1. OBJETIVO Describir la metodología para la

Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 1 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
1.
OBJETIVO
Describir la metodología para la determinación de plaguicidas organoclorados en agua
natural, residual y extractos de matrices sólidas (suelos o sedimentos) por Cromatografía
de Gases con detector de captura electrónica, utilizando columnas capilares. Referencias:
Método SM 66301 EPA 508 (Revisión 3.1 1995)2, EPA 508.1 (1995 Revisión 2)3, EPA
8081 A (1996 Revisión 1)4, EPA 525.2 (1995 Revisión 2)
2. ALCANCE
2.1.
Analitos y matrices
Este protocolo describe varios métodos de multiresiduo para la identificación y la
determinación de más de 30 plaguicidas organoclorados en matrices ambientales como
aguas naturales, aguas residuales y sedimentos.
Dependiendo de las condiciones de corrida en los métodos tomados como referencia, en
algunos no se evidencian los PCBs. Para identificarlos se requiere procedimientos
específicos de limpieza y fraccionamiento descritos de manera particular en los métodos
80825 y 36006, para facilitar la cuantificación de varios de los compuestos que se separan
en mezclas multi-componentes que normalmente incluyen los productos de degradación
ambiental.
1
American Public Health Association APHA., American Works Association, Water Environment
Federation. Standard methods for the examination of water and wastewater. 6630 Organochlorine
pesticides. 1999.
2
Determination of chlorinated pesticides in water by Gas Chromatography with an electron capture
detector. National exposure research laboratory office of research and development. U.S.
th
Environmental
protection
agency
EPA
Method
508-3.1
revision
1995.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
3
Determination of chlorinated pesticides, herbicides and organohalides in water using liquid solid
extraction and electron capture Gas Chromatography. National exposure research laboratory office
nd
of research and development. U.S. Environmental protection agency EPA Method 508-1 2
revision 1995 http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
4
Organochlorine pesticides by Gas Chromatography. National exposure research laboratory office
st
of research and development. U.S. Environmental protection agency EPA Method 8081 A.1
revision 1996 http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
5
Polyclorinated biphenyls (PCBs) por Cromatografía de gases. U.S. Environmental protection
agency
EPA.
Method
8082..
1ª
Revisión
1996.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
6
Cleanup. U.S. Environmental protection agency EPA. Method 3600C. 3a revisión. 1996.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 2 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
En la metodología para la determinación de multicomponentes es necesario realizar la
confirmación utilizando otras columnas, el sistema de columna dual o por lo menos otra
técnica cualitativa, con detector diferente por ejemplo en el método 82707 GC/MS.
El procedimientos SM 6630 tiene como alcance los analitos siguientes: BHC, lindano
(gamma HCH), heptacloro, Aldrín, heptacloro epóxido, Dieldrín, endrin, captan, DDE,
DDD, DDT, metoxicloro, endosulfan, dicloran, mirex y pentacloronitrobenceno, detectados
por cromatografía de gases con detectores de captura de electrones y de masas.
Los analitos incluidos en las metodologías de la referencia de EPA se describen en la
Tabla 1, identificados con N° CAS.
Tabla 1. Plaguicidas organoclorados de acuerdo al alcance de cada método EPA.
Analito
Alacloro
Aldrin
Aroclor 1016
Aroclor 1221
Aroclor 1232
Aroclor 1242
Aroclor 1248
Aroclor 1254
Aroclor 1260
Atrazina
-BHC (Hexaclorociclohexano HCH)
-BHC (HCH)
-BHC (HCH) (Lindano)
-BHC (HCH)
Butaclor
-Chlordano
-Chlordano
Chlorneb
Chlordane - not otherwise specified
Chlorobenzilato
Chlorobenzilato
Cianazina
Cloroneb
Clorotalonil
DBCP
4,4'-DDD
4,4'-DDE
4,4'-DDT
Diallate
Dieldrin
Endosulfan I
Endosulfan II
Endosulfan sulfate
Endrin
Endrin aldehyde
Endrin ketone
Etridiazol
Heptachlor
Heptachlor epoxide
Hexachlorobenzene
Hexachlorocyclopentadiene
Isodrin
Número de
registro CAS
15972-60-8
309-00-2
12674-11-2
11104-28-2
11141-16-5
53469-21-9
12672-29-6
11097-69-1
11096-82-5
5103-71-9
319-84-6
319-85-7
58-89-9
319-86-8
23184-66-9
5103-71-9
5103-74-2
501-15-6
57-74-9
510-15-6
2921-88-2
21725-46-2
2675-77-6
1897-45-6
96-12-8
72-54-8
72-55-9
50-29-3
2303-16-4
60-57-1
959-98-8
33213-65-9
1031-07-8
72-20-8
7421-93-4
53494-70-5
2593-15-9
76-44-8
1024-57-3
118-74-1
77-47-4
465-73-6
EPA
8081 A
EPA
508
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
EPA
508.1
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
7
X
X
X
X
X
U.S. Environmental protection agency EPA. Semivolatile organic compounds by gas
chromatography/mass
spectrometry
(gc/ms).
Method
8270C.3a
revision
1996.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 3 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
2.2.
Referencias
La metodología analítica se basa en las referencias documentadas en la bibliografía.
2.3.
Selección de la metodología
Diversos organismos internacionales han desarrollado y validado metodologías para el
análisis de plaguicidas organoclorados. Entre los organismos que publican metodologías
normalizadas en este campo, está la Agencia de Protección Ambiental de los Estados
Unidos US EPA, la American Standard for Testing and Materials ASTM, el grupo
conformado por The American Public of Health Association APHA, The American Water
Works Association (AWWA), y The Water Environment Federation (WEF), quienes
publican el Standard Methods for Water and Wastewater. También se dispone de
Manuales para la determinación de plaguicidas publicados por la Agencia para Drogas y
Alimentos US FDA.
En Europa, se cuenta con la Comisión Europea (European Comision) la cual emite
diferentes directivas y cuenta con comisiones especializadas (Commission working),
estos organismos emiten documentos como “SANCO/825/00 Guidance document on
residue analytical methods”. También se emiten directrices relacionadas con las
metodologías analíticas como “EC (2002) Commission decision implementing Council
Directive 96/23/EC concerning the performance of analytical methods and the
interpretation of results”, entre otros, relacionados con el objeto del presente protocolo.
La Tabla 2 resume las metodologías de referencia para plaguicidas organoclorados.
Tabla 2. Metodologías para el análisis de Plaguicidas Organoclorados
ORGANISMO
EPA
IDENTIFICACIÓN DEL MÉTODO
CARACTERÍSTICAS
Método 505 Rev 2.1
Plaguicidas organohalogenados y
PCB´s por microextracción y CG.
Método 508
Método 508, Rev 3.1
Plaguicidas organoclorados en agua
por CG/ECD
Método 508.1
Método 508.1 Rev 2.0
Método 525.2 Rev 2.0
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Plaguicidas organoclorados,
herbicidas y compuestos
organohalogenados en agua por
CG/ECD
Plaguicidas organoclorados,
herbicidas y compuestos
organohalogenados en agua por
extracción líquida/sólida CG/ECD
Compuestos orgánicos por extracción
líquida/sólida, columna capilar y
CG/MS
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 4 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Continuación Tabla 2. Metodologías para el análisis de Plaguicidas Organoclorados
ORGANISMO
IDENTIFICACIÓN DEL MÉTODO
CARACTERÍSTICAS
Método 608
Plaguicidas organoclorados y PCB´s
por CG/ECD.
EPA
Método 551.1
Standard
Methods
Método 8081 B
Plaguicidas organoclorados por
CG/ECD
Método 6630C
Plaguicidas organoclorados en agua
por CG
Método D5175-91 (1996)
ASTM
Método ASTM D5812
USGS-NWQL
(USGS
National
Water Quality
Laboratory)
AOAC
2.4.
Compuestos clorados en agua por
CG/ECD
Método O1104
Método O-1126-95
Método 0-1126-02
Método 990.6
Plaguicidas organohalogenados y
PBC´s en agua por microextracción y
CG
Plaguicidas organoclorados en agua
por columna capilar y CG/ECD
Compuestos organoclorados y
organofosforados disueltos en agua
por CG
Plaguicidas en agua por extracción en
cartuchos de fase sólida C18 y CG/MS
Plaguicidas en agua por extracción en
cartuchos de fase sólida C18 y CG/MS
Plaguicidas organoclorados en agua
por CG
Idoneidad del analista
El método debe ser realizado por profesionales del área química con experiencia analítica
en la extracción y manejo de cromatografía de gases. Los analistas sin experiencia deben
tener la supervisión del profesional de mayor experiencia en la ejecución de este tipo de
análisis. Todo analista debe demostrar la capacidad para aplicar la metodología y obtener
resultados confiables.
3. CARACTERÍSTICAS DE LOS ANALITOS
3.1.
Aldrín8 (EHC 91, 1989) y Dieldrín9 (HSG 21, 1989)
8
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health criteria 91 de 1989. Aldrin y Dieldrin. Consultado
Mayo 2007. Disponible en http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc91.htm
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 5 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
El Aldrín puro es un sólido cristalino incoloro, con punto de fusión de 104 – 104,5 °C. Su
presión del vapor es de 8,6 mPa a 20°C (6,5 x 10-5 mmHg a 25°C). Su densidad es 1,54
g/mL a 20 °C. Es prácticamente insoluble en agua (27 µg/L a 27°C; en acetona, benceno,
y xileno es mayor de 600 g/L. El Aldrín es estable a menos de 200°C y pH 4-8, pero en
presencia de agentes oxidantes y ácidos concentrados hay daño del anillo no clorado.
El Dieldrín tiene un punto de fusión de 175-176°C. Su presión de vapor es 0,4 mPa a
20°C 3,2 x 10-6 mmHg a 25°C. Es muy poco soluble en agua (186 µg/L a 20°C pero es
moderadamente soluble en hidrocarburos saturados y aromáticos, hidrocarburos
halogenados, éteres, ésteres, cetonas, y alcoholes. El Dieldrín es estable al álcali, ácidos
débiles y a la luz. Reacciona con los ácidos minerales concentrados, los catalizadores
ácidos, agentes oxidantes ácidos, y metales activos (hierro, cobre).
El Aldrín se utiliza principalmente como insecticida en suelos, en el cual se encuentra
conjuntamente con su producto de degradación, el Dieldrín. El Aldrín presenta baja
movilidad mediante volatilización o lixiviación. Se fija por adsorción rápidamente en suelos
con alto contenido de materia orgánica y de manera moderada en suelos arcillosos.
Tanto el Aldrín como el Dieldrín presentan baja penetración y se adhieren a las partículas
del suelo por lo cual no se presenta contaminación de las aguas subterráneas. Una vez
aplicado el Aldrín, una parte se volatiliza y el resto se degrada convirtiéndose en un 97%
en su epóxido, el Dieldrín que es retenida por más tiempo. Este último es fotosensible y se
degrada en pequeña proporción hasta foto-Dieldrín.
3.2.
Hexacloro-ciclohexanos (HCH ó BHC) (Alfa y Beta EHC 123, 1991)10, (Gama
EHC 124, 1991)11
El alfa Hexaclorociclohexano es subproducto importante (65-70%) en la fabricación del
lindano. Su solubilidad en agua es baja, pero es muy soluble en solventes orgánicos como
acetona, cloroformo, y xileno. Es un sólido con baja presión del vapor. Este isómero se
puede determinar conjuntamente con los otros isómeros por cromatografía de gases y
detector de captura electrónica, utilizando métodos complementarios de separación.
El beta Hexaclorociclohexano es subproducto (7-10%) en la fabricación del lindano. Su
solubilidad en agua es baja, pero es muy soluble en solventes orgánicos tales como
acetona, ciclohexano y xileno. Es un sólido con una presión baja del vapor. Tiene un
comportamiento similar al isómero alfa. Es el isómero más persistente en suelo pero
depende de la acción de microorganismos, del contenido de la materia orgánica y el agua
9
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health and safety guide 21 de 1989. Aldrin y Dieldrin.
Consultado Mayo 2007. Disponible en http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc21.htm
10
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health criteria 123 de 1991. Alfa y Beta
Hexaclorociclohexano.
Consultado
Mayo
2007.
Disponible
en
http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc123.htm
11
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health criteria 54 de 1991. Lindano. Consultado Mayo
2007. Disponible en http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc54.htm
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 6 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
evaporada en el suelo. La bioconcentración es más alta y la eliminación es más lenta para
beta-HCH que para otros isómeros.
El gama Hexaclorociclohexano (Lindano) es un sólido cristalino incoloro que funde a
112ºC y ebulle a 288ºC. Presión de vapor 0,434 x 10-5 kPa (3,26 x 10-5 mmHg) a 20 °C.
Prácticamente insoluble en agua (10 mg/L a 20°C; moderadamente soluble en el etanol
(6,7%); levemente soluble en aceites mineral; soluble en acetona y en solventes
aromáticos. Es estable a la luz, al aire, al calor, al bióxido de carbono y los ácidos fuertes;
se dehidroclora en presencia del álcalis o en exposición prolongada al calor con formación
de tricloro benceno, fosgeno y ácido hidroclórico. Es incompatible con las bases fuertes y
metales pulverizados, tales como hierro, cinc, y aluminio.
3.3.
Endrín (EHC 130, 1992)12
El Endrín es un sólido cristalino blanco prácticamente insoluble en agua 0,23 mg/L a 25ºC;
poco soluble en alcohol e hidrocarburos; moderadamente soluble en hidrocarburos
alifáticos y muy soluble en solventes tales como acetona, benceno, tetracloruro de
carbono y xileno.
La volatilización ocurre después de su aplicación en los suelos y cosechas y depende
generalmente de muchos factores, como el contenido de la materia orgánica y contenido
de agua del suelo, la humedad, el flujo de aire, y el área superficial de plantas.
Cuando es sometida a calentamiento alrededor de 200ºC como ocurre durante la
cromatografía gaseosa aparecen los derivados delta ceto-endrín y un aldehído. El Endrín
también se transforma en cetoendrín bajo condiciones ácidas y catalizador. Lo mismo
ocurre por irradiación UV en 48 h.
3.4.
Alaclor 13
El Alaclor es un compuesto sólido cristalino blanco o crema, combustible de punto de
fusion 39,5 – 41,5 ºC. Soluble in acetona, benceno, cloroformo, etanol, éter y acetato de
etilo. La solubilidad en agua es 242 mg/L a 25 ºC. Es hidrolizado por ácidos y bases
fuertes. Se descompone a 105°C. Es estable a la radicación UV. Es tóxico para
organismos acuáticos.
3.5.
Propaclor (EHC 147, 1993)14
Propaclor (2-cloro- N-(1-methiletil)- N-fenil acetamida). Compuesto sólido que funde a
77°C y se descompone por encima de 170°; Presión de vapor a 25°C:103 mPa; soluble en
12
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health criteria 130 de 1992. Eldrin. Consultado Mayo
2007. Disponible en http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc130.htm
13
WHO. IPCS INCHEM.Data Sheets on pesticides 86. 1996. Alachlor. Consultado Junio de 2007.
Disponible en http://www.inchem.org/documents/pds/pds/pest86_e.htm
14
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health criteria 147 de 1993. Propachlor. Consultado junio
2007. Disponible en http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc147.htm
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 7 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
agua (580mg/L a 20°C y 613mg/L a 25°C); soluble en solventes orgánicos: acetona 448
mg/kg; benceno 737 mg/kg; cloroformo 602 mg/kg; etanol 408 mg/kg; xileno 239 mg/kg.
El Propaclor se volatiliza en la superficie del suelo siempre que éste se encuentre
húmedo. Presenta una adsorción moderada en presencia de materia orgánica, lo que
induce la posibilidad de lixiviación a través del perfil del suelo y llegar a las aguas
subterráneas, aunque es poco frecuente, ya que se necesitaría una precipitación muy alta
para desplazar los residuos a unos 30 cm de profundidad del suelo. La mayoría de la
lixiviación ocurre en suelo arenoso con poca materia orgánica. La mayoría de los autores
aseguran que los residuos se encuentran dentro de los 4 centímetros superficiales del
suelo.
Los metabolitos originados por degradación del propaclor en suelos son N-isopropilanilina,
N-Isopropilacetanilida,N-(1-hidroxiiso-propil)-acetanilida
y
N-isopropil-2acetoxi
acetanilida. El metabolito conjugado de N-isopropilanilina es mucho más persistente que
el compuesto original.
3.6.
Arocloro (EHC 140, 1992, 2nd edition)15
Los PCBs son hidrocarburos bifenílicos polisustituidos con cloro, generando una mezcla
de alrededor de 130 diversos isómeros y congéneres.
Los congeners puros individuales son incoloros, a menudo cristalinos; los compuestos
comerciales son mezclas de estos congéneres y tienen colores desde amarillo claro hasta
oscuro. No se cristalizan a temperaturas bajas sino que se convierten en materiales
resinosos.
Los PCBs son prácticamente insolubles en agua, pero disuelven fácilmente en
hidrocarburos, grasas, y otros compuestos. La solubilidad de los frecuentes en agua a
25°C es: para el 1221 0,59 mg/L, 1232 0,45 mg/L, 1016 0,42 mg/L, 1242 0,24 mg/L, 1248
0,054 mg/L, 1254 0,021 mg/L, 1260 0,0027 mg/L. Los PCBs tienen un alto grado de
estabilidad química bajo condiciones normales. Son muy resistentes a diversos oxidantes,
al oxígeno, metales activos y otros productos químicos. Según pruebas de laboratorio
permanecen, son químicamente estables a altas temperaturas hasta 170°C y por períodos
prolongados.
3.7.
Butacloro16
N-butoximetil 2-cloro-2´,6´-dietilacetanilida es un líquido de color ámbar con punto de
fusión <-5°C y punto de ebullición 16°C. Presión de vapor 0,6 mPa a 25°C. Solublidad a
15
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health criteria 140 de 1992. Polychlorinated biphenyls and
terphenyls. Disponible en http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc140.htm
16
The pesticida manual. A World compendium. 9 edición. Charles R. Worthing Asc Ed Raymond J.
Hance. Published by The British Crop Protection Council. 1991
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 8 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
24°C 23 mg/L en agua, miscible con acetona, benceno, etanol, acetato de etilo, hexano.
Es estable a la luz UV y se descompone a 165°C
3.8.
Clordano
Está constituido por una mezcla con 60-75% de isómeros siendo los de mayor proporción
el isómero cis denominado alfa clordano, cuyo punto de fusión es 106-107°C y el isómero
trans denominado gama clordano. Contiene otros isómeros en proporción menor al 7% y
heptacloro. Solubilidad a 25°C 0,1 mg/L en agua, miscible con acetona, ciclohexano,
etanol, 2-propanol, tricloroetuleno.
3.9.
Heptacloro17
Este compuesto fue aislado del clordano grado técnico. Cuando esta puro es un sólido
cristalino de punto de fusión 95-96°C y presión de vapor a 25°C 53 mPa. Solubilidad de
25-29°C 0,056 mg/L en agua.
El producto grado técnico contiene alrededor del 7% de heptacloro y cerca del 28% de
compuestos relacionados tales como trans clordano (20–22%) y trans nonachlor (4–8%).
Su punto de fusión varía entre 46-74°C y su solubilidad 20-30°C 1,65 kg/L en
ciclohexanona; 62,5 g/L en etanol; 1,41 kg/L en xileno. Es estable a temperaturas ≤261°C,
a la luz, humedad, aire pero es susceptible a la epoxidación.
3.10.
Endosulfan
Es una mezcla de dos isómeros alfa endosulfan y I endosulfan que funde a 109°C. El
ensosulfan con una pureza ≥94% es un sólido cristalino pardo con olor a dióxido de azufre
y punto de fusión 70-100°C y presión de vapor 1,2 mPa a 80°C. Solublidad a 22°C para el
alfa endosulfano es 0,32 mg/L, para el beta endosulfano es 0,33 mg/L; a 20°C 200 g/L en
diclorometano, acetato de etilo y tolueno; 65 g/L en etanol, 24 g/L en hexano. Es estable a
la luz solar e inestable en medio alcalino generando hidrólisis.
3.11.
Clorobenzilato
Es un sólido incoloro de punto de fusión 36-37,5°C y presión de vapor 0,12 mPa a 20°C.
Solubilidad a 20°C 10 mg/L en agua; 1 kg/kg de acetona, diclorometano, metanol, tolueno;
600 g/kg de hexano y 700 g/kg en 1-octanol.
3.12.
Cloroneb
Sólido cristalino incloro con punto de fusión 133-135°C y ebullición 268°C; presión de
vapor 400 mPa a 25°C. Solubilidad a 25°C de 8 mg/L en agua, 115 g/kg en acetona, 133
17
WHO. IPCS INCHEM. Concise International Chemical Assessment Document
HEPTACHLOR. Disponible en http://www.inchem.org/documents/cicads/cicads/cicad70.htm
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
70.
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 9 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
g/kg en diclorometano; 118 g/kg en dimetilformamida; 89 g/kg en xileno. Es estable a
temperatura ≤268°C y a temperatura ambiente en presencia de ácidos y bases.
3.13.
DBCP (1,2 dibromo-3-cloropropano)18
Líquido incoloro de olor pungente que descompone a 196°C y funde a 6,7°C. Baja
solubilidad en agua, 0,1 g/100ml; presión de vapor 0,1 kPa a 20°C
3.14.
DDT y sus derivados 19
El p,p´-DDT corresponde a 1,1´-(2,2,2-tricloroetilideno)-bis(4-clorobenceno). Este
compuesto se encuentra normalmente con otros isómeros siendo los más frecuentes el
4,4´DDE y el 4,4´DDD. Todos los isómeros del DDT con fórmula empírica C14H9Cl5 son
sólidos cristalinos blancos. El DDT es soluble en solventes orgánicos benceno, 106 g/L;
ciclohexanona 100 g/L; cloroformo 96 g/L; éter de petróleo 4-10 g/L etanol 1,5 g/L. Es
insoluble en agua. El DDT es resistente al ataque enzimático en suelos y a los
microorganismos superficiales; el DDE es aún más resistente.
3.15.
Clorotalonil
Tetracloro isoftallonitrilo. Es un sólido cristalino inodoro que funde a 250-251°C y presión
de vapor 1,3 Pa a 40°C. Solubilidad a 25°C: 0,6 mg/kg en agua; 20 g/kg en acetona,
butanona, dimetilsulfóxido; 80 g/kg en xileno. Es estable a la temperatura en condiciones
normales de almacenamiento, a la luz UV y en soluciones acuosas ácidas y alcalinas.
3.16.
Etridiazol
Etil 3-triclorometil 1,2,4-tiadiazol-5-il-eter es un líquido de color amarillento, con presión de
vapor 13 mPa a temperatura ambiente. Solubilidad a 25°C 50 mg/L en agua, soluble en
acetona, tetracloruro de carbono, etanol e hidrocarburos saturados. Es estable a la luz
solar y UV así como a la temperatura.
4.
FUNDAMENTO DE LA METODOLOGÍA20
La cromatografía de gases es un método de separación y cuantificación en la cual los
componentes que hacen parte de una muestra vaporizada, se inyectan en una columna
en la cual se separan por un proceso de reparto entre una fase móvil gaseosa,
generalmente inerte y una fase estacionaria líquida inmovilizada sobre la superficie de un
sólido inerte o en las paredes de un tubo capilar. La elución se consigue mediante el flujo
18
WHO. IPCS INCHEM. ICSC 0002. http://www.inchem.org/documents/icsc/icsc/eics0002.htm
WHO. IPCS INCHEM. Environmental Health criteria 9. DDT y sus derivados
http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ehc009.htm
20
Skoog D., West D., Holler J., Crouch S. Fundamentos de Química Analítica.8 edición. Thomson
editores. 2005, p959.
19
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 10 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
de la fase móvil de gas inerte sin que se presente interacción alguna de los analitos con
ella durante el recorrido a través de la columna.
El detector de captura electrónica es uno de los más utilizados en análisis ambiental
teniendo en cuenta que responde de manera selectiva a compuestos orgánicos que
contienen halógenos como es el caso de los plaguicidas y bifenilos policlorados.
El eluyente de la muestra procedente de la columna pasa sobre un emisor de radiación
beta, generalmente 63 Ni. Un electrón del emisor causa la ionización del gas portador y la
producción de una corriente de electrones, la cual en ausencia de especies orgánicas, la
corriente generada entre los electrodos es constante, mientras que en presencia de
compuestos orgánicos que contengan grupos funcionales electronegativos que tienden a
capturar electrones, la corriente disminuye significativamente.
Este comportamiento permite la detección con alta sensibilidad para los halógenos,
peróxidos, quinonas y grupos nitro. El detector no es sensible a los grupos funcionales
amino, hidroxilo e hidrocarburos.
Otro detector utilizado para compuestos organofosforados es el de captura de electrones
que se basa en que compuestos electronegativos toman electrones obtenidos de un
emisor beta, formando iones cargados negativamente, la señal de fondo conformada por
los electrones, disminuye cuando eluyen compuestos capaces de capturar electrones, lo
que lo hace muy sensible a moléculas que contengan halógenos. No es útil para todos los
compuestos de este grupo, pero tiene como ventaja su alta sensibilidad para los que
responden.
El detector de mayor uso a nivel ambiental para confirmar la presencia de compuestos
organofosforados de matrices complejas es el de masas, que se basa en la generación de
iones a partir de las moléculas o átomos originales y la posterior separación de los iones
generados de acuerdo a la relación masa/carga y medida de la abundancia de éstos.
Generalmente se usa el modo scan para obtener información espectral muy precisa sobre
la identidad del compuesto, por lo cual tiene como ventaja su alta especificidad. Ésta es
la metodología utilizada para la confirmación de los componentes del grupo de
organofosforados en matrices ambientales. Con respecto a la sensibilidad, se deben
operar en modo de monitoreo de ión selectivo para tener mayor sensibilidad y para la
cuantificación.
5.
5.1.
CONSIDERACIONES PARA EL MANEJO DE MUESTRAS
Recomendaciones para la recolección de las muestras
Si el muestreo se aplica para agua de grifo, este debe abrirse y dejar que corra hasta que
la temperatura se estabilice (1 ó 2 minutos). Se ajusta el flujo alrededor de 500 mL/min y
se recoge la muestra corriente. En los casos en que el agua ha sido clorada deberá
reducirse el cloro residual agregando una cantidad suficiente de sulfito de sodio sólido o
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 11 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
una solución concentrada que permita alcanzar una concentración final de 50 mg/L, para
luego tapar y agitar la botella con la muestra recolectada, para mantenerla protegida de la
luz.
En el caso de aguas superficiales se debe tener previsto el sitio más representativo del
cuerpo de agua que se va a evaluar. Se llena la botella con la muestra de agua, se tapa y
refrigera hasta que llega al laboratorio para ser analizada. En el caso de utilizar
muestreadores automáticos que permiten la obtención de muestras compuestas es
fundamental contar con botellas de vidrio que puedan mantenerse refrigeradas hasta
finalizar el muestreo y llegar al laboratorio.
NOTA 1:
Es fundamental tener la precaución de utilizar materiales que no sean
plásticos en el equipo de muestreo, incluyendo las mangueras y los
protectores internos de las tapas de los frascos, ya que con frecuencia se
presenta la migración de algunos compuestos derivados de los ftalatos, que
posteriormente son interferentes críticos para los analitos del método en el
proceso cromatográfico.
NOTA 2:
Hay varios analitos cuyo comportamiento y estabilidad exigen la toma de
muestras independientes, a pesar de no ser del grupo de organoclorados
que pueden estar presentes.
5.2.

Para la cianazina las muestras no se tratarán con sulfito y no se ajustará
el pH. Deberán refrigerarse y analizarse dentro de los 14 días
posteriores al muestreo. En el momento de ser analizadas deberán
tratarse para eliminar el cloro residual y se ajustará el pH
inmediatamente antes de la fortificación con el estándar de los
compuestos relacionados, y de la extracción utilizando las mismas
cantidades aplicadas a las otras muestras en campo.

Para el Atraton y el Prometon las muestras se tratarán con el sulfito del
sodio para eliminar el cloro residual, pero no se aplicará el ajuste de pH.
La eficiencia para la recuperación de estos dos analitos en pH neutro es
≥ 90%.
Preservación de las muestras
Una vez tomada la muestra se debe ajustar el pH a 2 con la adición de HCl 6N. Si la
muestra contenía cloro es indispensable haber realizado el tratamiento correspondiente
antes de ajustar el pH. La razón del ajuste del pH es la de retardar cualquier degradación
microbiana de los analitos del método. Este ajuste del pH permite una conservación de los
analitos de la muestra hasta por 14 días.
Las muestras tomadas independientemente para análisis de la cianazina deberán
mantenerse refrigeradas hasta el momento del análisis.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 12 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Los resultados del estudio de la preservación demuestran que los analitos (excepto
cianazina) son estables por 14 días en las muestras que se preservan según lo descrito
en la sección 8.2 y la sección 8.3. Los extractos de muestra refrigerados se pueden
almacenar hasta 30 días. 8.5
5.3.
Almacenamiento de la muestra
Las muestras se deben mantener refrigeradas a 4°C desde el momento de la recolección
hasta que se realice la extracción en el laboratorio. Los extractos almacenados a
temperatura ≤4°C son estables para los analitos del método hasta por 30 días.
5.4.
Estabilidad de los analitos
La cianazina se degrada en la muestra cuando se almacena bajo condiciones ácidas o en
presencia de sulfito del sodio, condición que debe tenerse en cuenta en el momento del
muestreo.
El atraton y el prometon se ionizan bajo condiciones ácidas lo que afecta la eficiencia de
la extracción de matrices de agua a pH ácido.
Los analitos carboxin, diazinon, disulfoton, sulfoxido del disulfoton, fenamiphos, y terbufos
deben ser extraídos inmediatamente después de la recolección y conservación; no se
pueden almacenar como los demás analitos hasta 14 días.
5.5.
Extracción de los analitos de la muestra
La cantidad utilizada para muestras líquidas es normalmente de 1L y para muestras
sólidas se toma un peso entre 2 y 30 g, a partir de las cuales se recuperan los analitos
mediante la aplicación de técnicas de extracción apropiadas dependiendo de la matriz.
En el caso de muestras líquidas se extraen a pH neutro con cloruro de metileno usando
extracción discontinua (embudo de decantación), (EPA 3510C)21 o por extracción continua
líquido – líquido, (EPA 3520C)22 u otros métodos apropiados.
Las muestras de matrices sólidas se extraen mediante extracción soxhlet (EPA 354023 ó
354124) o con ultrasonido (EPA 355025) con mezcla cloruro de metileno/acetona (1:1).
21
Separatory funnel liquid-liquid extraction. U.S. Environmental protection agency. Method EPA
3510C. 3a revision 1996. http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
22
Continuous liquid-liquid extraction. U.S. Environmental protection agency Method 3520C 3a
revision 1996. http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
23
Soxlhet extraction U.S. Environmental protection agency Method 3540C 3a revision 1996.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
24
Soxlhet extraction U.S. Environmental protection agency. Method 3541C 1994.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
25
Ultrasonic extraction U.S. Environmental protection agency Method 3550B 2a revision 1996.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 13 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
La purificación de las muestras se lleva a cabo con Florisil (EPA 362026) y/o permeación
sobre gel (EPA 364027). Cuando se aprecie interferencia de azufre se recomienda el
procedimiento EPA 3660.
Antes del análisis cromatográfico el disolvente debe cambiarse a hexano usando un
concentrador Kuderna-Danish KD, ya que cualquier rastro de cloruro de metileno origina
un pico de disolvente muy ancho.
5.6.
Responsabilidad del analista
Es responsabilidad del analista revisar que las muestras sean aptas para el análisis de los
organoclorados, verificando el cumplimiento de las consideraciones descritas para su
manejo adecuado desde el momento de la recolección hasta la aplicación del análisis.
6.
EQUIPOS, INSUMOS, REACTIVOS Y ESTÁNDARES
En este protocolo se ha partido del referente del método SM 6630 y de tres métodos de la
EPA y por lo tanto se mostrarán de manera particular y comparativa las necesidades de
cada uno de ellos, con lo cual es posible proceder de acuerdo a la disponibilidad de cada
laboratorio.
6.1.
Equipos
6.1.1. Balanza analítica con precisión de pesada 0,0001 g
6.1.2. Potenciómetro con capacidad de lectura de 0,01 unidades de pH.
6.1.3. Cromatógrafo de gases dotado con los elementos y sistemas necesarios para
operar, con columna sencilla o doble; sistema de inyección split-splitless,
6.1.3.1.

Detector de captura electrónica ECD
Sistema de adquisición, manejo y registro de datos, que permita obtener como
mínimo los datos de tiempos de retención y áreas de los picos.
26
Florisil cleanup. U.S. Environmental protection agency Method 3620B 2a revision 1996.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm.
27
Gelpermeation cleanup U.S. Environmental protection agency Method 3640 D 1a revision 1994.
http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/main.htm
27
Eurachem. Uncertainty Manager; Guide Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement
Eurachem 2000; Disponible en www.uncertaintymanager.com
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 14 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA






Horno para la columna cromatográfica con software para realizar corridas con
temperatura programable.
Bombas y equipo básico para extracción en fase sólida, para la preparación de la
muestra por medio de la utilización de discos o cartuchos,
Columnas para secado de las muestras de vidrio que contienen de 5-7 g de sulfato
de sodio anhidro con los cuales se previene la contaminación de los extractos con
agua. Se puede utilizar un pequeño tubo, una jeringa, un cuenta gotas de cristal,
siempre que se evite el riesgo de caída del sulfato de sodio en el extracto y sea de
vidrio.
Baño de maría capaz de regular la temperatura con una variación de ±2°C.
Columnas cromatográficas. Se describen a continuación varias alternativas de
columna cuyas especificaciones determina la respuesta del método y están dadas
particularmente por cada uno de los métodos descritos.
Método SM 6630
Esta metodología describe el uso de columnas de vidrio tradicionales, las cuales han sido
reemplazadas por columnas capilares que permiten una resolución y eficiencia mayores.
Las columnas descritas son columnas de vidrio de 2 m x 4 mm de diámetro interno con las
siguientes fases: 5% OV 210 soportado sobre tierra de diatomáceas tratada con dimetildicloro silano, 100 /120 mesh; como columna alterna 1,5% OV-17 y 1,95% QF1. Otras
opciones incluyen 3% OV-1 en mezcla con 6%QF-1 y 4% SE-30 en tierra de diatomáceas
100/120 mesh. Recomienda esta metodología el uso de columnas de 30 m x 0,32 mm de
diámetro interno y 0,25 micras de espesor con los soportes mencionados.
La Tabla 3 describe las columnas para 3 metodologías EPA.
Tabla 3. Columnas cromatográficas para el análisis de plaguicidas organoclorados – EPA
Método EPA 508
Sílica fundida 95% dimetil
5% fenil polisiloxano ( J&W
Scientific DB-5) o
equivalente, de 30 mx0,25
mm diámetro interno
espesor de película de 0,25
micras.
Sílica fundida 50% dimetil,
50 % difenil polisiloxano
(J&W Scentific DB-1701
Sientific) o equivalente 30
m x 0,25 mm diámetro
interno, espesor de
película 0,25 micras
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Método EPA 508-1
Sílica fundida 95% dimetil 5%
fenil polisiloxano ( J&W
Scientific DB-5) o equivalente,
de 30 m x 0,25 mm diámetro
interno espesor de película de
0,25 micras.
Método EPA 8081-A
Sílica fundida 95% dimetil 5%
fenil polisiloxano ( J&W
Scientific DB-5 ó SE 54) o
equivalente, de 30 mx0,32 mm
diámetro interno espesor de
película de 0,1 micras.
Sílica fundida 50% dimetil, 50
% difenil polisiloxano (J&W
Scentific DB-1701 Sientific) o
equivalente 30 mx0,25 mm
diámetro interno, espesor de
película 0,1 micras
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 15 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Continuación Tabla 3. Columnas cromatográficas para el análisis de plaguicidas
organoclorados – EPA
Método EPA 508
Método EPA 508-1
Método EPA 8081-A
Sílica fundida 35 % difenil 65%
dimetil polisiloxano (DB-608;
SPB 608) o equivalente, de 30
m x 0,25 mm película de 1
micra de espesor
Sílica fundida (DB-608, SPB608, RTx-35) de 30 m x 0,53
mm con película 0,5 microm ó
0,83 microm de espesor
6.1.4. Sistema de inyección automático o manual con capacidad para inyectar 2
microlitros.
6.1.5. Equipo de agitación por rotación con los accesorios necesarios
6.2.
Materiales
6.2.1. Helio de alta pureza como gas de arrastre.
6.2.2. Equipo para toma de muestras simples o compuestas

Recipientes de borosilicato, capacidad 1L con graduación (Wheaton Media/lab
bottle 219820 o equivalente). Pueden usarse botellas ámbar. Estos recipientes
deberán ser lavados y secados adecuadamente para minimizar la contaminación.
Las tapas deberán ser de rosca con cubierta interna de teflón u otro material inerte
que prevengan la contaminación. Deberán ser lavados cuidadosamente con el
último solvente utilizado, luego con detergente y agua de grifo, agua destilada,
secados al aire o en estufa a 400°C.

Envases para muestra, de vidrio ámbar capacidad 1 L o ¼ de galón con tapa rosca
con recubierta interna de teflón. Las botellas ámbar son muy importantes para
prevenir el daño de los analitos por acción de la luz.
6.2.3. Embudos de decantación 2L con tapa de teflón o TFE fluorocarbono.
6.2.4. Balones o frascos para almacenamiento de soluciones en vidrio ámbar de 10-15
mL de capacidad con tapa de TFE-fluorocarbono.
6.2.5. Erlenmeyer 500mL
6.2.6. Viales ámbar de varios tamaños (5-10mL) tapa rosca interior de TFE fluorocarbono
6.2.7. Microjeringas de varios tamaños
6.2.8. Equipos de concentración Kuderna-Danish KD, compuesto por los siguientes
elementos:
 Tubos concentradores graduados de 10-25 mL (Kontes K-570050-1025 ó K570050-2525 o equivalentes). La calibración deberá verificarse para los volúmenes
utilizados en la prueba.
 Frascos evaporadores K-D-500 mL (Kontes K-570001-0500 equivalente) incluido
el tubo de concentración.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 16 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA

Columnas Snyder de tres bolas macro K-D- (Kontes K-5030000-0121 o
equivalente)
 Columnas Snyder de dos bolas macro K-D-(Kontes K-569001-0219 o equivalente)
6.2.9. Frascos para agitación en equipo que permita la agitación de 30 veces / minuto
6.2.10. Perlas de ebullición carborundo # 12 (Arthur H Thomas Co. 1590-033 o
equivalente) Calentadas a 400°C antes de su uso, enfriadas y guardadas en
desecador.
6.2.11. Vidriería general del laboratorio: Balones volumétricos de capacidad de 10 mL,
100 mL y 1000 mL, frascos de vidrio de varios tamaños ámbar con tapa rosca con
cubierta interna de Teflón.
6.2.12. Viales para el inyector automático, de capacidad de acuerdo a las especificaciones
del inyector con tapa cubierta internamente de teflón; o manual con jeringa de
vidrio para inyectar 2 microlitros.
6.2.13. Jeringas hipodérmicas de vidrio de capacidad 10 mL, con agujas para jeringas de
7-10 cm de longitud punta roma. Microjeringas de varios tamaños
6.3.
Reactivos
6.3.1. Lista de reactivos












Acetona - GP
Metileno dicloruro - GP
Metil-tert-butil-éter MTBE - GP
Ácido clorhídrico RA
Fosfato de potasio K2HPO4 RA
Cloruro de sodio RA
Sulfato de sodio granular anhidro GP
Tiosulfato de sodio RA
Pentacloronitrobenceno PCNB 98% pureza RA (estándar interno)
Decaclorobifenilo DCB 96% pureza RA (compuesto sucedáneo o surrogate)
Cloruro mercúrico RA (agente conservante de las muestras)
Agua destilada
Nota: GP grado pesticida o solvente destilado en vidrio o equivalente
6.3.2. Purificación de reactivos



Cloruro de sodio: caliente los cristales en una cápsula de porcelana a 400°C durante
4 horas para remover sustancias orgánicas que pueden ocasionar interferencias.
Almacenar en frasco de vidrio para evitar contaminación por ftalatos.
Sulfato de sodio anhidro granular: caliente los cristales en una cápsula de porcelana a
400°C durante 4 horas para remover sustancias orgánicas que pueden ocasionar
interferencias. Almacene en frasco de vidrio para evitar contaminación por ftalatos.
Agua destilada: utilice preferiblemente recién destilada, almacene en vidrio para evitar
contaminación por ftalatos y libre de los analitos de interés.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 17 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
6.3.3. Preparación de soluciones:
Buffer de fosfatos (pH 7): prepárelo por mezcla de 29,6 mL de ácido clorhídrico 0,1 N y 50
mL de fosfato dipotásico 0,1 M
6.3.4. Estándares
Los estándares de los plaguicidas organoclorados incluidos en los métodos de la
referencia se describen en la Tabla 1
6.3.4.1.
Solución concentrada de plaguicidas organoclorados
Se puede obtener de soluciones comercialmente disponibles, certificadas por el fabricante
o un ente independiente, de 1,00 µg/mL o preparadas a partir de estándares certificados
de la siguiente manera:
Prepare una solución de concentración de 1,00 microgramo / microlitro para cada analito
pesando 0,0100 g del material certificado para disolverlo en MTBE y complete a un
volumen de 10 mL. Aplique la corrección en los cálculos de la concentración con base en
la pureza declarada en el certificado del estándar. Pueden usarse diluciones mayores
dependiendo de las necesidades del método.
Transfiera la solución estándar a un vial ámbar de vidrio con tapa con cubierta interna de
TFE-fluorocarbono y almacene a temperatura ambiente y protegida de la luz. Estas
soluciones deben reemplazarse después de 2 meses o en el momento en que los
resultados de comparación con los blancos fortificados o las muestras de control indiquen
que presentan problemas.
6.3.4.2.
Solución de estándar interno.
Prepare una solución de PCNB 98% de pureza para utilizarlo como estándar interno
pesando 0,010 g del compuesto puro, disuélvalo en MTBE y afórelo a 100 mL. Transfiera
a un frasco de vidrio con tapa con cubierta interna de TFE-fluorocarbono y almacene a
temperatura ambiente. (100microgramos/mL). Esta solución debe reemplazarse cuando
los controles implementados en el método indiquen un problema. Se puede reemplazar
este estándar interno siempre y cuando el nuevo compuesto cumpla con los requisitos de
un estándar interno.
6.3.4.3.
Solución de compuesto sucedáneo (surrogate)
Prepare una solución concentrada de compuesto sucedáneo (surrogate) pesando 0,050g
de DCB 96% de pureza y disúelvalo en MTBE aforando a 100mL. Transfiera a un frasco
de vidrio con tapa con cubierta interna de TFE-fluorocarbono y almacene a temperatura
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 18 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
ambiente. Esta solución debe reemplazarse cuando los controles implementados en el
método indiquen un problema.
6.3.4.4.
Solución concentrada de verificación del laboratorio (SVL)
La solución de verificación del laboratorio está compuesta por algunos analitos, se utiliza
para evaluar la idoneidad del sistema cromatográfico y verificar que se encuentra dentro
de las especificaciones definidas en la metodología. Prepare pesando 0,0010 g de cada
uno de los siguientes analitos: clorotalonil, clorpirifos, DCPA, y HCH delta. Disuelva cada
uno de ellos en MTBE y diluya a un volumen final individual de 10 mL en matraz aforado.
Prepare una solución concentrada colocando en un balón aforado de 100mL:
 2 microlitros de solución estándar concentrada de clorpirifos
 50 microlitros de solución estándar concentrada de DCPA
 50 microlitros de solución estándar concentrada de clorotalonil
 40 microlitros de solución de estándar concentrada de HCH delta
Complete a volumen con MTBE y agite vigorosamente la solución. Transfiera a un frasco
de vidrio con tapa con cubierta interna de TFE fluorocarbono y almacene a temperatura
ambiente. Reemplace la solución de verificación cuando los controles implementados
indiquen un problema en la respuesta del método.
6.3.4.5.
Solución de verificación de degradación SVD
La solución de verificación de degradación está indicada para algunos analitos en los
cuales es más evidente este proceso. Prepare en MTBE una solución que contiene 4,4´DDT y Endrín a 1 microgramo/mL. Inyecte esta solución para verificar la degradación de
estos compuestos en el puerto de inyección, determinando la presencia de Endrín
aldehído, Endrín cetona y para DDT, la aparición de 4.4´-DDE y 4,4´-DDD.
7. CONTROL Y ASEGURAMIENTO DE CALIDAD DEL MÉTODO
El laboratorio debe demostrar la competencia técnica para aplicar la metodología en el
análisis de plaguicidas y otros contaminantes ambientales con el fin de asegurar y
demostrar la obtención de resultados confiables. El laboratorio deberá implementar,
mantener, soportar y aplicar las buenas prácticas de laboratorio, que son la base para las
demás estrategias de demostración de la competencia.
El requerimiento mínimo de control de calidad exigido incluye la demostración de la
capacidad inicial del laboratorio, el porcentaje de recuperación (%R) del compuesto
sucedáneo (surrogate) en cada muestra y blanco, monitorear la respuesta del estándar
interno en cada muestra y blanco, el análisis de los blancos de laboratorio (BS, BR, BC,
BLF, MLF y MCC) y el límite de detección (LD) de cada analito.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 19 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
7.1.
BPL
7.1.1. Limpieza del material de vidrio:
El material de vidrio debe limpiarse de acuerdo al siguiente protocolo para asegurar su
limpieza:
 Enjuague todo material de vidrio con el último solvente utilizado tan pronto como sea
posible.
 Lave con agua caliente y detergente, enjuague con agua del suministro del municipio y
agua destilada, en este orden.
 Escurra el agua.
 Enjuague todo el recipiente con acetona y/o
 Coloque el material en una mufla o estufa que alcance 400°C (A excepción del
material volumétrico)
 Seque y enfríe el material
 Tape el material con papel de aluminio o invierta y almacene en un ambiente limpio
para prevenir la acumulación de polvo u otros contaminantes.
Este procedimiento puede no ser suficiente para la eliminación de compuestos
termoestables como los bifenilos policlorados (PCB) que pueden causar interferencia.
7.1.2. Residuos de analitos
El analista debe prevenir la ocurrencia de interferencias potenciales como la
contaminación debida a residuos de analitos dejados en los materiales provenientes de
estándares o muestras contaminadas.
7.2.
Demostración de la capacidad inicial del laboratorio
Para demostrar la capacidad inicial del laboratorio se deberá conocer el porcentaje de
recuperación (%R) de cada analito, la desviación estándar relativa (DER) y el límite de
detección (LD), de los datos obtenidos en las corridas de las muestras de blancos de
laboratorio fortificados (BLF).
Es recomendable que periódicamente el laboratorio determine y documente sus límites de
detección y capacidad para los analitos de interés en cada proceso analítico.
7.2.1.

Determinación del porcentaje de recuperación del analito.
Con blanco de laboratorio fortificado (BLF).
La manera de proceder es la siguiente.
 Seleccione una concentración representativa de al menos 10 veces el LD o una
concentración intermedia del estándar de calibración para cada analito.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 20 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
 Prepare una dilución primaria del estándar que contenga 1000 veces la concentración
seleccionada.
 Con una jeringa adicione 1 mL de la solución concentrada a un seriado de 4 a 7
alícuotas de 1L de agua reactivo.
 Analizar cada alícuota de acuerdo al procedimiento establecido.
Calcule el porcentaje de recuperación (%R) determinado para los diferentes analitos, el
cual podrá variar en un rango de ±30% del valor indicado en la Cromatografía de
gases/MS – Método EPA 525-2
Demuestre y documente la calibración antes de proceder con el análisis de muestras de
rutina, antes del análisis de un lote de muestras (en un periodo no mayor a 12 horas) o al
inicio de cada día de trabajo.











Determine la escala de respuesta para las masas y la abundancia de acuerdo a lo
indicado por el manual del equipo.
Verifique el autotune y el cumplimiento de especificaciones
Inyecte 1 µL de una solución de DFTPP (decafluorotrifenilfosfina), endrín y 4,4´DDT (estos 2 analitos pueden ir en solución independiente a la de DFTPP y se
utilizan para verificar la degradación).
Adquiera el espectro de masas de 45 a 450 uma, (al menos se debe adquirir 5
scans/pico), de un pico de respuesta simétrica para cada componente.
Analice el espectro del DFTPP y verifique el cumplimiento de los criterios definidos
en la Tabla para proseguir con la calibración.
Analice los productos de degradación del endrín, endrín cetona y endrín aldehido y
del 4,4´-DDT, 4,4´-DDD y 4,4´-DDE. El pico de endrín cetona sale 1,1 a 1,2 veces
el tiempo de retención del endrín con iones de relación m/z 67 y 317 en el espectro
de masas. Si la degradación del endrín y del DDT excede el 20%, es necesario
que realice mantenimiento en el puerto de inyección y posiblemente otras áreas
antes de realizar la calibración.
Inyecte 1 µL de la solución de calibración del punto medio de la curva (0,5 a 2,0
µg/L.
Adquiera el espectro de masas de 45-450 uma
En el caso de plaguicidas que dan varios picos como el toxafeno, el clordano o los
contaminantes bifenilos policlorados, inyecte individualmente cada solución.
Las condiciones de trabajo se describen en la tabla 7
Analice los datos adquiridos, si los componentes son reconocidos inyecte las otras
soluciones de calibración, compare la sensibilidad con la obtenida para los mismos
compuestos por otros detectores como CE.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 21 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Tabla y Tabla 8 para las últimas 3 de 4 muestras consecutivas y la DER de las
mediciones deberá ser menor del 30% de los valores de recuperación descritos para el
método normalizado de referencia. Con este criterio se determina si la eficiencia es
satisfactoria, caso en el cual se prosigue con el análisis de las muestras. En caso de no
cumplir las especificaciones para ciertos analitos se debe repetir el análisis utilizando
agua fresca, las veces necesarias, analizando en cada caso las posibles causas, hasta
que la recuperación y la DER sean satisfactorios.
El criterio de aceptación o rechazo es que la recuperación del analito con que se fortificó
el agua deberá ser de ±30% de la concentración adicionada y la desviación estándar
relativa de la medición (DER) ≤20%. Una vez que se ha demostrado la capacidad del
laboratorio se podrá repetir esta verificación utilizando solamente 4 alícuotas. En la
Cromatografía de gases/MS – Método EPA 525-2
Demuestre y documente la calibración antes de proceder con el análisis de muestras de
rutina, antes del análisis de un lote de muestras (en un periodo no mayor a 12 horas) o al
inicio de cada día de trabajo.










Determine la escala de respuesta para las masas y la abundancia de acuerdo a lo
indicado por el manual del equipo.
Verifique el autotune y el cumplimiento de especificaciones
Inyecte 1 µL de una solución de DFTPP (decafluorotrifenilfosfina), endrín y 4,4´DDT (estos 2 analitos pueden ir en solución independiente a la de DFTPP y se
utilizan para verificar la degradación).
Adquiera el espectro de masas de 45 a 450 uma, (al menos se debe adquirir 5
scans/pico), de un pico de respuesta simétrica para cada componente.
Analice el espectro del DFTPP y verifique el cumplimiento de los criterios definidos
en la Tabla para proseguir con la calibración.
Analice los productos de degradación del endrín, endrín cetona y endrín aldehido y
del 4,4´-DDT, 4,4´-DDD y 4,4´-DDE. El pico de endrín cetona sale 1,1 a 1,2 veces
el tiempo de retención del endrín con iones de relación m/z 67 y 317 en el espectro
de masas. Si la degradación del endrín y del DDT excede el 20%, es necesario
que realice mantenimiento en el puerto de inyección y posiblemente otras áreas
antes de realizar la calibración.
Inyecte 1 µL de la solución de calibración del punto medio de la curva (0,5 a 2,0
µg/L.
Adquiera el espectro de masas de 45-450 uma
En el caso de plaguicidas que dan varios picos como el toxafeno, el clordano o los
contaminantes bifenilos policlorados, inyecte individualmente cada solución.
Las condiciones de trabajo se describen en la tabla 7
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 22 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA

Analice los datos adquiridos, si los componentes son reconocidos inyecte las otras
soluciones de calibración, compare la sensibilidad con la obtenida para los mismos
compuestos por otros detectores como CE.
Tabla se ilustran los resultados obtenidos en la determinación del %R con BLF de varias
tipos de agua.
7.2.2.
Determinación del límite de detección (LD)
Para la determinación del límite de detección se deberán analizar al menos 7 Blancos de
laboratorio fortificados (BLF) preparados a una concentración baja de los diferentes
analitos como recomienda el método en la Tabla 8.
Otra opción es utilizar un punto de calibración calculado de manera que genere una
respuesta que sea 3 a 5 veces la señal de ruido. Se recomienda que estos 7 BLF sean
analizados en un periodo de 7 días para reflejar la variabilidad entre días. Una vez
analizados los 7 blancos se debe proceder a calcular la exactitud media y la desviación
estándar (DE) para cada analito. Con estos resultados calcular el LD según la ecuación:
LD  S * t( n 1 y 99%)
La demostración de la capacidad inicial del laboratorio permite inferir que el laboratorio
puede analizar muestras desconocidas por esta nueva metodología, aplicando las BPL y
los controles incluidos en este numeral.
7.3.
Control de calidad
Una vez demostrada la capacidad del laboratorio para aplicar la metodología, el
laboratorio puede iniciar el análisis de muestras desconocidas, en este caso debe planear
el lote de corrida el cual estará compuesto por:

Soluciones para la verificación de la eficiencia del sistema cromatográfico, tal
como se desarrolla en el numeral 7.3.1
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 23 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA





Preparación, análisis y evaluación de los blancos de solventes, de reactivos, de
campo y de laboratorio fortificado de acuerdo a lo indicado en el numeral 7.3.2
Demostración de la ausencia de interferencias potenciales tal como se indica en el
numeral 7.3.3
Preparación, análisis y evaluación de réplicas de laboratorio tal como se indica en
el numeral 7.3.4
Preparación, análisis y evaluación de las soluciones de calibración, estándar
interno en caso de que aplique y compuesto sucedáneo (surrogate), la preparación
de las soluciones de calibración se desarrolla en el numeral 8, la evaluación se
desarrolla en el numeral 7.3.5
Preparación, análisis y evaluación de muestras de control de calidad internas o de
origen externo de acuerdo a lo indicado en el numeral 7.3.5.4
7.3.1. Uso de Solución de verificación de eficiencia (SVL)
La eficiencia del laboratorio deberá ser monitoreada mediante la aplicación diaria del
análisis de una SVL, la cual contiene compuestos designados para evaluar la sensibilidad
del instrumento en función de la detección del analito, relación señal/ruido (S/N)>3. La
eficiencia del sistema cromatográfico en función del factor Gaussiano del pico (PGF) y la
eficiencia de la columna cromatográfica en función de la resolución como se ilustra en la
Tabla 4.

El Factor Gaussiano del Pico (PGF) se calcula mediante la ecuación:
PGF 
donde:

1,83 * W(1 / 2)
W(1 / 10)
W(1/2) = anchura de pico a la mitad de la altura en segundos.
W(1/10) = anchura de pico a la décima parte de la altura en segundos.
La Resolución entre picos está definida por la ecuación
R
t
W
donde: t es la diferencia del tiempo de elución entre dos picos
W es el promedio de la altura de pico a la línea base de los dos picos.
En caso que la respuesta del instrumento no satisfaga las especificaciones dadas es
necesario revisar las condiciones del equipo e insumos involucrados en la determinación
analítica. Los requerimientos de sensibilidad se basan en los LD dados para el método
normalizado. Las concentraciones de los estándares utilizados como SVL pueden
ajustarse de manera que sean compatibles con el LD determinado por el laboratorio.
Tabla 4. Requerimientos para evaluar la eficiencia del laboratorio usando soluciones de
verificación
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 24 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Ensayo
Analito
Concentración
µg/mL
Sensibilidad
Clorpirifos
0,0020
DCPA
0,0500
Clorotalonil
0,0500
HCH delta
0,0400
Eficiencia
cromatográfica
Eficiencia de la
columna
a
Requerimientos
Detección del analito;
S/N>3
0,80<PGF<1,15a
Resolución >0,50b
b
Fuente EPA508 Versión 2.1 1995. PGF Factor Gussiano del pico. Resolución entre dos picos.
El laboratorio puede adoptar prácticas de control de calidad dependiendo del método.
Ésto depende las exigencias del laboratorio y la naturaleza de las muestras, se puede
analizar siempre duplicados de muestras de MLF, entre otras.
Se permite la modificación de algunos factores críticos en el análisis, tales como columna,
condiciones cromatográficas o detector, sin embargo, valide la condición cambiada y
evalúe que los nuevos resultados cumplan las especificaciones definidas para el método
original.
7.3.2. Uso de blancos
Uno de los requisitos de obligatorio cumplimiento para el control y aseguramiento de la
calidad, incluido en BPL o dentro de un sistema de gestión de calidad desarrollado bajo
cualquier normativa o legislación, es el análisis de blancos con cada lote de corrida, que
demuestre que la determinación cualitativa y cuantitativa del analito es confiable y no
corresponde a respuestas generadas por el agua utilizada en el laboratorio, reactivos,
solventes o interferentes causados durante las etapas de recolección, tratamiento,
extracción y limpieza de la muestra. Los siguientes tipos de blancos se describen para la
aplicación en esta metodología:
7.3.2.1.
Blanco de solventes (BS)
Prepare y analice un blanco de solvente, para cada nueva botella de solvente antes de ser
utilizada para la extracción en las muestras. Mida un volumen de solvente igual al utilizado
para la extracción de las muestras y sométalo a las mismas etapas de concentración,
inyectando un volumen igual al definido para las muestras y verifique la respuesta
cromatográfica. No se debe presentar respuesta en la ventana de detección o tiempo de
retención de los analitos. En caso de que esto ocurra, utilice una nueva botella de reactivo
e informe al proveedor sobre el hallazgo, previa verificación del material de laboratorio,
para eliminar una posible interferencia debido a los elementos de laboratorio utilizados.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 25 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
7.3.2.2.
Blanco de reactivos (BR)
Preparado con el agua utilizada en el laboratorio. Se utiliza para demostrar que los
materiales de vidrio no aportan interferentes, que los reactivos y solventes, estándares
internos y compuestos sucedáneos (surrogate) utilizados durante el análisis no presentan
respuesta analítica que pueda interferir con la del analito. Procese antes que las
muestras. Cada vez que se cambie algún reactivo prepare un nuevo blanco de reactivos,
incluso durante la corrida de un lote de trabajo.

Uso de blanco de reactivos (BR)
Análisis del blanco de reactivos del laboratorio. (BR). Corra un blanco de reactivos al
menos en los siguientes casos:




Antes de comenzar el proceso analítico de muestras desconocidas
Cada vez que se cambie algún reactivo
Cada vez que se inicie una nueva muestra,
Una vez se haya eliminado la fuente de cualquier contaminación o interferente
En caso que en el BR se produzca alguna señal en la ventana de tiempo de retención de
cualquiera de los analitos de interés, estándar interno o compuesto sucedáneo
(surrogate), investigue la fuente de contaminación y elimine la interferencia antes de
procesar muestras
7.3.2.3.
Blanco de campo (BC)
Se puede obtener un blanco de campo a partir de una muestra de agua de laboratorio
llevada al sitio de recolección, la cual es tratada como una muestra desconocida. Exponga
esta muestra a las condiciones del sitio de muestreo, conservación y todos los demás
procedimientos analíticos. Su finalidad es demostrar si los analitos u otros interferentes
están presentes en el ambiente del sitio de muestreo.
7.3.2.4.
Blanco de laboratorio fortificado (BLF)
Se prepara a partir de una muestra de agua destilada, a la cual se adiciona una alícuota
del analito de concentración conocida. Se recomienda fortificar con concentraciones 10
veces mayores al LD. Analice como una muestra rutinaria. Procese por lo menos un BLF
por lote de corrida (ó en 24 horas de análisis). Su propósito es determinar que el método
está bajo control y el cumplimiento de los parámetros de desempeño de la metodología
(precisión y exactitud en el límite de detección).

Uso de blanco de laboratorio fortificado BLF
El laboratorio debe analizar por lo menos un BLF cada 20 muestras o una por lote de
corrida (conformado por las muestras corridas en 24 horas). La fortificación debe ser
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 26 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
preferiblemente 10 veces el LD. Calcule la exactitud como porcentaje de recuperación, la
cual se debe encontrar dentro de las especificaciones descritas en el numeral 7.2.1.
Cuando no se cumplen las especificaciones de las muestras fortificadas y de control,
analice las causas, documéntelas y tome las acciones correctivas y las preventivas
necesarias que eviten la repetición de datos fuera de control.
Establezca los límites máximo y mínimo de la carta control. Si no se cuenta con datos
suficientes para establecer estos valores, puede utilizar los criterios establecidos en el
numeral 7.2.1. Cuando se disponga de datos suficientes, (20 a 30 análisis) establezca sus
propios límites de control, para lo cual se realizan las estimaciones aplicando las
siguientes ecuaciones:
Límite de control superior = R + 3*DE (desviación estándar)
Límite de control inferior = X – 3*DE
Ajuste estos límites de control después de cada 10 nuevas mediciones de la recuperación,
usando los últimos 20 a 30 datos para su estimación sin que se excedan las
especificaciones dadas para la metodología.
7.3.3. Interferencias potenciales
7.3.3.1.
Interferencias del método
Las interferencias en esta metodología pueden originarse en la contaminación ocurrida
durante el manejo o debido a la calidad de los solventes, reactivos, limpieza de los
elementos de vidriería, equipo para el procesamiento de las muestras, los cuales pueden
producir señales discretas (artefactos) o aumentar el ruido de la línea base.
Demuestre de manera rutinaria que todos los reactivos, solventes, elementos de
laboratorio y equipos se encuentran libres de interferencias para lo cual se utilizan los
blancos de laboratorio contemplados en el numeral 7.3.2.
La calidad de los reactivos y solventes debe ser la apropiada para el análisis de
plaguicidas con el fin de minimizar las interferencias potenciales. En caso de no contar
con los solventes de la calidad requerida destile los reactivos disponibles en vidrio. Tenga
cuidado debido a que en esta operación se remueven los estabilizadores agregados por el
fabricante por lo cual se reduce su tiempo de vida.
La contaminación por ftalatos es una interferencia importante cuando se analizan
muestras utilizando el detector de captura de electrones. La contaminación se origina por
el uso de material de plástico o manipulación sobre superficies plásticas por lo que la
forma de minimizar esta contaminación es evitando su uso en cualquiera de las etapas
analíticas.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 27 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Otra forma de contaminación sucede cuando se corren muestras desconocidas en el
cromatógrafo. Si una de ellas contiene los analitos en baja concentración y se analiza
después de otra que contiene concentraciones altas, es posible que se genere respuesta
mayor en la muestra de baja concentración, lo cual da lugar a una contaminación cruzada.
Este problema se puede disminuir realizando una inyección o más de solvente MTBE
después de la muestra de concentración alta y para posteriormente volver a analizar la
muestra de concentración baja.
Se debe tener en cuenta que debido al alcance de la metodología, algunos compuestos
organoclorados pueden no tener buena resolución por lo cual es necesario contar con
más de un sistema cromatográfico (columna y condiciones de trabajo) con el fin de
mejorar la capacidad de separación de los analitos. La identificación depende de la
especificidad del detector con el que se cuente, teniendo en cuenta que el detector que
presenta la mayor probabilidad de identificación veraz de un compuesto es el de masas.
Los estándares de calibración, las muestras de control y las muestras para análisis deben
estar disueltos en el mismo solvente para evitar posibles problemas en la comparabilidad
de los picos cromatográficos.
7.3.3.2.
Interferencias de matriz
Verifique que no se presente contaminación durante la recolección, almacenamiento y
transporte de las muestras. Es requisito indispensable que analice blancos de muestra
para demostrar que no se presenta este tipo de contaminación y proporcionar validez a
los resultados.
Tenga en cuenta que dependiendo del origen de las muestras, se pueden presentar
interferencias por efecto de matriz. Es ideal que disponga de otras técnicas para confirmar
que la respuesta obtenida es debida al analito y no a una interferente.
Las interferencias de matriz pueden variar considerablemente dependiendo de la fuente
de las muestras y su diversidad y ocurren por la coextracción de contaminantes
contenidos en ella.
Tome las muestras de aguas crudas tratadas con cloro a una distancia adecuada antes
del sitio de cloración, ya que la presencia de concentraciones excesivas de este
componente induce la pérdida de algunos constituyentes de la muestra.
Dependiendo de la fuente de la cual sea tomada la muestra se pueden presentar
interferencias, principalmente si son de corrientes de desecho, filtrados de suelo
(lixiviados) o agua de vertimiento. En estos casos se requiere la aplicación de análisis
confirmatorio para incrementar la confiabilidad de la identificación y cuantificación de
compuestos determinados por el método aplicado.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 28 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
7.3.4. Réplicas
Uno de los requisitos de obligatorio cumplimiento para el control y aseguramiento de la
calidad, incluido en BPL o dentro de un sistema de gestión de calidad desarrollado bajo
cualquier normativa o legislación, es el análisis de réplicas, estas pueden ser:
7.3.4.1.
Réplicas de laboratorio (RL)
Trabájelas a partir de dos alícuotas de la muestra analítica, identificadas como RL1 y RL2
(RL: Réplica de laboratorio), analizadas separadamente, aplicando el procedimiento en
idénticas condiciones. Tiene como finalidad determinar la precisión asociada con el
procedimiento en el laboratorio o repetibilidad. Estas réplicas no permiten conocer el
efecto del muestreo, conservación y almacenamiento de muestras.
7.3.4.2.
Réplicas de campo (RC)
Obténgalas por recolección en el mismo tiempo y lugar, bajo condiciones iguales de dos
muestras independientes (RC1 y RC2), las cuales se tratan de manera igual durante la
recolección, transporte y almacenamiento, es decir en campo, y en el laboratorio. Tienen
como objeto determinar la precisión (Reproducibilidad) asociada con el muestreo,
recolección, conservación, almacenamiento y el procedimiento en el laboratorio.
Evaluación de las réplicas: si los resultados de las réplicas no se encuentran dentro de los
límites especificados en cada protocolo analítico en particular, reprocese otras muestras
de réplicas, si nuevamente se encuentran fuera de especificaciones, suspenda el lote de
corrida, busque la causa del problema, tome las acciones correctivas y documéntelas.
7.3.5. Soluciones de calibración
7.3.5.1.
Estándares de calibración (EC)
Son las soluciones preparadas a partir de la solución concentrada de los estándares
certificados de los analitos, y que contienen estándar interno y compuesto sucedáneo
(surrogate). Utilícelas para preparar la curva de calibración y verificar la respuesta
instrumental frente al analito.
7.3.5.2.
Estándar interno (EI)
El estándar interno es un compuesto similar en su estructura y comportamiento analítico
que no forma parte de la muestra. El mejor estándar interno corresponde al derivado
deuterado del analito. Agregue este estándar en cantidad conocida a la muestra y utilícelo
para medir la respuesta relativa de los analitos, compuesto sucedáneo (surrogate) y otros
componentes.

Uso de estándar Interno (EI)
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 29 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Cuando se aplica procedimiento de calibración con él, monitoree su respuesta (área o
altura del pico cromatográfico) en todas las muestras corridas durante cada día de
análisis. La respuesta del EI en los cromatogramas de cada muestra no podrá presentar
una desviación superior al 30 % en ningún caso.
En caso que la respuesta de una de las muestras sea >30%, optimice las condiciones del
instrumento e inyéctelo una segunda alícuota. El criterio de toma de decisión es el
siguiente:
 Si la segunda alícuota produce una señal aceptable, informe el resultado para la
muestra.
 En caso que la desviación sea ≥30%, analice nuevamente la muestra ncluyendo todas
las etapas analíticas, utilizando preferiblemente remanente de la misma muestra. En
caso de no disponer de muestra remanente, anote los resultados de la nueva
inyección del mismo extracto e informe el resultado como SOSPECHOSO.
Si se sigue presentando respuesta por fuera de especificación proceda con la verificación
de un estándar de calibración y el criterio para la toma de decisión es el siguiente:
 Si el estándar de verificación genera una respuesta cuya desviación esté dentro del
20% del valor esperado, entonces siga el procedimiento aplicando una segunda
inyección en cada muestra que incumpla los requerimientos de respuesta.
 En caso que la respuesta se desvíe en más del 20% del valor esperado, entonces
recalibre siguiendo todo el procedimiento descrito para calibración (numeral 8.1).
7.3.5.3.
Compuesto sucedáneos (surrogate) CS
El compuesto sucedáneo (surrogate) es un analito puro que no forma parte de la muestra
(se conoce que no va a estar presente en el tipo de muestras a analizar), agréguelo en
una cantidad conocida antes de la extracción y mídalo de igual manera que los analitos de
la metodología. Su fin es verificar la capacidad del método para su determinación en cada
muestra.

Uso del compuesto sucedáneo (surrogate) (CS)
Cuando se usa en la metodología un compuesto sucedáneo (surrogate), determine la
recuperación, la cual se debe encontrar entre el 70% al 130%.
Si la recuperación es menor al 70% o mayor al 130%, proceda de la siguiente manera




Revise los cálculos para detectar posibles errores
Fortifique soluciones para verificar la estabilidad o degradación del CS
Verifique que no se presente contaminación
Verifique el desempeño instrumental
En caso de que en estas revisiones no se identifique la causa, reanalice el extracto.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 30 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Si en el análisis de un BLF, la recuperación del CS no se encuentra entre el 70% al 130%,
identifique el problema e implemente una acción correctiva antes de continuar los análisis.
Reanalice la muestra y si cumple con el criterio de recuperación, reporte estos datos, en
caso de no cumplirlo, reporte la muestra como sospechosa.
7.3.5.4.
Muestras para control de calidad (MCC)
Obténgala a partir de una muestra de una matriz, la cual puede contener los analitos del
método en niveles conocidos o una muestra de matriz (si se trata de agua es preferible
obtenerla de una fuente externa al laboratorio), la cual es fortificada con una alícuota de
los analitos en un solvente miscible con agua. Tiene como objeto verificar los parámetros
del método con una fuente externa al laboratorio.
7.3.5.5.
Matriz de laboratorio fortificada (MLF)
Trabájela a partir de una alícuota de una muestra desconocida, a la cual se le agregan
cantidades conocidas de los analitos, estándar interno y compuesto sucedáneo
(surrogate). Analícela de igual manera que las muestras rutinarias. Tiene como finalidad
determinar si la matriz contribuye al sesgo de los resultados analíticos. Se debe
determinar la concentración de los analitos en la muestra inicial, antes de enriquecerla,
para hacer la corrección en la MLF.
7.3.5.6.
Controles con matriz de laboratorio fortificada (MLF)
Adicione una concentración conocida al menos al 5% de las muestras de rutina o una
muestra por serie si éstas son muy grandes. La concentración seleccionada no podrá ser
menor que la respuesta de corrida de la muestra que se selecciona para fortificar. En
condiciones ideales, la concentración para fortificar a matriz deberá ser la misma que para
preparar el BLF.
Calcule el porcentaje de recuperación (%R) para cada analito en función de la
concentración adicionada. Una vez se haya aplicado la corrección del resultado analítico,
siendo X la concentración obtenida para la muestra fortificada y b la medida en la muestra
sin fortificar
%R 
( X  b)
*100
concentrac ión de fortificac ión
Compare estos resultados con los límites de control obtenidos en agua destilada
fortificada (BLF) utilizada en el mismo proceso analítico. El valor para %R debe estar entre
65 - 135% de la cantidad fortificada.
Si la recuperación de cada uno de los analitos cae por fuera del rango asignado, y el
laboratorio tiene demostrada que la capacidad analítica está bajo control, el resultado
obtenido para la muestra no fortificada se informará como sospechoso con por efectos de
matriz y no del proceso analítico.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 31 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
7.3.5.7.
Uso de controles de calidad de fuente externa
El laboratorio debe analizar por lo menos una muestra cada trimestre de control de calidad
proveniente de una fuente externa. Estas muestras pueden provenir del ejercicio de
participación en rondas de comparación interlaboratorial.
7.3.5.8.
Uso de la solución de verificación de degradación (SVD)
La degradación del DDT y el endrín ocurre por exposición de sitios activos de las
moléculas a las condiciones de temperatura del puerto de inyección y de las columnas.
Verifique diariamente esta degradación. Los compuestos originados por el DDT eluyen
antes de éste, mientras que los productos de degradación del endrín eluyen
posteriormente. Si los productos de degradación exceden el 20%, vuelva a silanizar el
liner del puerto de inyección.
8. CALIBRACIÓN
8.1.
Cromatografía de gases con detector de captura de electrones
Establezca los parámetros de operación del cromatógrafo de gases de acuerdo con los
equipos e insumos descritos en el numeral 6. El sistema cromatográfico puede calibrarse
utilizando la técnica de estándar interno o de estándar externo. Realice la prueba indicada
en el numeral 7.2.1 para verificar la degradación del DDT y el endrin. En caso de no
cumplir especificaciones, tome el correctivo pertinente.
Realice la cuantificación por curva o por calibración punto a punto. Prepare las soluciones
que contienen los estándares para calibración en forma independiente por grupos de
analitos. También puede preparar de tal manera que analitos que no presentan buena
resolución bajo las condiciones de análisis se encuentren juntos. Prepare los estándares
de toxafeno, clordano y los arocloros en forma individual.
8.1.1. Calibración con estándar interno.
Seleccione uno o más estándares internos de comportamiento analítico similar a los
analitos de interés y demuestre que la medición obtenida para el estándar interno no se ve
afectada por el método o por interferencias de matriz. Para este caso el PCNB se
comporta de manera conveniente.

Prepare estándar interno de calibración (EICAL) en un balón volumétrico según
recomendaciones del método EPA 508 entre 3 y 5 niveles de concentración para
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 32 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA





cada analito de interés, por adición de volúmenes de una o más de las soluciones
concentradas de estándares.
Utilice un mínimo de 3 estándares de calibración para calibrar un rango de
concentración con un factor de 20; para un factor de 50 utilicer al menos 4
estándares y para un factor de 100 al menos 5.
El estándar más bajo deberá representar la concentración más cercana pero
superior al límite de detección del método.
Emplee el estándar sobrante para evaluar el rango esperado de concentración del
analito en la muestra o para definir el rango de trabajo del detector.
Adicione una cantidad conocida de uno más estándares internos, para cada uno
de los estándares de calibración y diluya a volumen con MTBE.
Analice cada uno de los EICAL de acuerdo al procedimiento establecido en el
numeral 9.4 y tabule los resultados utilizando la respuesta en área o altura de los
picos frente a la concentración dada para cada compuesto y estándar interno.
Calcule el factor de respuesta (FR) para cada analito y compuestos similares
utilizando la ecuación:
:
FR 
( Aa )(Cei )
( Aei )(Ca)
Donde:
Aa = respuesta para el analito utilizado
Aei= respuesta para el estándar interno
Ca = concentración del analito utilizado en µg/L
Cei= concentración del estándar interno en µg/L





Si el valor del factor de respuesta sobre el rango de trabajo es constante (20% de
la DER o menor) puede usarse para los cálculos. Alternativamente los resultados
pueden usarse para trazar una curva de calibración de relación de respuesta
(Aa/Aei) vs concentración del analito a medir (Ca).
Verifique diariamente el factor de respuesta o la curva de calibración con que se
trabaje o como mínimo deberá verificar dos estándares de calibración, uno al
iniciar y otro al terminar los análisis diarios. Estos estándares de chequeo deberán
ser de diferente concentración para permitir la verificación de la curva de
concentración.
Verifique los estándares de manera intercalada para períodos de análisis mayores
de 8 horas, con una frecuencia regular de las muestras de análisis durante el
período de trabajo. Si la respuesta para cualquier analito supera la variación de ±
20%, repita con estándar de calibración fresco. Si este resultado no es adecuado
genere una nueva curva de calibración. Un inyector sucio puede disminuir la
sensibilidad para los compuestos que eluyen tarde en la corrida.
Se recomienda analizar una solución de verificación de la calibración cada día de
trabajo
Si la verificación de la curva no cumple las especificaciones, los analitos
detectados en el periodo de las 2 curvas (cumple / no cumple) se consideran
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 33 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA

sospechosos y se debe reanalizar los extractos luego de tener una calibración que
pasa la variación.
Haga periódicamente la verificación de los estándares, al menos cada 3 a 4 meses
por medio de MCC.
8.1.2. Calibración con estándar externo.





Prepare estándar de calibración de la misma forma que se indicó en el numeral
8.1. omitiendo el uso del un estándar interno.
Comience con el estándar de calibración más bajo y analice cada uno de los
estándares aplicando el procedimiento establecido en el numeral 9.4 y tabule la
respuesta en área o altura del pico del analito, contra las concentraciones
inyectadas en el estándar en µg/L.
Utilice Los resultados para construir la curva de calibración de cada componente.
Si el cociente de respuesta a la concentración (Factor de calibración) es una
constante sobre el rango de trabajo (DER < 20%) asuma linealidad por el origen y
el promedio del cociente o Factor de calibración puede utilizarse en lugar de la
curva de calibración.
Verifique tanto la curva de calibración como el Factor de calibración en cada día de
trabajo como se aplica con el EI.
Verifique periódicamente los estándares de calibración, al menos cada trimestre mediante
un estándar preparado con un material de referencia obtenido externamente. Los
resultados de estos análisis deberán encontrarse dentro de los límites usados en la
verificación rutinaria de calibración.
8.2.
Cromatografía de gases/MS – Método EPA 525-2
Demuestre y documente la calibración antes de proceder con el análisis de muestras de
rutina, antes del análisis de un lote de muestras (en un periodo no mayor a 12 horas) o al
inicio de cada día de trabajo.






Determine la escala de respuesta para las masas y la abundancia de acuerdo a lo
indicado por el manual del equipo.
Verifique el autotune y el cumplimiento de especificaciones
Inyecte 1 µL de una solución de DFTPP (decafluorotrifenilfosfina), endrín y 4,4´DDT (estos 2 analitos pueden ir en solución independiente a la de DFTPP y se
utilizan para verificar la degradación).
Adquiera el espectro de masas de 45 a 450 uma, (al menos se debe adquirir 5
scans/pico), de un pico de respuesta simétrica para cada componente.
Analice el espectro del DFTPP y verifique el cumplimiento de los criterios definidos
en la Tabla para proseguir con la calibración.
Analice los productos de degradación del endrín, endrín cetona y endrín aldehido y
del 4,4´-DDT, 4,4´-DDD y 4,4´-DDE. El pico de endrín cetona sale 1,1 a 1,2 veces
el tiempo de retención del endrín con iones de relación m/z 67 y 317 en el espectro
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 34 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA





de masas. Si la degradación del endrín y del DDT excede el 20%, es necesario
que realice mantenimiento en el puerto de inyección y posiblemente otras áreas
antes de realizar la calibración.
Inyecte 1 µL de la solución de calibración del punto medio de la curva (0,5 a 2,0
µg/L.
Adquiera el espectro de masas de 45-450 uma
En el caso de plaguicidas que dan varios picos como el toxafeno, el clordano o los
contaminantes bifenilos policlorados, inyecte individualmente cada solución.
Las condiciones de trabajo se describen en la tabla 7
Analice los datos adquiridos, si los componentes son reconocidos inyecte las otras
soluciones de calibración, compare la sensibilidad con la obtenida para los mismos
compuestos por otros detectores como CE.
Tabla 5. Exactitud y precisión de plaguicidas organoclorados
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 35 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
EXACTITUD Y PRECISIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS PARA AGUA REACTIVO Y AGUA NATURAL FORTIFICADA
(SINTÉTICA), OBTENIDOS EN EL LABORATORIO
ANALITO
CONCENTRACIÓN
AGUA REACTIVO
AGUA SINTÉTICA 1§
AGUA SINTÉTICA 2£
ug/L
R*
DE**
R
DE
R
DE
Aldrin
0,15
86
9,5
100
11
69
9
Clordano-alfa
0,15
99
11,9
96
12,5
99
7,9
Clordano-gamma
0,15
99
11,9
96
12,5
99
6,9
Clorneb
5,00
97
11,6
95
6,7
75
8,3
Clorobenzilato
10,00
108
5,4
98
10,8
102
9,2
Clorotalonil
0,25
91
8,2
103
10,3
71
9,2
DCPA
0,25
103
12,4
100
13
101
6,1
4,4'-DDD
0,25
107
6,4
96
8,6
101
7,1
4,4'-DDE
0,10
99
11,9
96
12,5
99
6,9
4,4'-DDT
0,60
112
16,8
98
11,8
84
8,4
Dieldrin
0,20
87
8,7
103
9,3
82
7,4
Endosulfan I
0,15
87
8,7
102
8,2
84
12,2
Endosulfan Sulfato
0,15
102
15,3
94
1,3
72
9,4
Endrin
0,15
88
8,8
98
9,8
104
9,2
Endrin Aldehido
0,25
88
7,9
103
11,3
84
6,8
Endosulfan II
0,15
92
10,1
98
10,8
76
3,9
Etridiazol
0,25
103
6,2
91
6,4
98
7,7
HCH-alfa
0,05
92
10,1
106
7,4
86
6
HCH-beta
0,10
95
6,7
92
5,5
100
6,2
HCH-delta
0,10
102
11,2
99
11,9
103
7,7
HCH-gamma
0,15
89
9,8
115
6,9
85
7,7
Heptacloro
0,10
98
11,8
85
11,1
85
9,8
Heptacloro Epoxido
0,15
87
8,7
103
7,2
82
4,8
Hexaclorobenceno
0,05
99
21,8
82
9,8
68
6,2
Metoxicloro
0,50
105
13,7
101
10,1
104
9,5
cis-Permetrina
5,00
91
9,1
96
11,5
86
7,1
trans-Permetrina
5,00
111
6,7
97
9,7
102
7,6
Propaclor
5,00
103
9,3
116
4,6
95
9,6
Trifluralina
0,25
103
5,2
86
10,3
87
10,3
R*: recuperación promedio
DE**: desviación estándar del % de recuperación
§: Agua Absopure Nature Artesian Spring Water (Absopure Water Co, Plymouth; Michigan) valor corregido por la cantidad presente en el blanco
£: Agua reactivo fortificada con ácido fúlvico 1 mg/L. Ácido fúlvico de International Humic Substances Society. Valor corregido por la cantidad






Determine las áreas absolutas de los iones de cuantificación de los componentes
de la mezcla de calibración, estándar interno y compuesto sucedáneo (surrogate).
Las áreas no deben variar más del 30% de la calibración más reciente. En caso de
tener variaciones mayores haga los ajustes (limpieza de la fuente de iones y
mantenimiento que incluye cambio del filamento, limpieza del cuadrupolo, etc.),
hasta alcanzar la sensibilidad y recalibre.
Verifique que el sistema se encuentra dentro de especificaciones mediante el
seguimiento de cartas control.
Calcule el FR de los analitos y el compuesto sucedáneo (surrogate), los cuales
deben estar dentro del 30% del promedio del valor medido en la calibración inicial.
Haga una regresión lineal para los compuestos de interés.
Cuando se cuantifica con concentración puntual, la respuesta debe estar entre ±
20% del valor de la concentración.
Empiece la adquisición de datos a los 4 minutos
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 36 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Tabla 6. Especificaciones para la verificación de la respuesta del detector de masas con el
DFTTP
CRITERIOS PARA ABUNDANCIA DE IONES PARA DECAFLUOROTRIFENILFOSFINA DFTPP
Masa M/z Criterio de abundancia relativa
Objeto de la verificación
51
10-80% del pico base
Sensibilidad de masa baja
68
< 2% de masa 69
Resolución de masa baja
70
< 2% de masa 69
Resolución de masa baja
127
10-80% del pico base
Resolución de masa media
197
< 2% de masa 198
Resolución de masa media y sensibilidad
198
Pico base o > 50% de masa 442
Resolución de masa media
199
5-9% de masa 198
Resolución de masa media y relación isotópica
275
10-60% del pico base
Sensibilidad de masa media a alta
365
> 1% del pico base
Threshold de linea base
441
Presente y < masa 443
Resolución de masa alta y sensibilidad
442
pico base o > 50% de masa 198
Resolución de masa alta y relación isotópica
443
15-24% de masa 442
Resolución de masa alta
Tabla 7. Condiciones del sistema cromatográfico para el análisis de plaguicidas
organoclorados por CG/MS - Método EPA 525-2
Parámetro
Rango de masas
Tiempo de scan
Temperatura inicial
Rampa de temperatura
Temperatura de Injector
Temperatura de la línea de transferencia
Temperatura de la fuente
Inyector
Volumen de inyección
Gas portador
Trampa iónica
Condiciones
45 - 450 uma
1 seg/scan
45°C por 1 minuto
45°C por 1 minuto
45°C hasta 130°C en 3 minutos
130°C hasta 180°C a 12°C/minuto
180°Chasta 240°C a 7°C/minuto
240°C hasta 320°C a 12°C/minuto
250°C - 300°C
250°C – 300°C
De acuerdo a las especificaciones del
fabricante
Inyección splitless ( se puede utilizar
splitless si la sensibilidad lo permite)
1- 2 uL
Helio a 33 cm/seg
La temperatura del manifold y la corriente
de emisión se deben fijar de acuerdo a las
recomendaciones del fabricante
Fuente: Método EPA 8270 C revisión 3 – 1996
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 37 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
9. PROCEDIMIENTO
9.1.
Tratamiento de la muestra
Realice el pretratamiento inicial de las muestras de acuerdo a lo consignado en el numeral
5.1, 5.2 y 5.3. Registre el volumen de agua recibido. Adicione conservante si no se aplicó
antes a cada muestra, BLF, BR y estándares de calibración (EICAL, EECAL).
9.2.
Limpieza de la muestra
9.2.1. Para aguas naturales
Trate las muestras de acuerdo a lo indicado en el numeral 9.4
9.2.2. Para aguas residuales
Trate las muestras de acuerdo a lo indicado en el numeral 9.4
9.2.3. Para sedimentos
Examine la muestra, extraiga los plaguicidas teniendo en cuenta las limitaciones de
solubilidad, estabilidad y recuperación antes de proceder con la solución como una
muestra acuosa. El método EPA 8270 para screening de plaguicidas por cromatografía de
gases con detector de masas, describe la siguiente metodología para sedimentos, basada
en el método de extracción EPA 3545.
Pese 10 g de sedimento seco, pase al dedal de extracción y extraiga con mezcla de
acetona/cloruro de metileno, reduzca el volumen a 1,0 mL. Agregue el compuesto
sucedáneo y el estándar interno, y continúe con la metodología de determinación. El
tiempo de estabilidad para plaguicidas organoclorados en este tipo de muestras es de 14
días, almacenados a 14°C y en la oscuridad para minimizar la degradación por efecto de
radiación UV y por actividad microbiana.
Otro método de extracción recomendado para sedimentos es la limpieza por Florisil con
remoción de los azufrados. Cuando se trabaja con sedimentos liofilizados se puede
realizar extracción con Soxhlet, ultrasonido y extracción líquida presurizada.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 38 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Tabla 8. Exactitud, precisión y límite de detección de plaguicidas organoclorados
EXACTITUD, PRECISIÓN, LÍMITE DE DETECCIÓN (LD) Y LÍMITE DE DETECCIÓN ESTIMADO (LDE) DE
PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS
ANALITO
Aldrin
Clordano-alfa
Clordano-gamma
Clorneb
Clorobenzilato
Clorotalonil
DCPA
4,4'-DDD
4,4'-DDE
4,4'-DDT
Dieldrin
Endosulfan I
Endosulfan Sulfato
Endrin
Endrin Aldehido
Endosulfan II
Etridiazol
HCH-alfa
HCH-beta
HCH-delta
HCH-gamma
Heptacloro
Heptacloro Epoxido
Hexaclorobenceno
Metoxicloro
cis-Permetrina
trans-Permetrina
Propaclor
Trifluralina
CONCENTR
ACIÓN DE
FORTIFICA
CIÓN ug/L
0,075
0,015
0,015
5,000
0,025
0,025
0,025
0,025
0,010
0,060
0,020
0,015
0,015
0,015
0,025
0,015
0,025
0,025
0,010
0,010
0,015
0,010
0,015
0,005
0,050
0,500
0,500
5,000
0,025
N
RECUPERA
CIÓN %
DER
LD Método
ug/L
LD
Estimado
ug/L
7
7
7
8
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
8
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
66
117
109
99
119
119
112
115
127
87
77
78
129
72
95
148
96
94
95
84
80
67
71
115
120
64
122
90
108
9
8
3
5
12
12
4
5
6
23
22
25
4
18
15
35
17
8
12
7
16
7
18
43
11
24
9
18
3
0,0140
0,0041
0,0016
2,2000
0,0110
0,0110
0,0032
0,0044
0,0025
0,0390
0,0110
0,0092
0,0024
0,0062
0,0110
0,0240
0,0130
0,0053
0,0036
0,0020
0,0060
0,0015
0,0059
0,0077
0,0220
25,0000
0,1800
0,2500
0,0026
0,0750
0,0015
0,0015
5,0000
0,0250
0,0250
0,0250
0,0025
0,0100
0,0600
0,0200
0,0150
0,0150
0,0150
0,0250
0,0240
0,0250
0,0250
0,0100
0,0100
0,0150
0,0100
0,0150
0,0077
0,0500
5,0000
0,5000
0,5000
0,0025
Fuente: Método 508 EPA. Versión 2.1 1995.
N número de réplicas. LD estimado con base en una relación señal/ruido 5 (la concentración con
la que se estimó este valor difiere de la utilizada para determinar el LD del método). DER
desviación estándar relativa.
9.3.


Sistema Cromatográfico
El sistema cromatográfico y las condiciones de operación para la separación y
análisis de los plaguicidas organoclorados según el protocolo tomado de la EPA
608 y se resume en la Tabla 3 a 13 . Así mismo los tiempos de retención de cada
uno de los analitos en función del tipo de columna utilizada se ilustra en la Tabla.
Calibre o verifique diariamente las condiciones del sistema cromatográfico. Los
estándares y muestras deberán estar disueltos en MTBE.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 39 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Tabla 9. Tiempos de retención para los plaguicidas organofosforados con dos columnas
cromatográficas diferentes
ANALITO
Etridiazol
Clorneb
Propaclor
Trifluralina
HCH-alfa
Hexaclorobenceno
HCH-beta
HCH-gama
PCNB (estándar interno)
HCH-delta
Clorotalonil
Heptacloro
Aldrin
Clorpirifos
DCPA
Heptacloro epóxido
Clordano-gama
Endosulfan I
Clordano-alfa
4,4´-DDE
Dieldrin
Endrin
Endosulfan II
Clorobencilato
4,4´-DDD
Endrin aldehido
Endosulfan sulfato
4,4´-DDT
Metoxicloro
cis-permetrina
trans-permetrina
DCB
ND: Dato no disponible
9.4.
TIEMPOS DE RETENCIÓN
COLUMNA 1
COLUMNA 2
23,46
22,78
25,50
26,18
28,90
30,94
31,62
ND
31,62
32,98
31,96
ND
33,32
40,12
33,66
35,36
34,00
34,00
35,02
41,48
35,36
39,78
37,74
36,72
40,12
38,08
40,60
ND
41,14
41,14
42,16
42,16
43,52
43,86
44,20
43,52
44,54
44,54
45,90
44,88
45,90
45,90
46,92
ND
47,60
51,68
47,94
48,28
48,28
46,92
48,62
46,92
49,98
49,30
50,32
50,32
53,38
53,72
58,48
ND
58,82
ND
64,10
ND
Fuente: EPA 508 Versión 2.1 1995
Análisis
9.4.1. Extracción líquida / líquida de plaguicidas organoclorados
9.4.1.1.


Extracción manual
Marque en el recipiente que contiene la muestra el menisco para la posterior
determinación del volumen.
Fortifique la muestra con 50 µL de la solución de compuesto sucedáneo (surrogate) y
coloque en un embudo de separación de 2 L. Trate de igual manera los BL, BLF y
demás muestras para control de calidad que acompañan al lote de análisis.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 40 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA










Ajuste el pH de las muestras o los estándares a 7 por adición de 50mL de buffer de
fosfatos. Verifique el pH y ajústelo hasta obtener el valor indicado.
Agregue 10 g de NaCl a la muestra, tape y agite para disolver la sal.
Agregue 60 mL de cloruro de metileno al frasco que contiene la muestra, tape y agite
por 30 segundos para enjuagar las paredes internas.
Transfiera la muestra con solvente al embudo de separación y agite vigorosamente
por dos minutos permitiendo igualar presiones durante la agitación.
Deje en reposo por lo menos 10 minutos para la separación de las fases, en caso de
presentarse emulsión entre las fases en más de 1/3 del volumen de la capa orgánica,
utilice medios mecánicos como centrifugación, agitación y filtración por lana de vidrio u
otro medio físico para romper la emulsión.
Separe la fase orgánica que contiene el cloruro de metileno en un erlenmeyer de 500
mL.
Agregue otra alícuota de 60 mL de cloruro de metileno al embudo que contiene la
muestra y repita la extracción.
Combine los extractos del solvente en el erlenmeyer
Realice una tercera extracción de la misma manera.
Determine el volumen de muestra original, llenando el frasco que contenía la muestra
con agua, hasta la marca hecha al inicio de la extracción. Transfiera el agua a una
probeta de 1000 mL. Registre el volumen con precisión de 5 mL.
9.4.1.2.
Extracción automática
La extracción automática presentada se realiza en un sistema mecánico de agitación por
rotación.









Marque en el recipiente que contiene la muestra el menisco para la posterior
determinación del volumen
Fortifique la muestra con 50 µL de la solución de compuesto sucedáneo (surrogate) y
coloque en un embudo de separación de 2L. Trate de igual manera los BL, BLF y
demás muestras para control de calidad que acompañan al lote de análisis.
Ajuste el pH de las muestras o los estándares a 7 por adición de 50 mL de buffer de
fosfatos. Verifique el pH y ajústelo hasta obtener el valor indicado.
Vierta la muestra en el recipiente del equipo para la agitación
Agregue 10 g de NaCl a la muestra, tape y agite para disolver la sal.
Agregue 300 mL de cloruro de metileno al frasco que contiene la muestra, tape y agite
por 30 segundos para enjuagar las paredes internas. Iguale presiones
Transfiera la muestra con solvente al recipiente del equipo y agite por una hora. Se
debe observar mezcla completa entre la fase orgánica y la muestra durante los dos
primeros minutos de la agitación.
Quite el frasco del equipo de agitación, pase el contenido a un embudo de separación
de 2 L.
Deje en reposo por lo menos 10 minutos para la separación de las fases. En caso de
presentarse emulsión entre las fases en más de 1/3 del volumen de la capa orgánica,
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 41 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA


utilice medios mecánicos como centrifugación, agitación y filtración por lana de vidrio u
otro medio físico para romper la emulsión.
Pase la fase orgánica a un erlenmeyer de 500 mL.
Determine el volumen de muestra original, llenando el frasco que contiene la muestra
con agua, hasta la marca hecha al inicio de la extracción, transfiera el agua a una
probeta de 1000 mL. Registrar el volumen con precisión de 5 mL.
9.4.2. Concentración del extracto













Utilice un equipo de concentración Kuderna-Danish KD de 500 mL de capacidad y
tubo concentrador de 25 mL.
NOTA: se pueden utilizar otros sistemas de concentración que cumplan las
especificaciones dadas para la metodología.
Seque el extracto orgánico (cloruro de metileno) pasándolo por una columna de
secado, de vidrio, que contenga aproximadamente 10 g de sulfato de sodio anhidro.
Coloque el extracto seco en el balón del Kuderna-Danish KD
Enjuague la columna con aproximadamente 20 a 30 mL de cloruro de metileno y
reuna este solvente con el extracto seco anterior.
Otra forma de secado puede efectuarse agregando 5 g de sulfato de sodio anhidro al
erlenmeyer, agitar, dejar en reposo por 15 minutos para la decantación de la sal y
transvasar el solvente al balón del KD, enjuague el sulfato de sodio con porciones de
25 mL de cloruro de metileno y reuna con el extracto anterior.
Coloque unas perlas de ebullición limpias en el KD, una al balón de KD una columna
macro-Snyder prehumedecida con 1 mL de cloruro de metileno.
Coloque el equipo KD ensamblado totalmente y con el solvente a evaporar en un baño
de agua a 65°C – 70°C, de tal manera que el tubo concentrador quede parcialmente
sumergido en el agua caliente, asegurando que la superficie del balón del KD queda
expuesta al vapor caliente.
Ajuste la posición del KD a medida que progresa la concentración de tal manera que
se alcance la evaporación en 15 a 20 minutos, quedando un remanente de
aproximadamente 2 mL.
Quite el KD del baño de agua, deje que el solvente drene en el tubo concentrador y
enfríe por 10 minutos aproximadamente.
Remueva la columna Snyder y enjuague la parte interna y la unión esmerilada con
aproximadamente 1 a 2 mL de MTBE, recogiendo el solvente de enjuague en el tubo
concentrador. Deje drenar y retire la columna Snyder.
Pase el solvente a un tubo concentrador de 10 mL
Transvase la solución del tubo concentrador y enjuague con 5 a 10 mL de MTBE,
agregando todas las soluciones al tubo concentrador y otras perlas de ebullición
nuevas
Una una columna micro-Snyder al tubo concentrador, prehumedezca la columna con
0,5 mL de MTBE.
Coloque el sistema de micro-Snyder (tubo y columna), en un baño de agua de tal
manera que el tubo quede sumergido parcialmente en el agua caliente.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 42 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA






Ajuste la posición del KD a medida que progresa la concentración de tal manera que
se alcance la evaporación en 5 a 10 minutos, quedando un remanente de
aproximadamente 2 mL.
Quite el KD del baño de agua, deje que el solvente drene en el tubo concentrador y
enfríe por 10 minutos aproximadamente.
Remueva la columna micro-Snyder y enjuagar la parte interna y la unión esmerilada
con aproximadamente 0,5 a 1 mL de MTBE, recogiendo el solvente de enjuague en el
tubo concentrador. Deje drenar y retire la columna micro-Snyder.
Ajuste el volumen final a 5 mL con MTBE.
Pase el solvente a un vial de tamaño apropiado con tapa rosca con recubierta interna
de TFE, tape y guarde a temperatura de 4°C (Refrigeración) para su análisis
cromatográfico.
Si el análisis se va a realizar con estándar interno, agregue 50 µL de la solución de
estándar interno, tape y agite para distribuirlo en la solución.
NOTA: Remueva completamente el cloruro de metileno de tal manera que el extracto final
se encuentre libre de este solvente debido a que causa problemas sobre el
detector de captura de electrones.
NOTA: Mantenga los extractos para análisis a temperatura de 4°C, protegidos de la luz.
Estudios de estabilidad han demostrado que la estabilidad de los analitos se
mantiene en estas condiciones por un periodo de 28 días, sin embargo se
recomienda un periodo máximo de almacenamiento de 14 días.
9.4.3. Análisis cromatográfico


Inyecte 1 a 2 µL de los extractos provenientes de los blancos, muestras de campo y
de laboratorio fortificadas, muestras de control de calidad interno y externo, soluciones
de calibración y muestras desconocidas. Ajuste el sistema de manejo de datos para
obtener la respuesta de los picos cromatográficos en área o altura.
Si la respuesta obtenida para el pico excede el rango de trabajo del sistema diluya la
muestra y reanalice.
9.5.



Identificación de analitos
La identificación de los analitos se hace por comparación de los tiempos de retención
con los tiempos de retención del cromatograma de referencia.
Considere positiva la identificación, si el tiempo de retención del pico del analito en la
muestra se encuentra dentro de la ventana especificada en el protocolo.
Estime el ancho de ventana del tiempo de retención con base en la respuesta de los
estándares de calibración analizados durante el día. Puede calcular el tamaño de
ventana para cada compuesto estimando 3*DE del tiempo de retención del
compuesto.
La interpretación del cromatograma requiere de experiencia cuando:
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 43 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
 Los componentes de la muestra no se resuelven cromatográficamente
 Los picos representan más de un componente de la muestra (picos ensanchados, con
hombros, con valles entre dos o más máximos).
 Existe duda sobre la identificación de un pico en un cromatograma
 Para CG/MS, identifique tentativamente los picos con base en el tiempo de retención y
la ventana preestablecida (± 5 seg del tiempo de retención del estándar más cercano).
 Analice la abundancia de los iones de los componentes del cromatograma
 Compare el espectro de masas (después de la sustracción de la señal de base o
background) al espectro de referencia en la base de datos creada
NOTA: En caso que ocurran estas situaciones, se requiere que disponga de técnicas
alternativas apropiadas que ayuden a confirmar la identificación de los picos.
Generalmente puede acudir al uso de otro tipo de detector que responda a un
principio físico o químico diferente del original tal como espectrometría de masas, o
la aplicación de una técnica de separación diferente a la inicial.
Tabla 3. Cuadro resumen del sistema cromatográfico
Parámetro
Columna 1 o primaria
Fase móvil
Velocidad lineal del gas
de arrastre
Temperatura del horno
Temperatura del horno
Temperatura del
inyector
Volumen de
Inyección
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
EPA 508
Columna 1
Columna 1 o primaria: Sílice
fundida de 95% de dimetil 5%
fenil polisiloxano de 30 m de
longitud x 0,25 mm de
diámetro interno y 0,25 µm de
espesor, crosslinked, tipo DB5 (J&W Scientific) o
equivalente.
Gas portador Helio de alta
pureza para cromatografía de
gases
EPA 508
Columna 2
Columna 2 o alternativa: Sílice
fundida de 50% de dimetil 50%
fenil polisiloxano de 30 m de
longitud x 0,25 mm de diámetro
interno y 0,25 µm de espesor,
crosslinked, tipo DB-1701 (J&W
Scientific) o equivalente
Gas portador Helio de alta
pureza para cromatografía de
gases
30 cm/min
30 cm/min
Programación de temperatura
de 60°C a 300°C, con rampa
de 4°C/minuto
Programación de temperatura
de 60°C a 300°C, con rampa
de 4°C/minuto
Programación de temperatura
de 60°C a 300°C, con rampa de
4°C/minuto
Programación de temperatura
de 60°C a 300°C, con rampa de
4°C/minuto
250°C
250°C
2 µL
2 µL
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 44 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Continuación Tabla 4. Cuadro resumen del sistema cromatográfico
Parámetro
Modo de inyección
Detector
Temperatura del
detector
EPA 508
Columna 1
Splitless con tiempo de 45 seg de
delay
Captura de electrones
EPA 508
Columna 2
Splitless con tiempo de 45 seg de
delay
Captura de electrones
320°C
320°C
Tabla 11. Cuadro resumen de las condiciones de trabajo de 3 columnas utilizadas en el
método EPA 8141 B
Parámetro
EPA 8141 B
Columna DB-210 y SPB-608
Gas portador
He - flujo
Temperatura
inicial
Rampa de
temperatura
EPA 8141 B
Columna DB 5 o equivalente
5 mL/minuto
5 mL/minuto
50°C por un minuto
130°C por 3 minutos
50°C hasta 140°C a 5°C/minuto
140°C por 10 minutos
140°C hasta 240°C a 10°C/minuto
240°C por 10 minutos o hasta el final
de elución de los compuestos
130°C hasta 180°C a 5°C/minuto
180°C por 10 minutos
180°C hasta 250°C a 2°C/minuto
250°C por 15 minutos o hasta el
final de elución de los
compuestos
Fuente: Método EPA 8141 B revisión 2 – 2000
Tabla 12. Cuadro resumen de las condiciones del sistema cromatográfico para columnas
de 30 m - columna dual - Método EPA 8141 B
Parámetro
EPA 507
Columna 1
Columna 1
Columna 1: Sílice fundida de 95% de
dimetil 5% fenil polisiloxano de 30 m
de longitud x 0,53 mm de diámetro
interno y 1,5 µm de espesor,
crosslinked, tipo DB-5 (J&W
Scientific) o equivalente.
Gas de arrastre
Helio de alta
pureza para
cromatografía
de gases – Flujo
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
EPA 507
Columna 2
Columna 2 o alternativa: Sílice
fundida de 50% de dimetil 50%
fenil polisiloxano de 30 m de
longitud x 1,0 mm de diámetro
interno y 0,53 µm de espesor,
crosslinked, tipo DB-210 o
equivalente
6 (mL/min) Helium
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 45 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
Continuación Tabla 5. Cuadro resumen de las condiciones del sistema cromatográfico
para columnas de 30 m - columna dual - Método EPA 8141
EPA 507
Columna 1
Parámetro
Velocidad del
gas de make up
Temperatura del
horno
Temperatura del
inyector
Volumen de
inyección
Modo de
inyección
Solvente
Detector
Temperatura del
detector
Temperatura de
la perla
EPA 507
Columna 2
20 (mL/min) Helium
120 EC (3-min hold) to 270EC (10-min hold) at 5 EC/min
120ºC (manteniendo 3 min) a 270ºC (manteniendo 10 min ) a 5ºC/min
250°C
2 µL
Flash vaporización
Hexano
Nitrógeno / Fósforo
300°C
250°C
Fuente: Método EPA 8141 B revisión 2 - 2000
Tabla 6. Condiciones del sistema cromatográfico para el análisis de plaguicidas
organoclorados por CG/MS - Método EPA 8270 C
Parámetro
Rango de masas
Tiempo de scan
Temperatura inicial
Rampa de temperatura
Temperatura final
Temperatura del Inyector
Temperatura de la línea de transferencia
Temperatura de la fuente
Inyector
Volumen de inyección
Gas portador
Trampa iónica
Condiciones
35 – 500 uma
1 seg/scan
40°C por 4 minutos
40°C hasta 270°C a 10°C/minuto
270°C hasta que finalice la elución
250°C - 300°C
250°C – 300°C
De acuerdo a las especificaciones del
fabricante
Inyección splitless (se puede utilizar
splitless si la sensibilidad lo permite)
1- 2 µL
Hidrógeno 50 cm/seg ó Helio a 30 cm/seg
La temperatura del manifold y la corriente
de emisión se deben fijar de acuerdo a las
recomendaciones del fabricante
Fuente: Método EPA 8270 C revisión 3 - 1996
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 46 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
10. CÁLCULOS Y EXPRESIÓN DE RESULTADOS
10.1. Cálculos


Determine la concentración de las muestras por comparación directa en la curva de
calibración de estándares utilizando la ecuación generada por ella, no así la que se
usa para verificación permanente. En caso de no haber realizado curva de calibración
se puede hacer el cálculo con base en la respuesta del calibrador utilizado.
Determine la concentración de los compuestos individuales en la muestra utilizando la
siguiente ecuación:
Cx 
( Ax )(Cs )
( As )( FR )
donde: Cx = concentración del analito en µg/L
Ax = respuesta del analito de la muestra
As = respuesta del estándar (externo o interno) en unidades consistentes con las
unidades utilizadas para la respuesta del analito.
FR = factor de respuesta (con un estándar externo FR=1 porque el estándar es el
mismo compuesto medido como analito)
Cs = Concentración del estándar interno o externo que produce una señal As en
µg/L.
10.2. Reporte de resultados
Reporte los resultados en µg/L sin hacer corrección de los resultados por la recuperación
11. OBSERVACIONES
11.1. Seguridad y riesgo
Tenga cuidado en el manejo de los reactivos y estándares utilizados en el análisis debido
a que su toxicidad o carcinogenicidad no han sido evaluados en forma definitiva.
Cada compuesto manipulado debe ser considerado como potencialmente peligroso para
la salud y se debe minimizar la exposición.
Mantenga las fichas de seguridad de las sustancias utilizadas en la aplicación de esta
metodología, las cuales deben ser conocidas por los analistas o técnicos que manejan
estas sustancias.
Tenga precaución durante la purificación de solventes debido a que se remueven los
estabilizadores agregados, lo cual puede generar riesgos para su manejo. El éter dietílico
tiende a formar peróxidos explosivos por lo cual debe manejarlo con cuidado y, si es
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 47 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
necesario, estabilícelo haciendo reflujo sobre aleación de plomo y sodio granulado
durante 8 horas, destilando en vidrio y agregando metanol al 2%.
11.2. Manejo ambiental
La metodología empleada, utiliza volúmenes altos de solventes, por lo cual se recomienda
que tenga un sistema de recuperación de solventes o de reciclaje, lo cual ayuda a
minimizar la contaminación ambiental y el riesgo ocupacional.
11.3. Disposición de residuos
Cumpla con la normatividad vigente en el país, sobre disposición de residuos sólidos,
líquidos y emisiones en general provenientes de actividades analíticas.
12. VALIDACIÓN
Para realizar una validación parcial o total de los parámetros de desempeño de la
metodología, evalúe previamente al menos los siguientes aspectos
 Verifique la calibración y el mantenimiento de los instrumentos utilizados en las
metodologías, balanza analítica, HPLC.
 Verifique el cumplimiento de las especificaciones para los instrumentos de
medición.
 Verifique las condiciones ambientales en las que se desarrollan las metodologías
12.1. Verificación de la idoneidad del sistema cromatográfico
Evalúe la idoneidad del sistema cromatográfico mediante la determinación del número de
platos teóricos, el factor de asimetría, la resolución, el factor de separación alfa, el factor
de capacidad y la desviación estándar relativa de la réplica del estándar, al inicio del
estudio y con cada lote de muestras analizadas.
12.2. Determinación de los parámetros de desempeño de la metodología
El diseño metodológico para la validación de métodos cuantitativos comprende la
determinación de los siguientes parámetros de desempeño:
 Especificidad /Selectividad (Incluye la determinación de las posibles interferencias)
 Linealidad (rango lineal)
 Precisión: evalúela a través de la repetibilidad y la precisión intermedia
(reproducibilidad)
 Límite de detección y de cuantificación
 Exactitud
 Robustez
 Cálculo de la Incertidumbre
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 48 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
12.2.1. Especificidad
Evalúe muestras de blanco de reactivos
determinación de este parámetro.
y blancos de matriz diferentes para la
12.2.2. Linealidad
Determine la relación entre las variables dependiente e independiente (X, Y), a través del
análisis de una curva de calibración obtenida por lo menos con 6 niveles en el rango de
trabajo teórico. El número de réplicas por nivel es 10. Analice blancos de reactivos y de
matriz conjuntamente.
12.2.3. Precisión
Determine este parámetro en los niveles de Repetitividad (o repetibilidad) y precisión
intermedia o reproducibilidad.


Repetibilidad: determine aplicando el método a muestras con por lo menos 6
replicas, con niveles del analito en el rango de trabajo; realizados el mismo día, por
el mismo analista.
Precisión intermedia: determine aplicando el método a muestras con entre 6 y 10
réplicas, con niveles del analito en el rango de trabajo; realizados en diferente día.
12.2.4. Límites de detección y cuantificación.
Evalúe estos parámetros con base en la respuesta promedio del blanco y su desviación
estándar. Para su determinación se analice 10 réplicas de blancos de reactivos.
Límite de detección = promedio del blanco + 3*Desviación estándar
Límite de cuantificación = promedio del blanco + 10*Desviación estándar
12.2.5. Exactitud.
Estímela por medio de la recuperación del analito
12.2.6. Robustez.
Aplique el método de Youden para la evaluación de la robustez. Seleccione 7 parámetros
de cada metodología, a los cuales se les harán modificaciones ligeras y se observará la
respuesta analítica.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha:
Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial – República de Colombia
SUBDIRECCIÓN DE ESTUDIOS AMBIENTALES - GRUPO DE ACREDITACIÓN
Código: XXXXXX
Fecha: 31/01/2009
Versión: 01
Página 49 de 49
DETERMINACIÓN DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN AGUAS POR CROMATOGRAFÍA DE
GASES Y DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
13. BIBLIOGAFÍA COMPLEMENTARIA





Glaser, J.A., Foerst, D.L., McKee, G.M., Quave, S.A., and Budde, W.L. “Trace
Analyses for Wastewaters”, Environ. Sci. Technol., 15, 1426, 1981.
ASTM Annual Book of Standards, Part 31, D3694, “Standard Practice for Preparation
of Sample Containers and for Preservation, “American Society for Testing and
Materials, Philadelphia, PA, p. 679, 1980.
“OSHA Safety and Health Standards, General Industry,” (29 CRF 1910), Occupational
Safety and Health Administration, OSHA 2206, (Revised, January 1976).
ASTM Annual Book of Standards, Part II, Volume 11.01, D3370-82, “Standard
Practice for Sampling Water”, American Society for Testing and Materials,
Philadelphia, PA, 1986.
Elaborado por: Teresa Pérez Hernández
Fecha: 10/11/2008
Revisor por: IDEAM
Fecha: 31/01/2009
Aprobado por:
Fecha: