Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria PROTOCOLO PARA LA TOMA DE MUESTRAS DEL NEMATODO ENQUISTADO DE LA PAPA Meloidogyne chitwoodi Objetivo Inspección y toma de muestras del nematodo enquistado de la papa Meloidogyne chitwoodi Informe 2009 Material de colecta Pala de jardinero Botas de hule Sales cuaternarias Agua Bolsas de plástico Bolsas de papel (2 Kg) Etiquetas GPS Marcadores de tinta indeleble Libreta para toma de apuntes Lápices La toma de muestras se llevara a cabo cuando se presenten los síntomas típicos ocasionados por este patógeno, esto se determinara mediante recorridos quincenales, en busca de la presencia de síntomas. Cuando se detecte una planta con síntomas sospechosos del nematodo, esta será extraída para buscar la presencia de signos (Agallas) en el tubérculo (Fig. 1 y 2). Cuando se presenten agallas en el tubérculo y/o raíz se procederá a la toma de muestras como se describe a continuación: 1. En el caso de parcelas con superficie de una hectárea o menores, la toma de muestras se realizará cada 10 metros, en forma de cuadrícula, abarcando toda la superficie (Fig. 3). En el caso de parcelas mayores a 5 hectáreas, se toman también 30 muestras en forma de cuadrícula, repartidas de manera aleatoria en toda la superficie. 2. Antes del ingreso a la parcela se deben cambiar los zapatos de diario por botas previamente lavadas y desinfectadas, las palas para la toma de muestras deben estar lavadas y desinfectadas previamente. 3. En presencia del cultivo, las muestras se toman junto a la planta, haciendo un perfil de suelo que abarque toda la zona radicular, de éste perfil de suelo se eliminan los primeros 5 cm superficiales y se toman submuestras de 100- 150 grs. aproximadamente, mismos que se colocan en bolsas de plástico. 24 4. Al final se juntan todas las submuestras tomadas y se revuelven homogéneamente para formar una muestra compuesta, de la cual se toman dos kilogramos que se colocan en doble bolsas de papel, debido a que la bolsa de plástico afecta la viabilidad de los nematodos y por lo tanto los resultados. 5. Se georreferencia la parcela muestreada, tomando al menos 4 puntos por cada parcela. 6. En presencia del cultivo, buscar plantas con síntomas tales como: crecimiento pobre, enanismo y amarillamiento; para verificar la presencia de este patógeno. 7. El material se debe etiquetar con los datos siguientes: Fig. 3 Esquema general de muestreo para Globodera rostochiensis 25 Metodologías de muestreo Producto 6 Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria Fecha Municipio Localidad Nombre del predio Nombre del productor Ubicación geográfica (coordenadas) Material colectado Croquis de ubicación de la parcela. 1. Al finalizar las labores de toma de muestras se cambian las botas por los zapatos de diario. 2. Lavar y desinfectar botas y las palas utilizadas en el proceso de toma de muestras, en la orilla de la parcela. 3. Las muestras se ponen en una hielera para su traslado al laboratorio. Adicional a la toma de muestras del suelo, de igual forma se deberá tomar muestras de plantas. Las muestras deben tomarse de plantas aparentemente sanas y plantas enfermas colectadas en los límites de los focos de infección (entre la zona sana y enferma). Las plantas colectadas deben tener raíz y eliminar el exceso de suelo, sin trozar las raíces. El tamaño de muestra debe de ser de 10 plantas por hectárea. Se deben enviar raíces, no es indispensable que se envíen las plantas con follaje. Las muestras vegetales y de suelo deben enviarse en contenedores diferentes. Informe 2009 Recomendaciones. Dado que el nematodo dorado, Meloidogynae chitwoodi es fácilmente diseminado a través de las herramientas de trabajo e incluso por medio de la suela de los zapatos, es necesario, el uso de zapatos exclusivos para el ingreso a las parcelas en la toma de muestras, se recomienda el uso de botas, previamente lavadas y desinfestadas. Las desinfestación de las botas se realiza con una solución de agua y sales cuaternarias (1ml de sales cuaternarias (presentación en líquido) por litro de agua). Se sugiere que al arribar a una parcela, se dejen los zapatos antes de ingresar a la parcela a muestrear y se calcen las botas desde el inicio y hasta el final de la toma de muestras. Al finalizar la toma de muestras, se cambian las botas por los zapatos y éstas se vuelven a lavar y desinfestar para su uso posterior, lo mismo en el caso de las palas utilizadas. Es indispensable la eliminación completa de suelo tanto de las palas como de las botas utilizadas. Evaluación de los nematodos Se evaluará el porcentaje de incidencia únicamente cuando los síntomas son asociados al ataque de nematodos, el cual es la relación entre el número de plantas u órganos vegetales infectados y el número total de plantas u órganos inspeccionados, y se expresa mediante la siguiente fórmula: PI= N° de Unidades Infectadas x 100/ N° total de unidades inspeccionadas (raíz). 26 Huerto Superficie (ha) Lat. GPS Long. Con Síntomas Metodologías de muestreo Con signos No. De plantas PI= N° de Unidades Infectadas x 100/ N° total de unidades inspeccionadas (raíz). Municipio Localidad Localización Porcentaje de intensidad # de muestras de Suelo (Kg) Nombre del colector: ___________________ Fecha de colecta: _______________________ Entidad Federativa:_______________ Formato 1. Datos, de muestreos realizados para la detección del nematodo enquistado de la papa Meloidogyne chitwoodi Producto 6 27