Medio EC - EC Medium Product Information Page

Anuncio
MEDIO EC – EC MEDIUM (7206)
Propósito de Uso
El Medio EC es utilizado para la detección de bacterias coliformes a 37°C y Escherichia coli a elevadas
temperaturas (44,5°C y 45,5°C).
Resumen y Explicación del Producto y Explicación
El Medio EC fue desarrollado por Hajna y Perry1 en un esfuerzo por mejorar los métodos para la detección
de bacterias del grupo de coliformes y de E. coli. Este medio consiste de un caldo tamponado de lactosa con
la adición de un 0,15% de una Mezcla de Sales Biliares. El crecimiento de las bacterias formadoras de
esporas y estreptococos fecales es inhibido por las sales biliares, mientras que el crecimiento de E. coli es
intensificado por su presencia. Este medio puede ser utilizado a 37°C para la detección de organismos
coliformes o a una temperatura de 44,5°C o 45,5°C para el aislamiento de E. coli.
El Medio EC es utilizado en pruebas a elevadas temperaturas para la diferenciación de organismos del grupo
de coliformes que pertenecen también al grupo de coliformes fecales.2 La prueba para coliformes fecales,
utilizando el Medio EC es aplicable para investigaciones en agua potable, contaminación de arroyos, fuentes
de agua bruta, sistemas de tratamiento de aguas residuales, aguas de baño, aguas del mar y monitoreo
general de la calidad del agua. El Medio EC es utilizado en la prueba de NMP (Número más probable) para
coliformes fecales. El Medio EC no debe ser usado para el aislamiento directo de coliformes; previo al
enriquecimiento en medios presuntivos es requerido para la recuperación óptima de coliformes fecales. El
Medio EC es utilizado en métodos para el análisis de alimentos y de la calidad del agua.2-5
Principios del Procedimiento
La triptosa es una mezcla de digerido enzimático de proteína, suministra nitrógeno, vitaminas y aminoácidos
al Medio EC. La lactosa es la fuente de carbono. La Mezcla de Sales Biliares es el agente selectivo contra
las bacterias Gram-positivas, particularmente bacilos y estreptococos fecales. El Fosfato Dipotásico y el
Fosfato Monopotásico son los agentes de tamponado. El Cloruro de Sodio mantiene el balance osmótico del
medio.
Fórmula / Litro
Triptosa ................................................................................... 20 g
Lactosa ..................................................................................... 5 g
Mezcla de Sales Biliares ........................................................ 1,5 g
Fosfato Dipotásico .................................................................... 4 g
Fosfato Monopotásico............................................................ 1,5 g
Cloruro de Sodio ....................................................................... 5 g
pH Final: 6,9 ± 0,2 a 25°C
La fórmula puede ser ajustada y/o suplementada de acuerdo a los requerimientos para cumplir con las especificaciones de
rendimiento o desempeño.
Precauciones
1. Para uso en el laboratorio.
2. IRRITANTE. Irritante para los ojos, piel y sistema respiratorio.
Procedimiento
1. Disuelva 37 g del medio en un litro de agua purificada.
2. Mezcle completamente.
3. Distribuya dentro de los tubos Durham que contienen fermentación invertida.
4. Autoclave a 121°C durante 15 minutos.
PI 7206 Rev 9 diciembre 2015
Especificaciones de Control de Calidad
Apariencia del Deshidratado: Polvo suelto homogéneo, color beige claro
Apariencia del Preparado:
Medio preparado es de color brillante a claro
Solución al 1X:
Dorado
Solución al 2X:
Color naranja ámbar mediano a oscuro
Precipitado:
Ninguno a poco (mínimo)
Respuesta Esperada del Cultivo: Con referencia al Capítulo 4 de la FDA/BAM, Enumeración de Bacterias
Coliformes y Escherichia coli (actualización Feb/2013) y la Asociación Americana para la Salud Pública
(APHA, American Public Health Association) Métodos Estándar para la Evaluación de Agua Potable y Aguas
Residuales, Edición 20ava Sección 9221 (APHA Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater). Pueden seguirse dos métodos de inoculación, a saber:

Inoculación directa de las cepas de prueba en el Medio EC con incubación a 35 ± 2°C y a 44,5 ±
0,2°C. Incube los cultivos en una atmósfera aeróbica a las temperaturas indicadas y luego examine
para determinar crecimiento y la presencia de gas a las 24 ± 2 horas; si no hay presencia de gas reincube por 48 ± 3 horas para confirmar la presencia de gas.

Pre-enriquecimiento de las cepas de prueba en Caldo Lauril Triptosa (LTB, Lauryl Tryptose Broth,
por sus siglas en inglés) a 35 ± 2°C. Si no se presenta crecimiento/gas después de haber
transcurrido 24 horas, re-incube hasta por 48 horas y transfiera con el asa de siembra el cultivo
enriquecido de LTB al Medio EC e incube aeróbicamente en un baño maría a 44,5°C y 45,5°C.
Examine para determinar crecimiento y presencia de gas luego haber transcurrido de 24 ± 2 horas;
si no hay presencia de gas re-incube por 48 ± 3 horas para confirmar la presencia de gas.
RESULTADOS ESPERADOS
MICROORGANISMO
ATCC
INÓCULO
APROXIMADO
(UFC)
Inoculación Directa en
Medio EC a 35°C /44,5°C
Pre-enriquecimiento con
LTB a 35°C; Medio EC a
44,5°C /45,5°C
Crecimiento
Gas
Crecimiento
Gas
Bueno a
excelente a
35°C; de
ningún a
pobre
crecimiento a
44,5°C
± a 35°C
-a
44.5°C
Ninguno a
bueno
–
Enterobacter aerogenes
13048
10–300 para 35°C;
10–300 para 44,5°C;
10–100 para
enriquecimiento con
LTB
Enterococcus faecalis
29212
103
Inhibido
N/A
Inhibido
N/A
Escherichia coli
25922 o
8739 o
11775
10–300 para 35°C;
103 para 44,5°C;
10–100 para
enriquecimiento con
LTB
Bueno a
excelente
+
Bueno a
excelente
Débil + a
+
Los organismos listados son los mínimos que deben ser evaluados para propósitos de análisis y pruebas de control de calidad.
PI 7206 Rev 9 diciembre 2015
Procedimiento de la Prueba
Referirse a las referencias adecuadas para los procedimientos específicos utilizando el Medio EC.2-5
Resultados
La producción de gas debido al crecimiento de bacterias en el Medio EC dentro de las 48  3 horas o menos
se considera como una reacción positiva de coliformes fecales. En caso de ausencia de gas con ausencia
de crecimiento o con poco crecimiento se considera como una reacción negativa.2
Almacenamiento
Almacene el envase conteniendo el medio de cultivo deshidratado sellado firmemente y a una temperatura
entre 2–30°C. Una vez abierto y cerrado nuevamente, coloque el envase en un ambiente con baja humedad
a la misma temperatura de almacenamiento. Proteja el producto de los efectos de la humedad y de la luz
manteniendo el envase firmemente cerrado.
Expiración
Referirse a la fecha de expiración estampada en el envase. El medio de cultivo deshidratado debe ser
desechado si no fluye libremente, o si su apariencia ha cambiado a partir del color original. La expiración
aplica para el medio de cultivo que haya sido almacenado en su recipiente intacto, original y bajo las
condiciones indicadas.
Limitaciones del Procedimiento
Debido a las variaciones en los requerimientos nutricionales, algunas cepas podrían tener un pobre
crecimiento o ausencia de crecimiento en este medio de cultivo.
Empaque
Medio EC
EC Medium
Código No.
7206A
7206B
7206C
500 g
2 kg
10 kg
Referencias
1.
2.
3.
4.
5.
Hajna and Perry. 1943. Am J. Public Health. 33:550.
Eaton, A. D., L. S. Clesceri, and A. E. Greenberg (eds.). 1998. Standard methods for the examination of water and wastewater,
20th ed., American Public Health Association, Washington, D.C.
Cunnif, P. (ed.). 1995. Official Methods of Analysis AOAC International, 16th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD.
Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser (eds.). 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 3 rd
ed. American Public Health Association, Washington, D.C.
FDA/BAM Chapter 4 Enumeration of E. coli and the Coliform Bacteria updated 2/2013; www.fda.gov
Información Técnica
Para preguntas relacionadas con la preparación o el rendimiento de los medios de cultivo deshidratados o para contactar al
Departamento de Servicios Técnicos, comuníquese con Acumedia Manufacturers, Inc. al teléfono (517) 372-9200 o al fax (517) 3722006.
PI 7206 Rev 9 diciembre 2015
Descargar