Placas de Petri Agar Cromogénico Coliformes/E. coli Producto Los Placas de Petri Cromogénico conteniendo Coliformes / medios de cultivo tradicionales Agar utilizados para la detección de coliformes/ E. coli. coli a menudo contienen sales biliares para E. ARAVANLABS le suministra el pack de placas inhibir ya preparadas empacadas en triple bolsa fuertes inhibidores, sin embargo, pueden totalmente limitar selladas. Cada placa está individualmente protegida con esterilizado óxido etileno. por de parafilm Este Bacterias el gram-positivas. crecimiento Estos de los microorganismos de interés que ya están sub letalmente dañados. embalaje prolonga la vida útil del medio de cultivo contenido en las placas, evitando la Se requiere una cuidadosa selección de los deshidratación inhibidores utilizados en el medio selectivo y contaminación. En el proceso de fabricación se utilizan todos los para materiales estériles. Este proceso garantiza recuperación su estabilidad y permite poder entrar el dañados. El Agar Cromogénico Coliformes / material en salas blancas sin riesgo de E. introducir contaminación. inhibidor de las bacterias Gram-positiva y no Uso asegurar coli el de estos contiene tiene crecimiento crecimiento de la la microorganismos Tergitol®7 negativo y efecto coliformes como un sobre / E. el coli objetivo. Por lo tanto, Agar Cromogénico El Agar Cromogénico Coliformes / E. coli es Coliformes / E. coli es el medio ideal para la un medio de cultivo cromogénico selectivo y detección de estas bacterias en muestras de diferencial destinado al uso en laboratorios agua potable y los alimentos procesados de microbiología que analizan alimentos y agua. A las 24 horas de incubación este Fundamento medio permite la detección, diferenciación y enumeración de E. coli y coliformes del agua Las peptonas seleccionadas, el piruvato, el potable y los alimentos procesados. sorbitol y la solución tampón de fosfato promueven el rápido crecimiento. El Durante el procesamiento de fabricación de crecimiento de las bacterias Gram-positivas, alimentos y agua a menudo se lesionan y algunas Gram-negativas se inhibe por la metabólicamente los microorganismos. presencia Mail: [email protected] Cel.: (+598) 92 746 190 www.aravanlabs.com.uy de Tergitol®7, que no tiene 1 ningún efecto negativo sobre las bacterias Se distribuyó en placas de Petri estériles en coliformes. condiciones asépticas controladas por monitoreo ambiental. Cada placa de Petri La combinación cromogénicos de permite dos sustratos fue sellada la detección esterilizado. con parafilm previamente simultánea de coliformes totales y E. coli. Características del producto Se recomienda la adición de suplementos de antibióticos si se sabe que la muestra tiene Placas alto nivel de flora (especialmente si se cromogénico espera ligeramente opalescente y amarillento. presencia de especies de de Petri es conteniendo un medio de agar cultivo Aeromonas). Almacenamiento El sustrato Salmon-GAL se utiliza para la identificación de β-D-galactosidasa, que es Almacenar placas de Petri conteniendo agar característica cromogénico a 2-8ºC con tapa hacia abajo. para coliformes. Esta interacción resulta en colonias coliformes de color rojo. Procedimiento El sustrato X-glucurónido se utiliza para la Recuento por siembra identificación de β-D-glucuronidasa, que es En superficie: inocular 0,1 mL de muestra. característica para E. coli. Esta bacteria Esparcir con rastrillo. escinde tanto Salmón-GAL como X- glucurónido, por lo que las colonias positivas Aislamiento por agotamiento E. coli adquieren un color azul oscuro- Siembra por estría: Se inocula la muestra violeta. Distinguiéndose fácilmente de otras sobre un extremo de la placa con un ansa y colonias se de coliformes, que tienen un salmón al color rojo. extiende formando estrías sobre la superficie en varios sentidos. Preparación Control ambiental Se suspendieron 26,5 g de medio de cultivo Para realizar un monitoreo ambiental por en 1000 ml de agua purificada. Se calienta a método de sedimentación se debe retirar la ebullición con agitación frecuente hasta que tapa de la placa de Petri y colocarla debajo. esté completamente disuelto (Aprox. 35 Dejar min) sin sobrecalentar. Inmediatamente se ambiente que se desea controlar un tiempo enfrió el medio en el baño de agua a 45- no extremadamente largo para evitar que se 50°C. Se controló pH: 6,8 ± 0,2 a 25 ° C. deshidrate la superficie de la placa. Mail: [email protected] Cel.: (+598) 92 746 190 www.aravanlabs.com.uy el medio de cultivo expuesto al 2 Los resultados se expresan en 2 u.f.c/cm /hora. Para muestras con alta carga microbiana deben utilizarse antibióticos (aprobado para las pruebas de agua). Incubación Incubar las placas aeróbicamente a 35-37° Algunas cepas de Aeromonas spp. pueden C en posición invertida (agar hacia arriba) crecer durante 24 horas. Después de la incubación, coliformes). las placas para examinar la presencia de fácilmente diferenciados de coliformes por la colonias típicas de E. coli y otros coliformes. reacción de color rojo (similar Aeromonas de oxidasa. a los pueden ser Coliformes son oxidasa-negativos mientras que aeromonas Interpretación de resultados son oxidasa-positivo. Las colonias de E. coli se identifican como aquellas de color azul oscuro- violeta. Las colonias de coliformes se identifican como colonias rojas. Las placas inoculadas con muestras de alimentos pueden producir colonias poco características que son difíciles de enumerar. Precauciones -Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo. - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro, Coliformes E. coli así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - Utilizar ropa protectora cuando se manipula el producto. Limitaciones Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipularlas apropiadamente siguiendo las normas de El Agar Cromogénico Coliformes / E. coli bioseguridad establecidas por el laboratorio. está diseñado para el crecimiento de rápido - Las características del producto pueden de colonias, incluso para sub coliformes alterarse si no se conserva apropiadamente. letalmente herido. La selectividad de la base - Descartar el producto que no ha sido de medio de agar es limitado. Las muestras utilizado y los desechos del mismo según con reglamentaciones vigentes. una alta carga microbiana pueden conducir al crecimiento excesivo. Mail: [email protected] Cel.: (+598) 92 746 190 www.aravanlabs.com.uy 3 Indicaciones al consumidor ISO International Organisation. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento. Standardisation Microbiology of food and animal feeding stuffs - General rules for microbiological examinations. ISO 7218:1996/Amendment 1:2001. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo. ISO International Organisation. Standardisation Microbiology of food and animal feeding stuffs - Preparation of test Referencias samples, initial suspension dilutions for microbiological and decimal examination. American Public Health Association. 1995. Part 1: General rules for the preparation of Standard methods for the examination of the initial suspension and decimal dilutions. water and wastewater, 19th ed. American ISO 6887-1:1999. Public Health Association, Washington, D.C., USA. ISO International Standardisation Organisation. Water quality - Sampling. Part Byamukama, D., Mach, R.L., Kansiime, F., 1: Guidance on the design of sampling Manafi, M., and A.H. Farnleitner. 2005. programmes and sampling techniques. ISO Discrimination Efficacy of Fecal Pollution 5667-1:2006. Detection in Different Aquatic Habitats of a High-Altitude Tropical Country, Using Presumptive Coliforms, Escherichia coli, and Clostridium perfringens Spores. Appl. Environ. Microbiol. 71: 65-71. Geissler, K., Manafi, M., Amoros, I., and J.L. Alonso. 2000. Quantitative determination of total coliforms and Escherichia coli in marine waters with chromogenic and fluorogenic media. J. Appl. Microbiol. 88: 280-285. Gonzalez, R.D., Tamagnini, L.M., Olmos, P.D., and G.B. de Sousa. 2003. Evaluation of a chromogenic medium for total coliforms and Escherichia coli determination in readyto-eat foods. Food Microbiology 20: 601604. Mail: [email protected] Cel.: (+598) 92 746 190 www.aravanlabs.com.uy 4