MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Código: LAB-PO-01

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
UNIDAD DE ADMINISTRACIÓN TALLERES Y
LABORATORIOS
PROGRAMA INDIVIDUAL DE PRÁCTICAS
Código:
LAB-PO-01-01
Revisión: 1
Página:
1 de 5
CICLO ESCOLAR: 2013-2014N
NOMBRE DEL DOCENTE: DENYCE OYUQUI MOO PUC
CARRERA(S): IIAL
ASIGNATURA: Microbiología de alimentos
SEMESTRE: 5
GRUPO(S): A
PARCIAL: Primero
NOMBRE DE LABORATORIO O DE LA INSTITUCIÓN EN CASO DE PRÁCTICA
EXTERNA:
NÚMERO Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
No 1 Determinación de microorganismos indicadores. Parte 1 “ lavado y
esterilización de materiales”
FECHA Y HORA PROPUESTA DE LA PRÁCTICA: 11 septiembre de 2013 de 14 a 17
horas
MATERIALES REQUERIDOS: para 6 equipos
Tela de gasa
Papel aluminio
Papel estraza
Vaso de precipitado de 1000ml
Sanitas
Material para la higiene y desinfección de áreas de trabajo.
Cerillo
Espátula
Probeta de 100ml
Cinta maskin
Cinta testigo
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Página:
6 Cajas de petri
3 Pipetas de 1ml
3 Pipetas de 5 ml
3 Pipetas de 10 ml
1 Perilla de seguridad
24 Tubos de dilución con rosca o tapón con torunda
24 Tubos durjan
3 matraces erlenmeyer de 250ml
Agitador magnético
Varilla de vidrio
Gradilla
2 Charolas para contener materiales
EQUIPO REQUERIDO: para 6 equipos
Refrigerador (para almacén de materiales y medios)
Autoclave
SE DEBE ANEXAR LA DESCRIPCIÓN DEL DESARROLLO DE LA PRÁCTICA.
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NOMBRE Y FIRMA DEL DOCENTE.
FECHA DE ENTREGA
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Procedimiento

a. Método para coliformes totales:

Preparamos diluciones hasta 10-3.

Sembramos dos, tres o cinco tubos por cada dilución, según sea el caso.

o
Los resultados se dan en por gr o mL
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o
En el caso de agua se sigue de la otra forma:
o
Cuando se trate de aguas, los resultados se darán por 100 mL.
o
Luego, incubar a 35 ºC ± 1 por 24 h.
o
Realizar la 1ra lectura (determinar la presencia de gas). Ésta se observa en
las campanas.
o
Los tubos que no sean positivos se incuban por otras 24 h más.
o
b. Métodos para coliformes fecales:
o
Para coliformes fecales se utilizan dos métodos:
o
En el Primer Método se cogen los tubos positivos del caldo Lauril Sulfato
Triptosa y se lleva una asada al caldo EC utilizando una asa que tenga 3 mm
de diámetro.
o
Luego, estos tubos se incuban a 45.5 ºC ± 0.2, en baño María con agitación
constante por 24 h.
o
Si hay gas a las 24 o 48 h. es positivo para coliformes fecales.
o
El Segundo Método es la llamada prueba de Mackenzie.
o
En esta se usa el caldo Brila mas agua Peptonada.
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o
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Se parte del caldo MacConkey, los tubos positivos de la prueba de
coliformes totales se siembran en este caldo, si aquí vuelve a salir positivo
se le realizan las dos pruebas sgtes:
o

Sólo se tomará esta prueba como positiva si los dos tubos (caldo Brilla y
caldo Peptonado) resultan positivos.

Al tubo con caldo peptonado se le agrega el reactivo de Kovacs para
hacer la prueba de Indol.

Para ver coliformes termorresistentes, de los tubos que hayan salido
positivos se siembra una asada en agar MacConkey y se aíslan las
colonias características.

De los tubos positivos se los siembra en otros tubos en caldo EC con
campana de Durham.
Preparación de agua peptonada
Peptona 1 g
Cloruro de sodio 8.5 g
Agua 1Litro
Mezclar los ingredientes y ajustar a un ph de 7 con cloruro de sodio .1N
Esterilizar por 15 minutos
http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/lcf/aguilar_g_ae/apendiceC.pdf