COMBATE DE Corticium EN TOMATE Y Fusarium EN FRESA

Agronomfa Costarricmse: 15(1!l): 1-6. 1991.
COMBATE DE Corticium EN TOMATE Y Fusarium EN FRESA MEDIANTE
EL USO DE MICROORGANISMOS ANTAGONISTAS Y/O
HONGOS ENDOMICORRIZOGENOS (MVAY
Ronald Vargas *
ABSTRACT
Control of Corticium in tomato and Fusarium in strawberry by antagonistic microorganisms and/or vesicular-arbuscular mycorrbizae (YAM).
Under greenhouse conditions, the effects of seedling inoculation with vesiculararbuscular mycorrhizae (YAM) (Gigaspora margarita and Glomus spp.) and/or
the addition to soil of "Symbiont" (a commercial product consisting of a mixture of oil palm charcoal plus antagonistic microorganisms), on the incidence of
Corticium rolfsii and Fusarium oxysporum f. sp. fragariae on tomato
(Lycopersicon sculentum cv. Ponte Rosa) and strawberry (Fragaria vesca
Duschesne var. Hokowase) seedlings, respectively, was studied. 90% of the
tomato seedlings showed C. rolfsii disease symptons in the control treatment
Symbiont incorporation to the soil resulted in a 40% reduction of disease incidence. Incorporation of the commercial product plus seedling inoculation with
G. margarita and Glomus spp. resulted in suppression of the disease caused by
C. rolfsii. On the other hand, seedling inoculation with G. margarita and
Glomus spp. resulted in a disease incidence reduction of 60% and 20%, respectively. In the case of F. oxysporum f. sp.fragariae. Symbiont incorporation to
soil resulted in a disease incidence reduction in strawberry of 17%. Seedling
inoculation with G. margarita and or Glomus spp. reduced pathogen incidence
by only 17%. However, both treatments combined resulted in a 33% disease
incidence reduction. The effects of both practices in the biological control of
soil-borne plant pathogens and their possible comercial use are discussed.
INTRODUCCION
Recibidopara
publicaci6n
el26 dejuniode 1990.
Laboratoriode Microbiologiade Suelos.Centrode
La inoculaci6n de plantulas de diversas
especies de interes comercial con hongos MY A es
una practica comun para la obtenci6n de plantas
micorrizadas (Mosse, 1977; Menge, 1978).
Kobayashi (1989) ha sefialado sobre los
efectos beneficos de la adici6n al suelo de un
compuesto de carb6n vegetal que contenia microorganismos antagonistas, y de la inoculaci6n de
plantulas con hongos ~YA sobre la incidenc~a del
mal del talluelo del pepmo causado por Phytlum y
Investigaciones
Agron6rnicas.
Universidadde Costa
Rhizoctonia.
~ca. ~an Jose. Costa Rica. ,Miernbro ~el ~rograrna
Flnanc~ero de, Apoyo a Inves~lgad,ores Cl~n~cos del
ConseJo Naclonal de Investigaclones Clenuficas y
Los
reducci6n
Existen diversos documentos en la literatura
que establecen claramente el papel de los bongos
endomicorriz6genos (MY A) en la reducci6n de la
incidencia de diferentes pat6genos vegetales del
suelo (Bagyaraj, 1984).
1/
.
Tecnol6gicas
(CONICIT)deCostaRica.
principales
efectos
asociados
con la
de la incidencia
de los parogenos
vege-
tales del suelo causados por los hongos MY A son
-
..
2
AGRONOMIA COSTARRICENSE
la inhibici6n de la formaci6n de propagulosy la
colonizaci6nde las raicesmicorrizadas.Estosdos
tipos de supresi6nson ampliamentecubiertosen
la literatura: a) inhibici6n de la formaci6nde clamidosporasde Thielaviopsisbasicolaen las falces
de tabaco infectadas pOT Glomus mosseae
(Baltrushathy y Shonbeck, 1972; 1975); formaci6n de esclerociosde Sclerotiumrolfsii en falces
de maRl infectadas pOTGlomus fasciculatum
(Krisna y Bagyaraj, 1983);y la formaci6nde oosporas de Aphanomyceseutichesen arvejasinfectadas pOTGlomus fasciculatum (Rosendahl,
1985); b) reducci6n en la colonizaci6n de
Microphomina.Rhizoctoniay Fusarium en falces
de soya infectadas pOT Glomus mosseae
(Zambolin y Schenck, 1983); la inhibici6n de la
formaci6n de zoosporangiosy liberaci6n de zoosparas de Phytophthora parasitic a en falces de
citricos (Davis et al.. 1978;Davis y Menge, 1980;
1981)y de P. cinnamomien raicesde maiz y crisantemos infectadas par Glomus fasciculatum
(Meyer y Linderman, 1986).
Otro factor atribuible a los hongosMVA es
la inducci6nde reaccionesmorfol6gicasy fisiol6gicas de defensaen plantasinfectadasPOThongos
diarnetro,esterilizadoa 120°CPOT2 h en 4 dIas
sucesivos,y almacenadoa temperaturaambiente
hastasu utilizaci6n.
Inmediatamenteantesdel transplantede !as
plantulas,el suelo esterilizadoCueinoculadocon
C. rolfsii 0 F. oxysporumf. sp.fragariae, preparados como sedescribea continuaci6n.
MVA.
tribuyeron
Sin embargo, la supresi6n de los pat6genos
~
Cultivo, preparation e inoculation
de los hong~ patogenos
Corticium rolfsii CuesuministradoPOTel Dr.
N. Kobayashi (Instituto Nacional de Investigaciones en Plantas Ornamentaies,Vegetalesy
Te, Ministerio de Agricultura, Forestaiesy Pesca,
Kurume, Jap6n). Este pat6genoCuereproducido
en medio Agar-Papa-Azucar(APA) (200 g papas,
20 g azucary 15 g de agarPOT1 L de aguadestilada).
El inocula fungosoaficionado al sueloesterilizado Cuepreparado de la siguiente manera:
agregadosde suelo fueron colocadosen frascos
de vidrio de 1 L de capacidad,mezcladoscon trozos de papa,a raz6n de 200 g/kg de suelo,yautoclavadosa 120°CPOT4 h. Posteriormente,se inocularon trows (3x3 mm) de C. rolfsii que se disuniformemente
sobre la su~rficie
del
del suelo POTlos hongos MVA no esta aun bien
suelo esterilizadocontenido en los frascos. Los
documentada
y la evidenciaexperimental
disponi-
frascosasl inoculadosfueronincubadosa 28°C
ble es poca (Dehne, 1982; Schenck,1988;Smith,
1988).
El prop6sitode la presenteinvestigaci6nCue
determinar,bajo condicionesde invemadero,los
efectos de la inoculaci6n con hongos MVA en
combinaci6ncon la adici6n al suelo de un "compost" de carb6n de palma aceitera conteniendo
microorganismosantagonistas,sobrela incidencia
de Corticium rolfsii y Fusarium oxysporumf. sp.
jragariae. en tomatey fresa,respectivamente.
EI presenteexperimentose Ilev6 a cabo en
el Laboratorio de Fitopatologfa,Instituto Nacional
de Investigaciones en Plantas Ornamentales,
Vegetales y Te, Ministerio de Agricultura,
Forestalesy Pesca,Kurume,Jap6n.
hasta que el crecimiento fungoso alcanzara la
basede los mismos. Estos cultivos fueron secados al aire, tamizadospara producir agregadosde
inocula de 1 a 2 mm de diametro, y almacenados
en bolsas plasticas a 5°C hasta su utilizaci6n.
Este inocula fungosoCueagregadoal sueloesterilizado a razondel 1.5%(pip).
Fusarium oxysporum f. sp. fragariae Cue
tambienobtenidoa partir de un aislamientosuministradoPOTel Dr. N. Kobayashi. EI pat6genoCue
crecido en frascosconteniendomedia liquido AP
bajo constante agitaci6n a 28°C. Luego de 1
semanade incubaci6n, una alicuota Cueextralda
diariamentepara determinarel numerode propagulos/ml. Una vez que el inoculo alcanz6 lxl08
propagulos/ml, el contenido de los frascos Cue
diluido para seTinoculado al suelo esterilizado,a
raz6nde lxl06 propagulos/kgde suelo,y mezclado minuciosamente.
Suelo
EI suelo utilizado, recolectadoen Kurume,
cerca de Fukuoka, Jap6n, Cuesecado al aire,
tamizadopara obteneragregadosde 1 a 2 mm de
Hongos endomicorrizogenos(MVA)
Tanto Gigaspora margarita como Glomus
spp. fueron cedidosPOTel Dr. N. Kobayashi. Las
esporasde G. margarita fueron aisladasde suelo;
MATERIALES Y METODOS
i!
1
~
VARGAS: Combatede bongoscon antagmistasy miCOlTizas
3
el cual habia sido previamentesembradocon soya
(Glycine max val. Ryokuko Edamame), pol el
metoda de tamizado en humedo (Daniels y
Skipper, 1982). Las esporas aisladas fueron
sometidasa un tratamientode sonicacionde baja
intensidad (1-2 Watts) pol 2-3 seg (Ultrasonic
Disruptor Model UR-200P, Seiko Co.) con el
objeto de remover contaminantesadheridosa su
superficie,y esterilizadassuperficialmenteen una
solucion de ChloramineT (Kanto Chemical Co.)
al2% pol 15 mill (Mosse,1988).
Las esporasesterilizadasde G. margarita
fueron colocadas,en gruposde 30, soble la superficie de un compuestode carbOnde palma aceitera finamente molido y arcilla acida japonesa
(Wako Pure Chemical Industries) al 2:1, y mezcladas basta formar un "pellet". Los "pellets"
conteniendoills esporasfueron colocadosen viales de vidrio y almacenadosen la oscuridad a
temperaturaambientebastasu utilizacion.
El inocula de Glomusspp. utilizado consisti6 de una mezclade falces ya infectadasy partfculasde arcilla.
siguientestratamientos: 1) sueloinoculadocon el
pat6geno(testigo);2) sueloinoculadocon el pat6gena+ 3% de compost;3) suelo inoculadocon el
patogeno + 3% de compost + Glomus spp.; 4)
sueloinoculadocon el pat6geno+ 3% de compost
+ G. margarita; 5) sueloinoculadocon el pat6geno + Glomus spp.; y 6) suelo inoculado con el
pat6geno+ G. margarita.
Tres "pellets" par plantula, conteniendo
esporasde G. margarita, fueron colocadosbajo la
radiculade la plantulasa la siembra. Parael caso
de Glomusspp., aproximadamente1 g de inocula
Cueadicionadoal momentadel transplante.
En tados los casasfueron evaluadas3 repeticionespol tratamiento. El nlimero promedio de
plantulasde tamale y fresa evaluadaspol repeticion Cuede 10 y 6, respectivamente.Las observacionessoble la incidenciade ambospat6genosse
realizarondurante15 dfasparael casodel tamale,
y 38 diasparala fresa.
Plantulas
Se utilizaron plantulas de tom ate
(Lycopersiconesculentumcv. PonteRosa)con 13
was de germinadas,y plantulasde fresa(Fragaria
vescaDuschesnevar. Hokowase)de 1 meso
lncidencia de Corticium rolfsii
Como resultado de la inoculacion de C .
rolfsii al sueloesterilizado,un 90% de las pIantuills de tomate mostraronsfntomasde su ataqueal
cabode 15 dfasde observacion(Cuadro I).
La respuestaa la inoculacion con bongos
MVA, al momenta del transplante,estuvo determinadapol el bongo inoculado. En comparacion
con el porcentaje de plantulas atacadaspol C .
rolfsii observadasen el tratamientotestigo,la inoculaci6n de las plantulascon Glomus spp. redujo
Mixtura de carbon vegetal y microorganismos
antagonistas
La mixtura utilizada consistio de Symbiont
(Kingukoru Co.), un producto comercial elaborado a basede carbOnde palma aceiterafinamente
molido inoculado con microorganismosantagonistas aislados del suelo. Los microorganismos
presentes en este producto comercial son antagonistas a los pat6genos usados en la presente inves-
.
.
..
.,
RESULTADOS
."
..
,
CuadraI. Efectodela adicl~ de.corn~ste InOC:U~ClOO
~
bongosMVA en la IncldenClade CortlclUlnrolfsll
en plantulasde tomateen invemadero..
tlgacl6n (N. KobayashI,comumcaclonpersonal).
La mezcla, denominada en el texto como compost, Cue adicionada al suelo esterilizado, inmediatamente antes del transplante, a raz6n del 3%
(pip).
Bioensayo
El efecto de la adici6n del compost y de la
inoculaci6n de las plantulas de tomate y fresa con
.
..
bongos MVA, Cuedetermmado baJo condIciones
de invemadero utilizando suelo inoculado con C .
rolfsii y F. oxysporum
f. Sp.fragariaeenrecipienres
de
12
L
.,
Para
tal
fin
fueron
estudiados
los
Tratamientos
% incidencia..
Testigo
C<Xnpost
Glomusspp.
Gigaspora
margarita
C<Xnpost
+ G~omus
spp..
C<Xnpost
+ Glgasporamargarlla
.
..
90
50
70
30
0
0
EI nivel de in6culo inicial de C. rolfsii rue de
1,5%~/p) para todoslos tratami~n~os.
10 plantulas de t<Xnate por repeucl6n fueron evaluadas
durante 15 dfas. Los valores correspooden
al pr<Xnedio.
4
AGRONOMIA COSTARRICENSE
la incidencia del pat6geno unicamente en un 20%
(Cuadro 1), mientras que la inoculaci6n de lag
plantulas con G, margarita caus6 una reducci6n
en la incidencia del pat6geno de un 60%.
La incorporaci6n del compost al suelo al
momento del transplante, result6 en una reducci6n intermedia de la incidencia de C. rolfsii
(40%, Cuadro 1). La adici6n del compost al suelo
Los resultados obtenidos durante la presente
investigaci6n demuestran que para el caso del ataque de !as plAntulas de tamaLey frega pot C, rolfsii y 1': oxysporum f. sp.fragariae. respectivamente, la simple inoculaci6n con G. margarita y/o
Glomus spp. no rue suficiente para brindar una
junto con la inoculaci6n de lag plantulascon G
protecci6ntotal contrael ataquedel pat6geno.
,
margarita y/o Glomu.)"spp. result6 en la completa
eliminacion del ataque causado pot C, roifsii al
cabo de 15 drag.
Incidencia de Fusarium oxysporum
f. sp.jragariae
La incidencia de Fusarium oxysporum f. sp.
fragariae en plantulas de frega al cabo de 38 dfas,
en relaci6n con log diferentes tratamientos evaluados, se muestra en el Cuadra 2.
La inoculaci6n del suelo esterilizado con 1':
oxysporum f. sp.fragariae. a raz6n de lxl06 propagulos/kg de suelo, result6 en un maxima de
83% de lag plantulas atacadaspot el pat6geno.
La inoculaci6n
con G, margarita
y/o
Glomus spp. al momento del transplante en suelo
infestado con el pat6geno vegetal, al igual que la
adici6n de compost, redujeron parcialmente la
incidencia (de un 83% a un 66%, Cuadro 2).
La mayor reducci6n en la incidencia del
pat6geno, un 33%, se logr6 con la aplicaci6n del
compost junto con la inoculaci6n de cualquiera de
los bongos MVA.
Cuadra2, EfectodeIa adici6ndecompost
e inoculaci6n
coo
d 1 mal del talluelo en
invemadero..
Phytium y Rhizoctonia.
La mcorporac16n del
compost no solo provee con una mezcla de microorganismos antagonistas capaces de competir pot
exudados radiculares, de producir antibi6ticos,
..
,
% mCldenCla..
83
66
66
66
50
enzimas liticas a nivel de la rizosfera y con ello
vegetales del suelo, sino que provee con un sustrato poroso altamente estimulante de la actividad,
proliferaci6n e infecci6n pot parte de log bongos
MVA inoculados
(Nishio,1988;Saito,1988).
e1
,
emp
,
e
.
1
.
como
compuesto
un
e
n
d
lCl
6
a
d
al
f
6
.
.
f
d
I
'
I
Se concluye pot tanto, que para un efcctivo
combate biol6gico de log pat6genos vegetales del
1 1 d' '
a
50
El mvelde in6culoinicial F, oxysporwnf. sp,fragar~e Cuede lxID" propagulos/ml
paratodosIos tratamlentos,
p ..ntuas e resapOTrepeucln ueronev ua as
durante38 dlas.Losresultados
correspooden
al promedio.
6
.,
Pepino
causadopar
reducirla incidenciade log bongospat6genos
0,
Compost
+ Gigaspora
margarl/a
e
sue
Testigo
Compost
Glomusspp.
Gigaspora
margarila
Compost
+ G~omus
sW..
..
Estos resultados concuerdan con log informados
pot Bagyaraj (1984), quien establece que la incidencia de log pat6genos del suelo puede reducirse
como resultado de la inoculaci6n con bongos
MVA.
De log dog bongos MVA utilizados, G .
margarita rue el que mayores beneficios mostro
en la reducci6n del ataque pot C. roifsii. Existen
reportes en la literatura que establecen el mayor
efecto benefico de ciertos bongos MV A soble
otros en el combate bio16gico de pat6genos vegetales del suelo (Davis et al., 1980). Es muy probable que facrores como tipo de suelo, pH, especies vegetales involucradas, asi como otros microorganismos presentes en el suelo, interactuen de
manera tal, que determinen una mayor eficiencia
de un bongo MVA soble otto en el combate biologico de log pat6genos vegetales del suelo. Se
sugiere mas investigaci6n en este campo con el
fin de poder definir claramente la estrategia de
combate biol6gico mas adecuada para un conjunto
de condiciones bi6ticas y abi6ticas determinadas.
El efecto sinergistico de la adici6n del compost y de la inoculaci6n con bongos MV A ha sido
ampliamente discutido pot Ogawa (1987; 1989).
Kobayashi (1989) report6 soble log efectos reneficas de ambas practicas en el combate bio16gico
hoogosMVA en Ia ~cidencia de Fusariwn oxys-
porwnf, sp.fragarlae en plantulasde tomateen
.
DISCUSION
ado durante la presente mvesttgac16n moculado
con microorganismos antagonistas al pat6geno a
VARGAS: Combatede hongoscon antagooistasy micorrizas
5
controlar, mas la inoculaci6n a la hora del transplante con hongosMVA, podria ser una alternativa promisoria. Es impartante sefialar que esta
estrategiapodria ponerseen practica bajo condiciones de invernaderodurante la propagaci6nde
plantasde valor comercial,dondela incidenciade
pat6genosvegetaiesdel suelo es de suma impartancia. Par otro lado,.su implementaci6na nivel
de campo queda suJeta a una mayor y mas
del presentetrabajo. Al Dr. N. Kobayashipar su
gentilezaen la obtenci6nde los bongosutilizados
en el presente trabajo; y a la Agencia de
Cooperaci6nlnternacionalJaponesa(JICA) par el
apayobrindadodurantemi estadfaen Jap6n.
extensiva investigaci6n.
BAGYARAI, D.I.
LITERATURAcrrADA
RESUMEN
En
pruebas
.
mvernadero
de
se evaluaron
los
BALTRUSHATHY,
H.;
Untersuchungen
efectos de la inoculaci6n
con bongos MVA
(Gigaspora margarita y Glomus spp.) y/o de la
adici6n del producto comercial "Symbiont" (car-
b6n de palma aceiteramezcladocon diversos
microorganismos
antagonistas)
Sp.fragariae, en plantulas de tomate (Ly c 0persico'! esculentum cv. Ponte Rosa) y fresa
(Fra.garla vescaDuschesnevar. Hokowase),respecuvamente.Un 90% de las plantulasde tamale
mostraronsmtomasdel ataquepar C. rolfsii en el
tratamientotestigo. La incorporaci6nal suelodel
od
.al S b.
d . I . .d
pr UClacomerci ym lOot, re uJo a mci encia de este pat6genoen un 40%. La adici6n al
suelode esteproductocomercialjunto con la inoculaci6n de G. margarita y/o Glomusspp. result6
en la no incidenciade C. rolfsii. Par otro lado, la
simple inoculaci6n con G. margarita y Glomus
Spp.result6 en una disminuci6n de la incidencia
del pat6genode un 60% y 20%, respectivamente.
I . Parael caso
. , de
I F:oxysporum
I d S f.b.sp.fragariae
d . I
a mcorporaclona sue.o e y~ lOot re uJo e
ataqueen un 17%. La moculacl6ncon G. margarita y/o Glomus spp. result6 en una disminuci6n de este pat6geno de apenas un 17%. Sin
,
ambos tratamientos
. .
.
en conjunto resulta-
con en una dlsmmucl6n de un 33%.
Los efectos de ambas practicas en el combate biol6gico de pat6genos vegetales del suelo y
SU pasible usa a nivel comercial son discutidos en
el presente
1972.
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