza antioxidante de los productos que se ofrecen en el mercado. Hasta hace poco la presencia de la palabra “antioxidante” en las etiquetas de los productos o como resultado de las promociones o campañas mercadotécnicas fue suficiente para atraer a los consumidores hacia esos productos; recientemente, los consumidores exigen conocer el contenido de estos compuestos de manera cuantitativa y sustentada en las etiquetas de los alimentos procesados y en los alimentos frescos, con la intención de aprovechar sus efectos en beneficio de su salud. Por otro lado, los profesionistas de la nutrición buscamos estrategias dietéticas, de bajo costo y fáciles de seguir, que podrían significar ahorro de recursos económicos en el tratamiento y control de las enfermedades crónicas. Se ha demostrado (Rao, 2002; Kun, et al., 2007; Santosh et al., 2010) que el consumo de antioxidantes como el licopeno puede reducir el riesgo de enfermedades cardiovasculares, protegiendo a los lípidos debido a que evita que las LDL se oxiden y produzcan daños en la membrana celular. El licopeno es un carotenoide que se encuentra principalmente en alimentos como el tomate, la sandía roja, la toronja rosada, la guayaba rosada y la papaya, y en algunos productos procesados como el puré y el jugo de tomate (Vitale, et al., 2010), que a diferencia de otros carotenoides, potencializa su efecto cuando se somete al calor, lo que permite utilizarlo en diferentes preparaciones de uso cotidiano y bajo costo ya que se apegan a la dieta habitual del mexicano. Métodología: para la determinación del contenido de licopeno en los alimentos fuente se utilizó el método de extracción con solventes por etapas (Fernández et al., 2007) siguiendo el procedimiento que se describe a continuación. 238 | P á g i n a Selección de los alimentos: los alimentos fueron seleccionados por sus características organolépticas y físicas siguiendo los lineamientos de la NOM-093SSA1-1994. Bienes y Servicios. Prácticas de Higiene y Sanidad en la Preparación de Alimentos que se Ofrecen en Establecimientos Fijos. En los alimentos frescos se consideró la madurez, integridad de las piezas y la calidad. En los alimentos procesados se consideró además de la integridad de los empaques y la fecha de caducidad, la marca comercial ya que muchas de ellas no cumplen con los requisitos mínimos establecidos por la normatividad vigente. Siguiendo las recomendaciones de la Procuraduría Federal del Consumidor (PROFECO, 2011) por su mayor contenido en sólidos de tomate, se utilizaron puré de tomate y salsa cátsup marca La Costeña® y jugo de tomate marca Jumex®. Los alimentos frescos y procesados se higienizaron con agua y jabón y luego fueron enjuagados a chorro de agua de acuerdo con lo estipulado en la NOM-093SSA1-1994. Bienes y Servicios. Prácticas de Higiene y Sanidad en la Preparación de Alimentos que se Ofrecen en Establecimientos Fijos. Posteriormente fueron procesados utilizando los reactivos, material y equipo requeridos. 2. Preparación de la muestra: 1.- Se tomaron muestras de 5 g de cada alimento y se trituraron en un mortero con 25 ml de acetona grado reactivo; se trataron repetidas veces hasta obtener los extractos homogéneos incoloros. 2.- Estos extractos acetónicos se filtraron con ayuda de un embudo BÚCHNERa vacío utilizando papel filtro del número 5 y evaporaron con ayuda de un rotavapor BÚCHI switzarland R-215 a vacío hasta desecar el homogenado para diluirlo seguidamente en 25 ml acetato de etilo grado comercial. 3.- Posteriormente se transvasaron en un embudo de separación con 25 ml de cloruro de sodio (NaCl) al 10% y se mezclaron agitando cuidadosamente. 4.- Se separó la fase acuosa y etérea, mediante el lavado sucesivamente hasta que la fase acuosa se haga incolora. 5.- Después se deshidrató la fase etérea utilizando como desecante sulfato de sodio anhidro y se sometió a un proceso de eliminación del solvente utilizando un rotavapor acoplado con una bomba de vacío y una temperatura inferior a los 40 °C durante 30 minutos; la muestra finalmente seca se diluyó en éter de petróleo ligero con el objetivo de realizar la cromatografía de capa fina. Todo este procedimiento se realizó bajo luz reducida. 3. Extracción de licopeno: 1.- A través de la cromatografía de capa fina se separaron y purificaron los pigmentos carotenoides; para ello se utilizaron placas de silicagel 60 GF254 de 20x20 y como solvente de desarrollo se utilizó éter de petróleo ligero. 2.- El extracto de carotenoide se colocó en pequeñas proporciones utilizando la pipeta de Pasteur sobre las placas previamente activadas en la estufa a 120 °C durante una hora. 3.- Posteriormente se llevaron a la cámara de desarrollo por espacio de 30 minutos; luego se extrajeron las placas, se secaron para colocarlas bajo la luz ultravioleta. 239 | P á g i n a 4.- Se utilizó la misma cantidad del patrón de licopeno para posteriormente recoger los pigmentos obtenidos de las muestras junto con el patrón de licopeno y proceder a identificarlos mediante la realización de un barrido por espectrofotometría de UV-Vis UV-Vis, THERMO SCIENTIFIC type evolution 300 LC, comparando los espectros de los pigmentos obtenidos de las muestras con el espectro del estándar de licopeno. Utilizando una longitud de onda de 450 nm. 4. Preparación del patrón de licopeno: se preparó una solución madre de 500 ppm diluyendo 5 mg del estándar de licopeno en 10 ml de hexano, para esto se utilizó como patrón licopeno Sigma-AldrichL9879-10 MG; a partir de esta muestra se prepararon distintas diluciones sucesivas, en una atmósfera confinada de nitrógeno, en un rango de 1 a 4,5 ppm y se midió a una longitud de onda de 450 nm mediante espectroscopia visible utilizando un Spectronic 20. 5. Cuantificación del contenido de licopeno: una vez concluido el desarrollo cromatográfico en capa fina, se raspó la capa de forma individual para cada uno de los componentes, se diluyó con hexano y se determinó la absorbancia a la longitud de onda de máxima absorción, se sustituyó en la ecuación de la recta y se determinó las concentraciones de licopeno en las distintas muestras, la identificación del licopeno se basó en el espectro del estándar o patrón de licopeno, como puede apreciarse en la figura 1. Figura No.1 Curva de calibración de licopeno Resultados: se cuantificó el contenido de licopeno de cada alimento y se expresó en miligramos por cada 100 g de cada una de las muestras (Tabla No. 1). 240 | P á g i n a Tabla No.1 Contenido de licopeno en las muestras de alimentos analizadas Muestra de alimento Papaya maradol Tomate saladette Toronja rosada Sandía roja Guayaba amarilla Jugo de tomate** Salsa cátsup* Puré de tomate* Contenido de licopeno mg/100g 2,03 2,11 0,37 2,75 0,47 4,29 3,97 3,29 En esta tabla se presenta el contenido de licopeno de las muestras de alimentos analizadas, especificando el tipo y las marcas y la cantidad de licopeno en mg por 100 g. *Marca la Costeña **Marca Jumex Los resultados muestran que el mayor contenido de licopeno se encontró en los alimentos industrializados derivados del tomate, el jugo de tomate, la salsa cátsup y el puré de tomate, mientras que en los alimentos frescos presentaron menor contenido; se observó que el contenido de licopeno fue semejante entre la papaya maradol, el tomate saladette y la sandía roja y en menor cantidad la guayaba amarilla y la toronja rosada. Análisis: otros estudios han realizado la determinación de licopeno en los alimentos fuente, pero han reportado valores en rangos, lo que no permite tener la certeza de la cantidad real que contiene el producto (Waliszewski, et al., 2010) Martín et al. (2002) reporta valores absolutos que resultaron superiores a los del presente estudio, probablemente por el tipo o la marca del alimento que no se especifican en la metodología como puede observarse en la tabla No. 2 Tabla No.1 Comparación del contenido de licopeno en los alimentos fuente entre tres estudios Alimentos Papaya maradol Tomate saladette Toronja rosada Sandía roja Guayaba amarilla Jugo de tomate** Salsa cátsup* Puré de tomate* Contenido de licopeno en mg/100g Presente estudio Martín et Waliszewski et al.(2002)* al.(2010) 2.03 ----0.11-5.3 2.11 3.7 0.72-20 0.37 ----0.35-3.36 2.75 ----2.3-7.2 0.47 --------4.29** 10.0 5.00-11.60 3.97* 18.0 9.90-13.44 3.29* 22.48 6.20 *Datos calculados a partir de las raciones alimentarias en 100 g *Marca la Costeña **Marca Jumex Periago et al. (2001) afirma que en la literatura son escasos los estudios donde se especifican el tipo de alimento fresco y la marca de los alimentos industrializados que contienen licopeno, por lo que se dificulta establecer pautas unificadas para recomendar su consumo. 241 | P á g i n a Por otro lado, de acuerdo con Vitale et al. (2010) la cantidad de licopeno que se encuentra presente en el tomate fresco depende de la variedad utilizada, de las condiciones ambientales, del estado de maduración en el momento de la cosecha y del tratamiento post-cosecha previo a la llegada al expendio donde es comercializado. De acuerdo con Ordóñez et al. (2009) desde el punto de vista nutricional el mayor problema que tiene la ingesta de licopeno es la forma en que debe ser consumido, ya que cuando se somete a cocción se incrementa su biodisponibilidad (casi cuatro veces más que el crudo), mejorando sus propiedades antioxidantes y anticancerígenas. (Perdomo et al., 2012) Conclusiones: conocer la cantidad de licopeno en mg/100 g de los alimentos de uso cotidiano identificando el tipo en los frescos y la marca comercial en los industrializados, permite a los consumidores seleccionarlos con la seguridad de obtener sus propiedades antioxidantes y a los profesionistas de la nutrición utilizarlos en la dieta habitual y el diseño de menús que cubran las necesidades nutrimentales y produzcan efectos hipolipemiantes. . Referencias: Rao, A., Shen, H. (2002).Effect of low dose lycopene intake on lycopene bioavailability and oxidative stress. Nutrition Research. 22,1125-1131. Kun, Y., Lule, U., Xiao-Lin, D. (2007). Lycopene: its properties and relationship to human health. Food Reviews International. 22, 309-333. Santosh, K., Shipra, G., Shreesh, O., Suman, S. (2010).Cardiovascular friendly natural products: a promising approach in the management of CVD. Natural Product Research. 24 (9), 873898. Vitale, A., Bernatene, E., Pomilio, A. 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Nutrición Hospitalaria. 27(5),1542-1546. 242 | P á g i n a EFECTO DEL GRUPO GENÉTICO SOBRE LA COMPOSICIÓN DE ÁCIDOS GRASOS DE LA CARNE DE OVINOS DE PELO EN EL ESTADO DE YUCATÁN Raciel Estrada-León1*, Mario Chi-Kuk1, Víctor Moo-Huchin1, Ivan Estrada-Mota1, Victor Toledo-López2, Enrique Sauri-Duch2. 1 Instituto Tecnológico Superior de Calkiní en el Estado de Campeche. Av. AhCanul por Carretera Federal Campeche-Mérida, Calkiní, Campeche, México. 2 Instituto Tecnológico de Mérida. Av. Tecnológico Km 5 Carretera antigua MéridaProgreso S/N, Mérida, Yucatán, México. *Autor para correspondencia: [email protected] Categoría: Posgrado RESUMEN El contenido de lípidos y el tipo de ácidos grasos saturados e insaturados, son de las principales características a considerar dentro del concepto de "calidad de carne"; ya que se ha evidenciado, la importancia de los ácidos grasos en la dieta con respecto a la salud humana, debido a que se sabe que ciertos ácidos grasos presentes en la carne (omega 3, 6 y 9), muestran actividad biológica. El objetivo del presente estudio, fue determinar el perfil de ácidos grasos en carne fresca y madurada (16 días a 4°C) de dos cortes (Lomo y Pierna), en tres grupos genéticos de ovinos de pelo (Pelibuey, Dorper x Pelibuey, Dorper x Blackbelly) en el Estado de Yucatán. La composición de ácidos grasos, fue determinada mediante cromatografía de gases. Los resultados encontrados, indican que el lomo y la pierna de los tres grupos genéticos evaluados, resultaron con una mayor proporción de ácidos grasos saturados (43.19±5.9% a 64.28±6.1%) excepto Pelibuey. Con respecto a los ácidos grasos insaturados, se encontraron valores en un rango de 35.73±5.9% a 56.81±5.9%; de los cuales, el valor más alto correspondió a Pelibuey, (P<0.05). De manera similar, para Pelibuey, la pierna mostró una mayor cantidad de ácido linoleico (ω-3) y el lomo de oleico (ω-9), con respecto a cortes de los otros dos grupos genéticos evaluados. En conclusión, los resultados obtenidos, permitirían promover el consumo del lomo y pierna de ovinos Pelibuey, debido a su mayor composición de ácidos grasos insaturados. Palabras clave: Ovinos de pelo, grupos genéticos, ácidos grasos, cromatografía 243 | P á g i n a INTRODUCCIÓN En México, pocos estudios han sido realizados con la finalidad de evaluar el efecto de las razas y/o cruzas, así como del tipo de corte, sobre la calidad de la carne de los ovinos de pelo, debido principalmente a que se consumen tradicionalmente en “Barbacoa”; sin embargo, están surgiendo nuevos negocios, que demandan altos estándares de calidad de carne; por lo que es imperativo, evaluar las diferencias en la calidad de la carne debidas a razas y/o cruzas, así como tipos de cortes, a fin de caracterizar estándares e identificar procesos de producción de carne de alta calidad, lo que permitiría incrementar la rentabilidad para los productores (Hernández-Cruz, et al., 2009). Sin embargo, medir la calidad de la carne es complejo, ya que se refiere a características de composición, visuales y sensoriales tanto de la canal como de los cortes de la misma. En general se refiere al grado de excelencia de un producto (Tompson, 1988). El término “calidad de carne”, es un concepto complejo y difícil de definir, debido a sus diferentes enfoques; sin embargo, se ha evidenciado la importancia de los ácidos grasos en la dieta con respecto a la salud humana, ya que se sabe que ciertos ácidos grasos presentes en la carne (omega 3, 6 y 9), muestran actividad biológica (Wood et al., 2004). En éste sentido, El contenido de lípidos y el tipo de ácidos grasos saturados e insaturados, son unas las principales características a considerar dentro de la calidad de la carne. Pocos estudios, han reportado las diferencias en el perfil de ácidos grasos de diferentes grupos genéticos de ovinos de pelo, en diferentes músculos como lomo y pierna; aspecto de gran relevancia; ya que se ha reportado, que uno de los posibles factores que afecta el sabor de la carne, es la variación en el contenido de los ácidos grasos de la misma, debido a las diferencias entre razas o grupos genéticos (Fisher et al., 2000). Por lo tanto, el objetivo del presente estudio, fue determinar el perfil cromatográfico de ácidos grasos en dos cortes (Lomo y Pierna ) de tres grupos genéticos de ovinos de pelo (Pelibuey, Dorper x Pelibuey, Dorper x Blackbelly) en la el Estado de Yucatán, a fin de determinar sus principales características y promover su comercialización a mercados exigentes, favoreciendo de ésta manera el desarrollo socioeconómico de la región. METODOLOGÍA Para el presente estudio, se utilizaron 18 corderos machos, seleccionados al azar y clasificados fenotípicamente en tres grupos genéticos (Pelibuey, Dorper x Pelibuey y Dorper x Blackbelly); los cuales, se criaron ad libitum a base de alimento balanceado comercial, por un período de tres meses (90 días), en dos jaulas elevadas con 3 animales de cada grupo genético (9 corderos por jaula). Posteriormente, los animales fueron sacrificados con un peso de 34.7±3. kg (Peso de venta comercial), a una edad aproximada de 6 meses. 244 | P á g i n a Tras el sacrificio por un procedimiento estandarizado, las canales obtenidas se mantuvieron a 4°C durante 24 horas, para posteriormente obtenerse muestras de dos cortes, musculo Longissimus dorsi (Lomo) y la región distal del musculo Semitendinosus (Pierna) por cada grupo genético. En el laboratorio, las muestras de carne fueron lavadas para eliminar residuos de grasa y sangre. La carne fue cortada y empacada al vacío (Oster modelo V2240-013, China) utilizando un film de polietileno. Una parte de las muestras fueron destinadas para su análisis como carne fresca y el resto de las muestras fueron congeladas a -20°C hasta su análisis. Para determinar el perfil de ácidos grasos, se siguió la técnica de extracción de los lípidos descrita por (Hanson y Holley, 1963) y para la formación de los ésteres metílicos se siguió la técnica de (Morrison y Smith, 1965). La composición de ácidos grasos, fue obtenida mediante cromatografía de gases, utilizando las condiciones cromatográficas descritas por (Moo-Huchin, et al., 2013). Los resultados se presentaron como porcentaje del total de ácidos grasos. El análisis estadístico, se realizó utilizando el procedimiento de modelos lineales generales (GLM) del paquete estadístico SAS (2002), con la finalidad de determinar el efecto del grupo genético (GG) y tipo de corte (TP), así como la interacción del grupo genético x tipo de corte (GGxTC), sobre en el perfil de ácidos grasos, por lo que éstos fueron incluidos como efectos fijos al modelo. La comparación de medias, se realizó con la prueba de la mínima diferencia significativa (LSD). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Acorde a los resultados obtenidos, los principales ácidos grasos identificados fueron: Mirístico (4.93%), Palmítico (27.21%), Esteárico (24.71%), Palmitoléico (25.47%), Oléico (14.42%), Linoléico (2.93%); Con un total de ácidos grasos saturados (SFA) de 57.18%, ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) de 2.93%, ácidos grasos Monoinsaturados (MUFA) 39.89% y ácidos grasos insaturados (UFA) de 42.82%. Resultados similares con respecto al tipo de ácidos grasos y el porcentaje contenido de los mismos en cortes de lomo y cuello, fueron reportados en México, para ovinos de pelo en confinamiento, con un cruzamiento indefinido de razas (Pelibuey x Blackbelly x Dorper) y para ovinos de lana (Rambouillet x Criollo) (Hernández-Cruz et al., 2009). No se encontraron efectos significativos (P>0.05) del GG, TC y GGxTC sobre los ácidos grasos Mirístico (C14:0), Palmítico (C16:0), Esteárico (C18:0), así como tampoco sobre el total de ácidos grasos saturados (SFA). Sin embargo, GG fue estadísticamente significativo (P<0.05) para Oléico (C18:1); así como también, TC tuvo efectos estadísticamente significativos (P<0.05) para Palmitoléico (C16:1), Oléico (C18:1), Linoléico (C18:2) y ácidos grasos poliinsaturados (PUFA). La Interacción GGxTC, tuvo efectos estadísticamente significativos (P<0.05) sobre Palmitoléico (C16:1), Oléico (C18:1), Linoléico (C18:2) y ácidos grasos poliinsaturados (PUFA), ácidos grasos Monoinsaturados (MUFA) y ácidos grasos 245 | P á g i n a insaturados (UFA). Diferencias significativas en el contenido de ácidos grasos monoinsaturados como el ácido Oléico, y no diferencia (P>0.05) para el ácido Palmitoléico, debidos factores genéticos como la raza o cruzamiento (grupo genético), han sido reportados para dos razas de ovinos en Irán (Reza Younsefiet et al., 2012); lo cual, concuerda con los resultados del presente trabajo. Con respecto a la Interacción GG x TC, el corte de Lomo de Pelibuey, presentó un mayor contenido de ácido Oleico (C18:1) y, el corte de pierna de Pelibuey y DP x BB, presentaron los mayores contenidos de ácido Palmitoléico (C16:1), con respecto a los de demás cortes de los diferentes GG. Asímismo, la Pierna de Pelibuey, presentó los menores valores de SFA (43.19%), y los mayores valores de PUFA (9.93%) y UFA (56.81%) (Tabla 1). Tabla 3. Composición de ácidos grasos (% del total de ácidos grasos) en lomo y pierna de tres grupos genéticos de ovinos de pelo, en el Estado de Yucatán. Ácidos grasos Saturados Mirístico (C14:0) Palmítico (C16:0) Margarico (C17:0) Esteárico (C18:0) Monoinsaturados Palmitoléico (C16:1) Oleico (C18:1) Poliinsaturados Linoléico (C18:2) Total de Saturados Total de Poliinsaturados Total de Monoinsaturados Total de Insaturados Pelibuey Lomo Pierna Dorper x Pelibuey Lomo Pierna Dorper x Blackbelly Lomo Pierna 5.11±1.91ab 24.49±7.62ab 5.05±1.91ab 15.98±7.62a 8.86±1.91b 24.17±7.62ab 5.04±1.91ab 29.94±7.62ab 4.32±1.97a 36.89±7.88b 1.43±1.91a 34.43±7.62b 0.09±0.22a 0.00±0.22a 1.39±0.22b 0.36±0.22a 0.00±0.23a 0.00±0.22a 24.92±3.53ab 22.16±3.53ab 29.82±3.53b 28.14±3.53ab 24.01±3.53ab 22.16±3.53a 17.77±5.37a 34.98±5.37b 21.09±5.37a 22.42±5.37a 16.44±5.56a 37.90±5.37b 27.12±3.24c 11.91±3.24ab 12.55±3.24ab 11.17±3.24ab 17.22±3.24b 6.53±3.24a 0.48±1.96a 9.93±1.96b 2.09±1.96a 2.74±1.96a 1.65±2.03a 0.49±1.96a 54.63±5.89ab 43.19±5.89a 64.27±5.89b 63.66±5.89b 64.28±6.08b 55.07±5.89ab 0.48±1.96a 9.93±1.96b 2.09±1.96a 2.74±1.96a 1.65±2.03a 0.49±1.96a 44.89±4.90ab 46.89±4.90b 33.64±4.90a 33.60±4.90a 35.09±5.00ab 44.43±4.90ab 45.37±5.89ab 56.81±5.89b 35.73±5.89a 36.34±5.89a 35.72±6.08a 44.92±5.89ab Los resultados encontrados en el presente trabajo, difieren con los reportados para cortes de los músculos Longissimus lumborum y Gluteobiceps, en ovinos cruzados French Ile x Pagriarola y Gentile di Puglia x Sopravissana, donde no encontraron diferencias en la composición de ácidos grasos (Salvatori, et al., 2004). CONCLUSIONES La carne de los tres grupos genéticos de corderos y los cortes evaluados, se caracterizan por su composición de ácidos grasos predominantemente saturados, excepto la pierna de Pelibuey. 246 | P á g i n a Por su mayor cantidad de ácido Oleico (ω-9) en lomo y ácido Linoléico (ω-3) en pierna de Pelibuey, así como ácido Palmitoléico en perna de Pelibuey y Dorper x Blacbelly; se podría promover el consumo de dichos cortes de corderos, en mercados exigentes, favoreciendo el desarrollo socioeconómico de la región. REFERENCIAS Fisher, A. V., Enser, M., Richardson, R. I., Wood, J. D., Nute, G. R., Kurt, E., y otros. (2000). Fatty Acid Composition and Eating Quality of Lamb Type Derived From Four Diverse Breed x Production System. Meat Science (51), 141-147. Hanson, S. W., & Holley, J. (1963). Application of the Bligh and Dyer Method of Lipid Extraction to Tissues Homogenates. Biochemical Journal , 1 (89), 101-102. Hernández-Cruz, L., Ramírez-Bribiesca, J. 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[email protected] Categoría “Licenciatura” Objetivo General: Garantizar la inocuidad en el proceso de sacrificio de aves en un rastro municipal del Estado de Guanajuato. Objetivos Específicos: Realizar un diagnóstico inicial del proceso de sacrificio de aves, Identificar PCC en el proceso y Elaborar e Implementar el manual de Inocuidad. Resumen: Las aves juegan un rol determinante en la economía de diversos países. Siendo la manipulación de aves vivas la actividad que entraña el mayor riesgo de exposición a agentes contaminantes (biológicos, químicos y físicos), especialmente en el sacrificio de aves. Para cuantificar los riesgos de inocuidad alimentaria a lo largo de la cadena de producción y comercialización, es importante saber cómo, dónde y cuándo se produce la contaminación. Siendo el sistema HACCP (sistema preventivo) el que nos ayuda a identificar, evaluar y controlar los peligros significativos en la inocuidad de alimentos. Para ello se realizó un diagnóstico inicial del proceso para tener un antes y un después del plan HACCP. Se realizo un análisis de riesgos y el diagrama de flujo del proceso; identificando riesgos potenciales y medidas preventivas de éstos. De acuerdo a los resultados del plan HACCP, se decidió enfocarse en los agentes biológicos ya que estos representaron mayor peligro para el consumidor, realizándose análisis microbiológicos (coliformes totales y fecales, E. coli y Salmonella) de acuerdo a la (NOM-194-SSA1-2004) de agua y de la canal de ave. Obteniéndose coliformes totales en agua inicial escaldado 11NMP/100mL y 15NMP/100mL en pigmentado, ausencia de Salmonella, presencia de E. coli 6.28x103 UFC/g en la canal de pollo como producto final, por lo tanto el proceso se encuentra fuera de los límites establecidos por la Norma. En base a lo anterior se identificaron los PCC del proceso y se desarrolló la Implementación de medidas preventivas y correctivas. Así como conciencia en personal del rastro, sanitización del equipo e implementación del manual. Obteniendo coliformes totales en agua inicial escaldado -3 NMP/100mL y -3NMP/100mL en pigmentado, ausencia de Salmonella, presencia de E. coli 9.5x102 UFC/g en la canal de pollo como producto final. Estando estos resultados bajo la Nom después de haber implementado el plan HACCP, ayudando a garantizando la inocuidad en el proceso de sacrificio de aves. Metodología: Se realizó un análisis de riesgos y el diagrama de flujo de proceso; identificando los riesgos potenciales y las medidas que pueden prevenir esos riesgos. En base a lo anterior se identificaron de los puntos críticos de control y las medidas preventivas a aplicar, para establecer Límites Críticos a cada PCC 248 | P á g i n a (Punto Crítico de Control). Para lograr la actividad anterior se implementó un sistema de Monitoreo que nos ayudó a implementar Acciones Correctivas y los respectivos procesamientos de Verificación. Para contar con un el sistema de Control de Documentos y Datos HACCP hechos a la medida para un Rastro Municipal de Sacrificio de Aves del Estado de Guanajuato. Y para comprobar la efectividad de este procedimiento a nivel inocuidad se llevaron a cabo análisis Microbiológicos (Coliformes totales) siguiendo las normas NORMA Oficial Mexicana NOM-194-SSA1-2004, en la cual se evalúa la calidad sanitaria de muestras de agua o alimentos mediante la búsqueda de microorganismos coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli. Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no sólo sobreviven, sino que se multiplican, por lo que en los alimentos, el grupo coliforme adquiere un significado distinto al que recibe en el agua. Cuando los productos alimenticios han recibido un tratamiento térmico pasteurización, horneado, cocción, etc.), estos microorganismos se utilizan como indicadores de malas prácticas sanitarias. Se analizaron muestras de agua del escalado y del pigmentador al inicio, intermedio y final del proceso. Para el análisis microbiológico se realizaron diluciones decimales de 10 -1 a 10-5, y se transfirió 1 mL de cada dilución a cajas de Petri estériles. Después se les agregó de 12 a 15 mL de medio agar rojo violeta bilis manteniéndolo de 45 – 48°C. Se mezcló correctamente el medio con la muestra y se dejó solidificar. Se incubaron las cajas en posición invertida a 35±2°C durante 24 h. Se calcularon las UFC de microorganismos coliformes/g de muestra. Para tomar el resultado para las muestras que resultaron positivas, se realizó la prueba confirmativa con caldo lactosa bilis verde brillante. Se determinaron los mesofilicos aerobios, método más utilizado como Indicador microbiológico de calidad para verificar la efectividad de los procedimientos de limpieza y desinfección, determinar si las temperaturas fueron las apropiadas y el origen de la contaminación durante el proceso. Se realizarón diluciones decimales de 10-1 a 10-5 y se transfirió 1 mL de cada dilución a cajas de Petri estériles. Se agregaron de 12 a 15 ml de medio agar cuenta estándar manteniéndolo de 45 – 48°C se mezcló correctamente el medio con la muestra y se dejó solidificar. Se incubaron las cajas en posición invertida a 35±2°C durante 24±2 h, 48±2h y 72±2 h. Se calcularon las UFC de microorganismos coliformes/g de muestra. También se llevó a cabo el aislamiento de Salmonella, para Identificar cepas de Salmonella en alimentos que pueden causar un peligro altamente patógeno a la salud humana por (ETA). Para esta prueba se tomaron muestras de los canales de pollo (producto final pigmentado entero, producto final pigmentado eviscerado, desplumado inicial, mitad y final del proceso). Primero se llevó a cabo un preenriquecimiento; Transfiriendo 25 g de pollo licuado por 1 min a un matraz con 225 mL de medio de pre-enriquecimiento (caldo selenito cistina) a 35±2°C por 24±2 h. Se procedió el aislamiento por el método de estría cruzada en Agar xilosa lisina desoxicolato (XLD), Agar Mac. Conkey, Agar Eosina Azul de Metileno. Si los resultados son positivos, se inoculan colonias sospechosas de Salmonella por método de estría simple inclinada en Agar LIA 35±2°C por 24 h. Si es positivo, Realizar Identificación Bioquímica en medios SIM, Agar Citrato de Simmons, Caldo de malonato, caldo RM-VP, medio MIO. Informar presencia o ausencia de Salmonella en g o mL según sea el caso. 249 | P á g i n a Resultados: Sistema HACCP DIAGRAMA DEL PROCESO DE SACRIFICIO DE AVES CON SUS RESPECTIVOS PCC RECEPCIÓN DE AVES ATURDIMIENTO Y COLGADO 37 voltios 15 a 17 s. DESANGRADO t= 3´ PCC PCC PCC ESCALDADO T=57°C, t=3.5´ DESPLUMADO 2700 rpm PIGMENTACIÓN 2 H O T=80°C 2 PIGMENTACIÓN H2O FRIO EXTIRPACIÓN GLANDULA ACEITOSA/CLOACA Y RECTO/ABERTURA PCC ENVISCERADO EXTRACCIÓN PULMON/BUCHE/PESCUEZO RECOLECCIÓN HIGADO/CORAZON/MOLLEJAS ENJUAGADO H2O CLORADA ENTREGA ALMACENADO CONGELADO -18°C Análisis Microbiológicos siguiendo las normas NORMA Oficial Mexicana NOM194-SSA1-2004. ANÁLISIS COLIFORMES MUESTRA H2O Escaldado Inicial H2O Escaldado RESULTADOS PLAN HACCP ANTES DESPUES 11 NMP/100mL -3 NMP/100mL 11 NMP/ 100mL 7.2 NMP/100mL 250 | P á g i n a medio H2O Escaldado final H2O Pigmentado Inicial H2O Pigmentado medio H2O Pigmentado final MESOFILICOS Salmonella 21 NMP/ 100mL 15 NMP/ 100mL 15 NMP/ 100mL -3 NMP/100mL 75 NMP/ 100mL 3.6 NMP/100mL 93 NMP/ 100mL 7.2NMP/100mL 6 6 H2O Escaldado Inicial H2O Escaldado medio H2O Escaldado final H2O Pigmentado Inicial H2O Pigmentado medio H2O Pigmentado final 9.32 x 10 UFC/mL 4.8x 10 UFC/Ml 3.2 x 10 UFC/mL Canal de pollo producto final , entero y pigmentado Canal de pollo producto final eviscerado y enjuagado Canal de pollo desplumado inicio Canal de pollo desplumado intermedio Canal de pollo desplumado final Ausencia en 25 g 3 E.coli 6.28X10 UFC/g Ausencia en 25 g 2 E.coli 9.5X10 UFC/g Ausencia en 25 g Ausencia en 25 g Ausencia en 25 g Ausencia en 25 g Ausencia en 25g Ausencia en 25g Ausencia en 25 g Ausencia en 25 g 6 27 x 10 UFC/mL 3 27.8 x 10 UFC/mL 2.5 x 10 UFC/mL 6 4.2 x 10 UFC/mL 3 4.0 x 10 UFC/mL 6 2.5 x 10 UFC/mL 6 2.7 x 10 UFC/mL 6.5 x 10 UFC/mL 3.8 x 10 UFC/mL 6 6 6 6 Comparación con la NORMA Oficial Mexicana NOM-194-SSA1-2004. 1.10.2 Microbiológicas. i) Mamíferos y aves domésticas: 6.1.4 El agua que se utilice para el proceso deberá cumplir con el límite permisible de cloro residual libre y de organismos coliformes totales y fecales establecidos en la NOM-127-SSA1-1994. 251 | P á g i n a 4. Límites permisibles de calidad del agua Discusión: En comparación con la NORMA Oficial Mexicana NOM-194-SSA12004. El diagnóstico inicial del proceso se encontraba fuera de los límites permitidos, ya que se encontraron coliformes totales en agua inicial escaldado 11NMP/100mL y 15NMP/100mL en pigmentado, ausencia de Salmonella, presencia de E. coli 6.28x103 UFC/g en la canal de pollo como producto final. Después de la implementación de medidas correctivas se logró una disminución altamente significativa, dando como resultado; coliformes totales en agua inicial escaldado -3 NMP/100mL y -3NMP/100mL en pigmentado, ausencia de Salmonella, presencia de E. coli 9.5x102 UFC/g en la canal de pollo como producto final. Por lo tanto estos niveles cumplen con las especificaciones de la NOM-194-SSA1-2004. Conclusiones y/o Recomendaciones: Dicho trabajo nos dio la pauta, para identificar los riesgos potenciales que perjudican la inocuidad en las canales de pollo como producto terminado y tomar decisiones idóneas para el mejoramiento del proceso de un rastro municipal del estado de Guanajuato. Dicho proceso tenía un gran problema en la calidad del agua utilizada para las operaciones de escaldado y pigmentado, por ello se realizaron los siguientes puntos: 1.- Recircular constantemente el agua del escaldado 2.- Enjuagar con agua potable y clorada la desplumadora 3.- Vigilancia en el aseo de guantes, cuchillos y de los trabajadores 4.-Sanitizacion de los equipos y del entorno 5.-Conciencia en los trabajadores del rastro. Obteniéndose niveles aceptables y un proceso dentro de los límites establecidos por la NORMA Oficial Mexicana NOM-194-SSA1-2004. Lo que indica que el plan HACCP es una herramienta indispensable que ayuda al mejoramiento y control de cualquier proceso. Referencias: Vaillancourt, J.P. 2003. Bioseguridad en producciones avícolas. Los Avicultores y Su Entorno, 6 (33): 7981. Bolder, N.M. 2007. Microbial challenges of poultry meat production. World’s Poultry Science Journal, 63: 401–411. Bertrab, P. R. E. Inocuidad alimenticia [en línea]. Agro Revista Año 5 No. 1. Aguascalientes,México<http://www.aguascalientes.gob.mx/agro/modulos/sitio/revista/1-6/inocuidad.htm Perspectiva del subsector pecuario Ave(pollo) <http://www.sagarpa.gob.mx /agronegocios/Documents /EBespa%C3%B1ol300909.pdf 252 | P á g i n a PRINCIPALES COMPONENTES DEL EXTRACTO CLOROFÓRMICO DEL HONGO COMESTIBLE Agaricus subrufescens 1 1 2 3 1 Márquez-Fernández O. , Luna-Díaz C , Moukha S , Mata G y Trigos A . Laboratorio de Alta Tecnología de Xalapa-Universidad Veracruzana, Calle Médicos y Odontólogos No. 5 unidad del Bosque, Xalapa, Veracruz, México. [email protected]. Categoría: Licenciatura 2 INRA, UR1264, Mycologie et Se´curite´ des Aliments, BP81, 33883 Villenave d Ornon, France and Department of Toxicology, UFR des Sciences, Pharmaceutiques-Universite´ Bordeaux Segalen, 146 rue Le´o Saignat, 33076 Bordeaux Cedex, France. 3 Instituto de Ecología A.C. Carretera Xalapa-Coatepec, Briones, Xalapa, Ver. 1 OBJETIVO GENERAL. Realizar el estudio químico y pruebas de citotoxicidad del hongo A.subrufescens. OBJETIVOS ESPECIFICOS. Obtener los extractos etanólico y clorofórmico de los cuerpos fructíferos liofilizados del hongo Agaricus subrufescens Realizar pruebas de citotoxicidad mediante el ensayo MTT en líneas Neuro2a, Vero y L1210 de los extractos. Obtener y purificar los componentes mayoritarios o metabolitos secundarios presentes en el extracto más bioactivo de Agaricus subrufescens RESUMEN. El género Agaricus comprende especies apreciadas gastronómicamente, entre las que se encuentra Agaricus subrufescens, (Agaricus blazei Murrill) que tambien se ha utilizado tradicionalmente, en el tratamiento de enfermedades crónico degenerativas1. Las pruebas in vitro e in vivo de extractos de esta especie, demostraron tener propiedades inmunomoduladoras y citotóxicas, no obstante los componentes activos y su posible acción farmacológica no están del todo claras2,3. Por lo que se realizó el estudio citotóxico (ensayo MTT) y micoquímico, de los extractos de esta especie comestible, resultando que éstos presentan la capacidad de inhibir el crecimiento y provocar muerte celular de tres líneas celulares cancerígenas (Neuro2a, Vero y L1210); asimismo, se identificaron tres esteroles, por medio de Resonancia Magnética Nuclear (RMN), como ergosterol, peróxido de ergosterol, cerevisterol, además, de un aldehído aromático6 (o-hidroxibenzaldehído). Aunque el aislamiento de los metabólitos bioactivos no ha finalizado, este trabajo abre la posibilidad encontrar otros compuestos citotóxicos y justifica parcialmente la actividad biológica para esta especie, ya que los tres esteroles aislados cuentan con reportes de su actividad biológica. METODOLOGÍA Extracción. Los disolventes utilizados fueron purificados por destilación fraccionada; los cuerpos fructíferos liofilizados de Agaricus subrufescens (cepa híbrida de INRA-Francia) se sometieron a maceración con etanol por siete dias, repitiéndose le extracción diez veces más; los extractos se concentraron en un evaporador de rotación a presión reducida. El extracto etanólico seco se extrajo nuevamente con cloroformo y éste se concentró a presión reducida. 253 | P á g i n a Una ultima extraccion por maceración con cloroformo, se realizó a los cuerpos fructíferos del hongo, hasta el agotamiento. Ensayo MTT. Se usaron tres líneas celulares Neuro2a (neuroblastoma), Vero (riñón) y L1210 (células de leucemia linfocítica murina). Se cultivaron en placas de 96 pocillos durante 24 horas a una concentración de 105 células/µl. Posteriormente, las células fueron expuestas durante 48 horas a diferentes concentraciones de los extractos del hongo Agaricus subrufescens. Purificación. La purificación de los metabólitos se realizó por cromatografía en columna gravitatoria, utilizando como fase estacionaria gel de sílice 0.2-0.5 mm de tamaño de malla, y como fase móvil hexano y mezclas de hexano-acetato de etilo en polaridades ascendentes. Las fracciones se obtuvieron y concentraron a presión reducida, una vez concentradas se verificó su composicion mediante cromatografía en capa fina utilizando cromatofolios de gel de sílice y aluminio, y como reveladores se utilizaron vapores de yodo y luz ultravioleta. Identificación. La identificación de los compuestos se realizó por medio de Resonancia Magnética Nuclear de H1 y C13 en un equipo Varian Mercury de 300 MHz. RESULTADOS. Ensayo MTT. En la línea celular Neuro2a se observó un perfil de inhibición con 1000 µg/ml de extracto, la inhibición es significativa en esta línea celular para todos los extractos probados; sin embargo, el extracto clorofórmico (partición del extracto etanólico) resultó con mejor actividad inhibitoria y osciló entre 100 y 1000 µg/ml. En la línea celular Vero, se observó un perfil de inhibición significativa con extracto clorofórmico con 300 µg/ml de extracto, cabe señalar que ésta es una de las líneas celulares más resistentes a la acción de fármacos citotóxicos. En la línea celular L1210, se observaron dos efectos: una inducción del crecimiento observada a una concentración de 130 µg/ml del extracto etanólico y una inhibición significativa con una concentración de 40 µg/ml del extracto clorofórmico (partición). Estudio químico. De la partición clorofórmica, que obtuvo un mejor perfil de citotoxicidad, se purificaron cuatro compuestos identificándose, con base a sus propiedades físicas y a sus datos espectroscópicos al ser comparados con la literatura, como: ergosterol (1)4, peróxido de ergosterol (2)4, cerevisterol (3)5 y o-hidroxibenzaldehido (4)6, tres de los cuales, como puede apreciarse en la Tabla 1, presentan diversas actividades biológicas. O 1 O HO 2 HO 254 | P á g i n a OH O 3 HO OH 4 OH TABLA 1. RESUMEN DE ACTIVIDADES BIOLOGICAS REPORTADAS EN LA LITERATURA DE LOS METABOLITOS OBTENIDOS EN LA CEPA HIBRIDA A. subrufescens Metabólito Actividad Biológica Referencia Ergosterol Wiseman, 1993; Yazawa, Inhibición de la angiogénesis et al., 2000; Takaku, et al., ocasionada por tumores. 2001; Yuan, et al., 2006; Inhibición del crecimiento del cáncer Kobori, et al., 2007; Seo, de vejiga en ratas. et al., 2009; Trigos, et al., Actividad citotóxica en células de 2011. carcinoma epitelial del cérvix humano. Inhibición de la peroxidación lipidica de las membranas. Reducción del dolor asociado a la inflamación. Peróxido de • Efecto citostático sobre las células Trigos, et al, 2002; Youen, Ergosterol HT29. et al, 2005; Kobori et al, • Supresión de LPS inducido por TNF- 2007; Seo et al, 2009 a y la secreción de IL-1a / b. • Inhibición de la fosforilación de MAPK. • Actividad anticomplementaria en contra de la vía clásica del sistema del complemento. • Inhibición de la proliferación de células cancerígenas. • Antifúngica. Cerevisterol • Citotóxica al inhibir la actividad del α Mizushina, et al., 1999; ADN polimerasa, impidiendo así la Trigos, et al., 2011. replicación celular. O-hidroxi benzaldehido ANALISIS Ergosterol (1) Sólido cristalino, incoloro, el cual descompone con la luz. 3βhidroxi-5, 7,22-ergostatrieno. RMN-1H (δ, CDCl3): 0.63 (3H, s, Me-18), 0.82 (3H, d, J=6.6 Hz Me-27), 0.84 (3H, d, J=6.6 Hz Me-26), 0.91 (3H, d, J=6.3 Hz Me-28), 0.94 (3H, s, Me-19), 1.04 (3H, d, J=6.7 Hz Me-21), 3.63 (1H, m, H-3α), 5.20 (2H, m, H-22, H-23), 5.38 (1H, m, H-7), 5.57 (1H, m, H-6). 255 | P á g i n a Peróxido de ergosterol (2) Sólido cristalino, incoloro en forma de agujas, RMN1 H (δ, CDCl3): 0.82 (3H, d, J=6.8 Hz Me-26), 0.82 (3H, s, Me-18), 0.83 (3H, d, J=6.8 Hz Me-27), 0.88 (3H, s, Me-19), 0.91 (3H, d, J=6.7 Hz Me-28), 1.00 (3H, d, J=6.9 Hz Me-21), 3.94 (1H, m, H-3α), 5.18 (2H, m, H-22, H-23), 6.23 (1H, d, J=8.6 Hz H-7), 6.50 (1H, d, J=8.6 Hz H-6). Cerevisterol (3) Sólido cristalino, incoloro, soluble en acetona y metanol, 5αergosta-7,22-dien-3β, 5α, 6β-triol. RMN-1H (δ, CDCl3): 0.58 (3H, s, Me-18), 0.81 (3H, d, J=6.7 Hz Me-27), 0.82 (3H, d, J=6.7 Hz Me-26), 0.90 (3H, d, J=6.9 Hz Me28), 1.01 (3H, d, J=6.6 Hz Me-21), 1.06 (3H, s, Me-19), 3.62 (1H, d, J=5.1 Hz H6α), 4.08 (1H, m, H-3α), 5.20 (2H, m, J=7.1 Hz H-22 y H-23), 5.36 (1H, d, J=2.5 Hz H-7). O-hidroxibenzaldehido (4) Sólido blanco, soluble en hexano, el cual fue identificado por los datos espectroscópicos al ser comparados con una base de datos (http://sdbs.riodb.aist.go.jp) como o-hidroxibenzaldehído o salicilaldehído. RMN-1H (δ, CD3OD): 7.20 (1H, d, J=8.0 Hz H-6), 7.4 (1H, m, H-4), 7.69 (1H, dd, J=8.0 y 1.6 Hz H-5), 7.82 (1H, d, H-3), 7.96 (1H, s, H-2), 9.80 (1H, s, H-1). CONCLUSIONES El extracto clorofórmico (partición etanólica) de los cuerpos fructíferos liofilizados, de Agaricus subrufescens (cepa híbrida de INRA-Francia), presentó una inhibición significativa del crecimiento, contra tres líneas celulares de cáncer, por lo que se infiere que puede contener compuestos con actividad citotoxica. Aunque el aislamiento de los metabólitos bioactivos no ha finalizado, este trabajo abre la posibilidad encontrar otros compuestos citotóxicos y justifica parcialmente la actividad biológica para esta especie, ya que los tres esteroles aislados cuentan con reportes de su actividad biológica. Sin pretender aventurarse, Agaricus subrufescens podría ser considerado como un alimento funcional, sin embargo, es necesario continuar con la caracterización química y biológica de sus componentes. REFERENCIAS 1. Coello, C.M.M. Uso de Scytalidium thermophilum para el cultivo semicomercial de Agaricus spp, 2006. 2. Hetland, G., Lovik, M., Wiker, H.G. Protective effects of b-glucan against Mycobacterium bovis, BCG infection in BALB/cmice. Scandinavian Journal of Immunology 47, 548–553, 1998. 3. Bernardshaw, S., Johnson, E., Hetland, G., An extract of the mushroom Agaricus blazei Murrill administered orally protects against systemic Streptococcus pneumoniae infection in mice. Scandinavian Journal of Immunology 62, 393–398, 2005. 4. Trigos, Á., Ortega-Regules, A. Selective destruction of microscopic fungi through photo-oxidation of ergosterol. Mycologia 94(4): 563-568, 2002. 5. El-Mekkawy, S., Meselhy, M.R., Nakamura, N., Tezuka, Y., Hattori, M., Kakiuchi, N., Shimotohno, K., Kawahat, T., Otake, T. Anti-HIV-1 and Anti-HIV-Protease Substances from Gonoderma lucidum. Phytochemistry 49(6): 1651-1657, 1998. 6. Base de datos Espectroscópicos http://sdbs.riodb.aist.go.jp. 7. Kobori M., M. Yoshida, M. Ohnishi-Kameyama, H. Shinmoto. Ergosterol peroxide from an edible mushroom suppresses inflammatory responses in RAW264.7 macrophages and growth of HT29 colon adrenocarcinoma cells. British Journal of Pharmacology. 2007, 150: 209-219. 8. Mizushina, Y., N. Takahashi, L. Hanashima, H. Koshino, Y. Esumi, J. Uzawa, F. Sugawara, K. Sakaguchi. Lucidenic acid O and lactone, new terpene inhibitors of 256 | P á g i n a eukaryotic DNA polmerases from a basidiomycete Ganoderma lucidum. Bioorganic and Medicinal Chemistry. 1999, 7(9): 2047-2052. 9. Seo, H. W., T. M. Hung, M. K. Na, H. J. Jung, J. C. Kim, J. S. Choi, J. H. Kim, H. K. Lee, I. S. Lee, K. I. Bae, M. Hattori, B. S. Min. Steroids and triterpenes from the fruit bodies of Ganoderma lucidum and their anti-complement activity. Archives of Pharmacal Research. 2009, 32(11):1573-1579. 10. Takaku, T., Y. Kimura, H. Okuda. Isolation of an antitumor compound from Agaricus blazei Murrill and its mechanism of action. The Journal of Nutrition. 2001, 1409-1413. 11. Trigos, Á. Ortega, A. Selective destruction of microscopic fungi trough photooxidation of ergosterol. 2002. Mycologia 94: 563-568. 12. Trigos, Á. Suárez, J. Biologically active metabolites of the genus Ganoderma: Three decades of myco-chemistry research. Revista Mexicana de Micologia 34:63-83, 2011. 13. Yazawa, Y., M. Yokota, K. Sugiyama. Antitumor promoting effect of an active component of Polyporus, ergosterol and related compounds on rat urinary bladder carcinogenesis in a short-term test with concanavalin A. Biology & Pharmacology Bulletin. 2000, 23:1298–1302. 14. Youen, J. W. N., M. D. I. Gohel. Anticancer effects of Ganoderma lucidum: a review of scientific evidence. Nutrition and Cancer. 2005, 53(1): 11-17. 15. Yuan, J. P., J. H. Wang, X. Liu, H. C. Kuang, X. N. Huang. Determination of ergosterol in Ganoderma spore lipid from the germinating spores of Ganoderma lucidum by high-performance liquid chromatography. Journal of Agriculture and Food Chemistry. 2006, 54: 6172-6176. 16. Wiseman, H. Vitamin D is a membrane antioxidant: ability to inhibit iron-dependent lipid peroxidation in liposomes compared to cholesterol, ergosterol and tamoxifen and relevance to anticancer action. FEBS Letters 326. 1993, 285–288. 257 | P á g i n a IMPLEMENTACIÓN DEL ESTANDAR GLOBAL DE SEGURIDAD EN ALIMENTOS BRC EN LA CADENA DE SUMINISTRO DE BOTANAS Palabras clave: Estándar BRC, Botanas, Seguridad en Alimentos. Jessica Liliana Vargas Vilchis1, Alicia Reyes García1, Javier Abimael Cuadros Aguirre1, Francelvia Pérez Hernández1. 1 Universidad Autónoma del Estado de México. Facultad de Química. Departamento de Alimentos. Carretera: Toluca Atlacomulco. Km. 15.5. S/N. El Cerrillo Piedras Blancas. C.P.50130 Toluca, Estado de México; México. Tel/fax: 01(722)296-5514. [email protected] Categoría Licenciatura. OBJETIVO GENERAL Implementar el estándar global de seguridad en alimentos BRC en una planta de elaboración de botanas. OBJETIVOS ESPECÍFICOS seguridad en alimentos BRC, para efectuar diagnóstico. planta de botanas. RESUMEN Actualmente las empresas alimentarias trabajan con estándares de vanguardia en seguridad en alimentos; “Alimentos Seguros todos los días, en cada paquete”. Las inadecuadas políticas y prácticas de la Planta de Botanas para prevenir problemas por enfermedades transmitidas por alimentos e incumplimientos con regulaciones de exportación, impactaron la imagen de la marca, perdidas de ventas, costos extraordinarios por atención de quejas, análisis de productos, reproceso y pérdida de clientes y consumidores. Para resolver el problema a nivel directivo se eligió el Estándar Global de Seguridad en Alimentos BRC, el objetivo de este trabajo fue implementar dicho estándar, desarrollando planes, políticas y prácticas para administrar, minimizar o eliminar riesgos para la compañía, clientes y consumidores. El trabajo se desarrolló en 7 fases: planteamiento de la iniciativa y compromiso de la Dirección, se comunicó la iniciativa al interior de la empresa, definición de responsabilidades y necesidades de formación del Personal, fue necesario un diagnóstico, para entonces definir del Sistema de Gestión de la Calidad a implantar, las tres últimas fases fueron la Implantación del Sistema de Gestión, realización de auditorías, seguimiento y establecimiento del proceso de mejora. La participación de todos los niveles de la organización fue decisiva para lograr la implementación del estándar global BRC, represento un cambio de visión en relación con el compromiso de seguridad de los consumidores y sirvió para replantear el control a lo largo de todas las células de trabajo al interior de la planta. El proceso duro un año y la Planta se certificó. METODOLOGÍA Las Fases del Proceso de Implantación del Sistema de Gestión para el estándar Global de Seguridad en alimentos BRC fueron: Fase 1. Planteamiento inicial y Compromiso de la Dirección. Definición del compromiso con el proyecto de implantación del sistema de gestión del personal directivo. 258 | P á g i n a Fase 2. Comunicación interna de la Iniciativa. Desarrollo y despliegue de la estrategia de comunicación necesaria para que cualquier cambio organizacional y en consecuencia la implantación del sistema de calidad resultara posible y fuera exitoso. Fase 3. Definición de Responsabilidades/Formación del Personal. Propuesta de formación de un equipo de calidad para coordinar las actividades, selección y formación de las personas implicadas en el proyecto de implementación del sistema de calidad. Fase 4. Diagnóstico de la Situación Actual de la Organización. Autoevaluación como pieza clave del proceso de implantación del sistema de calidad. Fase 5. Definición del Sistema de Gestión de la Calidad a Implantar. Definición por la organización de los siguientes elementos del sistema de gestión de calidad: Alcance del sistema, procesos y procedimientos, sistema de documentación. i Fase 6. Implantación del Sistema de Gestión de la Calidad. Formación de todo el personal de la organización sobre el sistema de calidad a implantar, así como la adopción gradual de todo el sistema, incluidos los procedimientos definidos. Fase 7. Auditorias, Seguimiento y Proceso de Mejora. Auditorias periódicas a partir de la puesta en marcha del sistema de gestión de la calidad en toda la organización, para dar seguimiento de los avances hacia la calidad total. RESULTADOS Fase 1. Planteamiento inicial y Compromiso de la Dirección: El personal Directivo se implicó activamente en el proceso, comprendió los fundamentos del mismo y doto de los recursos económicos y materiales necesarios al equipo en el que se delegó el proyecto; dio a conocer el proyecto a través de un evento donde se realizó la presentación de la iniciativa global de seguridad en alimentos que estaba basada en el estándar BRC, asistieron los Gerentes de la Organización y los Supervisores de Calidad que fungían como representantes de la Dirección. Fase 2. Comunicación interna de la Iniciativa: Se comunicó a las personas de la organización a través de publicaciones internas, reuniones de equipo, noticias en periódicos internos, entre otros; sobre el papel que desempeñarían en la introducción del sistema de calidad y sobre las características y elementos principales del modelo que se implantaría. Se tuvieron reuniones con la representación sindical mencionándoles la importancia de su liderazgo y del papel que todos los colaboradores juegan en el sistema de calidad y sobre las características y elementos principales del modelo que se implanto. Fase 3. Definición de Responsabilidades/Formación del Personal: Se formó el equipo de calidad el cual se integró de forma multidisciplinaria con un representante de cada una de las diferentes áreas que conforman la Planta de Botanas, nombrando como líder del mismo al Supervisor de Calidad, el cual se encargó de definir las responsabilidades para cada miembro y así mismo se estableció la línea de comunicación para cada departamento. Las reuniones del equipo se llevaron a cabo de forma semanal para estar al tanto del desarrollo y ejecución de las fases de implantación cumpliendo con las fechas compromiso. i Fase 4. Diagnóstico de la Situación Actual de la Organización: La autoevaluación permitió a la organización hacer un diagnóstico de su situación e identificar puntos fuertes y áreas de mejora. El análisis de los resultados de la auditoría diagnóstico permitió identificar que el porcentaje menor de cumplimiento se tenía en: el control de producto (40% de avance) y el personal (42% de avance); donde se registró el mayor cumplimiento fue en control de procesos (46%). 259 | P á g i n a Fase 5. Definición del Sistema de Gestión de la Calidad a Implantar: Se integró el manual del sistema de calidad que incluyo: compromisos de la dirección, plan para la seguridad en alimentos (HACCP), descripción del Sistema de Gestión de Calidad y Seguridad en Alimentos, control del producto, control de procesos y personal; todo basado en la estructura de BRC V.6. se desarrollaron los Programas correspondientes para su seguimiento. Se definió la Política de Calidad y Seguridad en Alimentos, cada uno de los elementos de la política se ligó a un objetivo del Sistema de gestión y a su vez se definieron indicadores para cada uno. El alcance del sistema de gestión se dio de manera integral para Calidad, Inocuidad, Legalidad, Ambiente Laboral, Rentabilidad y Mejora Continua. Fase 6. Implantación del Sistema de Gestión de la Calidad: Las actividades para la implantación se listaron en un cronograma para desarrollarlas en un periodo de seis meses, incluyendo el compromiso del equipo directivo, revisión contractual y enfoque al cliente, la capacitación del personal involucrado y mejora continua entre otros. El trabajo del equipo de calidad se enfocó a dar cumplimiento a los objetivos definidos en el cronograma. Se capacito al personal desde HACCP hasta etiquetado del producto. Fase 7. Auditorias, Seguimiento y Proceso de Mejora: La última fase de implantación del sistema de gestión de calidad fue continua y recurrente. Se trabajó sobre un programa anual de auditorías internas las cuales se plantearon para llevar a cabo la revisión completa del sistema BRC. El cierre de los planes de acción se dio con la verificación de la efectividad de las acciones tomadas, estableciendo criterios de efectividad en función del cumplimiento de Indicadores de Calidad e Inocuidad. Se logró cumplimiento en el control de producto, personal y control de procesos. Así mismo se implementó un Programa de Supervisiones Sistemáticas i diarias por el Supervisor de Producción con la finalidad de verificar el cumplimiento de las buenas prácticas de manufactura, condiciones de operación y calidad de producto. El proceso duro un año y al termino del proceso la Planta se certificó con el estándar global BRC. CONCLUSIONES La participación de todos los niveles de la organización fue decisiva para lograr la implementación del estándar global BRC; represento un cambio de visión en relación con el compromiso de seguridad de los consumidores y sirvió para replantear el control a lo largo de todas las células de trabajo al interior de la planta de botanas. El establecer auditorías internas proporciona información clave para establecer el ritmo de la implementación del estándar global de seguridad en alimentos BRC en la cadena de suministro de la planta de elaboración de botanas. Capacitar a todo el personal de la planta fue importante para la ejecución de todos los programas definidos para la seguridad en alimentos. REFERENCIAS -CC-10013-IMNC-2002 Norma Mexicana IMNC Directrices para la documentación de sistemas de gestión de la calidad. -CC-001-1995. IMNC. Administración de la Calidad y Aseguramiento de la Calidad. Vocabulario. -PAS 220:2008 Sistemas de gestión de la seguridad alimentaria – Requisitos para cualquier organización en la cadena alimentaria. International Food Standard http://www.dnvba.com/es/Alimentacion-ybebidas/Seguridad-Alimentaria/Pages/IFS-International-Food-Standard.aspx Julio 2011, Londres: TSO. 260 | P á g i n a SISTEMA DOCUMENTAL PARA LA IMPLEMENTACIÓN DE LA NORMA ISO 22000:2005 EN UNA EMPRESA EMBOTELLADORA DE BEBIDAS CARBONATADAS Alejandro Monroy Perdomo1, Alicia Reyes García1, Eduardo Tlacaelel Rivera Gordillo1, Rosa Edith Malváis Delgado1. 1 Universidad Autónoma del Estado de México. Departamento de Alimentos. Carretera: Toluca Atlacomulco. Km. 15.5. S/N. El Cerrillo Piedras Blancas. CP.50130 Toluca Estado de México; México. Tel/fax: 01(722)2965514. [email protected] Licenciatura. OBJETIVO GENERAL Adecuar el sistema documental de calidad existente al sistema documental de la norma ISO 22000:2005 para poder implementar el sistema de gestión de seguridad alimentaria. OBJETIVOS PARTICULARES Realizar la comparación documental entre el sistema de calidad existente en el Corporativo y el sistema de gestión de seguridad alimentaria de la norma ISO 22000:2005. Realizar los cambios documentales necesarios para cumplir cada punto de la norma ISO 2000:2005 e integrar el sistema documental. RESUMEN El comercio de productos alimenticios en las grandes tiendas departamentales se da para aquellos productos que sean inocuos y aseguren confianza al consumidor y también su liderazgo en la venta de alimentos. La industria de alimentos reconoce el Análisis de Peligros y Control de Puntos Críticos, HACCP, como un medio efectivo y racional de asegurar la inocuidad alimentaria desde la cosecha hasta el consumo. El sistema ISO 22000:2005 lleva al sistema HACCP al nivel de gestión, y asigna recursos tanto financieros como humanos de una forma sistemática en conjunto con un sistema de calidad para asegurar la inocuidad del producto. El objetivo del trabajo fue llegar a la implementación documental del sistema ISO 22000:2005 en la Planta de Bebidas Carbonatadas, se revisó la documentación existente, apegada a la norma ISO 9001:2008, se tenían auditorias bajo este sistema, la empresa no estaba certificada. Se realizo una matriz de relación con la Norma internacional ISO 22000:2005 para identificar deficiencias, se propusieron los cambios documentales para la implementación de una forma sistemática, ordenada y práctica. La capacitación del personal fue fundamental para el entendimiento de la norma y generar los cambios documentales, se llegó hasta la verificación mediante auditorías internas. Los prerequisitos se implementaron siguiendo los requisitos de PAS 220:2008. El corporativo solicito una auditoria externa para verificar la implementación documental, la empresa auditora reportó como satisfactoria la implementación, por lo tanto se concluye que se implementó el sistema documental ISO 22000:2005 y PAS 220:2008. METODOLOGÍA Para realizar una apropiada implementación de la documentación, esta se realizó en dos etapas: 261 | P á g i n a Etapa 1. Revisión documental: Realización de auditorías para revisar la documentación existente. En este punto fue necesario hacer una diferencia entre los puntos de la operación que constituían un riesgo a la inocuidad del alimento y a aquellos que afectaban las características de calidad del producto y conocer el nivel de documentación existente. Etapa 2. Implementación documental. Con los resultados de las auditorías se elaboró una tabla con los procedimientos necesarios para el cumplimiento de la Norma ISO 2200:2005 y PASS 220:2008, identificando aquellos que era necesario modificar o elaborar. RESULTADOS Revisión documental. El corporativo formó un equipo de trabajo con el único objetivo de verificar e implementar documentalmente los requisitos establecidos en PAS 220:2008 e ISO 22000:2005. Este equipo de trabajo fue capacitado en PAS 220:2008, ISO 22000:2005, HACCP básico y avanzado. Posteriormente se procedió a la división del trabajo, a cada integrante del equipo se le asignó un prerequisito establecido en PAS 220:2008 y los requisitos de ISO 22000:2005. Los prerequisitos y requisitos establecidos fueron comparados con el sistema documental del corporativo identificando en todos ellos los faltantes de documentación, Una vez realizada la comparación de la documentación existente con la requerida por la norma se procedió a la elaboración de la documentación no existente. Implementación documental. Una vez concluidas las tareas de revisión documental y elaboración de documentos, se procedió a dar seguimiento a los resultados de la implementación documental de cada punto de la norma. De acuerdo a lo observado y a la comparación previa, se tomaron las medidas necesarias para el cumplimiento de la norma. En este punto las auditorías internas fueron de gran importancia, ya que de esta forma se verifico de forma continua el cumplimiento de las normas, con base a los resultados se tomaron acciones correctivas. Este ejercicio fue aprobado hasta que se alcanzó un 95% de cumplimiento de la norma, después, se procedió a publicar el sistema documental, finalmente se comunicó y capacito al personal de la planta con la nueva documentación. El nivel de cumplimiento de la planta en cuestiones de calidad era bueno, se cumplía con la documentación de manera adecuada para la norma ISO 9000 y con algunos de los puntos de ISO 22000:2005 y para el sistema HACCP, sin embargo se observó una falta de documentación asociada con la seguridad e inocuidad alimentaria. La planta cumplía con requisitos de calidad, pero la inocuidad estaba siendo obviada pensando que el aseguramiento de la calidad conllevaría a cumplir con requisitos de inocuidad. Es aquí donde la norma PAS 220:2008 sirvió como una guía para dar a conocer al corporativo que eran necesarias las operaciones que minimizaran los riesgos de contaminación de los productos en las diversas etapas de la manufactura. Cumplidos los requisitos documentales, el siguiente paso fue la implementación de todo el sistema con el propósito de lograr la certificación de la empresa. CONCLUSIONES. El compromiso debe ser total en la organización, desde la gerencia hasta la parte operativa; cada miembro de las operaciones realizadas en la organización debe ser consciente de la implementación de las normas y deben tomar parte en la totalidad del proceso. 262 | P á g i n a Las auditorías internas deben estar respaldadas por entidades externas que den validez de la implementación documental, los auditores reportaron la implementación como satisfactoria y de esta forma se concluyó que el sistema de documentación para ISO 22000:2005 y PAS 220:2008 era aceptado. Una vez aceptado el sistema la parte más importante es su aplicación en planta, en donde se debe establecer un eficaz sistema de verificación y dar seguimiento continuo a través de auditorías e inspecciones. Para la capacitación del personal en el conocimiento de este sistema es necesaria la intervención de una institución reconocida. Para la aplicación de estas normas es importante haber implementado los prerequisitos, con mayor importancia se cumplirán aquellos relacionados con las buenas prácticas de manufactura y el sistema HACCP. REFERENCIAS. - Principios Generales De Higiene de Los Alimentos CAC/RCP 1-1969, Rev 4 (2003) de salud. . (Agosto 2000). México. Dirección General de Calidad Sanitaria de Bienes y Servicios (1999). Manual de Buenas Prácticas de Higiene y Sanidad. Secretaria de Salud Subsecretaria de Regulación y Fomento Sanitario. México. ama prerequisitos en materia de seguridad alimentaria para la fabricación de alimentos. tos 263 | P á g i n a CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS DE QUITINA Y QUITOSANO OBTENIDOS A PARTIR DE LANGOSTA DE RIO (Cherax quadricarinatus) Rosa Elena Ramírez Carrillo*, Héctor Manuel Rocha Díaz, Rafael Calderón Zamarripa** & Laura Eugenia Pérez Cabrera. Depto.de Tecnología de Alimentos, Centro de Ciencias Agropecuarias, Universidad Autónoma de Aguascalientes, Aguascalientes, México. *[email protected] (**) Instituto del Agua del Estado de Aguascalientes, Gobierno del Estado de Aguascalientes. Categoría: Licenciatura Área temática: Química de Alimentos RESUMEN: Los exoesqueletos de crustáceos son considerados contaminantes ambientales sin embargo, constituyen la fuente principal de dos biopolímeros de alto valor agregado: la quitina y su derivado funcional, el quitosano. La utilización de estos está limitada principalmente a la variación en su composición química. La fuente de quitina y los incontrolados procesos de desacetilación son los principales factores que afectan las propiedades finales del quitosano. El objetivo del trabajo es optimizar el proceso de obtención de quitina y quitosano a partir de exoesqueletos de Cherax quadricarinatus y evaluar la calidad de los materiales obtenidos. Se aplico un tratamiento termoalcalino (TTA) a muestras provenientes de exoesqueletos deshidratados, molidos y tamizados (Talla 1 de 30-50g y Talla 2 de 10-30g, peso espécimen vivo), el TTA-A se llevó a cabo la desproteinización (NaOH 8%) seguido de una desmineralización (HCl 15%), para el TTA- B se invirtieron las etapas, de tal manera que se obtuvo quitina y posteriormente para la obtención de quitosano se aplico desacetilación (NaOH 50%). Se determinaron el rendimiento y los contenidos de humedad, lípidos, nitrógeno, cenizas y material insoluble en ácido láctico ajustando a un pH de 4.2±0.2. El rendimiento total desde peso vivo de los langostinos fue de 17% similar en lo encontrado para otras especies de crustáceos. El contenido de humedad fue similar para todas las muestras (3.8±0.5%). La muestra Talla 2 TTA-B resulto significativamente mayor para materia insoluble, cenizas y contenido proteico (2.8±0.03, 59.8±0.02, 12±0.8), de estos resultados se concluye que el TTA-B (desmineralización seguido de desproteinización) conduce a un proceso de obtención deficiente en comparación con el TTA-A. ABSTRACT: The exoskeletons of crustaceans are considered environmental pollutants however, are the two main sources of high value-added biopolymers : chitin and its functional derivative , chitosan . The use of these is limited primarily to the variation in chemical composition. Chitin source and uncontrolled deacetylation processes are the main factors that affect the final properties of chitosan. The aim of this work is optimize the process of obtaining chitin and chitosan from exoskeletons of Cherax quadricarinatus and evaluate the quality of the materials obtained. thermoalcanine treatment was applied (TTA ) to samples from exoskeletons dried , ground and sieved ( size 1, 30 -50g and size 2, 10-30g, living specimen weight ), the TTA-A was conducted deproteinization (NaOH 8%) followed by demineralization ( 15% HCl ) for TTA- B stages were reversed , so that 264 | P á g i n a chitin is obtained and subsequently for obtaining chitosan deacetylation was applied ( 50% NaOH). And performance is determined moisture contents, lipids, nitrogen, ash and lactic acid insoluble material and adjusted to a pH of 4.2 ± 0.2 . The total yield from the live weight of the prawns was 17 % similar to that found for other crustacean species. The moisture content was similar for all samples (3.8 ± 0.5%). Sample size 2 TTA- B was significantly higher for not soluble, ash and protein content (2.8 ± 0.03 , 59.8 ± 0.02 , 12 ± 0.8) From these results, it is concluded that TTA- B (demineralization followed by deproteinization) leads to a process of getting poor compared. Palabras clave: termoalcalino. Quitina, Quitosano, Cherax quadricarinatus, tratamiento INTRODUCCIÓN Los desechos de crustáceos producidos por la industria pesquera son la materia prima para la industrialización de la quitina. Las investigaciones realizadas demuestran que estos residuos albergan un polímero natural denominado quitina, sustancia que tiene aproximadamente 200 usos en la industria medicinal, farmacéutica, alimenticia, agrícola, tratamiento de efluentes, entre otras( Mathur and Narang, 1990). La tarea de extraer de ellos la quitina y su derivado el quitosano, puede convertirse no sólo en una alternativa de solución al problema medioambiental, sino que puede también dar apoyo en las diversas aplicaciones con que cuentan estos biopolímeros (Hernández et al., 2009). El procedimiento para obtenerla consiste en aislarla de proteínas, minerales, generalmente calcáreos y pigmentos. Las etapas de este procedimiento se denominan procesos de desproteinización y desmineralización. El quitosano, principal derivado de la quitina, se obtiene industrialmente mediante un tratamiento de desacetilación. Dependiendo de las condiciones de reacción, se obtiene quitosanos de diferente peso molecular y grado de desacetilación. Estas variables los hacen útiles para diversas aplicaciones. El quitosano es el único polisacárido catónico natural; ello le confiere características especiales que lo hacen útil en numerosas aplicaciones. Si bien las técnicas a aplicar para la obtención de quitina y quitosano son contaminantes, debido a que se utilizan soluciones de hidróxido de sodio y de ácido clorhídrico que generan residuos corrosivos, un manejo adecuado y responsable de las mismas permiten una explotación económica del residuo, ya que se le aporta valor agregado y además se disminuye el riesgo de la contaminación del medio ambiente (Yen et al., 2009). El aprovechamiento de estos desechos constituye una oportunidad de desarrollo industrial, y a la vez, una solución inteligente para el problema ambiental que los mismos generan. El objetivo de este trabajo es optimizar el proceso de obtención de quitina y quitosano a partir de exoesqueletos de Cherax quadricarinatus y evaluar la calidad de los materiales obtenidos. MATERIALES Y MÉTODOS Materia prima Se aplico un tratamiento termoalcalino (TTA) a muestras provenientes de exoesqueletos deshidratados, molidos y tamizados (Talla 1 de 30-50g y Talla 2 de 10-30g, peso espécimen vivo), el TTA-A se llevó a cabo la desproteinización (NaOH 8%) seguido de una desmineralización (HCl 15%), para el TTA- B se 265 | P á g i n a invirtieron las etapas, de tal manera que se obtuvo quitina y posteriormente para la obtención de quitosano se aplico desacetilación (NaOH 50%). Rendimiento El rendimiento global (RG) del proceso se calculo utilizando la siguiente expresión: (1) RG RR RT 100 Donde, RT es la cantidad en gramos de la muestra con la que se comenzó el proceso. RR es la cantidad en gramos del producto final (quitosano). Extracto Etéreo Se determinó el extracto etéreo reportado como % total de grasa por extracción continua con éter de petróleo siguiendo el método Goldfisch (Método AOAC 1980, 1995) utilizando como solvente éter de petróleo. Las determinaciones se realizaron por duplicado en las diferentes muestras. Proteína Se determinó mediante el análisis elemental de nitrógeno proteico siguiendo la metodología de Dumas, que se basa en la liberación de nitrógeno por pirolisis y subsiguiente combustión total, utilizando un detector de conductividad térmica. Se utilizaron los factores de conversión según protocolo para la transformación a proteína. Las determinaciones se realizaron por duplicado en las diferentes muestras. Cenizas Se determinó mediante la metodología, primeramente se desecaron las muestras en estufa a 105 °C y posteriormente se carbonizaron y calcinaron en una Mural (Felisa Modelo FE-340) de las muestras a 600 °C hasta peso constante. Las determinaciones se realizaron por triplicado en las diferentes muestras. Humedad La determinación del contenido en agua de las muestras se realizó siguiendo el método AOAC 14.003 (AOAC, 1980). Las determinaciones se realizaron por duplicado. Actividad de agua La aw se midió en un equipo Decagón (Aqua Lab, Modelo CX-3T; 0.003) en el intervalo de temperaturas entre 25-30 ºC, previa calibración del mismo con patrones de disoluciones molares de KCl, 0.5; NaCl, 60; LiCl, 8.57 y LiCl, 1341 con actividades de agua de 0.984, 0.760, 0.500 y 0.250, respectivamente. Las muestras se colocaron en el portamuestras y se procedió a su lectura por duplicado. Método 978.18.AOAC International (1995). Porcentaje de materia insoluble Con la finalidad de evaluar la calidad de los quitosano obtenidos, se determino el porcentaje de materia insoluble (%MI) disolviendo 0.5 g de las muestras (M1A, M1B, M2A y M2B) en acido láctico al 85%, ajustando a un pH de 4.2±0.2. 266 | P á g i n a RESULTADOS Y DISCUSIÓN Se analizó en cada etapa de los TTA-A y TTA-B teniendo como factor la talla 1 y 2 para determinar la eficiencia del proceso y la calidad de los productos obtenidos: quitina y quitosano. Con lo que respecta al rendimiento seco para la obtención de quitosano se obtienen valores significativamente mayores para el TTA-A (65% Talla 1 y 50% Talla 2) comparado con TTA-B (45% Talla 1 y 30% Talla 2), de esta manera, se demostró que el proceso de desproteinización de quitina tiene un efecto importante sobre el rendimiento, similares rendimientos fueron encontrados para otras especies de crustáceos .En cuanto a la talla de los especímenes existen diferencias significativas para ambos TTA. En la Tabla 1. se observan las características fisicoquímicas de quitina obtenida el contenido de humedad es similar para todas las muestras. La pérdida de agua en la muestra es debida a procesos físicos y químicos durante la etapa de obtención del quitosano. Durante la trituración, la eliminación del contenido de agua de hidratos es resultado del calentamiento localizado por fricción. También se considera la eliminación de grupos acetilo como resultado de la desacetilación termoalcalina de la quitina que genera grupos amino libres en la cadena polimérica y es un sitio sensible a la formación de puentes de hidrógeno con el oxígeno de radicales libres -OH y dado que el grado de desacetilación de los quitosano fue de >70%, la posibilidad de formación de moléculas de agua disminuye debido a una menor presencia de grupos amino. La Tabla 1 muestra los resultados de la determinación de los porcentajes de ceniza, nitrógeno, grasa y actividad de agua. Los contenidos de cenizas, grasa y nitrógeno resultaron significativos. El % de nitrógeno que presentan las muestras de quitina fue de ~2.3%. El contenido de nitrógeno del quitosano obtenido es muy bajo (Tabla 2) ~1.50, comparado con el que contienen los exoesqueletos que es del 6%. Es decir, el proceso de desproteinización fue eficiente, pues se eliminó gran porcentaje de la proteína. Tabla 1. Características fisicoquímicas de quitina obtenida a partir de langosta de rio.* Talla Tratamiento 1 2 TTA-A TTA-B TTA-A TTA-B Anova Grasa (%) 0.35±0.06a 0.39±0.04a 0.37±0.02a 1.99±0.23b 0.0004 Nitrógeno (%) 2.06±0.11a 2.54±0.20b 2.01±0.08a 2.59±0.13b 0.0232 Humedad (%) 3.38±0.13a 2.76±0.12ab 3.92±0.25bc 2.85±0.32c 0.0185 Cenizas (%) 32.64±0.12 26.88±1.01 39.64±1.56 35.69±0.27 0.5113 aw 0.284±0.001a 0.337±0.002b 0.304±0.001c 0.257±0.001d 0.000 La transformación de la quitina en quitosano modifica sustancialmente sus propiedades, de modo que éste es fácilmente soluble en soluciones acuosas de la mayor parte de los ácidos orgánicos e inorgánicos (pH < 6.5). La Tabla 2 muestra los resultados de la determinación de los porcentajes de ceniza, grasa, nitrógeno, humedad, actividad de agua y materia insoluble. El contenido de humedad fue similar para todas las muestras (3.8±0.5%). 267 | P á g i n a La muestra Talla 2 TTA-B resulto significativamente mayor para materia insoluble, cenizas y contenido de nitrógeno (2.8±0.03, 59.8±0.02, 1.9±0.03), de estos resultados se concluye que el TTA-B (desmineralización seguido de desproteinización) conduce a un proceso de obtención deficiente en comparación con el TTA-A. La concentración de material insoluble es superior a los valroes reportados en bibliografía (0.3-1.0%). Tomando en consideración la presencia de material inorgánico se puede justificar este resultado. Tabla 2. Características fisicoquímicas de quitosano obtenido a partir de langosta de rio.* Talla Tratamiento 1 2 TTA-A TTA-B TTA-A TTA-B Anova Grasa (%) Nitrógeno (%) Humedad (%) Cenizas (%) aw 1.00±0.34a 2.43±0.33b 1.20±0.01a 0.78±0.02a 0.0077 1.71±0.07b 1.60±0.03ab 1.51±0.00a 1.92±0.03c 0.0026 3.86±0.76 3.73±0.14 3.85±0.21 3.76±0.03 0.9809 60.60±0.46a 63.36±0.12b 62.79±0.47b 59.83±0.85a 0.0074 0.512±0.001 0.500±0.002 0.492±0.001 0.493±0.001 0.0000 Materia Insoluble (%) 2.52±0.04a 2.68±0.01b 2.46±0.04a 2.84±0.04a 0.0012 El resultado correspondiente al porcentaje de ceniza para ambos productos quitina y quitosano está influenciado por la presencia de impurezas de tipo mineral, como el calcio, contenido en sales de CaCO 3 o incluso la presencia de contaminantes metálicos. En la Tabla 1 y Tabla 2 se aprecia que el valor obtenido experimentalmente es superior respecto a lo reportado en bibliografía. El resultado depende, en gran medida, del origen, propiedades y condiciones de obtención del quitosano. Al ser alta la concentración de la disolución de NaOH (50%), la viscosidad se incrementa y aunado a las características estructurales del biopolímero, se facilita la retención de impurezas y se generan mayores productos de ignición. CONCLUSIONES Los resultados demuestran que existe una marcada influencia en el orden de las etapas de extracción y la talla del espécimen vivo. Se obtuvieron biopolímeros de quitina y quitosano con características similares a los biopolímeros reportados en la literatura. Futuras investigaciones centra su atención en lograr una disminución del contenido mineral. REFERENCIAS Hernández, H., Águila, E., Flores, O., Viveros, E., y Ramos, E. (2009) Obtención y caracterización de quitosano a partir de exoesqueletos de camarón. Superficies y Vacío. 22: 57-60. Mathur, N. K. and Narang, C. K. (1990) Chitin and Chitosan versatile polysaccharides form marine animals. Journal of Chemical Education, 11: 123125. Yen, M., Yang, J., and Mau, J. (2009) Physicochemical characterization of chitin and chitosan from crab shells. Carbohydrate Polymers, 75: 15–21. 268 | P á g i n a PROPIEDADES ÓPTICAS, MECÁNICAS Y DE BARRERA DE PELÍCULAS A BASE DE QUITOSANOS OBTENIDOS DE LANGOSTA DE RIO (Cherax quadricarinatus) Diana Alejandra Armendáriz Esparza*, Rosa Elena Ramírez Carrillo, Liliana Raquel Barba de Alba, Carlos Eduardo Romo Bacco, Rafael Calderón Zamarripa** y Laura Eugenia Pérez Cabrera. Depto.de Tecnología de Alimentos, Centro de Ciencias Agropecuarias, Universidad Autónoma de Aguascalientes, Aguascalientes, México. *[email protected] **Instituto del Agua del Estado de Aguascalientes (INAGUA), Gobierno del Estado de Aguascalientes. CATEGORIA: Licenciatura RESUMEN La utilización de subproductos industriales es una alternativa viable para la obtención de películas biodegradables. El quitosano es un polímero obtenido como subproducto de la industria pesquera; es biodegradable y posee capacidad filmogénica. El objetivo del trabajo fue caracterizar las películas obtenidas de cuatro tipos de quitosano obtenidos de Cherax quadricarinatus a través de sus propiedades mecánicas, ópticas y de barrera al vapor de agua. Los cuatro tipos de quitosano fueron obtenidos de especímenes de dos tallas, (talla 1 30-50g) y (talla 2 10-30g), sometidos a un tratamiento químico termoalcalino con la variación en el orden de las etapas. El tratamiento A se llevó a cabo en primer lugar la desproteinización (NaOH 8%) seguido de una desmineralización (HCl 15%), para el tratamiento B se invirtieron las etapas y posteriormente la etapa de desacetilación (NaOH 50%). Para la formulación de las películas se dispersaron los quitosanos M1A, M1B, M2A y M2B (1g) en medio acido (agua desionizada+acido láctico pH=4.1±0.2) y se adicionó glicerol como plastificante (0.6%) se extendieron 20g en superficies y desecaron. Las películas se acondicionaron a HR de 52.9%, se midieron las propiedades mecánicas (ASTME96): esfuerzo de fractura (F), módulo de elasticidad (ME) y porcentaje de deformación (%E) y ópticas (opacidad y trasparencia). La permeabilidad al vapor de agua (WVP) de acuerdo a ASTM E96. El %E fue significativamente mayor para M2B, la opacidad para M2A y la trasparencia para M1B. Para la WVP no existen diferencias significativas. Del estudio se concluye que la talla del espécimen y tratamiento de obtención tienen una influencia en las propiedades estudiadas. Palabras clave: Quitosano, Propiedades Mecánicas, Opacidad, Trasparencia y Permeabilidad. ABSTRACT The use of industrial subproducts is a viable alternative for the production of biodegradable film. The chitosan is a polymer obtein as a subproduct of the fishing industry, is biodegradable and has filmogenic capacity. The aim of this study was to characterize the films obtained from four types of chitosan, obtain from Cherax quadricarinatus through its mechanical properties, optical and water vapor barrier. 269 | P á g i n a The four types of chitosan were obtain from two sizes (size 1 30-50g) and (size 2 10-30g), subjected to a chemical thermoalkaline treatment with variation in the order of the steps. The treatment A was carried out first with the deproteinization (NaOH 8%) followed by a demineralization (HCl 15%), for the treatment B the stages were reversed, and subsequently the deacetylation step (NaOH 50%). For the formulation of the chitosan films dispersed M1A, M1B, M2A, M2B (1g) in an acid midst (deionized water+lactic acid pH 4.1±0.2) and glicerol as plasticizer was adder (0.6%) 20g were spread on surfaces and then they dried. The films were conditioned at 52.9%, mechanical proprieties (ASTME-96) were measured: Fracture stress, modulus of elasticity (ME) and percent strain (%E) and optical (haze and transparency), the r water permeability (WVP) in accordance with ASTM E96. The %E was significantly higher for M1B, opacity for M2A and transparency for M1B. For the WVP it was not significant differences. The study concludes that the sizes of the specimen and obtaining treatment have an influence on the properties studied. KEY WORDS: Chitosan, Mechanical Properties, Opacity, Transparency and permeability. INTRODUCCIÓN El quitosano es un aminopolisacárido, el cual es el principal derivado Ndesacetilado de la quitina aislada de los deshechos de crustáceos (Rhazi et al., 2004). Debido a las propiedades funcionales y fisicoquímicas del quitosano, se ha podido identificar una enorme cantidad de aplicaciones que abarcan áreas tan vareadas como: alimentación, medicina, agricultura, cosmética, y farmacia, entre otras. Se han reportado diversos métodos físico-químicos para su obtención y caracterización, sin embargo, su aplicación está limitada principalmente debido a la variación en su composición química, grado de desacetilación, tamaño de la cadena polimérica y purificación (Rhazi et al., 2004). La fuente de quitina y los incontrolados procesos de desacetilación son los principales factores que afectan las propiedades finales del quitosano (Ferreira et al., 2009). Desde el punto de vista fisicoquímico, el quitosano es un biopolímero hidrosoluble que puede formar películas, hidrogeles, andamios porosos, fibras, micro y nanopartículas en condiciones y medio ácido suaves (Tolaimate et al., 2000). Además, el carácter policatiónico le confiere al quitosano alta afinidad para asociar macromoléculas aunado a que el quitosano es un biopolímero catiónico que presenta actividad antimicrobiana y una gran capacidad de formar películas. Durante el procesamiento industrial de camarón, cangrejo, langosta y langostinos se genera un gran volumen de residuos que, de no estar adecuadamente tratados, pueden ocasionar un grave problema medio ambiental [Parada et al., 2004]. La mayoría de los estudios realizados en la obtención de quitosano han utilizado desperdicios industriales de camarón, sin embargo, en este trabajo se utilizó un método químico adecuado para trabajar exoesqueletos de langostino australiano, los cuales provienen de una producción acuícola del estado de Aguascalientes, con la finalidad de evaluar la obtención de quitosano, al igual que su grado de solubilidad y así obtener un material con un alto valor agregado de biomasa para diferentes aéreas de aplicación en la conservación de alimentos 270 | P á g i n a MATERIALES Y METODOS Formación de películas Se utilizaron cuatro muestras de quitosano obtenido de Cherax quadricarinatus, las cuales provenían de dos diferentes tallas de especímenes vivos (Talla 1 3050g y de Talla 2 (10-30g) así como la variación de las etapas de extracción termoalcalina. Se dispersaron 1g de los cuatro tipos de quitosano en agua desionizada y ácido láctico hasta alcanzar un pH=4.1±0.2, con 0.6 % de glicerol, se extendieron alícuotas de 20g en superficies lisas de 90mm y se desecaron para posteriormente retirarlas de las superficies y acondicionarlas en una atmósfera de con sílica gel. Determinación del espesor El espesor de las películas fue medido con un micrómetro (Mitutoyo), se midieron en 3 puntos y fue considerado el valor promedio Propiedades Mecánicas Las propiedades mecánicas fueron evaluadas con los métodos estándar de la ASTM (D882-97) para tensión. Las muestras (25 x 50 mm) fueron colocadas dejando una separación entre las pinzas de tensión (A/MTG) de 50 mm y el ensayo se realizó a una velocidad de 50 mm/min. Se empleó un analizador de textura (Texture Analyzer TAXT2), se evaluó esfuerzo de fractura (F), módulo de elasticidad (ME) y porcentaje de deformación (% E) en función de la concentración de glicerol. Las curvas Fuerza vs. distancia obtenidas en los ensayos mecánicos fueron transformadas en curvas esfuerzo vs. deformación de Hencky. El esfuerzo de fractura (F), el módulo de elasticidad (ME) así como el porcentaje de deformación en el momento de la rotura (% E) de los films fueron evaluados en al menos 8 muestras de cada una de las formulaciones. El esfuerzo de fractura fue calculado dividiendo la fuerza máxima necesaria para la ruptura del film por la sección transversal del film. El módulo de elasticidad corresponde con la pendiente de la curva esfuerzo de tracción frente a deformación en el tramo lineal inicial. %E fue calculado dividiendo la deformación del film en el momento de la rotura por la longitud inicial (50 mm). Permeabilidad del Agua Se determinó según una modificación del método de la ASTME-96. Las muestras se colocaron en celdas de aluminio de35mm de diámetro (Payne, elcometer), y éstas en recipientes herméticos. Las películas se sometieron a un gradiente de 52% de humedad relativa (RH) que corresponde a una fuerza impulsora de 1753.55 Pa. Se registró el cambio en el peso de la celda en una balanza analítica y ésta se graficó en función del tiempo (h). Los datos se regresionaron linealmente y, considerando el espesor, se calculó la permeabilidad al vapor de agua (WVP) en g Pa-1 s-1 m-1 a 20 ºC. Propiedades Ópticas Se cortaron listones de 10x50 mm, y se analizaron en un espectrofotómetro UVVisible (GBC). Las películas fueron colocadas directamente en la celda de cuarzo para su medición, y se utilizó aire como referencia para la determinación de la transparencia y opacidad. La transparencia se determinó a 600 nm (T600) a partir de la siguiente ecuación: 271 | P á g i n a T600=log %T / b. (Ec 1) donde %T es el porcentaje de transmitancia y b es el espesor de la película (mm). La opacidad de los films fue calculada en base a la siguiente ecuación, de acuerdo al método descrito por Gontard and Guilbert (1994): Opacidad= absorbancia a 500 nm X espesor de la película (Ec. 2) RESULTADOS Y DISCUSIÓN El %E fue significativamente mayor para M2B (Tabla 1), los análisis demuestran que hay una diferencia significativa entre la interacción de la talla y la etapa, el tratamiento A muestra valores de % de elongación mayores pero no hay una diferencia estadística entre ellos, mientras que en el tratamiento B se muestra claramente que el tratamiento afecta de manera importante el %E con respecto a la talla, teniendo mayor impacto las tallas 2 (10-30g) Tabla 1. Valores Promedio de Propiedades Mecánicas Talla 1 2 Etapa A B A B Anova Interacción Talla:Etapa 0.102±0.011 0.113±0.011b 0.094±0.022a 0.163±0.005c 0.0000 2.588±0.289 2.85±0.286b 2.382±0.576a 4.137±0.141c 0.0000 2.686±0.324 1.548±0.418b 2.890±1.466a 1.897±0.757c 0.4461 F 1.72±0.434 0.67±0.079 1.05±0.588 1.36±0.169 0.2062 0.0000 0.0000 0.4856 0.087 Espesor Área b ME b a %E 40.43±2.4b 24.47±2.8a 27.74±2.40b 38.05±4.35b 0.0000 0.0034 No se observó diferencia significativa en la WVT de las películas de quitosano (Tabla 2), sin embargo existe una diferencia estadísticamente diferente entre la media de la permeabilidad entre un nivel de etapa y otro; en el tratamiento B se muestra una mayor a comparación con el tratamiento A. Tabla 2. Valores Promedio de Propiedades Mecánicas Talla Etapa A 1 B A 2 B Interacción Talla:Etapa(Anova) Permeabilidad 10.207±1.787a 12.922±0.295b 10.333±2.048a 14.441±2.425b 0.6189 Las propiedades ópticas de las películas comestibles son de suma importancia ya que presentan la refracción de la luz, y debido a que el quitosano es un biopolímero, factores como el método de extracción y la maduración fisiológica del espécimen (talla) pueden llegar a determinar las características de la película, es decir pueden ser opacos, translucidos o transparentes, de esta manera el estudio y evaluación de estas características determinaran los usos posteriores más apropiados. 272 | P á g i n a Tabla 3 valores promedios de propiedades ópticas Talla Etapa A B A 2 B Interacción Talla:Etapa (Anova) 1 Transparencia Opacidad 0.102±0.011 0.113±0.011 0.094±0.022 0.163±0.005 0.5755 2.5883±0.289 2.855±0.286 2.3825±0.576 4.1375±0.141 0.8159 En la Tabla 3 se muestran los distintos valores obtenidos de los cuatro tipos de quitosano que fueron obtenidos de especímenes de dos tallas, sometidos a un tratamiento químico termoalcalino con la variación en el orden de las etapas. La opacidad fue significativamente mayor para M2A mientras que la transparencia lo fue para M1B. A partir de esto se puede observar que el tratamiento B tiene una influencia sobre la transparencia de las películas, a diferencia del tratamiento A, ya que los valores obtenidos por el tratamiento donde el tratamiento comenzó con una desproteinización (NaOH 8%) seguido de una desmineralización (HCl 15%), dio como resultado películas con una mayor opacidad. El caracterizar las propiedades ópticas, transparencia u opacidad de las películas de Quitosano, son de importancia principalmente si se pretenderá utilizar dicha película como una capa de protección o de apoyo a un alimento o producto con el fin de mejorar sus características sensoriales. CONCLUSION La talla del espécimen y tratamiento de obtención tienen una influencia en las propiedades estudiadas para cada caso en particular, lo que permitirá que la caracterización sea más personalizada y enfocada a la aplicación de este biopolímero. REFERENCIAS Gontard, N. & Guilbert, S. (1994). Bio-packaging: technology and properties of edible and/or biodegradable material of agricultural origin. In: Food Packaging and Preservation (edited by M. Mthlouthi). London: Blackie Academic and Professional. Pp. 159–181. Ferreira C. O., Nunes C. A., Delgadillo, I., & Lopes-da-Silva J. A. (2009) Characterization of chitosan-whey protein films at acid pH. Food Research International, 42(7), 807-813. Parada L. G., Crespín G.D., Miranda R., Katime I. (2004) Caracterización de quitosano por viscosimetría capilar y valoración potenciométrica, Revista Iberoamericana de Polímeros, 5, 1-16. Rhazi M, Desbrieres J, Tolaimate A, Alagui A, Vottero P. (2004). 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Tolaimate A, Debrieres J, Rhazi M, Alagui A, Vincendon M, Vottero P, (2000) The influence of deacetylation process on the physicochemical characteristics of chitosan from squid chitin, Polimer 41, 2463- 2469. 273 | P á g i n a AISLAMIENTO DE CEPAS DE Salmonella RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS A PARTIR DE CARNE CRUDA Gutiérrez-Alcántara, Eduardo Jahir1, Gómez-Aldapa, Carlos Alberto1, Santos López Eva María1, Román Gutiérrez Alma Delia1, Torres-Vitela M. del Refugio2, Villarruel-López Angélica2, Hernández Vélez, Rosa Margarita3, CASTRO-ROSAS, JAVIER1. 1 Centro de Investigaciones Químicas, Área Académica de Química, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Ciudad del Conocimiento, Carretera PachucaTulancingo Km 4.5, 42183, Mineral de la Reforma, Hidalgo, México; 2 Laboratorio de Microbiología Sanitaria,Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías. Universidad de Guadalajara, Marcelino García Barragán 1451.Guadalajara, Jalisco, 44430. México, 3 División de Investigación y Posgrado, Instituto Tecnológico de Villahermosa, Villahermosa, Tabasco. México E-mail: [email protected] POSGRADO Palabras clave: multiresistencia, antibióticos, Salmonella Introducción Se han reportado alrededor de 2,400 serotipos de Salmonella. Este patógeno puede sobrevivir de manera natural en el tracto intestinal de diferentes animales y en el humano. El patógeno es una de las causas más importantes de morbilidad y mortalidad en todo el mundo (3). Uno de los principales vehículos de Salmonella es la carne; diferentes productos cárnicos han sido responsables de brotes de salmonelosis (3). La contaminación de la carne de los animales de abasto con Salmonella puede ocurrir en diferentes etapas desde la granja hasta el momento en que se prepara y se sirve los alimentos en la mesa. Un problema asociado con la producción de la carne es el uso indiscriminado de antibióticos para el control de enfermedades bacterianas (4), lo que puede propiciar resistencia de las cepas de Salmonella a los antibióticos, creando un problema de salud pública. Existe limitada información sobre la frecuencia de cepas de Salmonella resistentes a antibióticos en productos cárnicos que se comercializa en México y en particular en el estado de Hidalgo. Se determinó la presencia de cepas de Salmonella resistentes a antibióticos en dos tipos de carne cruda obtenida en mercados públicos de la ciudad de Pachuca, Hidalgo, México. Metodología Se recolectaron 240 muestras de carne: 186 de molida de res y 54 de pollo. Cada muestra fue de 100 g de carne. La detección y aislamiento de las cepas de Salmonella se realizó por la técnica del servicio de inspección e inocuidad de alimentos del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (5). La técnica fue seguida tal cual, a excepción de que se usaron 100 g de muestra y 900 mL de caldo de pre-enriquecimiento. Las cepas de Salmonella fueron sometidas a ensayos de susceptibilidad a 14 antibióticos y 2 mezclas por la técnica estándar (2). 274 | P á g i n a Los antibióticos y las concentraciones usadas fueron: ampicilina (AMP) 10µg/ml, amikacina (AMK) 30 µg/ml, ciprofloxacina (CIP) 5 µg/ml, sulfisoxazol (SOX) 250 µg/ml, gentamicina (GEN) 10 µg/ml, cloranfenicol (CHL) 30 µg/ml, ceftriaxona (CRO) 30 µg/ml, tetraciclina (TCY) 30 µg/ml, ácido nalidíxico (NAL) 30 µg/ml, estreptomicina (STR) 10 µg/ml, kanamicina (K) 30 µg/ml, trimetoprim/sulfametoxazol (SXT) 1.25/23.75 µg/ml, amoxicilina/ácido clavulánico (AMC) 20/10 µg/ml, eritromicina (ERI)15 µg/ml, colistina (COL) 10 µg/ml, neomicina (N) 10 µg/ml. Las cepas fueron clasificadas en sensibles (S), resistentes (R) y de sensibilidad intermedia (2). Resultados y discusión Salmonella se aisló en el 70 % de las muestras de carne molida de res y en el 50 % de las de pollo. En total se aislaron 612 cepas de Salmonella de ambos tipos de carne. A las 612 cepas de Salmonella aisladas se les realizó la prueba de sensibilidad a los antibióticos. Todas las cepas de Salmonella presentaron resistencia a por lo menos 2 antibióticos (Tabla 1). Tabla 1. Porcentaje de cepas de Salmonella resistentes, sensibles y con sensibilidad intermedia a cada uno de los antibióticos analizados Antibióticos Sulfisoxazol (SOX) Colistina (COL) Estreptomicina (STR) Eritromicina (ERI) Trimetoprim/sulfametoxazol (SXT) Ampicilina (AMP) Ácido nalidíxico (NAL) Kanamicina (K) Neomicina (NEO) Tetraciclina (TCY) Amikacina (AMK) Gentamicina (GEN) Amoxicilina/ácido clavulánico (AMC) Ceftriaxona (CRO) Cloranfenicol (CHL) Ciprofloxacina (CIP) 1 Cepas Resistentes1 (%) 95.75 90.20 86.76 76.96 66.50 66.18 65.69 64.22 63.56 62.25 59.31 55.23 46.41 44.28 16.18 15.20 Sensibilidad intermedia (%) 3.11 0.0 11.28 20.43 27.94 15.36 29.08 31.53 32.03 6.70 27.45 24.02 26.80 22.71 55.39 19.28 Sensibles (%) 1.14 9.80 1.96 2.61 5.56 18.46 5.23 4.25 4.41 31.05 13.24 20.75 26.80 33.01 28.43 65.52 Las resistencias más frecuentes de las cepas de Salmonella a los antibióticos fueron a: sulfisoxazol (SOX) 95.75%, colistina (COL) 90.20%, estreptomicina (STR) 86.76% y eritromicina (ERI) 76.96% (Tabla 1). Por el contrario la mayoría de cepas fueron sensibles a Ciprofloxacina. 275 | P á g i n a Los perfiles de resistencia observados difieren mucho de una cepa a otra. Las diferencias de resistencias en las cepas de Salmonella pueden ser debido a los hábitos locales en el uso de antibióticos, o tal vez a que la carne que se comercializa en los mercados de Pachuca, procede de diferentes regiones o estados del país. Es importante destacar la elevada multirresistencia de las cepas aisladas: 3 cepas fueron sensibles a los 14 antibióticos y a las 2 combinaciones analizadas, más del 50 % de las cepas fueron resistentes a por lo menos 10 antibióticos y el 30.2% a por lo menos 12 antibióticos (Tabla 2). Nuestros resultados difieren de lo reportado por Antunes y col. (1): de 1183 cepas de Salmonella aisladas de diferentes fuentes observaron que el perfil de resistencia más frecuente fue de: ácido nalidixico, tetraciclina, estreptomicina, sulfametoxazol y ampicilina con un rango del 17 al 31% (1). En cuanto al perfil de multirresistencia de Salmonella Van y col. analizaron 180 muestras de carnes y productos marinos; las cepas aisladas presentaron un 40.7%, 22.0%, 18.7%, 16.5% de resistencia a tetraciclina, ampiclina, amoxicilina, ácido nalidixico, sulfafurazolona y estreptomicina, respectivamente (6). Además, reportaron que el 50.5 % de las cepas presentaron resistencia al menos a un antibiótico (6). Tabla 2. Perfil de resistencia a los diferentes antibióticos (multiresistencia) de las cepas de Salmonella aisladas de la carne molida de res y pollo No.de cepas 3 6 6 20 7 5 2 2 6 2 2 2 2 4 5 6 6 12 6 6 6 6 6 6 6 15 6 12 6 6 9 9 Número [( )-] y tipo de antibióticos a los que fueron resistentes las cepas (16)-AMP-AMK-CIP-SOX-GEN-CHL-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (15)-AMP-AMK-SOX-GEN-CHL-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (15)-AMP-AMK-CIP-SOX-GEN-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (14)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (14)-AMP-AMK-CIP-SOX-GEN-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (14)-AMP-AMK-CIP-SOX-GEN-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-ERI-COL-N (14)-AMP-AMK-CIP-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (14)-AMP-AMK-CIP-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (13)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL (13)-AMP-SOX-GEN-CHL-CRO-TCY-NAL-STR-TSX-AMC-ERI-COL-N (13)-AMP-AMK-CIP-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL (13)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-COL-N (13)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-TCY-NAL-STR-K-AMC-ERI-COL-N (13)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (13)-AMP-AMK-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (13)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-ERI-COL-N (13)-AMP-AMK-CIP-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-AMC-ERI-COL-N (13)-AMP-AMK-SOX-GEN-CHL-TCY-NAL-STR-K-TSX-ERI-COL-N (13)-AMP-CIP-SOX-GEN-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (12)-AMP-AMK-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-TSX-AMC-ERI-COL-N (12)-AMP-AMK-SOX-CHL-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL (12)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-AMC-ERI-COL-N (12)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-TSX-AMC-COL-N (12)-AMP-AMK-SOX-CRO-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (12)-AMP-AMK-SOX-GEN-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (12)-AMP-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (12)-AMP-AMK-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-TSX-ERI-COL-N (12)-AMP-SOX-GEN-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (12)-AMP-AMK-SOX-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL-N (12)-AMK-SOX-GEN-CHL-TCY-NAL-STR-K-TSX-ERI-COL-N (11)-AMP-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-TSX-AMC-ERI-COL-N (11)-AMK-SOX-GEN-TCY-NAL-STR-K-TSX-ERI-COL-N 276 | P á g i n a 6 6 6 6 6 6 9 6 6 6 6 6 6 6 9 9 9 6 6 9 6 6 24 12 9 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 21 6 6 9 6 6 6 9 18 6 6 6 6 6 6 6 6 4 4 4 4 3 3 (11)-AMK-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-K-TSX-ERI-COL-N (11)-AMP-AMK-SOX-GEN-TCY-STR-K-TSX-ERI-COL-N (11)-AMP-AMK-SOX-GEN-NAL-STR-K-AMC-ERI-COL-N (11)-AMK-CIP-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-TSX-COL-N (10)-AMP-AMK-SOX-CRO-NAL-STR-TSX-AMC-ERI-COL (10)-AMP-SOX-GEN-TCY-NAL-STR-TSX-AMC-ERI-COL (10)-AMP-SOX-GEN-CRO-NAL-TSX-AMC-ERI-COL-N (10)-AMP-GEN-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL (10)-AMP-SOX-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-ERI-COL (10)-AMP-AMK-SOX-CRO-NAL-STR-K-AMC-COL-N (10)-AMP-AMK-SOX-GEN-TCY-STR-K-TSX-COL-N (10)-AMP-AMK-SOX-NAL-STR-K-AMC-ERI-COL-N (10)-AMP-AMK-SOX-CRO-STR-K-TSX-ERI-COL-N (10)-AMK-CIP-SOX-GEN-CRO-NAL-STR-K-COL-N (10)-AMP-AMK-SOX-GEN-TCY-STR-K-TSX-ERI-N (10)-AMP-SOX-GEN-TCY-STR-K-TSX-AMC-ERI-N (10)-AMK-SOX-GEN-TCY-STR-K-TSX-ERI-COL-N (10)-AMP-SOX-GEN-CHL-TCY-STR-K-TSX-ERI-N (9)-AMP-AMK-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-TSX-COL (9)-AMP-SOX-TCY-NAL-STR-TSX-AMC-ERI-COL (9)-AMP-AMK-SOX-NAL-STR-K-AMC-ERI-COL (9)-AMP-AMK-SOX-GEN-TCY-NAL-STR-K-ERI (9)-AMK-SOX-GEN-STR-K-TSX-ERI-COL-N (9)-AMK-SOX-GEN-TCY-STR-K-TSX-ERI-N (9)-AMP-SOX-GEN-TCY-STR-K-ERI-COL-N (9)-SOX-CRO-TCY-NAL-K-TSX-ERI-COL-N (9)-AMP-SOX-CRO-NAL-STR-K-ERI-COL-N (8)-AMP-AMK-SOX-NAL-STR-TSX-AMC-COL (8)-AMP-AMK-SOX-CRO-TCY-TSX-ERI-COL (8)-AMP-SOX-TCY-NAL-STR-TSX-AMC-ERI (8)-SOX-CRO-TCY-NAL-STR-TSX-ERI-COL (8)-SOX-CRO-TCY-NAL-TSX-AMC-COL-N (8)-SOX-CHL-TCY-NAL-STR-TSX-COL-N (8)-AMP-TCY-NAL-STR-K-TSX-AMC-COL (8)-AMP-AMK-SOX-GEN-STR-K-TSX-ERI (8)-AMK-SOX-GEN-STR-K-ERI-COL-N (8)-AMK-SOX-GEN-K-TSX-ERI-COL-N (7)-AMP-AMK-GEN-NAL-STR-AMC-ERI (7)-SOX-CRO-TCY-NAL-TSX-ERI-COL (7)-SOX-CHL-TCY-NAL-STR-TSX-COL (7)-AMP-SOX-GEN-AMC-ERI-COL-N (7)-AMP-SOX-STR-K-AMC-ERI-COL (7)-AMK-SOX-GEN-STR-K-COL-N (7)-AMK-SOX-GEN-K-ERI-COL-N (6)-AMP-SOX-CRO-AMC-ERI-COL (6)-AMP-AMK-SOX-STR-ERI-COL (6)-SOX-TCY-STR-ERI-COL-N (6)-SOX-GEN-K-ERI-COL-N (6)-SOX-STR-K-ERI-COL-N (5)-AMP-SOX-NAL-STR-AMC (5)-SOX-TCY-NAL-TSX-COL (5)-SOX-TCY-STR-ERI-COL (5)-SOX-NAL-STR-ERI-COL (4)-SOX-NAL-STR-COL (4)-SOX-STR-ERI-COL (3)-SOX-TCY-COL (3)-SOX-ERI-COL (2)-AMP-SOX 277 | P á g i n a Conclusiones Los resultados muestran un problema serio de multiresistencia de Salmonella a los antibióticos. Es necesario una mayor regulación, vigilancia y seguimiento del uso de antibióticos durante la cría de los animales de abasto. En el contexto actual, la carne cruda de res y pollo pueden estar participando en la diseminación de cepas resistentes entre la población consumidora. Es necesaria la implementación de prácticas adecuadas de higiene durante toda la cadena de producción de la carne, incluida la aplicación de desinfección efectiva de las canales. Bibliografía 1. Antunes P., J. Machado and L. Peixe. 2006. Characterization of antimicrobial resistance and class 1 and 2 integrons in Salmonella enterica isolates from different sources in Portugal. J. Antimicrob. Chemother. 58:297–304. 2. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2009. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. Twenty-First Edition. M02-A10 and M07-A8. 3. Gómez-Aldapa, C.A., A. Villarruel-López, M.R. Torres-Vitela and J. CastroRosas. 2012. The role of foods in Salmonella infections. Pp. 21-46. En: Salmonella - A Dangerous Foodborne Pathogen. B.S.M. Mahmoud (Ed.). Intech Publisher. Rijeka, Croatia. 4. Oliver S.P., S.E. Murinda and B.M. Jayarao. 2011. Impact of Antibiotic Use in Adult Dairy Cows on Antimicrobial Resistance of Veterinary and Human Pathogens: A Comprehensive Review. Foodborne Pathog Dis. 8(3):337-55. 5. U.S. Department of Agriculture. 2011. Isolation and Identification of Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg and Catfish Products. Microbiology laboratory guidebook, MLG 4.05. Disponible en la página: http://www.fsis.usda.gov/PDF/MLG_4_05.pdf Fecha de acceso: julio, 2012. 6. Van T., G. Moutafis, T. Istivan, L. Thuoc Tran and P. Coloe. 2007. Detection of Salmonella spp. in retail raw food samples from Vietnam and characterization of their antibiotic resistance. Appl. Environ. Microbiol. 73(21):6885–6890. 278 | P á g i n a EFECTO DE LA EXTRACCIÓN SECUENCIAL DE LAS FRACCIONES PROTEICAS EN LAS PROPIEDADES TÉRMICAS DE LA HARINA DE MAÍZ NIXTAMALIZADA Amador-Hernández, M.1, Olguin-Arteaga, G.M.1, Quintanar-Guzmán, A.2, SolorzaFeria, J.3, Sánchez-Ortega, I.1, Díaz-Sánchez, F.1, Castro-Rosas, J.1, SantosLópez, E.M.1 1. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, México, Área Académica de Química, Ciudad Universitaria, Crta Pachuca-Tulancingo Km. 4.5, Col. Carboneras, Mineral de la Reforma, C.P. 42183, Hidalgo, México, [email protected] 2. Adriana Consulting Services, USA, P.O. Box 6762, Siloam Springs, Arkansas, EUA, zip 72761. [email protected] 3. Instituto Politécnico Nacional, CEPROBI. Km 6 Carretera Yautepec-Jojutla, Calle Ceprobi 8, Col. San Isidro. C.P. 62731. Yautepec, Morelos, México, [email protected] LICENCIATURA Objetivo Determinar el efecto de la extracción secuencial de las fracciones proteicas en las propiedades térmicas de la harina de maíz nixtamalizado. Resumen Se sabe que durante la nixtamalización ocurren cambios en la estructura de las proteínas formando enlaces que protegen al gránulo de almidón (almidón-calcioproteína) lo que causa un mayor gasto de energía para conseguir la gelatinización necesaria en la elaboración de productos de botana. En este estudio se determinó el efecto de la extracción secuencial de las fracciones proteicas en las propiedades térmicas de harinas de maíz nixtamalizadas y se comparó con muestras control (sin cal). Para determinar las propiedades térmicas de los residuos se midió la entalpía a 7 mg de muestra hidratada al 50% de humedad en celdas de aluminio herméticamente selladas, empleando un barrido de temperatura de 25 a 120°C con una velocidad de calentamiento 10°C/min. Los resultados indican que la ausencia de albúminas y globulinas en la harina no influyen en la energía necesaria para perturbar al gránulo de almidón en muestras con cal (3.97 ± 0.11 J/g, 3.98 ± 0.20 J/g) y sin cal (3.59 ± 0.18 J/g, 3.74 ± 0.27 J/g), mientras que cuando se retiran además la α, β y δ zeínas se incrementa la entalpía de gelatinización en muestras con cal (4.91 ± 0.14 J/g) contrariamente a lo ocurrido en muestras sin cal (2.73 ± 0.24 J/g). En el residuo IV se obtuvo el mayor valor de entalpía (5.97 ± 0.24 J/g) en muestras con cal. Finalmente la entalpía disminuye notablemente en el residuo cuando se han retirado las fracciones proteicas (2.39 ± 0.16 J/g). Cada fracción de proteínas contribuye a dar estabilidad al cristal de almidón, principalmente las γ- zeínas y las glutelinas por lo que su ausencia provocara una reducción en la entalpía requerida para la gelatinización del almidón. 279 | P á g i n a Palabras clave: nixtamalización, entalpia de gelatinización, harina de maíz nixtamalizado, fracción proteica. Introducción La nixtamalización es un tratamiento térmico-alcalino importante en la transformación del maíz en diversos productos, donde se generan cambios químicos en el contenido de nutrientes del maíz, obteniendo proteínas de mejor calidad en comparación con la del maíz sin procesar. Las razones de esto aún no son muy claras, sin embargo se sabe que la zeína es la fracción proteica más afectada en el proceso debido a que se polimeriza durante la cocción. También se ha estudiado la presencia de la cal: promueve uniones entre calcio-zeína-almidón, principalmente por puentes de calcio los cuales son muy difíciles de romper e incrementan la termorresistencia de las proteínas. El resultado de estas uniones, interacciones y puentes que forma la cal con las proteínas se ve reflejado en las propiedades térmicas de las harinas de maíz nixtamalizado, las proteínas son las más afectadas porque captan la energía térmica y esto evita que el gránulo la reciba, entonces se requiere más energía para gelatinizar debido a que una parte se gasta en desnaturalizar a la proteína y la otra en gelatinizar. En este estudio el efecto de la extracción secuencial de las proteínas de la harina de maíz nixtamalizado es con la finalidad de darle diferentes propiedades funcionales a las harinas, que permitan mejorar los procesos como por ejemplo evitar gastos energéticos innecesarios y aumentar rendimientos de la harina. Materiales y métodos Se utilizó la variedad de maíz dentado, obtenido en la región de El Arenal, Hidalgo. El tratamiento alcalino se realizó en lotes de 500 g de maíz, según la metodología descrita por Rojas-Molina et al. (2008). La extracción de las proteínas se realizó de acuerdo al método empleado por Landry. (1983). Y las fracciones extraídas de proteína se dializaron en un tubo de membrana porosa Spectra/por (Spectrum Medical Industries, Inc., Canadá) con un tamaño de poro de 3500 Da utilizando solución de concentración menor (agua desionizada). A continuación, los extractos dializados se liofilizaron para obtener los aislados de proteína. Posteriormente los 5 residuos obtenidos de la extracción de proteínas se secaron por una noche a 40° C para el análisis térmico: CaFR1 y NCaFR1 (harina nixtamalizada después de la extracción de globulina y albúmina solubles en solución salina), CaFR2 y NCaFR2 (harina sin globulinas y albúminas), CaFR3 y NCaFR3 (después de α-, β-, δ-zeínas y la extracción de proteínas similares a zeína), CaFR4 y NCaFR4 (después de γ-zeínas y la extracción de proteínas similares a glutelinas), CaFR5 y NCaFR5 (después de la extracción de todas las proteínas). Se determinó la entalpia, la temperatura pico y el intervalo de temperatura de gelatinización de las muestras, por calorimetría diferencial de barrido (DSC), se midió la entalpía a 7 mg de muestra hidratada al 50% de humedad en celdas de aluminio herméticamente selladas, empleando un barrido de temperatura de 25 a 120°C con una velocidad de calentamiento 10°C/min. Todas las mediciones se llevaron a cabo por triplicado. 280 | P á g i n a La proteína cruda (N x 6.25) de la CaF y NCaF harinas, extractos y los residuos se determinó por el método de Dumas con un sistema autoanalizador FP-528 (LECO). Se realizó el análisis de varianza con un nivel de significancia del 5% (p = 0,05), y las diferencias significativas entre las medias fueron definidas por la prueba Newman-Keuls. Resultados y discusiones Los resultados de la distribución de las proteínas de los extractos y la recuperación de proteínas se muestran en la tabla 1. NCaF presentó un menor contenido de proteína que CaF, debido probablemente a que las proteínas forman puentes muy estables con el calcio y esto permite que no se solubilicen en agua al momento de la cocción, caso contrario en lo que ocurrió en las muestras sin cal. El contenido de proteína que se encuentra en el maíz nixtamalizado fue similar al intervalo reportado por Bressani et al. (2001) de 6.68-9.0 %, Rojas Molina et al. (2008) y más bajo que el valor promedio (9.72 % ± 0.54) encontrados por Flores et al (2000) en las harinas comerciales de maíz nixtamalizado. Tabla 1. Distribución de la fracción de proteína en harinas de maíz nixtamalizado y harinas sin cal Proteína Muestra Total Porcentaje de la proteína total extraída Fracción Fracción Fracción Fracción Fracción I II III IV V CaF 7.40 7.06 0.48 43.11 3.54 32.40 NCaF 7.21 6.13 0.27 40.90 2.36 29.39 Proteína expresada como N X 6.25 Residuo Proteína recuperada 8.04 7.16 92.62 86.20 En el análisis térmico de las muestras con cal y sin cal de la tabla 2 los resultados indican que el residuo de la fracción I y II (ausencia de albúminas y globulinas) no influyen en la energía necesaria para perturbar al gránulo de almidón en muestras con cal (3.97 ± 0.11 J/g, 3.98 ± 0.20 J/g) y sin cal (3.59 ± 0.18 J/g, 3.74 ± 0.27 J/g) ya que en ambos tipos de muestra se solubilizan durante la cocción. En el residuo III al eliminar la α, β y δ zeína se incrementa la entalpía de gelatinización en muestras con cal (4.91 ± 0.14 J/g) contrariamente a lo ocurrido en muestras sin cal (2.73 ± 0.24 J/g), esto se debe a la polimerización de la Γ zeína en presencia de cal formando una red que protege al almidón. En el residuo IV se obtuvo el mayor valor de entalpía (5.97 ± 0.24 J/g) en muestras con cal por la interacción directa de calcio-glutelinas. Finalmente, la entalpía disminuye notablemente en el residuo V, tanto en las muestras con cal como en las muestras control, ya que el almidón no cuenta con la protección de las proteínas necesitando una cantidad mínima de energía para gelatinizar el gránulo. 281 | P á g i n a Tabla 2. Temperaturas de pico, temperaturas de transición y entalpías de las muestras control y residuos de harinas de maíz [Corn Flour Residues (CFR)]. ΔH (J/g) Tp (°C) Con cal Sin cal Con cal Sin cal Control 73.80 ± 0.11 79.04 ± 1.52 4.80 ± 0.01 3.43 ± 0.16 CFR I 79.70 ± 0.95 83.66 ± 1.17 3.97 ± 0.11 3.59 ± 0.18 CFR II 72.76 ± 0.42 76.83 ± 0.52 3.98 ± 0.20 3.74 ± 0.27 CFR III 71.60 ± 0.27 76.35 ± 0.60 4.91 ± 0.14 2.73 ± 0.24 CFR IV 78.81 ± 1.00 82.11 ± 0.63 5.97 ± 0.24 3.60 ± 0.17 CFR V (1er pico) 81.11 ± 2.41 78.13 ± 0.63 2.39± 0.16 2.46 ± 0.07 (2do pico) 109.53 ± 1.36 107.8 ± 1.60 1.72± 0.19 1.65 ± 0.06 Conclusiones Cada fracción proteica contribuye a dar estabilidad al cristal de almidón principalmente en las muestras con cal, ya que las proteínas interactúan con el calcio formando redes protectoras del almidón, por lo que al comparar cada una de las fracciones de proteína se observa que la ausencia de Γ-zeínas y glutelinas provocara una reducción en la entalpia necesaria para gelatinizar el almidón, donde la industria podrá tener una reducción en cuanto a los gastos de energía para la elaboración de productos de maíz nixtamalizados. Referencias Bressani, R. y Mertz, E.T. 1958. Studies on corn protein. IV. Protein and amino acid content of different corn varieties. Cereal Chem., 35: 227-235. Landry, I., Delhaye, S., Damerval, C. 2000. Improved Method for Isolating and Quantitating a-Amino Nitrogen as Nonprotein, True Protein, Salt-Soluble Proteins, Zeins, and True Glutelins in Maize Endosperm. Cereal Chemistry 77(5): 620-626 Flores-Farías, R., Martínez-Bustos, F., Salinas-Moreno, Y., Chang, Y.K., González- Hernández, J., and Ríos, E. 2000. Physicochemical and rheological characteristics of commercial nixtamalized Mexican maize flours for tortillas. Journal of the Science of Food and Agriculture. 80: 657-664. Rojas-Molina. I., Gutiérrez, E., Cortés-Acevedo, M. E., Falcón, A., Bressani, R., Rojas, A., Ibarra, C., Pons-Hernández, J. L., Guzmán-Maldonado, S. H., Cornejo- Villegas, A., y Rodríguez, M. E. 2008. Analysis of quality protein changes in nixtamalized QPM flours as a function of the steeping time. Cereal Chemisty. 85(3):409-416 282 | P á g i n a TLC-091 PROPUESTA DE MUROS VERDES CON PRODUCTOS ORGÁNICOS PARA RESTAURANTES Y HOGARES. CENTRO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE SAN ÁNGEL Licenciatura en Gastronomía y Artes Culinarias UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE QUÍMICA Departamento de Alimentos y Biotecnología Cristina Millet García, Olga del Carmen Velázquez Madrazo2. 1Facultad de Química, Departamento de Alimentos y Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México, México D.F. 04510, México. 2Centro de Estudios Superiores de San Ángel. Morelos 7, Tizapán, San Ángel, D.F, México. [email protected] y [email protected] Categoría: Licenciatura. Objetivos están confirmados en los productos agrícolas orgánicos (PrO). nivel doméstico y de restaurante PyME. Resumen La AO lleva a cabo prácticas de gestión específicas para los ambientes en los que se aplica y su principal beneficio es la sustentabilidad a largo plazo mediante el establecimiento de un equilibrio ecológico para proteger la fertilidad del suelo y evitar problemas de plagas (FAO, 2003). En el campo de la salud humana se considera que el principal beneficio es que al no utilizar insumos agrícolas, no hay residuos de éstos en los PrO y hay algunos reportes que señalan mayor valor nutricio en los vegetales cultivado de manera orgánica. Por ejemplo, desde 2001, Worthington reporta “genuinas diferencias en el contenido nutricio de PrO frente a productos de cultivo convencional (PrC)”, ya que hizo un importante estudio estadístico a partir de los datos publicados sobre composición nutricia en productos agrícolas orgánicos y de cultivo convencional. Encontró mayor contenido de vitamina C, hierro y fósforo en PrO en tanto que encontró menos nitratos, en ambos casos con diferencias significativas. En el contenido proteico no hubo diferencias significativas, pero si las hay en el sentido de que los PrO tienen mayor contenido de minerales nutricionalmente importantes y tienen menos metales pesados, respecto a los PrC. En 2011, Lester y Saftner realizaron un estudio que puso especial atención a las variables (generalmente ignoradas) de cultivo, cosecha, postcosecha y almacenamiento de diversos vegetales obtenidos mediante AO y cultivo tradicional (CT) y reportaron que PrO tienen generalmente mayor contenido de materia seca, ácido ascórbico, fenoles y azúcar, en tanto que presentan menor contenido de humedad, nitratos y proteína, y generalmente, menor rendimiento; ellos consideran además que la tendencia actual de elaborar perfiles de nitrógeno es un enfoque que permitirá mejorar tanto la agricultura convencional como la orgánica. Otro ejemplo lo ofrecen Koh y cols (2012) que estudiaron en espinacas de AO y CT, 17 flavonoides, ácido ascórbico, nitratos y oxalatos. Encontrando que en los PrO los contenidos de flavonoides y ácido cítrico son significativamente mayores respecto a las espinacas de CT (p <0.001); lo inverso sucede en nitratos y no encontraron diferencia significativa en el oxalato. También se han encontrado niveles mayores, estadísticamente significativos (P<0-05) de polifenoles bioactivos en tomates orgánicos, respecto a los de origen convencional (Lamuela-Raventos, 2012). Aunque la baja productividad y disminución de rendimientos son algunos de los problemas de la AO, éste es un inconveniente de menor importancia frente a los beneficios para la salud y especialmente, cuando el cultivo es para autoconsumo. 283 | P á g i n a Y podemos decir que en el caso de las PyMES, la producción, aunque no sea altamente eficiente, es mucho más conveniente que la adquisición, al menos en algunos vegetales, y puede ofrecer valor agregado por los atributos nutricios y la consideración del ambiente. Al buscar opciones de AO para pequeña escala, específicamente para áreas urbanas, se encontró que la AO surgió precisamente como alternativa agrícola y no consideraba ni la posibilidad de cultivo en zonas urbanas (ni verticales) ni mucho menos la hidroponía. Desde luego no son equivalentes y algunos piensan que por ser “alternativa” y moderna, la hidroponía no puede ser AO. El Dr. Nichols (2007), retirado de Massey University y experto en hidroponía considera que la sustentabilidad es un aspecto indispensable de los proyectos productivos con futuro y señala también que cuando se cuidan los factores que pueden hacer de la hidroponia una actividad sustentable, amigable con el ambiente, puede considerarse más “orgánica” que los sistemas de AO certificados mas estrictos. Nichols pone como ejemplo la recirculación del agua y nutrientes, que en el cultivo hidropónico, a diferencia de lo que sucede con cultivos en el suelo, sean AO, CT o de invernadero, no se pierden en el suelo. Éste y otros autores como Brown (2007) consideran que si la hidroponia utiliza sustratos, nutrientes y sistemas de recirculación que puedan certificarse como orgánicos, el potencial para esta combinación es enorme. Y ambos coinciden en que algunas de las ventajas adicionales de la sinergia hidroponia y agricultura orgánica, serán mejor nutrición, mayor seguridad, protección al ambiente y mejores rendimientos que a su vez generen menores costos. De hecho la permacultura es otra vigorosa corriente para la producción de alimentos que no compromete el ambiente y que si ha considerado la producción en pequeños espacios urbanos (Permaculture Inst., 1996). El cultivo hidropónico, por otro lado es el método utilizado para cultivar plantas usando soluciones minerales disueltas en el agua, en vez de “tierra” o suelo agrícola. Es una técnica de cultivo de plantas con nutrientes controlados, sin el uso de suelo, ni tierra, ni humus y con recirculación de agua. Las plantas cultivadas tienen sus raíces en un medio inerte y estéril, que no aporta nutrientes por sí mismo, pero que permite que circule por las raíces de la planta la cantidad adecuada de aire, el agua y los nutrientes necesarios para el desarrollo del vegetal. Esta técnica de agricultura es aplicable a nivel comercial en grandes invernaderos y también en pequeña escala y en tal caso, se utilizan recursos que las personas tienen a la mano, como espacios sin utilizar, materiales de desecho y tiempo libre. Una de las circunstancias que la hacen más necesaria son los espacios limitados, como los urbanos (Brown, 2007). Entre las huertas hidropónicas, las verticales pueden utilizarse en paredes, ventanas y otros espacios similares, frecuentemente disponibles en el hogar o en los restaurantes. Entre sus ventajas está un buen aprovechamiento de la luz solar de las ventanas, y un óptimo aprovechamiento del agua de riego, ya que el exceso por saturación de una planta no es descartado, sino que escurre a la planta del nivel inferior hasta llegar al fondo y permite el riego por goteo continuo, mediante una bomba de aire; esto mismo mantiene circulando los nutrientes entre las plantas, en forma permanente y evita cualquier desperdicio de agua. Favorece también la disponibilidad de productos todo el año, gracias a que el cultivo se puede instalar en áreas interiores o semiprotegidas y constituye, sin duda, un elemento ornamental muy estético en cualquier hogar o establecimiento, especialmente de alimentación (Zeigest, 2010). Metodología: Para llevar a cabo el proyecto, se revisó literatura de los últimos 5 años en revistas especializadas de nutrición y de inocuidad alimentaria, para identificar los atributos nutricios y beneficios para la salud que se han comprobado en PrO; a partir 284 | P á g i n a de estos resultados se seleccionaron las yerbas y hortalizas más convenientes para un muro verde a nivel doméstico o de restaurante PyME. Por otro lado se investigaron opciones para cultivo orgánico en pequeña escala y para autoconsumo, pero conservando los beneficios para la salud, que desde el inicio motivaron la investigación. Finalmente, se ha implementado el cultivo hidropónico y orgánico, en muro verde para los siguientes vegetales de importancia en el hogar y el restaurante: lechuga, chile serrano, albahaca y jitomates cherry y uva. Se está trabajando además en el cultivo hidropónico orgánico de romero, fresas y menta. En el Congreso se presentará la propuesta completa, considerando localización, contenedores, sistema de soporte, instalación y costo para el muro verde de cultivo hidropónico orgánico de estos vegetales, específicamente diseñado para el hogar y el restaurante. Se han considerado también las temporadas, riego y drenaje, los cuidados, formas de reproducción, siembra y/o transplante, así como una guía de recomendaciones generales para el cuidado del muro verde. Conclusiones: Se encontraron varios productos agrícolas con especial valor agregado por el cultivo orgánico y se elaboró una propuesta para un muro verde, fundamentada en principios de AO, de hidroponía y de permacultura, que permite cultivarlos para autoconsumo en casa o pequeño o mediano negocio de alimentos preparados. Se recomienda continuar con la investigación para aplicar a otros productos y a otra escala, porque la propuesta generada realmente constituye una buena opción para alimentación más económica y segura. Bibliografía Andersen, M., C. Pazderka, P. Liu, M. Castejón, C.E. Morales y F.I. Elizondo. 2003. ¿Qué es la agricultura Orgánica? Depósito de Documentos de FAO. Disponible a través de Internet en: http://www.fao.org/docrep/007/ad818s/ad818s03.htm Koh, E., S. Charoenprasert and A.E. Mitchell. 2012 (March 6th). Effect of Organic and Conventional Cropping Systems on Ascorbic Acid, Vitamin C, Flavonoids, Nitrate, and Oxalate in 27 Varieties of Spinach (Spinacia oleracea L.). J. Agric. Food Chem., 60 (12):3144–3150. DOI: 10.1021/jf300051f Lamuela-Raventos, R.M. 2012 (march 2). Evaluation of a Method To Characterize the Phenolic Profile of Organic and Conventional Tomatoes. J. Agric. Food Chem., 60 (13): 3373–3380. DOI: 10.1021/jf204702f Lester, G.E. and R.A. Saftner. 2011. Organically versus Conventionally Grown Produce: Common Production Inputs, Nutritional Quality, and Nitrogen Delivery between the Two Systems. J. Agric. Food Chem., 59 (19): 10401–10406. DOI: 10.1021/jf202385x Nichols, M. 2002. Why Not Organic Hydroponics? Practical Hydroponics & Greenhouses. Iss 63, March/April. Disponible a través de Internet en: http://hydroponics.com.au/why-not-organic-hydroponics/ Permaculture Institute. 1996. Key Concepts in Permaculture. Disponible a través de Internet en: http://www.permaculture.org/nm/index.php/site/key_concepts/ Worthington V. 2001 (Apr). Nutritional quality of organic versus conventional fruits, vegetables, and grains. J Altern Complement Med. 7(2):161-73. Zeigest. 2010 (28 noviembre). Proyecto de Hidroponia Vertical. Zeigest Mar del Plata. Disponible a través de Internet en: http://zeitgeistmdp.com.ar/z/2010/11/28/proyecto-hidroponia-vertical 285 | P á g i n a Diferencias en la capacidad antioxidante de dos tipos de extracto de ginkgo biloba Victoria Mérida-Portilla1*, Moreno-León G.2, Rivadeneyra Domínguez E.1, DíazSobac R.1,2 y Vázquez-Luna A.1,2+ 1 Facultad de Química Farmacéutica Biológica, Universidad Veracruzana, Zona Universitaria, Xalapa, Ver. C.P. 91000. 2 Instituto de Ciencias Básicas, Lab. de Biología y Química Molecular de Frutas, Universidad Veracruzana/Rafael Sánchez Altamirano s/n, Xalapa, Ver. C.P. 91190/[email protected] * Autor que presentará el trabajo + Autor a quien la correspondencia deberá ser enviada Objetivo general: Determinar las diferencias en la capacidad antioxidante de extracto de ginkgo biloba alópata (A) y homeópata (H), para aprovechar sus propiedades en la industria alimentaria. Resumen: El extracto de ginkgo biloba (GB) se ha recomendado en casos de insuficiencia circulatoria cerebral, vértigo y por su acción antioxidante, neutraliza los radicales libres de oxígeno e hidroxilo que aumentan en la isquemia de los tejidos. El objetivo fue determinar las diferencias en la capacidad antioxidante de extracto de ginkgo biloba alópata(A) y homeópata(H), para aprovechar sus propiedades en la industria alimentaria. Se utilizaron dos tipos de GB, se prepararon 25 diluciones (1:20, v/v), para c/u. Se cuantificaron flavonoides totales. La actividad antioxidante se evaluó por FRAP y DPPH, así como la concentración inhibitoria media (IC 50). Cada ensayo fue hecho por triplicado para determinar reproducibilidad. Se realizó un ANOVA, la prueba Tukey para análisis de medias y se calcularon los coeficientes de Pearson. Las diluciones de ginkgo obtenidas tuvieron una concentración de flavonoides de 81.48±3.6mg/100g (H) y 214.12±3.2mg/100g (A). No se observaron diferencias significativas (p<0.05), entre las determinaciones hechas para los ensayos de DPPH y FRAP. La actividad determinada por DPPH prueba de FRAP a los 30min fue de 198.2±4.1 mMFe2+/100g (H) y 213.2±3.8 mMFe2+/100g (A). Se encontró correlación alta entre las actividades antioxidantes determinadas por los ensayos de DPPH y FRAP (r>0.98: p<0.05). Los diferentes extractos mostraron una buena actividad antioxidante, pudiendo proponerse indistintamente para su aplicación en la industria farmacéutica y alimentaria. Palabras Clave: ginkgo biloba, poder reductor, DPPH, flavonoides Resumen: The extract of ginkgo biloba (GB) has been recommended in cases of cerebral circulatory insufficiency, vertigo and its antioxidant, neutralizes free radicals and hydroxyl oxygen that increase in tissue ischemia. The objective was to determine differences in the antioxidant capacity of ginkgo biloba extract allopathic (A) and homeopathic (H), to promove 286 | P á g i n a their properties in the food industry. They used two types of GB were prepared 25 dilutions (1:20, v/v). Quantified total flavonoids. The antioxidant activity was evaluated by FRAP and DPPH and median inhibitory concentration (IC50). Each assay was done in triplicate to determine reproducibility. We performed an ANOVA, Tukey test for means analysis and calculated the Pearson coefficients. Ginkgo dilutions obtained had a flavonoid concentration of 81.48±3.6mg/100g (H) and 214.12±3.2mg/100g (A). No significant differences (p<0.05) among the determinations made for testing and FRAP DPPH. Activity determined by DPPH for the extracts was 22.9±0.39 MTE/g (H) and 23.7±0.42 MTE/g (A). FRAP test 30min was 198.2±4.1mMFe2 +/100g (H) and 213.2±3.8 mMFe2+/100g (A). High correlation was found between the antioxidant activity assays determined by DPPH and FRAP (r>0.98, p< 0.05). The different extracts showed good antioxidant activity, may propose either for use in pharmaceutical and food industry. Keywords : ginkgo biloba, reducing power, DPPH, flavonoids Introducción El Ginkgo biloba (GB) es una antigua planta originaria de china, único representante de la familia Ginkgoaceae que ha sido usado por sus propiedades medicinales y es obtenido de las hojas verdes desecadas del árbol del Ginkgo o "árbol de los cuarenta escudos". En la actualidad los extractos de hoja de GB se usan especialmente por vía oral y constituye un fitofármaco [Calapai et al., (2000). Estudios realizados por diversos autores han demostrado que los extractos de GB pueden disminuir el daño ocasionado por especies reactivas de oxigeno (ROS) debido a su actividad antioxidante. El extracto de GB ha reportado dos importantes compuestos bioactivos: Flavonoides y terpenoides. Los flavonoides neutralizan los radicales libres de oxígeno e hidroxilo debido a que posee un efecto inhibidor de la lipoperoxidación (Rahman K., 2007). Se han descrito varios efectos benéficos en el extracto de GB; como vasoregulador de arterias, vasos capilares y antagonistas del factor activador de plaquetas. Los cambios metabólicos, como el aumento de la tolerancia a la anoxia en el metabolismo neuronal. La influencia beneficiosa sobre los trastornos de neurotransmisores. En la prevención de daños de las membranas causados por los radicales libres (Defeudis, 1991). Los efectos podrían atribuirse a ingredientes activos individuales, o por la acción combinada de varios agentes activos que se encuentran en los extractos de GB. El acentuado interés por los compuestos biofuncionales, que además de contener nutrientes, también contengan sustancias fisiológicamente activas, ha tomado una tendencia mundial en obtener una función benéfica en la reducción de enfermedades derivadas del “estrés celular”. 287 | P á g i n a Materiales y Métodos Materia Prima. Se utilizaron dos presentaciones comerciales de extracto de GB, una muestra alópata y una homeópata para la cuantificación de la concentración de flavonoides y la capacidad antioxidante. La muestra alópata fue obtenida en una farmacia de medicina de patente; mientras que la homeopática se obtuvo en una tienda de Productos Naturales, ambas en la región de Xalapa, Veracruz. Método espectrofotométrico para cuantificar flavonoides totales. La solución muestra se preparó con una solución de ácido sulfúrico al 10% y de etanol al 50%, posteriormente la muestra se reflujo durante un periodo de 2 horas, se enfrío y se filtró con ayuda de la bomba de vacío (el remanente se lava con una solución de etanol al 50%). El filtrado y los residuos se evaporan en baño de agua hasta la mitad de su volumen inicial, se deja enfriar en un baño de hielo (30min) y se filtra, se realizan lavados con agua destilada fría (10-15°C) a los precipitados formados, posteriormente el filtrado y los residuos de los lavados se disuelven con etanol al 96% (calentado previamente a 50°C). La solución se aforó a 100mL con la solución de etanol al 96%. Posteriormente se leyeron las absorbancias a 258nm, usando como patrón un estándar de quercetina (0.04g), en una solución de etanol al 96% (50mL), de esta solución se toma 1mL y se diluye a 100mL con etanol al 50%. El blanco consistió en una solución de etanol al 50%. La expresión empleada para el cálculo fue la siguiente: X = Am x PR x 5 AR x 100 Donde: X: contenido de flavonoides totales expresados como quercetina (%) Am: absorbancia de la solución muestra(nm) PR: peso de la sustancia de referencia (g) AR: absorbancia de la solución de referencia (nm) Identificación y cuantificación de flavonóides por HPLC Se utilizó un equipo de cromatografía de líquidos (HPLC) Varian model ProStar 210, equipado con un detector UV y dos bombas. Una columna C18 de fase reversa 4.6×250mm, 5μm (Agilent, Wilmington, DE, USA). La fase movil A fue agua:acetonitrilo 80:20, y la B acetonitrilo; se usó una velocidad de flujo de 0.8 mL, una longitud de onda de 240nm y un volumen de inyección de 20μL. Para la cuantificación de flavonoides se utilizó la metodología de enriquecimiento de pico mediante estándares de quercetina, ácido galico y catequina (Sigma-Aldrich). Determinacion de la capacidad antioxidante Método de DPPH La evaluación de la actividad antioxidante se basó en la capacidad de captación de radicales libres utilizando el reactivo DPPH (2,2-difenil-1picrilhidracilo) de la marca Sigma-Aldrich, el cual en presencia de un compuesto antioxidante cambia de color de azul violeta a amarillo (Brand-Williams et al., 288 | P á g i n a 1995). Se preparó una solución estándar metanólica de DPPH. La solución de trabajo se obtuvo mezclando 39mL de la solución anterior con 184mL de metanol para obtener una absorbancia de 1.000 a 517nm. Se tomó una alícuota de los extractos de GB y se hicieron reaccionar con 1.25mL de la disolución de DPPH por 60 minutos al abrigo de la luz. Al término de este tiempo, se realizaron lecturas a una longitud de onda de 517nm durante los primeros 5 minutos, cada minuto, y posteriormente a los 10, 30 y 60 minutos para obtener una cinética de reacción; como blanco de calibración se utilizó metanol. El blanco de la muestra se preparó con 0.75mL de los extractos y 1.25mL de metanol. El patrón de referencia fue preparado con 0.75mL de agua y 1.25mL de DPPH en tres ensayos independientes. Con los valores de las absorbancias obtenidas, se determinó el porcentaje de captación de radicales libres mediante la siguiente fórmula: Donde: A1= Absorbancia del patrón de referencia A2= Absorbancia de la muestra A3= Absorbancia del blanco de muestra Determinación del coeficiente de inhibición DPPH (IC50) Se determinó mediante un análisis de regresión del porcentaje de remanente versus la concentración necesaria de los extractos, para inhibir el 50% del radical DPPH (Brand-Williams et al., 1995). El porcentaje de remanente del radical DPPH fue calculado de la siguiente manera: ( ) Donde (DPPH)f es la absorbancia del radical DPPH al final de la reacción, (DPPH)i es la absorbancia del radical al inicio de la reacción (Kim et al., 2002). Método del poder reductor férrico (FRAP) Para esta técnica se prepararon tres soluciones; la primera fue un buffer de acetato de sodio (CH3COONa) a un pH 3.6 a 300mM; posteriormente la segunda fue una solución de TPTZ (2,4,6-tripyridyl-s-triazine) a 10mM y la tercera fue una solución de cloruro férrico hexahidratado (FeCl3·6H2O) a 20mM. La solución FRAP o solución de trabajo se preparó mezclando una proporción 10:1:1 respectivamente. Para el análisis por espectrometría del poder reductor férrico, la solución de trabajo se hizo reaccionar con los diferentes extractos de GB, se midió su absorbancia a 593nm, usando como patrón de referencia una solucion estándar de sulfato ferroso heptahidratado (FeSO 4·7H2O) y como blanco agua destilada. (Benzie-Strain, 1996). 289 | P á g i n a Análisis estadístico Los datos obtenidos se analizaron mediante un ANOVA completamente al azar para determinar diferencias significativas entre los diferentes extractos de GB, las medias obtenidas fueron analizadas mediante la prueba de Tukey. Resultados y Discusión. Los resultados obtenidos para la cuantificación de Flavonoides totales se presentan en la Tabla 1, se obtuvo una concentración mayor para el GB alopata que para el homeapata, posiblemente por el flavonoide utilizado como referencia que fue la catequina, compuesto que es mayoritario en el extracto alopata, como podemos observar en la cuantificación hecha mediante HPLC, ya que los valores de ácido gálico fueron parecidos, los de catequina mayores para el extracto alopata, y para quercitina no se pudo determinar su presencia en el extracto homeopático. Estos contenidos de flavonoides no influyeron determinantemente en las determinaciones de DPPH y FRAP (Tabla 2), ya que como podemos observar los resultados no mostraron diferencias significativas (p<0.05). Tabla 1.Contenido de flavonoides de dos presentaciones comerciales de Ginkgo biloba (GB). GB (H) GB (A) Flavonoides Totales (mg/100g) Determinaciones por HPLC (mg/100g) Quercitina Ac. Gálico Catequina 81.48±3.6 214.12±3.2 NO CONTIENE 0.36±0.09 2.83±0.19 11.25±0.76 2.25±0.12 8.75±0.31 *Los resultados son el promedio de todas las repeticiones Tabla 2. Actividad antioxidante de los ensayos de DPPH y FRAP. Ensayo DPPH (MTE/g) FRAP (mMFe2+/100g)* GB (H) GB (A) 22.9±0.39 23.7±0.42 Tiempo 30 minutos 198.2±4.1 213.2±3.8 * Los resultados son el promedio de todas las repeticiones 290 | P á g i n a Se encontró correlación alta entre las actividades antioxidantes determinadas por los ensayos de DPPH y FRAP (r>0.98: p<0.05). Esto es muy importante ya que la actividad antioxidante de un producto no es el resultado de la presencia de un solo componente fitoquímico, sino del efecto sinergístico de todos los compuestos presentes. Las representaciones graficas de la actividad antioxidante para los dos ensayos se encuentran representadas en la Figura 1, como podemos observar los valores son muy parecidos, las diferencias que se observan en A son de aproximadamente un 1%, por lo que podríamos decir que ambos presentan capacidad reductora muy similar durante el tiempo que se llevo a cabo el estudio. Figura 2. Representaciones graficas de los ensayos DPPH (A) y FRAP (B). Conclusión Los extractos de GB alópata y homéopata mostraron una buena actividad antioxidante, pudiendo proponerse indistintamente para su aplicación en la industria farmacéutica y alimentaria. BIBLIOGRAFÍA: Benzie, I y J. Strain. 1996. The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as a measure of Antioxidant Power. The FRAP Assay. Anal. Biochem. 239:70-76. Brand-Williams W., Cuvelier M y Berset C. 1995. Use of free radical method to evaluate antioxidant activity. Lebensm Wiss. Technology 28 (1): 25-30 DeFeudis, F. G. 1991. Ginkgo biloba extract (EGb 761): Pharmacological activities and clinical applications. Paris: Editions Scientifiques Elsevier. Calapaia G., Crupib A., Firenzuolic F., Marcianoa M., Squadritoa F., Inferreraa G., Parisia A., Rizzod A., Crisafullid C, Fiorea A. y Caputia P. 291 | P á g i n a 2000. Neuroprotective effects of Ginkgo biloba extract in brain ischemia are mediated by inhibition of nitric oxide synthesis. Life Sciences 67:2673–2683 Kim D.O., Lee K.W., Lee H.J. y Lee C.H. 2002. Vitamin C Equivalent Antioxidant Capacity (VCEAC) of Phenolic Phytochemicals. Journal of Agricultural and Food Chemistry, v. 50(13):3713-3717. Rahman K. 2007. Studies on free radicals, antioxidants, and co-factors. Clinical Interventions in Aging, 2(2):219–236. 292 | P á g i n a INHIBICIÓN DEL SISTEMA RENINA ANGIOTENSINA POR FRACCIONES PEPTÍDICAS DE FRIJOL TERCIOPELO (Mucuna pruriens) Palabras clave: Mucuna pruriens, renina, ECA-I, péptidos bioactivos. E. Castillo-Yam*, D.A. Betancur-Ancona y M.R. Segura-Campos Facultad de Ingeniería Química, Universidad Autónoma de Yucatán, Periférico Nte. Km. 33.5, Tablaje Catastral 13615, Col. Chuburná de Hidalgo Inn, 97203, Mérida, Yucatán, México. Teléfono: 52 999 946-09-56, ext. 1112 Fax. 52 999 946-09-94. Email: [email protected]. Categoría: Posgrado. Objetivo General: Evaluar la capacidad inhibitoria del sistema angiotensina de hidrolizados proteínicos de Mucuna pruriens. renina Objetivos Específicos: Evaluar la capacidad inhibitoria de la ECA-I y renina de hidrolizados proteínicos de Mucuna pruriens. Resumen La hipertensión arterial es una enfermedad multifactorial cuyo tratamiento se basa en la inhibición farmacológica del Sistema Renina-Angiotensina (RAS) en 3 puntos: Enzima Convertidora de Angiotensina I (ECA-I), acción directa de la Angiotensina II y renina. El frijol terciopelo (Mucuna pruriens) ha sido extensamente estudiado y se ha conseguido detoxificar las semillas para su uso alimentario. En este estudio se evaluó la capacidad de inhibición, in vitro, sobre la ECA-I y la renina de tres hidrolizados de M. pruriens. Se utilizaron las enzimas comerciales pepsina y pancreatina para la obtención de tres hidrolizados extensivos, dos individuales y uno secuencial a partir del concentrado proteínico. Se determinó el grado de hidrólisis (GH), así como la concentración necesaria para inhibir la actividad de la enzima en un 50% (IC50) para la ECA-I y renina. El GH obtenido fue de 15.35, 17.8 y 21.36% para los hidrolizados de pepsina, pancreatina y secuencial, respectivamente. El IC50 para la ECA-I fue de 8.04, 15.39 y 203.64 µg/mL de proteína y el IC50 para renina fue de 99.94, 252.97 y 224.12 µg/mL de proteína para pepsina, pancreatina y pepsina-pancreatina, respectivamente. La digestión in vitro de M. pruriens con pepsina y pancreatina individual o secuencialmente pudiera resultar en la producción de biopéptidos susceptibles de utilizar en la elaboración de alimentos funcionales. Debido a que estas enzimas están involucradas en la digestión gastrointestinal, los resultados obtenidos pudieran proveer información sobre los biopéptidos generados durante la digestión fisiológica del frijol terciopelo siendo por ende potencialmente biodisponibles. Metodología Granos de frijol terciopelo (M. pruriens) fueron adquiridos de ejidos productores del estado de Campeche. Dichos granos fueron descascarillados y molidos para obtener una harina a partir de la cual se obtuvo el concentrado proteínico mediante el método reportado por Betancur y col. (2004), con algunas modificaciones. Dicho concentrado se evaluó en su composición proximal de acuerdo a los procedimientos oficiales descritos por la A.O.A.C. (1997) que 293 | P á g i n a comprende humedad, proteína cruda, grasa cruda, fibra cruda y extracto libre de nitrógeno. Posteriormente, se hidrolizó enzimáticamente mediante la acción individual y secuencial de las enzimas pepsina y pancreatina a 90 min, de acuerdo al método señalado por Megías y col. (2004), utilizando una suspensión de concentrado proteínico al 5% (p/v) y una relación enzima:sustrato 1:10 (v/v). El grado de hidrólisis (GH) se determinó de acuerdo al método de Nielsen y col. (2001) y el potencial biológico de los hidrolizados proteínicos se evaluó al determinar la actividad inhibidora de la ECA-I (Hayakari y col., 1978) así como la actividad inhibidora de la renina (Li y Aluko, 2010). Todos los resultados fueron procesados mediante estadística descriptiva utilizando medidas de tendencia central (media) y dispersión (desviación estándar). Los datos obtenidos de la hidrólisis del concentrado proteínico y de las actividades biológicas se evaluaron mediante análisis de varianza y una comparación de medias por el método de Duncan para establecer las diferencias entre los tratamientos. Todos estos análisis se efectuaron utilizando el paquete computacional Statgraphics Plus Versión 5.1 y de acuerdo a los métodos señalados por Montgomery (2005). Resultados La composición proximal del concentrado proteínico de M. pruriens se muestra en el cuadro 1. Componente Proteína cruda 53.24±0.08 Grasa cruda 17.08±0.22 Fibra cruda 1.85±0.48 Cenizas ELN* Concentrado 13.34±0.22 14.49±0.56 proteínico Cuadro 1. Composición proximal del concentrado proteínico de M. pruriens (% base seca). *ELN: Extracto libre de nitrógeno. (n=2), media ± DE. La hidrólisis enzimática del concentrado proteínico de M. pruriens registró valores de GH de 15.35, 17.8 y 21.36% para el sistema pepsina, pancreatina y pepsinapancreatina, respectivamente. La actividad inhibitoria de la ECA-I y de renina de los hidrolizados proteínicos de frijol terciopelo registraron valores de IC 50 en un rango de 8.04-203.64 g/mL (Figura 1) y de 99.94-252.97 (Figura 2) g/mL, respectivamente. 294 | P á g i n a IC50 (µg/mL) 250 203.64c 200 150 100 50 8.04a 15.39b Pepsina Pancreatina 0 Secuencial Tratamiento Figura 1. Valores de IC50 registrados al evaluar la actividad inhibitoria de la ECA-I de hidrolizados proteínicos de Mucuna pruriens. a-cLetras diferentes indican diferencia estadística significativa (p<0.05). 300 252.97c IC50 (µg/mL) 250 224.12b 200 150 100 99.94a 50 0 Pepsina Pancreatina Secuencial Tratamiento Figura 2. Valores de IC50 registrados al evaluar la actividad inhibitoria de la renina de hidrolizados proteínicos de Mucuna pruriens. a-cLetras diferentes indican diferencia estadística significativa (p<0.05). Análisis El concentrado proteínico presentó una cantidad de proteína, grasa cruda y fibra cruda similar a la reportada por Tovar (2011), sin embargo el contenido de cenizas fue mayor al reportado por dicho autor. Bressani (2002), señala que existe una variación considerable en los niveles de minerales para este género. De acuerdo con la clasificación propuesta por Pedroche y col. (2003), los tres hidrolizados se clasificaron como extensivos, ya que tienen un GH >10%. Se han estudiado una amplia variedad de biopéptidos antihipertensivos obtenidos de diversas fuentes proteínicas, los cuales tienen actividad inhibitoria moderada para ECA-I (rangos micromolares) mientras que las constantes de inhibición para péptidos sintéticos presentan rangos nanomolares (Foltz y col., 2009). 295 | P á g i n a La ventaja que ofrecen los péptidos bioactivos es la seguridad de un producto natural, bajo costo y el beneficio adicional del péptido como fuente de aminoácidos esenciales (Udenigwe y Aluko, 2011). Las concentraciones de proteína requerida para inhibir en un 50% la actividad de la ECA-I (IC50) registradas en el presente estudio fueron menores a las reportadas por Tovar (2011) para el hidrolizado de pepsina a 10 min (2,630 g/mL de proteína) y pancreatina a 120 min (4,300g/mL de proteína), siendo las condiciones de hidrólisis los factores principales que generaron dicha variación en el potencial de inhibición. Por otro lado, Li y Aluko (2010) reportan valores IC 50, en concentraciones cercanas a los nanomoles en inhibidores sintéticos de renina. Algunos estudios de hidrolizados proteínicos de linaza reportan actividad inhibitoria de renina moderada con valores de IC50 que oscilan entre 1,220 y 2,810 g/mL de proteína (Li y Aluko, 2010), mientras que en hidrolizados de chícharos y semillas de cáñamo (IC50=810 g/mL de proteína) también se ha reportado la presencia de péptidos inhibidores de renina (Udenigwe y Aluko, 2011). Los valores de inhibición de renina registrados en el presente estudio fueron menores a los reportados por Li y Aluko (2010) y Udenigwe y Aluko, (2011) poniendo de manifiesto su mayor potencial biológico. De acuerdo con dicho autores, existe una correlación entre la inhibición enzimática del RAS in vitro y la actividad hipotensora de hidrolizados de semillas de cáñamo en estudios con ratas espontánemente hipertensas a dosis de 200 mg/kg de peso corporal de hidrolizado proteínico (Udenigwe y Aluko, 2011). Lo anterior, pone de manifiesto el potencial efecto hipotensor de los hidrolizados proteínicos de M. pruriens. Conclusiones y recomendaciones El hidrolizado proteínico de M. pruriens con pepsina registró el mayor potencial inhibidor de la ECA-I y renina resultando una alternativa viable como alimento funcional o nutracéutico en la prevención y/o tratamiento de la hipertensión y enfermedades relacionadas. Referencias AOAC International. (1997). Official Methods of Analysis of AOAC International. Washinton, D.C. William Horwitz Editor. Betancur, A.D., Gallegos, T.S., Chel, G.L. (2004). Wet fractionation of Phaseolus lunatos seeds: partial characterization of starch and protein. Journal of the Science of Food and Agriculture, 84, 1193-1201. Bressani, R. (2002). Factors influencing nutritive value in food grains legumes: Mucuna compared to other grain legumes. En Flores, M., Eilittä, M., Myhrman, R., Carew, L., Carsky, R., Food and Feed from Mucuna current uses and the way forward. Proceedings of an international workshop: (164-188). Tegucigalpa, Honduras. 296 | P á g i n a Foltz, M., van der Pijl, P., Duchateau, G. (2009). Current in vitro testing of bioactive peptides is not valuable. The Journal of Nutrition, 117-118. doi:10.3945/jn.109.116228 Hayakari, M., Kondo, Y., Izumi, H. (1978). A rapid and simple spectrophotometric assay for Angiotensin- converting enzime. Analytical Biochemistry, 84, 361-369. Li, H, Aluko, R. (2010). Identification and inhibitory properties of multifunctional peptides from pea protein hidrolysate. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 58, 11471-11476. Megías, C., Yust, M.M., Pedroche, J., Lquari, H., Girón-Calle, J., Alaiz, M., Millan, F., Vioque, J. (2004). Purification of an ACE inhibitory peptide alters hydrolysis of sunflower (Helianthus annus L.) protein isolates. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52 (7), 1928-1932. Montgomery, D.C. (2012). Diseño y análisis de experimentos. Limusa Wiley. Nielsen, P.M., Petersen, D., Dambmann, C. (2001). Improved method for determining food protein degree of hydrolysis. Journal of Food Science, 66 (5), 642-646. Pedroche, J., Yust, M., Girón-Calle, J., Vioque, J., Alaiz, M., Millán, F. (2003). Plant protein hydrolysates and Tailor-made foods. Electronic Journal of Environmental, Agricultural and Food Chemistry, 2 (1), 233-235 Tovar Benítez, T. (2011). Tecnofuncionalidad y biofuncionalidad de hidrolizados proteínicos de frijol terciopelo (Mucuna pruriens). Tesis de maestría. Universidad Autónoma de Yucatán. Mérida, Yucatán. Udenigwe, C., Aluko, R. (2011). Food protein-derived bioactive peptides: production, processing, and potencial health benefits. Journal of Food Science, 00 (0), R1-R14. 297 | P á g i n a “CARACTERIZACIÓN QUÍMICA Y FUNCIONAL DE HOJAS DE Stevia rebaudiana PROVENIENTES DE LA PENINSULA DE YUCATÁN” Palabras Clave: Stevia, Caracterización Química, Propiedades funcionales Matus-Basto, A.J., Betancur Ancona, D., Segura Campos, M.R. Facultad de Ingeniería Química, Universidad Autónoma de Yucatán, Periférico Nte. Km. 33.5, Tablaje Catastral 13615, Col. Chuburná de Hidalgo Inn, 97203, Mérida, Yucatán, México. Teléfono: 52 999 946-09-56, ext. 1112 Fax. 52 999 94609-94. E-mail: [email protected]. Categoría: Licenciatura. Objetivo General: Caracterizar química y funcionalmente hojas de Stevia rebaudiana Criolla. Objetivos Específicos: 1. Determinar el contenido de humedad, carotenoides y fibra dietética total, soluble e insoluble de las hojas de Stevia rebaudiana criolla. 2. Determinar la capacidad de absorción de moléculas orgánicas, retención de agua y aceite así como la capacidad de absorción y adsorción de agua de las hojas de Stevia rebaudiana criolla. Resumen La Stevia destaca por su potencial uso como sustituto de azúcar en alimentos y bebidas dulces, para que sean menos energéticas y se adapten a dietas de control de azúcares. El objetivo del presente estudio fue caracterizar química y funcionalmente las hojas de Stevia rebaudiana variedad criolla proveniente de la península de Yucatán. Las hojas de Stevia se obtuvieron de Bacalar, Quintana Roo y se molieron utilizando un molino Cyclotec. La harina resultante fue analizada química y funcionalmente. La caracterización química incluyó la determinación de humedad, fibra dietética total (FDT) soluble (FDS) e insoluble (FDI) así como el contenido de carotenoides. La caracterización funcional incluyo la capacidad de absorción de moléculas orgánicas (CAMO), la evaluación de retención de agua y de aceite así como la capacidad de absorción y adsorción de agua. La variedad criolla de Stevia registró valores de humedad, FDT, FDS y FDI de 7.80, 29.12, 8.73 y 20.39%, respectivamente y un contenido de carotenoides de 1.63 g/mL. La caracterización funcional de las hojas mostró un valor de CAMO de 1.13 g de aceite/g de muestra; una capacidad para retener agua y aceite de 2.87 y 6.49 g/g de muestra, respectivamente y una capacidad de absorción y adsorción de agua de 3.44 y 0.252 g/g de muestra. Metodología Este estudio se realizó en la Facultad de Ingeniería Química de la Universidad Autónoma de Yucatán. De manera general, hojas de Stevia rebaudiana criolla se adquirieron en Muna, Yucatán y se analizaron químicamente determinado su contenido de humedad (AOAC, 1997), carotenoides totales (Rodríguez, 1996) así como FDT, FDS y FDI (Prosky et al., 1988). Posteriormente, la evaluación de las propiedades funcionales de las hojas incluyó la determinación de la CAMO (Zambrano et al., 2001), retención de agua (Chau et al., 1997), Retención de 298 | P á g i n a aceite (Chau et al., 1997), capacidad de adsorción de agua (Chen et al., 1984) y capacidad de absorción de agua (Chau et al., 1997). Todos los resultados fueron procesados mediante estadística descriptiva utilizando medidas de tendencia central (media) y dispersión (desviación estándar). Resultados La variedad criolla de Stevia registró valores de humedad, FDT, FDS y FDI de 7.80, 29.12, 8.73 y 20.39%, respectivamente y un contenido de carotenoides de 1.63 g/mL. La caracterización funcional de las hojas mostró un valor de CAMO de 1.13 g de aceite/g de muestra; una capacidad para retener agua y aceite de 2.87 y 6.49 g/g de muestra, respectivamente y una capacidad de absorción y adsorción de agua de 3.44 y 0.252 g/g de muestra. Cuadro 1. Caracterización Química de hojas de Stevia rebaudiana criolla Componente Humedad FDT FDS FDI Carotenoides 7.00 % 7.80 29.12 8.73 20.39 g/mL 6.49 g/g muestra 6.00 5.00 4.00 3.44 2.87 3.00 2.00 1.13 1.00 0.25 0.00 CAMO Retención de agua Retención de aceite Absorción de agua Adsorción de agua Figura 1. Caracterización funcional de hojas de Stevia rebaudiana criolla Análisis La fibra dietética es la parte indigerible de las plantas o, aquellos carbohidratos que son resistentes a la digestión y absorción en el intestino delgado con fermentación parcial o completa en el intestino grueso (Sankhala et al., 2005). La fibra dietética incluye polisacáridos, oligosacáridos, lignina y sustancias asociadas a las plantas. Los carbohidratos análogos se definen como aquellos ingredientes alimenticios basados en carbohidratos que no son digeribles ni absorbibles y son similares a la fibra dietética de las plantas (Proski, 2001). 299 | P á g i n a El consumo adecuado de fibra dietética a través del alto consumo de frutas y vegetales hace posible una dieta saludable, con un adecuado peso corporal, un aceptable perfil lipoproteínico y una presión sanguínea normal (Sánchez-Muñiz, 2012). El contenido de FDT de la variedad criolla de S. rebaudiana esta representado por un 70.02% de FDI y un 29.98% de FDS. La fibra dietética ha sido ampliamente estudiada por sus beneficios a la salud. Ésta es considerada un factor preventivo de padecimientos como el cáncer, sirve como sustrato de colonias bacterianas, promueve el transito alimenticio intestinal, disminuye la reabsorción de ácidos biliares alterando la formación de micelas y reduce por ende los niveles de colesterol sanguíneo (Escudero-Álvarez, 2006). El alto porcentaje de FDI registrado en la variedad criolla de S. rebaudiana sugiere su posible aplicación en productos fisiológicos dietéticos. El consumo de este tipo de fibra esta asociado a generar sensación de saciedad debido a que la fibra absorbe agua, ocupa espacio en el estómago y reduce por ende la necesidad de consumir más alimentos. Dicha fibra también incremente el volumen y peso del bolo fecal, promueve el mejor funcionamiento del sistema digestivo y previene desordenes como el cáncer del colon. Por otro lado, las propiedades funcionales de la variedad criolla de S. rebaudiana ponen de manifiesto la capacidad de retención de agua. Las proteínas pueden incrementar esta propiedad, reforzando a su vez la habilidad de hinchamiento, una propiedad importante de las proteínas durante la preparación de alimentos como sopas y productos horneados. La capacidad de retención de aceite de las hojas de stevia se atribuyó al atrapamiento físico del aceite, atributo importante en el procesamiento de alimentos permitiendo su uso como retensor de sabor (Crammer y Ikan, 1986). La capacidad de absorción de agua es indicativa de la aptitud de una estructura para absorber agua de manera espontánea al colocarse en una superficie húmeda o al estar inmersa en agua. Por otro lado, la capacidad de adsorción de agua es la capacidad de una estructura para adsorber agua de forma espontánea cuando se expone a una atmósfera de humedad relativa y constante. Ésta es inicialmente un fenómeno de superficie, sin embargo a mayores niveles de hidratación puede ocurrir absorción dentro de la estructura, permitiendo el hinchamiento y la eventual solubilización (Zambrano et al., 2001). En este caso, si las proteínas presentes tienen un gran numero de residuos hidrofílicos expuestos al agua incrementará la capacidad de absorción de agua (Yeh et al., 2005). La capacidad de adsorción de agua de la variedad criolla de stevia (0.25 g de agua / g de muestra) fue menor que la reportada en zanahoria (0.82 g de agua / g de muestra) y remolacha (1.58 g de agua / g de muestra) (Zambrano et al., 2001). A la fibra insoluble se le atribuye parte de esta propiedad funcional ya que adsorbe agua como una esponja, sin embargo en este studio no se observó una relación significativa entre la FDI y la capacidad de adsorción de agua. La CAMO observada aquí, pone de manifiesto la capacidad de la variedad criolla de stevia de interaccionar eficazmente con grasas, ácidos biliares, colesterol, medicamentos y compuestos tóxicos o cancerígenos a nivel intestinal para luego ser eliminados en las heces. La lignina, un componente de la FDI, es probablemente el principal compuesto responsable de la CAMO (Rosamond, 2002). 300 | P á g i n a Conclusiones Los resultados obtenidos sugieren que las hojas de S. rebaudiana variedad criolla provenientes de la peninsula de Yucatán, México podrian ser utilizadas como suplemento o aditivo alimentario por su composición química (FDT: 29.12, FDS:8.73, FDI: 20.39%; carotenoides: 1.63g/mL) y propiedades funcionales (CAMO:1.13; Retención de agua y aceite: 2.87, 6.49 g/g de muestra; Absorción de agua y adsorción de agua 3.44 0 0.25 g/g de muestra). Referencias AOAC. 1997. Official Methods of analysis. Association of official analytical chemists, 15th ed. William Horwitz Editor. Washington, D. C. USA. Chau, C., Cheng, K. y Wong, Y. 1997. Functional properties of protein concentrates from three chinese indigenous legume seeds. J. Agric. Food Chem, 45: 2500-2503. Chen, J., Piva, M. y Labuza, T. 1984. 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Brasil: Livraría LTDA. pag. 195209. 301 | P á g i n a ELABOPRACION DE UN DULCE DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris. L) DIRIGIDO A NIÑOS DE PRIMARIA ADICIONADO CON FIBRA. Arturo Hurtado García1; Alicia Mireya Ramírez Schoettlin 2. Laura Esther Olguín Martínez 2. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del IPN. Laboratorio de Investigación y Confitería del Dpto. de Ingeniería Bioquímica. Rol. de Carpio y Plan de Ayala Casco de Santo Tomas. [email protected] [email protected] [email protected] 1Estudiante, 2Profesor becario COFAA y EDD Introducción En México el consumo de frijol es muy aceptado debido a que es un alimento de la canasta básica de alimentación, pero debido a diferentes factores, como los son la apertura a la libre importación de granos de América del Norte y de otras partes del mundo, el número de intermediarios en la línea agricultor-consumidor, el gran costo de movilidad del producto, han dejado en clara desventaja al producto nacional en comparación con el del extranjero, dejando una gran remanente en la producción nacional, por lo cual se busca la utilización de este producto en formas alternativas haciendo un cambio en la formulación de la producción del dulce de leche cambiando la leche por el frijol podremos así utilizar el frijol remanente y abrir posibilidades para que este producto sea también consumido por personas que tengan deficiencia en la enzima lactasa por lo cual son intolerantes a la lactosa y así abrir una nueva rama en los productos con sustitutos de leche el cual será enfocado hacia niños de nivel primaria. El producto es fortificado con inulina ya que este producto tiene componentes nutricionales que en ciertas cantidades beneficiarán a la buena digestión en los niños. En este trabajo se hace la fabricación de un dulce de frijol adicionado con inulina, que pueda ser consumido por niños entre 5 y 12 años de edad, y así, evaluar el incremento de fibra en el producto en comparación con un dulce de leche tradicional y que sea libre de lactosa. Materiales y métodos Selección del frijol Se utilizaron diferentes variedades de frijol como son: Peruano, Garbancillo, Negro, Flor de Mayo y Flor de Junio. 302 | P á g i n a A los cuales se les sometió a una limpieza, posteriormente a un remojo por 18 horas y a una cocción por 30 minutos en una olla exprés a 15lb/in2; después se realizó un segundo lavado y se le sometió a 2 reducciones de tamaño húmedas, la primera manual y otra con un molino mecánico obteniendo una pasta de frijol de coloración homogénea. Selección de la Formulación A partir de tres Formulaciones bibliográficas para dulce de leche, se utilizaron sustituyendo la leche el frijol y agua en una cacerola de cobre, se adicionó mantequilla previamente derretida y se mezcló, adicionó lentamente la sacarosa y mezclar para lograr una mejor homogeneización, se agregó vainilla y al momento de comenzar a hacer ebullición se agregó o no el bicarbonato de sodio lentamente y se redujo la temperatura de calentamiento, se siguió con agitación constante hasta lograr ver el fondo de la cacerola al pasar el agitador, al momento de llegar a una temperatura de 102ºC se retira de calentamiento y se agita vigorosamente hasta obtener una pasta moldeable para darle forma al producto final. Pruebas de ordenamiento Se realizó una prueba de ordenamiento afectivo a 20 jueces no entrenados en un rango de 18 a 25 años de edad seleccionados al azar para 3 evaluaciones diferentes; se pusieron a prueba los tipos de frijol seleccionados en las cuales se calificaron características sensoriales como color, textura, olor y sabor. Considerando productos con y sin adición de bicarbonato. Análisis químico proximal Se realizará un análisis químico proximal para poder comparar la aportación nutricional entre un dulce de leche común y el dulce de frijol realizado. Diseño de experimentos 303 | P á g i n a Habrá diferentes experimentos basados uno en el otro en una secuencia aplicándolo a la formulación: corrida Concentración de frijol (gramos) 67 126 171 67 126 171 67 126 171 67 126 171 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Concentración de inulina (gramos) 0 0 0 20 20 20 40 40 40 60 60 60 Resultados Se trabajó con cinco tipos de frijol los cuales fueron: flor de mayo, flor de junio, peruano, garbancillo, negro; el costo de estos frijoles varía entre 20 a 30 pesos el kilogramo siendo el más caro el frijol peruano. Físicamente se observó cual frijol de acuerdo a su coloración podría darnos un color parecido a un dulce de leche tradicional eliminado por este caso el frijol negro aunque después se retomó para una prueba hedónica. Se le aplicaron los mismos tratamientos de acondicionamiento, después se realizó una molienda manual para reducir el tamaño y que fuese más fácil la molienda mecánica la cual fue una molienda húmeda realizada en un molino de 0.5HP de motor HONDA el cual da como resultado una pasta de frijol la cual fue refrigerada después de ser empacada en papel libre de nitrógeno. . Relación de tiempo por cada 250 gramos de frijol en olla express a 15Lb/cm2 Tipo de frijol Tiempo (minutos) flor de mayo 20 flor de junio 19 peruano 17 304 | P á g i n a garbancillo 25 negro 17 A esta pasta de frijol se les determino humedad y se obtuvo una humedad promedio de 71%. Se trabajó en estas condiciones para reducir la cantidad de agua que se adicionara en la formulación evitando un mayor gasto de energía en la realización de producto (evaporación del líquido). Se realizó el dulce de cada uno de los tipos de frijol mediante la formulación base Primera fórmula utilizada en la elaboración del dulce de frijol Materia prima Cantidad (gramos) % Azúcar 200 39.17 Agua 200 39.17 Bicarbonato de sodio 0.5 0.09 Frijol 90 17.62 Mantequilla 20 3.91 Al realizar el proceso la obtención del punto final de cocción en el cual la temperatura final aproximada de 104ºC. Al realizarse los productos se obtuvieron cinco diferentes coloraciones siendo las más parecidas físicamente al dulce de leche las que se realizaron con frijol tipo peruano y frijol tipo garbancillo teniendo un color café claro similar ambos, los demás dulces elaborados obtuvieron coloraciones muy variadas como los son: frijol negro color negro, frijol tipo flor de mayo y junio un color entre naranja suave y rosa ambos. Al ser el bicarbonato de sodio un compuesto que nos permite la reacción de Maillard en la elaboración de un dulce de leche, se realizaron dulces con y sin bicarbonato notando que el bicarbonato solo aumenta la coloración en 2 o 3 tonos más en comparación con un dulce sin bicarbonato con lo cual se observó que el bicarbonato podía ser eliminado de la formulación original. Se realizó una prueba de ordenamiento afectivo evaluándolos atributos color, olor, textura y sabor Se realizaron a 20 jueces no entrenados y se analizó el resultado de acuerdo a la tabla de significancia a un nivel del 5 % en pruebas de ordenamiento. 305 | P á g i n a El color fue dado por el tipo de frijol y la adición o no de bicarbonato de sodio como ya se explicó anteriormente, de acuerdo con la tabla de significancia existiendo un rango estrecho para veinte pruebas y cinco muestras a ordenar entre cincuenta y setenta valores, en el que se interpreta como que el juez no nota diferencia entre esos productos. En la ( grafica 1) referente al color se observa que el de mayor aceptación fue el dulce realizado con garbancillo sin bicarbonato así como el peruano sin bicarbonato, habiendo entre ellos un grado mínimo de diferencia siendo casi insignificante, con lo cual se puede eliminar de la formulación el uso de bicarbonato y así reducir costos. GRAFICA 1. Análisis del color en la primera encuesta afectiva color rango 50-70 103 96 80 58 50 garbancillo c/bicarbonato garbancillo s/bicarbonato peruano c/bicarbonato peruano s/bicarbonato negro c/bicarbonato En la prueba la parte del olor fue analizada igualmente con a la tabla de significancia a un nivel del 5 % en pruebas de ordenamiento, observando que el que tiene más observación es el frijol tipo garbancillo (grafica 2) en referencia con los otros dos tipos de frijoles; este olor que no era apreciado por la mayoría de los jueces en el dulce es el característico a frijol el cual lo presentaban en mayor sensación el frijol peruano y negro desde el momento de su cocción, a diferencia del frijol garbancillo que al momento de terminar su cocción el olor era mínimo, lo cual se mantuvo constante en el producto final. GRAFICA 2. Análisis de textura en la primera encuesta afectiva 306 | P á g i n a olor rango 50-70 92 86 78 62 57 garbancillo c/bicarbonato garbancillo s/bicarbonato peruano c/bicarbonato peruano s/bicarbonato negro c/bicarbonato En la prueba la parte de la textura fue analizada igualmente con a la tabla de significancia a un nivel del 5 % en pruebas de ordenamiento dando como resultado una diferencia significativa encontrada en el rango de menor preferencia (grafica 3), ya que la textura era arenosa y que al aplicarle un pequeña presión se podía desmoronar, se observa que aún es necesario mejorar la textura. GRAFICA 3. Análisis de textura en la primera textura garbancillo c/bicarbonato 69 garbancillo s/bicarbonato 75 peruano c/bicarbonato afectiva rango 50- 70 88 74 encuesta peruano s/bicarbonato 84 negro c/bicarbonato El sabor es el elemento primordial en el cual se basa nuestro producto es el más relevante de acuerdo a nuestro análisis, fue evaluado de acuerdo en la misma 307 | P á g i n a prueba afectiva observándose que dentro de nuestro rango estrecho de no difenciaciòn de 50 a 70 se encuentra el garbancillo con bicarbonato y el frijol negro (grafica 4), con lo cual se observa que a pesar de que el frijol negro no es favorecido en color, olor y textura por los jueces, el sabor del dulce es aceptado por ellos, a diferencia del frijol garbancillo sin bicarbonato que tiene diferencia significativa hacia el rechazo, se preguntó a los jueces cual era el problema en el sabor del frijol tipo garbancillo sin bicarbonato y la mayoría de ellos se refirió a un sabor muy marcado a frijol. El frijol peruano fue eliminado de nuestras opciones, ya que, no es del agrado de los jueces y por otra parte es el frijol que es más costoso. GRAFICA 4. Análisis de sabor en la primera encuesta afectiva sabor rango 50-70 107 81 74 69 59 garbancillo c/bicarbonato garbancillo s/bicarbonato peruano c/bicarbonato peruano s/bicarbonato negro c/bicarbonato Como resultado de esta prueba obtuvimos que el tipo de frijol a utilizar fuera el frijol garbancillo debido a que su aceptación en las pruebas fue mayoritaria, dado el resultado de la prueba de color se obtuvo la eliminación del bicarbonato de sodio de la formulación. Quedando como principal problema la presencia de la mejora del sabor, se probó una segunda formulación basada en la encontrada bibliográficamente en la página de la PROFECO, la cual después de realizar los cambios de leche a frijol se encuentra la formula en el cuadro 12 CUADRO 12 Segunda fórmula utilizada en la elaboración del dulce de frijol Materia prima Cantidad (gramos) % 308 | P á g i n a Azúcar 180 45.22 Agua 100 25.12 Frijol 90 22.61 Mantequilla 28 7.03 Para llegar a la formulación se probaron diferentes concentraciones de frijol, se observa en esta formulación que se reduce la cantidad de agua y se aumentó la cantidad de mantequilla comparado con la primera formulación aplicada; la variable mantequilla se mantiene fija así como el azúcar, la variable concentración de frijol fue a la única a la cual se le realizaron pruebas a diferentes concentraciones las cuales se muestran en el cuadro 13. CUADRO 13. Concentraciones a probar de frijol Concentración de frijol (gramos) 67 126 171 Por cada gramo de leche en polvo se tomó 2 gramos de frijol molido debido a que el frijol está en condiciones más húmedas, se justifica la disminución de agua en la nueva formulación. A los productos de estas tres concentraciones se les aplico nuevamente una prueba de ordenamiento efectivo en pruebas de ordenamiento con lo cual se quería comprobar cuál era la concentración máxima aceptable de frijol dentro del producto, la cual fue evaluada de acuerdo a la tabla para determinar significancia a un nivel del 5% en pruebas de ordenamiento dando como resultado una aceptación mayor (grafica 5) entre las muestras con concentración de frijol de 67 y 126 gramos y rechazando el producto con la concentración de frijol de 171 gramos como era previsto desde antes de realizar dicha prueba ya que al momento de realizar el producto la elaboración fue muy difícil, tanto en el momento del mezclado como el de la identificación del punto para terminar la cocción. 309 | P á g i n a Al no haber diferencia significativa entre la concentraciones de 67 y 126 gramos nos da como resultado decidir que se utilizara la concentración de 126 gramos, esto se decidió así ya que el producto con una concentración aún más baja de los 90 gramos nos da como resultado un sabor más dulce, también influyendo sobre la textura y las complicaciones al darle forma al producto final. GRAFICA 5. Análisis en la selección de la concentración de frijol en la reformulación. [frijol] gramos rango 34-46 55 35 30 67 126 172 Se realizó una tercera prueba para la incorporación de la inulina al producto para darle un aumento en fibra y disminuir el dulzor del producto. Las pruebas se realizaron a diferentes concentraciones de inulina y conforme esta aumentaba, la cantidad de azúcar disminuía proporcionalmente, como se puede ver en el cuadro 14. CUADRO 14. Combinaciones probadas para la selección de la concentración de inulina (segunda reformulación) gramos de azúcar gramos de inulina Gramos totales 180 0 180 160 20 180 140 40 180 120 60 180 310 | P á g i n a De acuerdo a estas combinaciones de materias primas se realizó nuevamente un dulce de frijol y se sometió a 20 jueces no entrenados para su aprobación mediante una prueba de ordenamiento afectivo analizado por tabla para determinar significancia a un nivel del 5% en pruebas de ordenamiento. Al realizarse el dulce de frijol a estas diferentes concentraciones se observó que mientras más disminuía la concentración de azúcar, el manejo de la mezcla era más difícil, esto aumentado a la dificultad de mezclar la inulina en agua. Por lo cual antes de mezclarse la inulina con agua, se mezcló con azúcar para así evitar la formación de grumos al mezclar líquido y sólido. En el análisis de datos, pudimos observar que el dulzor disminuía drásticamente al disminuir el azúcar; que los jueces comenzaban a notar un sabor a frijol más fuerte por lo cual mientras mayor era el aumento de la inulina en la formulación, la aceptación disminuía (grafica 6). GRAFICA 6. Análisis en la selección de la concentración de inulina en la segunda reformulación. [inulina] gramos rango 34-46 46 43 31 20 40 60 Conforme lo dicho en tablas de aceptación se observa que entre las muestras con 40 y 60 gramos de inulina hay una diferencia significativa hacia el rechazo, en comparación con la muestra con 20 gramos de inulina en la cual hay diferencia significativa hacia la aceptación con lo cual se deduce la introducción de saborizantes que contrarresten el sabor del frijol, sin perder dicha esencia característica. 311 | P á g i n a Para mejorar el sabor se solicitaron saborizantes a la empresa “bell flavor and fragances”. Por lo cual solo se trabajó con tres saborizantes diferentes los cuales fueron, mango, durazno y vainilla. Se llegó a una formulación final dada por todos los cambios con los cuales el producto final será conformado por las cantidades mostradas en el cuadro 15. CUADRO 15. Formulación final del dulce de frijol. Materia prima Concentración (%) Azúcar 36.82 Agua 23.01 Frijol 28.99 Mantequilla 6.44 inulina 4.6 saborizante 0.11 Para determinar si nuestro producto se podría auto conservar debido a la concentración de humedad en este, se realizó una prueba de humedad por cuadruplicado en una estufa a 100ºC por 24 horas obteniendo una humedad promedio de 30% con lo cual se sabe que no se puede auto conservar ya que para que eso sea posible, tendrá que tener un % de humedad menor al 10%; se verificarán procedimientos y se intentara disminuir la mayor concentración de agua antes que buscar un conservador químico. 9- CONCLUSIONES Se estableció trabajar con el frijol en forma de pasta con una humedad de 70 % +_ 3% y así reducir la concentración de agua en la producción del dulce Se utilizara frijol garbancillo en la formulación para realizar el dulce de frijol debido a su bajo costo y aceptación del público. Se eliminó de la formulación la adición del bicarbonato de sodio ya que la coloración al adicionarlo no era muy significativa. 312 | P á g i n a Se utilizó para sustituir parcialmente el azúcar inulina de agave y así aumentar su contenido en fibra, volviéndolo un alimento funcional. La formulación final a trabajar es la registrada en el cuadro 15. Se utilizaran saborizantes para contrarrestar el sabor de frijol y así el producto tenga una mejor aceptación en el mercado. BIBLIOGRAFÍA. Madrigal, Lorena, Sangronis, Elba; La inulina y derivados como ingredientes claves en alimentos funcionales; Universidad Simón Bolívar, Archivos Latinoamericanos de Nutrición, Año 2011, Volumen 61, Número 4. Kunzel, George, un toque de sabor latino, capitulo 2ª: cuba pág.: 35-36. Bautista Justo, M., L. García Oropeza, J. E. Barbosa Corona, Y L.A. Parra Negrete. El agave tequilana weber y la producción de tequila. En: Acta universitaria, Universidad de Guanajuato. Vol. 11, No. 2 (ago. 2011) Ulloa, José Armando, Ulloa Rosas, Petra; El frijol (Phaseolus vulgaris): su importancia nutricional y como fuente de fitoquímicos; Centro de Tecnología de Alimentos, Universidad Autónoma de Nayarit; Septiembre 2011 López, Marcelino, Fernández, Fernando; Frijol: investigación y producción : referencia de los cursos de capacitación sobre frijol dictados por el Centro Internacional de Agricultura Tropical; , Centro Internacional de Agricultura Tropical, 2006 http://dspace.universia.net/bitstream/2024/1067/1/ManualdeFundamentosy TecnicasdeAnalisisdeAlimentos_6501.pdf (13 de febrero del 2013) http://www.fenalce.org/pagina.php?p_a=51 (27 de marzo del 2013) http://www.sagarpa.gob.mx/agricultura/Paginas/Agricultura.aspx (27 de marzo del 2013) www.profeco.gob.mx (27 de marzo del 2013) Anexo 1 Diagrama de selección de frijol 313 | P á g i n a Anexo 2 Diagrama de proceso de elaboracion del producto 314 | P á g i n a Elaboración de productos tipo cajeta con adición de amaranto, soya o frijol para niños de primaria. Arturo Hurtado Garcia1; Laura Esther Olguín Martínez 2; María Teresa Favela Torres 2. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del IPN. Laboratorio de Investigación Control de Calidad y Confitería del Dpto. de Ingeniería Bioquímica. Prol. de Carpio y Plan de Ayala Casco de Santo Tomas. [email protected] [email protected], [email protected], [email protected] 1Estudiante, 2Profesor becario COFAA y EDD Es necesario crear alimentos novedosos que sean del agrado del público infantil, se propone hacer variaciones en la cajeta tradicional dando otro aporte nutritivo. La cajeta puede elaborarse según la Norma Oficial Mexicana (NOM-F-480.1985), con leche de cabra o vaca o su mezcla, adicionada de azúcar, aditivos e ingredientes autorizados, se procesa en caliente hasta obtener la viscosidad y color necesarios, ingredientes opcionales: vainilla o alcohol. Teniendo la cajeta máximo 30% de humedad, mínimo 7.5% de grasa, máximo 2% de cenizas, mínimo 2% de proteínas y 63% de azúcar. Se elaboró de este producto utilizando frijol o soya o amaranto. Encontrando la sustitución parcial de leche del producto, conservando su sabor característico. Se obtuvieron 34 diferentes dulces tipo cajeta de frijol, soya y amaranto teniendo este último 2 variedades una con solamente la harina de amaranto y otra con harina de amaranto adicionada con el grano de amaranto, las 4 sustituciones con gran agrado dentro del público al que va dirigido, los niños al realizar pruebas afectivas no encontraron una diferencia significativa en el sabor ni en el aspecto general. 315 | P á g i n a SPIROTETRAMAT UNA ALTERNATIVA PARA EL CONTROL DEL PIOJO HARINOSO (Planococcus ficus) EN VID Salazar-López NJ1, Silveira-Gramont MI1, Zuno-Floriano F2, Hengel M2, ValenzuelaQuintanar AI3 , Aldana-Madrid ML1 1Departamento de Investigación y Posgrado en Alimentos, Universidad de Sonora, Rosales y Blvd. Luis Encinas s/n, Centro, Hermosillo, Sonora, C.P. 83000, México. 2Department of Environmental Toxicology, University of California, Davis, One Shields Avenue Davis, CA. 95616-8588, USA. 3Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. Carretera a la Victoria Km 0.6. Hermosillo, Sonora, 83304, México. [email protected] POSGRADO Sonora es uno de los principales productores de uva de mesa para exportación. Durante el cultivo de la vid este es atacado por diferentes plagas entre ellas el piojo harinoso lo cual ha inducido a los agricultores a recurrir a nuevos insecticidas para su control. Spirotetramat es un insecticida de la familia de los cetoenoles el cual ha demostrado ser eficiente para el control de dicho insecto. Por lo cual la presente investigación se enfocó en determinar el tiempo de degradación de spirotetramat desde su aplicación hasta la cosecha del fruto. Para ello se analizaron 90 muestras de hoja y 90 de uva en las diferentes etapas de maduración del fruto, antes de la aplicación del insecticida y después de este los días 1, 5, 10, 15 y 48. Las muestras fueron extraídas con una mezcla de acetonitrilo-agua (4/1 v/v + 220 uL L-1 de ácido fórmico) y la cuantificación fue realizada mediante LC/MSD. Se detectaron concentraciones de spirotetramat y de su metabolito enol por debajo de 0.05 mg kg -1 48 días después de la aplicación del insecticida, lo cual es inferior al límite máximo residual establecido por la Agencia de Protección Ambiental (1,3 mg kg-1). Por lo cual se concluye que bajo las condiciones del presente estudio el insecticida spirotetramat no representa riesgo. Palabras claves: Spirotetramat, Spirotetramat enol, Residualidad, Vid 316 | P á g i n a EFFECTO DEL ULTRASONIDO DE POTENCIA SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS DEL MÚSCULO L. DORSI DE RES EFFECT OF HIGH POWER ULTRASOUND ON PHYSICOCHEMICAL PROPERTIES OF BEEF M. LONGISSIMUS DORSI Valenzuela-González C.1, Alarcón-Rojo A.D.1, Santellano E.1, Quintero Ramos, A.2 Janacua-Viales H.3 1Facultad de Zootecnia y Ecología Universidad Autónoma de Chihuahua, Perif. Fco. R. Almada km 1. Chihuahua, 31453. México. [email protected], [email protected], [email protected] 2Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Autónoma de Chihuahua, Circuito Universitario s/n. Chihuahua, Chih. México. [email protected] 3Universidad Autónoma de Ciudad Juárez, Instituto de Ciencias Biomédicas, Departamento de Ciencias Veterinarias, Henri Dunant 4016. Ciudad Juárez, Chih., 32310, Mexico. [email protected] CATEGORIA: POSGRADO El efecto del ultrasonido de potencia sobre las características fisicoquímicas de la carne de vacuno se investigó usando el músculo longissimus dorsi de cuatro vacas Holstein a las 48 h postmortem. La carne se cortó en cubos de 4 cm 3. La mitad de los cubos de la misma rebanada fue irradiada con ultrasonido de potencia a una frecuencia de 40 kHz por 4 y 8 min y la otra mitad permaneció sin tratar (control). Se evaluó el pH, el color (L*, a*, b*), la capacidad de retención de agua (CRA), la pérdida por goteo (PG), y el esfuerzo de corte (EC) de la carne. El modelo ajustado para el análisis estadístico incluyó los efectos del ultrasonido, el tiempo de tratamiento, y la interacción del tratamiento con el tiempo. Los datos se analizaron utilizando el método del procedimiento MIXED del SAS. Cuando los efectos principales o su interacción fueron significativos (P <0,05) las medias fueron comparadas entre tratamientos utilizando el método de la diferencia mínima significativa. El ultrasonido produjo carne con menor (P <0,05) intensidad de color rojo (a*) y amarillo (b*) en comparación con las muestras control para los dos tiempos de aplicación. El período de 8 min produjo el valor de pH más alto y el más bajo de PG (P <0,05). No hubo ningún efecto (P ≥ 0,05) del ultrasonido sobre L* y EC de la carne. Se concluye que el ultrasonido de potencia puede ser un método alternativo para mejorar las propiedades físicoquímicas de carne de vacuno. 317 | P á g i n a “APROVECHAMIENTO DEL SUERO LÁCTEO PARA LA OBTENCIÓN DE UN PRODUCTO ALIMENTICIO EN LA REGIÓN VALLE DE CHIAPAS, MÉXICO.” Palabras clave— suero lácteo, gelatina, análisis bromatológico. Lam Gutiérrez Anayancy1, Guzmán Salinas Alejandra, Martínez Flores Karen Estefani, Sánchez Gómez Sac-nicté, Santos Gil Enrique y Silias Aguilar Jorge Alberto. Instituto Tecnológico Superior de Cintalapa División de Ingeniería en Industrias Alimentarias Carretera Panamericana Km. 995 Cintalapa de Figueroa, Chiapas, México. C.P. 3040 Categoría: Licenciatura 1 [email protected] Objetivo General: Estandarizar un proceso que permita la elaboración de un producto alimenticio derivado del aprovechamiento de un residuo agroindustrial en la Región Valle de Chiapas, México. Objetivos específicos: Proponer 3 formulaciones diferentes que permitan la obtención del producto propuesto. Evaluar sensorialmente las 3 formulaciones. Analizar los datos obtenidos de la evaluación sensorial mediante el uso de software estadístico. Analizar química y microbiológicamente el producto terminado. Resumen—Aproximadamente 90% del total de la leche utilizada en la industria quesera es eliminada como lacto suero. El estado de Chiapas ocupó el onceavo lugar de producción con casi 366.3 millones de litros al año. Del total de la leche producida en Chiapas, casi el 39% se utiliza para la elaboración de quesos (aprox. 126 millones de litros al año), desechándose aproximadamente 113.4 millones de lacto suero al año; por este motivo en la realización de este proyecto se buscó una alternativa al uso del suero con el fin de producir un alimento a partir de este. La gelatina representa una forma de aprovecharlo por lo cual se realizaron tres formulaciones variando las cantidades de grenetina, azúcar y saborizantes, después de realizar las pruebas de análisis sensorial a un grupo de panelistas integrado por 30 jueces no entrenados, resultó más aceptable la formulación 2, haciéndose evidente luego del análisis químico la presencia de 6.12% en contenido proteico, muy por arriba de lo contenido en gelatinas comerciales. Tras la realización de este trabajo se pudo obtener la estandarización de un proceso que permitió la elaboración de un producto alimenticio derivado de un residuo industrial. 318 | P á g i n a Metodología Recepción de materia prima La recepción de la materia prima para la elaboración de gelatina se llevó a cabo en queserías cercanas al municipio de Cintalapa el cual se ubica en El municipio de Cintalapa, Chiapas, está ubicado en la parte oeste del estado de Chiapas; se localiza a los 160º. 13’ latitud norte y 93º. 43’ longitud oeste y una altura de 545 metros sobre el nivel del mar, su extensión territorial es de 2,894 kilómetros cuadrados, con una población en todo el municipio de más de 70 mil habitantes. Estandarización del producto Se llevó a cabo la elaboración de la gelatina de suero siguiendo el siguiente diagrama: Para estandarizar el producto se llevaron a cabo tres formulaciones en las que se manejaron diferentes concentraciones de los insumos: grenetina, azúcar y saborizantes. Análisis sensorial Se realizó el análisis sensorial a 30 alumnos del instituto tecnológico superior de Cintalapa de los cuales 18 fueron del sexo femenino y 12 del sexo masculino, con edades de 19-22 años, la evaluación se realizó siguiendo una escala hedónica de 5 niveles para tres diferentes formulaciones. 1.- Me gusta mucho 2.- Me gusta poco 3.- No me gusta ni me disgusta 4.- Me disgusta poco 5.- Me disgusta mucho 319 | P á g i n a Análisis estadístico Tras haberse llevado a cabo el análisis sensorial se recabaron los datos y para determinar la formulación de mayor aceptación se llevó a cabo un ANOVA y la posterior prueba de Tukey P<0.01.De igual manera se elaboraron gráficas en donde se muestra las diferencias entre cada formulación. Análisis químico Debido a las características que presenta el producto terminado se le realizaron 2 tipos de pruebas para determinar el contenido de fibra a través del método de Kennedy (NMX-F-090-S-1978) modificado y el contenido de proteína con el método micro Kjeldahl (NMX-F-068-1980). Análisis microbiológico (Norma sanitaria que establece los criterios microbiológicos de calidad sanitaria e inocuidad para los alimentos y bebidas de consumo humano.) A la gelatina se realizaron los análisis microbiológicos para el conteo de bacterias aerobias, hongos y levaduras. Todos los análisis fueron llevados a cabo en el laboratorio de microbiología del Instituto Tecnológico Superior de Cintalapa. Resultados Recepción de materia prima El suero lácteo fue colectado de empresas queseras que comercializan su producto en La Región Valle del Municipio de Cintalapa de Figueroa, Chiapas. Estandarización del producto En el proceso de elaboración se evaluaron 3 formulaciones diferentes donde se hizo variar la concentración de azúcar y grenetina, principalmente Tabla 1 formulaciones Insumos Suero Grenetina Azúcar Saborizante Total Formulación 1 84.9% 2.43% 10.78% 1.89% 100 % Formulación 2 84.68% 3.22% 10.75% 0.51% 100 % Formulación 3 84% 4% 10.66% 1.33% 100% Según los valores presentados en la tabla anterior la formulación 2 es la que presentó las mejores características del producto terminado con respecto al análisis sensorial, ver tabla 2. 320 | P á g i n a Análisis sensorial Tabla 2 Análisis Sensorial FORMULACIÓN TEXTURA SABOR COLOR AROMA 1 4.433 4.467 4.900 4.933 2 4.633 4.567 4.933 4.967 3 4.100 4.067 4.867 4.933 La tabla anterior presenta los promedios del análisis sensorial llevado a cabo a un grupo de 30 jueces no entrenados, y se observa que la formulación 2 es la que prevaleció en el gusto de los jueces. Análisis estadístico Como se observa en el gráfico no existen diferencias estadísticas significativas entre cada formulación estudiada ni dentro de las variables para cada formulación, sin embargo puede mencionarse una ligera tendencia de mayor aceptabilidad en la formulación 2 con respecto a las otras evaluadas, que es la que tiene una concentración media de grenetina con respecto a las demás formulaciones. 6 5 TEXTURA 4 SABOR 3 COLOR AROMA 2 1 FORMULACION 1 FORMULACION 2 FORMULACION 3 Gráfico # 1.- Grado de aceptabilidad de la gelatina de acuerdo a las 3 formulaciones evaluadas. Análisis químico Tabla # 3.- Resultados de los análisis químicos Producto % de % de fibra proteína Experimental Comercializado ----------------------2.2 -----------------------321 | P á g i n a Luego del análisis sensorial, se consideró a la formulación 2 como aquélla de mayor aceptación y posteriormente se realizaron análisis químicos. En la tabla anterior se observan los resultados obtenidos para la determinación de proteínas expresados en porcentajes, el valor de proteína corresponde al 6.12 % cuyo valor es mayor al contenido de proteínas presentes en las gelatinas comerciales el cual reporta un valor aproximado de 2.2 %. De igual manera se observa que el porcentaje de fibra reportado es nulo, en caso de que este existiera su presencia es mínima, el método de Kennedy modificado no logró identificar un valor representativo sin embargo no se descarta la presencia de fibra en concentraciones trazas. Análisis microbiológico Tabla # 4. Resultado del análisis microbiológico de la gelatina. Requisito Recuento de bacterias aerobias mesofilicas, UFC/g Recuento de coliformes en placa UFC/g Determinación de EscherichiaColi UFC/g Recuentro de Mohos y Levaduras Recuento de Estaphylococcusaureus UFC/ g Resultado experimental 800 0 NOM - Norma colombiana 500-5000 10 <3 Ausente - Ausente 65 - 50-100 0 <100 - Los resultados obtenidos fueron comparados con la NOM-185-SSA1-2002 específica para productos derivados de lácteos obteniéndose valores experimentales por debajo de lo que marca. Conclusiones Tras la realización de esta investigación se pudo obtener la estandarización de un proceso que permitió la elaboración de un producto alimenticio derivado de un residuo industrial. Luego de la prueba hedónica realizada se seleccionó la formulación de mayor aceptación y se llevó a cabo el Análisis bromatológico con lo que se puede señalar que el producto cumple con las características deseables, de acuerdo a la normatividad vigente en México. Es de hacer notar que la cantidad de proteína presente en el producto que se obtuvo triplica a los valores reportados por empresas nacionales que comercializan productos similares en el mercado. En cuanto a los análisis microbiológicos se reporta valor por debajo de los permitidos por la norma, lo cual indica que el producto está libre de microorganismos y es apto para el consumo humano por ser un alimento inocuo. 322 | P á g i n a Referencias NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-051-SCFI/SSA1-2010, ESPECIFICACIONES GENERALES DE ETIQUETADO PARA ALIMENTOS Y BEBIDAS NO ALCOHÓLICAS PREENVASADOS-INFORMACIÓN COMERCIAL Y SANITARIA. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-130-SSA1-1995, BIENES Y SERVICIOS. ALIMENTOS ENVASADOS EN RECIPIENTES DE CIERRE HERMÉTICO Y SOMETIDOS A TRATAMIENTO TÉRMICO. DISPOSICIONES Y ESPECIFICACIONES SANITARIAS. NORMA OFICIAL MEXICANA (NMX-F-041-1983. ALIMENTOS. POSTRE DE GELATINA DE SABORES. FOODS FLAVORS GELATIN DESSERT. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS.) (NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-035-SSA1-1993, BIENES Y SERVICIOS. QUESOS DE SUERO. ESPECIFICACIONES SANITARIAS.) NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-185-SSA1-2002, PRODUCTOS Y SERVICIOS. MANTEQUILLA, CREMAS, PRODUCTO LÁCTEO CONDENSADO AZUCARADO, PRODUCTOS LÁCTEOS FERMENTADOS Y ACIDIFICADOS, DULCES A BASE DE LECHE. ESPECIFICACIONES SANITARIAS. NORMA COLOMBIANA: NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC26. NMX-F-068-S-1980. ALIMENTOS. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS. FOODS.DETERMINATION OF PROTEINS. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS. NMX-F-090-S-1978. DETERMINACIÓN DE FIBRA CRUDA EN ALIMENTOS.FOODSTUFF DETERMINATION OF CRUDE FIBER. NORMAS MEXICANAS.DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS. SANTOS M. ARMANDO, LECHE Y SUS DERIVADOS. ED. TRILLAS.PAG 234245. TETRA PACK. MANUAL DE INDUSTRIAS LÁCTEAS. ED. MUNDI – PRENSA. MADRID ESPAÑA.PAG 105-124. CÁRDENAS HERNÁNDEZ, JESSICA PAOLA, TESIS DE GRADO PRESENTADA COMO PARTE DE LOS REQUISITOS PARA OPTAR AL TÍTULO DE QUÍMICO FARMACÉUTICO. VALDIVIA-CHILE, 2006, HTTP://CYBERTESIS.UACH.CL/TESIS/UACH/2006/FCC266D/DOC/FCC266D.P DF 323 | P á g i n a INEGI. Población Nacional, investigado el día 23 de abril de 2013 de: http://cuentame.inegi.org.mx/poblacion/ INEGI. Población de Cintalapa de Figueroa, Chiapas, investigado el día 28 de abril de 2013 de: http://www.inegi.org.mx/ (N.d). servicios auxiliares, investigado el día 20 de abril de 2013; de: http://alimentariaonline.com/2006/11/29/aumenta-el-consumo-de-gelatinas-enmexico/ (N.d). Canales de distribución, investigado el día 8 de mayo de 2013; de: http://www.econlink.com.ar/economia/creditoconsumo/sustitutos.shtml Tetra Pack. Manual de industrias lácteas. Ed. Mundi – prensa. Madrid España.Pag 105-124. 324 | P á g i n a “PAPEL DE UN QUÍMICO DE ALIMENTOS EN EL DESARROLLO Y GESTIÓN DE UN ESTABLECIMIENTO DE COMIDA RÁPIDA” Autor: César Eduardo Sedano Martínez Coautores: Q.A. Esmeralda Paz Lemus; Q.F.B. Marco Antonio León Félix Instituciones: A Crêpe Place to Eat / LEFIX y Asociados / Facultad de Química, UNAM País: México / E.U.A. Dirección: Moctezuma 17, col. Toriello Guerra, Del. Tlalpan, México, D.F. / 38062 High Country Rd. 93551, Palmdale, CA, USA. Correo electrónico: [email protected] 325 | P á g i n a OBJETIVOS Establecer un cronograma de actividades partiendo de los requerimientos mínimos que por normatividad se deben de cumplir desarrollando los procedimientos y registros correspondientes. Desarrollar e implementar un sistema de Buenas Prácticas de Manufactura (BPM’s), basado en el Código de Regulaciones Federales, Título 21, parte 110 (CFR-21-110) de los Estados Unidos de Norteamérica. Desarrollar e implementar el sistema de Análisis de Peligros y Puntos Críticos de Control (HACCP) para restaurantes de acuerdo a la Guía para operadores de servicios de alimentos de la Administración de Alimentos y Medicamentos de Estados Unidos de Norteamérica (FDA). Auditar el sistema, estableciendo indicadores que demuestren la eficacia del sistema y demostrando que se tiene control de inocuidad y calidad en el establecimiento de comida rápida en cuestión. INTRODUCCIÓN En los servicios de alimentación es de suma importancia controlar la producción, almacenamiento y servicio de los alimentos a fin de proteger al consumidor y lograr su satisfacción, por lo que es indispensable desarrollar y gestionar estos temas en sistemas con reconocimiento global. Estos rubros a lo largo de la historia han ido adquiriendo una gran importancia, ya que el bienestar humano se encuentra de por medio y paralelamente se disminuyen los gastos innecesarios en los servicios de salud debido a enfermedades transmitidas por alimentos en cada nación. La importancia de establecer sistemas de reconocimiento internacional, que comprende desde las prácticas higiénicas en los establecimientos hasta la distribución de los productos, aunado a un sistema de gestión de calidad ayudará a mantener todos los eslabones de la larga y frágil cadena que los alimentos siguen respecto a calidad e inocuidad hasta llegar a ser consumidos. Cumpliendo las características de inocuidad y calidad de un alimento, promovemos que el establecimiento que las cumple pueda ser impulsado al mercado, ya que el consumidor tomara confianza al establecimiento y sus productos, y que por ende se generaran utilidades mayores haciendo que crezca dicho establecimiento a mediano y/o largo plazo, además de demostrar que se cuenta con un sistema correcto que disminuirá los problemas que normalmente se enfrentan en un establecimiento que carece de dicho sistema. Desarrollo de un sistema de gestión para un servicio de comida rápida Buenas Prácticas de Manufactura: Promulgadas en 1986 por la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA), para proporcionar lineamientos que exigen que todo alimento humano debería estar libre de adulteración. 326 | P á g i n a Es importante como primer paso para establecer el sistema de gestión el respetar las Buenas Prácticas de Manufactura establecidas en la normatividad, estas toman en cuenta: condiciones higiénico-sanitarias de las materias primas y de los establecimientos productores de alimentos, recursos humanos, requisitos de higiene en la fabricación, almacenamiento y transporte de materia prima y producto terminado, en controles de proceso en la producción y debida documentación. Las Buenas Prácticas de Manufactura involucran guías para: personal, su higiene y comportamiento, edificios e infraestructura, mantenimiento, controles de producción y proceso, almacenaje y distribución. Prerrequisitos: Al seguir las BPM’s se podrán elaborar seguimientos específicos para cada área de operación del establecimiento conocidos como Procedimientos Operativos Estandarizados (POE’s), los cuales al estar debidamente documentados, cumplidos, verificados continuamente y con un apoyo de recursos económicos pasaran a ser Programas de Prerrequisitos, si dichos programas son asentados correctamente se podrá proceder a diseñar el sistema HACCP. Procedimientos Operativos Estandarizados de Saneamiento: Forman parte de los POE’s y describen el qué, cómo, cuándo y dónde hacer limpieza y desinfección. Al sanitizar se enfatiza desde la limpieza de equipos, prácticas del personal, instalaciones del establecimiento, almacenamiento, diseño apropiado de equipos y operaciones, y control de plagas. Por lo que cuando se documentan, se llevan a cabo y se monitorean podremos pasar a formar el sistema HACCP. Los ocho lineamientos clave de la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA, por sus siglas en inglés) que son los requerimientos mínimos necesarios en un establecimiento de alimentos son: Seguridad del agua Mantenimiento y limpieza de las superficies que tienen contacto con los alimentos Prevención de contaminación cruzada Mantenimiento de las instalaciones, lavado y desinfección de manos y sanitarios Protección de adulterantes Etiquetado, almacenamiento y uso de compuestos tóxicos Control de las condiciones de salud de los empleados Exclusión de plagas de la planta de alimentos Considerando que las Buenas Prácticas de Manufactura y los Procedimientos Operativos Estandarizados estén debidamente formados, explicados y llevados a cabo se procederá a desarrollar el sistema HACCP para el Establecimiento de Comida Rápida en base a la Guía para operadores de servicios de alimentos de la Administración de Alimentos y Medicamentos de E.U.A. 327 | P á g i n a Certificaci ón Recursos Gestión Prerrequisitos CFR21-110 HACCP Mejora continua Auditorías 328 | P á g i n a METODOLOGÍA Establecer BPM's Establecer Programas de Prerrequisitos Etapas Previas al sistema HACCP Los 7 Principios del HACCP Implementación y mantenimiento de HACCP • Herramienta básica para la seguridad de los alimentos • Centralizadas en higiene y formas de manipular los alimentos • Documentar, capacitar, verificar y proveer recursos para todas las operaciones del Establecimiento de Comida Rápida • Formación del equipo HACCP, descripción del producto, determinar el uso del producto, elaborar diagrama de bloques del proceso del producto y la verificación corespondiente. • Los pilares de nuestro sistema HACCP • Cada programa HACCP varía de acuerdo al establecimiento en que se aplique • El sistema es estructurado y mantenido para asegurar su eficacia Conclusiones Siguiendo la normatividad de E.U.A., se cubrieron los requisitos mínimos necesarios tomando como base el cronograma de actividades propuesto, estableciendo los procedimientos y registros pertinentes. 329 | P á g i n a Se desarrolló e implementó un sistema de Buenas Prácticas de Manufactura, basado en el Código de Regulaciones Federales, Título 21, parte 110 (CFR-21-110) de los Estados Unidos de Norteamérica. Se desarrolló e implementó el sistema de Análisis de Peligros y Puntos Críticos de Control (HACCP) para un establecimiento de comida rápida de acuerdo a la Guía para operadores de servicios de alimentos de la Administración de Alimentos y Medicamentos de Estados Unidos de Norteamérica (FDA). Se auditó el sistema, tomando indicadores que demuestran la eficacia y eficiencia del sistema, demostrando paralelamente que se tiene control de inocuidad y calidad en el establecimiento de comida rápida donde se realizó el estudio. Bibliografía Código de Regulaciones Federales, Título 21, parte 110 (CFR-21-110) de Buenas Prácticas de Manufactura Actuales en manufactura, empacado o retención de alimentos para humanos. Programa de Certificación en Entrenamiento de Manejo de Alimentos de California, E.U.A Paquete de Información para Establecimientos de Alimentos. Salud Ambiental y Salud Pública. Condado de Los Angeles, California, E.U.A. Guía para Personal. Iniciadores de Seguridad en el Servicio. Quinta Edición. Asociación Nacional de Restaurantes® y ServSafe®, E.U.A. Manejo de Seguridad de los Alimentos: Guía para el uso voluntario de los principios de HACCP para operadores de los establecimientos y servicios de alimentación. Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA, por sus siglas en inglés) de E.U.A. Curso-Taller “HACCP Un Concepto Básico para la Protección de los Alimentos” Curso-Taller “HACCP Avanzado. Verificación y Validación” Blanca Dolly Tejada. Administración en los servicios de alimentación. Editorial Universidad de Antioquia. Segunda Edición. 2007. pp. 7-10 Defect Levels Handbook. The Food Defect Action Levels. Levels of natural or unavoidable defects in foods that present no health hazards for humans. FDA. 330 | P á g i n a CONFITES CON ANTIOXIDANTES Laura Esther Olguín Martínez 1; María Teresa Favela Torres 1: Alicia Ramírez Schoettlin1. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del IPN. Laboratorio de Investigación Control de Calidad y Confitería del Dpto. de Ingeniería Bioquímica Pról. de Carpio y Plan de Ayala Casco de Santo Tomas. [email protected]. [email protected], [email protected] 1Profesor becario COFAA y EDD. INTRODUCCION El consumo de dulces siempre ha sido amplio y bien aceptado por los niños y pueden ser una opción en el empleo de ingredientes que le den un beneficio extra en su salud. Los confites en general aportan solo la energía de sus carbohidratos. Por eso se propone elaborar las pastillas de goma hechas con grenetina que tienen una fuente de proteína que ha sido demostrado ser importante para la formación de los cartílagos a estas gomitas se les puede dar un beneficio nutricional como es la adición de antioxidantes y otros suplementos como :extracto litchi, extracto de flor de Jamaica o con glucosamina, o extractos de canela y glicina, este último como ayuda a niños con problemas de obesidad, todas estas sustancias tienen efectos benéficos para la salud, sin dejar a un lado la satisfacción de las exigencias del consumidor en cuanto a color, sabor, apariencia y textura agradables, y que lleguen a su comercialización a un precio accesible. La glucosamina es una sustancia que ha sido clasificada por la liga internacional contra el reumatismo por su acción terapéutica para la artrosis y osteoartritis, y se presenta en el mercado en forma de tabletas, capsulas, gel o jarabe. El litchi es un fruto originario de china que empieza a cultivarse en México es un fruto muy rico en vitamina C y antioxidantes. La Jamaica tiene una gran cantidad de antioxidantes y una coloración roja natural sumamente atractiva que elimina el uso de colorantes. La canela tiene un excelente poder antioxidante y también se reconoce como un buen hipoglucemiante METODOLOGIA Las pastillas de goma se elaboran con el método general del siguiente diagrama: Fig. 1 Metodología para la elaboración de pastillas de goma 331 | P á g i n a Las modificaciones pertinentes en la formulación son conocer el efecto que tiene la temperatura en las sustancias que se deben adicionar si estas no se afectan con los tratamientos térmicos se incorporan en la elaboración del jarabe si no es así se adicionan en el mezclado de ingredientes. Para conservar mejor el sabor se hace extracción por arrastre de vapor o lixiviación de sabores naturales por ejemplo para el litchi. Para añadir pulpas de frutas estas pueden prepararce en almíbar por ejemplo para litchi. Fig. 2 Metodología de elaboración de litchis en almíbar Determinación de humedad por tratamiento térmico NOM-116-ssa1-1994 Determinación de proteína por el método de kjeldahl gunning NMX-f-608-s-NORMEX2002 Determinación de cenizas NMX -f-066-S-1978 Determinación de extracto etéreo por el método de soxhlet NMX -f-089-S-1978 Método de cuenta de bacterias mesofílicas aerobias NMX -F-253-1977 Método de cuenta de organismos coliformes NMX -F-254-1977 Método de conteo de hongos y levaduras en alimentos NMX -F-255-1978 Método para determinación de salmonella y en alimentos NOM -114-SSA1-1994 Método para determinación de staphylococcus aureus en alimentos NOM -115-SSA11994 Evaluación sensorial Se proponen pruebas afectiva de escala hedónica por ser productos nuevos se aplicará jueces no entrenados, se les proporciona aproximadamente 5-6 g y se emplea agua como agente neutralizante. Para conocer si están presentes las sustancias añadidas se comprobó su presencia por ejemplo en las pastillas de glucosamina, se aplicó la técnica de espectroscopia de infrarrojo por transformada de Fourier (el equipo utilizado corresponde a un espectrofotómetro marca Perkin-Elmer 16 PC). 332 | P á g i n a RESULTADOS Mediante pruebas de ensayo y error se busca la adición de los componentes a las distintas formulaciones por ejemplo en el caso de gomitas de canela: Para obtener la cantidad de extracto de canela adecuado se realizaron diferentes extracciones canela en vara y dependiendo del sabor y la apariencia observados en la fórmula de pastilla de goma se tomó esa cantidad como parámetro, considerando un consumo de canela entre 1 y 2 g para un efecto hipoglucemiante. Fig1. APARIENCIA DE LAS PASTILLAS DE GOMA GC4 Y GC5, SIENDO ÉSTA ÚLTIMA LA SELECCIONADA EN LA CANTIDAD DE CANELA De esta manera se van variando los componentes en la formulación hasta tener sabores y colores apropiados por ejemplo en las gomitas de litchi. En el desarrollo de la formulación No. 14 de litchi, tuvo el inconveniente que en la parte de la pulpa no presentaba un color blanco como en la fruta, por lo que en la formulación 15 se le agregó dióxido de titanio, para lo cual se determinó cual era la cantidad mínima necesaria para que la pastilla de goma presentará un color blanco, sin embargo, la adición del dióxido de titanio perjudicó la gelificación de las pastillas de goma, por lo cual se descartó la adición de este. Las pastillas de goma con forma de litchi presentaron las siguientes dimensiones, las cuales se presentan en el cuadro 2. Las dimensiones de la pastilla de goma se evaluaron para determinar el parecido de las pastillas de goma con la fruta, y de acuerdo a los datos obtenidos la pastilla de goma cumple con las dimensiones de la fruta fresca, pero en el caso del peso están muy cerca del límite superior. 333 | P á g i n a A todos los productos se les determina el análisis químico proximal, para poder así manejar estos resultados en las etiquetas. 334 | P á g i n a Lo importante es que estos productos que se desarrollan aumentan su contenido en proteína y fibra en relación con productos comerciales. Es importante también comprobar la presencia de los compuestos que son adicionados a las gomitas como en el ejemplo de las de glucosamina sabor naranja. La técnica de espectroscopia de infrarrojo por transformada de Fourier permitió comprobar que el producto contiene el activo glucosamina que está presente como sulfato de glucosamina. De acuerdo a la dosis establecida por los estudios clínicos, las personas que sufren de problemas en las articulaciones requieren de 750 a 1500 mg de glucosamina al día. Por lo tanto, se necesita consumir de 3 a 5 gomitas sabor naranja al día, para cubrir dichas necesidades. CONCLUSIONES Es factible desarrollar pastillas de gama con la adición de nutrientes que aporten beneficios potenciales y comprobar la presencia en las gomitas después de los tratamientos térmicos. Todas las gomitas elaboradas tuvieron una buena aceptación de consumidores potenciales. BIBLIOGRAFIA 1. Baker, William; Gutierrez-Williams, Gabriela; White, Michael, Kluger, Jeffrey; Coleman, Craig. (2008). Effect of cinnamon on glucose control and lipid parameters. Diabetes care, 31:41-43. 2. Bedolla, B. Salvador; Dueñas, G. Claudia; Esquivel, I. Isabel; Favela, T. Teresa; Guerrero, H. Rodolfo; Mendoza, M. Ernesto; Olguín, M. Laura; Ortiz, G. José; Pacheco, P. Oliverio; Quiroz, B. Maricela; Ramírez, S. Alicia. (2009). Introducción a la tecnología de alimentos. 2° edición. Ed. Limusa. México. Pp. 144-145. Agradecimientos: Edid Areli Gómez Díaz, Naxhieli Itayu López Sánchez, Joaquín Guillermo Cortés Hernández 335 | P á g i n a POSTRES FRIOS FUNCIONALES María Teresa Favela Torres 1; Alicia Ramírez Schoettlin1 ; Laura Esther Olguín Martínez 1. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del IPN. Laboratorio de Investigación Control de Calidad y Confitería del Dpto. de Ingeniería Bioquímica Pról. de Carpio y Plan de Ayala Casco de Santo Tomas. [email protected]. [email protected], [email protected] 1Profesor becario COFAA y EDD. Introducción La elaboración de postres fríos como son los helados y las paletas de hielo tienen una gran importancia económica, por su forma, color y sabor tienen un gran atractivo para la población infantil. Es factible entonces introducir nutrientes que son deseables para que los niños se desarrollen sanamente, y fortalecer el buen funcionamiento del intestino, con lo que se logra una buena absorción de nutrientes, es evidente la importancia de mantener el equilibrio de la flora intestinal. Una de las formas más simples de incrementar las bacterias benéficas en el intestino es a través del consumo de alimentos que proporcionan estos microorganismos. es por ello que se recomienda el desarrollo productos como helados y paletas heladas a partir de leche fermentada que contenga bacterias ácido lácticas en cantidad adecuada, de manera que el producto actúe como prebiótico influyendo benéficamente en la salud del consumidor. Para complementar los productos se pueden saborizar con mermelada como el arándano o la mora azul para un aporte de antioxidantes. METODOLOGIA DESARROLLO EXPERIMENTAL Se deberá partir de leche bronca o pasteurizada, se pasteurizara si es el caso, por otro lado se aplicará la técnica de activación de bacterias lácticas, a la leche se le deberá hacer ajuste de sólidos, se podrá adicionar otros nutrientes y se inocula con las bacterias lácticas, se deja fermentar hasta lograr la acidez apropiada, es recomendable conocer las curvas de fermentación, la cual dura 4 horas en promedio y se adiciona la mermelada para saborizar, se lleva a cabo el pre enfriamiento, el batido y el endurecimiento con batido para la elaboración de los helados. Las paletas se elaboran a partir del vaciado en los moldes. Para paletas con tres sabores se vacía a los moldes la mezcla de la cubierta, dicha mezcla se empieza a enfriar a una temperatura entre 4-7°C, hasta alcanzar un grosor de 3 cm de pared, se procede a retirarle el excedente de la mezcla y se congela a una temperatura de 15°C. Recordando que está cubierta es de agua y de sabor piña. Se procede con la capa de coco, ésta mezcla se vacía y es el relleno de la paleta, y es aquí donde se encuentran las bacterias lácticas activadas. Al vaciar la mezcla se empieza a enfriar a una temperatura de 2-4°C, es aquí donde la Mezcla se empieza a congelar, pero no en su totalidad, por lo que permite quitar su excedente de la mezcla, hasta llenar el espacio del molde y se inicia el congelamiento, a una temperatura de -5°C y en este momento se colocan los palos de madera, y posteriormente se sacan las paletas del molde, para su empacado y posterior almacenamiento a -5°C. Se realizaron pruebas de evaluación sensorial afectivas de escala hedónica, y el análisis químico proximal. RESULTADOS Y DISCUSION Se recomienda mucho que se tenga un adecuado seguimiento de la fermentación con el consorcio de las bacterias ácido lácticas seleccionadas, aquí se tiene un ejemplo para el helado probiótico de zarzamora. Otro parámetro importante será conocer la cinética de congelación en la que es importante considerar la rapidez del congelamiento, que se logre llegar a – evitar la formación de cristales grandes de hielo y no tener una consistencia arenosa en el helado, otro factor que influye es la maduración. En la siguiente fig. se muestra el ejemplo se la curva de congelamiento para helado de zarzamora. 336 | P á g i n a En esta Figura se aprecia la mayor velocidad de congelación aplicada cuando la mezcla del helado Es muy conveniente determinar el grado de incorporación de aire a la mezcla de helado, en el ejemplo del helado de zarzamora que se trabajó, se calculó en 61.29% este resulta ser un valor promedio para helados suaves, este puede mejorarse con equipos propios para la elaboración de helado. Es muy conveniente realizar el análisis químico proximal a los helados funcionales, ya que se tiene que desarrollar la etiqueta para su comercialización. Elaboración de la Paleta Helada. En el proceso de elaboración de este producto hay ciertos puntos críticos que se deberán controlar como son las bajas temperaturas, pues es ahí, donde está en riesgo la sobrevivencia de las bacterias lácticas empleadas, cabe señalar que se alcanzan temperaturas de protegidas por los compuestos propios de la leche, no sufren tantas alteraciones. En el ejemplo de la paleta que se trabajó se logró obtener productos con dos capas de sabor, la capa interna está compuesta de leche fermentada saborizada con esencia de coco comercial y la capa más externa está compuesta por dulce de piña. Esta combinación de sabores da como resultado una paleta helada pro biótica en la cual se tiene el beneficio en el intestino del consumidor. Es recomendable conocer la viabilidad de las bacterias probiótica utilizada. En la paleta por ejemplo se realizaron pruebas de viabilidad para los dos inóculos empleados, tanto a la leche fermentada como en el producto final (paleta helada), se encontró que en la leche fermentada empleando el inoculo de yogurt comercial hay 72 x 107 UFC/ml, y en la paleta se conservan 10 x 105 UFC/ml, en el inoculo empleado con la cepa liofilizada se encontró que en la leche fermentada se obtuvo 27 x 108 UFC/ml, sobreviviendo en la paleta 23 x 107 UFC/ml. Evidentemente se tiene que empleando el inoculo liofilizado se obtienen mejores resultados de viabilidad de las bacterias lácticas, siendo más activas durante la fermentación debido a que se trata de un inoculo puro, ello no quiere decir que las Bifidobacterias de productos lácticos comerciales sean menos efectivas simplemente han perdido actividad durante su vida de anaquel. Tabla 4. Cuenta viable en leche fermentada y paleta probiótica elaborada con los cultivos lácticos liofiizados. QuickTime™ and a decompressor are needed to see this picture. Se observa la disminución de la presencia de microorganismos debido a la congelación, no obstante se observa una adecuada sobrevivencia después de elaborado el producto. CONCLUSIONES Se factible desarrollar: productos funcionales a partir de leche pro biótica, por ejemplo: helados con mermelada de mora azul y paleta trisabor. En las paleta, se pueden saborizar saborizaron diferentes capas, como en el producto desarrollado que se tenía: capa con piña natural, leche fermenta y saborizante de coco. Se pueden evaluar diferentes fuentes de bacterias. En el ejemplo de la paleta trizabor se evaluaron dos fuentes de bacterias ácido lácticas para su empleo como Inóculo: un producto comercial y una cepa liofilizada en el helado se utilizaron cepas liofilizadas. El inóculo comercial tardó 7 horas para fermentarse, llegando a una acidez de 0.72% y en el inóculo puro se observó que el tiempo disminuyó a 3.5 horas obteniendo una acidez de 0.75% .Se encontró que en la leche fermentada con el inóculo de cepa liofilizada se obtuvo 27 x10 8 UFC, sobreviviendo en la paleta 23 x10 7 UFC. El tratamiento térmico (bajas temperaturas), no afecta de manera 337 | P á g i n a Significativa la viabilidad de bacterias lácticas inoculadas, ya que éstas se mantienen vivas y activas, después de dicho proceso. Se determinó la formulación y las condiciones necesarias para la elaboración de la paleta trisabor y helado con mermelada de mora azul. El grado de aceptación de los productos fue muy bueno. Bibliografìa 1. - A.O.A.C. Official Methods of analysis of the association of official analytic chemists. 1980. Washington D.C. U.S.A - en de n e i aci n e 003) Lau anne Suiza) “P bi ic y mic f a in e ina de h mb e” 3. - Fuller, R. (1989). Probiotics in man and animals. J. Appl. Bacteriol. 365-378 4.- Guarner F. El colon como órgano: hábitat de la flora intestinal. Alimentos, Nutrición y Salud 2000;7(4):99-106 5.- Knorr, D. (1998). Technology aspects related to microorganism in functional foods. Trends in Food Sci. and Technol. 295-306. 6.-Olga Patricia García Obregón. Órgano Informativo de Kellogg sobre la relación entre la Nutrición y la Sa ud “Die a y a ud” Añ 10, 1, 003 P ime eme e 2003. Publicación Gratuita. 7.-Palou A, Serra P. Perspectivas europeas sobre alimentos funcionales. 2000;7690. 8.- Sanders MG (1995).Lactic acid bacteria as promoters of human health. In: Goldberg (Ed). Functional foods Champan and Hal, London 9.-Secretaría de Comercio . Dirección General de Normas. Norma Oficial Mexicana NOM-036-SSA1-1993, Bienes y Servicios. Helados de Crema, de Leche o Grasa vegetal, sorbetes y bases o mezclas para helados. Especificaciones Sanitarias 10.-Van der Werf, M.J. y K. Venema (2001). 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José Ortiz Gama. 338 | P á g i n a EFECTO DE LA INCLUSIÓN DE SUBPRODUCTOS DE MANGO Y UN EXTRACTO DE JAMAICA SOBRE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE UN ALIMENTO PARA TILAPIA Palabras clave: dieta; tilapia; actividad antioxidante; compuestos fenólicos Edgar Iván Jiménez Ruíz1*, Jesús Ernesto Rincones López1, Gabriel Ebodio Armenta López1, Rosendo Balois Morales1, Yolotzin Apatzingán Palomino Hermosillo1, Mónica Leticia Sánchez Herrera1, María Teresa Sumaya Martínez1 1 Unidad de Tecnología de Alimentos. Secretaría de Investigación y Posgrado. Universidad Autónoma de Nayarit, Ciudad de la Cultura “Amado Nervo”, Blvd. Tepic-Jalisco s/n, C.P. 63190. Tepic, Nayarit, México. *e-mail: [email protected] Categoría: POSGRADO Objetivo general Evaluar la capacidad antioxidante de un alimento para tilapia formulado con inclusión de subproductos de mango y extracto de jamaica, comparado con un alimento comercial. Objetivo específicos - Formular y elaborar una dieta para tilapia con la inclusión de harina de subproductos de mango y extracto de jamaica. - Determinar la capacidad para atrapar radicales libres del alimento formulado y de un alimento comercial. - Determinar la concentración de compuestos fenólicos totales del alimento formulado y de un alimento comercial. Resumen Los antioxidantes sintéticos más utilizados como aditivos en la formulación de alimento acuícola son el butilhidroxitolueno y butilhidroxianisol. Sin embargo, dichos compuestos han mostrado evidencia de efectos adversos en la salud, por lo que han sido susceptibles de regulación en su uso. Por lo tanto, existe una necesidad de buscar fuentes naturales de antioxidantes para reducir riesgos a la salud del consumidor de productos pesqueros, además que pudieran proveer efectos benéficos en el adecuado desarrollo de los organismos (ej. disminuyendo 339 | P á g i n a el estrés oxidativo) y la vida de anaquel de dichos productos. El objetivo del presente trabajo fue formular una dieta para tilapia, con la inclusión de antioxidantes naturales y determinar su capacidad antioxidante, comparándolo contra un alimento comercial. Se formuló un alimento para tilapia de acuerdo a una dieta base reportada en estudios anteriores y se añadió harina de subproductos de mango (10%) y un extracto acuoso de jamaica (1:10), ambos con actividad antioxidante. Posteriormente, tanto al alimento comercial como al formulado se les realizó un extracción etanólica (reflujo). A los extractos obtenidos se les determinó la actividad anti-radical utilizando el radical libre DPPH● y la concentración de compuestos fenólicos totales. El alimento formulado en laboratorio presentó 3 veces más actividad antirradical (13.25 μmol ET/g muestra) en comparación con el alimento comercial (4.22 μmol ET/g muestra) y concentraciones de compuestos fenólicos totales de 2.50 y 1.53 μmol EAG/g muestra, respectivamente. De acuerdo a lo anterior, es posible la sustitución de antioxidantes naturales por los sintéticos utilizados en la alimentación acuícola. Metodología Obtención de insumos con propiedades antioxidantes La harina de subproducto (cáscara, hueso y pulpa pegada ambos) se obtuvo a partir de de mango "Ataulfo" (Mangifera indica L.). El despulpado se realizó mecánicamente y el subproducto fue secado a 45°C durante 12h en un horno de flujo horizontal a una velocidad de aire de 2 m/s. Posteriormente, el subproducto seco se hizo pasar por un molino de martillos para después tamizarlo a un tamaño de partícula aproximado de 250 μm. Por otro lado, se preparó un extracto acuoso de jamaica (Hibiscus sabdariffa L.), el cual fue utilizado para la hidratación de la masa durante la elaboración del alimento. Dietas experimentales La dieta con inclusión de antioxidantes naturales (DMJ) fue formulada y elaborada en el Laboratorio de Tecnología de Alimentos de la Universidad Autónoma de Nayarit, con una concentración de 40% de proteína y 8% en lípidos, teniendo como ingredientes harina de pescado, soya, trigo, gluten, aceite de pescado, vitaminas y minerales, de acuerdo a lo reportado por Hernandez et al. (2010). Este alimento contiene los requerimientos nutricionales que la tilapia demanda, además de la inclusión de harina de subproductos de mango y el extracto de jamaica. El alimento comercial (DC) se obtuvo de una empresa localizada en Zapopan, Jalisco y al igual que la dieta formulada contiene 40% de proteína. Actividad antirradical Para la medición de este parámetro las dietas se sometieron a una extracción etanólica mediante reflujo durante 3h. Los extractos fueron filtrados con papel 340 | P á g i n a Whatman #4, para después ser almacenadas a 4°C hasta su análisis. La determinación de la actividad antirradical se realizó utilizando como prueba el radical libre DPPH●, siguiendo la metodología reportada por Morales y JiménezPérez (2001). La actividad antioxidante se expresó en μmoles equivalentes de Trolox/L (μmol ET/L). El Trolox (Carboxílico 6-hidroxi-2, 5, 7, 8-tetrametilcromo) es una molécula que presenta una fuerte actividad antirradical, la cual se toma como referencia. Concentración de compuestos fenólicos totales (CFT) Para este análisis se utilizaron los extractos etanólicos obtenidos como se describió anteriormente. La técnica para determinar los compuestos fenólicos totales se llevó a cabo de acuerdo a lo reportado por Stintzing et al. (2005), en la cual se utiliza el reactivo de Folin-Ciocalteu. La concentración de estos compuestos se obtuvo a partir de una curva estándar de ácido gálico (0 a 400 mg/L) y se expresó como equivalentes de ácido gálico (EAG) mg/L. Análisis de resultados Se llevó a cabo un análisis de varianza (ANOVA) univariado con las 3 diferentes dietas. Además, se realizó un prueba de comparación de medias por el método de Tukey, tomando en cuenta una p<0.05. Resultados Para efectos de comparación, en este estudio preliminar se realizaron los análisis de actividad antioxidante (utilizando el radical DPPH●) y compuestos fenólicos totales para la dieta formulada base (DB), la cual, al igual que DMJ contiene los requerimientos necesarios para el desarrollo de la especie. La diferencia entre DB y DMJ es la inclusión de compuestos bioactivos de origen vegetal en ésta última. Actividad antirradical Los resultados de actividad antirradical mostraron un aumento (p<0.05) en DMJ al compararla con DB, observándose 13.25 y 5.22 μmol ET/g, respectivamente. De la misma manera, DC mostró un valor de actividad antirradical 3 veces menor (4.22 μmol ET/g) al compararla con DMJ. Concentración de compuestos fenólicos totales Al igual que para la actividad antirradical, la concentración de CFT para las distintas dietas mostró diferencias significativas (p<0.05). La mayor concentración de estos compuestos se observó para la DMJ, con 2.50 μmol EAG/g muestra. En cuanto a DB y DC, se encontraron 0.95 y 1.53 μmol EAG/g muestra, respectivamente. 341 | P á g i n a Análisis Con lo anterior, es posible inferir que dicho aumento en la actividad antirradical y en los compuestos fenólicos totales para DMJ (al compararlo con la dieta base) se debe a la inclusión de compuestos bioactivos presentes tanto en los subproductos de mango, como en la jamaica y que fueron adicionados durante la formulación. Por otro lado, el hecho que DC contenga una mayor concentración de CFT puede deberse a la propia formulación de las dietas comerciales para peces, ya que se sabe que éstos son elaborados adicionando antioxidantes sintéticos de tipo fenólico como son el butilhidroxitolueno y butilhidroxianisol. Conclusiones El presente estudio preliminar y algunos complementarios que actualmente se están llevando a cabo, permitirán definir la potencial sustitución de los antioxidantes sintéticos en dietas para tilapia y/o otras especies relacionadas con compuestos bioactivos de origen natural. Lo anterior también comprende el aprovechamiento de subproductos de mango y jamaica que actualmente se producen en grandes volumenes en algunos estados de la república. Referencias Hernandez C., Olvera-Novoa M.A., Hardy R.W., Hermosillo A., Reyes C, Gonzáles B. 2010. Complete replacement of fish meal by porcine and poultry byproduct meals in practical diets for fingerling nile tilapia Orechromis niloticus: digestibility and growth performance. Aquaculture Nutrition. 16: 44-53. Morales F. y Jiménez-Pérez S. 2001. Free radical scavenging capacity of Maillard reaction products as related to colour and fluorescence. Journal Agricultural Food Chemistry. 72: 119-125. Stintzing F.C., Herbach K.M., Mosshammer M.R., Carle R., Yi W., Sellappan S., Akoh C.C., Bunch R. y Felker P. 2005. Color, betalain pattern, and antioxidant properties of cactus pear (Opuntia spp.) clones. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 53(2): 442-451. 342 | P á g i n a EFFECT OF GRAIN SORGHUM ON BLOOD GLUCOSE AND INSULIN RESPONSES Sun-Ok Lee, Nicole Poquette, Xuan Gu Department of Food Science, University of Arkansas 2650 North Young Avenue, Fayetteville, AR 72704 [email protected] Diabetes and obesity have sparked interest in identifying healthy, dietary carbohydrates as functional ingredients for controlling blood glucose and insulin levels. Grain sorghum has been known to be a slowly digestible cereal; however, research is limited on its health effects in humans. The objectives of this study were to measure the contents of functional starch fractions, SDS (slowly-digestible starch) and RS (resistant starch), and to investigate the effects of grain sorghum on postprandial plasma glucose and insulin levels in 10 healthy men. A whole-wheat flour muffin (control) was compared with the grain sorghum muffin with both muffins containing 50 g of total starch. Using a randomized crossover design, male subjects consumed treatments within a one-week washout period, and glucose and insulin levels were observed at 15 minutes before and 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 120, 180 minutes after consumption. The mean glucose responses reduced after consuming grain sorghum, particularly at 45–120 minute intervals, and mean insulin responses reduced at 15–90 minute intervals compared to control (P<0.05). The mean incremental area under the curve (iAUC) were significantly lowered for plasma glucose responses an average of 35% from 3863 ± 443 to 2871 ± 163 mg·(~3h)/dL (P<0.05). Insulin responses also reduced significantly from 3029 ± 965 μU·(~3h)/L for wheat to 1357 ± 204 with sorghum (P<0.05). Results suggest that grain sorghum is an excellent functional ingredient to assist in managing glucose and insulin levels in healthy individuals, and potentially diabetes and obesity. Keywords: grain sorghum, slowly-digestible starch (SDS), resistant starch (RS), diabetes 343 | P á g i n a “ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE LOS PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS DEL QUESO DE PORO” Palabras clave: Queso de poro, microorganismos, maduración. Rocher Córdova Roberto (1), García Jiménez Rafael (1), Hernández Muñoz Ana Line (1), Hernández Gómez Norma Angélica (1). Universidad Tecnológica de Tabasco. México. Carretera Villahermosa.-Teapa Km 14.6 s/n Fracc. Parrilla II Parrilla Centro, Tabasco C.P. 86280. Email:[email protected], [email protected], [email protected], [email protected]. Posgrado (maestría). OBJETIVOS General Evaluar el comportamiento de la flora microbiana durante el proceso de maduración del queso de poro, elaborado con leche bronca y con leche pasteurizada, que permita comparar la diferencia entre ambos procesos. Específicos Realizar análisis microbiológicos del queso de poro durante la maduración en los 2 procesos, utilizando parámetros recomendados en las Normas Oficiales Mexicanas para conocer su calidad. Elaborar tabla comparativa de los resultados obtenidos antes y después de la pasteurización, para observar los comportamientos del crecimiento microbiológico. RESUMEN La identificación de los parámetros microbiológicos permite establecer estrategias para la inocuidad de los alimentos. En el Estado de Tabasco, se produce un tipo de queso de poro producto blando elaborado con leche cruda y en forma artesanal. El objetivo de la investigación fue evaluar el comportamiento microbiológico durante el proceso de maduración del queso de poro, elaborado con leche bronca y pasteurizada, para comparar la diferencia entre ambos procesos. Los análisis fueron conforme a normatividad, estadística descriptiva y ANOVA. Los resultados fueron, que no se encontró coliformes fecales y Salmonella, no existiendo diferencia significativa en crecimiento de Staphylococcus aureus, ya que la pasteurización de la materia prima, al inicio disminuyó el crecimiento del microorganismo. Su crecimiento se estabilizó para ambos procesos en los 24 días de maduración (crecimiento de 100 UFC/g), que es lo que marca la norma. En el caso de las levaduras, crecieron muy por arriba de lo que marca la norma, las diferencias se observaron al inicio del proceso, conforme transcurre el tiempo de maduración, el crecimiento es casi paralelo, para ambos procesos, aumento a partir del tiempo 8 hasta los 48 días. Lo cual se debe a que estos microorganismos, son más resistentes a las altas temperaturas y pH ácidos.En el caso de los hongos no existen diferencias, independientemente del proceso hubo crecimiento, de este microorganismo, aunque muy por debajo de la norma. La pasteurización y acidez son 2 factores de la leche determinante para disminuir o eliminar el crecimiento bacteriano en productos lácteos. 344 | P á g i n a METODOLOGÍA 1. Obtención de las muestras. Las muestras se obtuvieron de la microempresa “El Tigre” del municipio de Balancán, Tabasco. Se analizaron un total de 42 muestras de queso tipo poro, de las cuales 21 fueron elaboradas con leche sin pasteurizar y las restantes con leche pasteurizada, cada lote de 21 muestras, se dividió en tres réplicas de 7 muestras cada una; luego se almacenaron por 48 días a 6 + 2°C. Durante el almacenamiento, se tomaron muestras al tiempo 0 (salida del proceso), 8, 16, 24, 32, 40 y 48 días, de cada réplica, tanto del lote sin pasteurizar como pasteurizado. Cabe mencionar que la temperatura y tiempo de maduración del queso de poro, es debido a los siguientes factores: a). La temperatura de almacenamiento (maduración), fue debido a que el producto se almacena en refrigeración en la microempresa al tiempo de maduración. Se tomó en base al proyecto “Evaluación de los parámetros microbiológicos, sensoriales y fisicoquímicos del queso de poro” (García et al, 2010), ya que este proyecto de tesis, se desprende del estudio que se menciona. El procedimiento, para la toma de muestra y transporte de las de las mismas, se realizó de acuerdo a las especificaciones Norma Oficial Mexicana 109-SS1-1994. Bienes y Servicios. Procedimiento para toma y transporte de muestras de alimentos, para su análisis. En cuanto a la preparación y dilución de las muestras, fue de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana 110-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Preparación y Dilución de Muestras de Alimentos para su análisis microbiológico. En la figura 1, se muestra el diagrama de la parte experimental de la investigación. 2. Análisis microbiológicos. Los análisis para la determinación de Hongos y levaduras (UFC/g), se llevaron a cabo de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana NOM-111-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Método para la determinación de Mohos y Levaduras en alimentos. La determinación de Coliformes fecales (NMP/g), se realizó con la metodología de la Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Determinación de bacterias Coliformes. Técnica del Número más Probable. En cuanto a la determinación de Salmonella se aplicó la metodología que se indica en la Norma Oficial Mexicana NOM-114-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Método para la determinación de Salmonella en alimentos. Los análisis para Staphylococcus aureus (UFC/g), realizaron de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana NOM-115SSA1-1994. Bienes y Servicios. 3. Análisis de resultados. Los resultados fueron analizados, empleando Estadística descriptiva y análisis de varianza. RESULTADOS En la tabla 1, se muestran los resultados de los análisis microbiológicos promedios, de las tres repeticiones en el queso de poro. En cuanto a la disparidad de estos resultados, se tiene que tomar en cuenta que existieron factores que no se pudieron controlar como son los siguientes: El proceso del queso de poro. El personal, que participó. Los materiales y utensilios empleados en la elaboración. 345 | P á g i n a Las condiciones del lugar donde se realizó el proceso. El tiempo de proceso. La calidad de la materia prima (leche). Los resultados indican que conforme transcurre el tiempo de maduración cero (días), los Staphylococcus aureus, aumentan hasta los 8 días con leche bronca, disminuyendo hasta nivelarse con 100 UFC/g; mientras que con leche pasteurizada sucede algo similar hasta nivelarse al mismo número de UFC/g. En cuanto a Coliformes totales y Hongos; los resultados son similares en ambos procesos. En relación a Coliformes fecales y Salmonella no fueron detectados. En relación a las levaduras en ambos procesos se observa que en el transcurso de almacenamiento su crecimiento aumenta. Tratamiento I T. Alm. 0 Staphylococcus aureus 328 333 UFC/g 452 333 Coliformes totales <100 NMP/g <100 Coliformes fecales No detectable Hongo s 100 UFC/g 100 Salmonella No detectable Levadura s 16 667 UFC/g 147 667 I 8 I 16 14 667 <100 No detectable 156 000 100 Ausente I 24 100 <100 No detectable 235 333 100 Ausente I 32 100 <100 No detectable 250 000 100 Ausente I 40 100 <100 No detectable 970 000 100 Ausente I 48 100 <100 No detectable 600 000 100 Ausente II 0 23 667 <100 No detectable 77 100 Ausente II 8 32 000 <100 No detectable 56 333 100 Ausente II 16 8000 <100 No detectable 35 667 100 Ausente II 24 100 <100 No detectable 98 667 100 Ausente II 32 100 <100 No detectable 52 000 100 Ausente II 40 100 <100 No detectable 80 667 100 Ausente II 48 100 <100 No detectable 88 333 100 Ausente Ausente Ausente Tablas 1. Resultados microbiológicos promedios del “Queso de poro” de las tres repeticiones = Leche bronca; II = Leche pasteurizada; 0, 8...48 Tiempo de almacenamiento en días. ANÁLISIS En base a los resultados, se observa que el crecimiento de los Staphylococcus aureus, es alto, cuando el queso se elabora con leche bronca (328 333 UFC/g) y disminuye considerablemente cuando se utiliza leche pasteuriza (23 667 UFC/g), lo cual indica que pasteurizar la leche no favorece el crecimiento del microrganismo. También se observa que después de 8 días de maduración el crecimiento disminuye y se nivela hasta los 24 días en ambos tratamientos. . En cuanto a Coliformes totales y Hongos; se mantiene su crecimiento constante, debido al aumento en la concentración de sal conforme transcurre el tiempo de almacenamiento. En relación a Coliformes fecales y Salmonella no fueron detectados. Debido posiblemente a las bajas temperaturas de maduración (6 + 2°C). 346 | P á g i n a En relación a las levaduras en ambos procesos se observa que en el transcurso de almacenamiento su crecimiento aumenta. Posiblemente resistentes a pH ácidos y a concentraciones salinas. CONCLUSIONES De acuerdo con los resultados obtenidos, se cumplieron con los objetivos planteados en este trabajo de investigación, ya que evaluó el comportamiento de la flora microbiana durante el proceso de maduración del queso de poro, elaborado con leche cruda y con leche pasteurizada, se determinó la calidad microbiológica del queso y se compararon los resultados antes y después de la pasteurización. Se encontraron diferencias en el crecimiento de Staphylococcus aureus, ya que la pasteurización de la materia prima, disminuyó el crecimiento de este microorganismo en el “queso de poro”, pero también, su crecimiento se estabilizó para ambos procesos en los 24 días de maduración (crecimiento de 100 UFC/g, que es lo que marca la norma). Sin embargo, el crecimiento registrado alto (en ambos procesos), puede ser debido a que el proceso de pasteurización de la materia prima fue deficiente. No se detectó presencia de Coliformes, en ninguna de las muestras de los dos tratamientos (con leche cruda y leche pasteurizada), siendo los límites máximos para Coliformes totales máx. 50 NMP (NOM-121SSA1-1994). Tampoco se identificó Salmonella en 25 g.; en ninguno de los dos procesos. En el caso de las Levaduras, que crecieron muy por arriba de lo que marca la norma, las diferencias se observaron al inicio del proceso (cero día de almacenamiento), conforme transcurre el tiempo de maduración, el crecimiento es casi paralelo, para ambos procesos. La pasteurización de la leche, es un factor determinante, para disminuir o eliminar el crecimiento bacteriano en productos lácteos, como se indican en los resultados que se indican en la tabla 1. El “queso de poro”, marca “El Tigre”, está libre de heces fecales, ya que se indican en los resultados enunciados en la tabla 1. RECOMENDACIONES El tiempo de almacenamiento (maduración) es de 24 días, para consumir el “queso de poro”, en relación al Staphylococcus aureus, que fue de 100 UFC/g (dentro de la normatividad); sin importar que la leche con que se elabora el queso, sea pasteurizada o cruda. Con respecto a las Levaduras, este queso se debe de consumir cuando sale del proceso (cero días de almacenamiento) y que sea elaborado con leche pasteurizada, ya que bajo estas condiciones, el crecimiento es en promedio de 77 UFC/g; que está dentro de la normatividad (100 UFC/g). Se recomiendan estudios posteriores para analizar qué tipo de levaduras son, y analizar el comportamiento de crecimiento en relación a los factores que prevalecen en el queso de poro y las consecuencias en el consumo. 347 | P á g i n a REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS • Administración de Drogas y Alimentos, 2005 (14 de Marzo). La FDA hace pública una advertencia de salud sobre ciertos quesos blandos elaborados con leche sin pasteurizar. Artículo con clave 888-INFO-FDA. Recuperado el 14 de marzo de 2006, de http:://www.fda.gov/oc/spanish. • Arroyo, F., 2005. Caracterización de cepas de Escherichia coli aislada en aguas y alimentos en el Estado de Tabasco por medio de la prueba de reacción en cadena de la polimerasa. Tesis de Licenciatura en Ingeniería Bioquímica. Instituto Tecnológico de Villahermosa. México. • NOM-109-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Procedimiento para toma, manejo y transporte de muestras de alimentos para su análisis. • NOM-110-SSA1-1994, Bienes y Servicios. Preparación y Dilución de Muestras de Alimentos para su análisis microbiológico. • NOM-111-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Método para la determinación de Mohos y Levaduras en alimentos. • NOM-112-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Determinación de bacterias Coliformes. Técnica del NMP. • NOM-114-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Método para la determinación de Salmonella en alimentos. • NOM-115-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Método para la determinación de Staphylococcus aureus. • NOM-121-SSA1-1994. Bienes y Servicios. Quesos: Frescos, madurados y procesados. • Priegue A; Lobato V. 1998. Evaluación microbiológica de masas para elaborar queso mozzarella. Artículo científico. Ministro de Asuntos Agrarios. 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[email protected] posgrado (Maestría). 348 | P á g i n a “ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE LOS PARÁMETROS FÍSICO-QUÍMICO, MICROBIOLÓGICO Y SENSORIAL DEL QUESO DE PORO ELABORADO EN EL MUNICIPIO DE BALANCÁN” La maduración del queso de poro elaborado en la región de los ríos (Balancán, Tabasco), tiene características propias debido al proceso de elaboración típico de esa región, y que durante su maduración va adquiriendo características físico-químicas, que favorecen sus características sensoriales (olor, color, y sabor), hasta obtener un punto óptimo de maduración que lo hace agradable al consumidor. El objetivo de este proyecto, es conocer el comportamiento de los parámetros Físico-químicos y sensoriales del “Queso de Poro” durante el proceso de maduración, elaborado con leche cruda y con leche pasteurizada; mediante las valoraciones correspondientes, que permitan evaluar las diferencias entre ambos procesos. Las muestras de ambos tipos de queso (con leche cruda y pasteurizada) fueron almacenadas a 5°C y se realizaron análisis fisicoquímicos: pH, Acidez, contenido de Humedad, cenizas y sólidos totales. Análisis sensoriales como apariencia, sensación al tacto, aroma, sabor, sensación final. A los resultados, se le aplicó una estadística descriptiva y ANOVA; reportando en los análisis fisicoquímicos presentan diferencias significativas en algunos parámetros que se determinaron entre el queso elaborado con leche cruda y leche pasteurizada, lo cual es debido, a las condiciones los proceso, moldes de madera y la aplicación de suero del día anterior, para cuajar la leche, en lugar de cuajo o cepas. En los análisis sensoriales solo al inicio del almacenamiento se tienen diferencias significativas de estos parámetros, de los quesos elaborados con leche cruda y leche pasteurizada. A medida que aumenta el tiempo de almacenamiento las características sensoriales tienden a ser iguales en ambos quesos. Palabras claves: Queso de poro, maduración, análisis fisicoquímicos. 349 | P á g i n a DETERMINACION DE CAPSAICINA EN CHILE MIRASOL MEDIANTE CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCION Y ESPECTOMETRIA DE MASAS Palabras clave: Capsicum annuum, capsaicina, oleoresina, Cromatografía Líquida de Alta Resolución y Espectrometría de Masas. M.J. Herrera Muñoz a, V. Concha Herrera b y J. Carranza Téllez b. Universidad Autónoma de Zacatecas, Programa de Químico en Alimentos. Campus Siglo XXI Carretera Zacatecas-Guadalajara Km 6, Ejido la Escondida. C.P. 98000 Zacatecas, México. [email protected] Licenciatura Objetivo General. Determinar el contenido de Capsaicina en Chile Mirasol mediante Cromatografía Líquida de Alta Resolución y Espectrometría de Masas. Objetivos Específicos. Diseñar una técnica para la extracción de capsaicina a partir de Chile Mirasol. Determinar el contenido de oleorresina y su purificación. Optimizar la separación cromatográfica de Capsaicina. Resumen. En México el chile (Capsicum annuum) posee una importancia sobresaliente desde el punto de vista cultural y es base de la alimentación de diversas culturas. Capsicum annuum presenta la mayor diversidad de frutos de género en forma, color y tamaño. Son fuente de compuestos de interés como los capsaicinoides, componentes activos responsables de la pungencia, además son fuente industrial de carotenoides que se emplean como colorantes. En este trabajo se ha empleado en experimentación la variedad de chile mirasol o guajillo cultivado en la entidad zacatecana. Existen dos métodos para expresar la pungencia de los Capsicum: La prueba oral usando como medida la Escala de Scoville y la prueba de Cromatografía Líquida de Alta Resolución. 350 | P á g i n a El coeficiente de partición octanol-agua es de 7.9 lo cual nos indica la hidrofobicidad de éste compuesto, se plantea la extracción de capsaicina mediante la trituración y maceración de una muestra de chile con hexano, se purifica y se caracteriza mediante el tiempo de retención (tR) obtenido a partir de la capsaicina pura y la extraída. El tR obtenido fue de 10.801 y 10. 756 respectivamente. Se realiza la separación cromatográfica de la Capsaicina haciendo uso de fases móviles acuo-orgánicas (ACN:H2O 50:50 vol.) y detección espectrofotométrica a una longitud de onda de 280 nm. Metodología. La metodología probada en esta investigación se realizó en base a la revisión documental sugerida por otros investigadores adecuada a nuestras condiciones. A partir de los resultados puede aplicarse esta metodología a otras variedades del fruto haciendo énfasis que la cantidad de oleorresina puede variar en función del fruto a analizar y de su origen. La cantidad obtenida de capsaicina a partir de 5 g de muestra se obtuvo un rendimiento del 3.58 % aproximadamente. Se prepararon disoluciones acuosas de concentración en el rango lineal del orden de 1-50 ppm a partir de una disolución madre del patrón de Capsaicina (Sigma St. Louis, EE.UU.), para la realización del calibrado. Las separaciones cromatográficas se llevaron a cabo en un sistema Waters, una bomba binaria 1525 y un detector Dual 2487, conectado a un registrador HP 3395. Se utilizó una columna AgelaTechnologies Dura Shell C18, con un tamaño de partícula de 5 μm de longitud 250 × 4.6 mm, previamente a la columna analítica se colocó una precolumna protectora Phenomenex ODS 4 × 3 mm. Espectrofotómetro de Masas: Marca Jeol, modelo. The MStation JMS-700. Especificaciones para el espectro de impacto. Modo de ionización. Impacto electrónico, resolución de masas: 1000, energía de ionización. 70 eV, corriente de ionización: 100 µA, temperatura de la fuente 250°C. 351 | P á g i n a Resultados. La tabla 1 muestra las cantidades de muestra de chile mirasol deshidrata sometida a análisis y las cantidades de oleorresina obtenidas. Tabla 1. Determinación de Oleorresina g de muestra g de oleorresina 5.307400000 0.149500000 5.304800000 0.240800000 5.343800000 0.198400000 5.318666667 0.196233333 Figura1. Tiempo de Retención de Capsaicina Patrón. Figura 2. Tiempo de Retención de Capsaicina Natural. Tabla 2. Determinación de Capsaicina Área ppm mg Cap/g de Oleorresina mg de Cap/ g de chile 206848 1.488564623 0.379284344 0.013993776 352 | P á g i n a Tabla 3. Análisis Estadístico x Prom 0.1962 S 0.0372 CV 18.96 DER 189.60 Lim. confianza 0.1960 +/- 0.058 Figura 3. Espectro de Masas de Capsaicina Conclusiones. El proceso de extracción, obtención y purificación de oleorresina es importante, la composición de la fase móvil resultó ideal en la separación cromatográfica con tiempos de retención cortos. La purificación de la oleorresina permitió el análisis mediante Espectrometría de masas. El origen de la muestra en estudio es de Calera de Víctor Rosales, Zacatecas. Considero que puede aplicarse a otras variedades del fruto, tomando en cuenta que la cantidad de oleorresina puede variar dependiendo del fruto a analizar y su origen. Referencias. • León Jorge, Botánica de los cultivos tropicales, Editorial Agroamericana, Tercera Edición, p. 331-336. 353 | P á g i n a • R. Mendoza, Sistemática e Historia del Ají CapsicumTourn, Facultad de Ciencias, Departamento académico de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional de Piura. • Luis Gustavo Lucas Santoyo, Fertilización fosfatada en chile Guajillo (Capsicum annuum L.) y su interacción con hongos MicorrízicosArbusculares. • Salvador Montes Hernández, Elena Heredia García y J. Alfonso Aguirre Gómez, FENOLOGÍA DEL CULTIVO DEL CHILE (Capsicum annuum L.) • Castañeda G. Castañón-Nájera y N. Mayerk-Pérez, Diversidad morfológica de Chile (Capsicum annuum L) Escuela Nacional de ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional. • O.Spicer, J.R. Almirall, Extraction of capsaicins is aerosol defense sprays from fabrics. Talanta • Mary Ann Fox, James K. Whitrsell, Organic Chemical Ed. Pearson Education 2ª edition, pag. 550. • Batchelor, J.D. and Jones B.T. Determination of Scoville Heat Value afor Heat Value afor Hot Sauces and Chilies: An HPLC Experiment. 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CAFFERATA, Efecto del pH sobre la Reacción de Descomposición Térmica de Vainillilamida del Ácido Pelargonico (N-[4-hidroxi-3metoxifenil-metil]-nonenamida) en solución hidroalcohólica. • Gerardo Fernández Barbero Tesis Doctoral Extracción, Análisis, Estabilidad y Síntesis de Capsaicinoides Universidad de Cádiz Facultad de Ciencias Departamento de Química Analítica. • Tesis de texto completo IPN SOLUBILIDADES DE LA CAPSAICINA Y PIGMENTOS pág. 19-24. • Instituto tecnológico de estudios superiores de Monterrey (ITESM). 1995 identificación de oportunidades y diseño de estrategias para el sector agropecuario del estado de Zacatecas; hortalizas (Chile seco, ajo y cebolla). Zacatecas, Zac., México p. 15-19. 354 | P á g i n a AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE THERMOPHILUS DEL SUERO DE LECHE PARA LA SUSTITUCIÓN DE CULTIVOS LÁCTICOS EN LA ELABORACIÓN DE QUESO TIPO CHIHUAHUA. Palabras clave: Suero fermento, cultivos lácticos liofilizados, Lactobacillus termophillus, Queso Chihuahua. Núñez Flores G. de Ja, Cortez Muñoz J.Mb., Jiménez Rodríguez J. J, Prieto Contreras L. F.c, Concha Herrera V*. Universidad Autónoma de Zacatecas, Programa de Químico en Alimentos. Campus Siglo XXI. Carretera Zacatecas Guadalajara Km 6, Ejido la Escondida. C.P. 98000, Zacatecas, México. E-mail: [email protected] Licenciatura Objetivo General: Sustitución de cultivos lácticos liofilizados (L.cremoris y S. lactis) por cultivos de Lactobacillus Thermophilus obtenidos del suero fermento en la elaboración de queso tipo Chihuahua. Objetivos específicos: *Desarrollar una técnica que permita el aislamiento, purificación y caracterización de Termophilus (Lactobacillus y Streptococcus termophilus) procedentes de la fermentación de la leche. *Evaluar la calidad del queso mediante pruebas microbiológicas y sensoriales. *Contrastar los resultados de la evaluación de los quesos elaborados por cultivos lácticos y suero fermento. Introducción Del total de la leche utilizada en la industria quesera aproximadamente el 90% es eliminada como lactosuero conteniendo cerca de 55% del total de ingredientes de la leche como lactosa, proteínas solubles, lípidos y sales minerales.1 355 | P á g i n a Aún el valor nutritivo es alto por ello se han realizado considerables esfuerzos dirigidos a su aprovechamiento, tanto a nivel de investigación tecnológica como a políticas gubernamentales que alienten o presionen a los industriales a hacer uso de este subproducto evitando que sea vertido al seno de cursos acuíferos. Donde resulta altamente perjudicial en la disminución en el rendimiento de cultivos agrícolas y cuando se desecha en el agua, reduce la vida acuática al agotar el oxigeno disuelto.1 Cada 1,000 litros genera cerca de 35 Kg de Demanda Biológica de oxígeno (DBO) y cerca de 68 Kg de Demanda Química de Oxígeno (DQO), comparable a la fuerza contaminante de las aguas negras.2 El género Lactobacillus es de gran importancia en la fabricación de productos lácteos fermentados así como la fabricación de quesos de pasta dura y semidura, quienes contribuyen a la maduración de quesos mediante su actividad proteolítica y en parte lipolítica. Estas bacterias suelen utilizarse como cultivos iniciadores y constituyen un vasto conjunto de microorganismos benignos, dotados de propiedades similares, que fabrican ácido láctico como producto final del proceso de fermentación. Las bacterias lácticas homofermentativas producen lactato o ácido láctico en un 70-90%, mientras que las bacterias lácticas heterofermentativas producen al menos un 50% de ácido láctico más otros compuestos tales como el ácido acético (CH3COOH), Dióxido de carbono (CO2) y etanol (CH3CH2OH); convirtiéndose solo la mitad de cada molécula de glucosa en lactato. Ambas fermentaciones son las responsables del agriado de la leche y de otros alimentos en tanto se les mantenga en condiciones anaerobias. Estos procesos proporcionan también aromas interesantes (especialmente desarrollados en las fermentaciones secundarias del ác. láctico y de los aminoácidos en los quesos.3, 7 En ésta investigación se pretende diseñar una técnica que permita elaborar queso tipo Chihuahua a partir de la sustitución de cultivos lácticos liofilizados (L. cremoris y S. lactis) por cultivos de Lactobacillus Thermophilus obtenidos del suero fermento. Metodología. 1. Se toman tres muestras de suero de leche sin pasteurizar, se fermentan a 45°C hasta alcanzar una acidez de 130 a 160°Dornic. 2. Se pasteurizan tres muestras de suero de leche (63°C/30 min.) se inoculan con suero fermento procedente del paso 1 en una concentración 1% vol. 356 | P á g i n a El procedimiento anterior se repite dos veces más inoculando con suero fermento obtenido de los pasos anteriores. Tercera siembra Primera siembra 1 4 4A 4B1 2 5 4B 5A1 3 6 5A 5A2 Lactosuero no acidificado y sin cultivos. Segunda siembra Prueba como cultivo iniciador en la elaboración de queso Chihuahua. Figura 1. Procedimiento de sembrado Nota: Los números indican las muestras de lactosuero, las flechas como se dividieron durante las siembras, las líneas negras el número de siembra, y aquellas muestras que no tienen continuación fueron utilizadas para determinar la acidez del ácido láctico. La acidez se determina de acuerdo a NOM 091SSA1-1994. La elaboración del queso tipo Chihuahua utilizando suero fermento se realiza a través de la forma convencional, apegándose a la NMX-F-209-1985. La elaboración del queso tipo Chihuahua se realiza de acuerdo a la forma convencional descrita de acuerdo al siguiente esquema. 357 | P á g i n a Leche cruda Recepción Coagulación 36 °C Corte (gel) 40 °C Filtración Pasteurización 60 °C/ 20 min Estandarización Preemaduración Cheddarizado Enfriamiento 40-45 °C Corte y Salado Prensado Maduración Figura 2. Diagrama de Flujo de Queso tipo Chihuahua Resultados Se estudiaron tres siembras por triplicado de lactosuero, en cada una de ellas se determinó la evolución de Ácido Láctico y pH. Se realizó el aislamiento y cultivo de las cepas provenientes del lactosuero y se sometieron a pruebas bioquímicas clásicas y morfológicas8,9 para determinar su género, tomando en cuenta solo los géneros Lactococcus, Lactobacillus y Leuconostoc que son los más empleados en la industria del queso como cultivos iniciadores. Conclusiones Los resultados sugieren que los microorganismos presentes son mezcla de Lactobacillus y Lactococcus, faltando aun las pruebas confirmativas, en un futuro se planea realizar la identificación molecular de las cepas. Se comprobó la ausencia de microorganismos patógenos. El aislamiento y desarrollo de las bacterias ácido lácticas de la forma descrita en sustitución a los cultivos liofilizados produjeron la acidez, aroma y elasticidad requerida en el queso elaborado. Respecto a la comparación entre los dos quesos es notoria la acidez en el queso elaborado a través de los cultivos comerciales. Sin embargo el tiempo 358 | P á g i n a de maduración es más tardío, es decir los microorganismos procedentes del suero fermento ralentizan la maduración (1 día) en contraste con los liofilizados, lo cual es un inconveniente en el manejo de grandes volúmenes de leche. Bibliografía 1. Garcia, Garibay. Lopez - Munguía. Quintero, Ramírez. Biotecnología Alimentaria. Editorial Limusa.pág.197. 2. www.science.oas.org/OEA_GTZ/LIBROS/QUESO/cap_4. 2 de Julio 2013 3. Ellner Richard, Microbiología de la leche y de los productos lácteos (preguntas y respuestas), Ed. Diaz de Santos S.A, Madrid España (2000), Capitulo 1, Pág. 12, 14-18. 4. Santos Moreno Armando, LECHE Y SUS DERIVADOS, Ed. Trillas, Segunda edición México (2007), Capitulo 3, Pág. 114. 5. NOM 091SSA1-1994. 6. NMX-F-209-1985. 7. Ma. Refugio Torres Vitela, Alejandro Castillo Ayala, MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS, Universidad de Guadalajara, Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías, Departamento de Farmacobiología, Guadalajara, Jalisco, México (2006), 2 Pág. 70-71. 8. Bouton, Y., Grappin, R. Preliminari Characterization of microflora on compté cheese. J. Appl. Microbiol. 85:123-31. 1998. 9. Baruzzi, F.; Matarane, A.; Morea, M.; Coccon-Celli P. S. Microbial Community Dynamics Durin the ScarmosaAltamurana Cheese natural fermentation. J. Dariry Sci. 85: 1390-1397. 2002. 359 | P á g i n a "CONTENIDO FENÓLICO DE LA CHÍA (SALVIA HISPÁNICA L.)". a P.L.N. Hernández -Flores, T. J.; b M. en C. Contreras- Martínez, C. S; c Dr. en C. Martínez- Navarrete Nuria; d Dr. en C. Camacho Vidal M.M.; e Dr. en C. CarranzaConcha, J*. a, b y e : Universidad Autónoma de Zacatecas, Programa de Nutrición. Campus Siglo XXI Carretera Zacatecas-Guadalajara Km 6, Ejido la Escondida. C.P. 98000 Zacatecas, México. c, d : Universidad Politécnica de Valencia. Departamento de Tecnología de Alimentos. Camino de Vera s/n C.P.46023 Valencia, España. RESUMEN En los últimos años la demanda de los consumidores por alimentos funcionales ha ido en aumento. Gracias a sus características nutricionales y funcionales, la Chía (Salvia Hipánica L.) ha atraído la atención de la industria de alimentos. Sin embargo ésta ha sido objeto de gran interés en la investigación hasta hace pocos años. Se presume que es originaria del sur de México, no obstante, en la actualidad también se cultiva en Argentina, Bolivia, Ecuador, Guatemala y México. Es rica en algunos minerales como el calcio, manganeso, y fósforo, muy buena fuente de fibra dietética y tiene un buen aporte de proteína, es una fuente de ácidos grasos omega 3 (60%). En contraparte es baja en sodio y colesterol. Se le atribuyen un gran poder antioxidante y se considera en alimento ideal para personas que busquen perder de peso. Por todo lo anterior, el objetivo del presente trabajo fue determinar el contenido en compuestos fenólicos totales mediante el método de Folin-Ciocalteau, comparando el método de extracción de dichos compuestos mediante el uso de metanol o bien de hexano. La Chía fue homogeneizada en los solventes propuestos y posteriormente centrifugada, la medición se llevó a cabo a 765nm. Los resultados mostraron un contenido fenólico total de 43.7mg/100g BS de Chía en las muestras extraídas con Metanol y 12.47mg/100g BS de Chía en las muestras con Hexano. Por lo tanto se concluye que el solvente que mejor rendimiento brinda en la extracción de los compuestos fenólicos en la Chía es el Metanol (43,7mg/100g BS) . Palabras Clave: Chía, compuestos fenólicos, método de extracción. INTRODUCCIÓN Originaria del sur México y norte de Guatemala (Capitani et al, 2012), la Chía (Salvia Hispánica L.) fue un importante producto en las antiguas culturas mesoamericanas, siendo cultivada en la misma región desde hace miles de años (Campos et al, 2013) . Es una planta herbácea anual, que pertenece a la familia de las Lamiáceas (Lamiaceae), produce pequeñas semillas blanquinegras con forma ovoide (Ayerza and Coates, 2005). Sin embargo también pueden encontrarse semillas completamente blancas (Cahill and Provance, 2002) teniendo diferencias en cuanto al tamaño y en el contenido en proteína y ácidos grasos (Ayerza, 1997; Ixtaina et al., 2006). 360 | P á g i n a Debido a que es un producto natural, su composición nutrimental depende de las condiciones ambientales en que ha sido cultivada(Ayerza, 1995; Coates and Ayerza, 1998). Su cultivo generalmente se realiza en climas tropicales o subtropicales así como en invernaderos, debido a que es sensible al frío (Huxley, 1992) . No obstante ni su cultivo ni su comercialización han alcanzado la de otros productos a los que se les atribuyen tantas propiedades benéficas. Actualmente se cultiva y comercia en México, Argentina, Bolivia, Ecuador y Guatemala (Ixtaina et al, 2011). En Argentina su cultivo es considerada un factor importante para la economía del noroeste del país (Coates y Ayerza, 1996). Su consumo brinda muchos beneficios a la salud, ya que es una gran fuente de péptidos biológicamente activos (Campos et al, 2013), de ácidos grasos omega 3 (ácido α-linolénico) (Palma et al., 1947; Ayerza, 1995) los cuales son importantes durante el desarrollo fetal así como durante la infancia (Bowen and Clandinin, 2005), así como para la prevención de enfermedades cardiovasculares por sus propiedades antiinflamatorias y antitromboticas (Galli and Marangoni, 2006). Es rica en fibra, proteína (superior a la de otros cultivos como el maíz, arroz, avena, cebada y amarabto) (Ayerza y Coates, 2005). Además contiene algunos compuestos antioxidantes como la miricetina, quercetina, kaempferol y ácido cafeíco (Castro-Martinez et al., 1986; Taga et al., 1984). Actualmente la Chía está siendo objeto de investigaciones en campos como la medicina, la nutrición y la ciencia de alimentos debido al gran interés que despiertan los alimentos funcionales y antioxidantes por la prevención que ofrecen frente a algunas enfermedades. Los compuestos fenólicos, son una serie de compuestos químicos que contienen un grupo hidroxilo (-OH) unido directamente a un anillo bencénico. Los polifenoles tiene efectos favorables en la salud humana como la inhibición de la oxidación de lipoproteínas de baja densidad, así disminuyendo el riesgo de padecer enfermedades cardiacas, poseen actividad antiinflamatoria y propiedades anticancerígenas (Bonilla et al., 1999). Por todo lo anterior el objetivo del presente trabajo fue determinar el contenido fenólico en la semilla de Chía. MATERIALES Y MÉTODOS. Como materia prima se utilizó semilla de Chía, la cual fue adquirida en un súper mercado de la ciudad de Zacatecas, México. Para la determinación de los compuestos fenólicos se empleó un patrón de ácido gálico (Sigma Aldrich) así como el reactivo Folin-Ciocalteau (Sigma Aldrich). Humedad (%Xw) Como parte del estudio, a la semilla de chía se le determinó el contenido en humedad según el método de la 14.003, 1990 AOAC. Extracción Para la extracción de los compuestos fenólicos, se utilizó hexano o metanol (grado HPLC) debido a que los compuestos presentan diferente coeficiente de partición octanol-agua. Se pesaron 30g de muestra, enseguida fueron homogeneizados con metanol o con hexano en un ultraturrax durante 15 minutos. Posteriormente la mezcla se centrifugó a 4°C durante 10 minutos y 5000 rpm. 361 | P á g i n a El sobrenadante fue refrigerado durante 24 horas. Durante todo el proceso se trabajó con la mínima presencia de luz con la finalidad de evitar la degradación de los compuestos fenólicos. Fenoles Totales La determinación de los fenoles totales se llevó a cabo mediante el método de B.B Li et al., (2006), que modifica el método de Folin- Ciocalteau, para lo cual se tomaron 250µl de extracto y se llevaron a un aforado de 25ml. Después se agregaron 15ml de H2O bidestilada, posteriormente se añadieron 1,25ml del reactivo Folin-Ciocalteau, se agitó la muestra y se dejó reposar durante 58minutos. A continuación se agregaron 3,75ml de carbonato de sodio al 7,5% y finalmente se enrasó con agua bidestilada dejándose reposar durante 2 horas. La medición se llevó a cabo a 765nm en un espectrofotómetro Genesys 10S UV-Vis (Thermo scientific). Las determinaciones se realizaron por triplicado. Los resultados fueron expresados en mg de ácido gálico/100g de muestra seca. Paralelamente a la medición de las muestras, se conformó una recta de calibrado a partir de un patrón de ácido gálico de 500ppm, siendo analizadas las diferentes concentraciones de la misma manera que las muestras de Chía. RESULTADOS Y ANÁLISIS Para los análisis de humedad, los resultados mostraron un porcentaje en base seca de 3,9 (0,2). Por otra parte, en cuanto al contenido fenólico total, se elaboró una recta de calibrado de 100 a 500 ppm de ácido gálico. 0.4 y = 0.0008x - 0.0429 R² = 0.9896 0.35 Absorbancia 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 0 100 200 300 400 500 600 ppm de ácido gálico . Figura 1. Recta de calibrado de ácido gálico. En cuanto al contenido fenólico total se observó un mayor rendimiento en estos compuestos cuando se utilizó metanol para la extracción, en comparación con las muestras en las que se empleó hexano (Fig. 2). Esto debido a que el metanol tiene una polaridad mayor, y la mayoría de los fenoles presentes en la Chía tienen un coeficiente de partición octanol-agua bajo. 362 | P á g i n a mg de AG/100g de mueestra BS 60 50 40 30 20 10 0 Chía M1 Chía M2 Chía M3 Chía H1 Chía H2 Chía H3 Figura 2. Valores medios y desviación estándar en fenoles totales de las muestras de Chía extraídas con metanol y hexano expresados en mg de ácido gálico/100g BS. Con la finalidad de brindar una información más concreta al gremio de investigadores, la Tabla 1 muestra los valores obtenidos para cada una de las muestras de Chía. Tabla 1. Valores medios y desviación estándar de las muestras de chía extraídas con los solventes propuestos. mg de ácido gálico/100g de Chía Muestras de Chía Hexano Metanol A 13,3 (0,6) 41,5 (5,8) B 12,05 (0,43) 44 (0,9) C 12,1 (0,4) 45,8 (6,9) CONCLUSIONES La Chía reúne muchas bondades en cuanto su composición nutrimental, como así lo demuestran múltiples estudios. En el presente documento se encontró que la Chía es una muy buena alternativa como fuente de compuestos fenólicos y posiblemente muchos de ellos con un carácter antioxidante, no envidiándole nada a algunas frutas ricas en compuestos bioactivos. Finalmente se encontró un mayor rendimiento en las muestras extraídas con metanol, presumiblemente debido a su polaridad. BIBLIOGRAFÍA Ayerza Jr., R., Coates, W., 1997. Selection and development of chia cultivars: initial results. In: Proceedings of the Annual Meeting of the Association for the Advancement of Industrial Crops, Saltillo, México. Ayerza R. 1995. Oil content and fatty acid composition of chía (Salvia hispánica) from five Northwestern locations in Argentina. Journal of the American Oil Chemist´s Society. 72 (9): 971-1090. Ayerza, R. and W. Coates. 1996. New industrial crops: Northwestern Argentina Regional Project. p. 45-51. In: J. Janick (ed.), Progress in new crops. 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Addy Leticia1, Kent Sulú Martha Patricia1, Alderete, Saldaña Sara2 1 Docentes de la Dependencia de Educación Superior, Ciencias de la Salud en la Universidad Autónoma del Carmen.2 Estudiante doctorado en Educación .Universidad Autónoma del Carmen. : MC Addy Leticia Zarza García [email protected] Nivel Licenciatura Objetivo: Percepción de los estudiantes del programa de Nutrición sobre la influencia de la estrategia pedagógica “EL PROYECTO INVESTIGATIVO EN EL APRENDIZAJE DE LA CIENCIA DE LOS ALIMENTOS, en su formación profesional, y analizar las posibles efectos de aplicar esta pedagogía en los cursos teórico-prácticos del programa educativo de nutrición Resumen. El aprendizaje sólido de los conceptos científicos debe ir acompañado del aprendizaje metodológico, de formas de producir y recibir conocimientos que caracterizan el trabajo científico. Este desarrollo simultáneo, conceptualmetodológico es favorecedor en la medida en que el proceso de enseñanzaaprendizaje se desarrolle en un contexto de (re)construcción de conocimientos, con oportunidades reiteradas y sistemáticas para poner en práctica procesos de justificación, típicos de la investigación científica y la solución de problemas, que asistan el escenario para que esa tarea tan exigente pueda llevarse a cabo. Becerra-Labra et al., (2007). En este estudio se presenta la percepción de los estudiantes del programa de Nutrición acerca del proyecto investigativo como estrategia didáctica en su formación profesional en el aprendizaje de la ciencia de los alimentos. Metodología: Estudio prospectivo, cuasi experimental del Modelo Investigación Educativa, orientada hacia la práctica, con tres componentes: 1) Al comenzar el curso los estudiantes ejecutaron una investigación de campo de problema(s) relacionado(s) con el tema dentro del contexto de Ciudad del Carmen , a desarrollar a lo largo del semestre académico, presentaron resultados a través de discusión en un seminario, simposio,etc. 2) Aplicación de encuestas para verificar la percepción de los estudiantes sobre esta estrategia pedagógica.3) Análisis de los resultados acerca de la percepción y visión de los estudiantes de esta estrategia en su desarrollo profesional. Resultados y Conclusiones: El 100% de los estudiantes encuestados consideraron esta estrategia como apoyo para su aprendizaje y su desarrollo profesional, en general propusieron realizar como máximo dos proyectos por semestre. Proyecto investigativo, estrategia pedagógica, Ciencia de los alimentos Metodología. Diseño de Estudio: Estudio prospectivo, cuasi experimental del Modelo Investigación Educativa, orientada hacia la práctica. Universo de estudio: Durante el periodo comprendido entre el 8 de Enero de 2013 al 08 de Julio de 2013 se aplico la estrategia didáctica basada en proyectos investigativo a los 25 estudiantes del programa educativo de nutrición en la impartición de la materia de Ciencia de los alimentos. Instrumentos de Evaluación: fueron tres:1) Al comenzar el curso los estudiantes ejecutaron una investigación de campo de problema(s) relacionado(s) con el tema dentro del contexto de Ciudad del 365 | P á g i n a Carmen, a desarrollar a lo largo del semestre académico, presentaron resultados a través de discusión en un seminario, simposio, etc. 2) Aplicación de un cuestionario para verificar la percepción de los estudiantes sobre esta estrategia pedagógica. 3) Análisis de los resultados acerca de la percepción y visión de los estudiantes de esta estrategia en su desarrollo profesional. Resultados: El 100% de los estudiantes encuestados razonaron esta estrategia como apoyo para su aprendizaje y su desarrollo profesional, en general propusieron realizar como máximo dos proyectos por semestre. Análisis: La encuesta realizada para verificar la influencia del proyecto investigativo (en el aula) en el aprendizaje de los estudiantes de Ciencia de los alimentos presenta un panorama general de la visión y la percepción de los alumnos frente a esta estrategia pedagógica de aprendizaje. 100% de los estudiantes encuestados (25) consideraron que esta estrategia es un apoyo para su aprendizaje y es importante en su desarrollo profesional. Además, la mayoría de los estudiantes sugieren que es más apropiado realizar, como máximo, dos proyectos por semestre. Por otra parte, más del 80% de los encuestados aprendieron en forma apropiada a realizar una planeación previa a la experimentación en el laboratorio, a consultar la literatura disponible para la investigación, a aplicar los conocimientos adquiridos en clase, a interpretar y analizar los datos del laboratorio, a comunicar efectivamente los resultados obtenidos y a trabajar en grupo durante el proyecto. Cuando se preguntó sobre el grado de aprendizaje en la realización de una planeación, antes de efectuar la experimentación en el laboratorio (pregunta No.1), tan solo un 7% de los estudiantes respondieron que aprendieron, mientras que un 43 y un 50% contestaron que aprendieron bien y aprendieron muy bien, respectivamente (gráfica 1). Existen dos componentes esenciales de los proyectos; el primero se refiere a la formulación de una pregunta o problema que sirva para organizar y direccionar las actividades, el segundo consiste en que dichas actividades resultan en una serie de productos o procesos, que culminan en un producto/proceso final que dirigen las preguntas, de acuerdo a Blumenfeld et al., (1991). En la pregunta No.2, sobre el aprendizaje, al consultar la literatura disponible para entender la investigación, se observó una respuesta muy positiva con respecto a esta actividad, con un 60% para aprendí muy bien, un 30% para aprendí bien y tan solo un 10% para aprendí (1). La aplicación de los conocimientos vistos en clase (pregunta No.3) evidenció también una respuesta positiva, en la cual se tuvo un 47% para aprendí muy bien y un 50% para aprendí bien, y tan solo un 3% para aprendí (gráfica No.3). Este tipo de aprendizaje se centra en el estudiante, y el tutor actúa como orientador o guía. El proyecto investigativo sitúa a los estudiantes en ambientes reales y contextualizados, y puede servir para construir puentes entre los fenómenos en la clase y las experiencias de la vida real; las preguntas y respuestas en sus tareas diarias dan valor a una indagación sistemática. Además, el proyecto investigativo promueve los lazos entre diferentes disciplinas o temas de una materia, y se adapta a diferentes tipos de estudiantes y situaciones de aprendizaje Blumenfeld et al., (1991). En la fig. No.2 también se indica el grado de aprendizaje en la interpretación de los datos obtenidos durante la experimentación realizada en el proyecto (pregunta 4). Los porcentajes registrados para esta pregunta fueron: aprendí bien, 63%; aprendí muy bien, 27%, y aprendí, 10%. Los inconvenientes que se presentan durante el desarrollo del proyecto se utilizan como herramientas para adquirir el conocimiento y la habilidad para solucionar problemas. 366 | P á g i n a Lo esencial es que los estudiantes aprendan a analizar e interpretar datos experimentales, con el fin de solucionar problemas representativos, siendo este el corazón del método Dochy et al., (2003). En la grafica No.3 se presentan los resultados para el aprendizaje sobre la escritura de un documento académico con cierta claridad y coherencia (pregunta No.5). El 60% de los encuestados consideraron que aprendieron bien a realizar esta actividad; el 37%, que aprendieron muy bien, y el 3% afirmaron que solo aprendieron. Por otro lado, en la pregunta No.10, referente al grado de aprendizaje al efectuar la exposición de los resultados obtenidos en el proyecto en forma clara y coherente, el 50% de los estudiantes estimaron que aprendieron muy bien, el 37% señalaron que aprendieron bien y el 13% manifestaron que aprendieron (grafica No.3). La aplicación del Proyecto Investigativo en una asignatura es una herramienta para mejorar la comunicación entre el grupo del proyecto y el resto del grupo de clase o los pares evaluadores, tal y como lo indica Murphy & Gazi, (2001); el documento escrito y la exposición oral del proyecto son esenciales para comprobar el cumplimiento de estas competencias al final del curso. Esto se evidenció en los informes que presentaban a medida que avanzaban en el proyecto, los cuales demostraban síntesis de la información y habilidades en el análisis de los resultados. Los resultados se pueden observar en las siguientes gráficas: 367 | P á g i n a Conclusiones y Recomendaciones.: La encuesta aplicada arrojo como resultado que el 100% de los estudiantes encuestados consideraron importante a esta estrategia como una herramienta de apoyo para su aprendizaje y para su desarrollo profesional, en general propusieron realizar como máximo dos proyectos por semestre. Por otra parte, más del 80% de los encuestados aprendieron en forma apropiada a realizar una planeación previa a la experimentación en el laboratorio, a consultar la literatura disponible para la investigación, a aplicar los conocimientos adquiridos en clase, a interpretar y analizar los datos del laboratorio, a comunicar efectivamente los resultados obtenidos y a trabajar en grupo durante el proyecto. En conclusión podemos afirmar que en la actualidad la misión de las universidades no es enseñar conceptos en este mundo globalizado, donde la tecnología, internet, televisión juegan un papel importante, la información está accesible a los estudiantes, por lo que es trascendental actualizar la práctica docente introduciendo estrategias didácticas utilizando el método científico que promuevan las habilidades y capacidades en competencia para atender problemas reales del contexto donde se realiza el proceso educativo. 368 | P á g i n a REFERENCIAS ANUIES (2000) La Educación superior en el siglo XXI. Líneas estratégicas de Desarrollo, México. http://www.anuies.mx. Abramson, S., Robinson, R., & Ankenman, K. (1995). Project work with diverse students: Adapting curriculum based on the Reggio Emilia approach. Childhood Education, 71(4), 197–202. AMMFEN (2002) Misión y Visión de la AMMFEN. Boletín de la asociación mexicana de miembros de facultades y escuelas de nutrición A.C. pp-6-7. 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Al igual que el quitosano, los Oligoquitosanos (COS) son oligómeros de quitosano obtenidos mediante despolimerización enzimática y presentan estas actividades biológicas, destacando por su alta solubilidad en agua, lo que hace más viable su aplicación en biotecnología de alimentos. El estudio del uso de quitosano como aditivo alimentario, conservante o componente de materiales de envasado viene utilizándose desde hace tiempo, ya que no sólo retarda el crecimiento de microorganismos patógenos, sino que además puede mejorar la calidad y la vida útil del alimento (Kim y Rajapkse., 2005). Es conocido el amplio espectro bactericida del quitosano desde que Allan y Hardwiger lo propusieron en 1979, y desde entonces, debido a su potencial uso desde el punto de vista comercial, ha atraído la atención de diversas investigaciones. Por ello, el efecto antimicrobiano de este polímero está bien documentado frente a bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. Se han documentado intervalos de concentración mínima inhibitoria entre 100-10.000 mg.L-1 para bacterias Gram-negativas (Helander y col., 2001) y de 100-1250 mgL-1 frente a bacterias Gram-positivas (No y col., 2002; Vishu Kumar y col., 2004). Se propone como mecanismo principal de la actividad antimicrobiana del quitosano y los COS la interacción electrostática entre la estructura de policatión del quitosano y los componentes predominantemente aniónicos de la superficie del microorganismo (Kong y col., 2010). El posible efecto antimicrobiano que presenta el quitosano se va a ver afectado por factores químicos, físicos y biológicos, que incluyen la concentración de quitosano, el peso molecular promedio (Mw), grado de acetilación (DA), pH, temperatura, salinidad, la presencia de cationes divalentes, el solvente en el que se encuentre disuelto el quitosano, el medio de supensión, y la fase de crecimiento del microorganismo (No y col., 2002; Zheng y col., 2003; Lim y col., 2004). Debido a la diferente morfología de las bacterias Gram-negativas y Gram-positivas, el mecanismo de actuación antimicrobiana presentado por el polímero puede ser diferente. La actividad antimicrobiana del quitosano y los COS depende de la morfología de la superficie bacteriana. Estas superficies son estructuralmente complejas y químicamente heterogéneas, por lo que no se pueden considerar como simples superficies esféricas. Algunas bacterias presentan apéndices de movilidad como los pilis, fimbrias o flagelos, e incluso aquellas bacterias que no tienen estos apéndices, pueden proyectar distintos tipos de polímeros desde su superficie como: LPS, ácidos micólicos, ácidos lipoteoicos, polisacáridos capsulares y proteínas (Hancock, 1991). Estos polímeros están involucrados en interacciones con distintas superficies y pueden causar interacciones débiles de diferente naturaleza incluso desde largas distancias, como, por ejemplo, puentes de hidrogeno. La hidrofobicidad de la superficie es otro factor que juega un papel importante en las distintas interacciones que se producen, dando lugar a fenómenos de adhesión o floculación (Stranda y col., 2002). 370 | P á g i n a Son los grupos aniónicos presentes en la superficie bacteriana los responsables de establecer interacciones con el quitosano, o sus derivados. Algunas investigaciones han demostrado que, en el caso de bacterias Gram-positivas, existe una mayor carga electronegativa en la bacteria y una mayor absorción de quitosano, permitiendo un mayor efecto inhibitorio de este (Chung y col., 2004). A pesar de las diferencias estructurales entre bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, el efecto antimicrobiano producido por cualquier agente comienza con las interacciones con la superficie bacteriana, ya sea la pared celular o la membrana lípidica externa. Objetivos: - Obtener muestras microbianas de un producto cárnico elaborado, mediante siembras en placas Petrifilm. - Evaluar la actividad antimicrobiana del Quitosano y Oligoquitosanos en diferentes concentraciones sobre cepas obtenidas. Metodología: Obtención de Muestras Microbianas. Se utilizó una muestra de salami de cerdo cocido 100% carne, de la cual se extrajeron 10 g, se trituro y se licuo en 90 ml de buffer de fosfatos, de esta dilución se tomó 1 ml para preparar las diluciones consecutivas hasta llegar a la 10-3. De las diluciones 10-1 y 10-3 se tomó 1 ml para inocular las placas petrifilm correspondientes a E. coli y coliformes totales y Staph express. Por cada dilución fueron sembradas dos placas petrifilm y se incubaron durante 48 h. a 35ºC. Luego de transcurrido este tiempo se dispuso a realizar la selección de las placas para realizar la resiembra. Preparación de Muestras. Se seleccionaron colonias de las distintas placas de petrifilm ( E. coli y S. aureus) y se incubaron por 24 Hrs a 37° en caldos nutritivos LB y YEB por duplicado. Se seleccionaron los medios con mayor crecimiento para cada muestra y de cada uno se realizaron 3 diluciones, cada dilución se sembró en su medio correspondiente. De colonias aisladas de cada placa se tomo una azada e inoculo en caldo nutritivo estéril y crecidas durante 24 Hrs a 37°C y 150 rpm. Se tomaron 500μL de cada tubo y se inoculo en caldo nutritivo repitiendo el tiempo de incubación y condiciones. De cada caldo se tomaron 200 μL y se ajusto la absorbancia a .600. Se tomaron 100 μL de cada uno y se sembró por varilla acodada. Preparación de Soluciones de Quitosano y COS. El quitosano utilizado fue purificado de uno comercial (Sigma) con un grado de desacetilación (DD) del 78% y un peso molecular (Mw) de 107 kDa y los COS corresponden a una fracción de 10 a 30 kDa depolimerizados con Lisozima y con un DD del 78%, ambos fueron obtenidos y caracterizados en el laboratorio de la Dra. Angeles Heras Caballero del Instituto de Estudios Biofuncionales de la Universidad Complutense de Madrid, de acuerdo a los protocolos del grupo. Para nuestro estudio se preparo una solución de Quitosanos al 2% (p/v) en solución de acido acético 0,3 M ajustando el pH a 5.5 con NaOH al 10%. Los COS fueron disueltos en agua a una concentración de 10mg/mL. Evaluación de la actividad antimicrobiana: A las placas inoculadas se les colocaron discos con distintas concentraciones de Quitosano y COS, tomando como control negativo acido acético 0,3 M pH 5.5 y como control positivo 10 μg de Ampicilina y se incubaron a 37°C durante 24 Hrs. Se midieron los diámetros de inhibición y se comparo respecto al control positivo para asignar un porcentaje de inhibición. 371 | P á g i n a Resultados. Figura 1. Inhibición de los COS y Qs frente a cultivos de E.coli y S. aureus. En esta figura se observan los halos de inhibición resultantes de las distintas concentraciones de COS y Qs frente al control positivo. Tabla 1 y 2. Acción antimicrobiana de los COS y Qs sobre E. coli y S. aureus. En las tablas 1 y 2 se puede observan los porcentajes de inhibición que mostraron las muestras de Qs y COS en diferentes concentraciones y distintos microorganismos, los valores más altos se aprecian en las mayores concentraciones para ambos casos, variando según el microorganismo evaluado. Discusión Las tablas 1 y 2 muestran los porcentajes de inhibición respecto al control positivo para Qs y COS con la medición del halo de inhibición después de 24 hrs de incubación. En general se aprecia un efecto mayor con la aplicación de COS con respecto al Qs esto se relaciona con lo reportado por varios autores los cuales describen varias hipótesis acerca del mecanismo de actividad antimicrobiana del quitosano. La más plausible es un cambio en la permeabilidad de la célula debido a las interacciones entre el quitosano, que es un policatión, y las cargas electronegativas de la superficie de la pared celular (Devlieghere y col., 2004). 372 | P á g i n a Además, se le atribuye la posible penetración en la bicapa fosfolipídica de la membrana citoplasmática con la consiguiente perturbación de esta y la posterior muerte celular (Li y col., 2010).Dicho lo anterior el bajo Mw de los COS permitiría de forma fácil la penetración de estas moléculas en la membrana citoplasmática (Coma y col., 2003; Vishu Kumar y col. 2005). Por otro lado, se ha demostrado que este polímero es capaz de unirse al ADN e inhibir la síntesis de mARN y la transcripción de ADN (Sudarshan y col., 1992). Así también se observa un efecto distinto con cada una de las cepas utilizadas teniendo mejores resultados frente a E.coli en el caso de los COS y sobre S. aureus con el quitosano, lo cual también describe como factor importante al tipo de especies de microorganismos evaluados (Gerasimenko y col., 2004; Park y col., 2004). Conclusión. Los resultados obtenidos señalan que es viable el uso de estos compuestos para aplicaciones dentro de la industria alimentaria por sus múltiples propiedades y sobre todo por su efecto antimicrobiano, lo cual es de suma importancia para la preservación de las características organolépticas y bromatológicas de los alimentos. Queda por realizar las pruebas directamente sobre el producto durante su proceso de elaboración para así confirmar los efectos antimicrobianos observados In vitro. 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El municipio de Teocelo, Veracruz desde hace ya algunos años ha desarrollado acciones de sustentabilidad que le han proporcionado muy buenos resultados, principalmente en la satisfacción de sus habitantes. A partir del año 2012 se inició una serie de acciones con la participación de diferentes facultades, encaminadas a lograr de Teocelo un municipio sustentable. La facultad de Ciencias Químicas a través del programa educativo de Ingeniería en Alimentos inició, con la participación de sus maestros y estudiantes un diagnóstico de las necesidades en materia de procesamiento, preparación y venta de alimentos. En este diagnóstico se determinaron importantes acciones para mejorar las condiciones de higiene en la manufactura de los alimentos. Los espacios visitados son: el rastro municipal, las carnicerías, el mercado municipal, los puestos ambulantes de alimentos, las panaderías y el negocio de zarzaparrilla. Es importante resaltar que como resultado de este trabajo de investigación, se han realizado dos primeras propuestas formales presentadas como trabajos de tesis, elaboradas por estudiantes de la licenciatura en ingeniería en alimentos. La intención es continuar con estos trabajos a través de tesis profesionales. También dentro del proyecto de hará la implementación de estas propuestas a través de cursos de capacitación a los diferentes usuarios. El objetivo es lograr que Teocelo llegue a ser realmente un municipio sustentable. INTRODUCCIÓN La sustentabilidad o también conocida con “desarrollo sustentable” es un tema de gran actualidad, ya que está referido al buen manejo de los recursos naturales así como de todos los factores que permitan un aprovechamiento responsable de recursos tanto renovables como no renovables. LOS ANTECEDENTES DE LA PRODUCCIÓN MÁS LIMPIA Y SU DEFINICIÓN El concepto de la producción más limpia, como tal, nace de uno de los documentos fundamentales de la cumbre de Rio sobre medio ambiente y sostenibilidad, la denominada agenda 21. La agenda 21 contiene un conjunto de programas destinados a alcanzar una guía para lograr el desarrollo sostenible. Se trata de dirigirse hacia un desarrollo que sea ambientalmente sostenible, el acceso y uso de los recursos naturales y que contribuya a combatir las amenazas ambientales globales; que sea socialmente sostenible mediante la erradicación de la pobreza y la inequidad; que sea culturalmente sostenible mediante el proceso y la revaloración de la diversidad cultural, y que sea políticamente sostenible mediante la construcción de una democracia más participativa. 375 | P á g i n a La agenda contiene 34 capítulos que se ocupan de las diversas dimensiones del desarrollo, incluyendo los referentes a los patrones de producción y consumo, y en ella se da prioridad a la implementación de producción más limpia y a las tecnologías de prevención y reciclaje. Adicionalmente, la UNEP promociona la declaración internacional en producción más limpia, la cual es una afirmación pública y voluntaria del compromiso en la práctica y la promoción de la PML. Este instrumento, que nace después del quinto seminario de alto nivel en PML, provee la oportunidad de obtener compromisos de alto nivel por parte de líderes políticos, sociales y económicos, para asegurar el reconocimiento y apoyo general para una adopción más limpia e intensa de la PML a nivel internacional, nacional y local. El concepto de la producción más limpia es diferente al concepto de “fin de tubo”. Este último incluye el uso de una variedad de tecnologías y productos para el tratamiento de los desechos sólidos, vertimientos líquidos, las emisiones gaseosas y, en general, todo tipo de contaminación una vez producida. Estas tecnologías, en general, no reducen la contaminación sino que disminuyen su toxicidad trasladándola de un medio a otro. La PML es una estrategia que busca prevenir la generación de la contaminación en la fuente, en vez de controlarla al final del proceso. De acuerdo con la UNEP, la producción más limpia es una aplicación continua de una estrategia ambiental preventiva e integrada, en los procesos productivos, los productos y los servicios para reducir los riesgos relevantes a los seres humanos y el medio ambiente. La mayor eficiencia ambiental que se logra implementando una estrategia de PML está asociada a la prevención de la contaminación, producto de un uso eficiente de los recursos. Asimismo, la mayor eficiencia económica también está asociada a: Un menor uso de materias primas y energía, Una recuperación de materiales y subproductos, Menores pagos por impuestos y multas ambientales. Según el banco mundial, puede alcanzarse una reducción de 20 a 30% de la contaminación sin necesidad de hacer inversiones de capital; y puede lograrse una reducción adicional de 20% o más con inversiones cuya tasa de retorno es de meses si se implementan mecanismos de PML. La importancia de esta estrategia radica en su aporte a la competitividad basada en la conservación del medio ambiente y la responsabilidad social, contribuyendo de esta manera al equilibrio entre los tres elementos principales del desarrollo sostenible como objetivo universal. La PML, además de generar beneficios para el sector productivo, también produce resultados positivos en otras partes interesadas. Por ejemplo, a la comunidad, porque ésta obtiene una mejor calidad de vida; a los inversionistas, porque ante un mejor desempeño ambiental de las empresas se puede generar valor y a la administración pública, porque reduce sus costos de operación. La implementación de la PML puede darse a nivel de las empresas o a nivel gubernamental. En primera instancia, la producción más limpia como estrategia preventiva se implementa a nivel empresarial, en el cambio de procedimientos de operación, en tecnología y estrategias administrativas. La asimilación del concepto de producción más limpia por parte de las empresas depende de la voluntad de las mismas y no es un proceso automático. Especialmente, las variables del entorno de las empresas son determinantes para la creación de la concepción en el interior de ellas. 376 | P á g i n a Por otro lado, la adopción de medidas preventivas por parte de las empresas representa igualmente beneficios para los diferentes actores de su entorno, como son la disminución de la contaminación ambiental y el desarrollo económico, con sus beneficios sociales relacionados. De esta manera, la producción más limpia integra distintos intereses de diferentes actores del entorno empresarial como son: las autoridades ambientales, los gremios, las universidades, los entes territoriales, los consultores especializados, entre otros. En primera instancia, las autoridades ambientales, como coordinadores ambientales en la implementación de la política nacional ambiental pueden promocionar y facilitar la adopción del concepto en las empresas a través de la aplicación de sus diferentes instrumentos, tanto económicos y regulatorias, como facilitadores. El beneficio de la implementación de la producción más limpia por parte de la autoridad ambiental se ve reflejado en la prevención y minimización de la contaminación ambiental. Por otro lado, los gremios, como representantes de los sectores empresariales, pueden facilitar la competitividad de las empresas por medio de la multiplicación de experiencias exitosas y la negociación de proyectos que los favorezcan. Las universidades y centros de educación desempeñan un papel importante en la creación de sensibilidad y capacidades profesionales en las empresas, tanto a nivel gerencial como a nivel profesional y operacional. El beneficio de la implementación de la producción más limpia por parte de estos actores se refleja en la oportunidad de innovación del desarrollo y comercialización de servicios que estos ofrezcan, como son los cursos de capacitación y proyectos de investigación. Los consultores especializados acompañarán, a través de su capacidad técnica, la implementación de las alternativas especificas en el interior de las empresas. Para los mismos consultores, la implementación de la producción más limpia representa una oportunidad de negocio a través de la oferta de sus servicios. Para el mejoramiento de la gestión ambiental y de la competitividad de las empresas se debe de realizar trabajo conjunto con los entes territoriales para articular, con los respectivos planes de gobierno, los proyectos orientados con el sector productivo e institucional, generando beneficios económicos, sociales y ambientales, mejorando, por lo tanto, la calidad de vida de la población y la competitividad y productividad de la ciudad o región. Lo anterior muestra que para el reconocimiento y la implementación de la producción más limpia por parte de las empresas, las condiciones facilitadoras del entorno empresarial desempeñan un papel fundamental. Igualmente, se muestra que para los actores que pueden brindar estas condiciones, la producción más limpia brinda interesantes ventajas. A partir de este contexto se desprende el papel de las autoridades ambientales en la implementación de la producción más limpia, como ente facilitador frente al sector productivo. 377 | P á g i n a Las necesidades para facilitar la implementación de esta estrategia preventiva están en: El control a través de la regulación directa no siempre es efectivo, por la complejidad de los problemas ambientales. El aumento de regulación directa trae beneficios escasos para las empresas y, en consecuencia, no facilita su cumplimiento. La innovación en el uso de otros instrumentos que van más allá del cumplimiento de la normatividad ambiental. Optimización de recursos en el cumplimiento de metas y objetivos ambientales. La efectividad de la coordinación entre el sector productivo y el gobierno para mejorar el desempeño ambiental empresarial. Certeza del sector productivo en la planificación de políticas ambientales y necesidades de inversión. Participación de sector productivo en decisiones de políticas ambientales, seguimiento y monitoreo de la gestión ambiental, diseño de la legislación. La producción más limpia, como mecanismo de política, es actualmente una de las alternativas de vanguardia para el manejo de estos problemas de contaminación. Su importancia radica en el hecho de que es una estrategia preventiva que utiliza un enfoque más proactivo que reactivo en la solución de los problemas. Podemos afirmar que los principios de la producción más limpia están acordes con los principios del desarrollo sostenible, ya que ésta no está encaminada a la reducción de la actividad industrial y comercial de una economía, sino que, dentro de la actividad productiva, aplica herramientas que tienden a su optimización y a la reducción de la contaminación. (Van Hoff, Bart; 2008) SEGURIDAD ALIMENTARIA Y NUTRICION En la actualidad producimos alimentos más que suficientes para cubrir las necesidades nutricionales básicas de todas las personas en el planeta; si todas tuvieran acceso a ellos. Incluso con estos excedentes, una de cada 6 personas en los países en desarrollo no tiene lo suficiente para comer. Casi todos los expertos en agricultura aceptan que la causa básica de esa hambre es la pobreza, la cual evita que las personas pobres cultiven o compren alimentos suficientes. De acuerdo con el banco mundial, una quinta parte de la población mundial lucha por vivir con un ingreso menor de un dólar diario, y casi la mitad vive con menos de dos dólares diarios. La guerra y la corrupción también impiden a las personas pobres el acceso a la comida. La seguridad alimentaria significa que cada persona en un área específica tenga acceso diario a suficiente comida nutritiva para tener una vida activa y saludable. A nivel de países, la pobreza se puede reducir mediante programas gubernamentales que ayuden a los pobres a ayudarse a si mismos, mediante la planificación familiar, educación y empleos (sobre todo para las mujeres), y prestamos pequeños para ayudar a los pobres a iniciar un negocio o comprar suficiente terreno para cultivar sus propios alimentos. (G. Tyler Miller, Jr.; 2009) 378 | P á g i n a INOCUIDAD ALIMENTARIA La calidad de los alimentos es una característica compleja que determina su valor o aceptabilidad para el consumidor. Abarca atributos negativos como el estado de descomposición, contaminación con suciedad, decoloración y olores desagradables y atributos positivos como origen, color, aroma, textura y métodos de elaboración de los alimentos. De las características de los alimentos se pueden señalar los siguientes atributos de la calidad: Nutricionales, se refiere a la aptitud de los alimentos para satisfacer las necesidades de energía y nutrientes del ser humano; sensoriales, se corresponde con las características organolépticas del alimento como la apariencia, el olor, color, textura y sabor; servicios, está relacionada con características del alimento como su presentación, el empaque, la facilidad para su elaboración o empleo, la disponibilidad en el mercado, entre otros y la inocuidad. Este último atributo es considerado un requisito básico de la calidad que implica la ausencia de contaminantes, adulterantes, toxinas y cualquier otra sustancia que pueda hacer nocivo el alimento para la salud, o bien unos niveles inocuos o aceptables de los mismos. La producción de alimentos sanos es una preocupación permanente de quienes se dedican a esta actividad, de los organismos oficiales encargados de velar por la salud de los consumidores y de la sociedad en general. El aseguramiento de la inocuidad de los alimentos ha sido realizado, hasta hace poco tiempo, mediante un enfoque reactivo, punitivo y de retirada del mercado de los alimentos. Estos sistemas de inocuidad y calidad enfatizan en el control de materias primas, procesos y productos mediante ensayos físicos, químicos y biológicos realizados en laboratorios. El control de los procesos productivos se realiza mediante la aplicación de técnicas estadísticas y efectuando mantenimiento y control de los equipos utilizados en los procesos de producción. Este tipo de control de la calidad tiene el inconveniente de que las fallas o defectos son detectados una vez que la materia prima es recibida, o al final del proceso de producción cuando es demasiado tarde, o no se detectan y llegan al consumidor causando daños a su salud. (Mercado, Carmen E.,2007) La calidad en el procesamiento de alimentos para su venta al público es un factor primordial cuando se quiere alcanzar la confianza de los consumidores. En la población de Teocelo, Veracruz, a partir del año 2012 la Universidad Veracruzana ha emprendido una labor muy importante que consiste en participar, a través de maestros y alumnos en diferentes proyectos que tienen como objetivo elevar los niveles de calidad de vida y prestación de servicios de sus habitantes. Asimismo, contribuir al mejoramiento de la imagen de la población, incrementando de esta forma la visita en plan recreativo de los veracruzanos y otros Estados del país. La Facultad de Ciencias Químicas campus Xalapa, gracias a la invitación de la Mtra. Rosario Valencia inició su participación a través del programa educativo de Ingeniería en Alimentos. La primera actividad fue una visita con un grupo de 15 estudiantes y un profesor. En esta visita se realizó un recorrido que se dividió en: comercios, mercado y rastro, de aquí se ha obtenido un primer documento que establece los puntos críticos y acciones prioritarias a desarrollar y que se presentan a continuación. 379 | P á g i n a También es importante decir que se están realizando en este momento dos tesis profesionales de licenciatura dentro del programa educativo de Ingeniería en Alimentos, una enfocada en la problemática del rastro y encaminada a mejorar sus condiciones de operación y la otra enfocada en la implementación de una empresa productiva a partir de productos agrícolas de la región. A continuación se presentarán los avances de los trabajos mencionados, especificando que este proceso no está concluido, ya que se tienen programadas más acciones en bien de la población de Teocelo. Una de ellas, a corto plazo es la implementación de un curso gratuito de capacitación en la técnica de marinado de carnes para incrementar su valor al público. Es importante mencionar que en estas acciones se ha contado con el apoyo incondicional tanto del personal de nuestra facultad como de las autoridades oficiales del municipio. El municipio de Teocelo, a partir de todas las propuestas elaboradas por las diferentes facultades de la Universidad Veracruzana tendrá un documento que podrá implementar a través de programas de capacitación, de concientización a sus habitantes que definitivamente, proporcionará un mejor nivel de vida y una mejor imagen hacia el exterior, incrementando el interés de la sociedad hacia este municipio. MÉTODOS Y MATERIALES La metodología empleada para realizar este trabajo de diagnóstico fue relativamente sencilla. Inició con la convocatoria a todos aquellos estudiantes interesados en participar. Una vez determinado el grupo de trabajo se procedió de la siguiente manera: 1. Primera visita al municipio, por un grupo de trabajo de los maestros asesores y 18 estudiantes. 2. Entrevista con el Presidente Municipal, para recabar información y establecer los principales problemas relacionadas con la preparación y venta de alimentos. 3. Formación de equipos (4 o 5 personas) para hacer el recorrido (inicio del diagnóstico). Esta actividad se llevó a cabo contando con el apoyo de personal del H. ayuntamiento. 4. Recorrido y diagnóstico. Los equipos fueron asignados a los siguientes espacios: rastro municipal, carnicerías, mercado municipal, panaderías, vendedores ambulantes. 5. Reuniones de trabajo. Se realizaron reuniones posteriores, en donde se hizo el análisis de la problemática más importante. Cada equipo desarrollo, en base a lo observado, la propuesta conveniente. 6. Elaboración de documento. Se elaboró el documento con los resultados de este trabajo de investigación y la propuesta con las acciones a desarrollar encaminadas a lograr un manejo higiénico y sustentable de los alimentos. RESULTADOS A continuación se presentan los resultados obtenidos a partir del diagnóstico, clasificadas de acuerdo a los espacios especificados en la metodología. PRIMER TRABAJO DE DIAGNÓSTICO DENOMINADO: “PUNTOS CRÍTICOS DE LOS DIFERENTES ESTABLECIMIENTOS DE ALIMENTOS DEL MUNICIPIO DE TEOCELO, VERACRUZ” VISITA AL RASTRO. Se revisaron e identificaron los siguientes puntos: o condiciones higiénicas deficientes o Infraestructura insuficiente 380 | P á g i n a o Potabilidad del agua no bien definida o Falta de personal capacitado o Falta de documentos para rastreo o Falta de uso de uniforme Carnicerías o Deficiencias en el trasporte del producto (rastro-carnicería) o Rastreo del sacrificio o Atención y control de calidad a proveedores o No hay documentos de seguimiento a procesos o Mala refrigeración y distribución (no en todas) o Presencia de insectos Mercado o Puesto de comida en planta alta del mercado con malas condiciones de higiene o Se requiere aplicación de pintura especial o Seguimiento de control de plagas Puestos ambulantes: o Uso excesivo de cloro o Capacitación del uso del aceite o Correcta refrigeración o Capacitar sobre correcta desinfección de frutas y verduras o Uso de cofias y cobrebocas o Control de higiene del personal o Método correcto para descongelar Panaderías o Materia prima mezclada con producto terminado o Contaminación cruzada o Presencia de insectos o Falta de uso de uniforme o Falta de higiene en todos los puntos Zarza Parrilla o Fermentación en tanques de madera o Falta de higiene o Utensilios o DISCUSIÓN Y RECOMENDACIONES Los Resultados obtenidos a partir del diagnóstico, proporcionan una idea clara de cómo se encuentra la población en cuanto a su situación de manejo higiénico de los alimentos. Es importante continuar con las investigaciones a través de proyectos de tesis que busquen aportar soluciones reales y concretas a la problemática encontrada. Para corregir las acciones expuestas anteriormente, se propone la elaboración de un manual con lenguaje sencillo y práctico, que permita al usuario llevar a cabo correctamente los procedimientos de elaboración de alimentos. Algunos de los puntos principales que tendrá el manual de enlistan a continuación: CORRECTA DESINFECCIÓN, USO CORRECTO DEL CLORO Como medio de desinfección: el cloro comercial es uno de los desinfectantes más usados, lo que se recomienda es seguir las indicaciones del fabricante para llevar a cabo la desinfección correcta de frutas y verduras. 381 | P á g i n a Antes que nada toda fruta o verdura que vaya a ser desinfectada debe ser lavada con abundante agua para eliminar el exceso de suciedad. Normalmente se utilizan 10 gotas de cloro por cada litro de agua, esto se lleva alrededor de 5 minutos; es importante manejar adecuadamente las cantidades expuestas, no exceder en el volumen del cloro, ni en el tiempo empleado. Al utilizar algún desinfectante de alimentos comercial se deben seguir las instrucciones del fabricante. En los utensilios de cocina: lavar, enjuagar y desinfectar todas las tablas para picar, los cuchillos, los utensilios, los lava-trastes, etcétera, después de trabajar con productos de carne cruda y antes de preparar otras comidas. (Las tablas para picar así como los mangos del cuchillo deben de ser de plástico). Lavar, enjuagar y desinfectar todas las superficies de trabajo y/o áreas de preparación, por lo menos cada 4 horas durante el uso continuo. PRÁCTICAS DEL PERSONAL: Todos los empleados deben mantener buenas prácticas de higiene. Los empleados involucrados en la preparación de alimentos deberán usar cofia para retener el cabello evitando contaminar al alimento, deberán usar cubre-boca abarcando la nariz y boca. Deberán llevar ropa limpia. Deberán mantener sus uñas limpias, cortadas, sin pintar y cuidadas. No deberán usar joyería (aretes, anillos, cadenas, pulseras, reloj, etc.) Deberán quitarse los delantales antes de entrar al baño o al salir del lugar de preparación de los alimentos. Los trapos y delantales no se deberán usar para limpiar las manos. Lavarse las manos antes y después de trabajar con el alimento. Usar jabón líquido para lavarse las manos. CORRECTA REFRIGERACIÓN La refrigeración detiene el crecimiento bacteriano. Los refrigeradores deben mantenerse a una temperatura de 40 °F (4.4 °C) o menos. Existen dos tipos de familias de bacterias completamente diferentes: las bacterias patogénicas, la clase de bacterias que causan enfermedades transmitidas por alimentos y las bacterias que deterioran los alimentos, la clase de bacteria que causa que los alimentos se deterioren y desarrollen olores, sabores y texturas desagradables. Un paso bien importante en mantener sus alimentos inocuos es manteniendo limpio su refrigerador. Limpie los derrames inmediatamente, limpie las superficies bien con agua caliente jabonosa, entonces enjuague. Para mantener el refrigerador que huela fresco y ayudar a eliminar los olores, coloque una caja abierta de bicarbonato de soda en la tablilla. Los alimentos como el caso del yogurt y todo derivado de lácteo nunca deben estar expuestos a temperatura ambiente, así como los alimentos una vez destapados. Leer la etiqueta de cada producto para su almacenaje proporcionará una mayor vida del producto. 382 | P á g i n a DESCONGELADO CORRECTO DE ALIMENTOS Hay tres formas correctas para descongelar los alimentos 1.- un día antes el alimento congelado pasarlo a refrigeración, así lentamente y sin ningún daño el alimento se descongelará. 2.- Del congelador pasar directo el alimento al microondas 3.- del congelador pasar directo el alimento al horno precalentado a 180°C USO DEL ACEITE: Cuando un aceite es utilizado para freír los alimentos, este se lleva a una temperatura demasiado alta, siendo que con esto emite sustancias orgánicas perjudiciales para la salud. Por lo cual, es recomendable cambiar el aceite una vez que este se torne oscuro y puedan verse en él partículas negras. El aceite no debe emitir demasiado humo, ya que la presencia de éste nos indica que se está quemando y produciendo sustancias tóxicas. No es recomendable reutilizar el aceite, y tampoco mezclar aceite usado con aceite nuevo. Se recomienda usar por partes el aceite, es decir, en el recipiente que se vaya a freír incorporar el aceite conforme la demanda lo exija, así, se evitará el desperdicio de éste. MATERIA PRIMA CON PRODUCTO TERMINADO La materia prima no puede estar en contacto con el producto terminado, ya sea juntos o en la misma habitación; ya que se genera una contaminación cruzada que, afecta mayoritariamente al producto terminado. Definir las áreas de trabajo y evitar que entren personas ajenas a estas. INSECTOS No existen protecciones para evitar la entrada de insectos (especialmente insectos voladores) ya que estos son grandes portadores de enfermedades y microorganismos patógenos para las personas que consumen los alientos elaborados. Poner protecciones (mosquiteros) para evitar que los insectos entren a la zona de producción. ZARZA PARRILLA, ELABORACIÓN. (punto exclusivo) La fermentación se realiza en barricas de madera, se recomienda que esta se realice en tanques de plástico y que tengan un control periódico de lavado de los mismos. RASTRO (punto exclusivo) (Norma oficial mexicana NOM-194-SSA1-2004) Las instalaciones y el equipo deben estar limpios y desinfectados antes de iniciar las labores. En el caso de los corrales, rampas, mangas, baño ante mortem y área de secado y escurrimiento deben lavarse por lo menos una vez al día. Lavar correctamente antes y después de usar el área de sacrificio (pisos, paredes, cortinas, mesas, utensilios, etc.) Los utensilios deben lavarse completamente con agua y jabón y enjuagarse con agua caliente al inicio y al final de la jornada de trabajo, cada vez que haya una interrupción en la labor o entren en contacto con tejidos infectados, parasitados o con tumoraciones, lesiones, excretas, secreciones o productos en mal estado. 383 | P á g i n a Se debe contar con recipientes para desinfección de material inoxidable, con circulación continua de agua caliente a una temperatura de 82°C y con la profundidad suficiente para que se cubra totalmente la superficie del equipo. Los recipientes para desinfección y lavamanos deben colocarse juntos y en número suficiente de acuerdo a la capacidad de sacrificio por turno. Llevar un registro de cada animal que ingresa al rastro y sale de éste. También anotar día y hora del sacrificio (libro de control). Todos los animales que se reciban deberán contar con certificado zoosanitario y/o guía de traslado de ganado, los que deberán mantenerse el mismo tiempo que los demás registros. Los rastros deberán contar con horno incinerador de capacidad suficiente para la disposición final de los productos rechazados. Se debe contar con corrales para que conforme a la especie, los animales tengan un periodo de descanso antes del sacrificio. El tamaño y número dependerá del volumen de sacrificio diario. En estos corrales se debe realizar la inspección ante mortem. Mantener limpio y tapado el contenedor de agua que se utilice para el proceso y deberá cumplir con el límite permisible de cloro residual libre y de organismos coliformes totales y fecales establecidos en la NOM-127-SSA1-1994. Capacitar a todo el personal que esté laborando dentro de las instalaciones del rastro. o Manejo correcto del animal dentro de las instalaciones o Manejo correcto de residuos biológicos. o Correcto traslado del animal en canal a las carnicerías. o Uso de uniforme blanco (botas, pantalón, camisa, mandil, cofia y cubre bocas). o Implementar buenas prácticas de higiene en el personal (uñas cortas y limpias, cabello recogido o corto en el caso de los hombres, asearse antes y después de terminar la jornada laboral). Marcar límites y respetarlos de un área a otra dentro de las instalaciones. Para mayor información consúltese el reglamento del rastro municipal, capitulo 1, disposiciones generales. Nota: todos los establecimientos antes mencionados deben emplear las BPH (Buenas Prácticas de Higiene). A PARTIR DEL PRIMER TRABAJO DE DIAGNÓSTICO, HAN SURGIDO DOS PRIMEROS TRABAJOS RECEPCIONALES ELABORADOS POR ESTUDIANTES DE LA CARRERA DE INGENIERÍA EN ALIMENTOS. Una de las tesis que se está desarrollando en el municipio de Teocelo lleva por título “PROPUESTA DE IMPLEMENTACIÓN DE BUENAS PRÁCTICAS DE HIGIENE Y MANUFACTURA EN LA PRODUCCIÓN DE VINO DE NARANJA EN UNA EMPRESA DE TEOCELO, VERACRUZ” y esto conlleva a la aplicación de ciertos reglamentos y evaluaciones para verificar la higiene, sanidad, elaboración e inocuidad que existe en el momento de la preparación de la bebida alcohólica antes mencionada, posteriormente se está realizando la propuesta de BPH y BPM para que en un futuro cercano, se obtenga una certificación del producto y este pueda ser comercializado fuera del municipio de Teocelo y poder competir con productos comerciales sin dejar de ser un producto artesanal. 384 | P á g i n a AUTORA DE LA TESIS: ANA SILVIA PURECO SALVADOR DIRECTORA DE LA TESIS: M. C. FRIXIA GALÁN MÉNDEZ La segunda tesis tiene por título: “DIAGNÓSTICO DE OPERACIÓN Y FUNCIONAMIENTO DEL RASTRO DEL MUNICIPIO DE TEOCELO, VER.” A continuación se presenta un resumen de la misma: Los rastros son un servicio público que debe cumplir con ciertos lineamientos de operación, así como estar diseñados de tal manera que faciliten su adecuada operación, esto es, requieren de espacio y ubicación adecuados, de manera que su operación se realice en condiciones higiénicas y sanitarias que satisfagan los requisitos necesarios para el consumo humano de carne. Para el establecimiento de rastros debe procurarse su integración al contexto urbano de cada centro de población del municipio, de manera que se respeten los espacios físicos destinados para cada actividad. Así mismo, se debe cuidar que su ubicación e instalación garanticen el funcionamiento de este servicio público; también es importante que estos establecimientos se localicen en las afueras de los poblados, debido a los olores indeseables que producen los desperdicios que genera su funcionamiento, éste debe ser eficiente en lo administrativo, en el área de matanza y el área exterior, dado que es un servicio público como ya se mencionó, cumplir con los requerimientos necesarios de su diseño es importante para que su operación sea satisfactoria. Es importante que periódicamente se realice un diagnóstico de operación y funcionamiento en los rastros que actualmente se encuentran en función para establecer si cumplen con la normatividad requerida para un adecuado sacrificio y seguridad del animal y del producto que se vaya a consumir. Un diagnostico consiste en analizar un sistema y comprender su funcionamiento, de tal manera que se puedan proponer cambios en el mismo y cuyos resultados sean previsibles (Rodríguez, 2007). En el estado de Veracruz, el municipio de Teocelo cuenta con un rastro municipal con más de 10 años de operación; siendo una de las áreas más importantes para la calidad de la carne, en el presente trabajo se realizó un diagnóstico de operación del funcionamiento relacionado con el manejo del mismo, con respecto al cumplimiento de las normas de sanidad oficiales sobre la operación, distribución y administración con el fin de conocer si cumple con las Normas Oficiales Mexicanas referentes a rastros municipales, a las Buenas Prácticas de Manufactura, Buenas Prácticas de Higiene y sacrificio animal. Al trabajar con rastros ya sea de Tipo Inspección Federal o Tipo Secretaria de Salud no solo se trata de llevar a cabo las buenas prácticas de higiene durante el sacrificio, sino de todo lo que se realiza desde que el animal llega a las instalaciones hasta que la carne es trasladada a su punto de venta. Teocelo quiere ingresar a la clasificación de pueblo mágico y una de las características que debe de tener para que esto se pueda llevar a cabo, es que los pobladores tengan costumbres locales muy arraigadas por lo que ostenten esa distinción. El municipio no solo busca ser pueblo mágico, pues está trabajando para ser un Teocelo sustentable, sin perder sus costumbres y tradiciones. A la fecha no se ha realizado un diagnóstico sobre la funcionalidad y operación del rastro, por lo que por su importancia, es necesario realizarlo con el fin de establecer sus fortalezas y debilidades y así poder recomendar acciones que conlleven a una buena operatividad de acuerdo con lo establecido en las normas oficiales mexicanas relacionadas. 385 | P á g i n a CONCLUSIONES La participación de maestros y estudiantes de la carrera de ingeniería en alimentos ha sido fundamental en la obtención de los resultados descritos anteriormente. Es necesaria una comunicación con los integrantes de los tres sectores: el académico, el gubernamental y la sociedad de Teocelo para poder lograr los objetivos planteados. Existen grandes posibilidades de alcanzar el objetivo primordial de hacer de Teocelo, Veracruz un municipio sustentable, ejemplar en el Estado de Veracruz. BIBLIOGRAFÍA G. Tyler Miller, Jr.; CIENCIA AMBIENTAL. DESARROLLO SOSTENIBLE. UN ENFOQUE INTEGRAL. 8ª. Edición. Cengage Learning Editores, S.A. México. 2009 Mercado, Carmen E. 2007. LOS ÁMBITOS NORMATIVOS, LA GESTIÓN DE LA CALIDAD Y LA INOCUIDAD ALIMENTARIA: UNA VISIÓN INTEGRAL. Agroalimentaria No. 24: 119-120. Norma oficial mexicana NOM-194-SSA1-2004, productos y servicios. Especificaciones sanitarias en los establecimientos dedicados al sacrificio y faenado de animales para abasto, almacenamiento, transporte y expendio. Especificaciones sanitarias de productos. Norma oficial mexicana NOM-127-SSA1-1994, Salud ambiental, agua para uso y consumo humano-límites permisibles de calidad y tratamientos a que debe someterse el agua para su potabilización. Van Hoff, Bart; Monroy, Nestor; Saer, Alex. PRODUCCIÓN MÁS LIMPIA. PARADIGMA DE GESTIÓN AMBIENTAL. 1ª. Edición. Editorial ALFAOMEGA. México. 2008. 386 | P á g i n a INFORMACIÓN LEGAL CONGRESO INTERNACIONAL “CUCCAL” SOBRE INOCUIDAD, CALIDAD Y FUNCIONALIDAD DE ALIMENTOS EN LA INDUSTRIA Y SERVICIOS DE ALIMENTACIÓN, año 1, No. 1, Enero – noviembre 2014, es una Publicación anual, editada y Publicada por Sociedad Mexicana de Inocuidad y Calidad para Consumidores de Alimentos, SOMEICCA A.C., calle 28 de diciembre, 87, Col. Emiliano Zapata, Delegación Coyoacán, C.P. 04815. Tel. (55) 5677-8657, www.someicca.com.mx, [email protected]. Editor responsable: Q.A. Esmeralda Paz Lemus. Reserva de Derechos al Uso Exclusivo No. 04-2013121612165800-106, ISSN: “en trámite”, ambos otorgados por el Instituto Nacional del Derecho de Autor. Responsable de la última actualización de este Número, Departamento de Informnación al Consumidor SOMEICCA A.C., Q.A. Roberto Carlos Quezada Guevara, calle 28 de diciembre, 87, Col. Emiliano Zapata, Delegación Coyoacán, C.P. 04815, fecha de última modificación, 13 de enero de 2014. Las opiniones expresadas por los autores no necesariamente reflejan la postura del editor de la publicación. Queda prohibida la reproducción total o parcial de los contenidos e imágenes de la publicación sin previa autorización del Instituto Nacional del Derecho de Autor. 387 | P á g i n a