DNA recombinante La tecnología de DNA recombinante genera herramientas para estudiar los genes y sus productos Insertar en vector de expresión Deducir secuencia de aminoácidos Secuencia de aminoácidos Transformar E. coli u otro hospedero Preparar péptidos sintéticos Sintetizar sonda específica Anticuerpo específico Preparar anticuerpos específicos para una proteína Escrutinio de una biblioteca de DNA por Southern blot Escrutinio de una biblioteca de expresión por Western blot Plásmidos de expresión Caracteristicas adicionales: - Promotor regulable - Terminador de la transcripcion - Sitio de reconocimiento por el ribosoma Transformacion en celulas eucariontes Biobalística Transformación directa Microinyección Virus Clonación en células animales Métodos de transfección Permeabilización química de las membranas Electroporación Liposomas Vectores Vectores derivados de virus animales SV40 Retrovirus Vacuna Vectores mixtos Métodos de selección Detección de actividades enzimáticas Resistencia a inhibidores Resistencia a antibióticos Integración dirigida Vectores de expresión para células animales Promotor inducible para animales Construcción de Reporteros 5’UTR X Promotor del gen X 3’UTR X Gen reportero El resto de características de los vectores de expresión son similares Proteínas reporteras Proteína verde fluorescente (GFP) Betaglucoronidasa (GUS) Luciferasa de luciérnaga (LUC) Creando ratones Knockout Bancos de mutantes en los organismos modelos Transformación de células vegetales Agrobacterium tumefaciens Transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens Transformación por biobalística ¡ Suerte en el examen !