C-213-docu

CARACTERIZACIÓN
FARMACOLÓGICA
DE
LOS
RECEPTORES
PURINÉRGICOS (P2) INVOLUCRADOS EN LA RELAJACIÓN MEDIADA POR EL
ATP EN EL MÚSCULO LISO TRAQUEAL DE COBAYO.
Cruz-Valderrama JE1, Figueroa-Ríos NA1, Ramírez-López D1, Flores-Soto E1,
Carvajal-Salinas V2, Barajas-López C3, Montaño LM1.
1
Depto. de Farmacología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de
México, DF. 2Depto. de Investigación en Hiperreactividad Bronquial, Instituto Nacional de
Enfermedades Respiratorias, México DF, y 3División de Biología Molecular, IPICYT, San
Luis Potosí, SLP, México.
[email protected]
Resumen: El ATP es una molécula que se almacena en neuronas, células
cebadas, epiteliales, plaquetas, etc., y en condiciones fisiopatológicas puede ser
liberado activando receptores purinérgicos del tipo P2 localizados en la membrana
plasmática. Estos receptores purinérgicos se subdividen en P2X(1-7) que son
ionotrópicos y los P2Y(1, 2, 4, 6, 11b, 12c, 13, 14, AP4Ad) que están acoplados a proteínas
G. Existen antecedentes donde la aplicación de ATP en músculo liso de las vías
aéreas (MLVA), inducen una respuesta bifásica (contracción y relajación). Se ha
propuesto que la relajación depende de la biosíntesis de PGE2 en el epitelio. El
propósito de éste trabajo fue caracterizar farmacológicamente a los receptores
purinérgicos (P2) involucrados en la relajación inducida por ATP en el músculo liso
traqueal de cobayo. Métodos y Resultados: Estudios funcionales en órganos
aislados. En anillos traqueales con epitelio, el tejido se contracturó con histamina
(10 M) para evaluar el efecto del ATP en el músculo liso. La adición de ATP (1
µM -1 mM) y ATPS (Análogo no hidrolizable del ATP, 1-320 µM), produjeron una
relajación semejante que fue inhibida por la indometacina (1 µM, ~94%). Para
evaluar la participación del epitelio en ésta respuesta, se removió mecánicamente
y observamos que la relajación inducida por ATP no fue modificada con respecto
al control con epitelio. El α,β-metil-ATP (agonista de receptores P2X, 1-320 µM) no
produjo relajación y solo se observó ~12% con 320 µM. El UTP (agonista de
receptores P2Y2,4, 1 µM-1 mM) produjo una relajación dependiente de la
concentración similar al ATP, pero la respuesta máxima observada a 1 mM fue
significativamente menor. La suramina (100 µM, antagonista inespecífico de los
receptores P2X y P2Y1,2,6,11b,12c,13), el RB2 (100 µM, antagonista inespecífico de
receptores P2Y 1,4,6,11b,12c,13) y el PPADS (antagonista inespecífico de P2X), no
modificaron la relajación inducida por el ATP. Sin embargo, la combinación de
suramina y RB2 así como la N-etilmaleimida (30 µM, desacoplador de proteínas
G) redujeron significativamente la relajación producida por el ATP. Ambos
antagonistas de los receptores P2Y bloquean a casi los mismos subtipos, sin
embargo la suramina no afecta a los P2Y4 mientras que el RB2 no bloquea a los
P2Y2, lo que podría explicar los resultados obtenidos con su combinación.
Conclusiones: Con estos resultados podemos concluir que la relajación inducida
por el ATP en el MLVA del cobayo es independiente del epitelio a través de la
producción de prostaglandinas vía la activación de receptores purinérgicos del tipo
P2Y2 y P2Y4.
Este trabajo fue apoyado por CONACYT (81409 y 102013) y DGAPA, UNAM (IN2018103).