Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria PROTOCOLO PARA EL MUESTREO DEL NEMATODO DORADO DE LA PAPA Globodera rostochiensis. Objetivo Inspección y toma de muestras del nematodo dorado de la papa Globodera rostochiensis. Materiales de colecta Pala de jardinero Botas de hule Sales cuaternarias Agua Bolsas de plástico Bolsas de papel (2 Kg) Etiquetas GPS Marcadores de tinta indeleble Libreta para toma de apuntes Lápices Hielera Informe 2009 Diseño de muestreo La toma de muestra se llevara a cabo, cuando el cultivo presente síntomas característicos del patógeno, mediante recorridos quincenales que se realizaran en las rutas establecidas para los estados correspondientes. Cuando la planta presenta síntomas, esta será extraída para observar la presencia de quistes, si presenta quistes similares a los mostrados en la guía de síntomas ocasionados por el nematodo dorado de la papa Globodera rostochiensis. Se procederá a la toma de muestra descrita a continuación: 1. En el caso de parcelas con superficie de una hectárea o menor, la toma de muestras se realiza cada 10 metros, en forma de cuadrícula, abarcando toda la superficie (Fig. 1). En el caso de parcelas mayores a 5 hectáreas, se toman también 30 muestras en forma de cuadrícula, repartidas de manera aleatoria en toda la superficie. 2. Antes del ingreso a la parcela se deben cambiar los zapatos de diario por botas previamente lavadas y desinfectadas, las palas para la toma de muestras deben estar lavadas y desinfectadas previamente. 3. En presencia del cultivo, las muestras se toman junto a la planta, haciendo un perfil de suelo que abarque toda la zona radicular, de éste perfil de suelo se eliminan los primeros 5 cm superficiales y se toman submuestras de 100- 150 grs. aproximadamente, mismos que se colocan en bolsas de plástico. 4. Al final se juntan todas las submuestras tomadas y se revuelven homogéneamente para formar una muestra compuesta, de la cual se toman dos kilogramos que se colocan en doble bolsas de papel, debido a que la bolsa de plástico afecta la viabilidad de los nematodos y por lo tanto los resultados. 5. Se georreferencia la parcela muestreada, tomando al menos 4 puntos por cada parcela. 6 .En presencia del cultivo, buscar plantas con síntomas tales como: crecimiento pobre, enanismo y amarillamiento; para verificar la presencia de este patógeno. 7. El material se debe etiquetar con los datos siguientes: 10 Producto 6 Fig. 1 Esquema general de muestreo para Globodera rostochiensis Fecha Municipio Localidad Nombre del predio Nombre del productor Ubicación geográfica (coordenadas) Material colectado Croquis de ubicación de la parcela. 8 .Al finalizar las labores de toma de muestras se cambian las botas por los zapatos de diario 9. Lavar y desinfectar botas y las palas utilizadas en el proceso de toma de muestras, en la orilla de la parcela. 10. Las muestras se ponen en una hielera para su traslado al laboratorio. Cultivo con síntomas En parcelas con síntomas, además de colectar en los puntos señalados, se tomaran submuestras en cada foco de infección y se homogenizara con el resto de la muestra (Figura 2 y Figura 3). 11 Metodologías de muestreo Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria Muestras de plantas Las muestras deben tomarse de plantas aparentemente sanas y plantas enfermas colectadas en los límites de los focos de infección (entre la zona sana y enferma). Las plantas colectadas deben tener raíz y eliminar el exceso de suelo, sin trozar las raíces. El tamaño de muestra debe de ser de 10 plantas por hectárea. Se deben enviar raíces, no es indispensable que se envíen las plantas con follaje. Las muestras vegetales y de suelo deben enviarse en contenedores diferentes. Recomendaciones Dado que el nematodo dorado, Globodera rostochiensis es fácilmente diseminado a través de las herramientas de trabajo e incluso por medio de la suela de los zapatos, es necesario, el uso de zapatos exclusivos para el ingreso a las parcelas en la toma de muestras, se recomienda el uso de botas, previamente lavadas y desinfestadas. Las desinfestación de las botas se realiza con una solución de agua y sales cuaternarias (1ml de sales cuaternarias (presentación en líquido) por litro de agua). Se sugiere que al arribar a una parcela, se dejen los zapatos antes de ingresar a la parcela a muestrear y se calcen las botas desde el inicio y hasta el final de la toma de muestras. Al finalizar la toma de muestras, se cambian las botas por los zapatos y éstas se vuelven a lavar y desinfestar para su uso posterior, lo mismo en el caso de las palas utilizadas. Es indispensable la eliminación completa de suelo tanto de las palas como de las botas utilizadas. Informe 2009 Evaluación de los nematodos Se evaluará el porcentaje de incidencia únicamente cuando los síntomas son asociados al ataque de nematodos, el cual es la relación entre el número de plantas u órganos vegetales infectados y el número total de plantas u órganos inspeccionados, y se expresa mediante la siguiente fórmula: PI= N° de Unidades Infectadas x 100/ N° total de unidades inspeccionadas (raíz). 12 Huerto Superficie (ha) Lat. Long. GPS No. De plantas Con Síntomas Con Signos Metodologías de muestreo *PI= N° de Unidades Infectadas x 100/ N° total de unidades inspeccionadas Municipio Localidad Localización *Porcentaje de intensidad # de Muestras de Suelo (Kg) Nombre del colector: ____________________ Fecha de colecta:______________________ Entidad Federativa:_______________ Formato 1. Datos, de muestreos realizados para la detección nematodo dorado de la papa Globodera rostochiensis. Producto 6 13