Guía N° 5 2012 UNIDAD 1: GENÉTICA SUB-UNIDAD 3: INGENIERÍA GENÉTICA SUB-UNIDAD 4: ENZIMAS SUB-UNIDAD 5: MUTACIONES Biología Profundización En esta sesión tú podrás: - Dominio de los principios básicos de ingeniería genética y sus aplicaciones productivas. - Conocer el concepto de producto transgénico y de sus implicaciones productivas y comerciales, en distintas áreas de la industria. - Conocer las aplicaciones de la ingeniería en las terapias génicas. - Dominio del concepto de enzima como proteína con acción catalítica, de sus efectos en la energía de activación y el sustrato. - Interpretar gráficos enzimáticos correctamente. - Comprender la importancia de una enzima en las reacciones químicas de una célula. - Dominio del concepto de mutación, comprendiendo que una mutación puede resultar positiva, negativa o neutra para un individuo, y de cómo se heredan. - Comprender los distintos mecanismos de mutación. ENZIMAS Las enzimas son proteínas catalizadoras de las reacciones químicas que ocurren dentro de un organismo, antes de explicar los detalles, examinemos la razón de que los organismos necesiten de proteínas que intervengan en las reacciones del metabolismo. Todos los procesos termodinámicos abióticos obedecen a una simple regla que define que el grado de desorden del universo está en constante aumento. En palabras simples la materia no tiende espontáneamente a adquirir un ordenamiento creciente sino que _______________________________________________________________________ Autor: Daniel Oyanedel T. / Edición: Katherine Brante C. 1 Consultas: biologí[email protected] / www.preusm.cl Guía N° 5 2012 todo lo contrario tiende a adquirir los estados de menor energía posible, y todo intento de alcanzar un orden superior a este estado requiere de un ingreso de energía al sistema. El hecho de que los sistemas vivos sean capaces de ordenar la materia desde compuestos simples a complejas estructuras mientras la regla universal es tender al desorden, estableció en la antigüedad la creencia de que los organismos vivos poseían la capacidad de desafiar las leyes de la naturaleza. Hoy sabemos que tanto la materia inerte como la que forma parte de los sistemas definidos como vivos, obedecen las mismas leyes físicas que gobiernan el universo, sólo que la evolución de los sistemas vivos ha permitido el desarrollo de mecanismos que, respetando las leyes básicas de la termodinámica permiten que el resultado final parezca desafiar a la naturaleza creando orden a partir del desorden creciente. Una parte fundamental de estos mecanismos son las proteínas catalíticas conocidas como enzimas. Reacciones químicas y energía de activación activación Para que una reacción química suceda las sustancias que reaccionarán deben chocar con tal energía que los enlaces que forman sus respectivas estructuras se vean debilitados y permitan la formación de nuevos enlaces con el correspondiente reordenamiento de los átomos. Figura 1. Ecuación química simplificada Ésta energía que impulsa la interacción entre los reactivos para formar un producto recibe el nombre de energía de activación. Cuando se proporciona la energía de activación los reactantes elevarán su energía de forma espontánea hasta la formación de complejo activado. A continuación la reacción se desencadenará espontáneamente en una cuesta abajo energética que entregará un producto con menor energía que los reactivos que los formaron ya que todo proceso conlleva una pérdida de energía en forma de calor. 2 Guía N° 5 2012 Figura 2. Representación gráfica del concepto de energía de activación, A y B representan a los reactantes mientras B y C representan a los reactantes. Inicialmente se debe aportar energía, la que está representada por la curva en ascenso, una que vez que se alcanzó la energía de activación y se forma el complejo activado, representado por la cima de la curva, la reacción ocurre de forma espontánea o de forma más coloquial, “cuesta abajo” Un ejemplo de esto es la combustión de la madera, para que comience la combustión, la temperatura debe ser elevada cerca de los 400 °C para que desde este punto la reacción se autoalimente desarrollándose hasta la combustión total del material original. Gracias a las enzimas el cuerpo humano es capaz de realizar la combustión de la glucosa a 37°C, que es la temperatura corporal aproximada de un ser humano, en el proceso de respiración celular. La diferencia entre la respiración celular y la combustión de un trozo de madera o un puñado de azúcar, para igualar los substratos, radica en que la primera es un proceso realizado en etapas controladas en donde cada paso es conducido por una enzima específica, mientras que en la combustión común, una vez alcanzada la energía de activación la reacción se desarrolla de forma descontrolada y espontánea y toda la energía producto de la reacción es liberada como calor, mientras que en la respiración un porcentaje es capaz de ser aprovechado para generar ATP. Las enzimas bajan la energía de activación de las reacciones. La energía de activación de la mayoría de las reacciones necesarias para el funcionamiento del metabolismo de un ser vivo son muy altas para poder suceder a la 3 Guía N° 5 2012 velocidad requerida para mantener el equilibrio dinámico interno de un organismo. El papel de las enzimas es bajar la energía que necesitan éstas reaccionen para que pueden suceder a la velocidad requerida y bajo las limitantes de aporte energético de un organismo. Por lo tanto las enzimas catalizan reacciones que son termodinámicamente posibles sólo afectando la velocidad en que ocurren, sin afectar el equilibrio natural de la reacción. Figura 3.Representación gráfica de la disminución de la energía de activación. Interacción enzima sustrato Ya conocemos de forma conceptual el trabajo de una enzima dentro del metabolismo de un organismo, y cómo se explica desde un punto de vista termodinámico, sin embargo esta actividad además posee un fundamento basado en que, para lograr el objetivo de bajar la energía de activación de una reacción química, la enzima debe interaccionar físicamente con los sustratos, y esta interacción será determinada por la estructura que adquiera la enzima funcional. Las enzimas por corresponder a macromoléculas proteicas están compuestas por aminoácidos ensamblados de forma lineal, pero que posteriormente y debido, ya sea a interacciones espontaneas entre los aminoácidos que la componen, o modificaciones post traduccionales específicas, adquieren una estructura terciaria o cuaternaria específica. 4 Guía N° 5 2012 Una enzima dentro de su estructura funcional posee un sitio específico de unión al sustrato que cataliza, lo que se conoce como sitio activo y es resultado del plegamiento de la cadena poli peptídica. Este sitio activo puede consistir solamente de aminoácidos o poseer sustancias inorgánicas no proteicas denominadas cofactores. Estos cofactores pueden ser iones de Magnesio (Mg++), Calcio (Ca++) o Potasio (K+) y son el elemento funcional fundamental de algunas enzimas. Junto con la cofactores algunas enzimas además necesitan del trabajo conjunto con moléculas orgánicas no proteicas denominadas coenzimas que por ejemplo pueden funcionar aceptando los electrones que se liberan en la reacción catalizada, para ser utilizados posteriormente en otros procesos celulares. La unión del sitio activo con el sustrato crea un ambiente de cercanía y ordenamiento de las sustancias que reaccionaran, incluso la interacción sitio activo sustrato orienta los reactivos de forma específica enfrentando las zonas reactivas de estos. En una reacción no catalizada la posibilidad de que suceda la reacción está determinada por los movimientos al azar de las moléculas de reactante y la probabilidad de que estas choquen y además lo hagan con la energía suficiente para suplir la energía de activación y formar el complejo activado. Todo este factor azar es reducido en las reacciones catalizadas, reduciendo de esta manera la energía necesaria para iniciar la reacción. Hipótesis de del ajuste inducido: Uno de los modelos más conocidos que intenta explicar el mecanismo de catálisis por medio de la interacción enzima sustrato por medio del sitio activo es la denominada de “llave – cerradura” en donde el sustrato es la llave que calza de forma específica en el sitio activo, que representaría a la cerradura. Sin embargo estudios posteriores permiten proponer que esta relación enzima sustrato, no es tan rígida como la que sucede entre una llave y una cerradura, más bien el sitio activo presentaría cierta flexibilidad que permitiría que frente a la unión con el sustrato este adquiera un leve cambio en su conformación adquiriendo un ajuste mucho mayor con el o los reactantes y además se produciría cierta tensión en las moléculas de reactivo que facilitaría aún más la reacción. A continuación se representa una reacción de hidrólisis de una molécula de sacarosa en sus componentes, glucosa y fructuosa, mediante el modelo de ajuste inducido. 5 Guía N° 5 2012 Figura 4. Mecanismo de ajuste inducido. Junto con la interacción enzima sustrato se muestra en que momento del proceso se reduce la energía de activación de la reacción de hidrólisis de la molécula de sacarosa: (1) La energía de activación se encuentra en niveles normales, (3) La unión enzima sustrato disminuye la energía de activación. Regulación de la actividad enzimática Cómo todo proceso que sucede dentro de los límites de un organismo, está sometido al control de su actividad en función de reducir el gasto innecesario de recursos y realizar la síntesis o degradación de compuestos en el momento y en la medida adecuada para no generar efectos nocivos en el organismo. Disponibilidad de enzima, sustrato y cofactores Evidentemente, lo fundamental para una reacción enzimática es que esté presente tanto la enzima catalizadora como el sustrato a reaccionar. En el caso de las enzimas que requieren cofactores para llevar a cabo la catálisis, la disponibilidad de estos elementos anexos servirá como mecanismo de control para activar o desactivar la catálisis. Temperatura y pH Si bien la temperatura acelera las reacciones, las proteínas son susceptibles a ser desnaturalizadas cuando la temperatura sobrepasa cierto nivel, al recordar que la catálisis depende de la conformación de una estructura del sitio activo específica, resulta evidente pensar que cualquier cambio en la conformación producto de la desnaturalización dejará a la enzima inactiva, muchas veces de forma irreversible. 6 Guía N° 5 2012 El pH por su parte afecta a la carga de las moléculas que se encuentran en solución, este cambio de carga debido al pH también puede cambiar la forma como se interrelacionan los aminoácidos que componen a la proteína, causando una distribución espacial de éstos, distinta a la presente en la proteína funcional. Interacciones alostéricas Enzimas que presentan otro sitio de unión específica para otra molécula aparte del sitio activo para el sustrato se podrán controlar mediante la unión de la segunda molécula a este sitio, lo que causará una modificación de la estructura de la enzima inhibiendo la catálisis. Una versión bastante “ingeniosa” de este sistema corresponde al caso en donde la molécula que se une al sitio alostérico es el producto de la catálisis de la enzima, por lo tanto a medida que la reacción se lleva a cabo el producto se acumula, se une al sitio alostérico de la enzima y de esta forma inhibe por sí mismo su producción, mecanismo que recibe el nombre de feedback negativo, o retroalimentación negativa. Inhibición competitiva En este caso, otra molécula (I) distinta al sustrato compite por el sitio activo de la enzima (E), bloqueando físicamente la unión del sustrato . Inhibición no competitiva El inhibidor se une a un sitio distinto al activo produciendo un descenso en la actividad de la enzima o la inactivación total de esta. Inhibición irreversible La molécula inhibitoria se une de manera permanente a zonas clave del sitio activo, bloqueando la actividad de la enzima. 7 Guía N° 5 2012 MUTACIONES Dejando de lado la concepción fantástica asociada al concepto de mutación, podemos definirlas como cualquier cambio en el genotipo de un organismo que se verá reflejado en la expresión de sus características, o fenotipo existiendo la posibilidad de que sean heredadas a la descendencia. Le herencia de las mutaciones dependerá si estas son somáticas o germinales. Si recordamos, las células de un organismo con reproducción sexual se dividen en dos grandes categorías, las somáticas que comprenden todas las células que forman los tejidos de un organismo y están sometidas a ciclos de crecimiento, división y apoptosis. Por otra parte las células germinales corresponden a los gametos, cuya función será la formación de un nuevo individuo como resultado del proceso reproductivo, perpetuando así la información genética aportada por los organismos parentales. Por lo tanto toda mutación genética ocurrida en las células somáticas sólo tendrá consecuencias en el organismo en que ésta ocurrió, en cambio, las que afecten a las células germinales de un individuo serán traspasadas a la descendencia. Correspondiendo estas a las de importancia evolutiva. Las mutaciones pueden ser beneficiosas o perjudiciales para el organismo dependiendo del contexto en que éste se encuentre y la magnitud de la mutación, sin embargo lo esencial reside en que es un fenómeno que aporta variabilidad a las poblaciones, proponiendo variaciones en el prototipo de los organismos, propuesta que será exitosa o no, manteniendo de esta forma la rueda de la evolución en movimiento. Mutaciones de pérdida y ganancia de función Cómo vimos anteriormente la funcionalidad de una proteína depende de que la secuencia de aminoácidos que la componen haya sido ensamblada de forma correcta y eso a su vez depende que la información contenido en el ADN sea la correcta, por lo tanto cualquier modificación que altere de tal forma la secuencia genómica, que se 8 Guía N° 5 2012 cambie la secuencia proteica resultado de la traducción, generará una proteína no funcional y por lo tanto una pérdida de función. El caso de ganancia de función resulta mucha más extraño, pero en caso de que la modificación sea tal que genere un producto proteico coherente y con una función específica, será tarea de la selección natural la permanencia en el tiempo de este carácter nuevo. Mecanismos de mutación La ADN polimerasa, enzima encargada de la replicación de ADN comete errores en la copia de las cadenas, y a pesar de que posee la capacidad de corregir los errores de copia que comete, el sistema no es infalible y por lo tanto pueden persistir algunas bases erróneamente colocadas en comparación con la hebra de ADN molde. La probabilidad de que ocurran este tipo de modificaciones del genoma es de 10-14 en organismos diploides. Éste tipo de mutación se denomina espontanea por su carácter intrínseco al mecanismo de replicación. En contraparte un organismo puede ser sometido al contacto con sustancias químicas o elementos radioactivos que interaccionan con las bases nitrogenadas causando ruptura y modificaciones irreversibles en la doble hebra de AND. Por el hecho de que estas modificaciones son producidas por agentes externos se denominan inducidas. Dentro de las mutaciones, aquellas que involucren cambios de bases, se pueden clasificar en transiciones y transversiones. Una transición se denomina la situación en la cual una purina se cambia por otra purina o una pirimidinas se reemplaza por otra pirimidinas. En el caso de las transversiones se cambios purinas por pirimidinas y viceversa. Aparte de existir la posibilidad del cambio entre bases, también es posible que ciertas bases o segmentos sean incluidos o eliminados (deleción) de la secuencia, que se realice una inversión en el sentido de un fragmento o que fragmentos sean traspuestos 9 Guía N° 5 2012 de su localización original a otras zonas cercanas del genoma. Así como podemos clasificar el tipo de mutación, también podemos caracterizar el resultado de estas mutaciones, es así como una mutación que modifique una base nitrogenada de un codón pero que el triplete resultante codifique para el mismo aminoácido producirá una mutación silenciosa ya que no tendrá ningún efecto sobre el proceso de traducción. Figura 7. Mutación silenciosa en donde se produce un cambio de bases, pero esto no genera un cambio en el aminoácido correspondiente gracias a que, como sabemos, en el código genético más de un codón distinto codifica para el mismo aminoácido. Si el cambio de base genera un codón que codifica para un aminoácido con propiedades químicas similares al aminoácido original, la mutación se denominará neutra, ya que si bien genera un cambio en la secuencia proteica, no produce cambios notorios en su funcionalidad. Por ejemplo: AAA(lisina)→AGA(arginina). Ambos son aminoácidos básicos Si se genera un codón que codifica para un aminoácido que difiere en propiedades estructurales y químicas se genera una mutación de cambio de sentido en donde se produce una proteína no funcional. Si se da el caso de que el cambio de base genera un codón de término dentro de la secuencia del gen, se denomina como mutación sin sentido ya que el gen no podrá ser transcrito en su totalidad debido a que el codón de término producto de la mutación ordenará la detención del proceso en forma prematura. Por último la inserción o eliminación de bases en números no múltiplos de tres provocará un cambio en el marco de lectura de los tripletes generando una secuencia totalmente distinta a la original fig8. 10 Guía N° 5 2012 Figura 8. Cambio del marco de lectura. La eliminación de bases no múltiplos de tres provoca que la secuencia de tripletes se vea alterada, modificando en su totalidad la secuencia aminoacídica Mutaciones cromosómicas Cuando una mutación genética implica anormalidades en cuanto al número total de cromosomas o su estructura y es tan severa que se puede detectar en un cariotipo, estamos frente a una mutación cromosómica. Errores en la repartición de los cromosomas ya sea de forma parcial o total, durante la mitosis o meiosis, generará células hijas con cromosomas de más mientras otras presentarán una dotación incompleta. En el caso de los gametos, la falta de un cromosoma (Aneuploidía) o más, excepto el cromosoma sexual, generara un gameto no funcional que no será capaz de generar un embrión viable. Por el contrario los individuos con cromosomas extra (Poliploidia) pueden generar embriones viables que en reducidos casos podrán crecer hasta la madurez presentando algún tipo de enfermedad como por ejemplo el Síndrome de Down, en donde la trisomía del cromosoma 21 causa un conjunto de síntomas físicos y mentales característicos en individuo que la presenta, el Síndrome de Klinefelter que afecta a los hombres y consiste en un cromosoma X extra, o el Síndrome de Turner presente en las mujeres y consiste en la falta del cromosoma Y, por esto se determina el fenotipo femenino en todos los casos, donde se observa infertilidad y un aspecto femenino de por vida. El reordenamiento, delación o adición de segmentos cromosómicos también son una causa de algunas enfermedades genéticas. Estos movimientos inter o intra 11 Guía N° 5 2012 cromosomales se denominan translocaciones y se deben a rupturas en los cromosomas y la posterior osterior reorganización de los fragmentos producidos producidos. INGENIERÍA ÍA GEN GENÉTICA Y BIOTECNOLOGÍA BIOTECNOLOG Es la ciencia biológica gica que trata de la ma manipulación n de los genes. La aplicación de los conocimientos de la ingenería genét genética ca constituye la biotecnologí biotecnología. Se abre así la posibilidad de modificar la informació información genética tica de las especies para combatir enfermedades, o bien en para diseñar plantas y animales animales más resistentes o con características muy específicas. ficas. Entre los procedimientos utilizados por esta disciplina para manipular la información genética se encuentra la tecnología del ADN recombinante. recombinante Este procedimiento se basa en la incorporación de genes de una especie en parte del genoma (conjunto de genes) de otra especie. De esta manera, una característica presente en una especie puede ser “incorporada” en organismos de otra especie. A los organismos que han sido modificados a través de esta práctica, sse les denomina “organismos transgénicos”. 12 Guía N° 5 2012 ¿Cómo se originan los organismos transgénicos? El proceso se inicia con el aislamiento del gen que se desea incorporar a un organismo. Para esto se usan enzimas de restricción, de origen bacteriano, capaces de reconocer secuencias cortas de ADN y cortarlo en lugares específicos. Una vez que el gen ha sido aislado de las células, es necesario multiplicar su número de copias. Para esto, el gen aislado es incorporado al citoplasma de bacterias, lo que se logra adicionando el ADN a medios de cultivo bacteriano. Cada vez que una bacteria se divide, replica también el gen incorporado, de manera que a partir de unas pocas copias del gen, se obtienen cientos de miles de nuevas copias. Las copias obtenidas del gen son extraídas desde las bacterias, para ser introducidas en las células del organismo que se desea manipular genéticamente. Actualmente, y como se muestra en el esquema, existen diversas técnicas para introducir las copias del gen en las células receptoras. 1. Proyectiles. Se “disparan” pequeñas esferas de material sólido, que ingresan a la célula y que llevan consigo copias del gen foráneo. 2. Inyección. El ADN se inyecta en las células a través de agujas muy finas. 3. Difusión. El gen puede atravesar la membrana plasmática y llegar hasta el núcleo. 4. Virus. Los virus se caracterizan por “inyectar” su ADN en las células. 13 Guía N° 5 2012 Aplicaciones de la tecnología del ADN recombinante Una vez en el núcleo celular, el segmento de ADN manipulado puede incorporarse al genoma de la célula receptora. Si la incorporación del gen se realiza en unas pocas células de un organismo ya adulto, entonces el gen foráneo se encontrará en todas las células hijas de aquellas que llevan consigo dicho gen. En cambio, si esta célula corresponde a un huevo fecundado, entonces el gen incorporado se encontrará en todas las células del organismo adulto. Pero, ¿Qué sucede con estos genes foráneos en las células receptoras y en sus células hijas? La tecnología del ADN recombinante presenta una gran gama de posibilidades de mejoramiento de plantas y animales para beneficio del ser humano. Por ejemplo, pueden incorporarse genes que codifiquen para una proteína, en bacterias o en animales, de manera que los organismos transgénicos pueden transformarse en verdaderas “fábricas” de proteínas de nuestro interés. Los productos transgénicos, ¿son tan beneficiosos como los productos naturales? Si bien la biotecnología permite el mejoramiento de ciertas características de plantas y animales, se debe tener en consideración que los productos transgénicos son artificiales, por lo tanto, aún queda por establecer si constituyen algún tipo de riesgo para nuestra salud. Uno de los problemas que se ha detectado en los animales y plantas transgénicos es el efecto de los genes insertados, sobre el metabolismo de las células. Una nueva proteína, por ejemplo, podría eventualmente producir una alteración en las vías metabólicas de la célula, generándose un conjunto de nuevos compuestos químicos que no se encuentran, de manera natural, en estos organismos. 14 Guía N° 5 2012 Impacto sobre el ecosistema Grandes extensiones de terreno han sido utilizadas para el cultivo de plantas transgénicas, por lo que algunos ecologistas han planteado la necesidad de estudiar el impacto que podrían tener sobre el ambiente los cultivos de estas plantas. Por otro lado, muchas de estas plantas son resistentes a insectos que constituyen plagas, los que se ven afectados negativamente, al igual que los organismos que se alimentan de ellos. (Fuente Biotecnología: Santillana) 15 Guía N° 5 2012 ¡Prepárate para la PSU! Analiza y resuelve las siguientes preguntas tipo PSU. Recuerda siempre leer atentamente: 1. El síndrome de Down es un caso de: A) Aneuplodía. B) Poliploidía. C) Recombinación génica. D) Mutación génica. E) Ligamiento. 2. La generación de diversidad génica, es decir, formación de nuevos genes alelos, es posible por: I. Permutación cromosómica. II. Crossing over. III. Mutación. A) Sólo I B) Sólo II C) Sólo III D) I y III E) II y III 3. Una mujer debe evitar tomarse radiografías durante el primer trimestre de embarazo, porque los rayos X: A) Producen mutaciones en los cromosomas sexuales del embrión que alteran su sexo. B) Producen malformaciones causadas por mutaciones somáticas en el embrión. C) Producen mutaciones en la madre que pueden pasar al embrión. D) Retardan el crecimiento del embrión. E) Alteran los gametos de la madre. 16 Guía N° 5 2012 4. A partir del siguiente esquema, se puede afirmar de las enzimas: A) Disminuyen la energía de activación de las reacciones químicas. B) No modifican su estructura durante la reacción química. C) Favorecen la especificidad de las reacciones químicas. D) Todas son constituyentes de vías metabólicas. E) Participan en reacciones irreversibles. 5. Respecto de las mutaciones, señale la alternativa INCORRECTA: A) Corresponden a cambios en la secuencia de bases nitrogenadas a nivel de ADN. B) Pueden llevar a codones sinónimos (codifican para el mismo aminoácido). C) Siempre confieren mejoras metabólicas. D) Son el principal mecanismo de cambio evolutivo en los seres asexuados. E) Se heredan siempre que afecten las células gaméticas. 6. Dentro las mutaciones cromosómicas se encuentran las aneuploidias, ejemplo(s) de este tipo de aberración cromosómicas es(son): I. Monosomía. II. Poliploidía. III. Trisomía. IV. Translocación. A) Sólo II B) I y III C) II y IV D) I, III y IV E) I, II, III y IV 17 Guía N° 5 2012 7. En el citoplasma de una célula se encuentran una gran diversidad de enzimas. Una determinada enzima consigue catalizar una reacción si: I. Se une en forma específica pero no covalente al sustrato. II. Es sintetizada en la zona en que se encuentra el sustrato. III. Su tamaño es proporcional al tamaño del sustrato. A) Sólo I B) Sólo II C) Sólo III D) I y III E) II y III 8. ¿Cuáles de las siguientes características pueden ser heredadas? A) Aptitudes mentales desarrolladas por los padres. B) Mutaciones en las células que originan los gametos. C) Habilidades atléticas desarrolladas por una práctica intensiva. D) Mutaciones del ADN de cualquiera célula somática en el organismo. E) Todas las anteriores. 9. Según el Principio de Hardy-Weinberg, el conjunto de genes de una población permanecerá estable a través de las generaciones si: I. La población es numerosa. II. Ocurren muchas mutaciones. III. Los individuos se aparean al azar. A) Sólo I B) Sólo II C) I y II D) I y III E) II y III 10. El proceso por el cual las células en meiosis intercambian material genético entre cromátidas no homólogas, corresponde a: A) Crossing-over o entrecruzamiento. B) Mutación por deleción. C) Translocación cromosómica. D) Mutación por inversión. E) Permutación cromosómica. 18 Guía N° 5 2012 11. En un cultivo celular se produjo una mutación puntual, que afectó a un nucleótido en una determinada posición de un gen, sin embargo, la proteína codificada por este gen apareció sin ninguna alteración. Esto se puede deber a que: I. El código genético es universal. II. El código genético es degenerado o redundante. III. La mutación fue hecha en un intrón. IV. La mutación fue hecha en un exón. A) Sólo III B) I y II C) I y III D) II y III E) II y IV 12. Las enzimas de restricción son de origen ___________________ y se usan en ____________________. Los términos que completan correctamente son: A) Viral – inmunología. B) Viral – biotecnología. C) Bacteriano – inmunología. D) Bacteriano – biotecnología. E) Eucarionte – farmacología. 13. El veneno de algunas especies de cobra puede ser dañino porque contiene enzimas que destruyen los glóbulos rojos o tejidos. De acuerdo al mecanismo descrito, el efecto del veneno podría ser inhibido: I. Induciendo el vómito. II. Bebiendo gran cantidad de agua. III. Aplicando hielo sobre el sitio de la mordedura. A) Sólo I B) Sólo II C) Sólo III D) I y III E) II y III. 19